CN116133530A - 甘露寡糖组合物用于饲喂甲壳类动物的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种适于饲喂甲壳类动物的饲料组合物，该饲料组合物包含甘露寡糖。本发明还涉及甘露寡糖组合物用于饲喂甲壳类动物的用途。本发明还涉及用包含甘露寡糖的饲料组合物饲喂的作为食物来源的甲壳类动物，特别是凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。

Description

甘露寡糖组合物用于饲喂甲壳类动物的用途
相关申请的交叉引用
本申请要求2020年5月29日提交的名称为“USE OF MANNOSE OLIGOSACCHARIDECOMPOSITIONS FOR FEEDING CRUSTACEANS”的欧洲申请号20177491.6的权益，该欧洲申请以引用方式全文并入本文。
技术领域
本发明涉及一种适于饲喂甲壳类动物的新颖饲料组合物，该饲料组合物包含甘露寡糖，该甲壳类动物优选地为十足目(Decapoda)的甲壳类动物，更优选地为枝鳃亚目(Dendrobranchiata)和抱卵亚目(Pleocyemata)的甲壳类动物，最优选地为凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)(以前也称为南美白对虾(Penaeus vannamei))或斑节对虾(Penaeus monodon)品种的虾。本发明还涉及甘露寡糖组合物用于饲喂甲壳类动物的用途，该甲壳类动物优选地为十足目的甲壳类动物，更优选地为枝鳃亚目和抱卵亚目的甲壳类动物，最优选地为凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。本发明进一步涉及所述用途，该用途用于以下目的：降低食物转化率，降低死亡率，提高生长性能，增加如通过组织学测量的胃肠道或肌层厚度，更具体地中肠上皮和刷状缘高度，以及增加甲壳类动物在细菌感染情况下的存活率。
背景技术
在水产养殖中，特别是在甲壳类动物诸如虾、对虾、螃蟹、龙虾(包括海螯虾)、小龙虾(或也被称为淡水螯虾)的养殖中，存在对用于改善总体健康的营养补充剂的需求。
随着世界人口的增加，对用于人类食用的动物蛋白的需求不断增长。养殖甲壳类动物是水产养殖行业中的当前增长的重要组成部分，并且预计未来将对总体水产蛋白产量产生更高的相对贡献。过去二十年来，全球甲壳类动物产量的快速增长在很大程度上反映了亚洲，尤其是中国、泰国和印度尼西亚的白肢虾(凡纳滨对虾)养殖的大幅增长。与斑节对虾相比，凡纳滨对虾的养殖由于在以下参数方面的许多竞争优势而吸引了生产者：更快的生长速率、安全的高放养密度、低盐度耐受性、冷温度耐受性、蛋白质需求(更少的饲料蛋白质)以及繁殖和驯化的可能性和更少的疾病。
然而，海产食品行业正面临着饲养更多动物的挑战。方法包括提高养殖能力，但通常也通过总体上提高动物生长性能和改善动物健康和强壮性。然而，动物经常容易得病，从而导致不良的饲料转化率、低生长性能和低存活率。具体地，当涉及生长性能时，反映在胃肠健康和完整性方面的强壮性是关键因素。对疾病和饲料添加剂的抗性可用来实现这一点。
已知甘露寡糖组合物改善一些动物的总体健康，特别是肠道健康。目前市场上现有的甘露寡糖(或甘露聚糖、或甘露-寡糖、或MOS)组合物都是提取物，诸如酵母提取物(大部分是酵母细胞壁提取物)、绿咖啡豆提取物、魔芋提取物等。它们都表现出不是高纯成分和不具有一致成分的缺点，特别是对于酵母细胞壁提取物如此，并且因此它们在动物中的活性非常不可预测。它们的效应波动很大。此外，由于在提取过程中产生许多废物料流，所以这种甘露寡糖提取物的生产过程具有不可忽略的环境影响。
由本申请人提交的WO2018232078 A1涉及一种通过在微反应器中聚合甘露糖制备的甘露寡糖(MOS)，从而避免了上述问题。以这种方式制备的MOS显示为有助于控制食品安全问题，特别是在各种行业(食品、饲料、化妆品和药物)中对抗沙门氏菌(Salmonella)和大肠杆菌(E.Coli)的污染。在体内试验中显示，摄入MOS组合物有益于各种动物的胃肠健康并提高动物的生长性能。在此上下文中也提及了虾。
Zhang等人(《鱼类和贝类免疫学(Fish&Shellfish Immunology)》33(2012)1027-1032)也公开了使用甘露寡糖来测试凡纳滨对虾的生长性能。然而，在饮食中测试的唯一MOS是酵母源性的BIO-
Figure BDA0004006155890000021
其尤其包含至少30％的蛋白质和1.4％的粗脂肪。
Solidum等人(AACL Bioflux，2016，第9卷，第2期)公开了使用MOS和β-葡聚糖的组合配方(
Figure BDA0004006155890000022
PRE-GE)来饲喂凡纳滨对虾。
Do Huu Hoang等人(《国际渔业和水产研究杂志(International Journal ofFisheries and Aquatic Studies)》2019；7(2):302-307))公开了在幼年龙虾的饮食中使用酵母源性BIO-
Figure BDA0004006155890000031
然而，对于海产食品养殖，特别是对于甲壳类动物养殖，并非所有以这种方式制备的MOS都导致在参数，诸如生长性能、死亡率和食物转换率方面反映的甲壳类动物的高度增加的强壮性。因此，显然仍需要提供更有效的用于甲壳类动物，特别是虾的饲料添加剂。还需要提供以更环境友好的方式生产的饲料添加剂。本发明解决了这些需求。
发明内容
本发明涉及甘露寡糖组合物用于饲喂甲壳类动物，优选地十足目，更优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾的用途，其中该组合物
-可溶于水，优选地水溶解度为20％或更高，或50％或更高，
-包含基于干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含基于干重(db)计至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖。
具体地，所述用途是用于以下中的一者或多者的目的：
-降低食物转化率
-降低甲壳类动物的死亡率
-提高甲壳类动物的生长性能
-增加如通过组织学测量的甲壳类动物肠中肠上皮和刷状缘高度的生长
-增加肠道完整性
-提高甲壳类动物在细菌感染情况下的存活率
(特别是当与用以下物质饲喂的甲壳类动物相比时
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量)。
本发明还涵盖一种甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或50％或更高水中溶解度，
-包含基于干重(db)计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含基于干重(db)计至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
