CN116459254A - 血根碱或其盐在抑制伪中间型葡萄球菌中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供血根碱或其盐在抑制伪中间型葡萄球菌中的应用，特别是提供血根碱或其盐在制备由伪中间型葡萄球菌引起的感染病的防治药物中的应用。血根碱或其盐对伪中间型葡萄球菌具有明显的抑制和杀伤作用，且具有副作用小、不易产生耐药性的特点。因此，血根碱或其盐可以作为抗生素替代品，应用于制备防治犬脓皮病的药物中。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及血根碱或其盐在抑制伪中间型葡萄球菌中的应用，特别涉及血根碱或其盐在制备由伪中间型葡萄球菌引起的感染病的防治药物中的应用。
背景技术
脓皮病是犬因皮肤问题就诊的常见原因。已有研究表明，伪中间型葡萄球菌是脓皮病最常见的病原菌，可从90%的临床患犬中分离获得。伪中间型葡萄球菌皮肤感染可导致犬出现局灶性或全身性的脓疱、脓性渗出、丘疹等临床症状，并常伴有不同程度的瘙痒和脱毛，导致犬的生活质量大打折扣。并且宠物犬身上携带的病原可通过接触传递给其他家庭成员，当家中儿童、老人等体质较弱家庭成员免疫功能低下时，这些病原体很可能引起人畜共患皮肤病，威胁公共卫生安全。
实现对动物体表伪中间型葡萄球菌异常增殖情况的控制，是犬脓皮病治疗方案的重点之一。目前采用口服抗生素的系统治疗是针对脓皮病的主要治疗方式。临床表明，虽然一些抗生素对犬脓皮病有疗效，但是如果不能准确控制抗生素的使用剂量、使用周期以及用药顺序，会使脓皮病的治疗复杂化，并且还会带来副作用。例如，林可霉素的超剂量使用，会使接受治疗的病犬出现因刺激胃肠道而引起呕吐、食欲不振，以及腹泻等的副作用。克林霉素、庆大霉素等抗菌药物的长期使用容易导致犬抗菌药物相关性菌群失调的出现，并有导致抗菌药物相关性腹泻的可能。阿米卡星可能会干扰正常菌群，长期应用可能导致非敏感菌的过度生长。
此外，广泛使用抗生素带来的另一个重要的不利后果是细菌耐药性问题日渐严峻。特别是由于犬脓皮病病原菌菌群构成变化较快，耐药性产生迅速，一次用药过后就产生耐药性的情况并不罕见。加之犬脓皮病经常反复发作，若长期应用抗生素进行治疗，更易导致细菌耐药性的产生。在世界范围内，已有很多关于分离出耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌（MRSP）及有多重耐药性（MDR）的伪中间型葡萄球菌的相关报道。细菌耐药问题会导致人类未来对细菌感染的控制手段受限，此外多重耐药菌还可通过直接接触在不同物种间传播，引起儿童、老人等体质较弱家庭成员发病，这对公共卫生安全来说也是一大隐患。
随着多重耐药菌的不断出现，医生对于系统治疗的看法产生了巨大变化。局部治疗不再仅仅作为选择性辅助治疗方法，而是被越来越被推荐作为耐药菌感染的治疗方法。特别是目前已有多种中药及其活性成分被证明具有抗耐药菌或逆转细菌耐药性的作用，因此利用具有抗菌活性的中药及其活性成分控制细菌感染成为了研究热点。但当前大多数研究都着眼于中药及其活性成分对人类医学领域常见病原菌的抑制作用，包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等，而中药抗兽医临床常见病原的研究仍处于起步阶段，公开的研究成果甚少。特别是，经过深入研究，伪中间型葡萄球菌与其它葡萄球菌如金黄色葡萄球菌的耐药机制大不相同，对同一药物的敏感性差异明显，因此针对其它耐药葡萄球菌有效的中药活性成分等往往对耐药伪中间型葡萄球菌如MRSP的抑制作用不够明显。在CLSI M100抗菌药物敏感性试验执行标准2016中，对于耐甲氧西林葡萄球菌增加了一个新分组：伪（假）中间型葡萄球菌。
当前，发掘不易产生耐药性的、对耐药伪中间型葡萄球菌、特别是耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌诱导的脓皮病有效且副作用小的抗生素替代药物至关重要且仍旧是业内面临的难题。
