CN116390714A - 局部眼科组合物 - Google Patents

Abstract

一种局部眼科组合物，其包括治疗有效量的作为活性药物成分的毒蕈碱受体拮抗剂，和作为液体载剂的半氟化烷烃。所述局部眼科组合物治疗眼病。

Description

局部眼科组合物

本申请要求2020年10月8日提交的美国临时申请号63/089,263和2021年5月11日提交的美国非临时申请号17/317,551的优先权，所述两个专利出于所有目的如同完全阐述于本文中地以引用方式并入。

技术领域

本发明涉及溶解于作为液体载剂的半氟化烷烃中的毒蕈碱受体拮抗剂的局部眼科组合物，其中阿托品制剂被用于治疗近视。

背景技术

阿托品是抗毒蕈碱化合物，并且是毒蕈碱受体的竞争性拮抗剂。它具有抗副交感神经功能。它被用于诸如抗胆碱中毒和心动过缓的几种适应症。在眼部，在传统上它被用于散大瞳孔。近来，低剂量的阿托品被显示能够在青壮年中减弱近视的进展(Li 2019)。对于近视适应症，截至目前阿托品仅在几个国家被批准。

近视或近视眼是人可清楚地看见近处的物体，但离得远的物体模糊不清的病状。如果眼球过长或角膜(眼的透明前盖)过弯，使得远处的物体不能被正确聚焦于视网膜，就会出现近视。近视是全球最常见的眼部病症。约30％的美国人群患有近视。近视的病因未知。遗传学被认为在近视中发挥作用。近视发展可能受人使用眼睛的方式影响。它可能在学龄儿童中出现并且进展直至约20岁。然而，由于视觉压力或诸如糖尿病的健康状况，近视也可能在成人中发展。近视可能提高其他眼病的风险(Wu 2019)。

阿托品溶液(水基)制剂已在多个临床试验中受测试，并且被证实能够减缓近视进展(Cooper 2018，Li 2019，Yam 2020)。在水基制剂中，一旦容器暴露于空气，在中性pH溶液下阿托品易于降解，因此在中性pH下产品的保存期通常短于1年。制剂中3-6的低pH被用来提高阿托品在溶液中的稳定性(Berton 2020，Saito 2019)。然而，低pH也已知造成眼内刺激和不适。

本发明使用有机液体载剂来形成更稳定且刺激性更小的阿托品制剂以用于眼部适应症，特别是近视。

发明内容

在一个实施方案中，局部眼科组合物包括：治疗有效量的作为活性药物成分的毒蕈碱受体拮抗剂，和作为液体载剂的半氟化烷烃。局部眼科组合物治疗眼病。

在另一个实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂选自由以下组成的组：阿托品、哌仑西平、阿地溴铵、苯扎托品、环喷托酯、苯海拉明、多西拉敏、乘晕宁、双环胺、达非那新、黄酮哌酯、羟嗪、异丙托铵、美贝维林、奥昔布宁、丙环定、东莨菪碱、索非那新、托吡卡胺、噻托溴铵、三己芬迪和托特罗定。

在另一个实施方案中，毒蕈碱受体拮抗剂是阿托品。

在另一个实施方案中，阿托品呈游离碱形式或盐形式。

在另一个实施方案中，呈游离碱形式的阿托品的浓度为约0.0001％至约1.0％(w/w)，优选约0.001％至约0.1％(w/w)，更优选约0.01％至约0.1％(w/w)。

在另一个实施方案中，半氟化烷烃是具有式RFRH或具有式RFRHRF的化合物，其中RF为具有15个或更少碳原子的全氟化烃，且其中RH为具有15个或更少碳原子的非氟化烃。

在另一个实施方案中，半氟化烷烃选自F4H5、F4H6、F6H4、F6H6、F6H8和F6H10。

在另一个实施方案中，半氟化烷烃是F6H8(全氟己基辛烷)。

在另一个实施方案中，局部眼科组合物还包括选自由苯乙醇、乙醇、异丙醇、甘油、丙二醇和聚乙二醇组成的组的有机助溶剂。

在另一个实施方案中，有机助溶剂是乙醇或苯乙醇。

在另一个实施方案中，乙醇的浓度为约1％(w/w)或更低，例如0.001％至1％(w/w)；或苯乙醇的浓度为约1％(w/w)或更低，例如0.001％至1％(w/w)。