该甘露寡糖组合物用于甲壳类动物的预防性治疗，以预防或降低细菌感染，特别是由弧菌种属(Vibrio spp.)引起的细菌感染的严重性。
本发明还涉及一种适于饲喂甲壳类动物，优选地十足目的甲壳类动物，更优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾的饲料组合物，该饲料组合物包含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物：
-可溶于水，优选地水溶解度为20％或更高，或50％或更高，
-包含基于干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
其中该饲料组合物进一步包含一种或多种其他饲料成分，优选地适于饲喂甲壳类动物的其他饲料成分。该一种或多种其他饲料成分可以选自鱼粉、其他基于海洋动物的蛋白质、基于植物的蛋白质、基于鱼或基于植物的油、全麦、小麦粉、矿物质、维生素、卵磷脂、胆固醇、着色剂(诸如炭黑)和适口性增强剂(诸如水解的海洋蛋白质)。
根据本发明的饲料组合物可通过包括喷雾干燥、挤出、制丸、造粒或附聚的方法制备。
最后，本发明还涉及一种用根据本发明的饲料组合物饲喂的甲壳类动物，优选地为十足目的甲壳类动物。本发明还涉及一种用根据本发明的饲料组合物饲喂的甲壳类动物，优选地为十足目的甲壳类动物。
具体地，用根据本发明的饲料组合物饲喂的凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾在烹饪时与相同烹饪的饲喂以下物质的虾相比具有增加的粉红色：
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
具体实施方式
使用“一种”描述本文的各种成分或组分仅仅是为了方便并且给出的是本发明的一般意义。本说明书应被理解为包含一种或至少一种，并且单数也包括复数意义，除非明显另有说明。
本发明在所附权利要求书中限定。本发明的至少一个方面基于以下发现：与现有的MOS组合物相比，根据本发明包含的甘露寡糖组合物(“本发明的组合物”或“本发明的甘露寡糖组合物”)具有作为用于甲壳类动物的饲料的改善效应。
在本文的任何实施方案中所述的每个特征可以与在其他实施方案中公开的任何其他特征组合。
甲壳类动物
甲壳类动物在本文中意指任何甲壳纲(Crustacea)的节肢动物。这些甲壳类动物大部分生活在水中并且具有硬壳、分段的身体和关节肢。本发明的目标甲壳类动物是养殖并因此需要饲喂的那些甲壳类动物。甲壳类动物的养殖在本文中包括海水养殖(其可以发生在开放的海洋上、海洋的封闭区段上、或在充满海水的槽、池塘或水沟中)、鱼菜共生、综合多营养水产养殖、淡水水产养殖(使用池塘、水库、湖泊、河流、以及其他内陆水路，例如微咸水)。
优选地，根据本发明的甲壳类动物是软甲纲(Malacostraca)和十足目，其包括虾、对虾、螃蟹、龙虾(包括海螯虾)、多刺龙虾或小龙虾(也被称为淡水螯虾)。(虾和对虾在本文中可互换使用，意指相同类型的动物，因为术语虾和对虾没有明确提及任何已知的分类群。虽然通俗地说，术语虾有时适用于较小的物种，而对虾更经常用于较大的物种，但事实上这两个术语之间没有明显的科学区别。)
甲壳类动物优选地为枝鳃亚目。适用于本发明的养殖物种的示例包括：
·白脚虾，也被称为太平洋白虾或国王明虾(凡纳滨对虾，以前也称为南美白对虾)
·大虎虾，也被称为亚洲虎虾或黑虎虾(斑节对虾)
·印度白对虾，也被称为印度对虾(印度明对虾(Fenneropenaeusindicus)，以前也称为印度虾(Penaeus indicus))
甲壳类动物也可以为抱卵亚目。适用于本发明的养殖物种的示例包括：
·印度太平洋沼泽蟹，或也被称为泥蟹或红树林蟹(锯缘青蟹(Scylla serrata))
·红沼泽淡水螯虾(Red swamp crawfish/red swamp crawfish)，或也被称为红沼泽小龙虾、路易斯安那州淡水螯虾、路易斯安那州小龙虾或泥虫(mudbug)(克氏原鳌虾(Procambarus clarkii))
·扇形棘龙虾(波纹龙虾(Panulirus homarus))
·华丽的多刺龙虾，也被称为华丽的岩石龙虾、热带岩石龙虾、或华丽的热带岩石龙虾(锦绣龙虾(Panulirus ornatus))
·巨河对虾，也被称为巨淡水对虾(罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii))
·中华毛蟹，也被称为上海毛蟹(中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis))
·红螯小龙虾，也被称为澳洲龙虾、昆士兰州红螯、红螯、热带蓝小龙虾或淡水蓝螯小龙虾(红螯螯虾(Cherax quadricarinatus))
甲壳类动物的其他示例包括丰年虾(卤虫种属(Artemia spp))。用根据本发明的MOS饲喂的丰年虾然后可以用作比丰年虾更大的甲壳类动物的活饲料，从而将MOS间接地结合到该更大的甲壳类动物的饲料中。该较大的甲壳类动物优选地选自十足目，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目，最优选地为凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
根据本发明的甲壳类动物更优选地是枝鳃亚目和抱卵亚目的虾、对虾、螃蟹、龙虾(包括海螯虾)、小龙虾(淡水鳌虾)。更优选地，甲壳类动物是枝鳃亚目和抱卵亚目的虾或对虾，甚至更优选地是枝鳃亚目的虾或对虾。最优选地，甲壳类动物是凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
本发明还涉及已经用根据本发明的饲料组合物饲喂的甲壳类动物。优选地，该甲壳类动物选自十足目，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目，最优选地虾，诸如凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
已经观察到，已经用根据本发明的饲料组合物饲喂的凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾在烹饪时与饲喂以下物质的虾相比具有增加的粉红色：
·不含任何甘露寡糖组合物；或者
·含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
·含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在该饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
这种增加的粉红色受到消费者的赞赏和追捧。
甘露寡糖组合物(MOS组合物)