发明内容
基于上述现状，本发明提供血根碱或其盐在制备由伪中间型葡萄球菌引起的感染病的防治药物中的应用。
血根碱（Sanguinarine，SAN）是一种生物碱，分子式为[C20H14NO4]+，存在于许多药用植物中，如白屈菜的全草、紫堇的块根、博落回的全草、血水草的地上部分等。血根碱属于苯并菲啶生物碱家族，具有多种生物学特性。包括抗细菌、抗炎、抗真菌、杀虫、抗癌等。相较于化学药物，血根碱作为一种天然产物，具有毒性低、副作用少、生物利用度高等特点。在人医领域，广泛用于卵巢癌、慢性病、牙病等学科的研究。在兽医领域，血根碱作为博落回散的主要成分，主要用作经济动物的饲料添加剂，改善其肠道菌群，从而提高饲料转化率。
发明人通过体外抑菌试验，首次证实了血根碱对于犬源耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌具有明显抑菌效果，可以破坏细菌的形态结构。通过建立小鼠皮肤MRSP感染模型，评估小鼠治疗前后的体况、皮肤菌荷载量、炎性因子水平和病理组织状况发现，血根碱治疗后的小鼠皮肤菌荷载量和炎性因子水平均有明显下降，病理组织观察发现治疗组小鼠皮肤各层细胞排列整齐，皮肤结构分层清晰。说明血根碱对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌诱导的脓皮病模型小鼠有明显疗效，且效果与抗生素阿米卡星无显著性差异。
此外，作为天然药物成分，血根碱具有副作用小、不易产生耐药性的特点，且在研究过程中也未发现血根碱对于犬脓皮病的任何副作用。与之形成对比的是，抗生素阿米卡星可能会干扰正常菌群，长期应用可能导致非敏感菌的过度生长；其它抗生素如克林霉素、庆大霉素、林可霉素也会对脓皮病的治疗带来副作用。因此，血根碱可以作为抗生素替代品，具有预防和治疗犬脓皮病的潜在价值，可应用于制备防治脓皮病、特别是防治犬脓皮病、尤其是防治耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌诱导的脓皮病的药物中。
需要说明且不难理解的是，本发明中所述的由伪中间型葡萄球菌引起的感染病，包括仅由伪中间型葡萄球菌引起的感染病，也包括由伪中间型葡萄球菌以及其它菌种共同引起的感染病，如犬脓皮病。此外，对于脓皮病，其病原菌中除了包括耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌以外，还可以包括其它病菌。
不难理解的是，上述防治药物可以为外用药，具体为局部用药物，即对脓皮病的患处直接用药。在具体实施过程中，该防治药物可以选自常用的外用药剂型，包括膏剂、喷剂、酊剂、软膏、乳膏、糊膏、凝胶剂、涂膜剂、搽剂、洗剂、泡腾剂等。
当然，上述防治药物中除了含有作为有效成分的血根碱或其盐之外，还可以含有药学上可接受的辅料。具体辅料的选择可以根据目标剂型选择，此处不再赘述。
本发明对于血根碱或其盐的来源和存在形式不做特别限定，可以是商购，也可以自行制备。对于自行制备的血根碱，可以是对白屈菜、紫堇、博落回、血水草进行提取得到的含有血根碱等成分的提取液；也可以是对提取液进一步浓缩、纯化的产物；还可以是白屈菜的全草、紫堇的块根、博落回的全草、血水草的地上部分的超微粉，其中含有血根碱等活性成分。当然，对于从中药原材中提取的提取液，以及将中药原材粉碎得到的中药超微粉，则上述防治药物中还包括中药原材中除血根碱或其盐之外的其它成分。
不难理解，上述血根碱的盐，指的是医学上可接受的盐，包括酸加成盐或季铵盐；优选地，酸加成盐包括与无机酸形成的盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、氨基磺酸或磷酸；优选地，酸加成盐包括与有机酸形成的盐，例如乙酸、己二酸、富马酸、琥珀酸、马来酸、柠檬酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、甲烷磺酸、萘磺酸或酒石酸。
本发明的有益效果是：
