CN116583285A - N-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)-1-环己基-2H-吲唑-5-甲酰胺和N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-环己基-2H-吲唑-5-甲酰胺衍生物作为IRAK4抑制剂用于治疗哮喘 - Google Patents

N-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)-1-环己基-2H-吲唑-5-甲酰胺和N-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1-环己基-2H-吲唑-5-甲酰胺衍生物作为IRAK4抑制剂用于治疗哮喘 Download PDF

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Abstract

本申请涉及一种式(A)的化合物，其中R1选自式(II)和式(III)并且R2选自式(IV)、式(V)和式(VI)，作为IRAK4抑制剂用于在治疗例如哮喘和慢性阻塞性肺病(COPD)、癌症、炎性疾病和自体炎性/自身免疫疾病如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病的方法中使用。本发明的优选化合物是，例如：N‑(咪唑并[1，2‑b]哒嗪‑3‑基)‑1‑环己基‑2H‑吲唑‑5‑甲酰胺、N‑(吡唑并[1，5‑a]嘧啶‑3‑基)‑1‑环己基‑2H‑吲唑‑5‑甲酰胺、N‑(咪唑并[1，2‑b]哒嗪‑3‑基)‑1‑氮杂螺[4.5]癸烷‑8‑基‑2H‑吲唑‑5‑甲酰胺和N‑(吡唑并[1，5‑a]嘧啶‑3‑基)‑1‑氮杂螺[4.5]癸烷‑8‑基‑2H‑吲唑‑5‑甲酰胺衍生物。本发明的示例性化合物是例如：N‑(咪唑并[1，2‑b]哒嗪‑3‑基)‑6‑甲氧基‑2‑((5r，8r)‑1‑甲基‑2‑氧代‑1‑氮杂螺[4.5]癸烷‑8‑基)‑2H‑吲唑‑5‑甲酰胺(实例1)：式(VII)。

Description

N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-1-环己基-2H-吲唑-5-甲酰胺 和N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1-环己基-2H-吲唑-5-甲酰 胺衍生物作为IRAK4抑制剂用于治疗哮喘
本说明书涉及抑制IRAK4并且因此在医学中具有潜在用途的化学化合物及其药学上可接受的盐。本说明书还涉及这些IRAK4抑制剂在治疗呼吸疾病、癌症、炎性疾病和自体炎性/自身免疫疾病中的用途，这些呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，这些自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征(syndrome)、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病。本说明书还涉及在制备所述IRAK4抑制剂中所涉及的方法和中间体化合物，并且涉及含有该抑制剂的药物组合物。
白细胞介素-1受体(IL-1R)相关激酶4(IRAK4)是免疫信号传导的关键调节子。IRAK4由多种细胞类型表达并且介导来自Toll样受体(TLR)和白细胞介素-1(IL-1)家族的受体(包括IL-1R、IL-18R和IL-33受体ST2)的信号转导。TLR识别来源于微生物的配体，诸如脂多糖(LPS)或微生物RNA或DNA并对其产生应答，同时IL-1家族的受体可以通过由TLR活化细胞(IL-1β和IL-18)或通过组织损伤(IL-1α和IL-33)产生的内源性配体活化。在TLR或IL-1受体通过其配体活化时，衔接蛋白髓样分化初级应答88(MyD88)被募集到受体并且与IRAK家族的蛋白质(IRAK1、IRAK2和IRAK4)一起形成被称为“Myddosome”的多聚体蛋白复合物。Myddosome充当信号传导平台以诱导核因子KB(NF-κB)和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径，以转录因子NF-κB、活化蛋白1(AP1)、c-AMP应答元件结合蛋白(CREB)和干扰素调节因子5(IRF5)的活化结束，从而驱动炎性细胞因子和趋化因子的转录。缺乏IRAK4的小鼠是可存活的，但是缺乏对于IL-1β、IL-18和LPS的炎性细胞因子应答。在IRAK4中呈现功能缺失突变的人表现出免疫受损表型，并且他们的免疫细胞示出对于TLR激动剂和IL-1受体配体的消除的细胞因子应答。
IRAK4的特征在于介导与MyD88的相互作用的N-末端死亡结构域和位于中心的激酶结构域。Myddosome形成促进IRAK4自磷酸化，其调控Myddosome的稳定性和下游信号传导。通过TLR和IL-1R进行的细胞因子诱导需要IRAK4的激酶活性，如通过表达激酶死亡的IRAK4的敲入小鼠中的研究以及使用小分子IRAK4激酶抑制剂的研究所示。
鉴于其在消除炎性应答中的关键作用，IRAK4构成发挥抗炎作用的药物的靶。
哮喘和COPD(慢性阻塞性肺疾病)是构成世界范围内未满足的医学需求的慢性肺疾病。哮喘和COPD的特征在于慢性气道炎症，涉及细胞因子释放异常、免疫细胞活化失调和气道重塑。在哮喘中，对于气道的刺激，诸如过敏性、病毒性和细菌性刺激经由病原体相关分子模式(PAMP)活化TLR受体，并且经由警报素(包括IL-33和IL-1α)的释放以及通过炎性小体活化时释放的IL-1β来活化IL-1R和ST2受体。TLR和IL-1家族的受体存在于气道中的多种细胞类型中，包括巨噬细胞、树突细胞、肥大细胞、单核细胞和上皮细胞，并且通过释放炎性细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-8、GM-CSF、IL-5)对其配体产生应答，从而导致气道炎症、炎性细胞(诸如嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞)的募集、气道高反应性和粘液产生。IRAK4抑制具有抑制气道中的这些炎性途径的潜力。来自哮喘和COPD患者的肺样品的基因表达分析已经揭示了若干患者的子集中与IL-1R和TLR2/4炎性途径相关联的基因表达上调。据我们所知，虽然还未在治疗呼吸疾病的临床中探索IRAK4抑制剂，但是来自若干研究组的临床前数据指示干扰IRAK4调节的途径减弱哮喘和COPD两者的动物模型中的气道炎症。例如，缺乏MyD88(myddosome的中心组分)的小鼠被保护而免受由过敏原或IL-33诱导的气道炎症，如用阻断IRAK2与IRAK4之间的相互作用的小分子模拟物处理的小鼠。还已经发现用单克隆抗体阻断IL-1β在哮喘的耐类固醇的小鼠模型中抑制由过敏原和细菌诱导的气道炎症。此外，在过敏原攻击时用IL-1R拮抗剂阿那白滞素处理小鼠在过敏性哮喘的小鼠模型中改善哮喘样症状。长期暴露于香烟烟雾是罹患COPD的主要因素。在暴露于香烟烟雾的小鼠中，IL-1信号传导在介导嗜中性粒细胞气道炎症中是重要的，并且用针对IL-1α、IL-1β或IL-1R的抗体阻断IL-1信号传导可以改善肺中的嗜中性粒细胞炎症并且减少暴露于香烟烟雾的小鼠中的细菌或病毒诱导的恶化。综合考虑，IRAK4抑制具有通过同时阻断若干疾病相关的信号传导途径而在炎性呼吸疾病中提供广泛的抗炎作用的潜力。
作为Myddosome的重要调节子，IRAK4还是由IL-1R、TLR或ST2介导的机制驱动的其他炎性疾病中的有希望的治疗靶。如先前披露的，IRAK4在自身免疫障碍诸如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮(SLE)中发挥作用(参见例如WO 2017207386和WO 2015150995)。在SLE中，由自身抗体和自体抗原构成的免疫复合物可以驱动TLR依赖性病理性信号传导。在SLE病理中，据报告IRAK4抑制阻断浆细胞样树突细胞中由TLR7和TLR9活化介导的I型干扰素和促炎细胞因子的释放。表达IRAK4的激酶死亡突变体或用IRAK4激酶抑制剂化合物处理的小鼠耐受实验诱导的关节炎和狼疮(参见例如WO 2017207386)。阿那白滞素(一种IL-1受体拮抗剂)用于治疗类风湿性关节炎的批准用途也支持致病性IL-1R信号传导在这种疾病中的作用。在干燥综合征中，TLR在PBMC(外周血单核细胞)中上调，并且唾液腺和TLR活化可以刺激干扰素和其他炎性细胞因子的释放，表明其牵涉到干燥综合征的病理。MyD88敲除小鼠在干燥综合征的实验小鼠模型中还表现出减少的疾病表现。系统性硬化症是一种严重的自身免疫障碍，其中IL-1R、TL00、TLR8和ST2信号传导可以驱动致病机制，包括微血管损伤和纤维化。抑制IRAK4作为系统性硬化症的治疗因此将同时阻断多个疾病相关途径。在肌炎中，高水平的IL-1α和IL-1β可能促进肌肉细胞炎症。肌炎患者还被表征为高I型干扰素基因签名，其可以部分地由TLR7/9活化驱动，并且IL-1R信号传导的相关性由较小的机械临床试验中用阿那白滞素治疗的肌炎患者的改善的临床结果支持。作为IL-1R途径的重要调节子，IRAK4还是治疗痛风中的有希望的靶。特别地在痛风患者中形成的尿酸一钠晶体可以触发炎性小体的活化和IL-1β的释放。使用卡那津单抗(一种抗IL-1β单克隆抗体)或阿那白滞素两者已经在痛风发作的治疗中证明了临床功效。还已经在患有子宫内膜异位症的患者中发现了高水平的IL-1β和IL-33。在口服施用IRAK4抑制剂抑制病灶形成的小鼠模型中示出了IRAK4在子宫内膜异位症的疾病过程中的重要性。在相同的小鼠模型中MyD88敲除小鼠也被保护而免受罹患子宫内膜异位症。IL-33/ST2信号传导是特应性皮炎中的关键机制，其涉及皮肤炎症、上皮屏障完整性和嗜酸性粒细胞募集的调节。IL-33可以MyD88依赖性方式在小鼠中触发湿疹和皮炎。作为ST2信号传导的调节子和myddosome的重要组分，IRAK4具有在特应性皮炎中抑制致病性IL-33/ST2信号传导的潜力。TLR7和IL-1R介导的机制两者均表明涉及银屑病。咪喹莫特(TLR/8激动剂)可以MyD88依赖性方式在小鼠中诱导银屑病样疾病。IL-1β在银屑病皮损中上调并且已经表明IL-1β/IL-1R轴促进皮肤炎症并且调节银屑病病理中IL-17(一种从TH17细胞释放的关键细胞因子)的产生。已经进一步显示IRAK4激酶活性是体内调节TH17分化和TH17介导的疾病所需的。
多种IRAK4激酶抑制剂是已知的，并且已经在原理上被开发用于肿瘤学或炎性疾病(参见例如WO 2015150995、WO 2017207386、WO 2017009806、WO 2016174183、WO2018234342)。在已知的IRAK4激酶抑制剂中，PF-06650833最近已经完成了治疗类风湿性关节炎的II期临床试验(参见clinicaltrials.gov的NCT02996500条目)。
综合考虑，IRAK4抑制剂具有用于治疗多种疾病和病症的潜力，虽然目前为止还没有这种抑制剂被批准用于临床使用。本说明书的目标是提供具有使得IRAK4抑制剂适用于临床使用，例如用于治疗与IRAK4介导的途径的活化相关联的炎性疾病诸如哮喘、COPD和慢性自身免疫/自体炎性疾病的物理化学和选择性特征(profile)的新的IRAK4抑制剂。
在第一方面，本说明书提供了一种具有式(A)的化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
R1选自
R2选自
R3和00各自独立地选自H、Me、Et、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
Y是N(Me)COMe、N(R5)COMe、N(Me)COR6、N(R5)COR6、CONMe2或5元N-杂环诸如1，2，3-三唑，并且Z是H、Me、Et和任选取代的C1-C6烷基；或者
Y和Z组合形成任选取代的4元、5元或6元环；
X选自OR7和NR8R9；
R5选自H、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
R6选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基和任选取代的5元或6元饱和N-杂环：
R7是Me、Et、异丙基、正丙基、环丙基、环丁基、任选取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基或含有选自O和N的杂原子的4元、5元或6元环；
R8和R9独立地选自H、Me和任选取代的C1-C6烷基，或者一起形成任选取代的C3-C6环烷基或含有选自O和N的另外的杂原子的任选取代的4元、5元或6元环；
其中当存在时，Z、R3、00、R5、R6、R7、R8和R9的任选取代基独立地选自OH、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl。
在第二方面，本说明书提供了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
R1选自
R2选自
R3和00各自独立地选自H、Me、Et、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
Y是N(Me)COMe、N(R5)COMe、N(Me)COR6、N(R5)COR6、CONMe2或5元N-杂环诸如1，2，3-三唑，并且Z是H、Me、Et和任选取代的C1-C6烷基；或者
Y和Z组合形成任选取代的4元、5元或6元环；
X选自OR7和NR8R9；
R5选自H、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
R6选自任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
R7是Me、Et、异丙基、正丙基、环丙基、环丁基、任选取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基或含有选自O和N的杂原子的4元、5元或6元环；
R8和R9独立地选自H、Me和任选取代的C1-C6烷基，或者一起形成任选取代的C3-C6环烷基或含有选自O和N的另外的杂原子的任选取代的4元、5元或6元环；
其中当存在时，Z、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的任选取代基独立地选自OH、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl。
以下本文对具有式(I)的化合物的提及应阅读为包括对具有式(A)的化合物提及以及对具有式(I)的化合物的提及。
本说明书还描述了一种药物组合物，其包含具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
本说明书还描述了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于作为药物。
本说明书还描述了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)中使用。
本说明书还描述了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗炎性疾病中使用。
本说明书还描述了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病中使用。
本说明书还描述了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗癌症中使用，例如用于与BTK抑制剂组合使用。
本说明书还描述了一种具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在治疗癌症中使用。在此类使用中，具有式(I)的化合物可以用作单一疗法，或与另一种治疗剂组合使用，例如用于治疗血液恶性肿瘤。有待治疗的血液恶性肿瘤可以选自华氏巨球蛋白血症(WM)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)、脾边缘区淋巴瘤(SMZL)、小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)、白血病(慢性淋巴细胞白血病(CLL))和意义未明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS-IgM+)。此外，该使用可以是用于治疗具有MYD88突变、B细胞受体(BCR)突变或MYD88和BCR突变两者的血液恶性肿瘤。当该化合物与另一种治疗剂组合使用时，该第二剂可以选自下组，该组包括BCR抑制剂诸如BTK抑制剂(实例包括依鲁替尼(ibrutinib)、阿卡替尼(acalabrutinib)、泽布替尼(zanubrutinib)或替拉鲁替尼(tirabrutinib))、PI3Kδ抑制剂和SYK抑制剂或免疫疗法。
本说明书还描述了具有式(I)的化合物用于制造药物的用途，例如其中该药物用于治疗呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，或用于治疗癌症或用于治疗自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病，或用于治疗炎性疾病。
本说明书还描述了治疗方法，其包括向对其有需要的患者施用有效量的具有式(I)的化合物，其中该有需要的患者具有呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，癌症，自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病或炎性疾病。
本说明书还涉及用于制造具有式(I)的化合物的方法。
通过阅读本说明书，本说明书的另外的方面对于本领域技术人员而言将是明显的。
本说明书参考下图。
图1.LPS诱导的肺炎症的急性小鼠模型中实例89的体内剂量应答。在吸入LPS刺激(challenge)(1mg/mL)之前1h向小鼠口服给药实例89化合物。在刺激之后4h，将动物处死，并且测量支气管肺泡灌洗液中释放的IL-6和TNF-α的水平。实例89以剂量依赖性方式降低IL-6和TNF-α的水平。单个数据点表示单个动物，并且柱表示每个组的平均值。通过将治疗组与媒介物组进行比较的单向ANOVA检验计算各组之间的统计学差值。**p<0.01，***p<0.001。因此建立了根据本说明书的IRAK4抑制剂减少体内炎性细胞因子和TNF-α的能力。
如上所述，已经发现具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐是IRAK4激酶的有效抑制剂。此外，具有式(I)的优选化合物表现出对于其他激酶优异选择性，从而提供了避免脱靶作用和毒性的特征。IRAK4抑制性活性和缺乏有害脱靶作用的此希望组合指示本说明书的化合物用于医学的适用性。
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有如本披露所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。例如，Concise Dictionary of Biomedicine andMolecular Biology[简明生物医学和分子生物学词典]，Juo，Pei-Show，第2版，2002，CRC出版社；Dictionary of Cell and Molecular Biology[细胞和分子生物学词典]，第3版，1999，Academic Press[学术出版社]；以及Oxford Dictionary of Biochemistry andMolecular Biology[生物化学和分子生物学牛津词典]，修订版，2000，牛津大学出版社(Oxford University Press)为技术人员提供在本披露中使用的许多术语的通用词典注释。
为了使本说明书可以更容易理解，在下面明确定义了某些术语。此外，定义在整个详细说明中视情况而阐述。
单位、前缀和符号是以它们的国际单位系统(Système International deUnites)(SI)接受的形式表示。数值范围包括限定该范围的数字。
术语“药物组合物”是指如下制剂，该制剂处于允许该活性成分的生物活性有效的形式，并且不含有另外的、对其将要施用的受试者具有不可接受的毒性的组分。此类组合物可以是无菌的。根据本说明书的药物组合物将包含具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，和至少一种药学上可接受的赋形剂。
术语如“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”或“治疗(to treat)”或“减轻(alleviating)”或“减轻(alleviate)”是指(1)使得诊断的病理性病症或障碍被治愈、减缓、减轻症状、和/或停止进展的治疗措施以及(2)防止和/或减缓所靶向的病理学病症或障碍的发展的预防性或防止性措施。因此，需要治疗的那些包括已具有障碍的那些；倾向于具有或罹患障碍的那些；以及在他们中需要预防障碍的那些。在某些方面中，如果患者显示例如，总的、部分的或瞬时的此呼吸疾病的症状的缓解，则根据本披露的方法成功“治疗”了该受试者的呼吸疾病。
术语“受试者”是指有待成为特定治疗的接受者的任何动物(例如，哺乳动物)，包括但不限于人类、非人类灵长动物、啮齿类等。典型地，术语“受试者”和“患者”在本文关于人类受试者可互换地使用。
如本文和以上所用，符号★用于指示具有式(I)的化合物的组分与该化合物的其他组分的连接位点。为了通过实例对此进行说明，当具有式(I)的化合物具有以下指定的R1基序时，该化合物将是具有结构A的化合物。类似地，当具有式(I)的化合物具有以下R2基序时，该化合物将是具有结构B的化合物。
如本文所用，术语“烷基”是指具有指定碳原子数的直链和支链饱和烃基。如本文所用，术语氘烷基是指其中一个或多个，任选地所有氢被氘原子替代的烷基。术语环烷基是指饱和的环烃。
在本说明书中，如在术语中所使用的前缀Cx-Cy诸如Cx-Cy烷基和类似物(其中x和y是整数)指示在该基团中存在的碳原子的数值范围。例如，C1-C4烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基，同时C1-C3烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基和异丙基。C1-C4烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。C1-C3烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基和异丙氧基。
除非明确说明，否则基团的键合原子可以是该基团的任何适合的原子；例如，丙基包括丙-1-基和丙-2-基。
如本文所用，术语环烷基是指具有指定碳原子数的饱和环烃基。因此，C3-Cb环烷基是指环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
如本文所用，术语烷氧基是指具有连接至烷基链上的氧原子的基团，其中如上定义，烷基链是具有指定碳原子数的直链和支链饱和烃基。因此，C1-C3烷氧基是指甲氧基、乙氧基、OnPr和OiPr基团。
如本文和以上所述，基团R2可以被基团R4取代。在此类情况下，基团R4可以附接至任何可用的环碳上，虽然优选R4附接至与附接至如下所示的吲唑环上的碳原子相邻的碳原子上。
如本文和以上所述，术语乙酰基是指具有式-C(O)Me的基团。对于N-酰化基团的提及在本文中用于是指具有小烷基侧链(即，任选取代的C1-C6烷基侧链或任选取代的C3-C6环烷基)的酰胺，在每种情况下，任选的取代基选自OH、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl，其中优选的N-酰化基团是N-乙酰基，即基团-NRC(O)Me。
如本文和以上所述，具有式(I)的化合物包含基团R2，其可以是被组合形成4元、5元或6元环的两个基团Y和Z取代的环己基环。在此类情况下，该4元、5元或6元环是饱和烃环系统，任选地其中，一个或两个环碳被选自O和N的杂原子替换。在其中两个环碳被杂原子替换的情况下，杂原子不是直接结合的，即杂原子替换不相邻的环碳，或者它们在环中不被CH2基团间隔开，但是可以例如被羰基连接以提供例如碳酸酯或氨基甲酸酯基序。烃环可以并入羰基，如在Y和Z组合形成环酰胺的情况下。在优选实例中，4元、5元或6元环是环酰胺或氨基甲酸酯，诸如吡咯烷-2-酮、噁唑烷-2-酮、哌啶-2-酮和1，3-噁嗪烷-2-酮。可替代地，基团Y和Z可以组合形成在氮处被酰基取代的氮杂环丁烷。此外，4元、5元或6元环可以被选自以下的基团取代：OH、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl。这些任选的取代基可以有利地用于调控分子的物理化学特性，诸如可溶性，或例如相对于其他激酶进一步优化与IRAK4激酶的相互作用，从而提供更有效和更具选择性的IRAK4激酶抑制剂。
如本文所述，具有式(A)的化合物包含可以选自以下的基团Y：N(R5)COMe、N(Me)COR6和N(R5)COR6。在此类情况下，基团R6可以是任选取代的5元或6元饱和N-杂环，例如经由杂环的氮原子连接至Y的羰基上以提供脲部分的吡咯烷或哌啶。例如，Y可以是基团N(Me)COR6，其中R6是如下所示的3-羟基吡咯烷。
如本文和以上所述，基团R7可以是含有选自O和N的杂原子的任选取代的4元、5元或6元环。为了避免疑问，“含有杂原子”意指环的原子中的一个是选自O或N的杂原子。在此类情况下，含有选自O和N的杂原子的饱和4元、5元或6元环是优选的。含有选自O和N的杂原子的优选4元、5元或6元环的实例是氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、吡咯烷、四氢吡喃和哌啶。如本文和以上所述，取代基R8和R9可以组合以形成含有选自O和N的另一个杂原子的任选取代的4元、5元或6元环。在其中存在另一个杂原子的情况下，该杂原子不直接结合至N，即环中的杂原子是不相邻的，或者它们不被CH2基团间隔开。在此类情况下，优选所得的环是饱和的，例如所得的环可以是吗啉或哌嗪环。
如对于本领域的读者明显的，具有式(I)的化合物并且特别是基团R2可以各种立体化学形式存在。应理解，权利要求书涵盖具有式(I)的化合物的所有立体化学形式，虽然作为IRAK4的抑制剂的具有最高活性的化合物是优选的。应认识到，具有式(I)的化合物可以在存在或不存在处于任何相关比例的具有式(I)的化合物的一种或多种其他可能的立体异构形式的条件下制备、分离和/或提供。立体富化的或立体纯的化合物的制备可以通过本领域中熟知的有机化学标准技术进行，例如通过从立体富化的或立体纯的起始材料合成，合成过程中使用适当的立体富化的或立体纯的催化剂，和/或通过拆分外消旋的或部分富化的立体异构体混合物(例如经由手性色谱法)进行。
作为实例，在以下情况下，取代基R2是1，3-取代的环己醇基团。在此系统中，环上醇和吲唑基团的相对(rel)立体化学可以是顺式或反式，并且顺式或反式异构体中的每一种将进而以反映手性中心(即，附接至羟基和吲唑基团上的碳)的(R)或(S)构型的两种对映异构体形式存在。在本文所述的某些情况下，化合物将被称为具有相对(rel)立体化学布置的化合物的异构体1和2，因此在被称为rel-(1S，3R)的化合物的情况下，应理解，两种可能的异构体是具有相同的相对立体化学但彼此是对映异构体的(1S，3R)异构体和(1R，3S)异构体。因此对于以下具有顺式相对立体化学的化合物的提及是指具有此相对立体化学的两种可能的化合物。本文的已知相对立体化学和未确定的绝对立体化学的结构被描绘为具有限定符的单一对映异构体“或对映异构体”。
如本文和以上所述，具有式(I)的化合物的某些组分是任选取代的。如本文所述，术语任选取代的意指化合物的结构元件可以被或可以不被一个或多个指定的任选取代基取代。在其中基团Z、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9中的一个或多个存在任选取代基的情况下，通常优选每个取代基团存在零个、一个或两个取代基，例如存在零个或一个取代基。在其中存在两个羟基取代基的情况下，应理解，两个羟基不附接至同一碳原子上。在其中任选取代基是F的情况下，优选存在一个、两个或三个F取代基，并且此外，在存在两个或三个取代基的情况下，它们直接结合至同一碳原子。这些任选的取代基可以用于调控分子的物理化学特性，诸如可溶性，调控代谢，或例如相对于其他激酶进一步优化与IRAK4激酶的相互作用，从而提供更有效和更具选择性的IRAK4激酶抑制剂。
如上所述，在第一实施例中，本说明书提供了一种具有式(A)的化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
R1选自
R2选自
R3和R4各自独立地选自H、Me、Et、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
Y是N(Me)COMe、N(R5)COMe、N(Me)COR6、N(R5)COR6、CONMe2或5元N-杂环诸如1，2，3-三唑，并且Z是H、Me、Et和任选取代的C1-C6烷基；或者
Y和Z组合形成任选取代的4元、5元或6元环；
X选自OR7和NR8R9；
R5选自H、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
R6选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基和任选取代的5元或6元饱和N-杂环；
R7是Me、Et、异丙基、正丙基、环丙基、环丁基、任选取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基或含有选自O和N的杂原子的4元、5元或6元环；
R8和R9独立地选自H、Me和任选取代的C1-C6烷基，或者一起形成任选取代的C3-C6环烷基或含有选自O和N的另外的杂原子的任选取代的4元、5元或6元环；
其中当存在时，Z、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的任选取代基独立地选自OH、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl。
在实施例中，具有式(A)的化合物是具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
R1选自
R2选自
R3和R4各自独立地选自H、Me、Et、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
Y是N(Me)COMe、N(R5)COMe、N(Me)COR6、N(R5)COR6、CONMe2或5元N-杂环诸如1，2，3-三唑，并且Z是H、Me、Et和任选取代的C1-C6烷基；或者
Y和Z组合形成任选取代的4元、5元或6元环；
X选自OR7和NR8R9；
R5选自H、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
R6选自任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
R7是Me、Et、异丙基、正丙基、环丙基、环丁基、任选取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基或含有选自O和N的杂原子的4元、5元或6元环；
R8和R9独立地选自H、Me和任选取代的C1-C6烷基，或者一起形成任选取代的C3-C6环烷基或含有选自O和N的另外的杂原子的任选取代的4元、5元或6元环；
其中当存在时，Z、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的任选取代基独立地选自OH、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl。
在实施例中，具有式(I)或式(A)的化合物是具有式(Ia)的化合物，其中基团R2是并且基团Y和Z组合形成4元、5元或6元环，其是任选取代的3-羟基环丁基、N-酰化氮杂环丁烷、吡咯烷-2-酮、1-烷基吡咯烷-2-酮、3-烷基噁唑烷-2-酮、1-烷基哌啶-2-酮或3-烷基-1，3-噁嗪烷-2-酮环。
在实施例中，具有式(I)或式(A)的化合物是具有式(Ib)的化合物，其中基团R2是并且基团Y和Z组合形成4元、5元或6元环，其选自3-羟基环丁基、N-乙酰基氮杂环丁烷、1-甲基吡咯烷-2-酮、3-甲基噁唑烷-2-酮、1-甲基基哌啶-2-酮和3-甲基-1，3-噁嗪烷-2-酮。/>
在实施例中，具有式(I)或式(A)的化合物是具有式(Ic)的化合物，其中基团R2是并且基团Y和Z组合形成选自以下的4元、5元或6元环
其中★代表与环己基的附接位点，并且R10是Me或任选地被OH、C1-C3烷氧基、C(O)Me、NH2、NHMe、NMe2、F或Cl取代的C1-C6烷基。
在实施例中，具有式(A)的化合物是具有式(Ac)的化合物，其中基团R2是并且基团Y和Z组合形成是/>的4元、5元或6元环，其中★代表与环己基的附接位点，并且R10是Me或任选地被OH、C1-C3烷氧基、C(O)Me、NH2、NHMe、NMe2、F或Cl取代的C1-C6烷基。
在实施例中，具有式(I)或式(A)的化合物是具有式(Id)的化合物，其中基团R2是Y选自N(Me)COMe、N(R5)COMe、N(Me)COR6、N(R5)COR6和CONMe2并且Z是H。
在实施例中，具有式(I)或式(A)的化合物是具有式(Ie)的化合物，其中基团R2是任选地其中R4是H。
在实施例中，具有式(I)或式(A)的化合物是具有式(If)的化合物，其中基团R2是任选地其中R3和R0是甲基。
在实施例中，具有式(If)的化合物是具有式(Ig)的化合物，其中基团R2选自
在实施例中，具有式(If)的化合物是具有式(Ih)的化合物，其中基团R2选自
/>
在实施例中，具有式(If)的化合物是具有式(Ah)的化合物，其中基团R2选自
在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)或(Ih)中的任一个的化合物是具有式(Ii)的化合物，其中R1是
在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ac)或(Ah)中的任一个的化合物是具有式(Ai)的化合物，其中R1是
在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ac)或(Ah)中的任一个的化合物是具有式(Aj)的化合物，其中R′是
在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)或(Ih)中的任一个的化合物是具有式(Ij)的化合物，其中R1是
在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii)或(Ij)的化合物是具有式(Ik)的化合物，其中X是OR7，任选地其中R7是OMe。
在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ac)或(Ah)中的任一个的化合物是具有式(Ak)的化合物，其中X是OR7，任选地其中R7是OMe。在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)、(Ie)、(If)、(Ig)、(Ih)、(Ii)或(Ij)的化合物是具有式(I1)的化合物，其中X是NR8R9。
在实施例中，具有式(I)的化合物，例如具有式(Ac)或(Ah)中的任一个的化合物是具有式(A)的化合物，其中X是NR8R9。
在实施例中，具有式(A)的化合物选自：
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1R，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1s，4s)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-(4-羟基-4-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2：
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((7R，8R)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺或rel′-2-((7S，8S)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1、2、3或4；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1R，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基环丙烷甲酰胺基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((1r，3R)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((1s，3S)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(2-羟基-N，2-二甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1r，3r)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1s，3s)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺
rel-2-((1S，2S，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，2R，3S)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，2R，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3R)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3S)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((5R，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2以及
rel-2-((5S，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2
或其药学上可接受的盐。
本发明的IRAK4抑制剂可以由可易于获得的起始材料(可从商业供应商，诸如默克公司(Merck KGaA)获得或通过包括在本领域技术人员的公知常识中的方法获得)制备。以下反应方案描述了用于合成IRAK4抑制剂的各种方法。可以给出典型或优选的反应条件用于合成，但是本领域技术人员将能够提出这些条件的修改以获得本文没有描述的类似物。以下呈现的方案因此是用于合成本说明书的化合物的代表性方法，并且它们不应被解释为以任何方式约束本说明书的范围。此外，可以修改反应顺序以改变总体合成，以便允许在不同的合成阶段处在分子的不同位置处的变化。
有知识的读者将认识到，以下方案中所述的化合物可能在一些情况下作为区域异构体和立体异构体的混合物获得，这些异构体可以在合成的不同阶段处使用本领域技术人员熟知的技术诸如硅胶/C18色谱法、HPLC、SFC、结晶等分离。
骨架/构建单元的通用合成：
方案1：用Hal＝卤化物合成骨架I-6。
如方案1所示的骨架I-6可以由可商购获得的2，4-二氟苯甲醛(I-1)制备。I-1可以使用标准硝化条件，例如使用浓硫酸和浓硝酸的混合物或如例如WO 2017/009798中所述使用浓硫酸和硝酸钾的混合硝化，以得到硝基化合物I-2。在碱(例如，DIPEA)和合适的溶剂(例如，DMF)的存在下在高温下用环丙醇处理I-2形成异丙醚I-3。吲唑I-4可以由I-3通过其在合适的溶剂中在高温(例如，80℃)下与肼反应获得。随后，芳香族胺I-5可以通过还原硝基化合物I-4，例如通过在乙醇/水混合物中用Fe和氯化铵(可替代地，可以使用在H2气氛下在MeOH中的碳上的Pd(或碳上的Pd(OH)2))处理获得。胺I-5可以通过例如在合适的溶剂(例如，乙腈)中用亚硝酸叔丁酯和溴化铜(I)处理来转化为对应的溴化物I-6(Hal＝Br)。在硝基还原之前用例如PMB保护基团对I-4的吲唑NH进行保护，接着在引入溴化物之后进行脱保护增加这些转换的产率。胺I-5可以通过例如在水/乙酸中用亚硝酸钠和碘化钾处理来转化为对应的碘化物I-6(Hal＝I)。
方案2：用如权利要求中定义的R1和R7＝--Me或-环丙基通用合成构建单元II-4。
卤化物II-1(Hal＝Br或I)可以用作合成构建单元II-4的起始材料，如方案2中描绘。卤化物II-1是可商购获得的，或者可以使用以上方案1中所述的步骤获得。在作为溶剂的醇的存在下在CO气氛(任选地在和/>的帮助下原位生成)下用Pd催化剂(例如，Pd(dppf)Cl2)处理II-1产生酯II-2(当使用MeOH作为溶剂时，在此示为甲酯)。随后在合适的溶剂(例如，水)中用例如氢氧化锂或氢氧化钾裂解酯产生羧酸II-3。用胺R1-NH2对此酸II-3进行的酰胺形成可以在作为溶剂的碱(例如，DIPEA)和DMF和/或THF的存在下用各种酰胺偶合试剂(例如，HATU)进行以产生所需的构建单元II-4。
卤化物II-1转化为酰胺II-4还可以使用氨基羰基化反应以一步方式进行。在碱(例如，TEA)和胺R1-NH2的存在下在CO气氛(任选地原位生成)下在溶剂(例如，CH3CN)中用Pd源(例如，Pd(OAc)2)和合适的配体(例如，1，3-双(二苯膦基)丙烷)搅拌II-1(Hal＝Br或I)在一步中得到酰胺II-4。
方案3：用以下物质通用合成构建单元III-2：Hal＝卤化物(Br，I)；R＝R2(如权利要求中定义)或如下定义的R2的保护前体；R7＝-Me或-环丙基等。
方案3中所示的吲唑III-2可以通过用在合适的溶剂(例如，DMF、THF、二噁烷、二甲苯、MeCN)中的碱(例如，K2CO3、Cs2CO3、NaHCO3、NaOH、KOH、NatOBu、KtOBu、KOEt、KHMDS、DIPEA、吡啶、TEA)和R2的烷基化试剂R-Y(例如，甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或卤化物)在高温下处理来由化合物III-1(可商购获得或通过以上方案1中所示的合成获得)获得。可替代地，烷基化可以通过化合物III-1与R2的α，β-不饱和羰基前体的迈克尔反应来进行。在R2含有需要通过合适的保护基团保护以用于此合成步骤的官能团的情况下，应使用R2的合适保护前体。此外，如方案3中所示的烷基化反应可以用R2的合适前体进行，该前体可以稍后在朝向目标化合物的合成中转化为R2。例如，如果R2含有胺或酰胺官能团，则胺可以在烷基化剂中用合适的保护基团(例如，Boc)保护，该保护基团在烷基化反应之后裂解。随后，胺可以烷基化或转化为酰胺。如果R2含有醇官能团，则此官能团可以用合适的醇保护基团保护，该醇保护基团承受烷基化反应的反应条件并且在目标化合物的合成中在后续阶段裂解。保护基团是本领域熟知的(参见例如，Greene′s Protective Groups in Organic Synthesis[有机合成中的保护基团]，Ed P.G.M.Wuts，Wiley，NY 2014，第5版)。可替代地，烷基化剂可以含有呈合适的保护羰基官能团形式的胺/酰胺/醇官能团的前体，其可以在通过本领域技术人员已知的合成方法进行的合成中在后续阶段中脱保护并转化为目标化合物的所需胺/酰胺/醇官能团。
根据以上所述的烷基化反应中使用的反应条件，可以获得N1和N2-区域异构体的混合物。N1异构体可以在以上所述的烷基化反应之后立即或在目标化合物的合成中在后续阶段中通过例如柱色谱法与N2异构体分离。
方案4：用以下物质通用合成构建单元IV-2和IV-7：R＝R2(如权利要求中定义或其如在方案3中所述的合适保护的前体；R7＝-Me、-环丙基等。
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方案4描述了N-2吲唑异构体IV-2和IV-7的区域选择性合成。在合适的溶剂(例如，iPrOH)中在高温下用胺R-NH2处理用于合成IV-2的可商购获得的起始材料IV-1，接着添加三正丁基膦使得形成IV-2。用于合成IV-7的起始材料IV-3是可商购获得的(IV-3，R7＝Me，CAS 586412-86-4)，或者可以如方案1中概述的合成顺序中所示获得(针对R7＝环丙基)。在合适的溶剂(例如，EtOH)中用胺R-NH2处理苯甲醛IV-3以形成对应的亚胺，接着在合适的溶剂(例如，DMF)中与叠氮化钠搅拌粗亚胺IV-4产生双环中间体IV-5。还原IV-5的硝基(在H2气氛下用例如碳上的Pd(OH)2)产生芳香族胺IV-6。随后在乙酸中用例如亚硝酸钠和碘化钾处理IV-6产生对应的碘化合物IV-7。
具有式(I)的化合物的通用合成：
方案5：具有式(I)的化合物的通用合成，方法1：
具有式(I)的化合物可以由化合物II-4如方案5中所示制备(R7＝-Me、-环丙基等；R1是如权利要求中定义的)。方案2中示出了制备化合物II-4的反应顺序。
吲唑II-4可以通过在与碱相容的溶剂中用碱(例如，KOH、KHMDS、Cs2CO3)和合适的烷基化试剂R-Y(Y＝甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、卤化物，R＝R2或如方案3中以上定义的R2的合适保护前体)处理来烷基化。在烷基化反应中使用R-Y(其中R＝R2的合适前体)的情况下，方案3中所述的步骤可以在烷基化之后进行以将R转化为目标化合物的R2。
根据以上所述的烷基化反应中使用的反应条件，可以获得N1和N2-区域异构体的混合物。N1异构体可以通过例如柱色谱法与N2异构体分离以获得具有式(I)的化合物。
方案6：具有式(I)的化合物的通用合成，方法2：
方案6中示出了制备具有式(I)的化合物的另一种方法。用于此途径的合适起始材料是吲唑III-2(Hal＝卤化物(Br，I)；R＝如权利要求中定义的R2或其如方案3中所述的合适前体；R7＝-Me、-环丙基等)。卤化物III-2可以如方案3和4中所述获得，并且可以首先在作为溶剂的醇的存在下在CO气氛下(在高压下)用Pd催化剂(例如，Pd(dppf)Cl2)处理以产生酯VI-1(如果使用MeOH作为溶剂，则形成Me-酯VI-1)。随后在合适的溶剂(例如，水)中通过例如氢氧化锂或氢氧化钾裂解酯产生羧酸VI-2。用胺R1-NH2(R1是如权利要求中定义的)进行的此酸VI-2的酰胺形成可以用各种酰胺偶合试剂(例如，HATU，T3P)进行以产生具有式(I)的所需化合物。
如果方案6中所示的反应顺序以化合物III-2(R＝R2的保护前体)开始，则将R转换为R2(如方案3中所述)可以在方案6中所示的合成顺序的不同阶段处进行，这取决于转换的性质和顺序中间体中存在的官能团与反应条件的相容性(本领域技术人员将能够决定步骤的顺序)。
将卤化物III-2(R＝R2)转化为具有式(I)的化合物也可以在一锅氨基羰基化方案中进行。在碱(例如，TEA)和偶合胺R1-NH2的存在下在CO气氛下(在高压下)在溶剂(例如，CH3CN)中与Pd源(例如，Pd(OAc)2)和合适的配体(例如，1，3-双(二苯膦基)丙烷或二(金刚烷-1-基)丁基磷烷)搅拌III-2(R＝R2)在一步中产生具有式(I)的化合物。
如果氨基羰基化反应用化合物III-2(R＝R2的合适保护前体)进行，则将R转化为R2(如方案3中所述)可以在方案6中所示的氨基羰基化反应之后进行，以得到具有式(I)的化合物。
方案7：具有式(I)的化合物的通用合成，方法3：
方案7示出了稍后在合成中改变取代基R7以获得具有式(I)的化合物的方法。以化合物VII-1开始，可以在DCM中用例如BBr3裂解甲氧基醚以产生苯酚VII-2。随后在烷基化反应或光延偶合中VII-2与烷基化试剂R7-Y(例如，甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或卤化物)或醇R7-OH反应产生具有式(I)的化合物。
在本说明书的实施例中，提供了合成具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的方法，在具有式(I)的化合物的合成中的中间体，例如本文和以上所述的方法和中间体。
在实施例中，提供了一种药物组合物，其包含具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。在此类实施例中，具有式(i)的化合物优选用作单一对映异构体形式。可以任选地存在少量杂质，例如按质量计最多1％的其他立体异构体形式。这些药物组合物可以用于治疗其中IRAK4激酶抑制剂可以是有益的病症，如本文和以上更详细所述。
在实施例中，提供了一种用于产生药品的具有式(I)的化合物，任选地其中该药品用于治疗或预防其中IRAK4激酶抑制剂可以是有益的病症，如本文和以上更详细所述。
具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐可以按无定形形式、结晶形式、或半结晶形式制备、使用或提供并且任何给定的具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐可以能够形成为多于一种晶体和/或多晶形形式，包括水合的(例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物或其他化学计量水合物)和/或溶剂化形式。应当理解的是本说明书涵盖了任何以及所有具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐的此类固体形式。
在本说明书的另外的实施例中，提供了具有式(I)的化合物，该化合物通过在以下‘实例’部分中所描述的方法可获得。
本说明书旨在包括存在于本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素应理解为包括具有相同原子数但具有不同质量数的那些原子。例如，氢的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括13C和14C。具有式(I)的同位素标记的化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与在附随的实例中所描述的那些类似的过程使用适当的同位素标记的试剂替代以前采用的非标记的试剂来制备。
具有式(I)的化合物的合适的药学上可接受的盐可以是例如酸加成盐。具有式(I)的化合物的合适的药学上可接受的盐可以是例如具有式(I)的化合物的酸加成盐，例如与无机酸或有机酸的酸加成盐。本说明书中的化合物可以作为游离碱化合物(即处于非盐化状态)来提供。
具有式(I)的化合物的另一种合适的药学上可接受的盐可以是例如在向所述人体或动物体施用具有式(I)的化合物之后在所述人体或动物体内所形成的盐。
具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐可以作为共晶固体形式制备。应当理解的是具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐的药学上可接受的共晶体形成本说明书的一个方面。
用于在药学背景下使用，可能优选的是在不存在大量其他立体异构形式的情况下提供具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
具有式(I)的化合物、或其药学上可接受的盐将通常经由口服途径施用，但是以包含活性成分或其药学上可接受的盐或其溶剂化物或这种盐的溶剂化物的药物制剂的形式、以药学上可接受的剂型的肠胃外、静脉内、肌肉内、皮下或其他可注射方式、含服、直肠、阴道、经皮和/或鼻途径和/或经由吸入的施用也是可以的。取决于有待治疗的障碍和患者以及施用途径，可以按变化的剂量施用这些组合物，例如以从1mg至1，000mg或从100mg至2，000mg的口服剂量施用。
上面所述的具有式(I)的化合物的药物配制品可以被制备例如用于肠胃外、皮下、肌肉内或静脉内施用。
以上所述的具有式(I)的化合物的药物配制品可以方便地以单位剂型施用，并且可以通过制药领域中熟知的任何方法，例如如Remington′s Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学]，第17版，Mack Publishing Company，Easton，PA.[马克出版公司，伊斯顿，宾夕法尼亚州]，(1985)中所述的制备。
适于口服施用的药物配制品可以包含一种或多种生理上可相容的载体和/或赋形剂，并且可以是呈固体或液体的形式。片剂和胶囊可以用以下物质制备：粘合剂；填充剂；滑润剂；和表面活性剂。液体组合物可以含有常规添加剂，诸如悬浮剂；乳化剂；和防腐剂。液体组合物可以包封在例如明胶中以提供单位剂型。固体口服剂型包括片剂、两件式硬壳胶囊和软弹性明胶(SEG)胶囊。根据本说明书的示例性口服组合物包含填充到两件式硬壳胶囊或软弹性明胶(SEG)胶囊中的具有式(I)的化合物和至少一种药学上可接受的赋形剂。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中作为药物使用。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中产生抗增殖性作用。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于在如人类的温血动物中作为抑制和/或治疗实体肿瘤疾病的抗侵袭性药剂使用。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐用于在如人类的温血动物中产生抗增殖性作用的用途。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于在如人类的温血动物中作为抑制和/或治疗实体肿瘤疾病的抗侵袭性药剂使用的药物中的用途。
在其中具有式(I)的化合物用于治疗特征在于过度增殖性疾病或实体肿瘤疾病的病症和相关治疗方法以及用于制造旨在治疗此类疾病的药物的实施例中，应理解，在优选实施例中，该疾病是黑色素瘤，并且此外，与布鲁顿氏酪氨酸激酶抑制剂组合使用是优选的。
在本说明书中，除非另外说明，否则短语“有效量”意指化合物或组合物的足以显著和积极地改变待治疗的症状和/或病症(例如，提供积极的临床反应)的量。用于药物组合物中的活性成分的有效量将随所治疗的具体病症、病症的严重程度、治疗的持续时间、同步治疗的性质、所利用的一种或多种具体活性成分、所利用的一种或多种具体药学上可接受的赋形剂/载体、以及处于主治医生的知识和专业知识范围内的类似因素而变化。有效量通常在0.1mg至1，000mg的范围内。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于提供对IRAK4激酶的抑制性作用。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于提供对IRAK4激酶的抑制性作用的药物中的用途。
根据另一个实施例，还提供了一种用于提供对IRAK4激酶的抑制性作用的方法，其包括向对其有需要的患者施用有效量的如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
根据另一个实施例，提供了一种如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，用于提供对IRAK4激酶的选择性抑制性作用。在此类情况下，选择性抑制性作用指示实现体外IRAK4激酶活性的50％抑制所需的具有式(I)的化合物的浓度低于实现另一种激酶(例如，如果被抑制则产生毒性副作用的另一种激酶)的50％抑制所需的浓度的10倍、100倍或1000倍或更低。
根据另一个实施例，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于提供对IRAK4激酶的选择性抑制性作用的药物中的用途。
根据另一个实施例，还提供了一种用于提供对IRAK4激酶的选择性抑制性作用的方法，其包括向对其有需要的患者施用有效量的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
本文描述了可以抑制IRAK4激酶的化合物。在生物化学和基于细胞的测定中，本说明书的化合物显示出是有效的IRAK4激酶抑制剂并且因此可用于治疗通过IRAK4激酶活性介导的障碍，特别是用于治疗呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，炎性疾病和自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病。
在实施例中，提供了具有式(I)的化合物用于治疗呼吸疾病的用途，任选地其中该呼吸疾病是哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
在实施例中，提供了具有式(I)的化合物用于治疗炎性疾病或自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病的用途。
在实施例中，提供了一种治疗方法，其包括向对有需要的患者施用有效量的具有式(I)的化合物，其中该患者具有呼吸疾病，任选地其中该呼吸疾病是哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)。
在实施例中，提供了一种治疗方法，其包括向对有需要的患者施用有效量的具有式(I)的化合物，其中该患者具有治疗炎性疾病或自体炎性/自身免疫疾病，诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病。
根据本说明书的另一个方面，提供了如上文所定义的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗通过IRAK4激酶活性介导的障碍，特别是用于治疗呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，炎性疾病和自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病的药物中的用途。
应了解，提供了以下实例以使得可以完全理解本发明的性质。还应了解，以下实例不旨在以任何方式限制描述的范围。
实例
使用了以下缩写：
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如果以上未定义，则用于分析数据的缩写与本领域中的常见用法一致(参见J MedChem Standard Abbreviations and Acronyms[医药化学杂志缩写和首字母缩写]http:// pubsapp.acs.org/paragoplus/submission/jmcmar/jmcmar_abbrevtions.pdf？)。
以下提供的化合物名称使用PerkinElmer ChemDraw Professional，20.0.2.51版生成。在其中关于绝对立体化学存在不确定性的情况下，尽可能地指定相对立体化学。
中间体的制备
中间体Int I-1：5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛的合成
5-溴-4-氟-2-硝基苯甲醛
在0℃下将发烟硝酸(12.0mL，0.3mol)在浓硫酸(25mL)中的溶液逐滴添加到在浓硫酸(75mL)中的3-溴-4-氟苯甲醛(19.3g，95.1mmol)中。将所得的黄色溶液缓慢升温至rt并搅拌4d。然后将反应混合物倒在碎冰上，并且将所得的沉淀物通过过滤收集以得到作为黄色固体的5-溴-4-氟-2-硝基苯甲醛(22.6g，96％)。m/z(ESI-)，[M-H]-245/247。
5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(IntI-1)
在rt下将在MeOH(46mL)中的甲醇钠(10.9g，60.6mmol)添加到在MeOH(150mL)中的5-溴-4-氟-2-硝基苯甲醛(10.0g，40.3mmol)中。在搅拌16h之后，将反应用水(300mL)淬灭，将形成的固体过滤掉并用水(100mL)洗涤以得到作为淡黄色固体的5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(6.6g，63％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.03(s，1H)，8.15(s，1H)，7.78(s，1H)，4.04(s，3H)。
中间体Int I-2：6-环丙氧基-5-硝基-1H-吲唑的合成
2，4-二氟-5-硝基苯甲醛
在0℃下在N2气氛下在1h时间段内向2，4-二氟苯甲醛(50.0g，351.9mmol)在硫酸(180mL)中的溶液中缓慢添加硝酸(15M)(30.5mL，457.4mmol)和硫酸(900mL)的混合物。将反应混合物在rt下再搅拌3h，之后将混合物倒在冰/水上并用EtOAc(400mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到作为黄色油状物的2，4-二氟-5-硝基苯甲醛(50.0g，76％)。
4-环丙氧基-2-氟-5-硝基苯甲醛
将在DMF(25mL)中的2，4-二氟-5-硝基苯甲醛(20.0g，106.9mmol)、环丙醇(6.2g，106.9mmol)和DIPEA(37.3mL，213.8mmol)在100℃下搅拌2h。使反应混合物冷却至rt，倒入冰/水(750mL)中并用EtOAc(350mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用PE/EtOAc(6∶1)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的粗4-环丙氧基-2-氟-5-硝基苯甲醛(12.0g)。MS ESI，m/z＝226[M+H]+。
6-环丙氧基-5-硝基-1H-吲唑(IntI-2)
将4-环丙氧基-2-氟-5-硝基苯甲醛(37.0g，164.3mmol)缓慢添加到在EtOH(100mL)中的水合肼(80％在水中)(32.9g，525.8mmol)中。将所得的混合物在rt下搅拌15min，并且然后在80℃下搅拌2h。使反应混合物冷却至rt并在减压下浓缩，以得到作为红色固体的6-环丙氧基-5-硝基-1H-吲唑(34.0g，94％)。MS ESI，m/z＝220[M+H]+。
中间体Int I-3：6-环丙氧基-5-碘-1H-吲唑的合成
6-环丙氧基-1H-吲唑-5-胺
