CN116478156A

CN116478156A - 一种akt抑制剂化合物的富马酸盐晶型及其制备方法

Info

Publication number: CN116478156A
Application number: CN202310033446.3A
Authority: CN
Inventors: 代清宇; 马昌友; 唐莹; 陈东晖; 吴舰; 徐丹; 朱春霞; 田舟山
Original assignee: Nanjing Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Nanjing Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2022-01-17
Filing date: 2023-01-10
Publication date: 2023-07-25

Abstract

本发明公开了一种AKT抑制剂化合物的富马酸盐晶型及其制备方法，具体涉及(R)‑4‑((1S,6R)‑5‑((S)‑2‑(4‑氯苯基)‑3‑(异丙基氨基)丙酰基)‑2,5‑二氮杂二环[4.1.0]庚烷‑2‑基)‑5‑甲基‑5,8‑二氢吡啶并[2,3‑d]嘧啶‑7(6H)‑酮单富马酸盐水合物的晶型H及其制备方法。

Description

一种AKT抑制剂化合物的富马酸盐晶型及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及(R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂二环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮富马酸盐的晶型及其制备方法。

背景技术

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及其下游蛋白AKT(又称蛋白激酶B，PKB)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)组成的PI3K/AKT/mTOR通路作为细胞内非常重要的信号转导途径，在细胞的生长、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等过程中发挥着极其重要的生物学功能。该通路的异常激活会引起一系列的疾病，包括癌症、神经病变、自身免疫性疾病和血液淋巴系统疾病。

AKT是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，通过下游众多效应器影响细胞存活、生长、代谢、增殖、迁移和分化。超过50％的人类肿瘤存在AKT过度活化的现象，尤以前列腺癌、胰腺癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌为主。AKT过活化可导致肿瘤发生、转移以及耐药性产生。

AKT具有三种亚型：AKT1、AKT2和AKT3。作为典型的蛋白激酶，每种亚型均由氨基末端的PH结构域(Pleckstrinhomologydomain)、中部结合ATP的激酶结构域以及羧基末端的调节结构域组成。3种亚型约80％的氨基酸序列同源，仅在PH结构域和激酶结构域连接区变化较大。

目前，针对PI3K/AKT/mTOR信号通路的靶向药物主要是PI3K抑制剂和mTOR抑制剂，而AKT处于该信号转导通路的核心部位。抑制AKT活性既可避免抑制上游PI3K造成的严重副作用，也可避免抑制下游mTOR引起的负反馈机制影响药效。因此，寻找有效和选择性的AKT抑制剂是当前肿瘤靶向药物研发的重要方向。CN101631778A公开了一类环戊二烯并[D]嘧啶衍生物，CN101578273A公开了一类羟基化和甲氧基化的环戊二烯并[D]嘧啶衍生物，CN101511842A公开了一类二氢呋喃并嘧啶衍生物，CN101970415A公开了一类5H-环戊二烯并[d]嘧啶衍生物，这些化合物具有小于10μM的抑制AKT1的IC₅₀。

(R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂二环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮，即化合物W，记载于WO2020156437A1，其具有良好的生物活性，能够有效抑制AKT激酶活性。化合物W具有如下结构：

作为药用活性成分的晶型结构往往影响到该药物的化学稳定性，结晶条件及储存条件的不同有可能导致化合物的晶型结构的变化，有时还会伴随着产生其他形态的晶型。一般来说，无定型的药物产品没有规则的晶型结构，往往具有其它缺陷，比如产物稳定性较差、析晶较细、过滤较难、易结块、流动性差等。因此，改善上述产物的各方面性质是很有必要的。

本发明提供了化合物W的富马酸盐新晶型及其制备方法。

发明内容

一方面，本申请提供了(R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂二环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮单富马酸盐水合物，其结构如下式I所示：

其中，n为0.5～1。

另一方面，本发明提供了(R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂二环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮单富马酸盐水合物的晶型，命名为晶型H。

在一些实施方案中，使用Cu-Kα辐射，所述晶型H以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱在2θ值为8.40°±0.2°、9.53°±0.2°和22.45°±0.2°有特征峰。

在一些实施方案中，使用Cu-Kα辐射，所述晶型H在以2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱中在2θ值为8.40°±0.2°、9.53°±0.2°、11.29°±0.2°、16.61°±0.2°、18.24°±0.2°、19.46°±0.2°、22.45°±0.2°、23.17°±0.2°、23.50°±0.2°和24.26°±0.2°处有特征峰。