本发明研究结果显示，血根碱及其盐对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌具有明显抑菌效果，对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌诱导的脓皮病模型小鼠有明显疗效，且具有副作用小、不易产生耐药性的特点。因此，血根碱或其盐可以作为抗生素替代品，应用于制备防治脓皮病、特别是防治犬脓皮病、尤其是防治由耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌诱导的脓皮病的药物中。
附图说明
图1为本发明实施例2中血根碱对MRSP的抑菌曲线；
图2为本发明实施例3中血根碱处理组与对照组扫描电镜下的MRSP；
图3为本发明实施例4各组小鼠用药7天后的血清抗炎因子IL-4水平，图中****表示SAN组和AK组均与CON组相比差异极显著（P＜0.0001），a表示PBO组和CON组均与SAN组相比差异极显著（P＜0.0001）；
图4为本发明实施例4中各组小鼠用药7天后的血清IL-6水平，图中****表示SAN组和AK组均与CON组相比差异极显著（P＜0.0001），a表示PBO组和CON组均与SAN组相比差异极显著（P＜0.0001）；
图5为本发明实施例4中各组小鼠皮肤匀浆培养过后的培养基；
图6为本发明实施例4中各组小鼠皮肤菌荷载量情况，图中****表示SAN组和AK组均与CON组相比差异极显著（P＜0.0001），a表示PBO组和CON组均与SAN组相比差异极显著（P＜0.0001）；
图7为本发明实施例4中各组小鼠皮肤组织病理切片图。
实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1. 采用肉汤稀释法测定血根碱对于MRSP的抑菌效果。
选择初始浓度为1.25 mg/mL的血根碱（血根碱盐酸盐，购自南京泽朗生物科技有限公司，下同）溶液作为MRSP的受试药物。设置药物治疗组（SAN），空白对照组（CON），阴性对照组（NC），安慰剂组（PBO）和阳性对照组（AK）。
阿米卡星、利福平和氯霉素等抗生素及含有抗菌活性化合物的香波等均可对MRSP起到抑制作用。根据药敏试验结果，本试验例选择阿米卡星（AK）溶液作为阳性对照药物。
取一次性U型底96孔板放入超净台（苏州净化设备有限公司，SW-CJ-2D）内，在第1孔内加入200 μL初始浓度的血根碱溶液。在2-8孔各加入100 μL MHB液体培养基，用微量移液枪从1孔内取出100 μL血根碱溶液至2孔后混匀，依次进行梯度稀释至第8孔后，弃置100μL液体。将100 μL受试菌液分解加入1-8孔，1-8孔为SAN组。9孔加入100 μL MHB培养基和100 μL受试菌液作为NC组；10孔内加入200 μL MHB培养基作为CON组；11孔内加入100 μL1%的DMSO溶液作为PBO组；12孔内加入100 μL阿米卡星溶液和100 μL菌液作为AK组。
加好样后，将96孔板放入37 ℃恒温培养箱（太仓市实验设备厂，DHP-9082）内培养18～24 h。肉眼观察增菌后的96孔板，没有细菌沉淀的孔对应的最低药物浓度即为药物的最低抑菌浓度（MIC）。从最小抑菌浓度孔和比它药物浓度更高的3个孔内各取出100 μL菌液，接种至准备好的BHI琼脂培养基上，用一次性涂布棒将菌液均匀的涂布在培养基表面，直至表面菌液干燥后，将培养基做好标记放入37 ℃恒温培养箱内培养18～24 h。观察增菌后的BHI琼脂培养基，表面菌落数量≤5个时所对应的最低药物浓度，即为药物的最低杀菌浓度（MBC）。
按照上述步骤，测得血根碱作用于MRSP的MIC为39.06 μg/mL，MBC为156.25 μg/mL；64 μg/mL的阳性药物阿米卡星溶液可完全抑制MRSP的生长。
实施例2. 血根碱抑菌曲线的测定
挑去MRSP接种至BHI肉汤培养基中，放入37 ℃，110 rpm恒温摇床（太仓市实验设备厂，THZ-D）内增菌6-8 h，将增菌后的菌液浓度调整至0.5麦氏浊度（1×108 CFU/mL）备用。
