CN116268192A - 一种含有中药组合物的饲料添加剂及其应用 - Google Patents
一种含有中药组合物的饲料添加剂及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种含有中药组合物的饲料添加剂及其应用,涉及饲料技术领域。所述中药组合物为夏桑菊或/和夏桑菊药渣,中药组合物的原料包括400‑600份夏枯草、150‑200份桑叶和60‑100份野菊花,将其应用于饲料的制备,所述饲料为产蛋动物或禽类饲料。本发明将中药组合物添加至饲料中,添加量为0.2‑3%,为产蛋动物和/或禽类动物的提供一种新的饲料添加剂和饲料。本发明的应用降低了料蛋比、提高蛋壳厚度、蛋重、蛋壳强度、蛋白高度和蛋黄指数,降低氧化应激,并且通过qPCR测定基因表达量,应用于饲料的制备中,可以降低盲肠中炎症因子表达,减轻炎症,提升蛋品质。
Description
技术领域
本发明属于饲料技术领域,具体涉及一种含有中药组合物的饲料添加剂及其应用。
背景技术
饲料添加剂是指在饲料生产加工、使用过程中添加的少量物质,虽然其在饲料中的用量很少,但其作用却是显著的。目前,对产蛋动物饲料及其添加剂的研究,主要集中在产蛋率、料蛋比、蛋壳厚度强度、蛋白高度和蛋黄指数等体现鸡蛋品质的方面,同时还体现在产蛋动物的健康,减轻炎症、降低氧化应激等方面。
而抗生素作为一种生长促进剂,虽然能够解决畜禽病害问题,对产蛋动物的生产有效果,可以有效提高家禽存活率,提高饲料报酬,增加经济效益。但在饲料中添加抗生素进行非治疗性预防是典型的抗生素滥用行为,滥用抗生素的弊端逐渐显露,例如干扰畜禽免疫系统、促使抗药菌产生等。世界各国限制或禁止在饲料中添加抗生素,我国农业农村部自2020年1月起全面禁止使用除中药类外促生长类药物作为饲料添加剂。产蛋动物无抗养殖是未来养殖业的必然发展趋势,因此现在很多研究利用特色农作物或中草药等替代抗生素,提高食用蛋的品质或风味,实现“过程可控制,结果可预期”的绿色养殖模式。在养殖中,除保证产蛋动物的健康生长外,所产的食用蛋的安全性与营养价值也是重要的关注点。利用无公害的饲料,避免兽药、农药、重金属和其他有毒有害物质的残留,生产绿色无公害的鸡蛋。
中国发明专利CN112602857A公布了一种蛋禽用复合植物饲料添加剂及其制备方法和应用,该饲料添加剂包含组分当归、黄芪、菟丝子、姜黄、万寿菊、牛磺酸、25-羟基维生素D3、果仁粉、维生素B12和包膜丁酸钠。将上述添加剂中的中药组分粉碎,经水或乙醇提取后,与除中药外的组分混合,制得蛋禽用复合植物饲料添加剂。应用到鸡饲料中,可以增大老龄母鸡蛋壳强度和蛋壳厚度,降低蛋壳破蛋率,提高蛋壳质量,并提高新鲜鸡蛋的保质期。但上述饲料添加剂中,中药被提取后的残渣未被利用,造成了中药资源的极度浪费。
中国发明专利CN103704483A公开了一种利用中药药渣发酵的饲料及其制备方法。饲料由中药药渣、秸秆和麸皮经真菌菌液发酵,并添加益生微生物菌剂制得。所述的中药药渣为千斤拨、金鹰根、鸡血藤、单面针、功劳木、穿心莲、当归、党参中的一种或多种中药提取后剩余的残渣。该发明的饲料中,粗蛋白含量高,可以促进家禽家畜的生长,有利于家禽家畜的增重和饲料转化效率。但该饲料的制备需要发酵,并添加益生微生物,且中药成分较复杂。
“夏桑菊”源自清代著名温病学家吴鞠通《温病条辨》的经典名方“夏桑菊”,主要由夏枯草、桑叶和野菊花配伍而成,夏枯草是夏桑菊中的君药,主要活性成分有迷迭香酸、木犀草苷、芦丁和槲皮素等,《中国药典》中以迷迭香酸为夏枯草的指标性成分。桑叶中的主要活性成分有绿原酸、芦丁和槲皮素等,《中国药典》中将芦丁作为桑叶的指标性成分。野菊花的主要活性成分有蒙花苷等,《中国药典》中以蒙花苷为野菊花的指标性成分。现代研究表明夏枯草含有三萜类化合物、多糖类化合物、黄酮类化合物、甾体类化合物与有机酸类化合物等成分,具有降血糖、降血压、调节免疫系统、抗肿瘤、抗炎抗菌及抗病毒等药理作用;桑叶中含酚类及黄酮类、生物碱类、氨基酸、多糖和甾类化合物,具有降血糖、抗炎、抗菌、抗病毒、抗衰老及抗癌等生物活性;野菊花含有挥发油、黄酮、多糖、有机酸、氨基酸以及微量元素等化学成分,有抑菌、抗炎镇痛、抗肿瘤活性、抗氧化等生理活性。