向6-环丙氧基-5-硝基-1H-吲唑(IntI-2)(35.0g，159.7mmol)和NH4Cl(42.7g，798.4mmol)在EtOH(100mL)/水(100mL)中的悬浮液中添加铁(44.6g，798.4mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌2h，冷却至rt，过滤，并且将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用PE/EtOAc(2∶1)洗脱)纯化，以得到作为红色固体的6-环丙氧基-1H-吲唑-5-胺(15.3g，51％)。MS ESI，m/z＝190[M+H]+。
6-环丙氧基-5-碘-1H-吲唑(IntI-3)
在0℃下向6-环丙氧基-1H-吲唑-5-胺(5.0g，26.4mmol)在乙酸(100mL)中的溶液中缓慢添加亚硝酸钠(2.7g，39.6mmol)在水(10mL)中的溶液。将所得的混合物在rt下搅拌1h。然后逐滴添加碘化钾(8.8g，52.9mmol)在水(10mL)中的溶液，并且将混合物在60℃下搅拌4h。将反应混合物冷却至rt，倒入水(400mL)中并用EtOAc(500mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用PE/EtOAc(2∶1)洗脱)纯化，以得到作为红色固体的6-环丙氧基-5-碘-1H-吲唑(4.0g，50％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ12.95(s，1H)，8.16(s，1H)，7.89(s，1H)，7.28(s，1H)，3.94-4.02(m，1H)，0.61-0.95(m，4H)。MS ESI，m/z＝301[M+H]+。
中间体Int I-4：5-溴-6-环丙氧基-1H-吲唑的合成
6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-5-硝基-1H-吲唑
将NaH(60wt％)(2.6g，63.9mmol)缓慢添加到在DMF(20mL)中的1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(7.5g，47.9mmol)和6-环丙氧基-5-硝基-1H-吲唑(IntI-2)(7.0g，31.9mmol)中。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将混合物倒入水(750mL)中，并且用EtOAc(1×400mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以产生粗产物，将其通过硅胶色谱法(用PE/EtOAc 2/1洗脱)纯化，以得到作为红色固体的6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-5-硝基-1H-吲唑(6.0g，55％)。MS ESI，m/z＝340[M+H]+。
6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1H-吲唑-5-胺
将铁(4.9g，88.4mmol)添加到在EtOH(20mL)和水(20.00mL)中的NH4Cl(4.7g，88.4mmol)和6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-5-硝基-1H-吲唑(6.0g，17.7mmol)中。将所得的混合物在80℃下搅拌2h，冷却至rt并且然后过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(用PE/EtOAc 2/1洗脱)纯化，以得到作为红色胶状物的6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1H-吲唑-5-胺(4.8g，88％)。MS ESI，m/z＝310[M+H]+。
5-溴-6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1H-吲唑
在16℃下在N2气氛下在20min时间段内将溴化铜(464mg，3.2mmol)添加到在MeCN(5mL)中的亚硝酸叔丁酯(333mg，3.2mmol)和6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1H-吲唑-5-胺(500mg，1.6mmol)中。将所得的混合物在50℃下搅拌0.5h。将混合物冷却至rt，然后倒入水(400mL)中并用EtOAc(2×400mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(用EtOAc/PE(1∶3)洗脱)纯化，以得到作为淡黄色固体的5-溴-6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1H-吲唑(68mg，11％)。MS ESI，m/z＝373/375[M+H]+。
5-溴-6-环丙氧基-1H-吲唑(IntI-4)
将TFA(3.0mL，39.0mmol)添加到在DCE(1mL)中的5-溴-6-环丙氧基-1-(4-甲氧苄基)-1H-吲唑(400mg，1.1mmol)中。将所得的混合物在100℃下搅拌12h，冷却至rt并且然后浓缩。将粗产物通过快速C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(5％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为灰色固体的5-溴-6-环丙氧基-1H-吲唑(156mg，58％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ13.00(s，1H)，7.99(s，1H)，7.94(s，1H)，7.36(s，1H)，4.00(tt，1H)，0.83-0.92(m，2H)，0.70-0.80(m，2H)。MS ESI，m/z＝253/255[M+H]+。
中间体IntI-5：吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺的合成
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将NH3水溶液(25％)(34.9mL，403.0mmol)添加到吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(20.0g，80.6mmol)的TFA盐在EtOH(300mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌2h，之后将该混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的50％-90％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为橙色固体的吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(9.9g，92％)。MS ESI，m/z＝135[M+H]+。
中间体IntII-1：N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺的合成
将Pd(OAc)2(89mg，0.4mmOl)添加到在脱气MeCN(30mL)中的TEA(3.7mL，26.4mmOl)、dppp(165mg，0.4mmOl)、5-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(2.0g，8.8mmOl)和咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(1.3g，9.7mmol)中。将所得的混合物在100℃下在CO气氛下在4巴下搅拌23h。在将混合物冷却至rt之后，将形成的沉淀物通过过滤收集，用MeCN(2mL)洗涤并在真空下干燥，以得到作为灰色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(2.4g，87％)，其不经进一步纯化即可使用。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ12.86(s，1H)，10.79(s，1H)，8.50-8.65(m，2H)，8.15(s，1H)，8.01-8.12(m，2H)，7.23(s，1H)，7.18(dd，1H)，4.18(s，3H)。m/z(ESI+)[M+H]+＝309。
中间体Int II-2：6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺的合成
6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯
将Pd(dppf)Cl2(9.7g，13.2mmol)、DIPEA(77mL，440.4mmol)和5-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(20.0g，88mmol)在MeOH(500mL)中的溶液在CO气氛下在15atm下并在110℃下搅拌12h。在将混合物冷却至rt之后，将反应混合物通过二氧化硅过滤，并且在减压下除去溶剂。将粗产物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％至30％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为棕色固体的6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(8.0g，44％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝207。
6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酸
在rt下在N2气氛下将在水(5mL)中的LiOH(732mg，30.5mmol)添加到在MeOH(5mL)中的6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(2.1g，10.2mmol)中。将反应混合物在rt下搅拌3h并且然后用HCl水溶液(0.1M)酸化。将形成的沉淀物通过过滤收集，用MeOH洗涤并在真空下干燥，以得到作为灰色固体的6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酸(1.6g，80％)，其不经进一步纯化即可使用。m/z(ESI+)，[M+H]+＝193。
6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int-II-2)
在rt下在N2气氛下将吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(Int I-5)(7.3g，54.0mmol)添加到在THF(20mL)中的HATU(20.6g，54.0mmol)、DIPEA(36mL，208.0mmol)和6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酸(8.0g，42.0mmol)中。将所得的溶液搅拌2h。将反应混合物倒入水(20mL)中，并且将形成的固体经由过滤收集，用水(100mL)洗涤并在真空下干燥，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(10.0g)，其不经进一步纯化即可使用。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ13.13(s，1H)，10.32(s，1H)，9.01-9.12(m，1H)，8.74(s，1H)，8.53-8.56(m，1H)，8.48(s，1H)，8.16(s，1H)，7.18(s，1H)，7.00-7.11(m，1H)，4.10(s，3H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝309。
中间体Int II-3：6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-IH-吲唑-5-甲酰胺的合成
6-环丙氧基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯
将5-溴-6-环丙氧基-1H-吲唑(Int I-4)(5.5g，21.7mmol)、DIPEA(2.1g，16.6mmol)和Pd(dppf)Cl2(15.9g，21.7mmol)在MeOH(30mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在110℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt，浓缩并通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(4.4g，87％)。MS ESI，m/z＝233[M+H]+。
6-环丙氧基-1H-吲唑-5-甲酸
在rt下向6-环内氧基-1H-吲唑-5-甲酸甲酯(4.4g，19.0mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加LiOH(1.4g，56.8mmol)在水(5mL)中的溶液。将所得的溶液在30℃搅拌12h。将反应混合物冷却至rt，用水(25mL)稀释并用EtOAc(10mL×3)洗涤。将水层用0.1N HCl酸化至pH4-5，并且将形成的沉淀物通过过滤收集以得到6-环丙氧基-1H-吲唑-5-甲酸(2.7g，65％)。MS ESI，m/z＝219[M+H]+。
6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int-II-3)
在rt下向6-环丙氧基-1H-吲唑-5-甲酸(5.5g，25.2mmol)、HATU(14.4g，37.8mmol)和DIPEA(22.0mL，126.0mmol)在DMF(6mL)和THF(54mL)中的溶液中添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(IntI-5)(5.1g，37.8mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌12h。将反应混合物倒入水(1L)中并且将形成的沉淀物通过过滤收集。将固体悬浮在MeOH(150mL)中，接着添加K2CO3(15g)，并且将所得的混合物在rt下搅拌2h。随后，将悬浮液倒入水(1L)中并过滤，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(6.9g，81％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ13.14(s，1H)，10.26(s，1H)，8.97-9.17(m，1H)，8.76(s，1H)，8.42-8.64(m，2H)，8.18(s，1H)，7.48(s，1H)，6.95-7.10(m，1H)，4.17-4.39(m，1H)，1.06-0.90(m，2H)，0.90-1.20(m，2H)。MS ESI，m/z＝335[M+H]+。
中间体Int III-1：1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯的合成
8-羟基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮
在0℃下向在MeOH(100mL)中的1-氮杂螺[4.5]癸烷-2，8-二酮(4.5g，26.9mmol)中一次性添加NaBH4(2.0g，53.8mmol)，并且将所得的溶液在rt下搅拌。在14h之后，将反应混合物用EtOAc(50mL)淬灭，真空除去溶剂，并且将所得的残余物使用硅胶色谱法(用EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色油状物的8-羟基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(2.5g，55％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝170。
2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯
在rt下在N2气氛下将TsCl(6.8g，35.8mmol)缓慢添加到在DCM(15mL)中的8-羟基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(2.8g，16.3mmol)、DMAP(199mg，1.6mmol)和TEA(9.1mL，65.0mmol)溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物用水(100mL)淬灭，用DCM(15mL×3)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的30％-60％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯(2.00g，38％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.79(d，2H)，7.47(d，2H)，4.39-4.59(m，1H)，2.42(s，3H)，2.07-2.19(m，2H)，1.48-1.83(m，8H)，1.35-1.48(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝324。
1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯(IntIII-1)
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在0℃下在N2气氛下向2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯(1.9g，5.9mmol)在DMF(8mL)中的溶液中添加NaH(60wt.％)(352mg，8.8mmol)。将所得的悬浮液在0℃下搅拌30min，接着添加碘甲烷(1.5mL，23.5mmol)。将反应混合物在rt下再搅拌6h并且然后用水(10mL)淬灭。将混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-60％MeCN(0.5％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到作为无色固体的1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯(1.8g，91％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(3∶1异构体混合物)δ7.78-7.86(m，2H)，7.48(d，2H)，4.61-4.70/4.43-4.53(m，1H)(异构体)，2.59/2.55(s，3H)(异构体)，2.42(s，3H)，2.13-2.23(m，2H)，1.54-1.89(m，8H)，1.15-1.26/1.26-1.37(m，2H)(异构体)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝338。
中间体Int III-2：7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯的合成
在0℃下在N2气氛下向在DCM(15mL)中的7-羟基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(2.0g，8.3mmol)和TEA(2.3mL，16.6mmol)中添加MsCl(839μL，10.8mmol)，并且将所得的溶液在rt下搅拌。在15h之后，将反应混合物倒入水(150mL)中并且用DCM(3×100mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且真空除去溶剂，以得到作为橙色固体的粗7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(2.70g)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ4.57-4.70(m，1H)，3.53(s，2H)，3.50(s，2H)，3.16(s，3H)，1.71-1.90(m，4H)，1.51-1.66(m，4H)，1.38(s，9H)。m/z(ESI+)，[M-tBu+H]+＝264。
中间体Int III-3：2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯的合成
2-甲基-8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-醇
在-78℃下在N2气氛下将甲基溴化镁在THF(3N，10.0mL，30.0mmol)中的溶液缓慢添加到在THF(50mL)中的8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-酮(2.0g，10.2mmol)中。将所得的混合物在-65℃下搅拌1h，并且在-40℃下搅拌2h。将反应混合物在-40℃下用饱和NH4Cl水溶液(50mL)淬灭，使其升温至rt并且用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并且真空除去溶剂。将所得的残余物使用硅胶色谱法(用在PE中的30％至40％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色油状物的2-甲基-8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-醇(2.1g，97％)。
2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-酮
在rt下在N2气氛下将HCl水溶液(2N，20mL，40mmol)缓慢添加到在THF(20mL)中的2-甲基-8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-醇(2.1g，9.9mmol)中，并且继续搅拌2h。将混合物用NaOH水溶液(2M)中和至pH 7并且用EtOAc(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×50mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩，以得到作为无色油状物的粗2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-酮(1.7g)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝169。
2-甲基螺[3.5]壬烷-2，7-二醇
在rt下在N2气氛下将NaBH4(37.8mg，1.0mmol)缓慢添加到在MeOH(3mL)中的粗2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-酮(84mg)中，并且将所得的混合物搅拌30min。然后真空除去溶剂，并且将所得的残余物使用硅胶色谱法(用在PE中的50％至70％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的2-甲基螺[3.5]壬烷-2，7-二醇(78mg，92％)。
2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯(Int-III-3)
在rt下在N2气氛下将TsCl(4.0g，21.0mmol)缓慢添加到在DCM(50mL)中的2-甲基螺[3.5]壬烷-2，7-二醇(1.2g，7.1mmol)、DMAP(172mg，1.4mmol)和TEA(4.9mL，35.2mmol)中，并且将所得的混合物在50℃下搅拌。在16h之后，使反应混合物冷却至rt，用水(50mL)淬灭并用DCM(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩。将所得的残余物使用硅胶色谱法(用在PE中的10％至50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为淡黄色油状物的2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯(1.7g，74％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 7.77(d，2H)，7.46(d，2H)，4.38-4.51(m，1H)，2.41(s，3H)，1.21-1.81(m，12H)，1.18(s，3H)。
中间体Int III-4：6-甲基-7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯的合成
在-78℃下将在THF(157.0mL，157.0mmol)中的1M LiHMDS添加到THF(100mL)中，接着在N2气氛下在30min时间段内逐滴添加7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(18.8g，78.6mmol)在THF(300mL)中的溶液。将所得的混合物在-78℃下搅拌1h。随后，逐滴添加碘甲烷(22.3g，157.1mmol)。将反应混合物在-78℃下再搅拌30min，接着在rt下搅拌15h。将混合物用冰水(150mL)淬灭并且用EtOAc(500mL×3)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的16％-20％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为淡黄色固体的6-甲基-7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(9.5g，48％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.83(br.s，2H)，3.53(br.s，2H)，2.40-2.49(m，2H)，2.06-2.22(m，3H)，1.72-1.83(m，1H)，1.47-1.57(m，1H)，1.39(s，9H)，0.88(d，3H)。MS ESI，m/z＝239[M-tBu+CH3CN+2H]+。
中间体Int III-5和Int III-6：外消旋-(6R，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(6S，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
外消旋-(6R，7S)-7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(6S，7S)-7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2--甲酸叔丁酯
在0℃下在N2气氛下在40min时间段内向6-甲基-7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-4)(19.5g，77.0mmol)在MeOH(300mL)中的溶液中分批添加NaBH4(5.8g，153.9mmol)。将所得的混合物升温至rt，持续5h。将反应用盐水(300mL)淬灭并且用EtOAc(500mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下蒸发。将残余物通过硅胶色谱法((1.)：用在PE中的25％-30％EtOAc洗脱；(2.)：用在PE中的25％EtOAc洗脱)纯化两次，以得到作为无色固体的外消旋-(6R，7S)-7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(13.6g，69％)和外消旋-(6S，7S)-7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.8g，9％)。(6R，7S)-异构体：MS ESI，m/z＝200[M-tBu+2H]+；(6S，7S)-异构体：MSESI，m/z＝200[M-tBu+2H]+。
外消旋-(6R，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-5)
在rt下在15min内将MsCl(7.7mL，98.7mmol)逐滴添加到外消旋-(6R，7S)-7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(4.2g，16.5mmol)和TEA(22.9mL，165mmol)在DCM(20mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌12h。将混合物用水(25mL×2)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的50％至100％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的外消旋-(6R，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(3.5g，64％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ4.64-4.68(m，1H)，3.41-3.61(m，4H)，3.16(s，3H)，1.94-2.02(m，1H)，1.52-1.82(m，5H)，1.38(s，10H)，0.88-0.97(m，3H)。
外消旋-(6S，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-6)
在0℃下在N2气氛下将MsCl(0.55mL，7.1mmol)逐滴添加到外，消旋-(6S，7S)-7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.8g，7.1mmol)和TEA(983μL，7.1mmol)在DCM(8mL)中的溶液中。将所得的溶液在rt下搅拌3h。将反应混合物用水(10mL)淬灭并且用DCM(15mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-60％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-(6S，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.4g，60％)。MSESI，m/z＝667[2M+H]+。
中间体Int III-7：外消旋-(1R，3R)-3-羟基环己基4-甲苯磺酸酯
在0℃下将TsCl(8.2g，42.0mmol)添加到在DCM(300mL)中的TEA(12.0mL，86.1mmol)、DMAP(526mg，4.3mmol)和外消旋-(1R，3R)-环己烷-1，3-二醇(5mg，43.0mmol)中，并且将所得的混合物在rt下搅拌。在2h之后，将反应混合物用水(200mL)淬灭并且用DCM(2×300mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1×200mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩。将所得的残余物使用硅胶色谱法(用在DCM中的0％至40％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为淡黄色油状物的外消旋-(1R，3R)-3-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(5.0g，43％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 7.77(d，2H)，7.47(d，2H)，4.68-4.80(m，1H)，4.59(br.s，1H)，3.70-3.81(m，1H)，2.42(s，3H)，1.20-1.73(m，8H)。
中间体Int III-8：(1s，4s)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯的合成
在rt下在N2气氛下在5min时间段内将TsCl(33.2g，174.2mmol)添加到((1s，4s)-4-羟基环己基)氨基甲酸叔丁酯(15.0g，69.7mmol)、DMAP(851mg，7.0mmol)和TEA(29.1mL，209.0mmol)在DCM(300mL)中的溶液中。将所得的混合物在50℃下搅拌20h。使反应混合物冷却至rt，用DCM(500mL)稀释，用盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4干燥并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的10％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的(1s，4s)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(15.5g，60％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.70-7.85(m，2H)，7.41-7.54(m，2H)，6.80(d，1H)，4.58(s，1H)，3.14-3.34(m，1H)，2.42(s，3H)，1.61-1.79(m，2H)，1.32-1.60(m，15H)。
中间体IntIII-9：4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯的合成
在rt下在N2气氛下在5min时间段内将TsCl(21.3g，111.5mmol)逐滴添加到(4-羟基环己基)氨基甲酸叔丁酯(顺式/反式比率1：5)(20.0g，92.9mmol)和TEA(25.9mL，185.8mmol)在DCM(400mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt搅拌20h。将反应混合物用DCM(400mL)稀释，用水(150mL×2)洗涤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的10％-25％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(顺式/反式比率1：5)(26.0g，76％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1：5顺式/反式异构体混合物)δ7.75-7.85(m，2H)，7.47(d，2H)，6.81/6.71(d，1H)(异构体)，4.54-4.62/4.27-4.42(m，1H)(异构体)，3.10-3.28(m，1H)，2.42(s，3H)，1.62-1.83(m，4H)，1.39-1.58(m，2H)，1.30-1.38(m，9H)(异构体)，1.09-1.27(m，2H)。MS ESI，m/z＝270[M-Boc+2H]+。
中间体IntIII-10：4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯的合成
在rt下将碘甲烷(3.8g，27.1mmol)逐滴添加到NaH(60wt.％)(812mg，20.3mmol)和4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(顺式/反式1：5)(Int III-9)(5.0g，13.5mmol)在DMF(50mL)中的悬浮液中。将所得的混合物在60℃下搅拌4h。使混合物冷却至rt，将反应用水(100mL)淬灭并且用EtOAc(100mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL×4)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以得到淡黄色固体。将固体通过硅胶色谱法(用在PE中的10％-25％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(顺式/反式1：5)(2.5g，48％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.80(d，2H)，7.48(d，2H)，4.32-4.45(m，1H)，3.57-3.89(m，1H)，2.60(s，3H)，2.43(s，3H)，1.67-1.91(m，2H)，1.42-1.67(m，6H)，1.38(s，9H)。MS ESI，m/z＝284[M-Boc+2H]+。
中间体Int III-11和Int III-12：外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇和外消旋-(7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇
在0℃下在N2气氛下在20min时间段内向7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(50.0g，293.8mmol)在MeOH(500mL)中的溶液中分批添加NaBH4(22.3g，587.5mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h并且然后在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的16％EtOAc洗脱)直接纯化，以得到外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(3.18g，6％)和外消旋-(7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(19.00g，38％)。外消旋-(7R，8S)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ4.27(d，1H)，3.75-3.9(m，4H)，3.51-3.6(m，1H)，1.44-1.78(m，5H)，1.25-1.44(m，2H)，0.86(d，3H)。外消旋-(7S，8S)-异构体：1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ4.45(d，1H)，3.75-3.89(m，4H)，2.89-3.05(m，1H)，1.27-1.77(m，6H)，1.19(t，1H)，0.90(d，3H)。
中间体IntIII-13：外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯的合成
在0℃下在N2气氛下在30min时间段内将MsCl(1.4mL，17.4mmol)逐滴添加到外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(Int III-11)(2.5g，14.5mmol)和TEA(6.1mL，43.6mmol)在DCM(50mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应混合物用盐水(100mL)淬灭并且用DCM(100mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-20％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为棕色油状物的外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯(2.1g，58％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ4.71(br.s，1H)，3.80-3.92(m，4H)，3.17(s，3H)，2.02-2.13(m，1H)，1.85-2.02(m，1H)，1.32-1.83(m，5H)，0.94(d，3H)。
中间体Int IV-1：(1s，4s)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇
(1r，4r)-4-羟基环己基4-甲苯磺酸酯
向TsCl(8.2g，43.0mmol)、TEA(8.7g，86.1mmol)和DMAP(591mg，4.8mmol)在DCM(100mL)中的溶液中添加(1r，4r)-环己烷-1，4-二醇(5.0g，43.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌14h。将反应混合物在减压下浓缩，并且将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的20％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的(1R，4R)-4-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(2.1g，18％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.78(d，2H)，7.47(d，2H)，4.40-4.53(m，1H)，3.39-3.54(m，1H)，2.42(s，3H)，1.60-1.83(m，4H)，1.32-1.60(m，2H)，1.13-1.32(m，2H)。
(1s，4s)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇(IntIV-1)
在rt下向6-环丙氧基-5-碘-1H-吲唑(IntI-3)(300mg，1.0mmol)和KOH(224mg，4.0mmol)在DMF(30mL)中的溶液中添加(1r，4r)-4-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(946mg，3.5mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌14h。将混合物冷却至rt，用EtOAc(50mL)稀释并用水(50mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的(1s，4s)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇(115mg，25％)。MS ESI，m/z＝399[M+H]+。
中间体Int IV-2：(1r，4r)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇的合成
(1s，4s)-4-羟基环己基4-甲苯磺酸酯
在0℃下向(1s，4s)-环己烷-1，4-二醇(3.0g，25.8mmol)、TEA(5.2g，51.7mmol)和DMAP(316mg，2.6mmol)在DCM(50mL)中的溶液中添加TsCl(5.2g，27.1mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将反应混合物用DCM(50mL)稀释，并且依次用0.1N HCl(50mL)和水(50mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-60％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的(1s，4s)-4-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(2.2g，32％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.78(d，2H)，7.47(d，2H)，4.47-4.55(m，1H)，3.43-3.53(m，1H)，2.42(s，3H)，1.60-1.78(m，2H)，1.35-1.60(m，6H)。
(1r，4r)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1.醇(IntIV-2)
向(1s，4s)-4-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(1.3g，4.7mmol)和6-环丙氧基-5-碘-1H-吲唑(IntI-3)(350mg，1.2mmol)在DMF(20mL)中的溶液中添加KOH(196mg，3.5mmol)。将所得的混合物在70℃下搅拌13h。将反应混合物冷却至rt，用EtOAc(50mL)稀释并用水(50mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的(1r，4r)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇(110mg，24％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.23(s，1H)，8.16(s，1H)，7.30(s，1H)，4.66(br.s，1H)，4.32-4.47(m，1H)，3.87-3.99(m，1H)，3.43-3.59(m，1H)，1.82-2.12(m，6H)，1.35-1.47(m，2H)，0.82-0.91(m，2H)，0.66-0.75(m，2H)。MSESI，m/z＝399[M+H]+。
中间体IntIV-3：外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑的合成
在rt下向5-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(1.5g，6.6mmol)和KOH(1.5g，26.4mmol)在DMF(40mL)中的溶液中添加外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯(Int III-13)(2.0g，8.0mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc(300mL)稀释并且用盐水(150mL×4)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为棕色固体的外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(600mg，22％)。MS ESI，m/z＝381/383[M+H]+。
中间体Int IV-4和Int IV-5：5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑和5-溴-6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑的合成
通过以下分离外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(Int IV-3)(7.3g，19.2mmol)：制备型SFC(IG，5μm 50×250mm；与在CO2(35℃，100巴)中的50％MeOH(0.1％2N NH3-MeOH)等度；200mL/min)，以得到均作为灰色固体的5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(3.1g，43％，100％ee)和5-溴-6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(3.0g，41％，100％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.25(d，1H)，7.96(s，1H)，7.12(s，1H)，4.13(td，1H)，3.87-3.99(m，4H)，3.87(s，3H)，2.26-2.43(m，1H)，2.19(td，1H)，
1.75-1.99(m，3H)，1.68(td，1H)，1.46(t，1H)，0.52(d，3H)。MS ESI，m/z＝381/383[M+H]+。
中间体Int IV-6和Int IV-7：(5s，8s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮和(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮的合成
2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯
在0℃下将MsCl(2.0g，17.6mmol)逐滴添加到在DCM(25mL)中的8-羟基-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(1.9g，10.4mmol)和DIPEA(4.7g，36.3mmol)溶液中。将所得的混合物升温至rt并搅拌48h。将反应混合物用冰冷的半饱和NaHHCO3水溶液(30mL)淬灭，并且用DCM(50mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用DCM洗脱)纯化，以得到作为橙色油状物的2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯(3.1g，96％)。
(5s，8s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(Int IV-6)和(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(Int IV-7)
在75℃下向5-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(775mg，3.4mmol)和KOH(434mg，7.0mmol)在THF(15mL)中的溶液中添加2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯(1.3g，5.0mmol)。将所得的混合物在75℃下搅拌过夜。将反应冷却至rt，用水淬灭，用DCM(40mL×4)萃取，干燥并在减压下浓缩。将残余物加载到10gSCX2交换筒上。将筒用DCM/MeOH(1∶1)(150mL)洗涤以除去不想要的1H-吲唑异构体，并且然后在蒸发溶剂之后用100mL2N NH3-MeOH溶液/DCM(1∶1)洗脱以得到粗产物。将棕色残余物通过硅胶色谱法(用EtOAc洗脱，并且然后用在DCM中的0％-2％2N NH3-MeOH溶液洗脱)进一步纯化，以得到8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮。通过以下进一步分离此材料：手性制备型SFC(/>纤维素-3，5μm 30mm×250mm；与在CO2(40℃，130巴)中的20％EtOH(20mM二乙胺)等度；120mL/min)，以得到作为第一洗脱异构体的(5s，8s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(153mg，3％，100％ee)和作为第二洗脱异构体的(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(153mg，3％，99.2％ee)。(5s，8s)-异构体：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.83(s，1H)，7.80(s，1H)，7.03(s，1H)，4.26-4.36(m，1H)，3.91(s，3H)，3.34(s，2H)，2.85(s，3H)，2.28(s，2H)，2.12-2.20(m，2H)，2.01-2.12(m，2H)，1.87-1.96(m，2H)，1.57-1.68(m，2H)。MSESI，m/z＝392/394[M+H]+。(5r，8r)-异构体：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.85(s，1H)，7.82(s，1H)，7.03(s，1H)，4.29-4.41(m，1H)，3.92(s，3H)，3.18(s，2H)，2.85(s，3H)，2.41(s，2H)，2.18-2.26(m，2H)，1.96-2.09(m，2H)，1.85-1.95(m，2H)，1.57-1.69(m，2H)。MS ESI，m/z＝392/394[M+H]+。
中间体Int IV-8：((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯
在rt下在N2气氛下向((1r，4r)-4-氨基环己基)氨基甲酸叔丁酯(10.5g，49.0mmol)在i-PrOH(200mL)中的溶液中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(IntI-1)(12.7g，49.0mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌1h，接着添加三正丁基膦(29.7g，147.0mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌13h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的9％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(14.2g，68％)。MS ESI，m/z＝424/426[M+H]+。
中间体Int V-1和Int V-2：N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺和N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的合成
外消旋-(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己烷-1-酮
在rt下在N2气氛下将外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(IntIV-3)(400mg，1.1mmol)添加到在THF(5mL)/水(5mL)中的1.2N HCl溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌过夜。将反应混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-60％MeCN(0.05％TFA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己烷-1-酮(330mg，93％)。MS ESI，m/z＝337/339[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-1)和N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-2)
将外消旋-(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己烷-1-酮(330mg，1.0mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(201mg，1.5mmol)、Pd(OAc)2(22mg，0.1mmol)、dppp(81mg，0.2mmol)和TEA(409μL，2.9mmol)在MeCN(15mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在90℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt，浓缩并通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离此材料：制备型手性SFC(AS-H，5μm 20mm×250mm；与在CO2(40℃，70巴)中的45％i-PrOH(2mM NH3-MeOH)等度；40mL/min)，以得到均作为黄色固体的作为第一洗脱异构体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(220mg，34％，71.2％ee)和作为第二洗脱异构体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(200mg，31％，83.3％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.67(s，1H)，8.65(dd，1H)，8.60(s，1H)，8.16(dd，1H)，8.06(s，1H)，7.30(s，1H)，7.23(dd，1H)，4.61-4.76(m，1H)，4.13(s，3H)，2.64-2.79(m，1H)，2.52-2.60(m，1H)，2.23-2.49(m，5H)，0.65(d，3H)。MS ESI，m/z＝419[M+H]+。
中间体Int V-3：N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃下向((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(Int IV-8)(990mg，2.3mmol)在DMF(10mL)中的溶液中添加NaH(60wt.％)(1.1g，28.0mmol)。将所得的混合物在0℃下搅拌30min，接着添加碘甲烷(662mg，4.7mmol)。将反应混合物在rt下搅拌15h，然后用水(10mL)淬灭并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到作为黑色固体的((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，59％)，其不经进一步纯化即可使用。MS ESI，m/z＝438/440[M+H]+。
((1r，4r)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
将((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(380mg，0.9mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(134mg，1.0mmol)、Pd(OAc)2(44mg，0.2mmol)、dppp(165mg，0.4mmol)和TEA(604μL，4.3mmol)在MeCN(20mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。然后，将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％乙腈(0.05％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为红色固体的((1r，4r)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(430mg，95％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.04(s，1H)，8.63(d，1H)，8.60(s，1H)，8.56(s，1H)，8.14(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.26(s，1H)，7.21(dd，1H)，4.34-4.61(m，1H)，4.11(s，3H)，3.79-4.04(m，1H)，2.73(s，3H)，2.12-2.33(m，2H)，1.92-2.12(m，2H)，1.62-1.92(m，4H)，1.42(s，9H)。MS ESI，m/z＝520[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-3)
在rt下在N2气氛下将((1r，4r)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(430mg，0.8mmol)添加到在二噁烷(12mL，24.0mmol)中的2N HCl中。将所得的混合物在rt下搅拌2h并且然后在减压下浓缩，以得到N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗HCl盐(300mg)，其不经进一步纯化即可直接使用。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.26(s，1H)，8.97(dd，1H)，8.63(s，1H)，8.60(s，1H)，8.43(dd，1H)，8.37(s，1H)，7.67(dd，1H)，7.28(s，1H)，4.48-4.64(m，1H)，4.13(s，3H)，3.01-3.22(m，1H)，2.54-2.59(m，3H)，2.12-2.29(m，4H)，1.85-2.12(m，2H)，1.47-1.73(m，2H)。MS ESI，m/z＝420[M+H]+。
中间体Int V-4：6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的合成
((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃下在N2气氛下向((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(IntIV-8)(4.2g，9.9mmol)在DMF(50mL)中的溶液中添加NaH(60wt.％)(792mg，19.8mmol)。将所得的悬浮液在rt下搅拌30min，接着添加碘甲烷(1.2mL，19.8mmol)。在搅拌13h之后，将反应用水(150mL)淬灭。将沉淀物过滤，用水(150mL)洗涤并真空干燥，以得到作为无色固体的((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.4g，100％)。MS ESI，m/z＝438/440[M+H]+。
