CN116338071A - 一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，包括对DSPE、1‑StePE‑MPEG、未知杂质、MPEG2000和SA的检测，步骤如下：制备供试品溶液；制备对照溶液；制备参比溶液；薄层色谱法测定。本发明一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检测方法，利用薄层色谱法，能够有效检测出其中的各种杂质，且对于浓度较低的杂质也能够有效检测出来，检测效果好，检测方法的稳定性好，结果的准确度高，实用性强。
Description
技术领域
本发明涉及有机化合物纯度检验技术领域，特别是涉及一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法。
背景技术
培化磷脂酰乙醇胺(DSPE-MPEG2000)是一种药用辅料，其是1,2-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)的聚乙二醇(PEG)化衍生物，因聚乙二醇末端采用了甲氧基封端，使PEG部分失活不能继续反应，因此称为MPEG。当PEG分子量为2000时，DSPE-MPEG又称为DSPE-MPEG2000。
DSPE-MPEG2000的合成原料为DSPE和MPEG2000，原料可能会由于未反应完全而引入到DSPE-MPEG2000中，同时，DSPE-MPEG2000在合成及储藏的过程中容易发生降解，生成DSPE、1-StePE-MPEG2000(分子式如下)、MPEG2000和SA(硬脂酸)等杂质，影响其纯度和质量，进而影响使用效果。
1-stePE-MPEG2000的结构式为：
DSPE-MPEG2000的紫外吸收波长较低(205nm)，处于紫外吸收波长的末端，容易受其他溶剂的干扰，所以一般不用紫外作为检测器。蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测器时不受梯度洗脱的影响，是现有技术中通常采用的检测器。
但本申请发明人在实现本申请实施例中发明技术方案的过程中，发现上述技术至少存在如下技术问题：
使用蒸发光散射检测器(ELSD)作为检测器时，在较大的进样量范围内，响应信号与组分的进样量可能呈非线性关系。RID的响应信号较大，可作为含量测定用的检测器，但在检测有关物质时，有关物质的量较小，信噪比达不到要求，因此难以实现杂质的有效检测，测量准确度低，不具有实际参考价值。
发明内容
本发明通过提供一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，解决了现有技术中培化磷脂酰乙醇胺中杂质检测难度大，检测准确度低的问题。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，包括对DSPE、1-StePE-MPEG和未知杂质的检测，步骤如下：
S1、制备供试品溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于三氯甲烷-甲醇的混合溶剂中，定容制备成供试品溶液；
S2、制备第一对照溶液：称取适量DSPE对照品、1-StePE-MPEG对照品以及DSPE-MPEG2000对照品溶解于氯仿-甲醇-水的混合溶剂中，定容制备成第一对照溶液；
S3、制备第一参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于步骤S2中制备的第一对照溶液中，定容制备成第一参比溶液；
S4、薄层色谱法测定：取上述供试品溶液、第一对照溶液和第一参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，然后将薄层板置于第一展开剂中展开，取出薄层板，预热处理，处理毕冷却至室温后喷涂第一显色剂，然后加热处理，视检，比较点有供试品溶液薄层板上的斑点与点有第一对照溶液薄层板上的斑点的颜色深度。
在本发明一个较佳实施例中，还包括对杂质MPEG2000的检测，步骤如下：
S2-1、制备第二对照溶液：称取适量MPEG2000对照品溶解于氯仿-甲醇-水的混合溶剂中，定容制备成第二对照溶液；
S3-1、制备第二参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于步骤S2-1中制备的第二对照溶液中，定容制备成第二参比溶液；
S4-1、薄层色谱法测定：取权利要求1中制备的供试品溶液、第二对照溶液和第二参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，将薄层板置于所述第一展开剂中展开，取出薄层板，预热处理，处理毕冷却至室温，喷涂第二显色剂，视检，比较点有供试品溶液薄层板上的斑点与点有所述第二对照溶液薄层板上的斑点的颜色深度。
在本发明一个较佳实施例中，还包括对杂质SA的检测，步骤如下：
S2-2、制备第三对照溶液：称取适量SA对照品溶解于氯仿-甲醇-水的混合溶剂中，定容制备成第三对照溶液；