在本说明书中，术语甘露寡糖、甘露-寡糖、甘露聚糖、甘露-低聚糖和MOS可互换用于描述相同物质。甘露寡糖定义为DP为3或更高的甘露糖的低聚糖。DP是指聚合度，即低聚糖中存在的单体的数量。在甘露寡糖中，单体是甘露糖。与预期相反，适于本发明目的的甘露寡糖组合物包含至少50重量％的DP为3或更高的甘露寡糖。令人惊讶地，正是这种较高平均分子量的甘露寡糖组合物导致了甲壳类动物的改善的生长和存活率。具有小于50重量％的DP为3或更高的甘露寡糖的甘露寡糖组合物表现得令人惊讶地不太好。不受理论束缚，认为这可能是由于具有较高平均分子量的甘露寡糖具有比较短链甘露寡糖更显著的益生元效应。
可进行HPLC分析(ISO 10504:1998-10)以确定存在于甘露寡糖组合物中的各种其他糖类的量和类型，诸如DP1、DP2、DP3和更高。
本发明涉及包含甘露寡糖的组合物的用途，其特征在于该组合物可溶于水。本发明的组合物具有20％或更大，更优选地30％或更大，甚至更优选地40％或更大，还甚至更优选地50％或更大，还甚至更优选地60％或更大的溶解度。因此，本发明组合物的溶解度可以在20％至90％，更优选地30％至85％，还甚至更优选地40％至80％，还甚至更优选地50％至75％，最优选地60％至75％的范围内。溶解度可根据如下文所述的测试A测量。
测试A
-提供待测量的组合物的10重量％的水溶液，加热至40℃并在40℃
保持1小时。
-然后将组合物在0.45μm孔径过滤器上过滤以去除任何未溶解的物质，并回收滤液。
-然后对滤液进行HPLC分析(ISO 10504:1198-10)并记录结果。
-溶解度以％表示并且对应于与初始10重量％水溶液的干物质相比滤液中的总糖含量。
根据本发明的MOS组合物可以容易地溶解在水中。该组合物在水中形成澄清溶液。
优选地，本发明的MOS组合物的特征还在于其包含小于0.1重量％db，优选地小于0.01重量％db，更优选地小于0.001重量％db的β-葡聚糖。最优选地，本发明的MOS组合物不包含β-葡聚糖或基本上不含β-葡聚糖。现有技术的大多数甘露寡糖含有大量的β-葡聚糖，通常甘露糖:β-葡聚糖的比率为1:1。由于β-葡聚糖的存在，这些组合物被认为具有积极效应。已经令人惊奇地发现，尽管如上所述含有非常低量的β-葡聚糖或根本不含β-葡聚糖，但是本发明的组合物仍具有积极效应。
此外，MOS组合物的特征在于其不是从酵母或植物纤维(诸如从魔芋或从咖啡豆)获得、衍生、分离或提取的。
优选地，本发明的MOS组合物的特征还在于甘露寡糖含量，即DP为3或更高的甘露寡糖，是基于该组合物的干重(db)计为至少50重量％(wt％)，优选地至少55重量％，更优选地至少60重量％，甚至更优选地至少65重量％，还甚至更优选地至少70重量％，最优选地至少80重量％。
本发明的MOS组合物优选地是甘露糖二糖(DP2)的来源。因此，优选地，本发明的MOS组合物的DP2含量为10重量％db至35重量％db，优选地15重量％db至30重量％db，优选地15重量％db至20重量％db。DP2的含量可以为约15重量％db。DP2的含量可以为约16重量％db。DP2的含量可以为约17重量％db。DP2的含量可以为约18重量％db。DP2的含量可以为约19重量％db。DP2的含量可以为约20重量％db。
此外，MOS组合物可包含果糖，该果糖的量为至多10重量％db，诸如从0.5重量％db至10重量％db，优选地至多5重量％db，更优选地至多3重量％db，更优选地至多1重量％db。
此外，MOS组合物可含有甘露糖，该甘露糖的量为5重量％db至30重量％db，优选地5重量％db至20重量％db。甘露糖的含量可以为约15重量％db。
此外，MOS组合物可含有葡萄糖，该葡萄糖的量为1重量％db至15重量％db，优选地1重量％db至10重量％db，更优选地1重量％db至5重量％db。葡萄糖的含量优选地小于10重量％db，更优选地小于5重量％db。
MOS组合物的干物质可根据其应用的需要进行调整。干物质可为至少70重量％，优选地至少75重量％，更优选地至少80重量％，甚至更优选地至少90重量％，还甚至更优选地至少95重量％，诸如例如95重量％至99重量％。MOS组合物可以以粉末形式或以液体形式储存，或负载在固体载体上。以粉末形式，本发明的MOS组合物是淡黄色至白色、自由流动的稳定粉末。
此外，MOS组合物的特征可在于，甘露寡糖主要包含α-1,6键和β-1,6键以及α-1,3键。优选地至少50％，更优选至少75％，甚至更优选地至少80％的键为α-1,6键和β-1,6键以及α-1,3键。这些可使用标准H1 NMR技术进行测量。
用于在微反应器中制备MOS组合物的方法
用于根据本发明使用的甘露寡糖组合物能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得。
甘露糖在微反应器中的缩聚是在140℃至300℃，优选地160℃至250℃，更优选地170℃至230℃的温度下发生的。甘露糖在微反应器中的停留时间为0.1秒(sec)至600sec，更优选地0.3sec至300sec，甚至更优选地0.5sec至150sec，最优选地1sec至100sec，并且微反应器中的压力为0.5巴至30巴，优选地1.0巴至15巴，并且更优选地1.0巴至10巴。
用于制备甘露寡糖组合物的方法包括以下步骤：
a)通过在酸化催化剂存在下在140℃至300℃的温度下将甘露糖传递通过微反应器来使该甘露糖缩聚，以产生含甘露寡糖的组合物，
b)任选地对该甘露寡糖组合物进行中和和/或脱色，
c)任选地对该甘露寡糖组合物进行精制，
d)收集该甘露寡糖组合物。
甘露糖可以是含甘露糖的组合物、单独的甘露糖、甘露糖溶液或这些物质的混合物。优选地，甘露糖是甘露糖水溶液。甘露糖水溶液中甘露糖的浓度并不重要，然而，甘露糖的浓度与粘度要求一致会比较有利。因此，有利的是，甘露糖水溶液含有下述含量的干物质：10重量％至90重量％，优选15重量％至80重量％，更优选40重量％至70重量％，甚至更优选50重量％至60重量％。
所用的酸化催化剂的量优选地是与甘露糖的重量比为甘露糖:酸化催化剂为100:0.005至100:20，更优选地100:0.5至100:10，甚至更优选地100:1至100:5。
优选地，酸化催化剂是柠檬酸、硫酸和/或磷酸。
优选地，将酸化催化剂在其被传递通过微反应器之前与甘露糖混合。
步骤a)中微反应器的温度为140℃至300℃，更优选地160℃至250℃，最优选地170℃至230℃。
在步骤a)期间，含甘露糖的组合物在微反应器中的停留时间优选地为0.1sec至600sec，更优选地0.3sec至300sec，甚至更优选地0.5sec至150sec，最优选地1sec至100sec，并且微反应器中的压力为0.5巴至30巴，优选地1.0巴至15巴，更优选地1.0巴至10巴。
优选地，在步骤a)之前，在酸化催化剂存在下，在比上述步骤a)的温度更低的温度下，将甘露糖传递通过第一微反应器。所述较低温度优选地为90℃至180℃，更优选地100℃至175℃，还更优选地120℃至175℃，甚至更优选地140℃至170℃，最优选地150℃至165℃。在该步骤中，可能已经发生一些缩聚。优选地，含甘露糖的组合物在第一微反应器中的停留时间相当短，诸如5秒或更短，优选地4秒或更短，更优选地3秒或更短，甚至更优选地2秒或更短，诸如0.1秒至2秒、或0.3秒至1秒、或0.5秒至1秒。