2-((1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将((1r，4r)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.3g，9.8mmol)、Pd(dppf)Cl2(714mg，1.0mmol)和TEA(13.6mL，97.6mmol)在MeOH(125mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。将反应混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的30％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的2-((1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(3.8g，93％)。MS ESI，m/z＝418[M+H]+。
2-((1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸
在rt下向2-((1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(2.9g，6.9mmol)在MeOH(50mL)/水(25mL)中的溶液中添加NaOH(556mg，13.9mmol)。将所得的溶液在30℃搅拌12h。将反应混合物冷却至rt并用4N HCl酸化至pH约6。将沉淀物过滤，用水(200mL)洗涤并真空干燥，以得到作为淡黄色固体的2-((1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(2.7g，95％)。MS ESI，m/z＝404[M+H]+。
((1r，4r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在rt下在N2气氛下向2-((1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(2.6g，6.4mmol)和DIPEA(3.4mL，19.3mmol)在DMF(50mL)中的溶液中添加HATU(2.9g，7.7mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌15min，接着添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺的HCl盐(1.4g，8.4mmol)。将反应混合物在rt下搅拌13h。将混合物用水(100mL)稀释并过滤以获得粗固体。将固体用水(100mL)洗涤，并且然后通过硅胶色谱法(用在DCM中的0％-5％MeOH洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的((1r，4r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(3.3g，99％)。MSESI，m/z＝520[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-4)
在rt下在N2气氛下向((1r，4r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(3.3g，6.4mmol)在DCM(40mL)中的溶液中添加在二噁烷(15.9mL，63.5mmol)中的4N HCl，并且将所得的溶液在rt下搅拌12h。将混合物在减压下浓缩，以得到作为淡黄色固体的6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的HCl盐(2.9g)，其不经进一步纯化即可直接使用。MS ESI，m/z＝420[M+H]+。
中间体Int V-5：2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-羟基-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的合成
在0℃下在N2气氛下在5min时间段内将BBr3(8.0mL，8.3mmol)逐滴添加到在DCM(15mL)中的2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例21，参见以下)(380mg，0.8mmol)中，并且将所得的混合物在40℃下搅拌。在6h之后，使反应混合物冷却至rt，用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭并用盐水(50mL)稀释。将混合物用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将所得的残余物使用C18快速色谱法(用在水中的0％至25％MeCN洗脱)纯化，接着通过硅胶色谱法(用在DCM中的9％至10％MeOH洗脱)纯化，以得到作为浅棕色固体的2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-羟基-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(170mg，46％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1：1旋转异构体混合物)δ 11.69(s，1H)，11.62(s，1H)，8.62(s，1H)，8.60(dd，1H)，8.57(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.10(s，1H)，7.21(dd，1H)，7.00(s，1H)，4.33-4.53(m，1H)，3.92(s，1H)，3.80(s，1H)，3.63(s，1H)，3.52(s，1H)，1.83-2.12(m，6H)，1.76/1.78(s，3H)(旋转异构体)，1.61-1.74(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝460。
实例
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例1)
8-氨基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮
将1-氮杂螺[4.5]癸烷-2，8-二酮(1.0g，6.0mmol)与在MeOH(46.0mL，0.18mol)中的4N NH3混合并且在rt下搅拌。在1h之后，在-50℃下将所得的溶液添加到在THF(20mL)中的NaBH4(256mg，6.8mmol)中并使其升温至rt。将反应用水(10mL)淬灭，并且真空除去有机溶剂。然后，添加4M NaOH水溶液(40mL)和氯化钠(10g)。将所得的悬浮液用DCM(4×70mL)萃取，将合并有机相经MgSO4干燥，并且真空除去溶剂以得到粗8-氨基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(0.9g)，其不经进一步纯化即可使用。
(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮
向在i-PrOH(25mL)中的粗8-氨基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(600mg)中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(IntI-1)(1.1g，2.2mmol)，并且将所得的混合物在80℃下搅拌。在4h之后，添加三正丁基膦(1.6mL，6.5mmol)，并且将混合物在80℃下搅拌过夜。然后使反应混合物冷却至rt并过滤。将收集的固体用庚烷(3×10mL)洗涤并使用离子交换色谱法纯化，用250mL DCM/MeOH(1：1)洗涤并用DCM/4N NH3-MeOH溶液(1/1)洗脱。然后将分离的固体使用i-PrOH重结晶以除去不想要的(5s，8s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮。将滤液通过硅胶色谱法(用在庚烷中的50％-100％EtOAc，然后EtOAc，接着在DCM中的0％-3％NH3-MeOH洗脱)进一步纯化，以得到(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(320mg，39％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝378/380。
(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮
在0℃下向(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(310mg，0.7mmol)在DMF(5mL)/THF(5mL)中的搅拌溶液添加NaH(60wt.％)(93mg，2.1mmol)。在20min之后，在0℃下缓慢添加碘甲烷(130μL，2.1mmol)。将所得的混合物升温至rt并搅拌过夜。然后将反应混合物用冰水(250mL)淬灭并且用DCM(4×25mL)萃取。将合并的有机相真空浓缩，并且将所得的残余物使用硅胶色谱法(用DCM(300mL)，EtOAc(2L)，然后用在DCM(150mL)中的2％NH3-MeOH洗脱)纯化，以得到作为米色固体的(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(225mg，78％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝392/394。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例1)
将甲基二苯基硅烷羧酸(193mg，0.8mmol)和KF(46mg，0.8mmol)添加到干燥且N2冲洗的COware气体反应器的室A中。将在脱气的无水MeCN(2mL)中的(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(116mg，0.3mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(121mg，0.9mmol)、dppp(41mg，0.1mmol)、Pd(OAc)2(27mg，0.1mmol)和TEA(223μL，1.6mmol)添加到室B中。然后，将DMSO(350μL)添加到室A中并且将室B在85℃下搅拌过夜。使反应混合物冷却至rt。将室B中的反应物用饱和NaHCO3淬灭，真空除去溶剂，并且将所得的残余物使用离子交换色谱法纯化，用DCM/MeOH(1/1；200mL)洗涤并且用在MeOH(200mL)中的4N NH3洗脱。将所得的深棕色固体使用硅胶色谱法(用EtOAc(2L)并且然后用在DCM中的0％-3％NH3-MeOH洗脱)进一步纯化，以得到橙色-黄色固体。将橙色-黄色固体用EtOAc(20mL)研磨，以得到亮黄色固体，将其在i-PrOH(3mL)浆化过夜。将浆液溶液过滤，并且将收集的沉淀物用i-PrOH(4×500μL)和戊烷(3×1mL)洗涤，以得到作为浅黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(93mg，74％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ 11.05(s，1H)，8.65(dd，1H)，8.64(d，1H)，8.59(s，1H)，8.16(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.29(s，1H)，7.23(dd，1H)，4.49-4.61(m，1H)，4.12(s，3H)，2.68(s，3H)，2.28(t，2H)，2.07-2.18(m，4H)，1.94-2.03(m，4H)，1.53-1.59(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝474。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例2)
向1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯(IntIII-1)(1.4g，4.2mmol)中添加DMF(15mL)、N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-1)(1.3g，4.2mmol)和KOH(466mg，8.3mmol)。将所得的溶液在100℃下搅拌。在12h之后，使反应混合物冷却至rt并且使用C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.05％FA)洗脱)直接纯化，接着通过手性HPLC(CHIRAL ART纤维素-SB，2×25mm，5μm；流动相A：MTBE(在MeOH中的2mm NH3)；流动相B：i-PrOH；梯度：等度50％B，持续21.5min；流速：20mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(28.0mg，1％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ 8.75(d，1H)，8.62(s，1H)，8.59(d，1H)，8.15(s，1H)，8.04(dd，1H)，7.21-7.28(m，2H)，4.71-4.79(m，1H)，4.23(s，3H)，2.68(s，3H)，2.59-2.69(m，2H)，2.44(t，2H)，2.07-2.33(m，6H)，1.45-1.55(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝474。
2-((1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例3)
(1r，4r)-4-羟基-N，N-二甲基环己烷-1-甲酰胺
在rt下在N2气氛下在3h时间段内将HATU(9.5g，25.0mmol)添加到在DCM(30mL)中的(1r，4r)-4-羟基环己烷-1-甲酸(3.0g，20.8mmol)、二甲胺盐酸盐(5.1g，62.5mmol)和DIPEA(14.5mL，83.0mmol)中。在将所得的混合物搅拌3h之后，将反应混合物倒入水(20mL)中并用DCM(3×20mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并且真空除去溶剂。将粗产物经受硅胶色谱法(用在PE中的0％至50％EtOAc洗脱)，以得到粗(1r，4r)-4-羟基-N，N-二甲基环己烷-1-甲酰胺(2.1g)，其不经进一步纯化即可使用。m/z(ESI+)，[M+H]+＝172。
(1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基4-甲苯磺酸酯
在0℃下在N2气氛下将TsCl(8.4g，44.1mmol)逐滴添加到在DCM(20mL)中的TEA(7.3mL，52.4mmol)、DMAP(214mg，1.8mmol)和粗(1r，4r)-4-羟基-N，N-二甲基环己烷-1-甲酰胺(2g)中，并且将所得的溶液在rt下搅拌。在11h之后，将反应混合物倒入水(20mL)中，用DCM(3×10mL)萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并且真空除去溶剂。将所得的残余物经受硅胶色谱法(用在PE中的10％至20％EtOAc洗脱)，以得到粗(1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基4-甲苯磺酸酯(2.1g)，其不经进一步纯化即可使用。m/z(ESI+)，[M+H]+＝326。
2-((1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例3)
在rt下在N2气氛下将KOH(218mg，3.9mmol)添加到在DMF(6mL)中的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-1)(300mg，1.0mmol)和粗(1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基4-甲苯磺酸酯(950mg)中，并且将所得的溶液在100℃下搅拌。在12h之后，使反应混合物冷却至rt并且直接经受C18快速色谱法(用在水中的10％至60％MeCN(0.5％FA)洗脱)，接着进行制备型HPLC(XSelect CSH Prep C18OBD柱，5μm，19mm×150mm；流动相A：水(0.1％FA)；流动相B：MeCN；梯度：在7min内15％至27％B，然后27％B持续2min，流速：60mL/min)，以得到作为黄色固体的2-((1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(40mg，9％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.05(s，1H)，8.64(t，2H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.29(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.56-4.65(m，1H)，4.12(s，3H)，3.03(s，3H)，2.85-2.97(m，1H)，2.80(s，3H)，1.94-2.04(m，3H)，1.59-1.81(m，6H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝462。
2-((1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例4)
(1s，4s)-4-羟基-N，N-二甲基环己烷甲酰胺
在rt下在N2气氛下将HATU(9.5g，24.9mmol)添加到DIPEA(14.5mL，83.2mmol)、二甲胺×HCl(5.1g，62.4mmol)和(1s，4s)-4-羟基环己烷羧酸(3.0g，20.8mmol)在DCM(30mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物倒入水(20mL)中并且用DCM(2×20mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(用在PE中的0至80％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的粗(1s，4s)-4-羟基-N，N-二甲基环己烷甲酰胺(3.5g)。
(1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基4-甲苯磺酸酯
在rt下在N2气氛下在3h时间段内将TEA(7.3mL，52.6mmol)添加到在DCM(30mL)中的DMAP(214mg，1.8mmol)、(1s，4s)-4-羟基-N，N-二甲基环己烷甲酰胺(3.0g，17.0mmol)和TsCl(6.7g，35mmol)中。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物倒入水(20mL)中并且用DCM(3×25mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％至20％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的(1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基4-甲苯磺酸酯(2.1g，37％)。m/z(ESI+)[M+H]+＝326。
2-((1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例4)
在rt下在N2气氛下将KOH(80mg，1.4mmol)添加到(1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基4-甲苯磺酸酯(348mg，1.1mmol)和N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-1)(110mg，0.4mmol)在DMF(10mL)中的溶液中。将所得的溶液在100℃下搅拌12h并冷却至rt，之后将混合物倒入水(10mL)中。将水相用EtOAc(3×20mL)萃取，将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到黄色油状物。将粗产物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％至30％EtOAc洗脱)纯化，接着通过制备型HPLC(Xselect CSH氟苯基OBD柱，5μm二氧化硅，30×150mm，流动相A：水(0.1％FA)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内20％B至30％B)纯化，以得到作为黄色固体的2-((1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(10mg，17％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.61-8.67(m，1H)，8.59(s，2H)，8.14-8.18(m，1H)，8.05(s，1H)，7.18-7.27(m，2H)，4.48-4.54(m，1H)，4.13(s，3H)，3.07(s，3H)，2.83(s，3H)，2.70-2.80(m，1H)，2.16-2.20(m，2H)，1.99-2.05(m，2H)，1.84-1.88(m，2H)，1.58-1.65(m，2H)。m/z(ESI+)[M+H]+＝462。
2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例5)和异构体2(实例6)
将Cs2CO3(793mg，2.4mmol)添加到在DMF(15mL)中的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-1)(300mg，1.0mmol)和2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯(IntIII-3)(631mg，2.0mmol)中，并且将所得的混合物在85℃下在N2气氛下搅拌。在5h之后，使反应混合物冷却至rt并且直接经受C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.5％FA)洗脱)，接着进行两步制备型HPLC纯化((第1制备型HPLC：XBridge Prep OBD C18，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；流动相B：MeCN；梯度：在7分钟内28％B至48％B；流速：60mL/min.)(第2制备型HPLC：Chiralpak ID-2，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)；流动相B：MeOH；梯度：在14min内等度50％B；流速：16mL/min.))，以得到均作为黄色固体的2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(25mg，6％，100％ee)和2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(23mg，5％，99.5％ee)。针对两个产物获得的1H NMIR和MS是相同的。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 11.04(s，1H)，8.63(dd，1H)，8.58(s，1H)，8.57(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.28(s，1H)，7.21(dd，1H)，4.75(s，1H)，4.33-4.52(m，1H)，4.12(s，3H)，1.71-2.05(m，10H)，1.43-1.61(m，2H)，1.26(s，3H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝461。
2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例7)和2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例8)
(1s，4s)-4-羟基环己基甲烷磺酸酯
在0℃下将MsCl(1.9mL，23.7mmol)添加到(1s，4s)-环己烷-1，4-二醇(2.5g，21.5mmol)和TEA(6.0mL，43.0mmol)在DCM(200mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌12h。将混合物倒入水(20mL)中，将水层用DCM(1×20mL)萃取，并且将有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(用PE：EtOAc50％至100％)纯化，以得到作为无色固体的粗(1s，4s)-4-羟基环己基甲烷磺酸酯(2.9g)。
2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例7)和2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例8)
将Cs2CO3(1.8g，5.7mmol)添加到N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-1)(350mg，1.1mmol)和粗(1s，4s)-4-羟基环己基甲烷磺酸酯(1.3g)在DMF(20mL)中的溶液中。将所得的混合物在100℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt，浓缩并通过C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为淡黄色固体的2-(4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺的反式和顺式异构体的混合物。通过以下分离此材料：制备型SFC(CHIRALPAK IH，2.0×25cm，5μm；流动相A：CO2，流动相B：EtOH(8mmol/L NH3-MeOH)；流速：40mL/min；梯度：40％B)，以得到均作为浅黄色固体的第一洗脱物2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(4mg，1％)和第二洗脱物2-(1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(12mg，3％)。(1s，4s)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.06(s，1H)，8.49-8.70(m，3H)，8.13-8.20(m，1H)，8.06(s，1H)，7.17-7.31(m，2H)，4.39-4.62(m，2H)，4.13(s，3H)，3.85-3.92(m，1H)，2.21-2.38(m，2H)，1.56-1.98(m，6H)。m/z(ESI+)[M+H]+＝407。(1r，4r)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.61-8.67(m，1H)，8.55-8.60(m，2H)，8.12-8.19(m，1H)，8.06(s，1H)，7.18-7.29(m，2H)，4.70-4.78(m，1H)，4.41-4.53(m，1H)，4.13(s，3H)，3.72-3.47(m，1H)，1.88-2.18(m，6H)，1.39-1.49(m，2H)。m/z(ESI+)[M+H]+＝407。
rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例9)和异构体2(实例10)
在N2气氛下向在DMF(10mL)中的外消旋-(1R，3R)-3-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(IntIII-7)(351mg，1.3mmol)和Cs2CO3(423mg，1.3mmol)添加N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-1)(400mg，1.3mmol)，并且将所得的混合物在90℃下搅拌。在5h之后，使反应混合物冷却至rt并且直接经受C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.05％FA)洗脱)，接着进行制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18，30×150mm5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；流动相B：MeCN；梯度：在7min内16％B至36％B；流速：60mL/min)和手性制备型HPLC(CHIRAL ART纤维素-SB，4.6×100mm，3μm；流动相A：(MTBE+在MeOH中的0.5％2N NH3)，流动相B：i-PrOH；梯度：在25min内等度30％B；流速：18mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(16mg，3％，99％ee)和rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(17mg，3％，98.7％ee)。异构体1：1H NMIR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.04(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(d，1H)，8.58(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.26(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.86(d，1H)，4.46-4.57(m，1H)，4.12(s，3H)，3.56-3.67(m，1H)，2.27-2.37(m，1H)，2.01-2.09(m，1H)，1.67-1.95(m，4H)，1.39-1.48(m，1H)，1.12-1.26(m，1H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝407。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.04(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(d，1H)，8.58(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.26(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.86(d，1H)，4.46-4.57(m，1H)，4.12(s，3H)，3.55-3.67(m，1H)，2.25-2.37(m，1H)，2.02-2.12(m，1H)，1.65-1.95(m，4H)，1.32-1.53(m，1H)，1.12-1.26(m，1H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝407。
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例11)和异构体2(实例12)
在rt下在N2气氛下向6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-2)(450mg，1.5mmol)和1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲苯磺酸酯(IntIII-1)(985mg，2.9mmol)在DMF(8mL)中的溶液中添加Cs2CO3(1.4g，4.4mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-40％MeCN(0.5％FA)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(WatersShield RP18OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在9min内在水中22％-32％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离固体：手性制备型HPLC(YMC手性ART纤维素-SB 5μm 20mm×250mm；在9min内与MeOH中的50％己烷/DCM(75/25，0.5％2M NH3-MeOH)等度；20mL/min)，以得到6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(55mg，8％，100％ee)和6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(32mg，5％，99.8％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(3∶7旋转异构体混合物)δ10.32(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(br.s，1H)，8.54(dd，1H)，8.46/8.45(s，1H)(旋转异构体)，8.16(s，1H)，7.44(s，1H)，7.06(dd，1H)，4.70-4.80(m，1H)，4.15(s，3H)，2.72(s，3H)，2.29(t，2H)，1.92-2.21(m，8H)，1.51-1.61(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝474。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1：7旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.59(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.49/8.48(s，1H)(旋转异构体)，7.25(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.48-4.60(m，1H)，4.06(s，3H)，2.68(s，3H)，2.28(t，2H)，2.08-2.18(m，4H)，1.93-2.04(m，4H)，1.52-1.60(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝474。
rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例13)和异构体2(实例14)
在rt下在N2气氛下将6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-2)(400mg，1.3mmol)添加到Cs2CO3(1.3g，3.9mmol)和外消旋-(1R，3R)-3-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(Int III-7)(702mg，2.6mmol)在DMF(15mL)中的浆液中。将所得的混合物在90℃下搅拌12h。使反应混合物冷却至rt，浓缩并且首先通过C18快速色谱法(用在水中的0至100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)，然后通过制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内21％B至30％B)直接纯化，以得到作为黄色固体的所需区域异构体外消旋-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离此材料：手性制备型HPLC(CHIRAL ART纤维素-SB柱，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(0.5％2N NH3-MeOH)，流动相B：i-PrOH；流速：20mL/min；在14min内等度50％B)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(26mg，5％，99％ee)和rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(26mg，5％，99％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，9.05-9.12(m，1H)，8.73(s，1H)，8.51-8.57(m，2H)，8.47(s，1H)，7.22(s，1H)，7.00-7.10(m，1H)，4.82-4.86(m，1H)，4.45-4.55(m，1H)，4.06(s，3H)，3.55-3.67(m，1H)，2.25-2.34(m，1H)，2.00-2.11(m，1H)，1.68-1.95(m，4H)，1.40-1.51(m，1H)，1.13-1.26(m，1H)。m/z(ES+)，[M+H]+＝407。异构体2：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，9.05-9.10(m，1H)，8.73(s，1H)，8.51-8.56(m，2H)，8.47(s，1H)，7.22(s，1H)，7.01-7.10(m，1H)，4.45-4.55(m，1H)，4.06(s，3H)，3.56-3.67(m，1H)，2.28-2.32(m，1H)，2.00-2.10(m，1H)，1.87-1.92(m，1H)，1.67-1.87(m，3H)，1.36-1.50(m，1H)，1.12-1.26(m，1H)。m/z(ES+)，[M+H]+＝407。
6-环丙氧基-2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例15)和异构体2(实例16)
在rt下向6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-3)(330mg，1.0mmol)和2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基4-甲苯磺酸酯(IntIII-3)(480mg，1.5mmol)在DMF(15mL)中的溶液中添加Cs2CO3(643mg，2.0mmol)。将反应混合物在85℃下在N2气氛下搅拌5h。将混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.5％FA)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH C18 OBD，5μm，30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中35％-55％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离此材料：制备型手性HPLC(IE 5μm 20mm×250mm；与MeOH中的50％己烷/DCM(75/25，10mM NH3-MeOH)等度；20mL/min)，以得到均作为黄色固体的6-环丙氧基-2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(37mg，9％，100％ee)和6-环丙氧基-2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(38mg，9％，95.8％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1HNMR (300 MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.46-8.63(m，3H)，7.53(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.76(s，1H)，4.34-4.49(m，1H)，4.15-4.26(m，1H)，1.67-2.08(m，10H)，1.37-1.67(m，2H)，1.27(s，3H)，1.03-1.12(m，2H)。0.92-1.03(m，2H)。MS ESI，m/z＝487[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1R，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例17)和6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例18)
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例19)和异构体2(实例20)
3-羟基环己基4-甲苯磺酸酯
在0℃下在N2气氛下在5min时间段内将TsCl(17.2g，90.4mmol)缓慢添加到环己烷-1，3-二醇(10.0g，86.1mmol)、DMAP(1.1g，8.6mmol)和TEA(36.0mL，258.3mmol)在DCM(100mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌15h。将反应混合物用盐水(100mL)淬灭，用DCM(100mL×2)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的25％-30％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的3-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(8.0g，34％)。MS ESI，m/z＝271[M+H]+。
外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺和外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
在rt下向6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-3)(500mg，1.5mmol)和3-羟基环己基4-甲苯磺酸酯(1.2g，4.5mmol)在DMF(20mL)中的溶液中添加Cs2CO3(1.5g，4.5mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.5％FA)洗脱)直接纯化，接着通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH OBD C18，5μm 30mm×150mm；洗脱梯度为在水中24％-34％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到均作为黄色固体的外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(31mg，5％)和外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(110mg，17％)。
6-环丙氧基-2-((1R，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例17)和6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例18)
通过以下分离外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(31mg，0.1mmol)：制备型手性HPLC(ID，5μm30×250mm；在30min内与EtOH中的80％己烷/DCM(75/25，10mM NH3-MeOH)等度；45mL/min)，以得到均作为黄色固体的6-环丙氧基-2-((1R，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(6mg，20％，99.9％ee)和6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(10mg，33％，99.5％ee)。(1R，3S)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.57(s，1H)，8.55(dd，1H)，8.53(s，1H)，7.51(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.85(d，1H)，4.45-4.62(m，1H)，4.18-4.28(m，1H)，3.53-3.69(m，1H)，2.24-2.29(m，1H)，1.98-2.12(m，1H)，1.69-1.96(m，4H)，1.31-1.53(m，1H)，1.10-1.31(m，1H)，0.93-1.10(m，4H)。MS ESI，m/z＝433[M+H]+。(1S，3R)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.49-8.58(m，3H)，7.51(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.85(d，1H)，4.43-4.60(m，1H)，4.16-4.28(m，1H)，3.54-3.68(m，1H)，2.24-2.38(m，1H)，1.98-2.14(m，1H)，1.64-1.98(m，4H)，1.30-1.54(m，1H)，1.12-1.30(m，1H)，0.89-1.12(m，4H)。MS ESI，m/z＝433[M+H]+。
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例19)和异构体2(实例20)
通过以下分离外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(110 mg，0.3 mmol)：制备型手性HPLC(YMC手性ART纤维素-SB 5 μm 20 mm×250 mm；在17 min内与EtOH中的90％己烷/DCM(75/25，10 mM NH3-MeOH)等度；20 mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(37 mg，34％，100％ee)和rel-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(22 mg，20％，98％ee)-异构体2。异构体1：1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.59(s，1H)，8.55(dd，1H)，8.52(s，1H)，7.51(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.74-4.88(m，1H)，4.71(d，1H)，4.17-4.27(m，1H)，4.10-4.17(m，1H)，2.00-2.16(m，3H)，1.75-2.00(m，2H)，1.53-1.75(m，2H)，1.42-1.53(m，1H)，0.94-1.12(m，4H)。MSESI，m/z＝433[M+H]+。异构体2：1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.59(s，1H)，8.55(dd，1H)，8.52(s，1H)，7.52(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.70-4.88(m，1H)，4.16-4.26(m，1H)，4.08-4.16(m，1H)，1.99-2.17(m，3H)，1.76-1.99(m，2H)，1.56-1.76(m，2H)，1.38-1.56(m，1H)，0.93-1.12(m，4H)。MS ESI，m/z＝433[M+H]+。
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例21)
7-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在rt下在2min时间段内向在DMF(20mL)中的粗7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-2)(1.5g，4.5mmol)和N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-1)(700mg，2.3mmol)中添加KOH(255mg，4.5mmol)，并且将所得的混合物在100℃下搅拌过夜。然后，使反应混合物冷却至rt，倒入水(150mL)中并用EtOAc(3×100mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并且真空除去溶剂以得到黄色固体。将残余物使用C18快速色谱法(用在水中的0％至80％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以产生粗7-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(280mg)，其不经进一步纯化即可使用。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向在DCM(4mL)中的粗7-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(280mg)中添加TFA(1.0mL，13.0mmol)，并且将所得的混合物在rt下搅拌。在2h之后，真空除去溶剂，并且将所得的残余物使用C18快速色谱法(用在水中的0％至80％MeCN(5％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(60mg，26％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝432。
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基v2H-吲唑-5-甲酰胺(实例21)
在rt下在N2气氛下向在DCM(1mL)中的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(350mg，0.8mmol)和TEA(452μL，3.2mmol)中添加乙酸酐(0.2mL，1.6mmol)。将所得的溶液搅拌1h，之后真空除去溶剂以得到黄色固体。将残余物使用C18快速色谱法(用在水中的60％至70％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(400mg，99％)。1H NMR(300MHz，CD3OD)(1：1旋转异构体混合物)δ 8.69(s，1H)，8.55-8.58(m，1H)，8.45(s，1H)，8.12(s，1H)，8.01(d，1H)，7.22(dd，1H)，7.18(s，1H)，4.52-4.55(m，1H)，4.21(s，3H)，4.06(s，1H)，3.93(s，1H)，3.83(s，1H)，3.69(s，1H)，1.95-2.28(m，6H)，1.89/1.91(s，3H)(旋转异构体)，1.74-1.87(m，2H).m/z(ESI+)，[M+H]+＝474。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例22)
(1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯
在rt下在N2气氛下在5min时间段内将TsCl(5.3g，27.8mmol)添加到在DCM(30mL)中的((1r，4r)-4-羟基环己基)氨基甲酸叔丁酯(5.0g，23.2mmol)和TEA(6.5mL，46.6mmol)中。在2h之后，将反应混合物倒入水(50mL)中并且用DCM(2×75mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并且真空除去溶剂。将所得的红色油状物溶解在DCM(50mL)中并通过硅胶垫过滤。将硅胶垫用DCM(500mL)洗涤，并且真空除去溶剂，以得到粗(1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(4.5g)，其不经进一步纯化即可使用。
(1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯
在rt下向在DMF(10mL)中的粗(1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(4.5g)和NaH(60wt.％)(731mg，18.3mmol)中逐滴添加碘甲烷(6.9g，48.6mmol)，将所得的混合物在60℃下搅拌。在2h之后，使反应混合物冷却至rt，用水(20mL)淬灭并用EtOAc(3×25mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并且真空除去溶剂。将所得的残余物使用C18快速色谱法(用在水中的30％至60％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到粗(1r，4r)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(2.4g)，其不经进一步纯化即可使用。
((1s，4s)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
向在DMF(10mL)中的粗(1r，4r)-4-(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(2.4g)和KOH(182mg，3.2mmol)中添加N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-1)(500mg，1.6mmol)，并且将所得的溶液在100℃下搅拌。在12h之后，使反应混合物冷却至rt并且使用C18快速色谱法(用在水中的20％至100％MeCN(0.05％FA)洗脱)直接纯化，以得到粗((1s，4s)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.6g)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝520。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向在1，4-二噁烷(6mL)中的粗((1s，4s)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(0.6g)中添加HCl水溶液(12N，1mL，12.0mmol)，并且将所得的混合物在rt下搅拌。在2h之后，真空除去溶剂以得到N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗HCl盐(0.5g)，其不经进一步纯化即可使用。m/z(ESI+)，[M+H]+＝420。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例22)
在rt下向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗HCl盐(0.5g)中添加在DCM(1mL)中的乙酸酐(0.2mL，1.7mmol)和TEA(0.6mL，4.4mmol)，并且将所得的混合物在rt下搅拌。在5min之后，添加另外的乙酸酐(0.2mL，1.7mmol)并且继续搅拌1h。然后，将反应混合物用水(5mL)淬灭并且真空除去溶剂。将所得的残余物使用制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18，30×250，5μm；流动相A：水(0.05％NH4OH)；流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内27％B至47％B)纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(21.5mg，4％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1：2旋转异构体混合物)δ 11.06(s，1H)，8.74(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.60(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.30(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.40-4.49(m，1H)，4.13(s，3H)，3.75-3.86(m，1H)，2.68(s，2H)，2.55(s，1H)，1.99-2.15(m，3H)，2.07(s，1H)，1.96(s，2H)，1.63-1.88(m，3H)，1.52-1.63(m，1H)，1.38-1.47(m，1H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝462。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例23)
在rt下将N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-3)的粗HCl盐(390mg)添加到在DCM(5mL)中的TEA(477μL，3.4mmol)中。在将所得的混合物搅拌5min之后，添加乙酸酐(121μL，1.3mmol)。继续搅拌1h，之后将反应用水(5mL)淬灭并浓缩以得到作为黄色油状物的粗产物。将粗产物通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18，30×250，5μm；流动相A：水(0.05％NH4OH)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内27％B至47％B)纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(62mg，16％)。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)(2：3旋转异构体混合物)δ8.69-8.73(m，1H)，8.55-8.61(m，1H)，8.45-8.49(m，1H)，8.13(m，1H)，7.99-8.06(m，1H)，7.21-7.26(m，1H)，7.20(s，1H)，4.45-4.62/3.87-3.97(m，2H)(旋转异构体)，4.22/4.21(s，3H)(旋转异构体)，2.99/2.88(s，3H)(旋转异构体)，2.30-2.40(m，2H)，2.06-2.25(m，5H)，1.81-2.01(m，4H)。
6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例24)和6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例25)
4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基(甲基)氨基甲酸叔丁酯
在N2气氛下将Cs2CO3(3.2g，9.7mmol)添加到4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(顺式/反式比率1：5)(Int III-10)(2.5g，6.5mmol)和6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-2)(1.0g，3.2mmol)在DMF(40mL)中的溶液中。将所得的混合物在90℃下搅拌4h，使其冷却至rt并且首先通过快速C18快速色谱法(用在水中的0％至70％MeCN洗脱)直接纯化，接着通过制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内40％B至60％B)纯化，以得到作为黄色固体的4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(270mg，16％，顺式/反式比率5：1)。m/z(ES+)，[M+H]+＝520。
6-甲氧基-2-(4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
将TFA(2mL，3.0mmol)添加到在DCM(4mL)中的(4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.3mmol；顺式/反式比率5：1)中。将所得的混合物在rt下搅拌1h。在减压下除去溶剂，将残余物溶解在EtOAc中并用饱和NaHCO3水溶液碱化。将有机层用盐水(3×50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并且将溶剂在减压下蒸发，以得到6-甲氧基-2-(4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的TFA盐(120mg，99％；顺式/反式比率5：1)。m/z(ES+)，[M+H]+＝420。
6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例24)和6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例25)
