CN116121239A - 一种核酸纯化分离方法及设备 - Google Patents
一种核酸纯化分离方法及设备 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116121239A CN116121239A CN202310392508.XA CN202310392508A CN116121239A CN 116121239 A CN116121239 A CN 116121239A CN 202310392508 A CN202310392508 A CN 202310392508A CN 116121239 A CN116121239 A CN 116121239A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nucleic acid
- test tube
- suction
- acid purification
- assembly
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
- C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
本发明涉及核酸纯化分离的技术领域,特别是涉及一种核酸纯化分离方法及设备,采用纯化分离方法将包含核酸的样品溶液试管安装在核酸纯化分离设备上,使核酸纯化分离设备对样品溶液试管中的溶液进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作,制备出样品溶液;核酸纯化分离设备包括底座、摇动组件、自转组件、吸排组件和注射组件,所述底座顶端设置有竖板,所述竖板靠近摇动组件的一端设置有电磁铁,所述底座顶端还设置有圆环,自转组件和吸排组件配合使试管中的溶液进行搅拌,电磁铁和吸排组件配合对试管中的溶液进行抽吸和排出,使每次有机溶剂的溶液的添加后进行摇动、搅拌、抽吸和排出的操作,提高了设备试验的准确性。
Description
技术领域
本发明涉及核酸纯化分离的技术领域,特别是涉及一种核酸纯化分离方法及设备。
背景技术
各种形式的核酸应用于多种领域,例如,在重组核酸技术领域中,需要将核酸以探针、基因组核酸或质粒核酸的形式使用。
此外,在诊断学领域中,核酸以多种形式应用于多种目的,例如,在检测和诊断人类病原体时,常常使用核酸探针,同样,核酸也用于检测遗传性病症,并且还用于检测食品污染物,此外,出于从绘制基因图谱到克隆或重组表达的多种目的,也常常用核酸对所需核酸进行定位、识别和分离。
发明专利CN101103109A涉及的用于分离和纯化核酸的方法,包括以下步骤:(1)向生物材料中加入裂解溶液以制备包含核酸的样品溶液,以及,向样品溶液加入水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液,从而制备包含水溶性有机溶剂的样品溶液;(2)使包含水溶性有机溶剂的样品溶液与固相接触,从而将核酸吸附在固相上;(3)使洗涤液与固相接触,从而在核酸被吸附在固相上的状态下洗涤固相;以及(4)使固相与回收液接触,从而使核酸从固相解吸;其中,在步骤(1)中,水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液至少分成两次加入,但是该方法在实际操作过程中,每次溶液添加后需要经过摇动、搅拌、抽吸和排出等动作,而试验员进行摇动、搅拌、抽吸和排出等动作时,其效果难以保证。
发明专利CN112195176A涉及的从生物材料中分离核酸纯化固体的方法,步骤:(1),将含有裸露核酸的液体与沉淀剂混合;在室温下,离心,将上清液倒入新离心管中;(2)向新离心管中加入异丙醇,混匀,在室温下,静置,离心,有白色沉淀生成,弃去白色沉淀以外的其它;洗涤,得到RNA固体,或RNA与DNA的混合固体,保存;本发明用匀浆解离剂匀浆生物材料,不需要加热就可以简单获得含有裸露核酸的液体,用于提取RNA固体和DNA固体;其中,液体与沉淀剂的混合需要离心和搅拌等动作以保证反应充分,而这些动作需要使用不同的设备进行完成,在进行样品转移时浪费时间,且转移过程中也会影响试验结果。