在夏桑菊组方提取后,所剩余的夏桑菊药渣经常以传统的填埋方式处理,其经济价值低。而提取后的夏桑菊药渣仍然含有大量的活性成分,且夏桑菊中不同的组份配比所带来的活性组分和含量、以及效果是不同的。本发明将夏桑菊和/或夏桑菊药渣应用于饲料中,既减少了中药药渣对环境的污染,具有良好的生态效益;又能变废为宝,开发出功能性动物饲料添加剂新产品,提高产品附加值,具有显著的经济效益;同时也能有效解决抗生素滥用问题,满足食品安全和公共卫生的需求。
本发明通过将中药组合物夏桑菊和/或夏桑菊药渣应用于饲料中,研究夏桑菊和/或夏桑菊药渣,其组份配比、夏桑菊药渣的制备方法、以及其添加剂量对产蛋动物生产的影响。该含有夏桑菊和/或夏桑菊药渣的饲料可以提高产蛋动物的产蛋性能,具体提高了料蛋比、蛋壳厚度、蛋重、蛋黄指数和蛋黄颜色,还可以降低氧化应激,减轻炎症。
发明内容
本发明针对现有技术存在的问题,提供了一种含有中药组合物的饲料添加剂及其应用,将中药组合物夏桑菊和/或夏桑菊药渣应用于饲料中,研究夏桑菊药渣的制备方法、其添加剂量对产蛋动物生产的影响。该应用可以提高产蛋动物的产蛋性能,具体降低了料蛋比、提高蛋壳厚度、蛋重、蛋黄指数和蛋黄颜色,还可以降低动物的氧化应激,减轻炎症。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:
首先,本发明提供了一种含有中药组合物的饲料添加剂,所述饲料添加剂中,中药组合物为夏桑菊或/和夏桑菊药渣。
优选地,所述中药组合物的原料包括以下重量份的组分:400-600份夏枯草、150-200份桑叶和60-100份野菊花。
进一步优选地,所述中药组合物的原料包括以下重量份的组分:500份夏枯草、175份桑叶和80份野菊花。
本发明中,所述夏桑菊是指由夏枯草、桑叶、野菊花为主要成分经过混合和/或提取得到的组合物和/或制剂,也包括市面在售的夏桑菊药物,如广州白云山星群(药业)股份有限公司生产的批准文号为Z44022217的夏桑菊颗粒。
然后,本发明提供上述饲料添加剂在制备饲料中的应用。
优选地,所述应用中,饲料添加剂的添加量为0.2-3%。
进一步优选地,所述应用中,饲料添加剂的添加量为0.5-1.5%。
优选地,所述饲料为产蛋动物饲料、禽类饲料中的至少一种。
进一步优选地,所述饲料为蛋鸡、蛋鸭、蛋鹌鹑、蛋鹅、蛋鸽子、鸵鸟中的至少一种。
更进一步优选地,所述饲料为蛋鸡饲料。
优选地,所述应用为夏桑菊药渣在制备饲料中的应用。
优选地,所述饲料为提高产蛋动物或禽类动物的产蛋性能,提高蛋重、蛋壳强度、蛋白高度、蛋黄指数、蛋壳厚度或加深蛋黄颜色、降低料蛋比的饲料。
优选地,所述饲料为改善产蛋动物或禽类动物的卵巢指数的饲料。
优选地,所述饲料为提高产蛋动物或禽类动物的生产性能的饲料。
优选地,所述饲料为改善产蛋动物或禽类动物的血清生化指标的饲料。
优选地,所述饲料为改善产蛋动物或禽类动物的血清炎症、提高免疫指标的饲料。
优选地,所述饲料为提高产蛋动物或禽类动物的抗氧化性能、提高蛋黄总抗氧化能力(T-AOC)的饲料。
优选地,所述饲料为改善产蛋动物或禽类动物的肠道组织形态的饲料。
优选地,所述饲料为提高产蛋动物或禽类动物的肠道基因表达的饲料。
优选地,所述饲料为改善产蛋动物或禽类动物的肠道微生物菌群的饲料。
然后,本发明提供一种饲料添加剂的制备方法,包括步骤:
(1)取重量份的野菊花,用65-98%乙醇浸渍,得到野菊花浸渍液和药渣1;
(2)取重量份的桑叶和夏枯草,与水混合煎煮1-3次,煎煮时间为1-2h,得药渣2;
(3)合并药渣1和2,干燥、粉碎得到饲料添加剂。
优选地,步骤(1)中,所述乙醇的浓度为70-95%,浸渍的时间为12-24h,浸渍的温度为15-40℃。
优选地,步骤(1)中,所述乙醇浸渍的固液比为1:1.5-3。
优选地,步骤(2)中,所述煎煮的次数为2次,每次煎煮的时间为1.5h。
优选地,步骤(2)中,所述煎煮的固液比为1:6-12。
优选地,步骤(3)中,所述粉碎后,过50-200目筛,得到夏桑菊药渣。
进一步优选地,所述粉碎后,过60目筛,得到夏桑菊药渣。
优选地,所述饲料添加剂的原料,按照重量份包括组分:500份夏枯草、175份桑叶和80份野菊花。
优选地,所述饲料添加剂为夏桑菊药渣。
再者,本发明提供一种饲料,包括饲料添加剂。
优选地,所述饲料为产蛋动物饲料、禽类饲料中的至少一种。