在另一个实施方案中，局部眼科组合物是非水溶液、悬浮液或乳液。

在另一个实施方案中，局部眼科组合物中的阿托品化学稳定至少0.5年、至少1年或至少2年。

在另一个实施方案中，局部眼科组合物适于作为滴眼剂局部施用于患者的眼睛。

在另一个实施方案中，局部眼科组合物造成眼内极小的刺激。

在另一个实施方案中，眼病是近视。

在另一个实施方案中，局部眼科组合物减缓近视进展。

要理解前文的概述和下文的具体实施方式是示例性和解释性的，并意图提供对如所要求的本发明的进一步解释。

附图简要说明

被包括以提供对本发明的进一步理解，并入本说明书并构成说明书一部分的附图图示本发明的实施方案，并且与描述一起用来解释本发明的原理。

在附图中：

图1示出阿托品(tR：12.947)标准溶液的色谱图。

图2示出家兔中的瞳孔散大效果：CBT-009＝阿托品F6H8制剂，比较物＝阿托品水制剂。

具体实施方式

现将详细地提及本发明的实施方案，其实例示于附图中。

毒蕈碱受体拮抗剂是阻滞毒蕈碱乙酰胆碱受体的活性的抗胆碱药。毒蕈碱受体拮抗剂可为阿托品，哌仑西平，阿地溴铵，苯扎托品，环喷托酯，苯海拉明，多西拉敏，乘晕宁，双环胺，达非那新，黄酮哌酯，羟嗪，异丙托铵，美贝维林，奥昔布宁，丙环定，东莨菪碱，索非那新，托吡卡胺，噻托溴铵，三己芬迪，或托特罗定。优选地，毒蕈碱受体拮抗剂是阿托品或哌仑西平。更优选地，毒蕈碱受体拮抗剂是阿托品。

本发明的局部眼科组合物包括治疗有效量的毒蕈碱受体拮抗剂，例如阿托品。治疗有效量意指有效防止受治疗受试者现有症状的发展或减轻现有症状的量。有效量的确定在本领域技术人员的能力以内，尤其是按照本文提供的详细公开内容。

阿托品溶液(水)制剂先前已被证实在治疗近视，特别是减少近视进展上有效(Li2019，Wu 2019)。一水合硫酸阿托品水制剂在临床上已以0.01％至1％的浓度受测试，并且所有这些剂量已在近视治疗中展现功效。溶液制剂具有两个缺陷。第一是，一旦容器暴露于空气，溶液中中性pH下的阿托品易于降解，因此在中性pH下产品的保存期通常短于1年。此外，在溶液中阿托品的这种不稳定性要求制剂在约一个月内被使用。第二个缺点是，用来减少阿托品降解以增加产品保存期的诸如3.5至6.0pH范围内的低pH可能造成人眼的刺激或不适，如患者不良事件报告的。

本发明提供使用半氟化烷烃，具体而言F6H8(全氟己基辛烷)，作为液体载剂以溶解阿托品的组合物来消除溶液制剂的两个缺点。F6H8是具有共价结合的两个互不混溶部分(烃段RH和全氟化段RF)的两亲性液体。在本发明的组合物中使用的其他相关类似物可为F4H5(全氟丁基戊烷)、F4H6(全氟丁基己烷)、F6H4(全氟己基丁烷)、F6H6(全氟己基己烷)和F6H10(全氟己基癸烷)。

F6H8的结构如下所示。

在一些实施方案中，本发明基于实施例中所述的研究，其显示阿托品可以足够的浓度溶解于F6H8中以具有生物学功效。阿托品于F6H8中的制剂在室温下长时间稳定，并且可制成具有足够保存期的产品以实现监管批准。在动物模型研究中，当以高于一些适应症所需的浓度给药时，这种制剂在眼内无刺激性。

实施例1和2证实，在添加三种助溶剂的情况下，可在F6H8中实现约0.0001至0.15％的稳定阿托品制剂。实施例7示出，在家兔模型中，阿托品游离碱F6H8有机制剂的等效剂量实现了与一水合硫酸阿托品水制剂类似的功效。结合0.01-1％的水制剂的已知功效，本研究表明F6H8制剂中约0.0001％至约1.0％或0.0001％至1.0％(游离碱，w/w)，优选约0.001％至约0.1％或0.001％至0.1％，更优选约0.01％至约0.1％或0.01％至0.1％的可实现浓度范围也将有效。