第一微反应器和步骤a)的微反应器能够具有相同的配置，它们可相似，并且例如，当分批执行该方法时，它们甚至能够是相同的微反应器。本发明的方法可分批、半连续、脉冲或连续方式运行，优选以连续方式运行。
因此优选地，本发明涉及一种方法，该方法包括
a0)在酸化催化剂存在下在90℃至180℃的温度下将甘露糖传递通过微反应器以获得经加热的甘露糖，
a)在酸化催化剂存在下在140℃至300℃的温度下通过微反应器使该经加热的甘露糖缩聚，
b)任选地对该甘露寡糖组合物进行中和和/或脱色，
c)任选地对该甘露寡糖组合物进行精制，
d)收集该甘露寡糖组合物，
其中该酸化催化剂优选地是柠檬酸、硫酸和/或磷酸。
步骤(a)中的温度优选地为160℃至250℃，更优选地170℃至230℃。
如果需要的话，则在收集该甘露寡糖组合物之前或在步骤c)和/或d)之后，可以进行冷却步骤以降低该甘露寡糖组合物的温度。
该甘露寡糖组合物可以以单程通过微反应器、通过多个连续微反应器制备，或以多程通过同一微反应器制备。
优选地，该甘露寡糖组合物是中和的。可中和甘露寡糖组合物，直到组合物的pH值达到4-7为止。这对于增加产品的稳定性是有利的，例如随时间推移水解较少，因此产品的组成几乎没有变化。另外，优点是产品则适合与对酸或酸性条件敏感的其他成分一起使用。可用任何合适的碱进行中和。优选地，特别是当该甘露寡糖组合物在食物中使用并且还可能在饲料和宠物食物中使用时，碱是苛性碱和/或氢氧化钾。
应当注意的是，可以中和甘露寡糖组合物或使甘露寡糖组合物脱色，或进行这两者。
任选地，可使用本领域已知的方法，经由色谱法来精制或纯化甘露寡糖组合物(例如，以至少部分地去除一些DP1和DP2)。
本发明还涉及能够通过本发明的方法获得的MOS组合物。实际上，此类MOS组合物尤其具有如本文所讨论的改善效应。
MOS组合物在甲壳类动物中的用途和效应
与已用对照饮食饲喂的甲壳类动物相比，或特别是与已用以下物质饲喂的甲壳类动物相比，当用根据本发明的MOS组合物饲喂甲壳类动物时，已经观察到了下述多种用途和效应：
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
已经令人惊讶地发现，根据本发明的MOS组合物对用所述组合物饲喂的甲壳类动物的生长性能具有改善效应。甲壳类动物的生长性能被理解为动物的增重和采食量。具体地，特征在于DP为3或更高的MOS的含量为至少50重量％db的本发明的MOS组合物，特别是对甲壳类动物的生长性能具有令人惊讶的改善效应。这与WO2018232078相反，其中DP为3或更高的MOS的含量为40重量％db或更低，例如35重量％db至40重量％db的MOS组合物对于各种其他动物的生长性能是优选的。
已经令人惊讶地发现，将根据本发明的MOS组合物用于饲喂甲壳类动物能够降低食物转化率。这意味着生产相同重量的甲壳类动物需要更少的饲料。
另外，已经令人惊讶地发现，使用根据本发明的MOS组合物降低了甲壳类动物的死亡率。这意味着当用包含根据本发明的MOS组合物的饲料组合物饲喂时，甲壳类动物死亡较少。
此外，已经令人惊讶地发现，使用根据本发明的MOS组合物用于饲喂甲壳类动物还增加了甲壳类动物的肠微绒毛的长度。增加的中肠上皮和刷状缘高度可以通过组织学测量。
最后，已经令人惊讶地发现，使用根据本发明的MOS组合物用于饲喂甲壳类动物还增加了甲壳类动物在细菌感染存在下的存活率。
凡纳滨对虾和斑节对虾的最常见的细菌感染是弧菌属种属，特别是哈氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、和溶藻弧菌(Vibrioalginolyticus)。这些感染可引起各种重要的综合征，诸如发光和所谓的zoea-2和bolitas综合征。在孵化场中，感染通常表现为：在水和/或虾体中发光；肠的破坏；身体结垢；减少的饲喂和高死亡率。在池塘中，高水平的弧菌属与虾的红色变色(特别是尾巴)以及内部和外部坏死相关联；低饲喂和慢性死亡率；由于虚弱的虾变得对病毒感染更敏感，因此弧菌属可引起继发性感染。常见的管理系统包括消毒设施、设备、水和工作人员、使用无细菌的活饲料、用塑料片覆盖培养槽以防止转移到其他槽。此外，需要良好的水和饲料管理来控制放养密度和通气以在整个养殖循环中维持最佳环境条件。
已经令人惊讶地发现，使用根据本发明的MOS组合物显著地改善了甲壳类动物当感染弧菌属种属时的存活率。
因此，本发明还涵盖一种甘露寡糖组合物，
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或50％或更高水中溶解度，
-包含基于干重(db)计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含基于干重(db)计至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
该甘露寡糖组合物用于甲壳类动物的预防性治疗，以预防或降低细菌感染，特别是由弧菌种属引起的细菌感染的严重性。
根据本发明的MOS组合物显著改善了甲壳类动物的整体强壮性。
最后，用根据本发明的饲料组合物饲喂的甲壳类动物(并且特别是凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾)在烹饪时与相同烹饪的饲喂以下物质的甲壳类动物相比具有增加的粉红色：
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
饲料组合物
本发明还涵盖一种适于饲喂十足目的甲壳类动物，优选地枝鳃亚目和抱卵亚目的甲壳类动物，更优选地虾，最优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾的饲料组合物，该饲料组合物包含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物：
-可溶于水中，优选在水中的溶解度为20％或更高，
-包含基于干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，这些键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
其中该饲料组合物进一步包含一种或多种其他饲料成分(适于饲喂甲壳类动物)。这些其他饲料成分可选自鱼粉、其他基于海洋动物的蛋白质、基于植物的蛋白质、基于鱼或基于植物的油、全麦、小麦粉、矿物质、维生素、卵磷脂、胆固醇、着色剂(诸如炭黑)和适口性增强剂(诸如水解的海洋蛋白质)中的一者或多者。
上述描述中提及的甘露寡糖的所有特征同样适用于在根据本发明的饲料组合物中所包含的甘露寡糖组合物。
除了本发明的MOS组合物之外，适于饲喂十足目的甲壳类动物，优选地枝鳃亚目和抱卵亚目的甲壳类动物，更优选地虾，最优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾的饲料组合物还包含通常用于这种饲料的饲料成分。制备用于甲壳类动物的饲料的领域的技术人员知道该饲料中所需的典型和特定的组成。适用于甲壳类动物的饲料组合物中通常使用的其他饲料成分包括鱼粉、其他基于海洋动物的蛋白质、基于植物的蛋白质、基于鱼或基于植物的油、全麦、小麦粉、矿物质、维生素、卵磷脂、胆固醇、和适口性增强剂(诸如水解的海洋蛋白质)中的一者或多者。