优选地,所述饲料,包括组分:上述的饲料添加剂、玉米、膨化大豆、豆粕、乳清粉、鱼粉、豆油、氨基酸、磷酸氢钙、石粉、食盐和预混料。
进一步优选地,所述饲料,按照重量份包括组分:0.2-2.5份饲料添加剂、50-65份玉米、5-10份膨化大豆、18-25份豆粕、4-7份乳清粉、3-10份鱼粉、0.1-3份豆油、0.1-3份氨基酸、0.1-1份磷酸氢钙、0.1-1份石粉、0.1-1份食盐和0.2-2份预混料。
更进一步优选地,所述饲料,按照重量份包括组分:0.5-1.5份饲料添加剂、52-60份玉米、6-8份膨化大豆、20-23份豆粕、5-6份乳清粉、4-6份鱼粉、0.5-2份豆油、0.5-1份氨基酸、0.5-0.8份磷酸氢钙、0.3-0.6份石粉、0.2-0.4份食盐和0.5-1.5份预混料。
更进一步优选地,所述饲料,按照重量份包括组分:0.5-1.5份饲料添加剂、56.5份玉米、7.5份膨化大豆、21.3份豆粕、5.5份乳清粉、5份鱼粉、1份豆油、0.68份氨基酸、0.72份磷酸氢钙、0.5份石粉、0.3份食盐和1份预混料。
更进一步优选地,所述饲料,按照重量份包括组分:1-1.5份饲料添加剂、56.5份玉米、7.5份膨化大豆、21.3份豆粕、5.5份乳清粉、5份鱼粉、1份豆油、0.68份氨基酸、0.72份磷酸氢钙、0.5份石粉、0.3份食盐和1份预混料。
更进一步优选地,所述饲料,按照重量份包括组分:1-1.5份夏桑菊药渣、56.5份玉米、7.5份膨化大豆、21.3份豆粕、5.5份乳清粉、5份鱼粉、1份豆油、0.68份氨基酸、0.72份磷酸氢钙、0.5份石粉、0.3份食盐和1份预混料。
优选地,所述豆粕,其粗蛋白质含量(CP)为40-50%。
进一步优选地,所述豆粕,其CP含量为43-46%。
进一步优选地,所述豆粕,其CP含量为44%。
优选地,所述鱼粉的CP含量为60-65%。
进一步优选地,所述鱼粉的CP含量为63.5%。
优选地,所述氨基酸选自赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、谷氨酸、色氨酸中的至少一种。
进一步优选地,所述氨基酸选自L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、L-苏氨酸、谷氨酸、色氨酸中的至少一种。
更进一步优选地,所述氨基酸选自L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、L-苏氨酸中的至少一种。
更进一步优选地,所述氨基酸为L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、L-苏氨酸的复合氨基酸。
更进一步优选地,所述复合氨基酸中,L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、L-苏氨酸的重量份比为0.3-0.5:0.1-0.2:0.1-0.15。
更进一步优选地,所述复合氨基酸中,L-赖氨酸、DL-蛋氨酸、L-苏氨酸的重量份比为0.4:0.15:0.13。
本发明中,所述饲料,是将饲料添加剂按照常规方法,与饲料中的原料进行混合;所述饲料中的原料均为市面上的常规原料。
相对于现有技术,本发明具有以下有益效果:
(1)本发明创造性的提供了一种含中药组合物的饲料添加剂,将以夏枯草、桑叶和野菊花为成分的夏桑菊和/或夏桑菊药渣应用于饲料的制备中,为产蛋动物和/或禽类动物的提供一种新的饲料。
(2)本发明将夏桑菊以不同的剂量添加至饲料中,不同剂量的夏桑菊在饲料中对产蛋动物和/或禽类动物表现出不同的效果;将夏桑菊应用于饲料中,提高了蛋壳厚度、蛋重、蛋壳强度、蛋白高度和蛋黄指数,降低料蛋比,降低氧化应激,并且通过qPCR测定基因表达量,发现该饲料可以降低盲肠中炎症因子表达,减轻炎症。
(3)本发明通过将特定组分重量份的夏桑菊应用于饲料中,不仅提升了蛋品质,并且可推广蛋鸡无抗养殖,生产出更加绿色、安全、无抗的蛋品,满足人们日益增长的对安全蛋品的需求。
附图说明
图1是本发明夏桑菊药渣对蛋鸡血清炎症与免疫指标的影响结果图;
图2是本发明夏桑菊药渣对蛋鸡抗氧化指标的影响结果图;
图3是本发明夏桑菊药渣对蛋鸡肠道形态学的影响结果图;
图4是本发明夏桑菊药渣对蛋鸡肠道组织学的影响结果图;
图5是本发明夏桑菊药渣对蛋鸡肠道相关基因表达的影响结果图;