实施例

实施例1：阿托品于F6H8中的溶解

方法：根据以下程序研究阿托品游离碱的配制：

1.溶解阿托品

在4mL F6H8或具有0.1％乙醇的F6H8中添加多于4mg阿托品粉末，从而产生约1mg/mL。搅拌制剂2天。

2.制备HPLC样品

对上述制剂进行离心并且经0.45微米滤器过滤上清液而无进一步稀释。由每种溶剂制备一个样品以用于HPLC分析。

3.分析HPLC样品

使用RP-HPLC法，利用与保护柱(12.5mm×2.1mm内径)连接的Agilent EclipsePlus C18 HPLC柱(150mm×2.1mm内径)，以0.2ml/min的流速从100％水到100％乙腈梯度洗脱来分析样品。在UV 220nm下监测色谱图。阿托品峰在保留时间12.947，如图1中色谱所示。

结果

在仅F6H8中阿托品的溶解度被测定为129μg/ml(0.0129％w/w)。当添加0.1％乙醇时，溶解度为171.5μg/ml(0.0173％w/w)。在该具体研究中，使用阿托品的游离碱形式，而单硫酸盐先前在批准用于近视用途的溶液制剂中使用。游离碱的MW 83％等效于单硫酸盐形式的阿托品溶液制剂。0.01％阿托品单硫酸盐溶液先前显示出在临床上对近视治疗有效并且在几个国家被批准。该0.01％阿托品盐浓度等效于0.0083％的游离碱浓度。因为在F6H8中观察到的阿托品游离碱最大为0.0129％，推断F6H8制剂可递送足够量的阿托品以治疗近视。观察到的0.0129％浓度比功效所需的0.0083％高出约55％。另外，观察到通过将乙醇加入制剂，阿托品的浓度可进一步提高。添加仅0.1％乙醇使溶解度提高33％。更高含量的乙醇将有可能进一步提高阿托品于F6H8中的溶解度。F6H8制剂中阿托品的浓度示于表1中。

表1：F6H8制剂中阿托品的浓度

样品描述	F6H8中的阿托品	具有0.1％(v/v)乙醇的F6H8中的阿托品
			溶解度(浓度)	129.0μg/mL	171.5μg/mL

使用略有不同的制备方法，将过量的阿托品游离碱加入100％F6H8。将混合物加热至40℃并搅拌15分钟。在离心并静置16小时后，样品(样品ID 1379308)被等分试样，测量浓度为214.55μg/mL。添加另外的阿托品游离碱并持续搅拌66小时，对样品(样品ID 140933)进行离心、等分试样，测量浓度为219.47μg/mL。因此，对214.55μg/mL和219.47μg/mL求平均值，阿托品游离碱于100％F6H8中的饱和溶解度被确定为217.01μg/mL。

通过添加助溶剂提高阿托品溶解度：

进行另外的研究来测定当添加助溶剂时阿托品的稳定浓度。如表2中所示，添加0.25％、0.50％或0.75％苯乙醇分别使阿托品溶解度提高至0.043％、0.055％或0.085％，添加0.25％、0.5％或0.75％乙醇分别使阿托品溶解度提高至0.031％、0.089％或0.108％，添加0.25％、0.5％、0.75％或2％异丙醇分别使阿托品溶解度提高至0.046％、0.055％、0.082％或0.153％。在10×系列稀释F6H8中0.75％助溶剂的每一样品后，阿托品制剂在低至约0.00008％含量下保持稳定。

表2具有各种浓度下不同类型助溶剂的F6H8中阿托品的浓度苯乙醇作为助溶剂的组合物

乙醇作为助溶剂的组合物

异丙醇作为助溶剂的组合物

实施例2：阿托品F6H8制剂随着时间推移稳定

方法

如实施例1中所述将阿托品溶解于F6H8中。通过HPLC法在25℃在1、3、6、9和12个月时测量阿托品的含量。如果含量维持在原始含量的90％-110％，则制剂中的阿托品被定义为稳定。

结果

在研究时段中，如下表3中所示阿托品是稳定的。

表3：F6H8制剂中的阿托品稳定性

时间点(月)	1	3	6	9	12
						保留零时的90％-110％(是/否)	是	是	是	是	是

实施例3：阿托品F6H8制剂在家兔研究中是可耐受的方法

在家兔中评估阿托品F6H8制剂的眼部耐受性。研究设计和评价示于表4和5中。

表4：实验设计

组	动物和性别数	右眼	左眼	给药频率
					3	3F	载剂	0.01％阿托品	每天四次，相隔4小时

表5：研究评价

结果和结论

阿托品制剂在家兔中耐受良好，没有明显的刺激和不适问题。

实施例4：F6H8中阿托品的稳定性

通过将适当量的阿托品游离碱溶解于100％F6H8中来制备0.0125％阿托品。在25℃下评估随着时间推移阿托品制剂的稳定性。在1个月、2个月和3个月时间点，将阿托品用乙腈提取两次并且如实施例1中所述通过HPLC定量。下表6示出阿托品含量保持稳定至少3个月，具有与目标浓度极小的变化。首次公开的该实施例证实本发明中的阿托品制剂在室温下稳定。