将乙酸酐(58mg，0.6mmol)添加到TEA(120μL，1.1mmol)和6-甲氧基-2-(4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的TFA盐(120mg，0.3mmol)(顺式/反式比率5∶1)在DCM(3mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌1h。在减压下除去溶剂，并且将残余物首先通过C18快速色谱法(用在水中的0％至70％MeCN洗脱)纯化，然后通过制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3+0.1％NH4OH)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内16％B至36％B)纯化，以得到作为橙色固体的6-甲氧基-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(顺式/反式比率5∶1)。通过以下分离两种异构体：手性制备型HPLC(CHIRAL ART纤维素-SB柱，2×25cm，5μm；洗脱梯度在EtOH中的50％MTBE(0.5％2NNH3-MeOH)；流速：20mL/min；在13min内)，以得到均作为黄色固体的作为第一洗脱异构体的6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(90mg，68％，100％ee)和作为第二洗脱异构体的6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(20mg，15％，100％ee)。(1s，4s)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1∶1旋转异构体混合物)δ10.37(s，1H)，9.05-9.12(m，1H)，8.75(s，1H)，8.70(s，1H)，8.53-8.57(m，1H)，8.49(s，1H)，7.27(s，1H)，7.00-7.11(m，1H)，4.70(s，1H)，4.39-4.54/3.74-3.88(m，1H)(旋转异构体)，4.08(s，3H)，2.54-2.72(m，5H)，1.92-2.20(m，5H)，1.52-1.90(m，3H)，1.38-1.50(m，1H)。m/z(ES+)，[M+H]+＝462。(1r，4r)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1∶1旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.01-9.11(m，1H)，8.74(s，1H)，8.52-8.63(m，2H)，8.46-8.49(m，1H)，7.19-7.24(m，1H)，6.99-7.09(m，1H)，4.36-4.59/3.70-3.90(m，3H)(旋转异构体)，4.07(s，3H)，2.90(s，2H)，2.70(s，1H)，2.31-1.93(m，7H)，1.59-1.92(m，4H)。m/z(ES+)，[M+H]+＝462。
2-((1r，4r)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例26)和2-((1s，4s)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例27)
(4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯
在rt下在N2气氛下在2min时间段内向6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-2)(500mg，1.6mmol)和4-((叔丁氧基羰基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(顺式/反式比率1：5)(Int III-9)(1.5g，4.1mmol)在DMF(15mL)中的悬浮液中添加Cs2CO3(1.6g，4.9mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌3h。将混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(1％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的(4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(顺式/反式比率7：1)(280mg，34％)。MS ESI，m/z＝506[M+H]+。
2-(4-氨基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
在rt下在N2气氛下在2min时间段内向(4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(顺式/反式比率7：1)(280mg，0.6mmol)在DCM(20mL)中的溶液中逐滴添加在二噁烷中的4N HCl(1.4mL，5.6mmol)。将反应混合物搅拌2h，之后将其在减压下浓缩以得到2-(4-氨基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(顺式/反式比率7：1)(270mg，约90wt.％)的粗HCl盐，其不经进一步纯化即可使用。MS ESI，m/z＝406[M+H]+。
2-((1r，4r)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例26)和2-((1s，4s)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例27)
在rt下在N2气氛下在2min时间段内向2-(4-氨基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(顺式/反式比率7：1)(90wt.％)(270mg)的粗HCl盐和TEA(250μL，1.8mmol)在DCM(4mL)中的溶液中缓慢添加4-溴丁酰氯(227mg，1.2mmol)，并且将所得的混合物搅拌2h。将混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-90％MeCN(0.5％FA)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(WatersShield RP1 8OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在8min内在水中26％-34％MeCN(0.05％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到2-((1r，4r)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(8mg，3％)，在此之后再次通过以下分离此材料：制备型HPLC(Waters/>BEH OBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中35％-50％MeCN(10mM NH4HCO3和0.1％NH4OH)；60mL/min)，以得到2-((1s，4s)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(52mg，20％)，两者均为黄色固体。(1r，4r)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9-07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.51-8.59(m，2H)，8.47(s，1H)，8.04(d，1H)，7.22(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.42-4.56(m，1H)，4.06(s，3H)，3.60-3.74(m，1H)，2.10-2.23(m，2H)，1.89-2.06(m，4H)，1.33-1.61(m，3H)，0.58-0.74(m，4H)。MS ESI，m/z＝474[M+H]+。(1s，4s)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.59(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.50(s，1H)，8.07(d，1H)，7.22(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.46-4.60(m，1H)，4.07(s，3H)，3.87-4.00(m，1H)，2.25-2.39(m，2H)，1.89-2.10(m，2H)，1.58-1.87(m，5H)，0.56-0.76(m，4H)。MS ESI，m/z＝474[M+H]+。
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例28)和异构体2(实例29)
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例30)和异构体2(实例31)
外消旋-(6R，7R)-7-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在rt下向6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-3)(500mg，1.5mmol)和外消旋-(6R，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-5)(748mg，2.2mmol)在DMF(10mL)中的溶液中添加Cs2CO3(1.5g，4.5mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的80％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到粗外消旋-(6R，7R)-7-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(400mg)。MS ESI，m/z＝572[M+H]+。
外消旋-6-环丙氧基-2-((6R，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向粗外消旋-(6R，7R)-7-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(400mg)在DCM(8mL)中的溶液中逐滴添加TFA(2.0mL，26.0mmol)，并且将所得的溶液在rt下搅拌4h。将混合物在减压下浓缩，以得到作为黄色油状物的外消旋-6-环丙氧基-2-((6R，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗TFA盐(350mg)，其不经进一步纯化即可使用。MS ESI，m/z＝472[M+H]+。
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例28)和异构体2(实例29)
在0℃下在N2气氛下向外消旋-6-环丙氧基-2-((6R，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗TFA盐(350mg)和TEA(250μL，1.8mmOl)在DCM(5mL)中的溶液中添加乙酰氯(110mg，1.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(WatersC18OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中35％-45％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)纯化，并且然后通过制备型手性HPLC(/>IA 5μm 20mm×250mm；在27min内与EtOH中的25％MTBE(2mM NH3-MeOH)等度；15mL/min)纯化，以得到均作为黄色固体的rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(15mg，5％，100％e)和rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(15mg，5％，99.7％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)(1：1旋转异构体混合物)δ10.30(s，1H)，9.07(d，1H)，8.75(s，1H)，8.56(s，1H)，8.55(d，1H)，8.53(s，1H)，7.54/7.52(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，4.16-4.24(m，1H)，4.05-4.16(m，1H)，3.97/3.80(s，2H)(旋转异构体)，3.68/3.53(s，2H)(旋转异构体)，2.06-2.17(m，1H)，1.88-2.06(m，4H)，1.80/1.77(s，3H)(旋转异构体)，1.60-1.72(m，1H)，1.42(t，1H)，1.03-1.11(m，2H)，0.93-1.03(m，2H)，0.59(br.d，3H)。MSESI，m/z＝514[M+H]+。
外消旋-(6S，7R)-7-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在rt下在N2气氛下向6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-3)(600mg，1.8mmol)和外消旋-(6S，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-6)(1.1g，3.2mmol)在DMF(6mL)中的溶液中添加Cs2CO3(1.8g，5.4mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeOH(0.05％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的粗外消旋-(6S，7R)-7-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(900mg)，其含有大约30％N1-异构体。MSESI，m/z＝572[M+H]+。
外消旋-6-环丙氧基-2-((6S，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
在N2气氛下向粗外消旋-(6S，7R)-7-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(900mg)(含有30％N1-异构体)在DCM(5mL)中的溶液中逐滴添加TFA(243mL，31.5mmol)，并且将所得的溶液在rt下搅拌12h。将混合物在减压下浓缩，以得到作为黄色固体的外消旋-6-环丙氧基-2-((6S，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗TFA盐(710mg)，其含有某一N1-异构体。MS ESI，m/z＝472[M+H]+。
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例30)和异构体2(实例31)
在rt下在N2气氛下向外消旋-6-环丙氧基-2-((6S，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗TFA盐(700mg)和TEA(833μL，6.0mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加乙酰氯(188mg，2.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％TFA)洗脱)纯化，以得到外消旋-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(100mg)，将其通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH OBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中30％-50％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，并且然后通过制备型手性HPLC(YMC手性ART纤维素-SB 5μm 20mm×250mm；与EtOH中的50％己烷/DCM(75/25，10mMNH3-MeOH)等度；20mL/min)分离，以得到作为黄色固体的rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(30mg，4％，99.5％ee)和rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(30mg，4％，100％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.50-8.59(m，3H)，7.53(d，1H)，7.05(dd，1H)，4.68(br.s，1H)，4.24(br.s，1H)，3.82-3.93(m，2H)，3.56-3.67(m，2H)，2.30-2.42(m，1H)，1.90-2.30(m，4H)，1.69-1.83(m，5H)，1.03-1.12(m，2H)，0.92-1.03(m，2H)，0.52-0.67(m，3H)。MS ESI，m/z＝514[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例32)和6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例33)
(4-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯
向4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)环己基4-甲苯磺酸酯(顺式/反式比率1：5)(IntIII-10)(2.3g，6.0mmol)和6-环并氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-3)(1.0g，3.0mmol)在DMF(30mL)中的溶液中添加Cs2CO3(2.9g，9.0mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌4h。将混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH OBDC185μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中47％-67％MeCN(10mM NH4HCO3和0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为橙色固体的(4-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(顺式/反式比率5∶1)(180mg，11％)。MS ESI，m/z＝546[M+H]+。
6-环丙氧基-2-(4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向(4-(6-环丙氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(顺式/反式比率5：1)(150mg，0.3mmol)在DCM(6mL)中的溶液中逐滴添加TFA(3.0mL，38.9mmol)，并且将所得的溶液在rt下搅拌1h。将混合物在减压下浓缩，以得到6-环丙氧基-2-(4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(顺式/反式比率5∶1)(130mg，94wt.％)的粗TFA盐。粗产物不经进一步纯化即可使用。MS ESI，m/z＝446[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例32)和6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例33)
在rt下向6-环丙氧基-2-(4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(顺式/反式比率5：1)(120mg，94wt.％)的粗TFA盐和TEA(150μL，1.1mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加乙酸酐(55mg，0.5mmol)。将所得的混合物搅拌1h。将反应混合物在减压下浓缩，并且将粗产物通过C18快速色谱法(在水中的0％-80％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为橙色固体的6-环丙氧基-2-(4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离固体：制备型手性HPLC(ID-2，5μm 20×250mm；与MeOH中的70％己烷/DCM(3/1，0.5％2N NH3-MeOH溶液)等度；流速：20mL/min)，以得到6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(90mg，63％，99.9％ee)和6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(20mg，14％，99.0％ee)。(1s，4s)-异构体：1HNMR(300MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.34(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.76(s，1H)，8.73(s，1H)，8.50-8.65(m，2H)，7.55(s，1H)，7.06(dd，1H)，4.63-4.78(m，1H)，4.38-4.54/3.72-3.90(m，1H)(旋转异构体)，4.17-4.30(m，1H)，2.54-2.77(m，2H)，2.55/2.69(s，3H)(旋转异构体)，1.91-2.22(m，2H)，1.97/2.08(s，3H)(旋转异构体)，1.38-1.89(m，4H)，1.04-1.13(m，2H)，0.94-1.04(m，2H)。MSESI，m/z＝488[M+H]+。(1r，4r)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.34(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.76(s，1H)，8。49-8.67(m，3H)，7.44-7.57(m，1H)，7.06(dd，1H)，4.46-4.61(m，1H)，4.36-4.46/3.71-3.87(m，1H)(旋转异构体)，4.17-4.30(m，1H)，2.74/2.87(s，3H)(旋转异构体)，2.16-2.33(m，2H)，2.01/2.10(s，3H)(旋转异构体)，1.93-2.16(m，2H)，1.65-1.93(m，4H)，1.02-1.13(m，2H)，0.92-1.02(m，2H)。MS ESI，m/z＝488[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例34)和异构体2(实例35)
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例36)和异构体2(实例37)
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-1)(100mg，0.2mmol)和1M甲胺-MeOH溶液(1.2mL，1.2mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(101mg，0.5mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-40％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(90mg，87％)。MSESI，m/z＝434[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例34)和异构体2(实例35)
向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(80mg，0.2mmol)和TEA(103μL，0.7mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加乙酸酐(38mg，0.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将反应混合物在减压下浓缩并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-60％MeCN洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XSelect CSH C18 OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在10min内在水中50％-65％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(45mg)。通过以下分离固体：制备型手性HPLC(IF，5μm 20×250mm；在28min内与MeOH中的50％MTBE(0.5％2N NH3-MeOH溶液)等度；流速：15mL/min)，以得到均作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(11mg，12％，99.9％ee)和N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(20mg，22％，99.9％ee)。异构体1：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1.2：1旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.60(d，1H)，8.58(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.27(d，1H)，7.22(dd，1H)，4.42-4.59/3.78-3.96(m，1H)(旋转异构体)，4.06-4.22(m，4H)，2.86/2.73(s，3H)(旋转异构体)，1.92-2.39(m，6H)，1.41-1.90(m，4H)，0.52-0.66(m，3H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。异构体2：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(3：2旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.71(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.29(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.51-4.76/3.90-4.08(m，1H)(旋转异构体)，4.31-4.48(m，1H)，4.13(s，3H)，2.59-2.99(m，4H)，2.24-2.40(m，1H)，1.74-2.24(m，6H)，1.26-1.74(m，2H)，0.92-1.20(m，3H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-2)(120mg，0.3mmol)和2M甲胺-MeOH溶液(717μL，1.4mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(122mg，0.6mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-20％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(100mg，80％)。MSESI，m/z＝434[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例36)和异构体2(实例37)
向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(90mg，0.2mmol)和TEA(116μL，0.8mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加乙酸酐(42mg，0.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-50％MeCN洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(WatersBEH C18OBD，5μm 19×250mm；洗脱梯度为在10min内在水中50％-60％MeCN(10mM NH4HCO3和0.1％NH4OH)；25mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(62mg)。通过以下分离固体：制备型手性HPLC(/>IF，5μm 20×250mm；在18min内与MeOH中的50％MTBE(0.5％2N NH3-MeOH溶液)等度；流速：15mL/min)，以得到均作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(25mg，25％，100％ee)和N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(20mg，20％，99.8％ee)。异构体1：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1.6：1旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.71(s，1H)，8.63(d，1H)，8.59(s，1H)，8.15(d，1H)，8.05(s，1H)，7.29(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.51-4.74/3.89-4.08(m，1H)(旋转异构体)，4.31-4.48(m，1H)，4.13(s，3H)，2.60-2.94(m，4H)，1.76-2.42(m，7H)，1.25-1.73(m，2H)，0.91-1.20(m，3H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。异构体2：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1.2：1旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.53-8.73(m，3H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.16-7.35(m，2H)，4.44-4.57/3.81-3.95(m，1H)(旋转异构体)，4.03-4.27(m，4H)，2.86/2.72(s，3H)(旋转异构体)，1.93-2.40(m，6H)，1.42-1.93(m，4H)，0.41-0.73(m，3H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。
rel-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例38)和异构体2(实例39)
rel-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例40)和异构体2(实例41)
外消旋-6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2-吲唑-5-甲酰胺
在N2气氛下向6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(IntII-2)(1.1g，3.6mmol)和外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯(Int III-13)(1.8g，7.1mmol)在DMF(10mL)中的溶液中添加Cs2CO3(3.5g，10.7mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt，倒入水(50mL)中并用EtOAc(25mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(WatersShield RP18OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在9min内在水中30％-40％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)纯化，以得到外消旋-6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2-吲唑-5-甲酰胺(700mg，42％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝463。
外消旋-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
在rt下在N2气氛下向外消旋-6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(300mg，0.7mmol)在1，4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加3N HCl水溶液(2.7mL，8.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应混合物用浓NH4OH水溶液酸化，并且通过C18快速色谱法(用在水中的20％-50％MeCN(1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(200mg，74％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝419。
rel-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例38)和异构体2(实例39)
rel-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例40)和异构体2(实例41)
在N2气氛下向外消旋-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(200mg，0.5mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加NaBH4(36mg，1.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将反应混合物用水(10mL)淬灭，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-50％MeCN(0.5％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-2-((1S，2S)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。将此混合物通过制备型手性HPLC(ID-2，5μm 20×250mm；与MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)/MeOH，60/40等度；流速：16mL/min)分离，以得到作为第一洗脱异构体的rel-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(7mg，4％，100％ee)和作为第二洗脱异构体的rel-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(56mg，28％，99.9％ee)。将作为第三和第四异构体洗脱但具有更低纯度的以下两种化合物在第二手性制备型HPLC(/>IE，5μμm 20×250mm；与MTBE(2mM NH3-MeOH溶液)/MeOH，50/50等度；流速：20mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的rel-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(36mg，18％，99.9％ee)和rel-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(6mg，3％，99.6％ee)。
rel-(1S，2S，4R)-异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.74(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.51(s，1H)，8.47(s，1H)，7.23(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.55(d，1H)，4.01-4.12(m，4H)，3.96(br.s，1H)，2.52-2.59(m，1H)，2.31-2.47(m，1H)，1.78-1.89(m，2H)，1.67-1.77(m，1H)，1.55-1.65(m，1H)，1.28-1.40(m，1H)，0.54(d，3H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝421。
rel-(1S，2S，4S)-异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.52(s，1H)，8.46(s，1H)，7.22(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.71(d，1H)，4.01-4.11(m，4H)，3.55-3.67(m，1H)，2.11-2.24(m，1H)，1.88-2.10(m，4H)，1.29-1.45(m，1H)，1.16(q，1H)，0.57(d，3H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝421。
rel-(1S，2S，4S)-异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.52(s，1H)，8.46(s，1H)，7.22(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.71(d，1H)，4.00-4.14(m，4H)，3.56-3.67(m，1H)，2.11-2.26(m，1H)，1.89-2.11(m，4H)，1.30-1.45(m，1H)，1.16(q，1H)，0.57(d，3H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝421。
rel-(1S，2S，4R)-异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.74(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.51(s，1H)，8.47(s，1H)，7.23(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.55(d，1H)，4.03-4.12(m，4H)，3.92-3.99(m，1H)，2.52-2.59(m，1H)，2.34-2.47(m，1H)，1.78-1.89(m，2H)，1.68-1.77(m，1H)，1.55-1.67(m，1H)，1.25-1.40(m，1H)，0.54(d，3H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝421。
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例42)和异构体2(实例43)
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例44)和异构体2(实例45)
外消旋-6-环丙氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-3)(1.4g，4.2mmol)和外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基甲烷磺酸酯(Int III-13)(1.1g，8.4mmol)在DMF(30mL)中的溶液中添加Cs2CO3(2.9g，9.0mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌3h，并且在冷却至rt之后用EtOAc(500mL)稀释，并且用盐水(100mL×3)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过制备型SFC(DAICELP4VP，5μm 30mm×250mm；与在CO2(35℃，70巴)中的30％DCM/MeOH(50/50，0.1％2M NH3-MEOH)等度；60mL/min)纯化，以得到作为橙色固体的外消旋-6-环丙氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(440mg，22％)。MS ESI，m/z＝489[M+H]+。
外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向外消旋-6-环丙氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(400mg，0.8mmol)在THF(5mL)和水(5mL)中的溶液中添加浓HCl水溶液(2.0mL，24.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-60％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，并且通过制备型SFC(YMC手性ART直链淀粉-C Neo5μm 30mm×250mm；与在CO2(35℃，78巴)中的60％MeOH/MeCN(50/50，0.1％2M NH3-MeOH)等度；60mL/min)进一步纯化，以得到作为橙色固体的外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(196mg，54％)。MS ESI，m/z＝445[M+H]+。
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例42)和异构体2(实例43)
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例44)和异构体2(实例45)
在N2气氛下向外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(180mg，0.4mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加NaBH4(31mg，0.8mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应混合物用水(1mL)淬灭并且然后在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-50％MeCN洗脱)纯化，以得到作为橙色固体的外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，2S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离固体：制备型手性HPLC(IA 5μm 20mm×250mm；与MeOH中的80％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；17mL/min)，以得到全部作为黄色固体的作为第一洗脱异构体的rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(8mg，4％，98.9％ee)、作为第二洗脱异构体的rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(7mg，4％，98.4％ee)、作为第三洗脱异构体的rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(40mg，22％，99.6％ee)和作为第四洗脱异构体的rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(30mg，17％，99.5％ee)。
rel-(1S，2S，4R)-异构体1：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.48-8.61(m，3H)，7.53(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.55(d，1H)，4.16-4.27(m，1H)，4.10(td，1H)，3.96(br.s，1H)，2.24-2.47(m，2H)，1.77-1.90(m，2H)，1.50-1.77(m，2H)，1.28-1.42(m，1H)，0.93-1.15(m，4H)，0.55(d，3H)。MS ESI，m/z＝447[M+H]+。
rel-(1S，2S，4R)-异构体2：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(d，1H)，8.75(s，1H)，8.48-8.64(m，3H)，7.53(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.55(d，1H)，4.22(br.s，1H)，4.01-4.15(m，1H)，3.96(br.s，1H)，2.22-2.46(m，2H)，1.77-1.92(m，2H)，1.50-1.77(m，2H)，1.27-1.45(m，1H)，0.92-1.15(m，4H)，0.55(d，3H)。MS ESI，m/z＝447[M+H]+。
rel-(1S，2S，4S)-异构体1：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.30(s，1H)，9.06(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.48-8.65(m，3H)，7.51(s，1H)，7.04(dd，1H)，4.71(d，1H)，4.15-4.25(m，1H)，4.02-4.15(m，1H)，3.54-3.69(m，1H)，)，1.87-2.30(m，5H)，1.29-1.50(m，1H)，1.11-1.29(m，1H)，0.92-1.11(m，4H)，0.58(d，3H)。MS ESI，m/z＝447[M+H]+。
rel-(1S，2S，4S)-异构体2：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.30(s，1H)，9.02-9.11(m，1H)，8.75(s，1H)，8.48-8.65(m，3H)，7.51(s，1H)，7.10-7.00(m，1H)，4.71(d，1H)，4.15-4.25(m，1H)，4.02-4.15(m，1H)，3.54-3.69(m，1H)，1.87-2.30(m，5H)，1.27-1.50(m，1H)，1.11-1.27(m，1H)，0.92-1.11(m，4H)，0.58(d，3H)。MS ESI，m/z＝447[M+H]+。
6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例46)和异构体2(实例47)
8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-醇
在0℃下在N2气氛下向8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-酮(3.0g，15.3mmol)在MeOH(50mL)中的溶液中添加NaBH4(867mg，22.9mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应溶液通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-醇(3.0g，99％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ4.80-4.90(m，1H)，3.98-4.11(m，1H)，3.83(s，4H)，2.02-2.15(m，2H)，1.40-1.55(m，10H)。
8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-基4.硝基苯甲酸酯
在0℃下将4-硝基苯甲酰氯(3.7g，19.7mmol)添加到TEA(5.3mL，37.8mmol)和8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-醇(3.0g，15.1mmol)在DCM(50mL)中的溶液中。将所得的溶液在rt下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩，并且通过硅胶色谱法(用在PE中的20％-50％EtOAc洗脱)，以得到粗8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(6.0g，75wt.％)。MS ESI，m/z＝348[M+H]+。
7-氧代螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯
向粗8，11-二氧杂二螺[3.2.47.24]十三烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(75Wt.％)(6.0g)在THF(40mL)中的溶液中添加2N HCl(40.0mL，80.0mmol)，并且将反应混合物在rt下搅拌2h。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，用水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并且然后在减压下浓缩以得到7-氧代螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(3.5g，50％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.36(d，2H)，8.22(d，2H)，5.15-5.36(m，1H)，2.52-2.61(m，2H)，2.17-2.43(m，4H)，2.04-2.17(m，2H)，1.82-2.00(m，4H)。
7-羟基螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯
在rt下在N2气氛下向7-氧代螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(3.4g，11.2mmol)在MeOH(60mL)中的溶液中添加NaBH4(848mg，22.4mmol)。将所得的溶液搅拌2h。将反应混合物用EtOAc(250mL)稀释，并且用水(75mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到作为无色固体的7-羟基螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(2.0g，58％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.34(d，1H)，8.18(d，1H)，5.18(p，1H)，4.42(d，1H)，3.34-3.50(m，2H)，2.19-2.46(m，2H)，1.89(td，2H)，1.50-1.78(m，4H)，1.06-1.50(m，4H)。
7-(甲苯磺酰基氧基)螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯
将TsCl(2.8g，14.7mmol)缓慢添加到7-羟基螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(1.8g，5.9mmol)、DMAP(72mg，0.6mmol)和TEA(2.5mL，17.7mmol)在DCM(50mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌2h，然后用DCM(100mL)稀释，并且用0.1N HCl(75mL)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-30％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的7-(甲苯磺酰基氧基)螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(1.20g，44％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.34(d，2H)，8.14(d，2H)，7.80(d，2H)，7.47(d，2H)，5.16(p，1H)，4.41-4.59(m，1H)，2.43(s，3H)，2.24-2.42(m，2H)，1.83-1.95(m，2H)，1.60-1.71(m，4H)，1.38-1.60(m，4H)。
6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例46)、异构体2(实例47)
在rt下向7-(甲苯磺酰基氧基)螺[3.5]壬烷-2-基4-硝基苯甲酸酯(1.2g，2.6mmol)和6-环并氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-1H-吲唑-5-甲酰胺(Int II-3)(350mg，1.1mmol)在DMF(20mL)中的溶液中添加Cs2CO3(1.0g，3.1mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌12h。在此之后，将反应混合物冷却至rt，接着添加Cs2CO3(314mg，1.0mmol)和MeOH(20mL)。将所得的混合物再搅拌3h。将反应混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺，其含有某一N1-区域异构体。将6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(70mg)通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH OBD C18 5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中30％-40％MeCN(10mM NH4HCO3和0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，并且然后通过手性制备型HPLC(IF，20×250mm，5μm；与MTBE/MeOH(0.1％2N NH3-MeOH)，80/20等度；流速：14mL/min)，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(12mg，9％，100％ee)和6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(9mg，7％，99％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.32(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.76(s，1H)，8.50-8.60(m，3H)，7.53(s，1H)，7.06(dd，1H)，4.92(d，1H)，4.33-4.52(m，1H)，4.18-4.27(m，1H)，4.06-4.18(m，1H)，2.24-2.39(m，1H)，1.82-2.15(m，5H)，1.42-1.82(m，6H)，1.02-1.10(m，2H)，0.93-1.02(m，2H)。MS ESI，m/z＝473[M+H]+。
2-(4-羟基-4-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例48)和异构体2(实例49)
5-溴-6-甲氧基-2-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑
在rt下在N2气氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(IntI-1)(3.3g，12.7mmol)在i-PrOH(30mL)中的溶液中添加1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-胺(2.0g，12.7mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌1h，然后冷却至rt并且接着添加三正丁基膦(12.9g，63.6mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌13h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的10％-100％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的粗5-溴-6-甲氧基-2-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(8.2g，41wt.％)，其不经进一步纯化即可在下一步骤中使用。MS ESI，m/z＝367/369[M+H]+。
4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮
在rt下向粗5-溴-6-甲氧基-2-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(41wt.％)(8.2g)在THF(50mL)中的溶液中添加在水中的4NHCl(22.9mL，91.6mmol)，并且将所得的溶液在rt下在N2气氛下搅拌12h。将混合物用2N NaOH中和，并且用EtOAc(150mL×3)萃取。将合并的有机层在减压下浓缩。将残余物从PE/EtOAc(3/1，100mL)中结晶，以得到作为淡黄色固体的4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮(3.0g，100％)。MS ESI，m/z＝323/325[M+H]+。
4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇
在-20℃下在N2气氛下向4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮(700mg，2.2mmol)在THF(120mL)中的溶液中缓慢添加在THF中的3N甲基溴化镁(4.3mL，13.0mmol)。将所得的混合物在-20℃下搅拌2h。将反应用饱和NH4Cl水溶液(5mL)淬灭并且然后在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为棕色固体的4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇(730mg，99％)。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。
2-(4-羟基-4-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇(730mg，2.2mmol)、Pd(dppf)Cl2(157mg，0.2mmol)和DIPEA(2.3ml，12.9mmol)在MeOH(25mL)中的混合物在CO气氛下在15atm下并在110℃下搅拌24h。将反应混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为棕色油状物的2-(4-羟基-4-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(635mg，93％)。MSESI，m/z＝319[M+H]+。
2-(4-羟基-4-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸
在N2气氛下向2-(4-羟基-4-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(635mg，2.0mmol)在MeOH(20mL)中的悬浮液中添加LiOH(155mg，6.5mmol)在水(20mL)中的溶液。将所得的混合物在rt下搅拌17h。将反应混合物用1N HCl中和，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为棕色胶状物的2-(4-羟基-4-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(600mg，99％)。MS ESI，m/z＝305[M+H]+。
2-(4-羟基-4-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例48)和异构体2(实例49)