可商购的任何鱼粉或其他基于海洋动物的蛋白质(例如，磷虾粉)可在本文中用于在饲料组合物中提供必需蛋白质。替代地或另外地或作为鱼粉的(部分)替代物，可使用昆虫粉。本领域技术人员通常知道取决于目标物种需要多少鱼粉和/或昆虫粉。
本领域技术人员通常知道取决于目标物种需要何种类型的矿物质和维生素以及各自需要多少。
对于饲喂甲壳类动物，特别是虾或对虾，诸如凡纳滨对虾和斑节对虾，胆固醇和磷脂经常被推荐作为任选的饲料成分。
适口性增强剂包括饲料添加剂和成分，诸如水解的海洋蛋白质。
具体地，根据本发明的MOS组合物在饲料组合物中的包合率基于干重计优选地为饲料组合物的0.01重量％至0.9重量％，优选地饲料组合物的0.05重量％至0.8重量％，更优选地饲料组合物的0.1重量％至0.6重量％，最优选地饲料组合物的0.1重量％至0.5重量％。用于饲喂凡纳滨对虾和斑节对虾的饲料组合物令人惊讶地在饲料组合物中MOS组合物的包合率为0.01重量％至0.9重量％时更有效。在1重量％或更高时，以上列出的效应远远不明显。
根据本发明的饲料组合物可以通过任何已知的方法制备。这些方法包括喷雾干燥、挤出、制丸、造粒或附聚。
本发明的条款
本发明涵盖以下：
条款1：甘露寡糖组合物用于饲喂甲壳类动物，优选地十足目的甲壳类动物的用途，其中该组合物
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或50％或更高水中溶解度，
-包含基于干重(db)计小于0.1重量％的β-葡聚糖，并且
-包含基于干重(db)计至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖。
条款2：根据条款1所述的用途，其中该甘露寡糖组合物不是从酵母或植物纤维获得的。
条款3：根据条款1或2所述的用途，其中该组合物能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得。
条款4：根据条款3所述的用途，其中甘露糖在该微反应器中的缩聚是在140℃至300℃，优选地160℃至250℃，更优选地170℃至230℃的温度下发生的，并且其中该甘露糖在该微反应器中的停留时间为1秒(sec.)至600sec.，优选地1sec.至300sec.，更优选地1sec.至150sec.，并且该微反应器中的压力为0.5巴至30巴，优选地1.0巴至15巴，并且更优选地1.0巴至10巴。
条款5：根据前述条款中任一项所述的用途，其中该甘露寡糖组合物包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，键的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键。
条款6：根据前述条款中任一项所述的用途，其中该甘露寡糖组合物为液体形式、粉末形式或负载在固体载体上。
条款7：根据前述条款中任一项所述的用途，其中每天或每2天、每3天、每4天或每5天用该甘露寡糖组合物或用包含该甘露寡糖组合物的饲料组合物饲喂该甲壳类动物。
条款8：根据前述条款中任一项所述的用途，其中该甲壳类动物选自枝鳃亚目和抱卵亚目的一种或多种甲壳类动物。
条款9：根据条款8所述的用途，其中该甲壳类动物是虾，优选地为凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
条款10：根据前述条款中任一项所述的用途，其中饲料组合物中的该甘露寡糖组合物量基于干重计为该饲料组合物的0.01重量％至0.9重量％，优选地该饲料组合物的0.05重量％至0.8重量％，更优选地该饲料组合物的0.1重量％至0.6重量％，最优选地该饲料组合物的0.1重量％至0.5重量％。
条款11：根据前述条款中任一项所述的用途，该用途用于以下中的一者或多者的目的：
-降低食物转化率
-降低该甲壳类动物的死亡率
-提高该甲壳类动物的生长性能
-增加如通过组织学测量的该甲壳类动物的肠微绒毛、中肠上皮和刷状缘高度的生长
-增加肠道完整性
-提高甲壳类动物在细菌感染情况下的存活率
以上是与当用以下物质饲喂甲壳类动物时相比的
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在该饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
条款12：一种甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或50％或更高水中溶解度，
-包含基于干重(db)计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含基于干重(db)计至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，所述键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
该甘露寡糖组合物用于甲壳类动物的预防性治疗，以预防或降低细菌感染，特别是由弧菌种属引起的细菌感染的严重性。
条款13：一种适于饲喂甲壳类动物，优选地十足目的甲壳类动物，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目的甲壳类动物，更优选地虾，最优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾的饲料组合物，该饲料组合物包含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物：
-可溶于水，优选地水中溶解度为20％或更高，或50％或更高，
-包含基于干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，这些键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
其中该饲料组合物进一步包含一种或多种其他饲料成分。
条款14：根据条款13所述的饲料组合物，其中该一种或多种其他饲料成分选自鱼粉、其他基于海洋动物的蛋白质、基于植物的蛋白质、全麦、小麦粉、基于鱼或基于植物的油、矿物质、维生素、卵磷脂、胆固醇、着色剂和适口性增强剂。
条款15：根据条款13或14所述的饲料组合物，其中该甘露寡糖组合物在该饲料组合物中的量是基于干重计为该饲料组合物的0.01重量％至0.9重量％，优选地该饲料组合物的0.05重量％至0.8重量％，更优选地该饲料组合物的0.1重量％至0.6重量％，最优选地该饲料组合物的0.1重量％至0.5重量％。
条款16：根据条款13至15中任一项所述的饲料组合物，该饲料组合物用于甲壳类动物的预防性治疗，以预防或降低细菌感染，特别是由弧菌种属引起的细菌感染的严重性。
条款17：一种用根据条款13至16中任一项所述的饲料组合物或甘露寡糖组合物饲喂的甲壳类动物，该甘露寡糖组合物：
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或50％或更高的水中溶解度，