S3-2、制备第三参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于步骤S2-2中制备的第三对照溶液中，定容制备成第三参比溶液；
S4-2、薄层色谱法测定：取权利要求1中制备的供试品溶液、第三对照溶液和第三参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，点样毕，将薄层板置于第二展开剂中展开，取出薄层板，晾干，喷涂所述第一显色剂，然后加热处理，视检，比较点有供试品溶液薄层板上的斑点与点有所述第三对照溶液薄层板上的斑点的颜色深度。
在本发明一个较佳实施例中，所述S1中，所述供试品溶液中DSPE-MPEG2000的浓度为40mg/ml。
在本发明一个较佳实施例中，所述S2中，所述第一对照溶液中，所述DSPE、1-StePE-MPEG和DSPE-MPEG2000的浓度分别为0.2mg/ml、0.48mg/ml和0.41mg/ml。
在本发明一个较佳实施例中，所述第一展开剂为氯仿-甲醇-水-冰醋酸以94:14:1.6:0.4的体积比混合的混合物。
在本发明一个较佳实施例中，所述第一显色剂为硫酸铜的磷酸溶液。
在本发明一个较佳实施例中，所述第二显色剂为碘化铋钾试剂。
在本发明一个较佳实施例中，所述预热处理的工艺条件为：温度100℃以上，时间2～3分钟。
在本发明一个较佳实施例中，所述加热处理的工艺条件为：温度160～170℃，时间10～15分钟。
本发明的有益效果是：本发明一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检测方法，利用薄层色谱法，具有检测速度快，成本低的特点，能够有效检测出其中的各种杂质，且对于浓度较低的杂质也能够有效检测出来，检测效果好，检测方法的稳定性好，结果的准确度高，实用性强。
附图说明
图1是1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000对照溶液、SA对照溶液、MPEG2000对照溶液采用检测DSPE、1-StePE-MPEG2000及未知杂质的薄层色谱条件进行薄层色谱测定的效果图；
图2是经氧化破坏、碱破坏、酸破坏、光照破坏和热破坏后的供试品溶液采用检测DSPE、1-StePE-MPEG2000及未知杂质的薄层色谱条件进行薄层色谱测定的效果图；
图3是1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000对照溶液、SA对照溶液、MPEG2000对照溶液采用检测MPEG2000的薄层色谱条件进行薄层色谱测定的效果图；
图4是经氧化破坏、碱破坏、酸破坏、光照破坏和热破坏后的供试品溶液分别采用检测MPEG2000的薄层色谱条件进行薄层色谱测定的效果图；
图5是1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000对照溶液、SA对照溶液、MPEG2000对照溶液采用检测SA的薄层色谱条件进行薄层色谱测定的效果图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
请参阅图1-5，本发明实施例包括：
实施例1
一种培化磷脂酰乙醇胺中DSPE、1-StePE-MPEG2000、MPEG2000、SA及未知杂质的检测方法
具体检测方法为薄层色谱法，所用薄层板的规格为：TLC Silica gel 60 F254，默克。
所用展开剂和显色剂包括：
第一展开剂：氯仿-甲醇-水-冰醋酸以94:14:1.6:0.4的体积比的混合液。
第二展开剂：正己烷-乙醚-冰醋酸以70:30:1的体积比混合的混合液。
第一显色剂：硫酸铜的磷酸溶液，其制备方法为：称取无水硫酸铜10g，溶解于8ml磷酸和100ml水中而成。
第二显色剂：碘化铋钾(Dragendorff’s)试剂，临用前配制，具体配置方法为：称取次硝酸铋0.85g，溶解于10ml醋酸和40ml水中，并剧烈震摇，作为溶液A；称取碘化钾8g，溶解于20ml水中，作为溶液B；取4ml溶液A和溶液B等比例混合溶液，并加入20ml质量浓度为20％的稀醋酸溶液。
具体检测步骤如下：
第一步、制备供试品溶液：
称取适量DSPE-MPEG2000溶于三氯甲烷-甲醇(体积比为1：1)的混合溶剂中，定容制备成DSPE-MPEG2000浓度为40mg/ml的供试品溶液。
第二步、制备对照溶液：
制备第一对照溶液：称取适量DSPE对照品、1-StePE-MPEG对照品以及DSPE-MPEG2000对照品溶解于氯仿-甲醇-水(体积比为65:25:4)的混合溶剂中，定容制备成第一对照溶液，该第一对照溶液中，所述DSPE、1-StePE-MPEG和DSPE-MPEG2000的浓度分别为0.2mg/ml、0.48mg/ml和0.41mg/ml，分别相当于所述供试品溶液中对应物质浓度的0.5％、1.2％和1.0％。
制备第二对照溶液：称取适量MPEG2000对照品溶解于氯仿-甲醇-水(体积比为65:25:4)的混合溶剂中，定容制备成MPEG2000浓度为0.52mg/ml的第二对照溶液，该第二对照溶液中，所述MPEG2000的浓度相当于所述供试品溶液中相对应物质含量的1.3％。