在rt下在N2气氛下向2-(4-羟基-4-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(100mg，0.3mmol)和HATU(150mg，0.4mmol)在DMF(20mL)中的溶液中添加DIPEA(230μL，1.3mmol)，接着添加咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(53mg，0.4mmol)。将反应混合物在rt下搅拌19h。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)直接纯化，并且通过手性制备型HPLC(ID，5μm 20mm×250mm；在12min内与DCM/MeOH(1：1)中的20％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；20.0mL/min)纯化，以得到均作为黄色固体的2-(4-羟基-4-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(11mg，8％，100％ee)和2-(4-羟基-4-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(7mg，5％，99.9％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.61-8.67(m，1H)，8.58(s，2H)，8.14(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.25(s，1H)，7.21(dd，1H)，4.34-4.48(m，1H)，4.27(s，1H)，4.12(s，3H)，2.18-2.35(m，2H)，1.82-1.94(m，2H)，1.62-1.76(m，2H)，1.44-1.6(m，2H)，1.17(s，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.04(s，1H)，8.60-8.68(m，2H)，8.57(s，1H)，8.14(d，1H)，8.05(s，1H)，7.27(s，1H)，7.21(ddd，1H)，4.44-4.56(m，2H)，4.11(s，3H)，1.98-2.12(m，4H)，1.53-1.73(m，4H)，1.23(s，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
rel-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例50)和异构体2(实例51)
外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例52)和异构体2(实例53)
3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮
在rt下向5-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(5.0g，22.0mmol)和环己-2-烯-1-酮(16.9g，176.2mmol)在1，4-二噁烷(1L)中的溶液中添加K2CP3(9.13g，66.06mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。使混合物冷却至rt，用水(1L)淬灭并且用EtOAc(500mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩为黄色油状物。将油状物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-60％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮(1.6g，22％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝323/324。
3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇
在-40℃下在N2气氛下在10min时间段内向3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮(2.0g，6.2mmol)在THF(30mL)中的溶液中逐滴添加在THF中的1M甲基溴化镁(24.8mL，24.8mmol)。将所得的混合物在-40℃下搅拌12h。将反应用水(10mL)淬灭并且用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-60％MeCN(0.5％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇(2.0g，95％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝339/341。
外消旋-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯和外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
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将3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇(2.0g，5.9mmol)、DIPEA(5.1mL，29.5mmol)和Pd(dppf)Cl2(648mg，0.9mmol)在MeOH(30mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在110℃下搅拌12h。使反应混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的30％-60％EtOAc洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(WatersXSelect CSH C18 OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在10min内在水中20％-45％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)纯化，以得到均作为黄色固体的外消旋-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(550mg，29％)和外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(800mg，43％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝319。
外消旋-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸
在rt下向外消旋-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(500mg，1.6mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中添加LiOH(113mg，4.7mmol)在水(2mL)中的溶液。将所得的溶液在rt下搅拌12h。将反应混合物用0.1N HCl酸化至pH 4-5，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的40％-60％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的外消旋-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(400mg，84％)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝305。
rel-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例50)和异构体2(实例51)
向外消旋-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(200mg，0.7mmol)、HATU(300mg，0.8mmol)和DIPEA(574μL，3.3mmol)在DMF(3mL)中的溶液中添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(Int I-5)(141mg，1.1mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌6h。将反应混合物用水(5mL)淬灭，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的10％至60％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，接着通过制备型手性HPLC(Chiralpak IA，2×25cm，5μm；流动相A：Hex/DCM(2：1，0.5％2N NH3-MeOH)，流动相B：MeOH；流速：20mL/min；梯度：在12min内50％B)，以得到rel-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(44mg，16％，100％ee)和rel-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体2(42mg，15％，98.4％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.52-8.58(m，2H)，8.47(s，1H)，7.21(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.68(s，1H)，4.51-4.61(m，1H)，4.06(s，3H)，1.93-2.12(m，3H)，1.72-1.87(m，2H)，1.58-1.67(m，1H)，1.38-1.55(m，2H)，1.24(s，3H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝421。
外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸
在rt下在N2气氛下向外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(800mg，2.5mmol)在MeOH(6mL)中的溶液中添加LiOH(181mg，7.5mmol)在水(6mL)中的溶液。将所得的溶液在rt下搅拌12h。将反应混合物用0.1N HCl酸化至pH4-5，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的30％-60％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(600mg，78％)。MS ESI，m/z＝305[M+H]+。
外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例52)和异构体2(实例53)
将外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酸(200mg，0.7mmol)、HATU(300mg，0.8mmol)和DIPEA(574μL，3.3mmol)在THF(15mL)中的溶液在N2气氛下搅拌1h，接着添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(Int I-5)(132mg，1.0mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌4h。将反应用水(5mL)淬灭，并且将形成的沉淀物通过过滤收集，以得到作为黄色固体的外消旋-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离固体：制备型手性HPLC(ID-2，5μm20mm×250mm；在25min内与MeOH中的50％MTBE(0.5％2NNH3-MeOH溶液)等度；17mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(40mg，19％，99.8％ee)和rel-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(48mg，23％，99.8％ee)。异构体1：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.51-8.59(m，2H)，8.46(d，1H)，7.20(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.64-4.83(m，1H)，4.41(s，1H)，4.05(s，3H)，1.87-2.13(m，3H)，1.71-1.87(m，2H)，1.55-1.71(m，2H)，1.27-1.43(m，1H)，1.20(s，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.52-8.57(m，2H)，8.46(d，1H)，7.20(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.68-4.79(m，1H)，4.41(s，1H)，4.06(s，3H)，2.04-2.12(m，1H)，1.98-2.04(m，1H)，1.92(t，1H)，1.70-1.87(m，2H)，1.55-1.69(m，2H)，1.29-1.40(m，1H)，1.20(s，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5ΩΩa]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例54)和异构体2(实例55)
3-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮
在rt下向6-环丙氧基-5-碘-1H-吲唑(IntI-3)(3.0g，10.0mmol)和环己-2-烯-1-酮(7.7g，80.0mmol)在1，4-二噁烷(500mL)中的溶液中添加K2CO3(4.1g，30.0mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt，用水(100mL)淬灭并用EtOAc(300mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为无色固体的3-(5-碘-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮(980mg，25％)。MS ESI，m/z＝397[M+H]+。
3-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇
在rt下在N2气氛下向3-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-酮(800mg，2.0mmol)在THF(10mL)中的溶液中逐滴添加在THF中的1M甲基溴化镁(8.1mL，8.1mmol)。将所得的混合物在-40℃下搅拌5h。将反应用水(20mL)淬灭并且用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的30％-60％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的粗3-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇(720mg)，其不经进一步纯化即可直接使用。MSESI，m/z＝413[M+H]+。
外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将粗3-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)-1-甲基环己烷-1-醇(720mg)、DIPEA(1.5mL，8.7mmol)和Pd(dppf)Cl2(128mg，0.2mmol)在MeOH(100mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在110℃下搅拌12h。使混合物冷却至rt并过滤。将滤液通过C18快速色谱法(用在PE中的0％-60％MeCN洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(WatersShieldRP1 8OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中30％-40％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)进一步纯化，以得到外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(240mg，40％)。MS ESI，m/z＝345[M+H]+。
外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸
向外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(180mg，0.5mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中添加LiOH(38mg，1.6mmol)在水(2mL)中的溶液。将所得的混合物在rt下搅拌12h。将混合物用0.1N HCl酸化至pH 4-5。将混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-60％MeCN(0.5％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为无色固体的外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(160mg，93％)。MS ESI，m/z＝331[M+H]+。
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例54)和异构体2(实例55)
在N2气氛下向外消旋-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(100mg，0.3mmol)、HATU(115mg，0.3mmol)和DIPEA(53μL，0.3mmol)在THF(10mL)中的溶液中添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(IntI-5)(41mg，0.3mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌2h。将反应用水(1mL)淬灭。将混合物通过制备型手性HPLC(IA，5μm 20mm×250mm；与MeOH中的50％MTBE(0.5％2N NH3-MeOH)等度；50mL/min)直接纯化，以得到均作为黄色固体的rel-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(42mg，42％，100％ee)和rel-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(46mg，46％，100％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.31(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.58(s，1H)，8.55(dd，1H)，5.53(s，1H)，7.51(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.50-4.64(m，1H)，4.19-4.25(m，1H)，1.94-2.11(m，3H)，1.72-1.86(m，2H)，1.63(br.d，1H)，1.37-1.56(m，2H)，1.25(s，3H)，1.01-1.11(m，2H)，0.93-1.03(m，2H)。MS ESI，m/z＝447[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例56)
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将(1s，4s)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇(Int IV-1)(110mg，0.3mmol)、TEA(115μL，0.8mmol)和Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(226mg，0.3mmol)在MeOH(20mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌14h。将混合物冷却至rt，浓缩并通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeOH(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(67mg，73％)。MS ESI，m/z＝331[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸
向NaOH(35mg，0.9mmol)在MeOH(1mL)和水(0.5mL)中的溶液中添加6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(57mg，0.2mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌4h。将反应混合物用0.1N HCl酸化至pH约6并且然后在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的粗6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(64mg，86wt.％)。MS ESI，m/z＝317[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例56)
向粗6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(86wt.％)(54mg)、DIPEA(119μL，0.7mmol)、HOBt(5mg，0.03mmol)和HATU(97mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(IntI-5)(46mg，0.34mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌4h。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，并且用水(25mL)洗涤。将有机层在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH C18 OBD 5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中27％-34％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(20mg，27％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.32(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.75(s，1H)，8.58(s，1H)，8.49-8.58(m，2H)，7.51(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.52(d，1H)，4.42-4.51(m，1H)，4.18-4.27(m，1H)，3.85-3.94(m，1H)，2.24-2.39(m，2H)，1.82-1.92(m，2H)，1.72-1.82(m，2H)，1.58-1.72(m，2H)，1.03-1.13(m，2H)，0.94-1.03(m，2H)。MS ESI，m/z＝433[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例57)
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将(1r，4r)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇(Int IV-2)(110mg，0.3mmol)、TEA(115μL，0.8mmol)和Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(45mg，0.1mmol)在MeOH(10mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌13h。将反应混合物冷却至rt并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeOH(0.1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(80mg，88％)。MS ESI，m/z＝331[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸
向6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(70mg，0.2mmol)在MeOH(1mL)中的溶液中添加NaOH(34mg，0.9mmol)在水(1mL)中的溶液。将所得的溶液在rt下搅拌14h。将反应混合物用2N HCl调节至pH 5-6并且然后在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(45mg，67％)。MS ESI，m/z＝317[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例57)
向6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(40mg，0.1mmol)、吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺的TFA盐(62mg，0.3mmol)、HOBt(4mg，0.03mmol)和HATU(72mg，0.2mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加DIPEA(66μL，0.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，并且用水(50mL)洗涤。将有机层在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH C18 OBD 5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中24％-32％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(12mg，22％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.30(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.74(s，1H)，8.55(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.53(s，1H)，7.50(s，1H)，7.04(dd，1H)，4.72(d，1H)，4.41-4.55(m，1H)，4.15-4.25(m，1H)，3.48-3.63(m，1H)，2.04-2.16(m，2H)，1.89-2.04(m，4H)，1.30-1.51(m，2H)，0.93-1.10(m，4H)。MS ESI，m/z＝433[M+H]+。
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例58)
(R)-1-(((1r，4R)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯
在rt下在N2气氛下向6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-4)的HCl盐(300mg，0.7mmol)和TEA(200mg，2.0mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加(R)-1-氯-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(149mg，1.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将反应混合物用MeOH(2mL)淬灭并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的(R)-1-(((1r，4R)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(320mg，91％)。MS ESI，m/z＝534[M+H]+。
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例58)
在rt下在N2气氛下向(R)-1-(((1r，4R)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(300mg，0.6mmol)在MeOH(10mL)/水(5mL)中的溶液中添加NaOH(68mg，1.7mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌12h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(WatersBEHOBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在8min内在水中12％-42％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)直接纯化，以得到作为黄色固体的2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(265mg，96％，100％ee)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(5：6旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.53-8.59(m，2H)，8.48/8.47(s，1H)(旋转异构体)，7.22/7.20(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，4.93/4.74(d，1H)(旋转异构体)，4.34-4.58/3.93-4.02(m，3H)(旋转异构体)，4.06(s，3H)，2.91/2.77(s，3H)(旋转异构体)，1.62-2.27(m，8H)，1.22/1.18(d，3H)(旋转异构体)。MS ESI，m/z＝492[M+H]+。
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例59)
(S)-1-(((1r，4S)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯
在rt下在N2气氛下向6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-4)的HCl盐(130mg，0.3mmol)和TEA(87mg，0.9mmol)在DCM(8mL)中的溶液中添加(S)-1-氯-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(64mg，0.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将反应混合物用MeOH(2mL)淬灭，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的(S)-1-(((1r，4S)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(152mg，100％)。MS ESI，m/z＝534[M+H]+。
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例59)
在rt下在N2气氛下向(S)-1-(((1r，4S)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(145mg，0.3mmol)在MeOH(5mL)/水(2.5mL)中的溶液中添加NaOH(22mg，0.5mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌12h。将反应混合物用水(10mL)稀释，并且将形成的沉淀物通过过滤收集。将固体依次用乙腈(2mL)和水(5mL)洗涤，并且然后真空干燥以得到作为黄色固体的2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(118mg，88％，100％ee)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1∶1旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.52-8.59(m，2H)，8.48/8.47(s，1H)(旋转异构体)，7.22/7.20(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，4.93/4.75(d，1H)(旋转异构体)，4.45-4.57/3.93-4.03(m，2H)(旋转异构体)，4.34-4.45(m，1H)，4.06(s，3H)，2.91/2.77(s，3H)(旋转异构体)，1.62-2.28(m，8H)，1.22/1.18(d，3H)(旋转异构体)。MS ESI，m/z＝492[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例60)和异构体2(实例61)
6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例62)和异构体2(实例63)
6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(IntIV-4)(380mg，1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(163mg，0.2mmol)和TEA(695μL，5.0mmol)在MeOH(10mL)中的混合物在CO气氛下在15atm下并在110℃下搅拌20h。将反应混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(350mg，97％)。MS ESI，m/z＝361[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
向6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(340mg，0.9mmol)在THF(5mL)/水(5mL)中的溶液中添加HCl水溶液(12N)(2.0mL，24.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将混合物用饱和NaHCO3水溶液中和，用EtOAc(200mL)稀释并用水(100mL×2)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为无色固体的6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(290mg，97％)。MS ESI，m/z＝317[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酸
向6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(285mg，0.9mmol)在MeOH(5mL)/水(2.5mL)中的悬浮液中添加NaOH(144mg，3.6mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将混合物用2N HCl酸化至pH 5，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为无色胶状物的6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(270mg，99％)。MS ESI，m/z＝303[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
在N2气氛下向6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酸(265mg，0.9mmol)和HATU(367mg，1.0mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加DIPEA(612μL，3.5mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌15min，接着添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(Int I-5)(176mg，1.3mmol)。将反应混合物在rt下搅拌2h，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(230mg，63％)。MS ESI，m/z＝419[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(105mg，0.3mmo.)和甲胺(在MeOH中31wt.％)(126mg，1.3mmol)在DCE(5mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(106mg，0.5mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将混合物在减压下浓缩，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(100mg，92％)。MS ESI，m/z＝434[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例60)和异构体2(实例61)
向6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(95mg，0.2mmol)和TEA(122μL，0.9mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加乙酸酐(45mg，0.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将混合物在减压下浓缩，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离此材料：手性制备型HPLC(IH，5μm 20mm×250mm；在7.5min内与MeOH中的50％MTBE(0.1％2NNH3-MeOH)等度；20.0mL/min)，以得到均作为黄色固体的6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(20mg，19％，99.9％ee)和6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(W-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体2(68mg，65％，100％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(2∶3旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.56/8.53(s，1H)(旋转异构体)，8.54(dd，1H)，8.47/8.46(s，1H)(旋转异构体)，7.24/7.21(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，4.45-4.59/3.8-3.93(m，1H)(旋转异构体)，4.08-4.18(m，1H)，4.06(s，3H)，2.86/2.73(s，3H)(旋转异构体)，1.97-2.38(m，6H)，1.43-1.89(m，4H)，0.53-0.65(m，3H)。MSESI，m/z＝476[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1∶1旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.74(s，1H)，8.66(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.48(s，1H)，7.25(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.63/4.02(br.s，1H)(旋转异构体)，4.38(s，1H)，4.06(s，3H)，2.65-2.93(m，3H)，1.26-2.39(m，10H)，0.94-1.21(m，3H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。
6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将5-溴-6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(IntIV-5)(1.0g，2.6mmol)、Pd(dppf)Cl2(384mg，0.5mmol)和DIPEA(2.3mL，13.1mmol)在MeOH(60mL)中的混合物在CO气氛下在15atm下并在110℃下搅拌15h。将反应混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(860mg，91％)。MS ESI，m/z＝361[M+H]+。
6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸
在N2气氛下向6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(850mg，2.4mmol)在MeOH(6mL)中的悬浮液中添加LiOH(169mg，7.1mmol)在水(6mL)中的溶液。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应混合物用0.1N HCl酸化至pH 6，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的含有32％的6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酸的粗6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸(720mg)。MS ESI，m/z＝347[M+H]+。
6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
在rt下在N2气氛下向粗6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酸(710mg)和DIPEA(1.4mL，8.2mmol)在DMF(10mL)中的溶液中添加HATU(935mg，2.5mmol)，接着添加吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(412mg，3.1mmol)。将反应在rt下搅拌2h。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(640mg，68％)。MS ESI，m/z＝463[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向6-甲氧基-2-((7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(630mg，1.4mmol)在THF(8mL)中的悬浮液中添加2.4NHCl(10.0mL，24.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌12h。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液中和，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为无色固体的6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(570mg，100％)。MS ESI，m/z＝419[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(200mg，0.5mmol)和甲胺(在MeOH中30wt.％)(495mg，4.8mmol)在DCE(6mL)中的溶液中添加三乙酰氧基硼氢化钠(203mg，1.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将混合物在减压下浓缩，并且然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(170mg，82％)。MS ESI，m/z＝434[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例62)和异构体2(实例63)
向6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(160mg，0.4mmol)和TEA(257μL，1.9mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加乙酸酐(94mg，0.9mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将混合物在减压下浓缩，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离固体：手性制备型HPLC(IH，5μm20mm×250mm；在14min内与MeOH中的80％MTBE(0.1％2NNH3-MeOH)等度；20.0mL/min)，以得到均作为黄色固体的6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(17mg，10％，99.4％ee)和6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(59mg，34％，99.9％ee)。异构体1：1H NMIR(400MHz，DMSO-d6)(3：4旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.74(s，1H)，8.56/8.53(s，1H)(旋转异构体)，8.54(dd，1H)，8.47/8.46(s，1H)(旋转异构体)，7.24/7.21(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，4.45-4.56/3.82-3.93(m，1H)(旋转异构体)，4.08-4.18(m，1H)，4.06(s，3H)，2.86/2.73(s，3H)(旋转异构体)，1.94-2.39(m，6H)，1.44-1.87(m，4H)，0.54-0.65(m，3H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(2：3旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.74(s，1H)，8.66(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.48(s，1H)，7.25(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.63/4.02(br.s，1H)(旋转异构体)，4.38(s，1H)，4.06(s，3H)，2.61-2.93(m，3H)，1.25-2.43(m，10H)，0.95-1.17(m，3H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(实例64)和异构体2(实例65)
7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在0℃下在N2气氛下在5min时间段内将NaBH4(388mg，10.3mmol)分批添加到6-甲基-7-氧代-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-4)(1.3g，5.1mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌1h。将反应用水(5mL)淬灭并直接浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的30％至40％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.2g，92％)(顺式/反式1∶2)。
6-甲基-7-(甲基磺酰氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在0℃下在N2气氛下在5min的时间段内将MsCl(1.6g，14.1mmol)逐滴添加到TEA(2.6mL，18.8mmol)和7-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.2g，4.7mmol)(顺式/反式1∶2)在DCM(25mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌12h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并且用DCM(100mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且蒸发溶剂，以得到作为黄色油状物的粗6-甲基-7-(甲基磺酰氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.5g)(主要是反式异构体)。产物不经进一步纯化即可用于下一步骤。
外消旋-(6S，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在rt下将KOH(1.2g，22.0mmol)缓慢添加到粗6-甲基-7-(甲基磺酰氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(1.5g)(主要是反式异构体)和5-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(1.0g，4.4mmol)在DMF(20mL)中的溶液中。将反应混合物在100℃下搅拌过夜。将混合物冷却至rt，用水(5mL)淬灭并且将水层用EtOAc(100mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并且蒸发溶剂。将粗产物通过硅胶色谱法(用在PE中的20％至30％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的粗外消旋-(6S，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(400mg)。m/z(ESI+)[M-tBu]+＝408/410。
外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((6S，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑
在0℃下在N2气氛下将TFA(4mL)逐滴添加到粗外消旋-(6S，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(400mg)在DCM(20mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌2h。在减压下除去溶剂，以得到外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((6S，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑的粗TFA盐(500mg)，其不经进一步纯化即可使用。MS ESI，m/z＝364/366[M+H]+。
外消旋-1-((6S，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)乙酮
在0℃下在N2气氛下将乙酰氯(223μL，3.1mmol)逐滴添加到外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((6S，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑的粗TFA盐(500mg)和TEA(1.5mL，10.5mmol)在DCM(10mL)中的溶液中。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应用水(5mL)淬灭并且将水层用DCM(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的50％-100％MeCN(0.05％HCOOH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-1-((6S，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)乙酮(190mg，45％)。m/z(ESI+)[M+H]+＝406，408。
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(实例64)和异构体2(实例65)
将Pd(OAc)2(9mg，0.04mmol)添加到dppp(41mg，0.1mmol)、TEA(123μL，0.9mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(174mg，1.3mmol)和外消旋-1-((6S，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)乙-1-酮(180mg，0.4mmol)在MeCN(10mL)中的溶液中。将所得的混合物在90℃下在CO气氛下在15atm下搅拌过夜。将粗产物冷却至rt，并且通过C18快速色谱法(用在水中的50％至55％MeCN(0.1％HCOOH)洗脱)直接纯化。然后将获得的材料通过制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内20％B至47％B)纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离固体：手性制备型SFC(CelluCOat柱，250×30mm，5μm，流动相为在120巴和40C下的在CO2中的30％MeOH，并且流速为100mL/min)，以得到rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(37mg，21％，100％ee)和rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(34mg，19％，100％ee)。两种异构体作为胶状物收集。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)(3∶4旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.55-8.61(m，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.30/7.29(s，1H)(旋转异构体)，7.22(dd，1H)，4.65-4.74(m，1H)，4.13(s，3H)，3.83-3.93(m，2H)，3.55-3.65(m，2H)，1.93-2.41(m，5H)，1.77(br.s，3H)，1.67-1.76(m，2H)，0.57/0.56(d，3H)(旋转异构体)。m/z(ESI+)[M+H]+＝488。
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(实例66)和异构体2(实例67)
外消旋-(6R，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
在0℃下在N2气氛下将KOH(1.4g，25.0mmol)添加到外消旋-(6R，7S)-6-甲基-7-((甲磺酰基)氧基)-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(Int III-5)(3.0g，9.0mmol)和5-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(1.9g，8.2mmol)在THF(50mL)中的溶液中。将所得的混合物在80℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至rt，用水(100mL)稀释并用EtOAc(2×75mL)洗涤。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到黄色油状物。将油状物通过C18快速色谱法(用在水中的50％至90％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-(6R，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(0.5g，13％)。m/z(ESI+)[M+H]+＝464/466。
外消旋-(6R，7R)-7-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯
将咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(255mg，1.9mmol)、dppp(82mg，0.2mmol)、Pd(OAc)2(44mg，0.2mmol)、TEA(588mg，5.8mmol)和外消旋-(6R，7R)-7-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(450mg，1.0mmol)在MeCN(8mL)中的溶液在CO气氛下在15atm下并在90℃下搅拌12h，并且然后使其冷却至rt。在减压下除去溶剂，并且将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的40％至90％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的粗外消旋-(6R，7R)-7-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(450mg)。m/z(ESI+)[M+H]+＝546。
外消旋-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((6R，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺
向粗外消旋-(6R，7R)-7-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-2-甲酸叔丁酯(450mg)中添加在DCM(4mL)中的TFA(2mL，26.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。在减压下除去溶剂，以得到作为黄色油状物的外消旋-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((6R，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗TFA盐(350mg)。产物不经进一步纯化即可使用。m/z(ESI+)[M+H]+＝446。
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(实例66)和异构体2(实例67)