图6是本发明夏桑菊药渣对蛋鸡肠道微生物的影响结果图。
具体实施方式
以下非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面的理解本发明,但不以任何方式限制本发明。下述内容仅仅是对本申请要求保护的范围的示例性说明,本领域技术人员可以根据所公开的内容对本申请的发明做出多种改变和修饰,而其也应当属于本申请要求保护的范围之中。
下面以具体实施例的方式对本发明作进一步的说明。本发明实施例中所使用的各种化学试剂、原料如无特殊说明均通过常规商业途径获得。
在本发明的下述实施例中,所述饲料为含有夏桑菊药渣的饲料。
在本发明的下述实施例中,所述夏桑菊药渣的原料,按照重量份包括组分500份夏枯草、175份桑叶和80份野菊花。
在本发明的下述实施例中,所述夏桑菊药渣的制备方法为:
(1)取夏桑菊中的野菊花,用65-98%乙醇在15-40℃下浸渍12-24h,固液比为1:1.5-3,得到野菊花浸渍液和药渣1;
(2)取夏桑菊中的夏枯草和桑叶,与6-12倍量的水混合煎煮1-3次,煎煮时间为1-2h,得药渣2;
(3)合并药渣1和2,干燥、粉碎过50-200目筛,得到夏桑菊药渣。
实施例1
饲料配方:基础日粮+夏桑菊药渣(中药组合物,饲料添加剂);所述基础日粮中,乳清粉、鱼粉、石粉、预混料均为普通市售常规饲料添加剂;所述预混料为向每千克饲粮提供Premix feed provided per kilogram of complete feed::VA,6000IU;VD3,2500IU;VE,25.0mg;VK3,2.25mg;VB1,1.8mg;VB2,7.0mg;VB6,4.0mg;VB12,0.20mg;泛酸pantothenicacid,12.0mg;烟酸niacin,35.0mg;生物素biotin,0.14mg;叶酸folic acid,0.8mg。
根据中国《鸡饲养标准(NY/T33—2004)》,制定满足产蛋高峰期蛋鸡营养需要的日粮配方,基础日粮原料及营养成分组成见表1,基础日粮原料及营养成分组分(干物质基础,%)。整个期间记录蛋鸡健康状况(产蛋率、畸形蛋率、平均蛋重、日均采食量、料蛋比和死淘率)。
表1
所述夏桑菊药渣的制备方法为:
(1)夏桑菊药渣的原料,按照重量份包括组分:500份夏枯草、175份桑叶和80份野菊花;
(2)取夏桑菊中的野菊花,用95%乙醇在30℃下浸渍16h,固液比为1:2,得到野菊花浸渍液和药渣1;
(3)取夏桑菊中的夏枯草和桑叶,与6倍量的水混合煎煮2次,煎煮时间为1.5h,得药渣2;(4)合并药渣1和2,干燥、粉碎过60目筛,得到夏桑菊药渣。
实施例2
试验动物及试验设计
选取产蛋率相近,健康状况一致的55周龄京粉蛋鸡1280只,采用单因子完全随机化设计分为空白对照组、低剂量组(夏桑菊药渣)、中剂量组(夏桑菊药渣)、高剂量组(夏桑菊药渣)、对比方法中剂量组、低剂量组(对比组方药渣)、中剂量组(对比组方药渣)、高剂量组(对比组方药渣),每组蛋鸡160只。空白对照组饲喂基础日粮,低、中、高剂量组在基础日粮干物质的基础上添加药渣,添加量分别为0.5%(低剂量,L)、1%(中剂量,M)和1.5%(高剂量,H)。试验周期63天。
所述夏桑菊药渣(XSJ)同实施例1。
所述对比方法中剂量组(DBFF-M)为:夏桑菊药渣的添加量为1%,不同的是,夏桑菊药渣的制备方法不同,具体为:取配方量的夏桑菊原料,混合后与2倍量的乙醇在60℃下浸渍16h,乙醇浓度为95%;过滤药渣;干燥、粉碎过60目筛,得到夏桑菊药渣。
所述对比组方药渣(DB)为:实施例1的夏桑菊药渣组方中,将野菊花替换为金银花。其余皆同实施例1,饲料添加剂同实施例1。
1、检测饲料(含夏桑菊药渣)对蛋鸡生产性能的影响
在试验的整个期间记录蛋鸡产蛋率、蛋重和采食量等情况。
其中,产蛋率%=产蛋总量/鸡只数×100%
料蛋比的计算方法=总耗料量/总蛋重×100%。
夏桑菊药渣对蛋鸡生产性能的影响见表2。
表2
表2中,同一行上标中相同字母表示无显著差异,相邻字母表示组间具有显著差异,相隔字母表示极显著差异;大写字母表示P<0.01,小写字母表示0.01<P<0.05。
由表2可知,与对照组相比,XSJ-L、XSJ-M和XSJ-H组中料蛋比都有显著性差异。