制备第三对照溶液：称取适量SA对照品溶解于氯仿-甲醇-水(体积比为65:25:4)的混合溶剂中，定容制备成SA浓度为0.20mg/ml的第三对照溶液，该第三对照溶液中，所述SA的浓度相当于所述供试品溶液中相对应物质含量的0.5％。
第三步、制备参比溶液：
制备第一参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于所述第一对照溶液中，定容制备成第一参比溶液，所述第一参比溶液中，DSPE-MPEG2000的浓度为40mg/ml。
制备第二参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于上述第二对照溶液中，定容制备成第二参比溶液，该溶液中DSPE-MPEG2000的浓度为40mg/ml。
制备第三参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于所述第三对照溶液中，定容制备成第三参比溶液，该溶液中DSPE-MPEG2000的浓度为40mg/ml。
第四步、检测：
A、对DSPE、1-StePE-MPEG2000及未知杂质的检测
取上述供试品溶液、第一对照溶液和第一参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，然后将薄层板置于上述第一展开剂中展开，取出薄层板，在100℃以上加热2～3min后冷却至室温，喷涂上述第一显色剂，然后再在160～170℃下加热10～15min，直到显色斑点全部出现，视检，若杂质斑点的颜色深度与对照溶液相应斑点的颜色深度相比，同样深或者更浅，则说明待检测样品DSPE-MPEG2000中DSPE含量不超过0.5％，1-StePE-MPEG含量不超过1.2％，未知杂质不得超过1.0％。
B、对MPEG2000杂质的检测
取上述供试品溶液、第二对照溶液和第二参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，将薄层板置于所述第一展开剂中展开，取出薄层板，在100℃以上加热2～3分钟后冷却至室温，喷涂第二显色剂，使显色斑点全部出现，视检，若杂质斑点的颜色深度与对照溶液相应斑点的颜色深度相比，同样深或者更浅，则说明待检测样品DSPE-MPEG2000中MPEG2000杂质的含量不超过1.3％。
C、对SA杂质的检测
取上述供试品溶液、第三对照溶液和第三参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，点样毕，将薄层板置于第二展开剂中展开，取出薄层板，晾干，喷涂所述第一显色剂，然后在160～170℃下加热10～15min，直到显色斑点全部出现，视检，若杂质斑点的颜色深度与对照溶液相应斑点的颜色深度相比，同样深或者更浅，则说明待检测样品DSPE-MPEG2000中SA杂质的含量不超过0.5％。
结果判定，若上述杂质斑点颜色均不比相应的对照斑点颜色深，说明待检测样品DSPE-MPEG2000的纯度符合要求，否则纯度不符合要求。
下面分析该检测方法的性能。
(一)首先进行溶液配置，具体如下。
DSPE对照溶液：取DSPE适量，精密称定，以氯仿-甲醇-水(体积比为65:25:4)为溶剂溶解，并稀释制成每1ml含0.2mg DSPE的溶液。
1-StePE-MPEG2000对照溶液：取1-StePE-MPEG2000适量，精密称定，以氯仿-甲醇-水(体积比为65:25:4)为溶剂溶解并，稀释制成每1ml含0.48mg 1-StePE-MPEG2000的溶液。
DSPE-MPEG2000对照溶液：取DSPE-MPEG2000适量，精密称定，以氯仿-甲醇-水(体积比为65:25:4)为溶剂溶解，并稀释制成每1ml含0.4mg DSPE-MPEG2000的溶液。
MPEG2000对照溶液：取MPEG2000适量，精密称定，以氯仿-甲醇(体积比为1:1)为溶剂溶解，并稀释制成每1ml含0.52mg MPEG2000的溶液。
SA对照溶液：取SA适量，精密称定，以氯仿-甲醇(体积比为1:1)为溶剂溶解，并稀释制成每1ml含0.2mg SA的溶液。
供试品溶液：取DSPE-MPEG2000样品适量，精密称定，以氯仿-甲醇(体积比为1:1)为溶剂制成每1ml含40mgDSPE-MPEG2000的溶液。
3种杂质(1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000)对照溶液：精密取1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000适量，以氯仿-甲醇-水(体积比为65:25:4)为溶剂制成每1ml含0.48mg 1-StePE-MPEG2000、0.2mg DSPE、0.4mgDSPE-MPEG2000的溶液，作为3种杂质对照溶液。
3种杂质对照参比溶液：取DSPE-MPEG2000样品适量，精密称定，以3种杂质对照溶液为溶剂，制成每1ml含40mg DSPE-MPEG2000样品的溶液，作为3种杂质对照参比溶液。
MPEG2000参比溶液：取DSPE-MPEG2000样品适量，精密称定，以MPEG2000对照溶液为溶剂，制成每1ml含40mg DSPE-MPEG2000样品的溶液，作为MPEG2000参比溶液。