在rt下将外消旋-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((6R，7R)-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的粗TFA盐(350mg)添加到在DCM(8mL)中的TEA(195mg，1.9mmol)中。将混合物在rt下搅拌5min，并且添加乙酸酐(99mg，1.0mmol)。将反应混合物在rt下搅拌1h。将混合物用水(5mL)淬灭并且通过C18快速色谱法(用在水中的20％至100％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离异构体：手性制备型HPLC(CHIRALPAK IF，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(2mM NH3-MeOH)，流动相B：MeOH；流速：17mL/min；在18min内等度50％B)，以得到rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(95mg，30％，100％ee)和异构体2，其在通过制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18柱，30×150mm，5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)，流动相B：MeCN；流速：60mL/min；梯度：在7min内20％B至40％B)进行第二次纯化之后产生rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(66mg，21％，99％ee)。两种异构体作为黄色固体收集。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1：1旋转异构体混合物)δ11.04(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(s，1H)，8.580/8.577(s，1H)(旋转异构体)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.29(d，1H)，7.22(dd，1H)，4.12(s，3H)，4.06-4.17(m，1H)，3.93-4.01/3.65-3.73(m，2H)(旋转异构体)，3.80/3.53(s，2H)(旋转异构体)，2.06-2.19(m，1H)，1.90-2.05(m，4H)，1.80/1.77(s，3H)(旋转异构体)，1.60-1.73(m，1H)，1.38-1.49(m，1H)，0.60/0.58(d，3H)(旋转异构体)。m/z(ESI+)[M+H]+＝488。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1∶1旋转异构体混合物)δ11.04(s，1H)，8.63(d，1H)，8.55-8.61(m，2H)，8.15(d，1H)，8.05(s，1H)，7.28(d，1H)，7.22(dd，1H)，4.12(s，3H)，4.05-4.17(m，1H)，3.92-4.00/3.65-3.72(m，2H)(旋转异构体)，3.79/3.52(s，2H)(旋转异构体)，2.05-2.20(m，1H)，1.89-2.05(m，4H)，1.79/1.76(s，3H)(旋转异构体)，1.61-1.72(m，1H)，1.42(t，1H)，0.59/0.57(s，3H)(旋转异构体)。m/z(ESI+)[M+H]+＝488。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例68)
将甲基二苯基硅烷羧酸(95mg，0.4mmol)和KF(23mg，0.4mmol)添加到干燥且N2冲洗的COware气体反应器的室A中。将在脱气的无水MeCN(1mL)中的(5s，8s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(IntIV-6)(35mg，0.3mmol)、dppp(14mg，0.03mmol)、Pd(OAc)2(7mg，0.03mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(80mg，0.6mmol)和DIPEA(138μL，0.8mmol)添加到室B中。然后，将DMSO(350μL)添加到室A中并且将室B在85℃下搅拌过夜。使反应混合物冷却至rt。将室B中的反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，在减压下浓缩，溶解在DCM(30mL)中并加载在5gSCX2交换筒上。将筒用DCM/MeOH(1∶1；100mL)洗涤，然后用DCM/4N NH3-MeOH溶液(1∶1；100mL)洗脱，并且然后用2N NH3-MeOH溶液(100mL)洗脱，以得到深黄色固体。将固体通过硅胶色谱法(用在DCM中的0％-2.5％2N NH3-MeOH溶液洗脱)纯化以得到黄色固体。将固体在rt下悬浮在MeCN(2mL)中并搅拌48h。然后将悬浮液过滤并用冰冷的MeCN(500μL×2)洗涤，以得到作为淡黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(36mg，58％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.25(s，1H)，8.83(d，1H)，8.35-8.44(m，2H)，8.10(d，1H)，7.99(d，1H)，7.19(s，1H)，7.02(dd，1H)，4.36-4.46(m，1H)，4.19(s，3H)，3.38(s，2H)，2.89(s，3H)，2.33(s，2H)，2.20-2.28(m，2H)，2.06-2.17(m，2H)，1.97(d，2H)，1.68(td，2H)。MS ESI，m/z＝474[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例69)
将甲基二苯基硅烷羧酸(88mg，0.4mmol)和KF(21mg，0.4mmol)添加到干燥且N2冲洗的COware气体反应器的室A中。将在脱气的无水MeCN(1mL)中的(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(IntIV-7)(49mg，0.1mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(27mg，0.2mmol)、dppp(13mg，0.03mmol)、Pd(OAc)2(7mg，0.03mmol)和DIPEA(127μL，0.7mmol)添加到室B中。然后，将DMSO(200μL)添加到室A中并且将室B在85℃下搅拌过夜。使反应混合物冷却至rt。将室B中的反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，在减压下浓缩，溶解在DCM(30mL)中并加载在5gSCX2交换筒上。将加载的SCX2筒用DCM/MeOH(1∶1∶100mL)洗涤，然后用DCM/4N NH3-MeOH溶液(1∶1∶100mL)洗脱，并且然后用2N NH3-MeOH溶液(100mL)洗脱，以得到深黄色固体。将固体通过硅胶色谱法(用在DCM中的0％-2.5％2NNH3-MeOH溶液洗脱)纯化以得到黄色固体，将其在rt下悬浮在MeCN(3mL)中并搅拌48h。将悬浮液过滤并用冰冷的MeCN(500μL×2)洗涤以得到固体。将固体溶解在15mL煮沸的MeCN中，并且在减压下在45℃下缓慢浓缩至5mL以得到悬浮液，将其保持在rt下过夜。将悬浮液过滤并且将残余物用冰冷的MeCN(500μL×2)洗涤，以得到作为淡黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(46mg，90％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.28(s，1H)，8.8-8.84(m，1H)，8.47(dd，1H)，8.40(s，1H)，8.16(d，1H)，8.10(d，1H)，7.18(s，1H)，7.12(dd，1H)，4.40(tt，1H)，4.19(s，3H)，3.20(s，2H)，2.87(t，3H)，2.44(s，2H)，2.22-2.30(m，2H)，2.04-2.15(m，2H)，1.91-1.98(m，2H)，1.65(td，2H)。MS ESI，m/z＝474[M+H]+。
rel-2-((5R，7R，8R)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺或rel-2-((5R，7S，8S)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例70)、异构体2(实例71)、异构体3(实例72)和异构体4(实例73)
7-甲基-8-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯
在-78℃下在N2气氛下在20min时间段内向8-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(15.0g，59.2mmol)在THF(150mL)中的溶液中逐滴添加在THF中的1M LiHMDS(118.5mL，118.5mmol)。将所得的混合物在-78℃下搅拌2h。随后，缓慢添加碘甲烷(7.4mL，118.5mmol)。使反应混合物升温至rt并搅拌15h。将反应用饱和NH4Cl水溶液(300mL)淬灭并用EtOAc(250mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的5％-20％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色半固体的7-甲基-8-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(6.6g，42％)。MS ESI，m/z＝212[M-tBu]+。
外消旋-(5R，7R，8S)-7，8-二羟基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8R)-7，8-二羟基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物
在0℃下在N2气氛下在1min时间段内向7-甲基-8-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯(5.0g，18.7mmol)在THF(70mL)中的溶液中添加在THF中的2M三仲丁基硼氢化锂(18.7mL，37.4mmol)。将所得的混合物在0℃下搅拌3h。将反应混合物用丙酮(20mL)淬灭并且然后在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的25％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为淡黄色油状物的外消旋-(5R，7R，8S)-7，8-二羟基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8R)-7，8-二羟基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(4.8g，95％)。MS ESI，m/z＝214[M-tBu]+。
外消旋-(5R，7R，8R)-8-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物
在0℃下在N2气氛下向外消旋-(5R，7R，8S)-7，8-二羟基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8R)-7，8-二羟基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(3.4g，12.6mmol)、三苯基膦(6.6g，25.2mmol)和异吲哚啉-1，3-二酮(2.8g，18.9mmol)在THF(60mL)中的溶液中添加DIAD(4.9mL，25.2mmol)。将所得的混合物在45℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt，倒入盐水(200mL)中并用EtOAc(250mL)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用DCM洗脱)纯化，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)进一步纯化，以得到作为淡黄色固体的外消旋-(5R，7R，8R)-8-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(1.9g，37％)。MS ESI，m/z＝384[M-tBu+CH3CN]+。
外消旋-(5R，7R，8R)-8-氨基-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-氨基-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物
向外消旋-(5R，7R，8R)-8-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(1.9g，4.6mmol)在EtOH(30mL)中的溶液中添加水合肼(80％在水中)(2.9g，46.4mmol)。将所得的混合物在50℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用DCM洗脱)纯化，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)进一步纯化以得到标题化合物的甲酸盐。将甲酸盐溶解在水(50mL)中，用饱和NaHCO3水溶液碱化至pH 9并且然后用EtOAc(100mL×2)和氯仿(100mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到作为淡黄色油状物的外消旋-(5R，7R，8R)-8-氨基-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-氨基-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(380mg，31％)。MS ESI，m/z＝269[M+H]+。
外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物
向外消旋-(5R，7R，8R)-8-氨基-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-氨基-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(360mg，1.3mmol)在i-PrOH(15mL)中的溶液中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(Int I-1)(384mg，1.5mmol)。将所得的混合物在50℃下搅拌2h，然后冷却至30℃，接着添加三正丁基膦(814mg，4.0mmol)。将反应混合物在80℃下在N2气氛下搅拌过夜。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为淡黄色固体的外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(440mg，69％)。MS ESI，m/z＝478/480[M+H]+。
外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷的混合物
向外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸叔丁酯的混合物(410mg，0.9mmol)在二噁烷(4mL)中的溶液中添加在二噁烷中的4NHCl(2.0mL，8.0mmol)，并且将所得的溶液在rt下搅拌20h。将反应混合物在减压下浓缩，以得到外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷的HCl盐的粗混合物(354mg)，其不经进一步纯化即可直接使用。MSESI，m/z＝378/380[M+H]+。
外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷的混合物
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在rt下在N2气氛下向外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-7-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷的HCl盐(354mg，0.9mmol)、乙酸(51mg，0.9mmol)和甲醛水溶液(40Wt.％)(674mg，8.3mmol)在MeOH(10mL)中的粗混合物中添加三乙酰氧基硼氢化钠(362mg，1.7mmol)。将反应混合物在rt下搅拌3h。将混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeOH(2％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到作为淡黄色固体的外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷的混合物(335mg，100％)。MS ESI，m/z＝392/394[M+H]+。
外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮的混合物
向外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷的混合物(310mg，0.8mmol)在THF(25mL)中的溶液中添加碘溶液(1.5g，5.9mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌2h，接着添加在水(10mL)中的碳酸氢钠(664mg，7.9mmol)。然后，将反应混合物在rt下再搅拌2h。将反应用饱和Na2SO3水溶液淬灭，直至颜色变为浅黄色，并且然后用DCM(200mL)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters XSelect CSH氟-苯基OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在12min内在水中32％-42％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)纯化，以得到作为淡黄色固体的含有40％的8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-1-酮的外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮)的混合物(120mg)，其不经进一步分离即可使用。
rel-2-((5R，7R，8R)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺或rel-2-((5R，7S，8S)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例70)、异构体2(实例71)、异构体3(实例72)和异构体4(实例73)
将含有40％的8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-1-酮的外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮和外消旋-(5R，7S，8S)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2，7-二甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮)的混合物(115mg)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(80mg，0.6mmol)、Pd(OAc)2(14mg，0.06mmol)、dppp(41mg，0.1mmol)和DIPEA(183mg，1.4mmol)在MeCN(15mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％乙腈(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到含有40％的2-(2，7-二甲基-1-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺的rel-2-((5R，7R，8R)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺和rel-2-((5R，7S，8S)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1-4的混合物。将所需的产物与副产物分离并且通过三个连续手性制备型HPLC运行(第一运行：IA，5μm 20mm×250mm；与EtOH中的50％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；20.0mL/min；第二和第三运行：/>ID，5μm 20mm×250mm；在16min内与MeOH中的50％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；20.0mL/min)分离，以得到作为淡黄色固体的以下四种异构体：异构体1(7mg，5％)、异构体2(7mg，5％)、异构体3(5mg，3％)和异构体4(5mg，3％)。异构体1和2彼此是对映异构体，针对两种异构体获得的LCMS/1H NMR是相同的；异构体3和异构体4彼此是对映异构体，并且针对两种异构体获得的LCMS/1H NMR是相同的。异构体1/异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.62(d，1H)，8.58(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.31(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.06-4.17(m，4H)，3.14(s，2H)，2.73(s，3H)，2.34(s，2H)，2.04-2.27(m，2H)，1.87-1.98(m，1H)，1.72-1.83(m，2H)，1.54-1.66(m，1H)，1.34(t，1H)，0.57(d，3H)。MS ESI，m/z＝488[M+H]+。异构体3/异构体4：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.62(d，1H)，8.58(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.28(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.07-4.17(m，4H)，3.38(s，2H)，2.76(s，3H)，2.06-2.28(m，4H)，1.86-1.96(m，1H)，1.76-1.86(m，2H)，1.51-1.63(m，1H)，1.33(t，1H)，0.57(d，3H)。MS ESI，m/z＝488[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例74)和异构体2(实例75)
(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲醇
在rt下在N2气氛下向(4-氨基环己基)甲醇(2.0g，15.5mmol)在i-PrOH(20mL)中的溶液中添加5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(Int I-1)(4.0g，15.5mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌1h，然后冷却至rt，接着添加三正丁基膦(15.7g，77.4mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的20％-50％EtOAc洗脱)纯化以产生黄色油状物。将油状物随后从EtOAc(2mL)/PE(12ml)中结晶，以得到作为无色固体的(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲醇(900mg，17％)。将来自结晶的滤液在减压下浓缩，以得到作为固体的(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲醇(5.0g，47wt.％)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。
(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲基氨基甲酸酯
在0℃下向粗(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲醇(47wt.％)(4.9g)在DCM(20mL)中的溶液中添加2，2，2-三氯乙酰基异氰酸酯(1.5g，8.2mmol)。将所得的溶液升温至rt并搅拌2h。随后，添加MeOH和K2CO3(94mg，0.7mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌15h。将反应用水(20mL)淬灭并且用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物从EtOAc/戊烷(3/1)(20mL)中结晶，以得到作为无色固体的(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲基氨基甲酸酯(2.5g，96％)。MS ESI，m/z＝382/384[M+H]+。
8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮
在rt下在N2气氛下在3min时间段内向氧化镁(728mg，18.1mmol)、[乙酰氧基(苯基)-λ3-碘苯]乙酸酯(3.5g，11.0mmol)和(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲基氨基甲酸酯(1.5g，3.9mmol)在DCM(150mL)中的溶液中添加乙酸铑(II)(347mg，0.8mmol)。将所得的溶液在40℃搅拌15h。将混合物冷却至rt，倒入水(100mL)中并用DCM(200mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XSelectCSH C18 OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在8min内在水中34％-35％MeCN(0.05％TFA)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为淡黄色固体的8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(340mg，23％)。MS ESI，m/z＝380/382[M+H]+。
8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮
在rt下在N2气氛下将碘甲烷(134mg，1.0mmol)逐滴添加到NaiH(60wt.％)(19mg，0.5mmol)和8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(120mg，0.3mmol)在DMF(6mL)中的悬浮液中。将所得的混合物在rt下搅拌15h。将反应用饱和NH4Cl水溶液(5mL)淬灭，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为红色固体的8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(70mg，56％)。MS ESI，m/z＝380/382[M+H]+。
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例74)和异构体2(实例75)
将8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(124mg，0.3mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(121mg，0.9mmol)、Pd(OAc)2(14mg，0.06mmol)、dppp(41mg，0.1mmol)和TEA(438μL，3.2mmol)在MeCN(10mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。使混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-90％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(WatersBEH OBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在8min内在水中30％-60％MeOH(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离固体：手性制备型HPLC(/>IF，5μm 20mm×250mm；在26min内与EtOH中的50％MTBE(0.5％2M NH3-MeOH)等度；13.0mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-1-甲基-2-氧代-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(7mg，4％，100％ee)和rel-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-1-甲基-2-氧代-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(1mg，1％，98.9％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.74(s，1H)，8.63(dd，1H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.30(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.65-4.73(m，1H)，4.23(s，2H)，4.13(s，3H)，2.60(s，3H)，2.51-2.58(m，2H)，1.93-2.15(m，4H)，1.53(d，2H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.04(s，1H)，8.62-8.66(m，1H)，8.61(s，1H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.25-7.29(m，1H)，7.22(dd，1H)，4.48-4.61(m，1H)，4.27(s，2H)，4.12(s，3H)，2.72(s，3H)，2.18(s，2H)，1.95-2.09(m，4H)，1.66-1.76(m，2H)。MS ESI，m/z＝476[M+H]+。
rel-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例76)，异构体2(实例77)
rel-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例78)和异构体2(实例79)
外消旋-(3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己烷-1-酮
将HCl水溶液(12N)(10.0mL，120.0mmol)添加到THF(10mL)和水(10mL)中，接着添加外消旋-(7R，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(Int III-11)(3.1g，18.0mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌12h。将反应混合物的pH用30wt.％NH4OH水溶液调节至pH 5-6，然后将混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的外消旋-(3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己烷-1-酮(2.1g，91％)。MS ESI，m/z＝170[M+CH3CN+H]+。
外消旋-(1S，2R，4R)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇的混合物
在rt下在N2气氛下向外消旋-(3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己烷-1-酮(2.0g，15.6mmol)在DCE(40mL)中的溶液中添加苯甲胺(2.0g，18.7mmol)。将所得的溶液搅拌1h，接着添加三乙酰氧基硼氢化钠(9.9g，46.8mmol)。将混合物在rt下再搅拌3h。将反应用水(15mL)淬灭并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为棕色固体的外消旋-(1S，2R，4R)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇的混合物(2.10g，61％)。
外消旋-(1S，2R，4R)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇的混合物
在N2气氛下向外消旋-(1S，2R，4R)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇的混合物(2.0g，9.1mmol)在MeOH(30mL)中的溶液中添加在碳上的Pd(OH)2(20wt.％)(640mg，0.9mmol)。将所得的悬浮液在rt下在氢气下在2atm下搅拌12h。将反应混合物通过硅胶过滤，并且将硅胶饼用MeOH(30mL)洗涤。将合并的MeOH溶液在减压下浓缩，以得到作为黄色油状物的外消旋-(1S，2R，4R)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇的粗混合物(1.20g，90wt.％)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。
外消旋-(1S，2R，4RH-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇的混合物
在rt下在N2气氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(IntI-1)(2.2g，8.4mmol)在i-PrOH(20mL)中的溶液中添加外消旋-(1S，2R，4R)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇的粗混合物(90wt.％)(1.0g)。将所得的混合物在80℃下搅拌2h，然后冷却至rt，接着添加三正丁基膦(5.6g，27.9mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。使混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-50％MeOH(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的外消旋-(1S，2R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇的粗混合物(5.0g，45wt.％)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。
外消旋-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺和外消旋-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺的混合物
将外消旋-(1S，2R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2R，4S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇的粗混合物(45wt.％)(5.0g)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(978mg，7.3mmol)、Pd(OAc)2(291mg，1.3mmol)、dppp(1.1g，2.7mmol)和TEA(2.8mL，19.9mmol)在MeCN(80mL)中的悬浮液在CO气氛下在10atm下并在100℃下搅拌12h。使混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-100％EtOAc洗脱)纯化，并且通过制备型SFC(DAICELP4VP，5μm 20mm×250mm；与在CO2(35℃，100巴)中的35％MeOH(2mM NH3-MeOH)等度)进一步纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺和外消旋-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺的混合物(600mg，22％)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
外消旋-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺和外消旋-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺
将外消旋-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺和外消旋-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺的混合物(600mg，1.4mmol)通过手性制备型SFC(IH，5μm 30×250mm；与在CO2(35℃，100巴)中的32％MeOH(2mMNH3-MeOH)等度；70mL/min)分离，以得到均作为黄色固体的外消旋-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(200mg，33％)和外消旋-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(220mg，37％)。
rel-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例76)和异构体2(实例77)
将外消旋-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(200mg，0.5mmol)进一步分离并且通过手性制备型HPLC(IA，5μm 20mm×250mm；在23min内与EtOH中的50％己烷/DCM(75/25，0.5％2MNH3-MeOH)等度；18.0mL/min)和手性制备型HPLC(对于异构体1：Waters XSelect CSHC18 OBD，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中22％-26％MeCN(0.1％FA)；60mL/min)纯化，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(40mg，20％，100％ee)和rel-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(40mg，20％，100％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.58(br.s，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.25(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.36-4.62(m，2H)，4.12(s，3H)，3.66(s，1H)，2.11-2.27(m，1H)，2.00(q，1H)，1.80-1.93(m，2H)，1.56-1.80(m，3H)，0.96(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
rel-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例78)和异构体2(实例79)
将外消旋-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(200mg，0.5mmol)通过手性制备型HPLC(ID-2，5μm 20mm×250mm；在19min内与MeOH中的50％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；20.0mL/min)进一步分离，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(80mg，40％，98.2％ee)和rel-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(80mg，40％，97.9％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.04(s，1H)，8.63(dd，1H)，8.61(s，1H)，8.57(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.25(s，1H)，7.21(dd，1H)，4.68(tt，1H)，4.60(br.s，1H)，4.11(s，3H)，3.71(dt，1H)，1.92-2.20(m，5H)，1.57-1.76(m，2H)，1.00(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.63(dd，1H)，8.61(br.s，1H)，8.57(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.26(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.63-4.73(m，1H)，4.60(d，1H)，4.12(s，3H)，3.67-3.76(m，1H)，1.92-2.21(m，5H)，1.58-1.75(m，2H)，1.00(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
rel-2-((1S，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例80)和异构体2(实例81)
rel-2-((1R，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(实例82)和异构体2(实例83)
外消旋-(3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己烷-1-酮
将HCl水溶液(12N)(8.0mL，96.0mmol)添加到THF(8mL)和水(8mL)中，接着添加外消旋-(7S，8S)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(Int III-12)(2.0g，11.6mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌12h。将混合物的pH用30Wt.％NH4OH水溶液调节至pH 5-6，然后将混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的外消旋-(3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己烷-1-酮(1.3g，89％)。MSESI，m/z＝211[M+2CH3CN+H]+。
外消旋-(1S，2S，4S)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1S，2S，4R)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇
在rt下在N2气氛下向外消旋-(3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己烷-1-酮(1.3g，10.1mmol)在DCE(50mL)中的溶液中添加苯甲胺(1.3g，12.2mmol)。将所得的溶液搅拌1h，接着添加三乙酰氧基硼氢化钠(6.6g，30.4mmol)。将反应混合物在rt下再搅拌3h。将反应用水(10mL)淬灭并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的30％-60％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到均作为黄色固体的外消旋-(1S，2S，4S)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇(200mg，9％)和外消旋-(1S，2S，4R)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇(700mg，32％)。MS ESI，m/z＝220[M+H]+。
外消旋-(1S，2S，4S)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇
在N2气氛下向外消旋-(1S，2S，4S)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇(180mg，0.8mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加在碳上的Pd(OH)2(20wt.％)(175mg，0.2mmol)。将所得的悬浮液在rt下在氢气下在1～2atm下搅拌12h。将反应混合物通过硅胶过滤，并且将硅胶饼用MeOH(100mL)洗涤。将合并的MeOH溶液在减压下浓缩，以得到作为黄色油状物的外消旋-(1S，2S，4S)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇(100mg，94％)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS ESI，m/z＝130[M+H]+。
外消旋-(1S，2S，4S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇
在rt下在N2气氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(IntI-1)(242mg，0.9mmol)在i-PrOH(20mL)中的溶液中添加外消旋-(1S，2S，4S)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇(100mg，0.8mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌1h，然后冷却至rt，接着添加三正丁基膦(626mg，3.1mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％乙腈(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的外消旋-(1S，2S，4S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(200mg，76％)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。
rel-2-((1S，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例80)和异构体2(实例81)
将外消旋-(1S，2S，4S)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(200mg，0.3mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(40mg，0.3mmol)、Pd(OAc)2(14mg，0.06mmol)、dppp(41mg，0.1mmol)和TEA(164μL，1.2mmol)在MeCN(50mL)中的悬浮液在CO气氛下在10atm下并在100℃下搅拌12h。使混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％乙腈(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到外消旋-2-((1S，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下进一步分离此材料：手性制备型HPLC(IA，5μm20mm×250mm；在11min内与DCM/MeOH(1：1)中的10％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；20.0mL/min)，以得到rel-2-((1S，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(16mg，13％，100％ee)和rel-2-((1S，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(16mg，13％，100％ee)；两者均为黄色固体。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.04(s，1H)，8.63(dd，1H)，8.54-8.59(m，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.24(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.66(d，1H)，4.46-4.59(m，1H)，4.12(s，3H)，3.02-3.14(m，1H)，2.02-2.16(m，2H)，1.96(td，2H)，1.70(q，1H)，1.37-1.58(m，2H)，1.01(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
外消旋-(1S，2S，4R)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇
在N2气氛下向外消旋-(1S，2S，4R)-4-(苄基氨基)-2-甲基环己烷-1-醇(600mg，2.7mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加在碳上的Pd(OH)2(20wt.％)(582mg，0.6mmol)。将所得的悬浮液在rt下在氢气下在1～2atm下搅拌12h。将反应混合物通过硅胶过滤，并且将硅胶饼用MeOH(100mL)洗涤。将合并的MeOH溶液在减压下浓缩，以得到作为黄色油状物的粗外消旋-(1S，2S，4R)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇(400mg)，其不经进一步纯化即可使用。MSESI，m/z＝130[M+H]+。
外消旋-(1S，2S，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇
在rt下在N2气氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(IntI-1)(740mg，2.9mmol)在i-PrOH(30mL)中的溶液中添加外消旋-(1S，2S，4R)-4-氨基-2-甲基环己烷-1-醇(380mg，2.6mmol)。将所得的混合物在80℃下搅拌1h，然后冷却至rt，接着添加三正丁基膦(1.6g，7.8mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％乙腈(0.05％FA)洗脱)纯化，以得到作为棕色油状物的外消旋-(1S，2S，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(600mg，68％)，其不经进一步纯化即可用于下一步骤。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。
rel-2-((1R，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺异构体1(实例82)和异构体2(实例83)
将外消旋-(1S，2S，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(580mg，1.7mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(257mg，1.9mmol)、Pd(OAc)2(67mg，0.3mmol)、dppp(288mg，0.7mmol)和TEA(994μL，7.1mmol)在MeCN(55mL)中的悬浮液在CO气氛下在10atm下并在100℃下搅拌12h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％乙腈(0.05％FA)洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(WatersBEH OBD C18，5μm 19×250mm；洗脱梯度为在11min内在水中22％-32％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；25mL/min)进一步纯化，以得到外消旋-2-((1R，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下进一步纯化此材料：手性制备型HPLC(/>IE，5μm 20mm×250mm；在27min内与DCM/MeOH(1：1)中的50％MTBE(0.1％2NNH3-MeOH)等度；20.0mL/min)和手性制备型HPLC(对于异构体1：Waters/>BEH OBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中18％-48％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1R，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(13mg，1％，98.5％ee)和rel-2-((1R，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(19mg，3％，99.6％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.65(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.28(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.61-4.70(m，1H)，4.55(d，1H)，4.13(s，3H)，2.44-2.49(m，1H)，2.35-2.48(m，1H)，1.84-1.94(m，1H)，1.72-1.82(m，2H)，1.63-1.70(m，1H)，1.47-1.56(m，1H)，1.01(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。异构体2：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.65(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.28(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.59-4.70(m，1H)，4.55(d，1H)，4.13(s，3H)，3.30-3.37(m，1H)，2.45-2.50(m，1H)，2.35-2.48(m，1H)，1.83-1.95(m，1H)，1.71-1.83(m，2H)，1.61-1.71(m，1H)，1.47-1.56(m，1H)，1.01(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例84)
将(1r，4r)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇(Int IV-2)(80mg，0.2mmol)和Pd(OAc)2(5mg，0.02mmol)添加到在MeCN(10mL)中的TEA(61mg，0.6mmol)、dppp(17mg，0.04mmol)和咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(54mg，0.4mmol)，并且将所得的混合物在15atm下在CO气氛下在90℃下搅拌。在12h之后，使反应混合物冷却至rt并且直接经受C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.1％FA)洗脱)，接着进行制备型HPLC(XBridgePrep OBD C18柱，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；流动相B：MeCN；梯度：在10min内25％B至30％B；流速：60mL/min)，以得到作为黄色固体的6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(17mg，20％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 10.91(s，1H)，8.63(dd，1H)，8.60(s，1H)，8.58(s，1H)，8.13(dd，1H)，8.06(s，1H)，7.52(s，1H)，7.19(dd，1H)，4.75(d，1H)，4.38-4.55(m，1H)，4.16-4.28(m，1H)，3.48-3.62(m，1H)，1.84-2.23(m，6H)，1.30-1.53(m，2H)，0.94-1.18(m，4H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝433。
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例85)
向在MeCN(5mL)中的粗(1s，4s)-4-(6-环丙氧基-5-碘-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-醇(IntIV-1)(70mg，0.2mmol)、dppp(7mg，0.02mmol)、TEA(98μL，0.7mmol)和咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(54mg，0.4mmol)中添加Pd(OAc)2(5mg，0.02mmol)中，并且将所得的混合物在15atm下在CO气氛下在90℃下搅拌。在12h之后，使反应混合物冷却至rt并且真空除去溶剂。将所得的残余物使用C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为淡黄色固体的6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(7mg，9％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ 10.94(s，1H)，8.65(dd，1H)，8.63(s，1H)，8.62(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.07(s，1H)，7.55(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.43-4.59(m，2H)，4.20-4.29(m，1H)，3.86-3.93(m，1H)，2.22-2.39(m，2H)，1.72-1.95(m，4H)，1.57-1.72(m，2H)，1.07-1.15(m，2H)，0.97-1.07(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝433。
6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例86)
将甲基二苯基硅烷羧酸(84mg，0.4mmol)和KF(20mg，0.4mmol)添加到干燥且N2冲洗的COware气体反应器的室A中。将在脱气的无水MeCN(1.5mL)中的(5r，8r)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(IntIV-7)(47mg，0.1mmol)、吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(IntI-5)(35mg，0.2mmol)、dppp(12mg，0.03mmol)、Pd(OAc)2(7mg，0.03mmol)和DIPEA(122μL，0.7mmol)添加到室B中。然后，将DMSO(200μL)添加到室A中并且将室B在85℃下搅拌过夜。使反应混合物冷却至rt。将室B中的反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，在减压下浓缩，溶解在DCM(30mL)中并加载在5gSCX2交换筒上。将筒用DCM/MeOH(1：1；100mL)洗涤，然后用4N NH3-MeOH溶液(100mL)洗脱，以得到深棕色固体。将棕色固体通过硅胶色谱法(用在DCM中的0％-2.5％2N NH3-MeOH溶液洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH C18OBD，5μm 19mm×150mm；用在水/MeCN中的10％-31％MeCN(95/5；0.2％26wt.％NH4OH)洗脱，在20min内；流速：19mL/min)进一步纯化以得到黄色固体。将此固体溶解在DCM中并加载在5g/>SCX2交换筒上，并且将加载筒用水(20mL)和MeOH(50mL)洗涤以除去副产物，并且然后用在MeOH/DCM(1：1；100mL)中的20mL 2N NH3溶液洗脱，以得到6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(14mg，25％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.46(s，1H)，8.99(s，1H)，8.79(s，1H)，8.60(dd，1H)，8.40(dd，1H)，8.06(d，1H)，7.16(s，1H)，6.79(dd，1H)，4.39(tt，1H)，4.16(s，3H)，3.20(s，2H)，2.87(s，3H)，2.44(s，2H)，2.22-2.32(m，2H)，2.04-2.15(m，2H)，1.89-1.98(m，2H)，1.61-1.69(m，2H)。MS ESI，m/z＝474[M+H]+。/>
