CN116223092A - 在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,包括步骤:1)将表面含有可脱落目标物质的组织块紧密压印于可变形材料表面后移开;2)将表面保留有脱落的目标物质的可变形材料与吸附性载玻片紧密接触;3)对吸附了目标物质的载玻片进行处理,使所述目标物质可被检测或观察到。该方法操作简单,可用于术中快速病理诊断,且该方法非常适用于表面凹凸不平或病灶分散的组织样本,具有很好的临床应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种采样方法,尤其涉及一种在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法。
背景技术
术中病理诊断是在手术过程中快速了解病变性质的一种方法,可以为医生进一步的手术切除提供诊断依据。通常手术医生会在患者病灶处切割一小块组织,然后送到病理科制作成冰冻切片,以便进行术中病理诊断。但是制作成冰冻切片需要花费一些时间,且如果要了解组织块不同方向上的病理情况还需要对组织的各个面都进行切割并制作成切片;还有一些病灶比较大且分散的组织,医生很难做到对所有可疑部位都切割一小块;例如皮肤癌的样本通常是含有较厚皮下脂肪的大块组织,其中可能分散着多处肿瘤病灶,但脂肪组织通常坑坑洼洼,病理科医生很难判断组织的切缘,也很难对脂肪进行进一步的切割,因此难以制成冰冻切片,即使能切下部分的小块组织,由于术中病理的时间紧迫,也有很难做到对所有可疑部位都取样并制作冰冻切片进行分析。
事实上,有些诊断用的标的物并不需要很大的量便可作出定性地诊断,如肿瘤细胞可根据显微镜下的形态来判断,一些特定性质的细胞可通过免疫染色来进行判断,同时类似于细胞这类标的物是可从组织块上少量脱落的,这为术中快速诊断提供了一种新颖的思路。
为了快速而全面地了解整个样本的情况,最好能一次性对整个样本的各个面都进行采样,对于那些表面不平整的组织,也希望能从那些坑坑洼洼的表面采集到脱落样本,因此需要一种可以直接从组织表面获得脱落样本的简单方法,如果能进一步精确地定位病变部位则能让手术医生尽快为患者切除病灶。
发明内容
为解决现有技术中存在的上述问题,本发明提供了在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,该方法包括步骤:
1)将表面含有可脱落目标物质的组织块紧密压印于可变形材料表面后移开;
2)将表面保留有脱落的目标物质的可变形材料与吸附性载玻片紧密接触;
3)对吸附了目标物质的载玻片进行处理,使所述目标物质可被检测或观察到。
优选地,所述目标物质为特定细胞和/或细胞碎片,在本发明的一种优选实施方式中,所述目标物质为肿瘤细胞或具有某种特性的肿瘤细胞。
优选地,步骤1)中通过将所述组织块在可变形材料上翻转而使组织块的多个表面均紧密压印于可变形材料表面。
优选地,所述组织块用于压印的表面积大于4cm2,进一步优选为大于8cm2。
优选地,所述组织块的表面不平整。
优选地,所述可变形材料可完全贴合组织块高低不平的表面,且组织块被移开以后变形不会自动回弹。
优选地,所述可变形材料具有黏性;进一步优选地,其制作材料为亲水胶体,可选自明胶、卡拉胶、琼脂中的一种或多种。
在本发明的一种优选实施方式中,所述可变形材料由明胶和卡拉胶混合而成。
进一步,步骤2)中所述紧密接触指将表面不平整的可变形材料在所述吸附性载玻片表面压平整,使脱落的目标物质转移到吸附性载玻片上。
优选地,所述吸附性载玻片的尺寸可覆盖所述组织块的全部表面或全部重点区域的表面。
优选地,所述吸附性载玻片为圆形,其直径优选为大于3cm,进一步优选为大于5cm或8cm。
优选地,步骤3)中所述的处理是指直接将载玻片置于显微镜下观察或对载玻片上的目标物质进行染色后再置于显微镜下观察。
进一步,所述在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法还包括步骤:在组织块表面找到所述目标物质脱落前所对应的位置。
在本发明的一种优选实施方式中,步骤1)后在可变形材料表面圈出对应组织块重点区域的位置。
在本发明的另一种优选实施方式中,所述的从组织块表面寻找可脱落目标物质的方法包括如下步骤:
1)将表面含有可脱落目标物质的组织块紧密压印于可变形材料表面,同时标记两者的对应位置后移开;
2)将表面保留有脱落的目标物质的可变形材料与吸附性载玻片紧密接触,同时在所述吸附性载玻片上也标记对应的位置;
3)对吸附了所述目标物质的载玻片进行处理,使所述目标物质可被检测或观察到。
在本发明的另一种优选实施方式中,可通过在组织块、可变形材料、吸附性载玻片中的任意两种或全部三种上设置参照物来为目标物质脱落前所对应的位置定位。