表6：100％F6H8中0.0125％阿托品游离碱的稳定性

在另一个实验中，将0.01％阿托品溶解于F6H8和0.25％苯乙醇中。在25℃和40℃下评估随着时间推移阿托品制剂的稳定性。在选定时间点，将阿托品用乙腈提取两次并且如实施例1中所述通过HPLC定量。下表7示出在第32天和84天时阿托品含量保持稳定，与第0天的基线无明显变化。在室温和加速温度下结果类似。加速温度下的稳定性表明，制剂可潜在地在室温下存储数月或数年而无阿托品的明显损失。首次公开的该实施例证实本发明中的阿托品制剂在室温下长时间存储稳定。

表7F6H8和0.25％苯乙醇中阿托品的稳定性

实施例5：家兔中体内眼部耐受性

研究设计：

三只雌性荷兰带兔的右眼给药40μL对照品(生理盐水中的0.01％一水合硫酸阿托品)，且左眼给药40μL F6H8中0.25％苯乙醇(PEA)的0.012％阿托品游离碱，1滴/眼，每天两次，相隔12小时，连续14天。在给药前(两次，在不同日)和给药期间最后日给药后每日，对所有动物进行眼部不适观察和眼部刺激观察。在给药前(一次)和最后日给药后第1天和第14天一次，对所有动物进行角膜检查。首次给药日被命名为第1天。

第14天的眼部刺激得分在下表8中示出。其他时间点有类似或更好的结果。

表8

McDonald-Shadduck评分(正得分的分类)示于下表9中。

表9

结论：在所有动物中阿托品制剂都耐受良好。任一动物都未观察到明显的眼部刺激或眼炎发现。在研究期间两个物种都没有试验品相关的对体重和摄食量的影响。在安排的检查期间所有动物都没有其他试验品相关的眼炎发现。该实施例证实所要求的新颖阿托品制剂对于眼部使用的安全性。

实施例6：狗的体内眼部耐受性

研究设计

三只雄性比格犬的右眼给药40μL对照品(生理盐水中的0.01％一水合硫酸阿托品)，且左眼给药40μLF6H8中0.25％苯乙醇(PEA)的0.012％阿托品游离碱，1滴/眼，每天两次，相隔12小时，连续14天。在给药前(两次，在不同日)和给药期间最后日给药后每日，对所有动物进行眼部不适观察和眼部刺激观察。在给药前(一次)和最后日给药后第1天和第14天一次，对所有动物进行角膜检查。首次给药日被命名为第1天。

第14天的眼部刺激得分示于下表10中。其他时间点有类似或更好的结果。

表10

McDonald-Shadduck评分(正得分的分类)示于下表11中。

表11

结论：在所有动物中阿托品制剂都耐受良好。任一动物都未观察到明显的眼部刺激或眼炎发现。在研究期间两个物种都没有试验品相关的对体重和摄食量的影响。在安排的检查期间所有动物都没有其他试验品相关的眼炎发现。该实施例证实所要求的新颖阿托品制剂对于眼部使用的安全性。

实施例7：家兔模型中体内药理学效力

在家兔模型中测试在F6H8和0.25％苯乙醇中阿托品制剂的药理学效力。效力被度量为正常未试验过的家兔中的瞳孔散大。阿托品的F6H8制剂的三个浓度(0.012％、0.01％、0.08％)与已知具有良好瞳孔散大效果的0.01％阿托品的水制剂进行比较。一滴每种制剂给至眼中，并且在后续8小时测量眼和瞳孔大小。

研究设计

十五只雌性荷兰带兔被分成五组，每组包括3只动物。通过Provantis或Excel，基于体重将三只雌性荷兰带兔随机分至每组。动物的给药以二阶段进行，阶段1和阶段2。

在阶段1，每只动物双眼给药40μL测试品(参见下表12)。给药的第一日被命名为第1天。在基线(给药前30分钟)，第1天给药后0.5h、1h、2h、3h、4h、6h、8h测量所有动物的双眼瞳孔大小。分析瞳孔大小测量数据的功效，以确定载剂中哪一剂量的阿托品游离碱等效于对照组生理盐水中0.01％一水合硫酸阿托品的剂量。允许动物有2天间歇期。