6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例87)
将甲基二苯基硅烷羧酸(95mg，0.4mmol)和KF(23mg，0.4mmol)添加到干燥且N2冲洗的COware气体反应器的室A中。将在脱气的无水MeCN(1mL)中的(5s，8s)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-3-酮(IntIV-6)(52mg，0.13mmol)、吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(IntI-5)(39mg，0.3mmol)、dppp(14mg，0.03mmol)、Pd(OAc)2(7mg，0.03mmol)和DIPEA(138μL，0.8mmol)添加到室B中。然后，将DMSO(350μL)添加到室A中并且将室B在85℃下搅拌过夜。使反应混合物冷却至rt。将室B中的反应用饱和NaHCO3水溶液淬灭，在减压下浓缩，溶解在DCM(30mL)中并加载在5gSCX2交换筒上。将筒用DCM/MeOH(1：1；100mL)洗涤，然后用4N NH3-MeOH溶液(100mL)洗脱，以得到深棕色固体。将固体通过硅胶色谱法(用在DCM中的0％-2.5％2NNH3-MeOH溶液洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(Waters XBridge BEH C18OBD，5μm 19mm×150mm；用在水/MeCN中的5％-35％MeCN(95/5；0.2％26wt.％NH4OH水溶液)洗脱，pH 10，在20min内；流速：19mL/min)进一步纯化，以得到6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(3mg，5％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.45(s，1H)，8.99(s，1H)，8.80(d，1H)，8.61(dd，1H)，8.41(dd，1H)，8.08(d，1H)，7.17(s，1H)，6.80(dd，1H)，4.41(tt，1H)，4.17(s，3H)，3.39(s，2H)，2.88(d，3H)，2.3-2.35(m，2H)，2.2-2.27(m，2H)，2.14(qd，2H)，1.94-1.99(m，2H)，1.67(td，2H)。MS ESI，m/z＝474[M+H]+。
2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例88)和2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例89)
在rt下在N2气氛下向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-2)(180mg，0.4mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加NaBH4(33mg，0.9mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应溶液通过C18快速色谱法(用在水中的0％-60％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为棕色固体的2-((1R，2R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离此材料：制备型手性HPLC(ID 5μm20mm×250mm；在19min内与MeOH中的50％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；40mL/min)，以得到均作为黄色固体的第一洗脱异构体2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(15mg，8％)和第二洗脱异构体2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(105mg，50％)。(1R，2R，4S)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.07(s，1H)，8.65(d，1H)，8.59(s，1H)，8.58(s，1H)，8.16(d，1H)，8.06(s，1H)，7.29(s，1H)，7.23(dd，1H)，4.58(d，1H)，4.13(s，3H)，4.03-4.15(m，1H)，3.93-4.01(m，1H)，2.25-2.46(m，2H)，1.55-1.90(m，4H)，1.29-1.42(m，1H)，0.54(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。(1R，2R，4R)-异构体：1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.58(s，2H)，8.16(dd，1H)，8.06(s，1H)，7.27(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.74(d，1H)，4.12(s，3H)，4.02-4.11(m，1H)，3.54-3.71(m，1H)，2.10-2.26(m，1H)，1.86-2.10(m，4H)，1.28-1.48(m，1H)，1.09-1.26(m，1H)，0.57(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例90)和2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例91)
在rt下在N2气氛下向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S)-2-甲基-4-氧代环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-1)(180mg，0.4mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加NaBH4(33mg，0.9mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h。将反应溶液通过C18快速色谱法(用在水中的0％-70％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为棕色固体的2-((1S，2S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离此材料：制备型手性HPLC(IA 5μm 20mm×250mm；与MeOH中的50％MTBE(0.1％2N NH3-MeOH)等度；20mL/min)，以得到均作为黄色固体的第一洗脱异构体2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(23mg，13％)和第二洗脱异构体2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(120mg，67％)。(1S，2S，4R)-异构体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.06(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.58(s，1H)，8.57(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.28(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.57(d，1H)，4.13(s，3H)，4.02-4.12(m，1H)，3.96(s，1H)，2.30-2.58(m，2H)，1.77-1.89(m，2H)，1.68-1.77(m，1H)，1.55-1.68(m，1H)，1.30-1.40(m，1H)，0.54(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。(1S，2S，4S)-异构体：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.04(s，1H)，8.63(dd，1H)，8.57(s，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.27(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.73(d，1H)，4.12(s，3H)，4.03-4.11(m，1H)，3.54-3.68(m，1H)，2.20-2.30(m，1H)，1.85-2.10(m，4H)，1.29-1.46(m，1H)，1.08-1.25(m，1H)，0.57(d，3H)。MSESI，m/z＝421[M+H]+。
2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例92)和2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例93)
外消旋-(7R，8R)-N-苄基-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-胺
在N2气氛下向7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(3.0g，17.6mmol)和苯甲胺(2.8g，26.4mmol)在甲苯(50mL)中的溶液中添加4-甲基苯磺酸一水合物(335mg，1.8mmol)。将所得的溶液在120℃下搅拌15h。随后，使反应混合物冷却至rt并在减压下浓缩，以得到粗亚胺中间体。在-60℃下在N2气氛下在5min时间段内向亚胺在MeOH(60mL)中的溶液中分批添加NaBH4(0.6g，15.8mmol)。将所得的混合物在-60℃下搅拌1h，然后缓慢升温至rt并搅拌3h。如上所述平行制备五个批次的粗产物溶液并合并，之后进行纯化。将反应混合物在减压下浓缩，溶解在EtOAc(500mL)中并且用盐水(300mL×3)洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4HCO3)洗脱)纯化，以得到作为橙色油状物的外消旋-(7R，8R)-N-苄基-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-胺(8.1g，35％)。MS ESI，m/z＝262[M+H]+。
外消旋-(7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-胺
在N2气氛下向外消旋-(7R，8R)-N-苄基-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-胺(8.1g，31.0mmol)在MeOH(100mL)中的溶液中添加在碳上的Pd(OH)2(20wt.％)(872mg，1.2mmol)。将所得的悬浮液在rt下在氢气下在2atm下搅拌15h。将反应混合物经硅藻土过滤，并且将硅藻土饼用MeOH(150mL)洗涤。将合并的MeOH溶液在减压下浓缩，以得到作为棕色油状物的粗外消旋-(7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-胺(5.0g)，其不经进一步纯化即可使用。
5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑
在rt下在N2气氛下向5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(Int I-1)(10.6g，40.9mmol)在i-PrOH(200mL)中的溶液中添加粗外消旋-(7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-胺(7.0g)。将所得的混合物在80℃下搅拌2h，然后冷却至rt并且接着添加三正丁基膦(41.4g，204.4mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌24h。使混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在DCM中的0％-10％MeOH的洗脱)纯化，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)进一步纯化，以得到作为黄色固体的外消旋-5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑。通过以下纯化此材料：手性制备型SFC(IG，5μm 50×250mm；与在CO2(35℃，100巴)中的50％MeOH(0.1％2N NH3-MeOH)等度)，以得到作为灰色固体的5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(3.0g，19％，100％ee)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.25(d，1H)，7.96(s，1H)，7.12(s，1H)，4.13(td，1H)，3.87-3.99(m，4H)，3.87(s，3H)，2.26-2.43(m，1H)，2.19(td，1H)，1.75-1.96(m，3H)，1.68(td，1H)，1.46(t，1H)，0.52(d，3H)。MS ESI，m/z＝381/383[M+H]+。
(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己烷-1-酮
在rt下在N2气氛下向5-溴-6-甲氧基-2-((7R，8R)-7-甲基-1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑(185mg，0.5mmol)在THF(5mL)中的溶液中添加4N HCl水溶液(5mL，20.0mmol)。将反应混合物在rt下搅拌12h。将反应混合物用NH4OH水溶液中和至pH约7并且然后在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-50％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己烷-1-酮(160mg，98％)。MS ESI，m/z＝337/339[M+H]+。
(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，3-二甲基环己烷-1-醇
在0℃下在N2气氛下在2min的时间段内向(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己烷-1-酮(120mg，0.4mmol)在THF(3mL)中的溶液中添加在THF中的3N甲基溴化镁(178μL，0.5mmol)。将所得的混合物在0℃下搅拌5h。将反应用水(1mL)淬灭并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN洗脱)纯化，以得到作为黄色油状物的(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，3-二甲基环己烷-1-醇(80mg，64％)。MS ESI，m/z＝353/355[M+H]+。
2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例92)和2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例93)
将(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，3-二甲基环己烷-1-醇(80mg，0.2mmol)、咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(92mg，0.7mmol)、Pd(OAc)2(10mg，0.05mmol)、dppp(37mg，0.09mmol)和TEA(158μL，1.1mmol)在MeCN(5mL)中的悬浮液在CO气氛下在15atm下并在90℃下搅拌10h。使混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN洗脱)纯化，以得到作为无色液体的2-((1R，2R)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下分离此材料：制备型HPLC(WatersBEH C18OBD，5μm 30mm×150mm；用在7min内在水中的23％-43％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)洗脱；流速：60mL/min)，以得到均作为淡黄色固体的2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(7mg，7％)和2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(20mg，20％)。(1R，2R，4S)-异构体：1HNMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.04(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.62(s，1H)，8.57(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.30(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.53(s，1H)，4.12(s，3H)，4.02-4.10(m，1H)，2.12-2.25(m，1H)，1.99-2.12(m，1H)，1.85-1.97(m，1H)，1.53-1.77(m，3H)，1.32-1.43(m，1H)，1.30(s，3H)，0.55(d，3H)。MS ESI，m/z＝435[M+H]+。(1R，2R，4R)-异构体：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.22(s，1H)，8.83(s，1H)，8.35-8.4(m，2H)，8.09(s，1H)，7.96(dd，1H)，7.21(s，1H)，6.99(dd，1H)，4.19(s，3H)，3.94(td，1H)，2.53-2.63(m，1H)，2.48(qd，1H)，2.00(m，1H)，1.81-
1.94(m，2H)，1.63(m，1H)，1.35-1.38(m，1H)，1.34(s，3H)，0.70(d，3H)。MS ESI，m/z＝435[M+H]+。
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例94)
(S)-1-(((1r，4S)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯
向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(IntV-3)的HCl盐(140mg，0.3mmol)和TEA(171μL，1.2mmol)在DCM(7mL)中的溶液中添加(S)-1-氯-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(69mg，0.5mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h，然后用水(10mL)淬灭并且用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％TFA)洗脱)直接纯化，以得到作为无色固体的(S)-1-(((1r，4S)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(52mg，32％)。MS ESI，m/z＝534[M+H]+。
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例94)
向(S)-1-(((1r，4S)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(41mg，0.1mmol)在THF(1.5mL)/水(1.5mL)中的溶液中添加LiOH(13mg，0.5mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌2h，然后用水(10mL)淬灭并且用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters XSelect CSH氟-苯基OBD，5μm 19×250mm；洗脱梯度为在10min内在水中30％-45％MeCN(0.1％FA)；25mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺和2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺的混合物(85：15)(6mg，15％)。此步骤中的消旋化作用的原因是未知的。MS ESI，m/z＝492[M+H]+。所需产物的进一步分离和纯化在以下实例95中描述。
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例95)
(R)-1-(((1r，4R)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯
向N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-3)的粗HCl盐(130mg，0.3mmol)和TEA(159μL，1.1mmol)在DCM(7mL)中的溶液中添加(R)-1-氯-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(64mg，0.4mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌2h，然后用水(10mL)淬灭并且用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的(R)-1-(((1r，4R)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(92mg，61％)。MS ESI，m/z＝534[M+H]+。
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例95)
向(R)-1-(((1r，4R)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(75mg，0.1mmol)在THF(2.5mL)/水(2.5mL)中的溶液中添加LiOH(24mg，1.0mmol)。将所得的溶液在rt下搅拌2h，然后用水(15mL)淬灭并且用EtOAc(25mL×3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18 ExRS 5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中11％-44％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺和2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺的混合物(85：15)(27mg，39％)。此步骤中的消旋化作用的原因是未知的。将此混合物与实例94中获得的产物混合物合并并且通过制备型手性HPLC(IA，5μm 20mm×250mm；在20min内与MeOH中的50％MTBE(0.5％2N NH3-MeOH)等度；20.0mL/min)分离，以得到均作为黄色固体的2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(4mg，100％ee)和2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(13mg，99.8％ee)。
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例94)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(4：5旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.56-8.67(m，3H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.18-7.30(m，2H)，4.94/4.76(d，1H)(旋转异构体)，4.33-4.59/3.92-4.03(m，3H)(旋转异构体)，4.12(s，3H)，2.91/2.77(s，3H)(旋转异构体)，1.60-2.27(m，8H)，1.22/1.18(d，3H)(旋转异构体)。MSESI，m/z＝492[M+H]+。
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例95)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(4：5旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.52-8.68(m，3H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.17-7.31(m，2H)，4.81(br.s，1H)，4.34-4.59/3.91-4.05(m，3H)(旋转异构体)，4.12(s，3H)，2.91/2.77(s，3H)(旋转异构体)，1.60-2.28(m，8H)，1.22/1.18(d，3H)(旋转异构体)。MS ESI，m/z＝492[M+H]+。
6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基环丙烷甲酰胺基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例96)
在rt下在N2气氛下向6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-4)的HCl盐(50mg，0.1mmol)和TEA(50μL，0.4mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加环丙烷甲酰氯(25mg，0.2mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h，然后用MeOH(0.5mL)淬灭并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基环丙烷甲酰胺基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(29mg，54％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(2：3旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.52-8.59(m，2H)，8.48/8.47(s，1H)(旋转异构体)，7.23/7.20(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，4.46-4.58(m，1H)，4.36-4.46/4.19-4.30(m，1H)(旋转异构体)，4.06(s，3H)，3.04/2.77(s，3H)(旋转异构体)，1.72-2.28(m，8H)，1.58-1.71(m，1H)，0.60-0.84(m，4H)。MS ESI，m/z＝488[M+H]+。
2-((1R，4r)-4-((1r，3R)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例97)
在rt下在N2气氛下向(1r，3r)-3-羟基环丁烷-1-甲酸(78mg，0.7mmol)和DIPEA(253μL，1.5mmol)在DMF(6mL)中的溶液中添加HATU(220mg，0.6mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌10min，接着添加6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-4)的HCl盐(220mg，0.48mmol)。将反应混合物在rt下搅拌2h，然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18 ExRS 5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中10％-41％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的2-((1R，4r)-4-((1r，3R)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(182mg，73％，100％ee)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(4：5旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.52-8.59(m，2H)，8.48/8.47(s，1H)(旋转异构体)，7.23/7.21(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，5.08/5.06(d，1H)(旋转异构体)，4.44-4.54(m，1H)，4.36-4.44/3.54-3.64(m，1H)(旋转异构体)，4.08-4.18(m，1H)，4.06(s，3H)，3.23-3.30/3.10-3.21(m，1H)(旋转异构体)，2.75/2.74(s，3H)(旋转异构体)，2.29-2.42(m，2H)，2.15-2.25(m，2H)，1.96-2.14(m，4H)，1.6-1.94(m，4H)。MS ESI，m/z＝518[M+H]+。
2-((1R，4r)-4-((1s，3S)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例98)
在rt下在N2气氛下向(1s，3s)-3-羟基环丁烷-1-甲酸(78mg，0.7mmol)和DIPEA(253μL，1.5mmol)在DMIF(6mL)中的溶液中添加HATU(220mg，0.6mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌10min，接着添加6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-4)的HCl盐(220mg，0.5mmol)。将反应混合物在rt下搅拌2h，然后通过C18快速色谱法(用在水中的0％-80％MeCN(0.1％FA)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18 ExRS 5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中10％-41％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的2-((1R，4r)-4-((1s，3S)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(178mg，71％，100％ee)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1：1旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.51-8.60(m，2H)，8.48/8.47(s，1H)(旋转异构体)，7.22/7.20(s，1H)(旋转异构体)，7.05(dd，1H)，5.02-5.09(m，1H)，4.43-4.55(m，1H)，4.34-4.43/3.67-3.79(m，1H)(旋转异构体)，4.06(s，3H)，3.92-4.04(m，1H)，2.76-2.88(m，2H)，2.65-2.76/2.30-2.43(m，4H)(旋转异构体)，2.15-2.26(m，2H)，1.59-2.14(m，8H)。MS ESI，m/z＝518[M+H]+。
2-((1r，4r)-4-(2-羟基-N，2-二甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例99)
1-(((1r，4r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯
在rt下在N2气氛下向6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-4)的HCl盐(230mg，0.5mmol)和TEA(153mg，1.5mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加1-氯-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(125mg，0.8mmol)。将所得的混合物在rt下搅拌1h，然后用MeOH(2mL)淬灭并且在减压下浓缩以获得固体。将固体用水(25mL)洗涤并且然后用PE/EtOAc(10：1)(44mL)洗涤，以得到作为黄色固体的1-(((1r，4r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(265mg，96％)，其不经进一步纯化即可使用。MS ESI，m/z＝548[M+H]+。
2-((1r，4r)-4-(2-羟基-N，2-二甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例99)
在rt下在N2气氛下向1-(((1r，4r)-4-(6-甲氧基-5-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基甲酰基)-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基乙酸酯(250mg，0.5mmol)在MeOH(10mL)/水(5mL)中的悬浮液中添加NaOH(55mg，1.4mmol)，接着添加DCM(1mL)以溶解不可溶的固体。将所得的溶液在rt下搅拌2h，然后在减压下浓缩，再溶解在MeOH/DMF(2mL/3mL)中并且通过制备型HPLC(WatersBEH OBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中30％-45％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的2-((1r，4r)-4-(2-羟基-N，2-二甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(215mg，93％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(2：3旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.58(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.47(s，1H)，7.22(s，1H)，7.05(dd，1H)，5.43/5.32(s，1H)(旋转异构体)，4.69-4.93/4.28-4.43(m，1H)(旋转异构体)，4.43-4.58(m，1H)，4.06(s，3H)，3.16/2.71(s，3H)(旋转异构体)，2.14-2.27(m，2H)，1.96-2.11(m，2H)，1.59-1.95(m，4H)，1.35(s，6H)。MSESI，m/z＝506[M+H]+。
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1r，3r)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例100)
将2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-羟基-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-5)(20mg，0.04mmol)、(1s，3s)-3-甲氧基环丁烷-1-醇(45mg，0.4mmol)、三苯基膦(23mg，0.1mmol)和DIAD(42μL，0.2mmol)在1，4-二噁烷(3mL)中的混合物在微波中在140℃下搅拌。在2h之后，使反应混合物冷却至rt并且直接经受C18快速色谱法(用在水中的0％至50％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)，接着进行制备型HPLC(XBridgePrep C18 OBD，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；流动相B：MeCN；梯度：在7min内22％B至42％B；流速：60mL/min)，以得到作为黄色固体的2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1r，3r)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(8mg，34％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1：1旋转异构体混合物)δ 11.13(s，1H)，8.67(s，1H)，8.62(dd，1H)，8.61(s，1H)，8.16(dd，1H)，8.11(s，1H)，7.21(dd，1H)，6.97/6.99(s，1H)(旋转异构体)，5.14-5.27(m，1H)，4.42-4.56(m，1H)，4.20-4.35(m，1H)，3.91(s，1H)，3.80(s，1H)，3.63(s，1H)，3.53(s，1H)，3.23(s，3H)，2.71-2.83(m，2H)，2.57-2.68(m，2H)，1.86-2.10(m，6H)，1.76/1.78(s，3H)(旋转异构体)，1.59-1.74(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝544。
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1s，3s)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例101)
将2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-羟基-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(Int V-5)(20mg，0.04mmol)、(1r，3r)-3-甲氧基环丁烷-1-醇(18mg，0.2mmol)、三苯基膦(46mg，0.2mmol)和DIAD(34μL，0.2mmol)在1，4-二噁烷(3mL)中的混合物在微波中在140℃下搅拌。在1h之后，使反应混合物冷却至rt并且直接经受C18快速色谱法(用在水中的0％至40％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)，接着进行制备型HPLC(XBridgeShield RP18 OBD，30×150mm，5μm；流动相A：水(0.05％NH4OH)；流动相B：MeCN；梯度：在8min内28％B至36％B；流速：60mL/min)和制备型手性HPLC(CHIRAL ART纤维素-SB S-5μm，2×25cm，5μm；流动相A：MTBE(0.5％2N NH3-MeOH)；流动相B：EtOH；梯度：等度30％B，持续27min；流速：18mL/min)，以得到作为黄色固体的2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1s，3s)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(10mg，42％，100％ee)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(1：1旋转异构体混合物)δ11.18(s，1H)，8.66(s，1H)，8.61(s，1H)，8.57(dd，1H)，8.16(dd，1H)，8.10(s，1H)，7.22(dd，1H)，7.08/7.09(s，1H)(旋转异构体)，4.74-4.84(m，1H)，4.40-4.58(m，2H)，3.91(s，1H)，3.80(s，1H)，3.63(s，1H)，3.53(s，1H)，3.22(s，3H)，3.02-3.17(m，2H)，2.34-2.45(m，2H)，1.85-2.15(m，6H)，1.76/1.78(s，3H)(旋转异构体)，1.62-1.74(m，2H)。m/z(ESI+)，[M+H]+＝544。
2-((1r，4r)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例102)
2-((1r，4r)-4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例103)
(1s，4s)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基甲烷磺酸酯
在0℃下在N2下在2min时间段内将MsCl(288μL，3.7mmol)逐滴添加到2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例7)(300mg，0.7mmol)和TEA(617μL，4.4mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中。将所得的溶液在30℃下搅拌5h。将反应混合物用水(20mL)淬灭并且用DCM(25mL×2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并且在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用在DCM中的0％-10％MeOH洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的(1s，4s)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基甲烷磺酸酯(260mg，73％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.61-8.70(m，2H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.30(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.95-5.04(m，1H)，4.55-4.69(m，1H)，4.12(s，3H)，3.24(s，3H)，1.98-2.34(m，6H)，1.80-1.98(m，2H)。MS ESI，m/z＝485[M+H]+。
2-((1r，4r)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例102)
2-((1r，4r)-4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例103)
向1H-1，2，3-三唑(285mg，4.1mmol)和Cs2CO3(403mg，1.2mmol)在DMF(10mL)中的悬浮液中添加(1s，4s)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基甲烷磺酸酯(200mg，0.4mmol)。将所得的混合物在90℃下搅拌2h。将反应混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％甲酸)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(WatersBEH OBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度为在7min内在水中27％-47％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)，接着47％-95％，再持续3分钟；60mL/min)进一步纯化，以得到均作为黄色固体的2-((1r，4r)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(11mg，6％)和2-((1r，4r)-4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(26mg，14％)。2-((1r，4r)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.62-8.67(m，2H)，8.61(s，1H)，8.24(d，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.76(d，1H)，7.29(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.62-4.79(m，2H)，4.13(s，3H)，2.26-2.38(m，4H)，2.05-2.26(m，4H)。MS ESI，m/z＝458[M+H]+。2-((1r，4r)-4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.63(s，1H)，8.60(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.81(s，2H)，7.28(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.63-4.78(m，2H)，4.13(s，3H)，2.26-2.37(m，4H)，2.02-2.26(m，4H)。MS ESI，m/z＝458[M+H]+。
rel-2-((1S，2S，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例104)和异构体2(实例105)
外消旋-(1R，2S，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇
在25℃下在N2下将5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(75mg，0.29mmol)添加到在i-PrOH(5mL)中的外消旋-(1R，2S，3S)-3-氨基-2-甲基环己烷-1-醇盐酸盐(45mg，0.27mmol)(根据Cao，Hai Thuong等人Synthesis[合成]2011，20，3297-3300的方法制备)和TEA(121μL，0.87mmol)中。将所得的混合物在80℃下搅拌2h。使反应冷却至rt，然后将三正丁基膦(213μL，0.87mmol)添加到反应中，并且将所得的溶液在80℃下搅拌12h。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(具有0.1％FA)洗脱)纯化，接着通过制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18柱，5μm 30×150mm；洗脱梯度：在水中33％-53％MeCN(10mMNH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到作为无色油状物的外消旋-(1R，2S，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(130mg，100％，73％wt.纯度)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ 7.86(s，1H)，7.80(d，1H)，7.04(s，1H)，4.56(q，1H)，3.94(s，3H)，3.87(dt，1H)，3.49(d，1H)，2.32(s，1H)，2.23-2.08(m，1H)，2.04-1.95(m，3H)，1.60-1.49(m，2H)，0.80(d，3H)。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。
rel-2-((1S，2S，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例104)和异构体2(实例105)
将Pd(OAc)2(9.2mg，0.04mmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(33.8mg，0.08mmol)、TEA(286μL，2.05mmol)、外消旋-(1R，2S，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(120mg，0.21mmol)和咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(83mg，0.62mmol)在MeCN(8mL)中的溶液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％乙腈(0.1％FA)洗脱)纯化，并且然后通过制备型HPLC(WatersBEH OBD C18，5μm 30×150mm；洗脱梯度：在水中16％-46％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到外消旋-2-((1S，2S，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下进一步纯化此材料：手性制备型HPLC(/>IA，2×25cm，5μm；用MeOH中的50％MTBE(0.5％2N NH3-MeOH)(1：1)等度洗脱；20mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1S，2S，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(10mg，11％，98.7％ee)和rel-2-((1S，2S，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(11mg，13％，95.7％ee)。针对两个产物获得的1H NMR和MS是相同的。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.04(s，1H)，8.69-8.52(m，3H)，8.15(d，1H)，8.05(s，1H)，7.27(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.99-4.73(m，1H)，4.63(dd，1H)，4.12(s，3H)，3.91-3.73(m，1H)，2.65-2.56(m，1H)，2.23-2.01(m，1H)，1.99-1.80(m，2H)，1.55(d，1H)，1.45(q，2H)，0.52(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
rel-2-((1S，2R，3S)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例106)和异构体2(实例107)
rel-2-((1S，2R，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例108)和异构体2(实例109)
外消旋-(1S，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇和rel-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇-异构体1和异构体2
在25℃下在N2下将5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(180mg，0.69mmol)添加到在i-PrOH(5mL)中的外消旋(1R，2R，3S)-3-氨基-2-甲基环己烷-1-醇盐酸盐和外消旋-(1S，2R，3S)-3-氨基-2-甲基环己烷-1-醇盐酸盐的混合物(89mg，0.69mmol)(根据Cao，Hai Thuong等人Synthesis[合成]2011，20，3297-3300的方法制备)和TEA(289μL，2.08mmol)中。将所得的混合物在80℃下搅拌2h。使反应冷却至rt，然后添加三正丁基膦(512μL，0.87mmol)，并且将所得的溶液在80℃下搅拌12h。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(具有0.1％FA)洗脱)纯化，并且然后通过制备型HPLC(XBridge Prep OBD C18柱，5μm30×150mm；洗脱梯度：在水中43％-73％MeOH(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到外消旋-(1S，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇和外消旋-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇的混合物。通过以下进一步纯化此材料：手性制备型HPLC(IC 2×25cm，5μm；与己烷中的MeOH15％(0.5％2N NH3-MeOH)等度；20mL/min)，以得到全部作为淡黄色固体的外消旋-(1S，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(35mg，15％)、rel-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇-异构体1(27mg，11％，98％ee)和rel-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇-异构体2(20mg，9％，99％ee)。外消旋-(1S，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.82(dt，2H)，7.07(d，1H)，4.33(td，1H)，4.09(s，1H)，4.02-3.87(m，3H)，2.45-2.22(m，1H)，2.18-2.03(m，2H)，2.01-1.81(m，3H)，1.79-1.64(m，1H)，0.70(dt，3H)。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。rel-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇-异构体11H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.87(s，1H)，7.79(s，1H)，7.07(s，1H)，4.10-3.80(m，4H)，3.47-3.31(m，1H)，2.15-2.05(m，3H)，1.96(q，1H)，1.70(s，1H)，1.59-1.45(m，2H)，0.82(dd，3H)。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。rel-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇-异构体21H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.87(s，1H)，7.79(s，1H)，7.07(s，1H)，4.10-3.80(m，4H)，3.40(s，1H)，2.10(tt，3H)，1.96(t，1H)，1.80(s，1H)，1.50(d，2H)，0.81(d，3H)。MS ESI，m/z＝339/341[M+H]+。
rel-2-((1S，2R，3S)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例106)和异构体2(实例107)
将Pd(OAc)2(2.6mg，11μmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(9.0mg，0.02mmol)、TEA(76μL，2.05mmol)、外消旋-(1S，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇(32mg，0.05mmol)和咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(22mg，0.16mmol)在MeCN(6mL)中的溶液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％乙腈(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到外消旋-2-((1S，2R，3S)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺。通过以下进一步纯化此材料：手性制备型HPLC(IA 2x 25cm，5μm；用EtOH中的50％MTBE(0.5％2N NH3-MeOH)(1：1)等度洗脱；18mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1S，2R，3S)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(3mg，14％，99.7％ee)和rel-2-((1S，2R，3S)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(3.9mg，18％，100％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.61(d，1H)，8.56(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.27(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.69(d，1H)，4.50-4.35(m，1H)，4.12(s，3H)，3.87(s，1H)，2.21-2.09(m，1H)，2.04-1.93(m，2H)，1.89-1.72(m，2H)，1.66-1.47(m，2H)，0.57(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.61(s，1H)，8.55(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.27(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.69(d，1H)，4.42(td，1H)，4.12(s，3H)，3.87(s，1H)，2.15(t，1H)，1.96(dd，2H)，1.82(dd，2H)，1.56(q，2H)，0.57(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
rel-2-((1S，2R，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例108)
将Pd(OAc)2(1.9mg，8.55μmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(7.1mg，0.02mmol)、TEA(60μL，0.43mmol)、rel-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇-异构体1(25mg，0.04mmol)和咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(17.2mg，0.13mmol)在MeCN(8mL)中的溶液在一氧化碳气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，并且通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18 ExRS，30mm x 150mm，5μm；洗脱梯度：在水中12％-45％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为淡黄色固体的rel-2-((1S，2R，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(2.9mg，16％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.57(s，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.28(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.80(d，1H)，4.22-4.08(m，4H)，3.28-3.14(m，1H)，2.08-1.86(m，4H)，1.83-1.74(m，1H)，1.52-1.27(m，2H)，0.63(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
