CN116267294B - 一种诱导龙血树可持续产生龙血竭的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种诱导龙血树可持续产生龙血竭的方法。S1.选择健康的龙血树的分枝或主干；S2.对步骤S1中的龙血树分枝枝干或主干进行剥皮处理；S3.然后用输液法将促脂剂输入龙血树体内或利用喷施法将促脂剂喷施整个植株，间隔1‑2个月后再次施加一次促脂剂；S4.步骤S3处理的9‑12个月后，割取有红色树脂形成的部位获得龙血竭。本发明提供的一种诱导龙血树快速产生龙血竭的方法，根据龙血树树干粗细的不同采用不同的方式，即可有效的避免现有的人工结脂(龙血竭)方法造成的龙血树容易死亡的问题，还降低了人工结龙血竭的操作成本；同时本发明采用树干全周剥皮伤害的方式诱导龙血树结脂(龙血竭)，大大提高结脂面积，进而提高龙血竭产量。
Description
技术领域：
本发明属于中药生物技术领域，具体涉及一种人工诱导龙血树快速产生龙血竭的方法及应用。
背景技术：
龙血竭(Dragon's blood)，具有活血散瘀、定痛止血、敛疮生肌的功效，在《本草纲目》中誉之为“活血圣药”，在我国作为名贵中药使用已有1500余年的历史，以它为功效原料的药物多达70多种，如复方龙血竭胶囊、麝香祛痛搽剂和产后补血丸等。另外，它在亚洲、非洲和美洲等多种文明中也具有悠久的药用历史。
龙血竭是龙血属(Dracaena)植物的树干在受到损伤后所形成的红色树脂。北非、西亚阿拉伯地区的龙血树(D.draco)、朱红龙血树(D.cinnabari Balf)和索科特拉龙血树(D.surculosa Lindle.)等龙血树属植物是生产龙血竭最早的基原植物。我国科学家通过资源调查发现，分布在我国南部的剑叶龙血树(D.cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen)、海南龙血树(D.cambodiana Pierre ex Gagnep)均可作为生产血竭的基原植物，这为改变血竭依赖进口的局面奠定了基础。但由于野生资源枯竭和人工诱导结脂技术等因素的影响，目前我国所需的龙血竭90％以上仍依赖从老挝、越南等东南亚国家进口。
研究表明，健康的龙血树树干中不含有红色树脂，只有受到伤害后才能产生红色树脂。但在自然条件下，龙血树树脂的形成往往需要几年、甚至几十年的时间，而产量往往不稳定或很少，尤其是其质控成分龙血素b的含量过低，很难达到国家药材标准，因此龙血树植物资源的发现及人工种种规模的扩大并没有解决血竭原料主要依靠进口的现状。更加严重的是，国外血竭的植物资源亦日益匮乏及当地政府的管控，从国外采购血竭已出现有价无市的境况，使得我国多数血竭相关药企处于阶段性停产，甚至濒临倒闭的窘境。
针对上述情况，为了加快龙血树生产血竭的进程，一批人工诱导龙血树结脂的方法孕育而生。但现有方法产生的树脂往往仅在伤害的局部生成，且随着伤害时间的延长龙血树茎内的髓部逐渐腐烂进而引起树干死亡，另外合理的采脂时间还不清楚等等因素导致血竭药材的产量和品质很难得到保证，导致目前生产上仍缺乏高效的人工诱导龙血树结脂的技术。
发明内容：
针对目前生产上仍缺乏高效的人工诱导龙血树结脂(龙血竭)的技术，本发明的目的在于提供一种人工诱导龙血树可持续产生龙血竭的方法。
本发明提供如下技术方案：
本发明的第一个目的在于提供促脂剂在促进龙血树结龙血竭中的应用，所述的促脂剂为海藻肥，冠菌素，寡聚糖，褪黑素，壳寡糖、氨基酸水溶肥中的一种或两种以上。
优选，还可以含有磷酸二氢钾。
优选，所述的海藻肥浓度1g/L-2g/L；冠菌素浓度为1umol/L-5umol/L；所述的寡聚糖浓度为1g/L-2g/L；所述的褪黑素浓度为50umol/L-200umol/L；所述的壳寡糖浓度为1g/L-2g/L。
进一步优选，所述的促脂剂是含2g/L磷酸二氢钾和1umol/L冠菌素的溶液，或2g/L海藻肥和2g/L寡糖素的溶液、或2g/L壳聚糖和100umol/L褪黑素的溶液。
本发明的第二个目的是提供一种人工促进龙血树生产龙血竭的方法，包括以下步骤：
S1.选择健康的龙血树的分枝或主干；
S2.对步骤S1中的龙血树分枝枝干或主干进行剥皮处理；
S3.然后用输液法将促脂剂输入龙血树体内或利用喷施法将促脂剂喷施整个植株，间隔1-2个月后再次施加一次促脂剂；