-包含基于干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，这些键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
其中该被饲喂的甲壳类动物优选地选自十足目，更优选地为枝鳃亚目和抱卵亚目的虾。
根据该条款的甲壳类动物可以被包含在食物中。该甲壳类动物可以是即食的经烹饪的或生的甲壳类动物。
条款18：根据条款17所述的甲壳类动物，其中该甲壳类动物是丰年虾(卤虫种属)。
条款19：根据条款18所述的丰年虾用于饲喂比丰年虾更大的甲壳类动物的用途，该甲壳类动物优选地选自十足目，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目，最优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
条款20：根据条款17所述的甲壳类动物，其中该甲壳类动物选自凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
条款21：根据条款17所述的甲壳类动物(例如虾)，该甲壳类动物当烹饪时与饲喂以下物质的甲壳类动物相比具有增加的粉红色：
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在该饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
条款22：根据条款20所述的凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾，该虾当烹饪时与饲喂以下物质的虾相比具有增加的粉红色：
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在该饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
条款23：根据条款17所述的甲壳类动物的用途，其中该甲壳类动物是丰年虾(卤虫种属)，用于饲喂比丰年虾更大的甲壳类动物，优选地选自十足目，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目，最优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
条款24：一种食物，该食物包含经烹饪的根据条款17所述的甲壳类动物，其中该甲壳类动物优选地是凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾，其中当与经烹饪的饲喂以下物质的甲壳类动物相比时，该甲壳类动物在烹饪时具有增加的粉红色：
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，该甘露寡糖组合物在该饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
条款25：一种饲养甲壳类动物的方法，该方法包括向该甲壳类动物饲喂包含甘露寡糖组合物的饲料组合物，该甘露寡糖组合物：
-可溶于水，优选地水中溶解度为20％或更高，或50％或更高，
-包含基于干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，这些键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
其中该饲料组合物可进一步包含一种或多种其他饲料成分。
条款26：根据条款25所述的方法，其中该一种或多种其他饲料成分选自鱼粉、其他基于海洋动物的蛋白质、基于植物的蛋白质、全麦、小麦粉、基于鱼或基于植物的油、矿物质、维生素、卵磷脂、胆固醇和适口性增强剂。
条款27：根据条款25或26所述的方法，其中该甲壳类动物选自十足目，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目，更优选地虾，最优选地凡纳滨对虾和斑节对虾品种的虾。
本发明通过以下非限制性实施例说明。
实施例
I.MOS的生产
1.MOS 1(根据本发明)
将含甘露糖的起始溶液(从在负载在树脂上的钼酸钠催化剂上将葡萄糖转化成甘露糖而获得)置于在真空压力和升高的温度(约134℃)下的蒸发器中以去除过量的水并将干物质从50％增加至约85％。然后将溶液置于缓冲槽中以确保有足够的产物进料到微反应器中。在90℃添加50％柠檬酸溶液至达到3重量％。然后将产物在微型热交换器中从90℃快速加热至约220℃。
然后将产物转移到微反应器中，在该微反应器中在215℃的温度下在甘露糖单体之间发生缩聚。将压力保持在1.6巴至3.0巴。反应器中的停留时间为约15秒。甘露糖单体彼此连接以形成不同长度的甘露寡糖链。两个甘露糖单元的这种连接释放水分子，这增加了溶液的水含量。
然后将产物暴露于4％氢氧化钠水溶液以中和柠檬酸并使任何将来的水解最小化。向产物中添加水并稀释以达到约50％的浓度。
然后使产物通过碳柱过滤器，以减少在微反应器中处理期间形成的副产物，该副产物包括糠醛和成色副产物。
然后将产物在介于50℃与70℃之间的温度下暴露于第二真空蒸发过程，以使产物的颜色变化最小化并达到约70％的最终干物质浓度。
2.MOS 2(比较)
进行与MOS 1相同的方法，不同之处在于反应温度为约200℃，并且微反应器中的压力介于2.1巴与4.0巴之间。
3.MOS 3(比较)
进行与MOS 1相同的方法，不同之处在于反应温度为约195℃，并且微反应器中的压力介于1.6巴与3.0巴之间。
每种MOS的反应条件和性质结果的总结(db＝基于干重计)。
Figure BDA0004006155890000211
II.体内生长性能试验
将使用根据本发明的甘露寡糖(MOS)的效应与WO2018232078 A1中公开的其他甘露寡糖(MOS)的效应进行比较。
1.体内生长性能试验1
虾接受参考饮食与6种不同饮食的比较，该6种不同饮食具有2种包含水平的上述3种不同MOS，每种MOS具有不同的平均分子量，其中MOS 1具有根据本发明的最高平均分子量。
·REF：不含任何免疫刺激产品的参考饮食(无藻类、海草或酵母)
·饮食1a：饲料组合物中0.2重量％的MOS 1
·饮食1b：饲料组合物中1重量％的MOS 1
·饮食2a：饲料组合物中0.2重量％的MOS 2
·饮食2b：饲料组合物中1重量％的MOS 2
·饮食3a：饲料组合物中0.2重量％的MOS 3
·饮食3b：饲料组合物中1重量％的MOS 3
与参考饮食相比，MOS仅替代小麦粉，使得它不能影响蛋白质或能量含量。
用造粒机在2mm模头上生产饲料组合物，其中用蒸汽进行蒸汽预调理(在>90℃)和后调理(在>90℃)达20分钟。
根据下表配制饲料组合物(所有值基于干重计以重量％给出)。
Figure BDA0004006155890000221