rel-2-((1S，2R，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(实例109)
将Pd(OAc)2(1.3mg，5.81μmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(4.8mg，0.01mmol)、TEA(41μL，0.29mmol)、rel-(1R，2R，3S)-3-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-2-甲基环己烷-1-醇-异构体2(17mg，0.03mmol)和咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-胺(11.7mg，0.09mmol)在MeCN(6mL)中的溶液在CO气氛下在15atm下并在100℃下搅拌15h。将混合物冷却至rt并在减压下浓缩。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，并且然后通过制备型HPLC(WatersOBD C18，5μm，30×150mm；洗脱梯度：在水中15％-45％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的rel-2-((1S，2R，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(5.3mg，43％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ 11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.58(s，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.28(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.79(d，1H)，4.20-4.08(m，4H)，3.25-3.07(m，1H)，2.06-1.86(m，4H)，1.80(d，1H)，1.56-1.29(m，2H)，0.63(d，3H)。MS ESI，m/z＝421[M+H]+。
2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例110)
将HATU(89mg，0.23mmol)添加到在DMF(6mL)中的DIPEA(103μL，0.59mmol)、(S)-3-羟基丁酸(20.4mg，0.20mmol)和6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺盐酸盐(Int V-4)(70mg，0.13mmol)中。将所得的混合物在25℃下搅拌15h。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4.OH)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18 ExRS 5μm，30×150mm；洗脱梯度：在水中9％-42％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(37mg，55.7％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.34(s，1H)，9.09-9.01(m，1H)，8.72(s，1H)，8.58-8.49(m，2H)，8.46(d，1H)，7.19(d，1H)，7.04(s，1H)，4.62(d，1H)，4.56-4.37(m，1.5H)，4.04(s，4H)，3.92-3.81(m，0.5H)2.79(d，3H)，2.46-2.25(m，2H)，2.24-1.95(m，4H)，1.92-1.56(m，4H)，1.18-1.02(m，3H)。MS ESI，m/z＝506[M+H]+
2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例111)
将HATU(96mg，0.25mmol)添加到在DMF(6mL)中的DIPEA(110μL，0.63mmol)、(R)-3-羟基丁酸(21.8mg，0.21mmol)和6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺盐酸盐(Int V-4)(70mg，0.14mmol)中。将所得的混合物在25℃下搅拌15h。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4.OH)洗脱)直接纯化，并且通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18 ExRS，5μm，30×150mm；洗脱梯度：在水中9％-42％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)进一步纯化，以得到作为黄色固体的2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺(53mg，74.5％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.58-8.52(m，2H)，8.48(d，1H)，7.21(d，1H)，7.06(dd，1H)，4.67-4.59(m，1H)，4.56-4.41(m，1.5H)，4.10-3.97(m，4H)，3.96-3.86(m，0.5H)，2.81(d，3H)，2.48-2.29(m，2H)，2.25-1.96(m，4H)，1.93-1.60(m，4H)，1.16-1.07(m，3H)。MS ESI，m/z＝506[M+H]+
rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3R)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例112)和异构体2(实例113)
将HATU(163mg，0.43mmol)添加到在DMF(6mL)中的DIEA(188μL，1.08mmol)、外消旋-(1R，3R)-3-羟基环戊烷-1-甲酸(46.5mg，0.36mmol)和6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺盐酸盐(Int V-4)(150mg，0.33mmol)中。将所得的混合物在rt下搅拌3h。将粗产物通过快速C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN洗脱)纯化。通过以下进一步纯化材料：手性制备型HPLC(IF，2x 25cm，5μm；在22min内用在MeOH 60％中的MTBE 40％(0.5％2N NH3-MeOH)等度洗脱；18mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3R)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(45mg，26％)和rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3R)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(44mg，25％)。异构体1：1HNMR(400MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.60-8.52(m，2H)，8.47(d，1H)，7.22(d，1H)，7.06(dd，1H)，4.48(dd，1.5H)，4.19(dq，1H)，4.06(s，3H)，3.92(q，0.5H)，3.30(m，0.5H)，3.22(m，0.5.H)，2.82(d，3H)，2.16(d，3H)，2.08-1.87(m，3H)，1.87-1.6(m，7H).1.51(m，1H)。MS ESI，m/z＝532[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.35(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.60-8.52(m，2H)，8.52-8.43(m，1H)，7.22(d，1H)，7.06(dd，1H)，4.55(m，1.5H)，4.22-4.15(m，1H)，4.06(s，3H)，3.95(d，0.5H)3.31(d，0.5H)3.21(d，0.5H)，2.82(d，3H)，2.16(d.3H)，2.11-1.88(m，3H)，1.89-1.61(m，7H)，1.5(m，1H)。MS ESI，m/z＝532[M+H]+。
rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3S)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-口]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例114)和异构体2(实例115)
/>
将HATU(163mg，0.43mmol)添加到在DMF(10mL)中的DIPEA(188μL，1.08mmol)、外消旋-(1R，3S)-3-羟基环戊烷-1-甲酸(46.5mg，0.36mmol)和6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺盐酸盐(Int V-4)(150mg，0.33mmol)中。将所得的混合物在rt下搅拌15h。将粗产物通过C18快速色谱法(用在水中的0％至100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化。通过以下进一步纯化材料：手性制备型HPLC(Chiral Art纤维素SB，2x 25cm，5μm；用MTBE 70％(0.5％2NNH3-MeOH)/30％(DCM-MeOH，1：1)等度洗脱；20mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3S)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(22mg，12％)和rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3S)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(18mg，10％)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.74(d，1H)，8.59-8.54(m，2H)，8.49-8.45(m，1H)，7.22(d，1H)，7.06(dd，1H)，4.55(m，1.5H)，4.06(s，4H)，3.97(m，0.5H)，3.21-3.01(m，1H)，2.82(d，3H)，2.31-2.10(m，3H)，2.06-1.89(m，3H)，1.88(m，4H)，1.64(m.4H)。MS ESI，m/z＝532[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ10.36(s，1H)，9.08(dd，1H)，8.74(d，1H)，8.59-8.54(m，2H)，8.48(dd，1H)，7.21(d，1H)，7.06(dd，1H)，4.52(m，1.5H)，4.06(s，4H)，3.91(m.0.5H)，3.00(t，1H)，2.82(d，3H)，2.18(q，3H)，2.09-1.88(m，3H)，1.87(m，4H)，1.61(m，4H)。MS ESI，m/z＝532[M+H]+。
2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例116)和2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例117)
4-((1r，4r)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸硝基苯酯
在0℃下在N2下将4-氯甲酸硝基苯酯(177mg，0.88mmol)添加到在DCM(1mL)中的N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(甲基氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺盐酸盐(Int V-3)(200mg，0.44mmol)、TEA(245μL，1.75mmol)中。将所得的混合物在rt下搅拌15h。在减压下除去溶剂，然后添加水(30mL)和MeOH(5mL)并且将所得的混合物搅拌30min。将所得的沉淀物通过过滤收集，用水(25mL)洗涤并在真空下干燥，以得到作为黄色固体的4-((1r，4r)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸硝基苯酯(260mg，100％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)(旋转异构体混合物)δ11.05(s，1H)，8.67-8.60(m，2H)，8.59(s，1H)，8.30(s，1H)，8.28(s，1H)，8.17(s，1H)，8.05(s，1H)，7.51-7.43(m，2H)，7.29-7.18(m，2H)，4.61-4.45(m，1H)，4.25-3.99(m，1H)，4.12(s，3H)，3.01和2.91(s，3H)，2.32-2.20(m，2H)，2.16-2.03(m，2H)，2.01-1.82(m，4H)。MS ESI，m/z＝585[M+H]+。
2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例116)
在25℃下在氮气下将(S)-吡咯烷-3-醇(26.6mg，0.30mmol)添加到在DMF(3mL)中的4-((1r，4r)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸硝基苯酯(110mg，0.15mmol)、TEA(106μL，0.76mmol)中。将所得的混合物在70℃下搅拌15h。使反应混合物冷却至rt，然后通过制备型HPLC(YMC-Actus TriartC18 ExRS，5μm，30×150mm；洗脱梯度为在水中10％-43％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(35mg，43％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(d，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.26(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.86(d，1H)，4.57-4.41(m，1H)，4.26-4.18(m，1H)，4.12(s，3H)，3.77-3.62(m，1H)，3.51-3.39(m，2H)，3.29-3.19(m，1H)，3.10-3.00(m，1H)，2.67(s，3H)，2.27-2.15(m，2H)，2.10-1.94(m，2H)，1.89-1.77(m，4H)，1.77-1.66(m，2H)。MSESI，m/z＝533[M+H]+。
2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(实例117)
在25℃下在N2下将(R)-吡咯烷-3-醇(9.66mg，0.11mmol)添加到在DMF(3mL)中的4-((1r，4r)-4-(5-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基氨基甲酰基)-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)(甲基)氨基甲酸硝基苯酯(40mg，0.06mmol)、TEA(39μL，0.28mmol)中。将所得的混合物在70℃下搅拌15h。使反应混合物冷却至rt，然后通过制备型HPLC(YMC-Actus Triart C18ExRS，5μm，30×150mm；洗脱梯度为在水中10％-43％MeCN(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；60mL/min)纯化，以得到作为黄色固体的2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺(20mg，68％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.59(d，2H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.26(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.86(d，1H)，4.55-4.39(m，1H)，4.27-4.16(m，1H)，4.12(s，3H)，3.77-3.61(m，1H)，3.52-3.40(m，2H)，3.29-3.18(m，1H)，3.12-2.97(m，1H)，2.67(s，3H)，2.25-2.14(m，2H)，2.13-1.94(m，2H)，1.90-1.77(m，4H)，1.77-1.62(m，2H)。MSESI，m/z＝533[M+H]+。
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例118)和异构体2(实例119)
1-氨基-4-(苄基氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
在0℃下在N2下在3mmin内向1-氨基-4-氧代环己烷-1-甲酸甲酯(1.5g，8.8mmol)和苯甲胺(1.1g，10.5mmol)在MeOH(28mL)中的溶液中添加氰基硼氢化钠(826mg，13.1mmol)。将所得的混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(2％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的1-氨基-4-(苄基氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(1.4g，61％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(1：2异构体混合物)δ7.35-7.24(m，4H)，7.24-7.15(m，1H)，3.70/3.67(s，2H)(异构体)，3.61/3.59(s，3H)(异构体)，2.45-2.30(m，1H)，2.09-1.98(m，1H)，1.84-1.73(m，1H)，1.67-1.41(m，5H)，1.28-0.99(m，1H)。MS ESI，m/z＝263[M+H]+。
1，4-二氨基环己烷-1-甲酸甲酯
在N2下向1-氨基-4-(苄基氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(300mg，1.1mmol)在MeOH(16mL)中的溶液中添加在碳上的Pd(OH)2(20wt.％)(60mg，0.4mmol)。将所得的悬浮液在25℃下在氢气下在1atm下搅拌2h。将反应混合物经硅藻土过滤，并且将硅藻土饼用MeOH(100mL)洗涤。将合并的MeOH溶液在减压下浓缩，以得到作为无色油状物的1，4-二氨基环己烷-1-甲酸甲酯(120mg，61％)，其不经进一步纯化即可直接使用。MS ESI，m/z＝173[M+H]+。
1-氨基-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-甲酸甲酯
在25℃下在N2下将5-溴-4-甲氧基-2-硝基苯甲醛(1.3g，4.9mmol)添加到在i-PrOH(32mL)中的1，4-二氨基环己烷-1-甲酸甲酯(890mg，5.2mmol)和TEA(2mL，14.8mmol)溶液中。将所得的混合物在80℃下搅拌2h，冷却至室温，接着添加三正丁基膦(3.6mL，14.8mmol)。将混合物在80℃下搅拌12h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的1-氨基-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-甲酸甲酯(650mg，35％)。MS ESI，m/z＝382/384(1：1)[M+H]+。
(1-氨基-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲醇
在0℃下在N2下向1-氨基-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己烷-1-甲酸甲酯(630mg，1.7mmol)在THF(30mL)中的溶液中添加氢化铝锂(94mg，2.5mmol)。将所得的混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物倒入Na2SO4·10H2O在THF(50mL)中的悬浮液中，并且然后通过硅藻土过滤。将硅藻土饼用THF(500mL)洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩，以得到作为淡黄色固体的(1-氨基-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲醇(440mg，75％)，其不经进一步纯化即可直接使用。MS ESI，m/z＝354/356(1：1)[M+H]+。
N-(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-(羟基甲基)环己基)-2-氯乙酰胺
在0℃下在N2下在2min内将2-氯乙酰氯(140mg，1.3mmol)逐滴添加到(1-氨基-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)环己基)甲醇(400mg，1.1mmol)在DCM(4.5mL)和NaOH水溶液(2N)(4.5mL，2.3mmol)中的混合物中。将所得的混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物倒入水(10mL)中并且用DCM(20mL×3)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为淡黄色固体的N-(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-(羟基甲基)环己基)-2-氯乙酰胺(120mg，25％)。MS ESI，m/z＝430/432(1：1)[M+H]+。
9-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮
在0℃下在N2下在2min内将叔丁醇钾(177mg，1.6mmol)分批添加到N-(4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-(羟基甲基)环己基)-2-氯乙酰胺(170mg，0.4mmol)在THF(10mL)中的溶液中。将所得的混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(10mL)中并用EtOAc(50mL×3)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的9-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮(105mg，68％)。MS ESI，m/z＝394/396(1：1)[M+H]+。
9-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮
在0℃下在N2下在2min内将氢化钠(60wt.％)(14mg，0.4mmol)分批添加到9-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮(95mg，0.2mmol)在DMF(6mL)中的溶液中。将所得的混合物在0℃下搅拌15min，接着添加碘甲烷(103mg，0.7mmol)。将混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(10mL)淬灭并用EtOAc(50mL×3)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％FA)洗脱)纯化，以得到作为无色固体的9-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮(85mg，86％)。MS ESI，m/z＝408/410(1：1)[M+H]+。
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯
将9-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1-甲基-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-2-酮(85mg，0.2mmol)、Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(17mg，0.02mmol)和TEA(290μL，2.1mmol)在MeOH(10mL)中的混合物在CO气氛下在15atm下在100℃下在密封容器中加热15h。将反应混合物冷却至rt并且在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为红色固体的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(75mg，93％)。MS ESI，m/z＝388[M+H]+。
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺15.5]十一烷-9-基)-2H-吲唑-5-甲酸
将氢氧化锂(20mg，0.8mmol)添加到6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2H-吲唑-5-甲酸甲酯(65mg，0.2mmol)在THF(3mL)/水(3mL)中的溶液中。将所得的溶液在25℃下搅拌2h。将反应混合物用2N HCl调节至pH 6。将混合物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)直接纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2H-吲唑-5-甲酸(50mg，80％)。MS ESI，m/z＝374[M+H]+。
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例118)和异构体2(实例119)
将吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-胺(23mg，0.1mmol)的HCl盐添加到6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-2H-吲唑-5-甲酸(45mg，0.1mmol)、HATU(55mg，0.1mmol)和DIPEA(63μL，0.4mmol)在DMF(3mL)中的溶液中。将所得的混合物在25℃下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩，并且通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，以得到作为黄色固体的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺的异构体的混合物。通过以下分离此混合物：制备型手性HPLC(IA 5μm 20mm×250mm；与MeOH中的50％MTBE(0.5％2NNH3-MeOH)等度；在24min内，20mL/min)，以得到均作为无色固体的作为第一洗脱异构体的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺--异构体1(19mg，32％，100％ee)和作为第二洗脱异构体的6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(3mg，5％，99.5％ee)。异构体1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.70(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.49(s，1H)，7.26(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.75-4.68(m，1H)，4.07(s，3H)，4.07(s，2H)，3.91(s，2H)，2.71(s，3H)，2.41-2.34(m，2H)，2.22-2.04(m，4H)，1.63-1.55(m，2H)。MS ESI，m/z＝490[M+H]+。异构体2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6δ10.34(s，1H)，9.07(dd，1H)，8.73(s，1H)，8.61(s，1H)，8.54(dd，1H)，8.47(s，1H)，7.22(s，1H)，7.05(dd，1H)，4.68-4.56(m，1H)，4.08(s，2H)，4.06(s，3H)，3.98(s，2H)，2.88(s，3H)，2.20-1.94(m，6H)，1.81(br.d，2H)。MS ESI，m/z＝490[M+H]+。
rel-2-((5R，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例120)和异构体2(实例121)
rel-2-((5S，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例122)和异构体2(实例123)
外消旋-3-溴-N-((3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己-1-烯-1-基)-N-甲基丙酰胺
在-78℃下在5min内将在THF中的甲胺(2M)(34.1mL，68.2mmol)添加到在密封容器中的外消旋-(3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己烷-1-酮(如Int V-1的合成中所述合成)(2.3g，6.8mmol)在甲苯(100mL)中的溶液中。将所得的溶液升温至rt并在110℃下搅拌2.5h。将混合物在减压下浓缩。将残余物溶解在THF(100mL)中并冷却至0℃。将碳酸氢钠(859mg，10.2mmol)和3-溴丙酰氯(1.2g，6.8mmol)添加到反应混合物中，将其在25℃下搅拌30min。将反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(25mL)淬灭并用EtOAc(150mL×2)萃取。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩以产生无色油状物。将粗产物通过硅胶色谱法(用在PE中的0％-60％EtOAc洗脱)纯化，以得到作为红色固体的外消旋-3-溴-N-((3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己-1-烯-1-基)-N-甲基丙酰胺(850mg，26％)。MS ESI，m/z＝484/486/485(1∶2∶1)[M+H]+。
外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮和外消旋-(5S，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮
在20min内向外，消旋-3-溴-N-((3R，4R)-4-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-3-甲基环己-1-烯-1-基)-N-甲基丙酰胺(450mg，0.9mmol)在甲苯(60mL)中的溶液中逐滴添加三丁基锡烷(810mg，2.8mmol)和AIBN(76mg，0.5mmol)在MeCN(1mL)和甲苯(15mL)中的溶液中。将所得的溶液在80℃下搅拌6h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％MeCN(0.05％FA)洗脱)纯化，接着进行制备型HPLC(XBridgePrep OBD C18，30×150mm 5μm；流动相A：水(10mM NH4HCO3+0.1％NH4OH)；流动相B：MeCN；梯度：在10min内34％B至44％B，然后在44％B下等度，持续10min；流速：60mL/min)，以得到均作为淡黄色固体的作为第一洗脱混合物的外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(26mg，7％)和作为第二洗脱混合物的外消旋-(5S，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(26mg，7％)。外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮：1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.84(s，1H)，7.78(d，1H)，7.05(s，1H)，3.91(s，3H)，3.79(td，1H)，2.77(s，3H)，2.48-2.23(m，4H)，2.15-2.03(m，3H)，1.88(td，1H)，1.70-1.57(m，3H)，0.67(d，3H)。MS ESI，m/z＝406/408[M+H]+。外消旋-(5S，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.85(s，1H)，7.80(d，1H)，7.05(s，1H)，4.00-3.84(m，5H)，3.21(s，3H)，2.80-2.64(m，1H)，2.63-2.47(m，2H)，2.42(t，2H)，2.26-2.04(m，3H)，1.96-1.71(m，3H)，1.49(dd，1H)，0.71(d，3H)。MS ESI，m/z＝406/408[M+H]+。
rel-2-((5R，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例120)和异构体2(实例121)
rel-2-((5S，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(实例122)和异构体2(实例123)
将外消旋-(5R，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(26mg，0.1mmol)、Pd(OAc)2(29mg，0.1mmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(26mg，0.1mmol)和TEA(89μL，0.6mmol)在MeCN(10mL)中的悬浮液在密封容器中在CO气氛下在15atm下在100℃下加热15h。在冷却至rt之后，将额外的Pd(OAc)2(29mg，0.1mmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(26mg，0.1mmol)和TEA(89vL，0.6mmol)添加到以上反应混合物中。将所得的悬浮液再次在密封容器中在CO气氛下在15atm下在100℃下再加热15h。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％乙腈(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，接着进行制备型手性HPLC(IA 5μm 20mm×250mm；在10min内与MeOH/DCM(1/1)中的50％MTBE(0.5％2M NH3-MeOH)等度；20mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((5R，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(5mg，16％；97.2％ee)和rel-2-((5R，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(4mg，13％；99.5％ee)。异构体1和2彼此是对映异构体，针对两种异构体获得的LCMS/1H NMR是相同的。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.64(dd，1H)，8.62(s，1H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.31(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.21-4.13(m，1H)，4.12(s，3H)，2.68(s，3H)，2.41-2.26(m，3H)，2.26-2.14(m，1H)，2.09-1.89(m，4H)，1.71(t，1H)，1.61-1.50(m，2H)，0.59(d，3H)。MS ESI，m/z＝488[M+H]+。
将外消旋-(5S，7R，8R)-8-(5-溴-6-甲氧基-2H-吲唑-2-基)-1，7-二甲基-1-氮杂螺[4.5]癸烷-2-酮(26mg，0.1mmol)经受以上所述的反应条件。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过C18快速色谱法(用在水中的0％-100％乙腈(0.1％NH4OH)洗脱)纯化，接着进行制备型手性HPLC(YMC Chiral ART纤维素-SB 5μm 20mm×250mm；在18min内与乙醇中的50％MTBE(0.5％2M NH3-MeOH)等度；20mL/min)，以得到均作为黄色固体的rel-2-((5S，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1(4mg，13％，99.9％ee)和rel-2-((5S，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体2(4mg，13％，98.6％ee)。异构体1和2彼此是对映异构体，针对两种异构体获得的LCMS/1H NMR是相同的。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ11.05(s，1H)，8.67-8.61(m，2H)，8.59(s，1H)，8.15(dd，1H)，8.05(s，1H)，7.32(s，1H)，7.22(dd，1H)，4.26(dt，1H)，4.12(s，3H)，3.08(s，3H)，2.75-2.54(m，1H)，2.53-2.36(m，1H)，2.27(t，2H)，2.16-1.92(m，3H)，1.89-1.70(m，3H)，1.53(t，1H)，0.62(d，3H)。MS ESI，m/z＝488[M+H]+。
IRAK4抑制剂化合物在IRAK4酶测定中的功效
使用质谱读出在酶测定中确定化合物针对IRAK4的抑制性活性。使用Echo 655(Labcyte Inc)，从溶解在DMSO中并添加到384孔测定板(Greiner#781280)中的10mM化合物原液产生具有1μM或10μM最高浓度的10点半对数化合物浓度应答曲线。向测定板中添加在测定缓冲液(50mM Tris-HCl pH 7.4，10mM MgCl，5mM谷胱甘肽，0.01％BSA，3mM ATP)中稀释至0.2nM的最终浓度的10μL人重组IRAK4蛋白(LifeTechnologies#PV4002)。将酶在室温下用化合物温育15分钟，之后使用Echo 655(Labcyte Inc)将肽底物(KKARF SRFAGS SPSQS SMVAR，Innovagen custom synthesis，在DMSO中10mM)添加到每个孔中，至10μM的浓度。在室温下两小时之后，用90μL的0.4％甲酸(Merck#33015)停止反应。在Waters TQ-S质谱仪上通过LC-MS/MS测量未磷酸化和磷酸化的肽。使用TargetLynx软件对峰进行积分，并且计算磷酸化与未磷酸化的肽之间的比率。对曲线进行拟合，并且在Genedata Screener 15(Genedata AG)中确定化合物功效。所呈现的数据是至少n＝2的几何平均数，或者从单一实验获得，如由*所表示。
IRAK4磷酸化细胞测定
通过TLR或IL-1R配体进行的IRAK4活化导致IRAK4自磷酸化，这可以通过IRAK4激酶抑制剂防止。在IL-1β刺激的Karpas-299细胞中评定IRAK4抑制剂化合物对于IRAK4自磷酸化的作用，作为细胞功效的量值。将Karpas-299细胞在含有10％FBS(Gibco#10270)的RPMI 1640(Gibco61870-010)中培养。将细胞以2×104个细胞/孔铺板在聚D-赖氨酸涂覆的384孔板(Corning#356663)中，使用Echo 655(Labcyte Inc)将各种浓度(10点半对数剂量应答，最终最高浓度为30μM)的化合物添加到这些板中。将细胞离心(250g，4min)，在37℃下温育1h，然后在37℃下用22.7ng/mL重组IL-1β(R&DSystems，#201-LB-025)刺激10mnin，接着在4％多聚甲醛中固定10min，并且在冰冷的70％MeOH中透化30min。将细胞在BlueWasher(BlueCatBio)上用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤两次，然后用含有10％FBS的PBS封闭20min。用BlueWasher除去封闭溶液，并且将细胞在含有0.05％Tween-20的封闭溶液中用抗pIRAK4(Thr345/Ser346)(CST，#11927，1：400)染色，持续1h，然后在BlueWasher上用含有0.05％Tween-20的PBS洗涤两次，接着在含有0.05％Tween-20的封闭缓冲液中用Alexa 647缀合的第二抗兔IgG抗体(CST，#4414，1：2，000)和Hoechst 33342(Sigma，1：2，000)染色，持续30min。最后，将细胞用含有0.05％Tween-20的PBS洗涤两次，并且使用适当的滤光器用10X空气物镜在ImageXpress Micro(分子装置)上成像。在Columbus(PerkinElmer)中分析图像，并且对荧光强度/来自第二抗体的细胞进行定量。在Genedata Screener 15(GenedataAG)中分析定量数据。在此测定中获得的结果在表1中呈现，并且证明了本说明书的化合物抑制细胞中的IRAK4的能力。IC50值是至少2个实验的几何平均数。
表1化合物在IRAK4酶抑制测定和IRAK4磷酸化细胞测定中的活性
/>
/>
IRAK4抑制剂对于人THP-1单核细胞系中的IL-1β诱导的细胞因子释放的作用
将THP-1细胞在含有10％FBS(Gibco 10270-106)、1mM丙酮酸钠(Gibco 11360-070)和100U/mL青霉素-链霉素(Gibco 15140-122)的RPMI 1640(Gibco 72400-021)中培养。将细胞以5×104个细胞/孔铺板在384孔Echo合格板(Labcyte PPT-0200)中，使用Echo655(Labcyte Inc)将各种浓度(10点半对数剂量应答，最终最高浓度为10μM)的化合物添加到这些板中。将板在37℃下温育1h，然后添加重组IL-1β(R&D Systems 201-LB-025/CF)至1.8ng/mL的最终浓度。将板在37℃下温育18h。将板在250x g下离心四分钟，然后使用Echo655上的声分配将1.6μL的细胞上清液转移到白色低体积384孔板(Greiner#784075)中。接下来，使用声分配(珠和抗体来自PerkinElmer I8AlphaLISA检测试剂盒，AL224C)添加200nL的受体珠(5mg/mL)和生物素化的抗IL-8抗体(500nM)。将板密封，短暂离心，然后在室温下温育1h。之后，添加200nL的供体珠溶液(5mg/mL)，将板密封并短暂离心，然后温育1h，之后在Envision板上读数以允许确定实现THP1细胞中IL-1β刺激后释放的IL-8的量减少50％所需的IRAK4抑制剂的浓度(表2)。在Genedata Screener 15(Genedata AG)中分析定量数据。所呈现的数据是至少n＝2的几何平均数，或者从单一实验获得，如由*所表示。
IRAK4抑制剂对于人PBMC中LPS和IL-1β诱导的细胞因子释放的体外作用
为了评估IRAK4抑制剂对于人原代免疫细胞中阻断疾病相关途径的作用和功效，我们用LPS(TLR4激动剂)或IL-1β(IL-1R配体)刺激人PBMC(外周血单核细胞)并且测量促炎细胞因子IL-6和TNF-α的释放。简而言之，使用LymphoPrep密度梯度将PBMC从由健康个体捐赠的人血中分离，并且以200000个细胞/孔(用于LPS测定)或300000个细胞/孔(用于IL-1β测定)的细胞密度铺板在96孔培养板中。将细胞用系列稀释度的IRAK4抑制剂或媒介物(DMSO)温育1h，之后用0.11ng/mL LPS(来源于大肠杆菌)或1ng/mL重组人IL-1β刺激细胞。在LPS刺激4h或IL-1β刺激20h之后，收集上清液并且通过Mesoscale Discovery(MSD)多重测定测量促炎细胞因子TNF-α、IL-8和IL-6的水平。对剂量-应答曲线进行作图，并且使用GraphPad Prism 8用4参数曲线拟合计算IC50值(参见表3)。证明了根据本说明书的IRAK4抑制剂在抑制促炎细胞因子释放和TNF-α中是高度活性的。
LPS诱导的气道炎症的小鼠模型中IRAK4抑制的体内作用
TLR充当气道中的微生物和过敏原的第一感应物，并且可以介导快速炎性应答。吸入的LPS刺激的小鼠模型用于研究IRAK4抑制对于急性TLR4驱动的气道炎症的过程的作用。简而言之，通过口服施用用5、15和50mg/kg的测试化合物(实例89)或单独的媒介物(在水中的5％DMSO，95％SBE-B-CD(30％w/v))对9周大的C57Bl/6NCrl雌性小鼠进行给药。在0.5h之后，通过以6L/min压缩空气流全身暴露于在盐水中的1mg/mL LPS(大肠杆菌0111：B4，来自Sigma L2630)的气溶胶或仅盐水，持续0.5h来对动物进行刺激。在暴露之后，对盒子进行通气并且将动物返回其饲养笼中。在4h之后，用单一腹膜内注射0.3mL戊巴比妥(100mg/mL)对动物进行安乐死，并且使用1mL的PBS对整个肺进行手动支气管肺泡灌洗(BAL)。将收集的BAL液体(BALF)在300x g下在4℃下离心10min，并且收集上清液并储存在-80℃下。使用MSD多重测定在BALF上清液中测量促炎细胞因子的水平，使用8只小鼠/治疗组，不同的是LPS/媒介物组，其中使用20只小鼠。不同治疗组中BALF上清液中的IL-6和TNF-α的水平在图1中表示。实例89以剂量依赖性方式降低吸入的LPS刺激之后IL-6和TNF-α的水平。
表2：本说明书的化合物针对hTHP1细胞中的IL-1β刺激的IL-8释放的IC50值
/>
*n＝1
表3.用LPS和IL-1β刺激的人PBMC中IRAK4抑制剂化合物的IC50值(nM)
/>

Claims (16)

1.一种具有式(A)的化合物或其药学上可接受的盐，
其中：
R1选自
R2选自
R3和R4各自独立地选自H、Me、Et、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
Y是N(Me)COMe、N(R5)COMe、N(Me)COR6、N(R5)COR6、CONMe2或5元N-杂环诸如1，2，3-三唑，并且Z是H、Me、Et和任选取代的C1-C6烷基；或者
Y和Z组合形成任选取代的4元、5元或6元环；
X选自OR7和NR8R9；
R5选自H、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C6环烷基；
R6选自任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C3-C6环烷基和任选取代的5元或6元饱和N-杂环；
R7是Me、Et、异丙基、正丙基、环丙基、环丁基、任选取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基或含有选自O和N的杂原子的4元、5元或6元环；
R8和R9独立地选自H、Me和任选取代的C1-C6烷基，或者一起形成任选取代的C3-C6环烷基或含有选自O和N的另外的杂原子的任选取代的4元、5元或6元环；
其中当存在时，Z、R3、R4、R5、R6、R7、R8和R9的任选取代基独立地选自OH、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中，Y和Z组合形成4元、5元或6元环，其选自任选取代的3-羟基环丁基、N-酰化氮杂环丁烷、吡咯烷-2-酮、1-烷基吡咯烷-2-酮、3-烷基噁唑烷-2-酮、1-烷基哌啶-2-酮或3-烷基-1，3-噁嗪烷-2-酮。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中，Y和Z组合形成4元、5元或6元环，其选自任选取代的3-羟基环丁基、N-酰基氮杂环丁烷、1-甲基吡咯烷-2-酮、3-甲基噁唑烷-2-酮、1-甲基哌啶-2-酮和3-甲基-1，3-噁嗪烷-2-酮。
4.根据任一前述权利要求所述的化合物，其中，在Y和Z组合形成4元、5元或6元环的情况下，该环选自
其中★代表与环己基环的附接位点，并且R10是Me或任选地被OH、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C(O)Me、氨基、NHMe、NMe2、F或Cl取代的C1-C6烷基。
5.根据权利要求1所述的化合物，其中，R2是
任选地其中R3和R4是甲基。
6.根据权利要求1所述的化合物，其中，R2是
任选地其中Y是N(Me)COMe并且Z是H。
7.根据任一前述权利要求所述的化合物，其中，R1是
8.根据任一前述权利要求所述的化合物，其中，X是OR7。
9.根据权利要求1所述的具有式(A)的化合物，其选自：
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1s，4s)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(二甲基氨基甲酰基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-(2-羟基-2-甲基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1R，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3S)-3-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1s，4s)-4-(环丙烷甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-6-环丙氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2：
rel-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-(2-羟基螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-(4-羟基-4-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3S)-3-羟基-3-甲基环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-6-环丙氧基-2-((1S，3R)-3-羟基-3-甲基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1R，2R，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-甲氧基-2-((1S，2S，4R*)-2-甲基-4-(N-甲基乙酰氨基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((6S，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2：
rel-2-((6R，7R)-2-乙酰基-6-甲基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2：
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((7R，8R)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺或rel-2-((7S，8S)-2，7-二甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1、2、3或4；
N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-3-氧杂-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1R，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3R，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1R，3S，4S)-4-羟基-3-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
6-环丙氧基-2-((1r，4r)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-环丙氧基-2-((1s，4s)-4-羟基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((5r，8r)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((5s，8s)-2-甲基-3-氧代-2-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，2S，4R)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，2S，4S)-4-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4S)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，2R，4R)-4-羟基-2，4-二甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1S，4r)-4-((S)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-2-羟基-N-甲基丙烷酰氨基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-((1r，4r)-4-(N-甲基环丙烷甲酰胺基)环己基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((1r，3R)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((1s，3S)-3-羟基-N-甲基环丁烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(2-羟基-N，2-二甲基丙烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1r，3r)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-(2-乙酰基-2-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-((1s，3s)-3-甲氧基环丁氧基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(1H-1，2，3-三唑-1-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1r，4r)-4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
re，-2-((1S，2S，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，2R，3S)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1S，2R，3R)-3-羟基-2-甲基环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基丁烷酰氨基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺；
rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3R)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((1R，4r)-4-((1R，3S)-3-羟基-N-甲基环戊烷-1-甲酰胺基)环己基)-6-甲氧基-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
2-((1S，4r)-4-((S)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
2-((1R，4r)-4-((R)-3-羟基-N-甲基吡咯烷-1-甲酰胺基)环己基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺；
6-甲氧基-2-(1-甲基-2-氧代-4-氧杂-1-氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)-N-(吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
rel-2-((5R，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；以及
rel-2-((5S，7R，8R)-1，7-二甲基-2-氧代-1-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)-N-(咪唑并[1，2-b]哒嗪-3-基)-6-甲氧基-2H-吲唑-5-甲酰胺-异构体1或异构体2；
或其药学上可接受的盐。
10.一种药物组合物，其包含根据任一前述权利要求所述的具有式(A)的化合物和至少一种药学上可接受的赋形剂。
11.根据任一前述权利要求所述的具有式(A)的化合物，用于用作药物。
12.根据权利要求11所述的用于使用的化合物，其用于治疗呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，癌症，炎性疾病和自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病。
13.根据权利要求1至9中任一项所述的具有式(A)的化合物，用于在药物的制造中使用，任选地其中该药物用于治疗呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，癌症，炎性疾病和自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病。
14.一种治疗其中IRAK4的抑制是有益的疾病或病症的方法，其包括向对其有需要的患者施用有效量的根据权利要求1至9中任一项所述的具有式(I)的化合物或其药学上可接受的盐。
15.根据权利要求14所述的治疗方法，其中，该有需要的患者是患有呼吸疾病诸如哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)，癌症，炎性疾病或自体炎性/自身免疫疾病诸如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肌炎、干燥综合征、系统性硬化症、痛风、子宫内膜异位症、特应性皮炎和银屑病的患者。
16.根据权利要求11或权利要求13所述的用于使用的化合物或根据权利要求14所述的治疗方法，其中，该使用、药物或治疗是针对血液恶性肿瘤，其选自华氏巨球蛋白血症(WM)、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)、脾边缘区淋巴瘤(SMZL)、小淋巴细胞淋巴瘤(SLL)、白血病(慢性淋巴细胞白血病(CLL))和意义未明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS-IgM+)。
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