S4.步骤S3处理的9-12个月后，割取有红色树脂形成的部位获得龙血竭。
优选地，步骤S1中的龙血属植物为剑叶龙血树、海南龙血树、龙血树、阿拉伯龙血树或索科特拉龙血树。
优选地，步骤S2所述的剥皮处理是指剥去龙血树树干的全周的树皮。
优选地，步骤S2所述的剥皮深度以露出次生组织即可，不可伤害到次生组织。
优选地，步骤S2中剥皮处分枝枝干或主干的直径必须在5cm以上。
优选地，步骤S2中剥皮范围介于离地30cm以上，叶基部50cm以下。
优选地，步骤S3中对于地径小于10cm，树高低于4m的龙血树推荐使用喷施法。对于高大，地径10cm以上龙血树推荐使用输液法，输液时钻孔的深度小于3㎝。
优选地，步骤S4中龙血竭的收获方式。对于胸径小于等于10cm的龙血树枝干，从结脂(龙血竭)部位的最下端水平锯断，获取含有树脂的部分，余下的伤口截面用草木灰和泥土等混合物封住。对于胸径大于10cm的龙血树树干，直接用剥皮的方式获取含有树脂的部分。
本发明的第三个目的在于提供一种人工可持续诱导龙血树结龙血竭的方法，在人工促进龙血树结龙血竭后，再进行以下步骤：
S1.伤害结脂(龙血竭)过程中保留直径过小或其他不适宜结脂(龙血竭)的龙血树枝干，让其继续生长；
S2.剥皮处理会刺激龙血树枝干在剥皮的下端萌生许多侧芽，通过修剪保留其中1-2个侧芽使其生长为粗壮的分枝；
S3.在上一次龙血竭收获以后，继续选择胸径达到5cm以上龙血树树干进行剥皮加促脂剂的方式诱导龙血树结龙血竭，同时对龙血竭收获后胸径仍达10cm以上的龙血树树干，可通过直接加施促脂剂的方式持续诱导其结龙血竭。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明提供的一种诱导龙血树快速产生龙血竭的方法，根据龙血树树干粗细的不同采用不同的方式，即可有效的避免现有的人工结脂(龙血竭)方法造成的龙血树容易死亡的问题，还降低了人工结龙血竭的操作成本；同时本发明采用树干全周剥皮伤害的方式诱导龙血树结脂(龙血竭)，大大提高结脂面积，进而提高龙血竭产量。更重要的是，本发明可以利用同一株龙血树不断生长的分枝持续伤害结脂，达到持续生产龙血竭的目的。
附图说明
图1是剥皮处理后，喷施法施加促脂剂的海南龙血树；
图2是剥皮处理后，输液法施加促脂剂的龙血树；
图3是剥皮处理促进龙血树侧芽的萌发及生长；
A在剥皮处理6个月时下方萌发的侧芽；B锯断12个月后侧芽生长为分枝；
图4是不同促脂剂的结脂(龙血竭)效果。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
实施例1促脂剂的筛选
1.选取胸径在5cm左右的海南龙血树枝干，在枝干上，中和下三个部位分别进行全周剥皮，每个部位的剥皮范围是15cm长，剥皮以露出次生组织即可，不可伤害到次生组织。
2.剥皮后，全株喷施下列9种不同的促脂剂(表1)，每天1次，每次20ml/枝，连续喷7天。剥皮伤害30天后锯断枝条，40度烘干，割取红色部分，利用95％乙醇提取龙血竭。
表1不同促脂剂的龙血竭产量
上述促脂剂的配制方法是将各成分按其浓度加于水中，混合均匀即得。
从图4中可以看出本发明提供的促脂剂可以促进龙血树快速的产生红色树脂(图4)。经过进一步提脂和测量可以看出，在相同时间内，本发明提供的促脂剂确实可以显著提高海南龙血树的龙血竭产量，至少是空白对照1.6倍以上，最高者可达5.26倍(表1)。同时还可以看出，本发明提供的促脂剂的龙血竭产量显著高于200710100570.5专利和杨晓虹等(2014)文献中提供的试剂，整体上也高于201310207182.5专利提供的试剂。
实施例2纵切+喷施促脂剂诱导结脂
1.选择胸径6±0.8cm的海南龙血树枝干，在离地50-150cm范围内，分别在枝干两侧纵向切割2个长50cm，深2cm左右，宽1cm的纵向切口。
2.纵切处理后整株立即喷施促脂剂(含2g/L壳聚糖和100umol/L褪黑素的水溶液)，50ml/枝，一个月后再喷施一次相同的促脂剂。
3.纵切处理6个月后，将整个含有纵向伤害的枝干锯断，40度烘干，割取含有红色树脂的部分，粉碎后利用95％乙醇回流提脂，最后经浓缩干燥得龙血竭6.52g/枝
实施例3剥皮+喷施促脂剂持续诱导结脂
1.选择胸径6±0.8cm的海南龙血树枝干，在离地40-130cm范围内，进行全周剥皮，剥皮长度50cm(图1)，剥皮以露出次生组织即可，不可伤害到次生组织。