2、检测饲料(含夏桑菊药渣)对蛋鸡气管指数的影响
2.1检测方法:对喂养后的蛋鸡进行采血,采血结束后,迅速分离其脾脏、肝脏、卵巢和输卵管,用滤纸擦干并称重,计算各器官指数。
2.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡器官指数的影响结果见表3。
表3
由表3可知,与对照组相比,XSJ-M的卵巢指数有所提高,肝脏指数、脾脏指数和输卵管指数无明显差异。
3、检测饲料(含夏桑菊药渣)对蛋品质的影响
3.1检测方法:在试验结束前一天收集鸡蛋样品,每组随机选取8枚鸡蛋,进行蛋品质检测。
(1)蛋重:使用Egg Analyzer进行测量,精确到0.01g。
(2)蛋形指数:使用电子数显游标卡尺测定每枚鸡蛋横径与纵径,再行计算。
公式:蛋形指数=横径/纵径×100%。
(3)蛋壳强度:将完整的鸡蛋置于蛋壳强度测定仪上检测。
(4)蛋黄颜色:将鸡蛋打碎置于Egg Analyzer中检测。
(5)哈氏单位和蛋白高度:将鸡蛋打碎置于Egg Analyzer中检测。
(6)蛋壳厚度:使用蛋壳厚度计测定蛋的锐端、钝端和中部3部分的蛋壳厚度,取其平均值作为蛋壳厚度。
(7)蛋黄指数:每个重复选择两枚蛋黄,使用电子数显游标卡尺测定蛋黄高度与蛋黄直径。蛋黄指数=蛋黄高度/蛋黄直径。
(8)蛋黄比例:清除蛋黄表面蛋白物质以及系带,在分析天平上称量记录蛋黄重,与蛋重作比。
公式:蛋黄比例=蛋黄重量/全蛋重。
3.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡蛋品质的影响结果见表4。
表4
项目 | 对照组 | 试验I组 | 试验II组 | 试验III组 | P-值 |
Items | control | XSJ-L | XSJ-M | XSJ-H | P-Value |
蛋重,g | 59.43±0.71C | 61.44±0.83BC | 65.27±1.23A | 62.76±0.59AB | 0.001 |
蛋壳强度,kg f | 2.99±0.14b | 3.46±0.21a | 3.76±0.20ab | 3.33±0.15ab | 0.039 |
蛋黄颜色 | 4.37±0.18b | 4.81±0.21ab | 4.56±0.24b | 5.37±0.21a | 0.013 |
蛋白高度,mm | 6.70±0.26b | 7.59±0.14a | 7.23±0.23ab | 7.34±0.15a | 0.031 |
蛋黄指数 | 0.35±0.01B | 0.41±0.02A | 0.37±0.01AB | 0.37±0.00AB | 0.007 |
蛋壳厚度,mm | 0.30±0.01C | 0.38±0.01A | 0.38±0.01A | 0.33±0.01B | 0.000 |
项目 | 试验Ⅳ组 | 试验Ⅴ组 | 试验Ⅵ组 | 试验Ⅶ组 | P-值 |
Items | DBFF-M | DB-L | DB-M | DB-H | P-Value |
蛋重,g | 59.94±0.51 | 59.54±0.37 | 59.40±0.53 | 59.09±0.46 | 0.650 |
蛋壳强度,kg f | 2.96a±0.08 | 3.01a±0.05 | 2.92a±0.11 | 2.61b±0.15 | 0.041 |
蛋黄颜色 | 4.50±0.19 | 4.75±0.25 | 4.50±0.27 | 4.75±0.25 | 0.783 |
蛋白高度,mm | 6.87a±0.15 | 6.43ab±0.23 | 6.12b±0.15 | 6.34b±0.12 | 0.027 |
蛋黄指数 | 0.34a±0.01 | 0.33ab±0.01 | 0.30bc±0.01 | 0.31c±0.01 | 0.022 |
蛋壳厚度,mm | 0.22a±0.01 | 0.22a±0.01 | 0.23a±0.01 | 0.18b±0.01 | 0.008 |
表4中,同一行上标中相同字母表示无显著差异,相邻字母表示组间具有显著差异,相隔字母表示极显著差异;大写字母表示P<0.01,小写字母表示0.01<P<0.05。