在一些实施方案中，使用Cu-Kα辐射，所述晶型H在以2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱中在2θ值为5.46°±0.2°、8.40°±0.2°、9.53°±0.2°、11.29°±0.2°、12.14°±0.2°、12.55°±0.2°、13.69°±0.2°、14.60°±0.2°、15.77°±0.2°、16.61°±0.2°、17.72°±0.2°、18.24°±0.2°、19.46°±0.2°、20.96°±0.2°、22.45°±0.2°、23.17°±0.2°、23.50°±0.2°、24.26°±0.2°、25.10°±0.2°、25.56°±0.2°、26.44°±0.2°、29.55°±0.2°、30.73°±0.2°和32.75°±0.2°处有特征峰。

在一些实施方案中，使用Cu-Kα辐射，所述晶型H以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱具有如图1所示的图谱。

在一些实施方案中，所述晶型H在差示扫描量热法测得的热分析图中，在起始温度为115℃～125℃处有吸热峰。

在一些实施方案中，所述晶型H在差示扫描量热法测得的热分析图中，在起始温度为118℃～122℃处有吸热峰。

在一些实施方案中，所述晶型H在差示扫描量热法测得的热分析图中，在起始温度为121℃处有吸热峰。

在一些实施方案中，所述晶型H具有如图2所示的DSC图谱。

在一些实施方案中，所述晶型H具有如图3所示的TGA图谱。

在一些实施方案中，所述晶型H具有如图5所示的TGA图谱。

并非出于限制的目的，所述晶型H是包含0.5～1分子的水合物，结构式I中n为0.5～1；优选的，n为0.5或1；更优选的，n为0.5。

另一方面，本发明提供了一种晶型H的晶型组合物，其中所述晶型H的重量占晶型组合物重量的50％以上；优选80％以上；进一步优选90％以上；更进一步优选95％以上；最优选98％以上。

另一方面，本发明提供了包含所述晶型H或晶型组合物的药物组合物。

在一些实施方案中，所述药物组合物进一步包含一种或多种药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，所述药物组合物为适于口服的固体药物制剂，优选片剂或胶囊。

另一方面，本申请还提供了用作药物的晶型H或晶型组合物或药物组合物。

另一方面，本申请还提供了所述晶型H或其晶型组合物或其药物组合物在制备用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的药物中的用途。

另一方面，本申请还提供了所述晶型H或其晶型组合物或其药物组合物用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的用途。

另一方面，本申请还提供了用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的方法，其包括向有需要的个体给予本申请的所述晶型H或其晶型组合物或其药物组合物。

另一方面，本申请还提供了用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的本申请的所述晶型A或其晶型组合物或其药物组合物。

在一些实施方案中，所述AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态为癌症。

在一些典型的实施方案中，所述癌症为乳腺癌、前列腺癌或卵巢癌。

在一些典型的实施方案中，所述癌症为前列腺癌。

相关定义

除非有特定说明，下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义：

术语“药学上可接受的载体”是指对机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些载体。包括但不限于国家食品药品监督管理局许可的可用于人或动物的任何稀释剂、崩解剂、粘合剂、助流剂、润湿剂。

本申请中的“X-射线粉末衍射图谱”为使用Cu-Kα辐射测量得到。

本申请中的“2θ”或“2θ角度”是指衍射角，θ为布拉格角，单位为°或度；每个特征峰2θ的误差范围为±0.20°。

需要说明的是，在X射线粉末衍射光谱(XRPD)中，由结晶化合物得到的衍射谱图对于特定的结晶往往是特征性的，其中谱带(尤其是在低角度)的相对强度可能会因为结晶条件、粒径和其它测定条件的差异而产生的优势取向效果而变化。因此，衍射峰的相对强度对所针对的结晶并非是特征性的。判断是否与已知的结晶相同时，更应该注意的是峰的相对位置而不是它们的相对强度。此外，对任何给定的结晶而言，峰的位置可能存在轻微误差，这在结晶学领域中也是公知的。例如，由于分析样品时温度的变化、样品移动、或仪器的标定等，峰的位置可以移动，2θ值的测定误差有时约为±0.2°。因此，在确定每种结晶结构时，应该将此误差考虑在内。在XRPD图谱中通常用2θ角或晶面距d表示峰位置，两者之间具有简单的换算关系：d＝λ/2sinθ，其中d代表晶面距，λ代表入射X射线的波长，θ为衍射角。对于同种化合物的同种结晶，其XRPD谱的峰位置在整体上具有相似性，相对强度误差可能较大。还应指出的是，在混合物的鉴定中，由于含量下降等因素会造成部分衍射线的缺失，此时，无需依赖高纯试样中观察到的全部谱带，甚至一条谱带也可能对给定的结晶是特征性的。