SA参比溶液：取DSPE-MPEG2000样品适量，精密称定，以SA对照溶液为溶剂，制成每1ml含40mg DSPE-MPEG2000样品的溶液，作为SA参比溶液。
(二)供试品溶液的强制降解方法
氧化破坏：取供试品溶液0.1ml，加入1μl质量分数为30％的H2O2，混匀，常温反应1小时后，备用。
碱破坏：取供试品溶液0.1ml，加入1μl 0.1mol/L的NaOH溶液，混匀，常温反应1小时后，备用。
酸破坏：取供试品溶液0.1ml，加入1μl 1mol/L的HCL，混匀，60℃反应10分钟后再常温反应50分钟后，备用。
光照破坏：取供试品溶液0.2ml，于15000lx的光照下放置24小时，备用。
热破坏：取适量DSPE-MPEG2000样品于80℃下放置1小时，称取上述热破坏后的DSPE-MPEG2000样品适量，精密称定，以三氯甲烷-甲醇(1:1)为溶剂制成每1ml含40mg的溶液，备用。
(三)专属性验证
取上述制备的1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000对照溶液、SA对照溶液、MPEG2000对照溶液各10μl点于薄层板的同一点上，采用检测DSPE、1-StePE-MPEG2000及未知杂质的薄层色谱条件进行测定，杂质检查系统专属性试验结果见图1。
结果与分析：由图1可知，在3种杂质(1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000)检查系统下，DSPE和1-StePE-MPEG2000的Rf值(比移值)不同，且不与DSPE-MPEG2000的Rf值重叠，其中1-StePE-MPEG2000和DSPE的分离度、DSPE-MPEG2000和1-StePE-MPEG2000的分离度均大于1。SA在主斑点上方，MPEG2000在该检查系统下不显色，因此SA和MPEG2000不干扰DSPE和1-StePE-MPEG2000及未知杂质的检查。
将上述进行氧化破坏、碱破坏、酸破坏、光照破坏和热破坏后的供试品溶液采用检测DSPE、1-StePE-MPEG2000及未知杂质的薄层色谱条件进行点样测试，结果如图2所示。由图2可知，酸破坏和碱破坏，可破坏出少量的1-StePE-MPEG2000及未知杂质，破坏出的未知杂质和主斑点的分离较好。因此，DSPE、1-StePE-MPEG2000及未知杂质的检查方法专属性良好。
取上述制备的1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000对照溶液、SA对照溶液、MPEG2000对照溶液各10μl点于薄层板的同一点上，采用检测MPEG2000的薄层色谱条件进行点样测试，结果如图3所示。由图3可知，在MPEG2000的检查系统下，MPEG2000的Rf值不与主斑点的Rf值重叠，和主斑点的分离度大于1。SA和DSPE在该检查条件下不显色，1-StePE-MPEG2000和MPEG2000的显色斑点不相邻，因此SA、DSPE和1-StePE-MPEG2000不干扰杂质MPEG2000的检查。
将上述进行氧化破坏、碱破坏、酸破坏、光照破坏和热破坏后的供试品溶液采用检测MPEG2000的薄层色谱条件进行点样测试，结果如图4所示。由图4可知，酸破坏可破坏出1-StePE-MPEG2000，碱破坏可破坏出MPEG2000。因此，MPEG2000的检查方法专属性良好。
取上述制备的1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000对照溶液、SA对照溶液、MPEG2000对照溶液各10μl点于薄层板上，采用检测SA的薄层色谱条件进行点样测试，结果如图5所示。由图5可知，在SA的检查系统下，SA的Rf值不与主斑点的Rf值重叠，和主斑点的分离度较大。MPEG2000在该检查条件下不显色，1-StePE-MPEG2000和DSPE比移值为0，因此MPEG2000、DSPE和1-StePE-MPEG2000不干扰杂质SA的检查。
将上述进行氧化破坏、碱破坏、酸破坏、光照破坏和热破坏后的供试品溶液采用检测SA的薄层色谱条件进行点样测试，结果均破坏出未知杂质，碱破坏可破坏出明显的未知杂质和SA，未知杂质不干扰SA的检查。因此，SA的检查方法专属性良好。
(四)各杂质的检测限
将1-StePE-MPEG2000、DSPE和DSPE-MPEG2000对照溶液、MPEG2000对照溶液及SA对照溶液分别逐级稀释，并取稀释后的溶液进行薄层色谱测试，直至各成分的斑点几乎不明显为止。各杂质的具体稀释浓度变化及检测限浓度如下表所示。
(五)耐用性
A、考察微小变化流动相的有机相比例对杂质的检查有无影响，检测方法为展开剂均使用氯仿-甲醇-水-冰醋酸(体积比为92:16:1.2:0.4)。
测试结果表明：各杂质与主斑点分离较好，不受展开剂的影响。
B、考察薄层板对杂质的检测有无影响，检测方法为：将默克薄层板换成国产薄层板(G254，青岛邦凯)。
测试结果表明：各杂质与主斑点分离较好，不受薄层板的影响。