具体地,本发明所述在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法可包括步骤:
1)将表面含有可脱落目标物质的组织块紧密压印于可变形材料表面,同时分别在可变形材料和组织块上设置位置相对应的第一参照物和第二参照物,然后将两者分开;
2)将表面保留有脱落的目标物质的可变形材料与设置有第三参照物的吸附性载玻片紧密接触,所述第三参照物与所述第一参照物位置相对应;
3)对吸附了所述目标物质的载玻片进行处理,使所述目标物质可被检测或观察到;
4)在与所述载玻片结构相同、具有相同标记和第三参照物的透明软膜上标画出被检测或观察到的所述目标物质的位置;
5)通过所述第二参照物和所述第三参照物的对应连接使所述软膜贴合覆盖至所述组织块的表面。
进一步,可在所述组织的表面刻画出所述目标物质的原始位置后去除透明软膜。
优选地,所述第一参照物、第二参照物、第三参照物两两之间具有连接结构,其连接方式可以为套接、卡接或粘接等。
在本发明的一种优选实施方式中,所述连接方式为套接,所述第一参照物为若干针状结构,所述第二参照物为对应数量的内径与针状结构直径相同的筒状结构,所述第三参照物为对应数量的内径与筒状结构外径相同的圆孔结构,使第三参照物与第二参照物可完全匹配,且所述筒状结构的侧壁较薄,不超过0.5mm,使第三参照物与第一参照物之间的误差尽量缩小,或者所述第三参照物的圆孔内径也可设置为可调节。
本发明提供了一种从组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,该方法操作简单,可用于术中快速病理诊断,由于该方法省去了制作冰冻切片的过程,只需将组织样本压印于可变形材料表面即可,获得的可脱落物质(如细胞)可直接用于病理诊断,因此该方法可以更快速地获得初步诊断结果,该方法非常适用于表面凹凸不平或病灶分散的组织样本,进一步该方法还可直接定位病灶在原组织上的位置,使手术医生可在术中进行病灶切除或精确取样,具有很好的临床应用前景。
以下将结合附图对本发明的构思、具体结构及产生的技术效果作进一步说明,以充分地了解本发明的目的、特征和效果。
附图说明
图1是本发明方法步骤1)的操作示意图;
图2是组织块翻转压印轨迹平面示意图;
图3是本发明方法步骤2)的操作示意图;
图4是含肿瘤的皮肤组织结构示意图;
图5是压印以后可变形材料的表面结构示意图;
图6是实施例3中组织块、可变形材料和参照物的结构和操作示意图;
图7是实施例3中载玻片和透明软膜的结构示意图;
图中:1-组织块,2-可变形材料,3-吸附性载玻片,4-表皮,5-脂肪层,6-肿瘤灶,7-第一参照物,8-第二参照物,9-透明软膜,10-第三参照物。
具体实施方式
实施例1
如图1所示,将切面平整或任意面不平整的术中肿瘤组织切块1紧密压印于可变形材料2的表面(所述可变形材料2可由明胶和卡拉胶混合而成),一面压印完后如图2所示将组织块翻转,使每个面都压印于可变形材料2的表面,同时可在可变形材料2上对所有面做标记,如六个表面分别标记为a、b、c、d、e、f,压印时可变形材料会随着组织块表面的凸起或凹槽发生变形。之后将可变形材料2的压印面向下,与吸附性载玻片3紧密接触(图3),同时可变形材料2的压印面也会被压平,可使脱落的目标物质完全接触到载玻片3的表面并被吸附至载玻片上,可以将可变形材料2与吸附性载玻片3制成形状、大小相同的结构,方便按压转移。最后将吸附了脱落细胞(其中含有肿瘤细胞)的载玻片直接置于显微镜下观察或经过固定、染色等处理后置于显微镜下观察。
实施例2
对于含有较厚脂肪的皮肤组织,由于脂肪的切缘不平整,且肿瘤病灶可能较分散,更适合使用本发明的方法来收集脱落细胞,从而从中找出肿瘤细胞。如图4所示为术中切除的一块皮肤组织,其包括最上层的表皮4、粗糙而厚实的脂肪层5以及分散在脂肪各处的正常组织或肿瘤灶6,切割下来的皮肤组织无法通过肉眼直接判断肿瘤的性质,但是要取全所有可疑部位的样本则相对复杂,因此本实施例将含有可疑部位的整块皮肤组织都紧密压印于可变形材料2的表面,压印完成以后可变形材料2的表面也形成了相应的凸起或凹坑(如图5所示),医生可以在重点的凸起或凹坑周围画上圆圈记号并标注一些符号,以便找到肿瘤细胞后可以对应出其在皮肤组织上的位置,手术医生也可以根据病理科指出的位置进一步对肿瘤组织取样或切除。
实施例3