差示扫描量热法(DSC)测定当晶体由于其晶体结构发生变化或晶体熔融而吸收或释放热时的转变温度。对于同种化合物的同种晶型，在连续的分析中，热转变温度和熔点误差典型的在约5℃之内，通常在约3℃之内。当描述某个化合物具有某一给定的DSC峰或熔点时，指的是该DSC峰或熔点±5℃。DSC提供了一种辨别不同晶型的辅助方法。不同的晶体形态可根据其不同的转变温度特征而加以识别。需要指出的是对于混合物而言，其DSC峰或熔点可能会在更大的范围内波动。此外，由于在物质熔化的过程中伴有分解，因此熔化温度与升温速率相关。

热重分析(TGA)指的是在程序控制温度下测量待测样品的质量与温度变化之间关系的一种热分析技术。当被测物质在加热过程中有升华或汽化现象时，其分解出了气体或失去了结晶水时，引起被测物质量发生变化。这时，热重曲线就不是直线而是有所下降。通过分析热重曲线，即可知道被测物质在什么温度下产生变化，并且根据所失重量，可计算失去了多少物质量。

在提到例如XRPD图谱、DSC图谱或TGA图谱时，术语“如……所示”包括与本文描绘的那些不一定相同，但在被本领域技术人员考虑时落入实验误差的限度内的图谱。

附图说明

图1实施例1制备产品的X-射线粉末衍射(XRPD)谱图；

图2实施例1制备产品的差示扫描量热(DSC)图；

图3实施例1制备产品的热重(TGA)图；

图4实施例2制备产品的X-射线粉末衍射(XRPD)谱图；

图5实施例2制备产品的热重(TGA)图；

图6实施例3中条件A下样品储存前后的XRPD叠加图谱；

图7实施例3中条件B下样品储存前后的XRPD叠加图谱。

具体实施方式

下面通过实施例更详细地描述本申请。但这些具体描述仅用于说明本申请的技术方案，不对本申请构成任何限制。

参照WO2020156437A1公开的方法制备化合物W。

各仪器测试条件如下：

(1)X-射线粉末衍射仪(X-ray Powder Diffraction，XRPD)

仪器型号：Bruker D2 Phaser 2^nd

X-射线：Cu,kα,1.540598，/>1.544426，Kα2/Kα1强度比例:0.50

X射线光管设定：30kV，10mA

检测器：1D-LYNXEYE

样品旋转时间：15秒

扫描范围(°2θ)：3-40°

扫描步长(°2θ)：0.043

扫描时间：150秒

(2)热重分析仪(Thermogravimetric，TGA)

仪器型号：TA Instruments TGA25

吹扫气：氮气

升温速率：10℃/min

升温范围：室温-300℃

(3)差示扫描量热仪(Differential Scanning Calorimeter，DSC)

仪器型号：TA Instruments DSC25

吹扫气：氮气

升温速率：10℃/min

升温范围：20-300℃

实施例1化合物W单富马酸盐水合物晶型H的制备

步骤一：将化合物W(10g)与富马酸(2.52g)在丙酮/水/甲基叔丁基醚(44.2mL/7.8mL/52mL)中进行成盐，得到化合物W富马酸盐的类白色固体(12.33g)。

步骤二：向200mL蓝口瓶中添加步骤一制备的固体(5g)和20mL丙酮-水混合溶剂(丙酮与水的体积比为6：4)，升温至40-50℃磁力搅拌溶清。向蓝口瓶中加入丙酮(15mL)，降温至20-30℃。向蓝口瓶中加入乙酸乙酯(10.5mL)，搅拌10min。向蓝口瓶中滴加乙酸乙酯(94.5mL)。加毕，在20-30℃下搅拌熟化1小时。熟化完毕，抽滤，湿滤饼在真空(真空度≤-0.08Mpa)下于65℃下干燥17小时，得到类白色固体粉末(4.48g)。