由上述验证可知，本发明一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，可用于培化磷脂酰乙醇胺的各有关物质的检测，且检验结果稳定可靠，各项指标均符合相关要求。
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (10)
1.一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，包括对DSPE、1-StePE-MPEG和未知杂质的检测，步骤如下：
S1、制备供试品溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于三氯甲烷-甲醇的混合溶剂中，定容制备成供试品溶液；
S2、制备第一对照溶液：称取适量DSPE对照品、1-StePE-MPEG对照品以及DSPE-MPEG2000对照品溶解于氯仿-甲醇-水的混合溶剂中，定容制备成第一对照溶液；
S3、制备第一参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于步骤S2中制备的第一对照溶液中，定容制备成第一参比溶液；
S4、薄层色谱法测定：取上述供试品溶液、第一对照溶液和第一参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，然后将薄层板置于第一展开剂中展开，取出薄层板，预热处理，处理毕冷却至室温后喷涂第一显色剂，然后加热处理，视检，比较点有供试品溶液薄层板上的斑点与点有第一对照溶液薄层板上的斑点的颜色深度。
2.根据权利要求1所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，还包括对杂质MPEG2000的检测，步骤如下：
S2-1、制备第二对照溶液：称取适量MPEG2000对照品溶解于氯仿-甲醇-水的混合溶剂中，定容制备成第二对照溶液；
S3-1、制备第二参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于步骤S2-1中制备的第二对照溶液中，定容制备成第二参比溶液；
S4-1、薄层色谱法测定：取权利要求1中制备的供试品溶液、第二对照溶液和第二参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，将薄层板置于所述第一展开剂中展开，取出薄层板，预热处理，处理毕冷却至室温，喷涂第二显色剂，视检，比较点有供试品溶液薄层板上的斑点与点有所述第二对照溶液薄层板上的斑点的颜色深度。
3.根据权利要求1所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，还包括对杂质SA的检测，步骤如下：
S2-2、制备第三对照溶液：称取适量SA对照品溶解于氯仿-甲醇-水的混合溶剂中，定容制备成第三对照溶液；
S3-2、制备第三参比溶液：称取适量DSPE-MPEG2000溶于步骤S2-2中制备的第三对照溶液中，定容制备成第三参比溶液；
S4-2、薄层色谱法测定：取权利要求1中制备的供试品溶液、第三对照溶液和第三参比溶液各10μl，分别在薄层板上点样，点样毕，将薄层板置于第二展开剂中展开，取出薄层板，晾干，喷涂所述第一显色剂，然后加热处理，视检，比较点有供试品溶液薄层板上的斑点与点有所述第三对照溶液薄层板上的斑点的颜色深度。
4.根据权利要求1所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，所述S1中，所述供试品溶液中DSPE-MPEG2000的浓度为40mg/ml。
5.根据权利要求1所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，所述S2中，所述第一对照溶液中，所述DSPE、1-StePE-MPEG和DSPE-MPEG2000的浓度分别为0.2mg/ml、0.48mg/ml和0.41mg/ml。
6.根据权利要求1或2所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，所述第一展开剂为氯仿-甲醇-水-冰醋酸以94:14:1.6:0.4的体积比混合的混合物。
7.根据权利要求1或3所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，所述第一显色剂为硫酸铜的磷酸溶液。
8.根据权利要求2所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，所述第二显色剂为碘化铋钾试剂。
9.根据权利要求1或2所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，所述预热处理的工艺条件为：温度100℃以上，时间2～3分钟。
10.根据权利要求1或3所述的一种培化磷脂酰乙醇胺中杂质的检验方法，其特征在于，所述加热处理的工艺条件为：温度160～170℃，时间10～15分钟。
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