在阶段2，每只动物双眼给药40μL测试品(参见下表13)14天。阶段2中给药的第一日被命名为第4天。在基线(给药前30分钟)、第4天和第17天给药后0.5h、1h、2h、3h、4h、6h、8h测量所有动物的双眼瞳孔大小。

表12：阶段1的研究设计

注：^a替换动物(如果有的话)将按照测试设施SOP编号并被包括在研究报告中。载剂：1-(全氟己基)辛烷中0.25％苯乙醇

表13：阶段2的研究设计

注：^a替换动物(如果有的话)将按照测试设施SOP编号并被包括在研究报告中。

^b从阶段1功效数据确定等效剂量。给出与生理盐水中0.01％一水合硫酸阿托品等效功效的载剂中阿托品游离碱的优化浓度。

载剂：1-(全氟己基)辛烷中0.25％苯乙醇

结果

如图2中所示，阿托品的F6H8制剂增加瞳孔大小，具有与其水制剂类似的效力。0.01％F6H8制剂与水制剂相比稍微有效一点。该观察表明新颖的阿托品F6H8与已证实的阿托品制剂一样有效，并且可用于治疗利用水基制剂的疾病。图2示出家兔中的瞳孔散大效果，CBT-009＝阿托品F6H8制剂，比较物＝阿托品水制剂。

本领域技术人员将明白的是，可在不脱离本发明的精神或范围的情况下在本发明中作出各种修改和变化。因此，本发明意图涵盖对本发明的修改和变化，前提是它们属于随附权利要求书和其等效物的范围内。

参考文献

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Claims (17)

1.一种局部眼科组合物，其包含：

治疗有效量的作为活性药物成分的毒蕈碱受体拮抗剂；和

作为液体载剂的半氟化烷烃；

其中所述局部眼科组合物治疗眼病。

2.如权利要求1所述的局部眼科组合物，其中所述毒蕈碱受体拮抗剂选自由以下组成的组：阿托品，哌仑西平，阿地溴铵，苯扎托品，环喷托酯，苯海拉明，多西拉敏，乘晕宁，双环胺，达非那新，黄酮哌酯，羟嗪，异丙托铵，美贝维林，奥昔布宁，丙环定，东莨菪碱，索非那新，托吡卡胺，噻托溴铵，三己芬迪，和托特罗定。

3.如权利要求2所述的局部眼科组合物，其中所述毒蕈碱受体拮抗剂是阿托品。

4.如权利要求3所述的局部眼科组合物，其中所述阿托品呈游离碱形式或盐形式。

5.如权利要求4所述的局部眼科组合物，其中所述呈游离碱形式的阿托品的浓度为约0.0001％至约1.0％(w/w)，优选约0.001％至约0.1％(w/w)，更优选约0.01％至约0.1％(w/w)。

6.如权利要求1所述的局部眼科组合物，其中所述半氟化烷烃是具有式RFRH或具有式RFRHRF的化合物，其中RF为具有15个或更少碳原子的全氟化烃，且其中RH为具有15个或更少碳原子的非氟化烃。

7.如权利要求6所述的局部眼科组合物，其中所述半氟化烷烃选自由以下组成的组：F4H5、F4H6、F6H4、F6H6、F6H8和F6H10。

8.如权利要求7所述的局部眼科组合物，其中所述半氟化烷烃是F6H8(全氟己基辛烷)。

9.如权利要求1所述的局部眼科组合物，其还包含选自由苯乙醇、乙醇、异丙醇、甘油、丙二醇和聚乙二醇组成的组的有机助溶剂。

10.如权利要求9所述的局部眼科组合物，其中所述有机助溶剂是乙醇或苯乙醇。

11.如权利要求10所述的局部眼科组合物，其中所述乙醇的浓度为约1％(w/w)或更低；或所述苯乙醇的浓度为约1％(w/w)或更低。

12.如权利要求1所述的局部眼科组合物，其中所述局部眼科组合物是非水溶液、悬浮液或乳液。

13.如权利要求12所述的局部眼科组合物，其中所述局部眼科组合物中的所述阿托品化学稳定至少0.5年、至少1年或至少2年。

14.如权利要求1所述的局部眼科组合物，其中所述局部眼科组合物适于作为滴眼剂局部施用于患者的眼睛。

15.如权利要求14所述的局部眼科组合物，其中所述局部眼科组合物造成眼内极小的刺激。

16.如权利要求1所述的局部眼科组合物，其中所述眼病是近视。

17.如权利要求16所述的局部眼科组合物，其中所述局部眼科组合物减缓近视进展。

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