分别进行XRPD、DSC和TGA表征。

其XRPD衍射图谱如图1所示，其主要特征衍射峰如表1所示：

表1实施例1产品的XRPD特征衍射峰

其DSC图谱如图2所示，吸热峰的起始温度和峰值温度分别为120.8℃和128.7℃。

TGA图谱如图3所示，显示在加热至150.0℃时重量损失的质量分数约为1.62％。

实施例2化合物W单富马酸盐水合物晶型H的制备

步骤二：向200mL蓝口瓶中添加步骤一所得产品(5g)和50mL丙酮-水混合溶剂(丙酮与水的体积比为85：15)，升温至40-50℃，磁力搅拌溶清。向蓝口瓶中加入丙酮(100mL)，降温至20-30℃。向蓝口瓶中加入甲基叔丁基醚(50mL)。加毕，在20-30℃下搅拌熟化4小时。熟化完毕，抽滤，湿滤饼在真空下于60℃下干燥29小时，得到类白色固体粉末(3.52g)。

分别进行XRPD和TGA表征。

其XRPD衍射图谱如图4所示。其TGA图谱如图5所示，显示在加热至150.0℃时重量损失的质量分数约为1.74％。

实施例3稳定性研究

利用下面的储存条件测定实施例1制备样品的晶体稳定性。

条件A：温度：10℃，相对湿度：10％，敞口放置10天；

条件B：温度：60℃，相对湿度：15％，敞口放置10天；

将储存前后的样品分别进行XRPD表征，结果如表2和图6、图7所示。

表2晶型H稳定性实验结果

储存条件	储存前(0天)	储存后(10天)
			条件A	晶型H	晶型H
条件B	晶型H	晶型H

以上所述仅为本申请的较佳实施例而已，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请保护的范围之内。

Claims

1.如下式I所示化合物，

其中，n为0.5～1；优选的，n为0.5或1；更优选的，n为0.5。

2.(R)-4-((1S,6R)-5-((S)-2-(4-氯苯基)-3-(异丙基氨基)丙酰基)-2,5-二氮杂二环[4.1.0]庚烷-2-基)-5-甲基-5,8-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(6H)-酮单富马酸盐水合物的晶型，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱在2θ值为8.40°±0.2°、9.53°±0.2°和22.45°±0.2°有特征峰。

3.根据权利要求2所述的晶型，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱在2θ值为8.40°±0.2°、9.53°±0.2°、11.29°±0.2°、16.61°±0.2°、18.24°±0.2°、19.46°±0.2°、22.45°±0.2°、23.17°±0.2°、23.50°±0.2°和24.26°±0.2°处有特征峰。

4.根据权利要求2所述的晶型，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱在2θ值为5.46°±0.2°、8.40°±0.2°、9.53°±0.2°、11.29°±0.2°、12.14°±0.2°、12.55°±0.2°、13.69°±0.2°、14.60°±0.2°、15.77°±0.2°、16.61°±0.2°、17.72°±0.2°、18.24°±0.2°、19.46°±0.2°、20.96°±0.2°、22.45°±0.2°、23.17°±0.2°、23.50°±0.2°、24.26°±0.2°、25.10°±0.2°、25.56°±0.2°、26.44°±0.2°、29.55°±0.2°、30.73°±0.2°和32.75°±0.2°处有特征峰。

5.根据权利要求2所述的晶型，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以衍射角2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱具有如图1所示的图谱。

6.根据权利要求2所述的晶型，其特征在于，所述晶型在差示扫描量热法测得的热分析图中，在起始温度为115℃～125℃处有吸热峰；优选在起始温度为118℃～122℃处有吸热峰；更优选在起始温度为121℃处有吸热峰；进一步优选所述晶型具有如图2所示的DSC图谱。

7.根据权利要求2所述的晶型，其特征在于，具有如图3或者图5所示的TGA图谱。

8.一种晶型组合物，其包含权利要求2-7任一项所述的晶型，所述晶型的重量占晶型组合物重量的50％以上；优选80％以上；进一步优选90％以上；更进一步优选95％以上；最优选98％以上。

9.一种药物组合物，其包含权利要求2-7任一项所述的晶型或权利要求8所述的晶型组合物；优选地，所述药物组合物为适于口服的固体药物制剂；更优选片剂或胶囊。

10.权利要求2-7任一项所述晶型或权利要求8所述的晶型组合物或权利要求9所述药物组合物在制备用于预防和/或治疗AKT蛋白激酶介导的疾病或疾病状态的药物中的用途；优选在制备用于预防和/或治疗癌症的药物中的用途；更优选在制备用于预防和/或治疗乳腺癌、前列腺癌或卵巢癌中的用途。