同时在对溶液进行添加时,需要根据样品溶液的量来确定水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加量,因此每次添加溶液的体积需要进行定量以避免添加过多或过少,而普通的吸管难以准确定量添加,并且在进行摇动、搅拌、抽吸和排出等动作时,溶液中的溶质容易粘在试管的内壁,进而使试管内的反应不充分。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明提供一种操作便捷且高效的核酸纯化分离方法及设备。
本发明的一种核酸纯化分离方法,所述核酸纯化分离方法包括以下步骤:
S1:向生物材料中加入裂解溶液,以制备包含核酸的样品溶液;
S2:将包含核酸的样品溶液试管安装在核酸纯化分离设备上,添加水溶性有机溶剂,使核酸纯化分离设备对样品溶液试管中的溶液进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作,制备出样品溶液;
S3:使所述包含水溶性有机溶剂的样品溶液与固相接触,从而将核酸吸附在所述固相上;
S4:使洗涤液与所述固相接触,从而在核酸被吸附在所述固相上的状态下,洗涤所述固相;
S5:使所述固相与回收液接触,从而使核酸从所述固相解吸;
在步骤S2中旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作按照如下步骤进行:
S201:将包含核酸的样品溶液试管插入到核酸纯化分离设备中的自转组件上,在核酸纯化分离设备中压力传感器的辅助下测量出样品溶液试管中样品溶液的体积;
S202:依据压力传感器的检测数值,核酸纯化分离设备中注射组件将相对应体积的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液注射到样品溶液试管中;
S203:注射完成后,核酸纯化分离设备中的摇动组件、自转组件和环形齿带相互配合使样品溶液试管进行摇动和自转,核酸纯化分离设备中的自转组件和吸排组件配合使溶液进行搅拌;
S204:在步骤S203中样品溶液试管进行摇动的过程中,核酸纯化分离设备中的电磁铁和吸排组件配合对样品溶液试管中的溶液进行完全的抽吸和排出,并且通过压力传感器检测数值的变化,核酸纯化分离设备自行调整电磁铁的吸力大小,进而调节吸排组件的抽吸量。
一种核酸纯化分离设备利用所述的一种核酸纯化分离方法制备包含水溶性有机溶剂的样品溶液,包括底座、摇动组件、自转组件、吸排组件和注射组件,所述摇动组件固定设置于底座的上端,所述底座顶端设置有竖板,所述竖板靠近摇动组件的一端设置有电磁铁,所述底座顶端还设置有圆环,所述圆环内侧壁设置有环形齿带,所述圆环的外侧设置有控制器;
所述摇动组件包括转盘,所述转盘固定设置于电机的输出端,所述电机固定设置于底座的顶端;
所述自转组件包括转筒,所述转筒转动设置于转盘上,所述转筒顶端设置有试管,所述转筒底端固定设置有齿轮;
所述吸排组件包括吸筒,所述吸筒内设置有圆杆,所述圆杆远离吸筒的一端固定设置有铁磁块,所述圆杆位于吸筒内的一端固定设置有移动盘,所述圆杆外端设置有压力弹簧,所述压力弹簧与移动盘之间设置有压力传感器;
所述注射组件包括蠕动泵,所述蠕动泵位于自转组件的上方。
优选的,所述摇动组件上设置有多组自转组件,所述摇动组件上还设置有多组吸排组件,每组所述吸排组件对应一组自转组件,所述摇动组件位于圆环内部,所述齿轮与环形齿带进行啮合传动,所述转盘的底端与圆环的顶端不接触,所述齿轮与电机不接触。
优选的,所述转筒顶端设置有凹槽,所述试管位于凹槽内,所述凹槽底端设置有固定底垫,所述凹槽内壁上设置有橡胶卡环,所述试管的底端卡在固定底垫中,所述试管穿过橡胶卡环。
优选的,所述吸筒固定设置在转盘顶端,所述移动盘的外端设置有密封垫,所述吸筒远离铁磁块的顶端固定设置有管道,所述压力弹簧位于吸筒内,所述管道与吸筒连通,所述管道顶端设置有一次性吸管。
优选的,所述一次性吸管的一端插入到管道内,所述一次性吸管的另一端插入到试管内,所述一次性吸管插入到试管的一端与试管内壁不接触,所述一次性吸管插入到试管的末端设置为斜面,所述一次性吸管插入到试管的一端设置为倾斜状态,所述一次性吸管远离管道的一侧设置有铁磁片,所述一次性吸管靠近试管一侧的顶部弯折处具有弹性,所述铁磁片密封在一次性吸管的管壁内。
优选的,所述蠕动泵固定设置于安装架远离转盘中心的一侧,所述安装架固定设置于安装板靠近转盘的一侧,所述安装板固定设置于底座的顶端,所述安装架顶端设置有储液罐,所述储液罐的底端设置有软管,所述软管穿过蠕动泵,所述软管的底端设置有喷头,所述喷头位于试管上方。