由表4可知,与对照组相比,XSJ-L、XSJ-M和XSJ-H组极显著提高了蛋壳厚度(P<0.01);XSJ-M和XSJ-H组极显著增加了蛋重(P<0.01);且XSJ-L显著提高了蛋壳强度、蛋白高度和蛋黄指数(P<0.05);XSJ-H组显著提高了蛋白高度,加深蛋黄颜色(P<0.05)。综上所述,不同浓度夏桑菊药渣均不同程度的提高了蛋品质。
4、检测饲料(含夏桑菊药渣)对血清生化指标的影响
4.1检测方法:采用科华全自动生化分析仪测定蛋鸡血清中谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、血磷(Phosphorus,P)、血钙(Calcium,Ca)、白蛋白(albumin,ALB)、血糖(Glucose,GLU)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC)、免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)。血清生化相关试剂盒均购自科华生物。4.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡血清生化指标的影响结果见表5。
表5
项目 | 对照组 | 试验I组 | 试验II组 | 试验III组 | P-值 |
Items | control | XSJ-L | XSJ-M | XSJ-H | P-Value |
IP(mmol/L) | 2.88ab±0.21 | 2.47b±0.14 | 3.46a±0.45 | 2.43b±0.23 | 0.049 |
ALP(U/L) | 288.62b±54.07 | 636.24a±117.01 | 526.71ab±85.84 | 340.75b±51.67 | 0.023 |
GLU(mmol/L) | 11.56b±0.27 | 11.94ab±0.21 | 12.44a±0.26 | 12.63a±0.35 | 0.040 |
项目 | 试验Ⅳ组 | 试验Ⅴ组 | 试验Ⅵ组 | 试验Ⅶ组 | P-值 |
Items | DBFF-M | DB-L | DB-M | DB-H | P-Value |
IP(mmol/L) | 2.64±0.17 | 2.56±0.12 | 2.88±0.08 | 2.52±0.15 | 0.252 |
ALP(U/L) | 330.55±30.81 | 277.04±35.77 | 265.29±27.71 | 290.96±26.8 | 0.469 |
GLU(mmol/L) | 11.74±0.28 | 11.64±0.23 | 12.09±0.57 | 12.02±0.26 | 0.514 |
表5中,同一行上标中相同字母表示无显著差异,相邻字母表示组间具有显著差异,相隔字母表示极显著差异;大写字母表示P<0.01,小写字母表示0.01<P<0.05。
由表5可知,与对照组相比,XSJ-L组极显著增加了ALP水平(P<0.05);XSJ-M组和XSJ-H显著提高了GLU水平(P<0.05)。
5、检测饲料(含夏桑菊药渣)对血清炎症与免疫指标的影响
5.1检测方法:利用酶联免疫法检测血清中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosisfactor-α,TNF-α)、白细胞介素1-β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)、D-乳酸(D-Lactic acid)等8项指标。
5.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡血清炎症与免疫指标的影响结果见图1。
由图1可以看出,夏桑菊药渣可以显著降低血清中IL-2的表达量(P<0.01)。
注:图1中,ns表示无显著性差异,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。
6、检测饲料(含夏桑菊药渣)对蛋鸡抗氧化指标的影响