在1，2，3号15 mL离心管内各加入5 mL浓度分别为2MIC、MIC和1/2MIC的血根碱溶液，在4号离心管内加入5 mL灭菌蒸馏水。随后，在1-4号试管内各加入4.9 mL BHI液体培养基和0.1 mL MRSP菌液。使1-4号试管的菌液浓度均为1×106 CFU/mL，药物浓度分别为MIC、1/2MIC、1/4MIC和0 mg/mL。
在4个试管中各取3 mL放入分光光度计（Thermo NanoDrop 2000）内，测定其在波长为600 nm时的吸光度（OD值），并记录。将完成测定的离心管放入37 ℃，110 rpm的恒温摇床上增菌，随后每小时检测一次，持续12小时，将检测结果绘制成抑菌曲线图，如图1所示。
由图1可知，随着培养时间的延长，药物浓度为0 mg/mL（CON）、1/4MIC、1/2MIC和MIC的菌液的OD值均呈上升趋势，其中药物浓度为0 mg/mL、1/4MIC、1/2MIC的菌液的OD值呈显著增长趋势，且药物浓度越高，OD值的增长幅度越小。对于药物浓度为MIC的菌液，其OD值随略有上升但变化不大，基本维持在非常接近于0的水平，说明血根碱可以有效延缓MRSP进入对数生长期的时间。
实施例3. 采用扫描电镜观察血根碱对MRSP的破坏作用
选取MRSP菌作为受试细菌。按照实施例2的方法准备50 mL药物浓度为1/4MIC的血根碱溶液作为试验组，50 mL BHI肉汤培养基作为对照组。挑去MRSP菌分别接种至2个准备好的液体培养基中，将接好菌的50 mL离心管放入37 ℃，110 rpm的恒温摇床内增菌14 h。增菌结束后，将离心管取出放入高速冷冻离心机（Sigma-Aldrich，3-18K）内，在5000 rpm的条件下离心5 min。弃去上清液，用1 mL无菌水重悬菌泥，将菌液转移至1.5 mL离心管内。再次放入高速离心机中，在8000 rpm的条件下离心5 min，弃去上清液，沉淀即为菌泥。
将菌泥按照扫描电镜（Hitachi，SU8010）样本制作要求，按照前固定、后固定、脱水、干燥、粘台、喷金的步骤制成细菌样品后，进行电镜观察。
结果如图2所示，其中A，B图为在BHI肉汤培养基中正常培养的MRSP菌在不同放大倍数下的扫描电镜图。C，D图为在1/4MIC药物浓度的血根碱溶液中培养的MRSP菌在不同放大倍数下的扫描电镜图。由图2可知，与对照组相比，加入血根碱后对MRSP的菌体结构造成了破坏。说明采用极低药物浓度的血根碱，即可对MRSP的菌体结构造成破坏。
实施例4
1、小鼠MRSP皮肤感染模型建立
1）脱毛：将6-8周龄，体重为16-18 g的雌性Balb/c小鼠，作为试验动物。用电推剪推去小鼠背部毛发，将脱毛膏均匀的涂抹在小鼠背部皮肤上，静置1min后，用蘸有蒸馏水的棉球擦除脱毛膏及小鼠毛发，观察是否有绒毛残留。若有，则再次涂抹脱毛膏进行脱毛，直至观察不到绒毛残留；若没有，则用干棉球将小鼠背部皮肤擦净。
2）造模：按照50 mg/kg的麻醉剂量抽取舒泰50注射液，采用腹腔注射的形式对小鼠进行麻醉。待小鼠行动迟缓，呼吸变深变慢后，开始进行造模。用蘸有75%酒精的棉球擦拭小鼠背部脱毛区域的皮肤，进行消毒。待酒精完全挥发，皮肤恢复干燥后，用无菌手术刀片刮伤小鼠背部皮肤至渗血但不出血的状态。拿出准备好的浓度为0.5麦氏浊度的MRSP，用移液枪抽取100 μL菌液接种至每只小鼠背部刮伤的皮肤表面，待菌液感染30 min后，小鼠MRSP细菌感染模型建立完成。
2、小鼠MRSP皮肤感染模型的分组治疗
1）分组：将建模后的小鼠分为4组，分别是血根碱治疗组（SAN）、阿米卡星治疗组（AK）、1%二甲基亚砜DMSO治疗组（PBO）、空白对照组（CON）。
2）治疗药物：根据体外抑菌试验结果，选择40 μg/mL的血根碱溶液作为试验组治疗药物；64 μg/mL的阿米卡星溶液作为阳性对照组治疗药物；为排除血根碱溶液内DMSO对试验的影响，选择1%的DMSO溶液作为安慰剂组治疗药物；空白对照组建模后不做任何处理。