图6和图7所示为本发明含参照物的实施例,在可变形材料2上设置两个针状的第一参照物7并在其上套设两个对应的第二参照物8,第二参照物8为筒状结构,其内径与第一参照物7的直径相同,使两者正好吻合,且第二参照物8可从第一参照物7上移除,当将组织切块1向下压印至可变形材料2上时,第二参照物8会插入组织内,当将组织切块1移除时,第二参照物8可保留在组织内,移除后可变形材料2的表面会保留组织切块1接触面的形态,同时第一参照物7也保留在可变形材料2上,随后将吸附性载玻片3上圆孔结构的第三参照物10套设于第一参照物7上,所述圆孔结构的内径与第二参照物8的外径相同,且第二参照物8的侧壁厚度小于0.5mm,使第三参照物10与第一参照物7基本吻合,翻转可变形材料2后向下压紧可变形材料2和吸附性载玻片3,并用手将原本下凹的部位压至吸附性载玻片3的表面,由于载玻片3具有吸附性,可将原本粘在可变形材料2上的细胞转移至吸附性载玻片3的表面,之后对吸附性载玻片3进行常规处理(如染色等),处理完可在显微镜下观察,找到特定肿瘤细胞,并在吸附性载玻片3上确定其所处的位置(可利用玻片上的划线),本实施例还提供了与吸附性载玻片3完全相同的透明软膜9,其上也设有两个第三参照物10,医生可根据软膜上的划线把吸附性载玻片3上的肿瘤细胞位置对应至透明软膜9上,随后将透明软膜9套设于组织切块1的接触表面,由于软膜材质可被戳穿,因此医生可在透明软膜9的肿瘤细胞位置用笔或其它标记工具穿过软膜在组织切块1的表面直接进行标记,标记后的组织切块1可被送回手术室或拍照发送至手术室,让手术医生对照着进行进一步的肿瘤部位切除或取样。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解,本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此,凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案,皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,包括步骤:
1)将表面含有可脱落目标物质的组织块紧密压印于可变形材料表面后移开;
2)将表面保留有脱落的所述目标物质的可变形材料与吸附性载玻片紧密接触;
3)对吸附了所述目标物质的所述载玻片进行处理,使所述目标物质可被检测或观察到。
2.如权利要求1所述的在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,所述目标物质为特定细胞和/或细胞碎片。
3.如权利要求1所述的在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,步骤1)中通过将所述组织块在所述可变形材料上翻转而使组织块的多个表面均紧密压印于所述可变形材料表面。
4.如权利要求1所述的在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,所述组织块的表面不平整。
5.如权利要求1所述的在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,步骤3)中所述的处理是指直接将载玻片置于显微镜下观察或对载玻片上的目标物质进行染色后再置于显微镜下观察。
6.如权利要求1所述的在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,还包括步骤:在组织块表面找到所述目标物质脱落前所对应的位置。
7.如权利要求6所述的在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,步骤1)后在所述可变形材料表面圈出对应组织块重点区域的位置。
8.如权利要求6所述的在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,通过在组织块、可变形材料、吸附性载玻片中的任意两种或全部三种上设置参照物来为目标物质脱落前所对应的位置定位。
9.一种在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,包括步骤:
1)将表面含有可脱落目标物质的组织块紧密压印于可变形材料表面,同时标记两者的对应位置后移开;
2)将表面保留有脱落的目标物质的可变形材料与吸附性载玻片紧密接触,同时在所述吸附性载玻片上也标记对应的位置;
3)对吸附了所述目标物质的载玻片进行处理,使所述目标物质可被检测或观察到。
10.一种在组织块表面寻找可脱落目标物质的方法,其特征在于,包括步骤:
1)将表面含有可脱落目标物质的组织块紧密压印于可变形材料表面,同时分别在组织块和可变形材料上设置位置相对应的第一参照物和第二参照物,然后将两者分开;
2)将表面保留有脱落的目标物质的可变形材料与设置有第三参照物的吸附性载玻片紧密接触,所述第三参照物与所述第二参照物位置相对应;
3)对吸附了所述目标物质的载玻片进行处理,使所述目标物质可被检测或观察到;
4)在与所述载玻片结构相同、具有相同标记和第三参照物的透明软膜上标画出被检测或观察到的所述目标物质的位置;
5)通过所述第一参照物和所述第三参照物的对应连接使所述软膜贴合覆盖至所述组织块的表面。
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