虾生长试验以重量为+/-1g的虾幼虫(进口至进行试验的比利时)开始并持续4周。有7种饮食，并且每种饮食共重复3次，因此共21个网。每个网接纳20只虾。将所有网放置在更大的槽中，以便具有相同的水质。用生物絮凝物维持大槽中的水质。每个网配备有单独的自动饲喂器。DO(溶氧)>5ppm，温度介于27℃与28℃之间，盐度保持在约15ppt-22ppt，并且pH保持高于7.3。在生长试验开始前，给予虾适应2-3天的机会。
每天饲喂虾。
在开始时和每2周，清点虾的数量并一起称重以获得平均重量和总生物质，以及每只虾的平均重量。三次重复的平均结果示于表1至表6中。4周后结束试验。
表1：平均重量，以g计
Figure BDA0004006155890000222
Figure BDA0004006155890000231
表2：每周增重，以g/虾/周计
饮食 第1周+第2周 第3周+第4周 总体增重
REF 0.84 1.38 4.44
饮食3a 0.80 1.59 4.79
饮食3b 0.90 1.21 4.23
饮食2a 0.90 1.37 4.55
饮食2b 0.82 1.40 4.43
饮食1a 0.87 1.56 4.85
饮食1b 0.91 1.38 4.59
表3：生物质，以g计
饮食 第0天 第14天 第28天 差异
REF 21.91 49.81 83.28
饮食3a 22.90 53.24 93.11 +12％
饮食3b 21.38 50.88 76.53 -8％
饮食2a 22.46 53.78 93.00 +12％
饮食2b 21.92 53.78 80.47 -3％
饮食1a 22.51 54.36 95.31 +14％
饮食1b 23.15 55.55 80.06 -4％
表4：每周饲料，以g计
饮食 第1周+第2周 第3周+第4周 总计
REF 34.22 51.24 85.46
饮食3a 35.18 54.86 90.05
饮食3b 33.69 51.70 85.38
饮食2a 34.75 54.33 89.09
饮食2b 34.22 55.55 89.76
饮食1a 34.80 55.34 90.14
饮食1b 35.43 55.87 91.30
表5：饲料转化率
饮食 第1周+第2周 第3周+第4周 总计
REF 1.23 1.53 1.39
饮食3a 1.16 1.38 1.28
饮食3b 1.14 2.02 1.55
饮食2a 1.11 1.39 1.26
饮食2b 1.07 2.08 1.53
饮食1a 1.09 1.35 1.24
饮食1b 1.09 2.28 1.60
表6：存活率
饮食 第0天 第14天 第28天
REF 20 18.00 15.00 75.00％
饮食3a 20 19.33 15.67 78.33％
饮食3b 20 17.67 14.33 71.67％
饮食2a 20 18.33 16.33 81.67％
饮食2b 20 19.67 14.67 73.33％
饮食1a 20 19.00 16.33 81.67％
饮食1b 20 18.67 14.00 70.00％
根据预期的生长曲线和平均重量每天给予饲料。
发现含有MOS 1的饮食比含有MOS 2或MOS 3的饮食得到更好的结果。此外，发现饮食中仅0.2重量％的MOS的包合率提供了比1重量％的包合率更好的总体结果。这是令人惊讶的，因为预期将需要更多非酵母源性MOS来实现与例如由Zhang等人描述的酵母源性MOS(2.0g kg-1MOS-4.0g kg-1MOS补充，即0.2重量％-0.4重量％)类似的效应。Zhang等人描述的MOS固有地还包含大量β-葡聚糖，已知该β-葡聚糖对虾的肠健康具有其自身有益效应。因此，预期将需要比Zhang等人使用的更多的根据本发明的MOS，这令人惊讶地证明不是这种情况。
2.体内生长性能试验2
第二组试验以重量为0.8g-0.9g的虾幼虫(在试验现场出生)开始并持续6周。
虾接受参考饮食或两种饮食1a或2a中的一者(分别以0.2重量％的包合率包含MOS1和MOS 2)，但每天饲喂或每周饲喂两次(总体相同的总量)。对于每种饮食和饲喂剂量进行8次重复。6周后结束试验。在其他方面，条件与体内试验1中的相同。八次重复的平均结果示于表7至表12中。
表7：平均重量，以g计
Figure BDA0004006155890000251
*每周给予两次而不是每天给予
表8：每周增重，以g/虾/周计
Figure BDA0004006155890000252
*每周给予两次而不是每天给予
表9：生物质，以g计
饮食 第0天 第14天 第28天 第42天
REF 19.40 36.45 80.91 148.29
饮食2a 19.88 34.12 76.04 148.84
饮食1a 19.52 37.06 86.45 153.47
饮食2a* 19.29 36.06 80.43 146.07
饮食1a* 19.68 37.54 85.17 155.23
*每周给予两次而不是每天给予
表10：每周饲料，以g计
饮食 第1周+第2周 第3周+第4周 第5周+第6周 总计
REF 36.29 37.94 74.38 148.61
饮食2a 36.82 36.31 70.97 144.10
饮食1a 36.43 38.60 78.49 153.51
饮食2a* 36.16 37.58 73.71 147.45
饮食1a* 36.60 38.86 77.48 152.93
*每周给予两次而不是每天给予
表11：饲料转化率
饮食 第1周+第2周 第3周+第4周 第5周+第6周 总计
REF 2.13 0.85 1.10 1.15
饮食2a 2.59 0.87 0.98 1.12
饮食1a 2.08 0.78 1.17 1.15
饮食2a* 2.16 0.85 1.12 1.16
饮食1a* 2.05 0.82 1.11 1.13
*每周给予两次而不是每天给予
表12：存活率
饮食 第0天 第14天 第28天 第42天 总计
REF 20 19.50 19.50 19.50 97.50％
饮食2a 20 19.50 19.50 19.38 96.88％
饮食1a 20 19.88 19.75 19.75 98.75％
饮食2a* 20 19.38 19.13 18.88 94.38％
饮食1a* 20 19.75 19.63 19.50 97.50％
*每周给予两次而不是每天给予
发现饮食1a比饮食2a得到更好的结果。此外，发现每天而不是每周饲喂两次饮食也导致更好的虾总体表现。
3.体内生长性能试验3
第三组试验以重量为0.8g-0.9g的虾幼虫(在试验现场出生)开始并持续4周。
虾接受参考饮食(不含免疫刺激成分)、含有0.05重量％(MOS1A)或0.1重量％(MOS1B)的包含剂量的MOS 1(根据本发明)的饮食、或含有市售产品的饮食：Actigen(来自Alltech)(“ACT”)、Prebiosal(“PRE”)和活性MOS(来自Biorigin)(“BIO”)。如制造商所推荐地应用市售产品在饮食中的包合率。
根据本发明的MOS或市售产品代替了参考饮食中的小麦粉，因此它不影响蛋白质或能量含量。
用造粒机在2mm模头上生产饲料。在20分钟内用蒸汽进行预调理(>90℃)和后调理(>90℃)。
饮食的组成示于表13中。
表13.