3）治疗方式：为保证药物与感染部位充分接触，最大程度的发挥药物的治疗作用，本试验采用湿敷的方法进行治疗。具体操作方法为，用无菌棉球或无菌纱布蘸取药液，湿敷于小鼠感染部位表面，每次湿敷持续时间为1 min。每组设置6只小鼠（n=6）作为平行对照，治疗周期为7天。
3、血根碱对小鼠MRSP皮肤感染模型治疗效果评估
1）炎性因子水平测定：在结束7天的治疗周期后，通过眼球采血的方式处死小鼠。将采集的全血样本室温放置2 h后，放入高速冷冻离心机内，以3000 rpm的速度离心20min。收集上清液，放入1.5 mL的离心管中，使用小鼠IL-4，IL-6 ELISA检查试剂盒（上海酶联生物科技有限公司，ml064310，ml063160）检测小鼠血清内IL-4，IL-6的含量，利用试剂盒内的稀释液将血清稀释5倍，每个样品重复3个孔，其余步骤按照说明书进行操作。
测定结束后，以标准品的浓度为横坐标，标准品对应的OD值为纵坐标绘制标准曲线并拟合曲线的线性回归方程，将样品的OD值代入方程内计算样品浓度，再乘以稀释倍数5后所得数据即为样品的实际浓度。拟合线性回归方程的相关系数R值需在0.95以上，试验数据才可使用。
2）IL-4水平变化：采用GraphPad Prism 8.0 版本进行单因素方差分析（ANOVA），每组6只小鼠均为统计分析对象（n=6）。如图3所示，SAN组和AK组小鼠血清中抗炎因子IL-4的水平远高于PBO组和CON组，存在极显著差异（P＜0.0001）。AK组小鼠血清中的IL-4水平略高于SAN组，但不存在显著性差异（P＞0.05）。PBO组小鼠和CON组小鼠血清中IL-4水平相近，不存在显著性差异（P＞0.05）。
3）IL-6水平变化：每组6只小鼠均为统计分析对象（n=6）。采用GraphPad Prism8.0 版本进行单因素方差分析（ANOVA）。如图4所示，与CON组小鼠相比，SAN组和AK组小鼠血清中促炎因子IL-6的水平较低，存在极显著性差异（P＜0.0001）。与SAN组小鼠相比，PBO组和CON组小鼠血清中IL-6水平较高，存在极显著性差异（P＜0.0001）。SAN组小鼠血清中IL-6的水平低于AK组小鼠，存在显著性差异（P＜0.05）。PBO组小鼠血清中IL-6的水平低于CON组小鼠，存在显著性差异（P＜0.05）。
4）皮肤组织收集：小鼠经眼球采血处死后，用高压过的无菌手术剪剪去小鼠背部创面皮肤，将每个皮肤样本分为2份放入5 mL离心管内。一份用作创面菌荷载量计算，一份用作病理组织切片观察。
5）皮肤菌荷载量测定：称量并记录用作创面菌荷载量计算的皮肤组织的重量。将皮肤组织剪成小块放入高压灭菌过的组织研磨器内，反复研磨8-10次，至管中组织成肉泥状。加入1 mL生理盐水，再研磨3-5次。用移液枪将管内组织匀浆转移至2 mL离心管中。在组织匀浆内加入生理盐水，按照100、103、106进行倍比稀释。各取100 μL稀释后的组织液接种至BHI琼脂培养基上，用一次性涂布棒涂布均匀，放入37℃恒温温箱内培养18～24 h。取出培养好的培养基，观察并记录不同稀释倍数下的菌落数量。按照以下公式计算每克皮肤组织中所含的细菌数量，其中N为培养基内菌落数量，G为皮肤样品重量。
图5为各组小鼠皮肤匀浆培养过后的培养基，图中A对应SAN组小鼠、B对应AK组小鼠、C对应PBO组小鼠、D对应CON组小鼠。每组6只小鼠均为统计分析对象（n=6），采用GraphPad Prism 8.0 版本进行单因素方差分析（ANOVA），结果如图6所示。
根据图5和图6可知，与CON组小鼠相比，SAN组与AK组小鼠在经过了7天的药物治疗后，皮肤菌荷载量下降，存在极显著性差异（P＜0.0001）。与SAN组小鼠相比，PBO组和CON组小鼠皮肤菌荷载量在细菌接种前后变化较小，存在极显著性差异（P＜0.0001）。与CON组小鼠相比，PBO组小鼠的菌荷载量略有下降，存在显著性差异（P＜0.05），推测可能与每日湿敷创面会带走部分细菌有关。与AK组小鼠相比，SAN组小鼠的皮肤菌荷载量略高，但不存在显著性差异（P＞0.05）。