6.1检测方法:在试验结束前一天,每组随机选取8枚鸡蛋,将所选鸡蛋的蛋黄从蛋白中分离出来,于-30℃保存。根据试剂盒说明书测定蛋黄中丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC)水平,肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶活性(CAT)以及超氧化物歧化酶(SOD),以及血清中谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-PX)分别采用北京盒子生工科技有限公司相关试剂盒测定。
6.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡抗氧化指标的影响结果见图2。
由图2可知,添加中剂量的夏桑菊药渣可以显著提高蛋黄T-AOC(P<0.01)水平。
注:图2中,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。
7、检测饲料(含夏桑菊药渣)对蛋鸡肠道组织形态学的影响
7.1检测方法:将4%多聚甲醛固定的蛋鸡肠道样本制作成石蜡切片后,通过光学显微镜观察卵巢卵泡的发育情况,利用图像分析软件测量十二指肠、空肠、回肠绒毛高度(Villus height)和隐窝深度(Crypt depth),计算绒毛高度/隐窝深度(V/C)。
7.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡肠道形态学的影响结果图见图3;夏桑菊药渣对蛋鸡肠道组织学的影响结果图见图4。图4中,ns代表组间差异无显著性。
十二指肠(DU,Duodenum)切片可见XSJ-M组小肠绒毛细长,排列整齐,刷状缘都不清晰,杯状细胞较多且均匀分布,隐窝深度适中,XSJ-L、XSJ-H组杯状细胞较XSJ-L组的少(图3、4)。与空白组相比,试验组三组的绒毛长度有所降低,隐窝深度也都减小(图4)。由图3、4可见,空白组回肠(IL,Ileum)绒毛显微结构正常,绒毛高度和宽度适中,绒毛柱状上皮细胞排列紧密。与空白组相比,XSJ-L和XSJ-H组回肠绒毛长度明显降低。XSJ-H组回肠绒毛柱状上皮细胞脱落、排列疏松,固有层内细胞明显减少,但绒毛宽度变化不明显。XSJ-M组回肠绒毛长度较长。XSJ-M和XSJ-H组的隐窝深度都有所升高,XSJ-L组隐窝深度有所降低。
观察空肠(JE,Jejunum),空白组小肠绒毛上皮细胞形态结构较完整清晰,但杯状细胞数量较少,隐窝形态结构完整且数量较多(图3)。与空白组对比,XSJ-L与XSJ-H组小鼠空肠小肠绒毛更长,杯状细胞含量较多,隐窝形态结构完整且数量较多。与空白组相比,XSJ-L、XSJ-M与XSJ-H的绒毛长度、隐窝深度与V/C无显著性差异。
8、检测饲料(含夏桑菊药渣)对蛋鸡肠道相关基因表达的影响
8.1检测方法:利用qPCR技术,检测盲肠中炎症和抗氧化因子:白介素(IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核转录因子-κB(NF-κB)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)、血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶(NQO1)表达量。
8.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡肠道相关基因表达的影响结果图见图5。
注:图5中,ns表示无显著性差异,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。
由图5可以看出夏桑菊药渣可以降低显著IL-6、NF-kB、TNF-α和COX四种炎症因子的表达。显著抑制Nrf-2的表达,显著提高屏障因子Occludin的表达。
9、检测饲料(含夏桑菊药渣)对蛋鸡肠道微生物的影响
9.1检测方法:采用16S rDNA高通量测序技术分析前肠(十二指肠、空肠、回肠)和后肠(盲肠、结直肠)内容物微生物组成。
9.2检测结果:夏桑菊药渣对蛋鸡肠道微生物的影响结果图见图6。其中,图6中的a图为Venn图;图6中的b图为PCA图;图6中的c图为群落组成图;图6中的d图为Subnetwork图;图6中的e图为Lefse-diff图。
图6中,XSJF_B为夏桑菊高剂量组前肠微生物;CGF_B为空白组前肠微生物;图6中的c图,XSJFB-CGFB为空白组与夏桑菊高剂量组的总微生物。