Figure BDA0004006155890000271
每种饮食包含38.2％的粗蛋白、6.7％的脂质、2.16％的粗纤维和6.92％的灰分。
将虾分配在20个筐中。每个网接纳20只虾。针对REF、MOS1A和MOS1B有8个重复，并且针对ACT、PRE和BIO有4个重复。虾生长试验以平均重量为1克的虾开始并持续4周。
将所有筐放置在2个更大的槽中。以此方式，所有筐具有相同的水质。用生物絮凝物维持该大槽中的水质。每个筐配备有自动饲喂器。
在开始时和每周后，清点虾的数量并一起称重以具有平均重量和总生物质。
每天根据预期的生长曲线和来自初始测量和最后测量的平均重量调整饲料授予。
结果示于以下表14至表15中。
表14：平均重量，以g/虾计
平均值 第0天 第7天 第14天 第21天 第28天
REF 0.967 1.605 2.553 3.542 4.620
MOS1A 0.978 1.546 2.445 3.504 4.648
MOS1B 0.980 1.605 2.528 3.555 4.704
ACT 0.980 1.571 2.465 3.520 4.557
PRE 0.977 1.591 2.470 3.522 4.592
BIO 0.978 1.645 2.488 3.570 4.680
表15：每周生长
第1周 第2周 第3周 第4周 总共4周
REF 0.639 0.948 0.989 1.078 3.653
MOS1A 0.568 0.899 1.060 1.144 3.670
MOS1B 0.625 0.923 1.028 1.149 3.724
ACT 0.591 0.894 1.055 1.037 3.577
PRE 0.614 0.879 1.053 1.070 3.615
BIO 0.667 0.842 1.082 1.111 3.702

Claims (18)

1.甘露寡糖组合物用于饲喂甲壳类动物，优选地十足目的甲壳类动物的用途，其中所述组合物
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或50％或更高的水中溶解度，
-包含基于干重(db)计小于0.1重量％的β-葡聚糖，并且
-包含基于干重(db)计至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖。
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述甘露寡糖组合物不是从酵母或植物纤维获得的。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述组合物能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得。
4.根据权利要求3所述的用途，其中甘露糖在所述微反应器中的所述缩聚是在140℃至300℃，优选地160℃至250℃，更优选地170℃至230℃的温度下发生的，并且其中所述甘露糖在所述微反应器中的停留时间为1秒(sec.)至600sec.，优选地1sec.至300sec.，更优选地1sec.至150sec.，并且所述微反应器中的压力为0.5巴至30巴，优选地1.0巴至15巴，并且更优选地1.0巴至10巴。
5.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述甘露寡糖组合物包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，所述键的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键。
6.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述甘露寡糖组合物为液体形式、粉末形式或负载在固体载体上。
7.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中每天或每2天、每3天、每4天或每5天用所述甘露寡糖组合物或用包含所述甘露寡糖组合物的饲料组合物饲喂所述甲壳类动物。
8.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中所述甲壳类动物选自枝鳃亚目和抱卵亚目的一种或多种甲壳类动物。
9.根据权利要求8所述的用途，其中所述甲壳类动物是虾，优选地为凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
10.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中饲料组合物中的所述甘露寡糖组合物的量基于干重计为所述饲料组合物的0.01重量％至0.9重量％，优选地所述饲料组合物的0.05重量％至0.8重量％，更优选地所述饲料组合物的0.1重量％至0.6重量％，最优选地所述饲料组合物的0.1重量％至0.5重量％。
11.根据前述权利要求中任一项所述的用途，所述用途用于以下中的一者或多者的目的：
-降低食物转化率
-降低所述甲壳类动物的死亡率
-提高所述甲壳类动物的生长性能
-增加如通过组织学测量的所述甲壳类动物的肠微绒毛、中肠上皮和刷状缘高度的生长
-增加肠道完整性
以上是与当用以下物质饲喂甲壳类动物时相比的-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，所述甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，所述甘露寡糖组合物在所述饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
12.一种甘露寡糖组合物，所述甘露寡糖组合物
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或者50％或更高的水中溶解度，
-包含基于干重(db)计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含基于干重(db)计至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，所述键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
所述甘露寡糖组合物用于甲壳类动物的预防性治疗，以预防或降低细菌感染，特别是由弧菌种属引起的细菌感染的严重性。
13.一种适于饲喂甲壳类动物，优选地十足目的甲壳类动物，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目的甲壳类动物，更优选地虾，最优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾的饲料组合物，所述饲料组合物包含甘露寡糖组合物，所述甘露寡糖组合物：
-可溶于水中，优选地水中溶解度为20％或更高，或者50％或更高，并且
-包含以干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，并且
-包含至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，并且
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，所述键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
其中所述饲料组合物进一步包含一种或多种其他饲料成分，所述其他饲料成分选自鱼粉、其他基于海洋动物的蛋白质、基于植物的蛋白质、全麦、小麦粉、基于鱼或基于植物的油、矿物质、维生素、卵磷脂、胆固醇和适口性增强剂。
14.根据权利要求13所述的饲料组合物，其中所述饲料组合物中的所述甘露寡糖组合物的量基于干重计为所述饲料组合物的0.01重量％至0.9重量％，优选地所述饲料组合物的0.05重量％至0.8重量％，更优选地所述饲料组合物的0.1重量％至0.6重量％，最优选地所述饲料组合物的0.1重量％至0.5重量％。
15.根据权利要求13至14中任一项所述的饲料组合物，所述饲料组合物用于甲壳类动物的预防性治疗，以预防或降低细菌感染，特别是由弧菌种属引起的细菌感染的严重性。
16.一种用根据权利要求13至15中任一项所述的饲料组合物或甘露寡糖组合物饲喂的甲壳类动物，所述甘露寡糖组合物：
-可溶于水，优选地具有20％或更高，或者50％或更高的水中溶解度，
-包含基于干重计小于0.1重量％的β-葡聚糖，
-包含至少50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖，
-任选地，能够通过甘露糖在微反应器中的缩聚获得，并且
-任选地，包含α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，其中优选地，所述键中的至少50％是α,β-(1,6)键和α,β-(1,3)键，
其中被饲喂的所述甲壳类动物优选地选自十足目，更优选地为枝鳃亚目和抱卵亚目的虾。
17.根据权利要求16所述的甲壳类动物的用途，其中所述甲壳类动物是丰年虾(卤虫种属)，用于饲喂比丰年虾更大的甲壳类动物，优选地选自十足目，更优选地枝鳃亚目和抱卵亚目，最优选地凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾。
18.一种食物，所述食物包含经烹饪的根据权利要求16所述的甲壳类动物，其中所述甲壳类动物是凡纳滨对虾或斑节对虾品种的虾，其中当与经烹饪的饲喂以下物质的虾相比时，所述虾在烹饪时具有增加的粉红色：
-不含任何甘露寡糖组合物；或者
-含甘露寡糖组合物，所述甘露寡糖组合物在饮食中以相同的包合率具有小于50重量％的聚合度为3或更高的甘露寡糖含量；或者
-含甘露寡糖组合物，所述甘露寡糖组合物在所述饮食中以相同的包合率具有基于干重计大于0.1重量％的β-葡聚糖含量。
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