6）皮肤病理组织切片制备：将用作病理组织切片观察的皮肤组织展平，放入5 mL离心管中。在管内加满10%中性福尔马林固定液，使组织完全浸泡在溶液中。将样本室温避光保存3天后，送至中国农业大学病理实验室进行切片制作。将制备好的皮肤组织切片分别在20×和40×的物镜（Nikon，DS-Ri2）倍数下进行组织观察，照片如图7所示。
图7中，A、B、C、D为20×物镜下的病理切片观察图，a、b、c、d为40×物镜下的病理切片观察图。图中黑色框内为真皮层局部放大图，黑色三角所示为成纤维细胞，黑色箭头所示为巨噬细胞，白色箭头所示为中性粒细胞。d图黑色框内可见真皮层存在菌团。图7中所有标尺的长度均为100 μm。
如图7所示，SAN组和AK组小鼠的皮肤病理组织切片结果为：均可见创面皮肤再上皮化，表皮连续，各层细胞排列整齐，皮肤结构分层清晰。真皮层内小血管轻微充血、出血，巨噬细胞、成纤维细胞丰富，提示创口愈合良好。炎性细胞整体含量较少，提示炎性反应轻微。部分小鼠表皮层存在轻微增厚。
PBO组和CON组小鼠的皮肤病理组织切片结果为：均见局部表皮不连续，表皮再上皮化不完全。真皮层结构疏松，提示真皮层仍存在坏死。皮肤组织表皮层与真皮层界限不清，各层细胞排列混乱；真皮层内有大量炎性细胞浸润，主要为中性粒细胞；均见真皮层内小血管出血、充血，且与SAN和AK组相较更为严重。CON组小鼠可见角质层增厚严重，角质层下疏松水肿。真皮层可观察到细菌菌团，提示造模成功。
由上述实施例和试验例可知，血根碱（SAN）对MRSP菌具有明显的抑制和杀伤作用，效果与阿米卡星（AK）无显著性差异；并且，血根碱对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌诱导的脓皮病模型小鼠有明显疗效，且效果与阿米卡星接近。但是阿米卡星可能会干扰正常菌群，长期应用可能导致非敏感菌的过度生长；而在开展上述实施例和试验例的过程中，未观察或检测到血根碱的副作用。
根据以上试验结果，血根碱对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌具有明显的抑制和杀伤作用，可以有效治疗因耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌引起的感染病，且未有副作用。天然低毒的血根碱或其盐在犬脓皮病的治疗和防止耐药性细菌的产生上展现巨大的潜力。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (8)
1.血根碱或其盐在制备由伪中间型葡萄球菌引起的感染病的防治药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述由伪中间型葡萄球菌引起的感染病为脓皮病。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述伪中间型葡萄球菌为犬源伪中间型葡萄球菌。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于，所述脓皮病的病原菌中包括耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌。
5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，血根碱的盐为血根碱盐酸盐。
6.根据权利要求1-5任一项所述的应用，其特征在于，所述防治药物为局部用药物。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述防治药物中还含有药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述防治药物的剂型为膏剂、喷剂、酊剂、软膏、乳膏、糊膏、凝胶剂、涂膜剂、搽剂、洗剂或者泡腾剂。
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