由图6a,图6b可以看出夏桑菊药渣(XSJF_B)与空白组(CGF_B)的肠道菌群有42.26%不一致,菌群结构组成完全不一致。由图6c,图6d可以看出相对于空白组,夏桑菊药渣降低了厚壁菌门的丰度,升高了变形菌门、拟杆菌门的丰度。在属水平上,夏桑菊药渣降低了乳杆菌属,升高了肠球菌、棒状杆菌的丰度。由图6e可以看出相对于空白组,夏桑菊药渣降低了厚壁菌门中乳杆菌属,比空白组多了气球菌科、短芽孢杆菌属、faecalitalea(屎豆属菌);多了变形菌门中莫拉菌科的不动杆菌属,降低了变形菌门中的鸡杆菌属。
最后应当说明的是,以上内容仅用以说明本发明的技术方案,而非对本发明保护范围的限制,本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换,均不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (10)
1.一种含有中药组合物的饲料添加剂,其特征在于,所述饲料添加剂中,中药组合物为夏桑菊或/和夏桑菊药渣,中药组合物原料包括以下重量份的组分:400-600份夏枯草、150-200份桑叶和60-100份野菊花。
2.权利要求1所述的饲料添加剂在制备饲料中的应用,其特征在于,所述饲料添加剂在饲料中的添加量为0.2-3%。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述饲料添加剂在饲料中的添加量为0.5-1.5%。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述饲料为产蛋动物饲料、禽类饲料中的至少一种。
5.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述饲料为蛋鸡、蛋鸭、蛋鹌鹑、蛋鹅、蛋鸽子、鸵鸟中的至少一种。
6.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述饲料为提高产蛋动物或禽类动物的产蛋性能,提高蛋重、蛋壳强度、蛋白高度、蛋黄指数、蛋壳厚度或加深蛋黄颜色、降低料蛋比的饲料,或/和为改善产蛋动物或禽类动物的卵巢指数的饲料;或/和为提高产蛋动物或禽类动物的生产性能的饲料;或/和为改善产蛋动物或禽类动物的血清生化指标的饲料;或/和为改善产蛋动物或禽类动物的血清炎症、提高免疫指标的饲料;或/和为提高产蛋动物或禽类动物的抗氧化性能、提高蛋黄总抗氧化能力的饲料;或/和为改善产蛋动物或禽类动物的肠道组织形态的饲料;或/和为提高产蛋动物或禽类动物的肠道基因表达的饲料;或/和为改善产蛋动物或禽类动物的肠道微生物菌群的饲料。
7.权利要求1所述的饲料添加剂和权利要求2-6任一项所述的应用中的饲料添加剂的制备方法,其特征在于,包括步骤:
(1)取重量份的野菊花,用85-98%乙醇浸渍,得到野菊花浸渍液和药渣1;
(2)取重量份的桑叶和夏枯草,与水混合煎煮1-3次,煎煮时间为1-2h,得药渣2;
(3)合并药渣1和2,干燥、粉碎得到饲料添加剂。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述乙醇,浓度为70-95%,浸渍的时间为12-24h,浸渍的温度为15-40℃,固液比为1:1.5-3;步骤(2)中,所述煎煮,固液比为1:6-12;步骤(3)中,所述粉碎,过50-200目筛,得到饲料添加剂。
9.一种饲料,其特征在于,包括权利要求7或8任一项制备方法所制备得到的饲料添加剂。
10.根据权利要求9所述的饲料,其特征在于,包括组分:权利要求1所述的饲料添加剂、玉米、膨化大豆、豆粕、乳清粉、鱼粉、豆油、氨基酸、磷酸氢钙、石粉、食盐和预混料;所述饲料,按照重量份包括组分:0.2-2.5份饲料添加剂、50-65份玉米、5-10份膨化大豆、18-25份豆粕、4-7份乳清粉、3-10份鱼粉、0.1-3份豆油、0.1-3份氨基酸、0.1-1份磷酸氢钙、0.1-1份石粉、0.1-1份食盐和0.2-2份预混料。
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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