2.剥皮处理后整株立即喷施促脂剂(含2g/L壳聚糖和100umol/L褪黑素的水溶液)，100ml/枝，一个月后再喷施一次相同的促脂剂。
3.剥皮处理6个月后，将整个含有剥皮伤害的枝干锯断，40度烘干，割取含有红色树脂的部分，粉碎后利用95％乙醇回流提脂，最后经浓缩干燥得龙血竭10.86g/枝。与实施例2相比，在枝干直径，结脂(龙血竭)时间和促脂剂一致的情况下，剥皮处理比纵切伤害处理的龙血竭产量高4.34g/枝，产量提高了66.5％。
4.剥皮处理刺激新侧芽的生长(图3A)，通过修剪保留2个使其生长为粗壮的枝干(图3B)，等新发育的龙血树枝干的直径达到5cm以上后，继续利用剥皮+喷施促脂剂再次诱导其结脂(龙血竭)。
实施例4剥皮+促脂剂输液法诱导结脂
1.选择地径大于10cm，胸径大于5cm的海南龙血树枝干，在离地40cm至枝干高度二分之一的范围进行全周剥皮，且剥皮处枝干的直径大于5cm，剥皮以露出次生组织即可，不可伤害到次生组织。
2.在离地20cm的龙血树主干上水平钻2个孔：孔径5mm，孔深3cm。
3.将200ml促脂剂(含2g/L海藻肥和2g/L寡糖素的水溶液)通过输液孔缓缓输入龙血树体内(如图2)。注意观察是否有漏液问题。
3.剥皮处理12个月后，将整个含有剥皮伤害的枝干切割下来，40度烘干，割取含有红色树脂的部分，粉碎后利用95％乙醇回流提脂，最后经浓缩干燥得龙血竭14.48g/枝。。
Claims (7)
1.促脂剂在促进龙血树结龙血竭中的应用，所述的促脂剂是含2g/L磷酸二氢钾和1umol/L冠菌素的溶液，或2g/L海藻肥和2g/L寡糖素的溶液、或2g/L壳聚糖和100umol/L褪黑素的溶液。
2.一种人工促进龙血树生产龙血竭的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1. 选择健康的龙血树的分枝或主干；
S2. 对步骤S1中的龙血树分枝枝干或主干进行剥皮处理；
S3. 然后用输液法将权利要求1中的促脂剂输入龙血树体内或利用喷施法将权利要求1中的促脂剂喷施整个植株，间隔1-2个月后再次施加一次促脂剂；
S4. 步骤S3处理的9-12个月后，割取有红色树脂形成的部位获得龙血竭。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S1中的龙血属植物为剑叶龙血树、海南龙血树、阿拉伯龙血树或索科特拉龙血树。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S2所述的剥皮处理是指剥去龙血树树干的全周的树皮；步骤S2所述的剥皮深度以露出次生组织即可，不可伤害到次生组织；步骤S2中剥皮处分枝枝干或主干的直径在 5 cm以上；步骤S2中剥皮范围介于离地30 cm以上，叶基部50 cm以下。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S3中对于地径小于10 cm，树高低于4m的龙血树使用喷施法；对于高大，地径10 cm以上龙血树使用输液法，输液时钻孔的深度小于3 ㎝。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤S4中龙血竭的收获方式，对于胸径小于等于10cm的龙血树枝干，从结龙血竭部位的最下端水平锯断，获取含有树脂的部分，余下的伤口截面用草木灰和泥土等混合物封住，对于胸径大于10cm的龙血树树干，直接用剥皮的方式获取含有树脂的部分。
7.一种人工可持续诱导龙血树结龙血竭的方法，在经过权利要求2、3、4、5或6所述的人工促进龙血树生产龙血竭的方法后，再进行以下步骤：
S1. 伤害结龙血竭过程中保留直径过小的结龙血竭的龙血树枝干，让其继续生长；
S2. 剥皮处理会刺激龙血树枝干在剥皮的下端萌生许多侧芽，通过修剪保留其中1-2个侧芽使其生长为粗壮的分枝；
S3. 在上一次龙血竭收获以后，继续选择胸径达到5cm以上龙血树树干进行剥皮加促脂剂的方式诱导龙血树结龙血竭，同时对龙血竭收获后胸径仍达10cm以上的龙血树树干，通过直接加施促脂剂的方式持续诱导其结龙血竭。
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