优选的,所述转盘的顶端中心固定设置有稳定杆,所述稳定杆与稳定盘转动连接,所述稳定盘固定设置于安装架靠近转盘中心的一侧。
优选的,所述底座的顶端设置有环形槽,所述环形槽内设置有玻璃罩,所述玻璃罩的顶端外部固定设置有把手,所述玻璃罩位于摇动组件、自转组件、吸排组件和注射组件的外端。
本发明的有益效果:
1、本发明通过将包含核酸的样品溶液试管安装在核酸纯化分离设备上进行有机溶剂的添加,通过核酸纯化分离设备的辅助使有机溶剂添加后进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作,使有机溶剂和包含核酸的样品溶液混合更加充分,并且通过机器代替人力进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作,降低了时间和人力成本,提高了设备使用的便捷性。
2、本发明通过设置环形齿带、电磁铁、摇动组件、自转组件和吸排组件,摇动组件、自转组件和环形齿带相互配合使试管进行摇动和自转,自转组件和吸排组件配合使试管中的溶液进行搅拌,电磁铁和吸排组件配合对试管中的溶液进行抽吸和排出,使每次水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加后进行摇动、搅拌、抽吸和排出的操作。
3、本发明通过设置压力传感器和控制器,压力传感器通过检测液面压力的大小,计算出试管中初始样品溶液体积,进而使控制器确定该试管水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液每次的添加量,保证了试管中溶液的添加更加精确,并且随着试管中溶液的添加,控制器增大电磁铁的吸力,保证试管中溶液的抽吸和排出效果,提高了设备试验的准确性。
附图说明
图1是本发明的方法流程示意图;
图2是本发明的结构示意图;
图3是本发明另一方向的结构示意图;
图4是齿轮和环形齿带的结构示意图;
图5是齿轮和环形齿带的仰视结构示意图;
图6是自转组件和吸排组件的结构示意图;
图7是注射组件的结构示意图;
图8是转筒和试管等装置的剖面结构示意图;
图9是吸筒和圆杆等装置的剖面结构示意图;
图10是一次性吸管的结构示意图;
图11是一次性吸管与铁磁片的剖面结构示意图。
附图标记:1、底座;2、摇动组件;3、自转组件;4、吸排组件;5、注射组件;6、竖板;7、电磁铁;8、圆环;9、环形齿带;10、环形槽;11、玻璃罩;12、把手;201、转盘;202、电机;203、稳定杆;204、稳定盘;301、转筒;302、试管;303、齿轮;304、凹槽;305、固定底垫;306、橡胶卡环;401、吸筒;402、圆杆;403、铁磁块;404、铁磁片;405、移动盘;406、密封垫;407、管道;408、压力弹簧;409、一次性吸管;501、蠕动泵;502、安装架;503、安装板;504、储液罐;505、软管;506、喷头。
具体实施方式
为了便于理解本发明,下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施例。相反地,提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容更加透彻全面。
实施例1
如图1所示的一种核酸纯化分离方法,包括以下步骤:
S1:向生物材料中加入裂解溶液,以制备包含核酸的样品溶液;
S2:将包含核酸的样品溶液试管安装在核酸纯化分离设备上,添加水溶性有机溶剂,使核酸纯化分离设备对样品溶液试管中的溶液进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作,制备出样品溶液;
S3:使所述包含水溶性有机溶剂的样品溶液与固相接触,从而将核酸吸附在所述固相上;
S4:使洗涤液与所述固相接触,从而在核酸被吸附在所述固相上的状态下,洗涤所述固相;
S5:使所述固相与回收液接触,从而使核酸从所述固相解吸;
在步骤S2中旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作按照如下步骤进行:
S201:将包含核酸的样品溶液试管插入到核酸纯化分离设备中的自转组件上,在核酸纯化分离设备中压力传感器的辅助下测量出样品溶液试管中样品溶液的体积;
S202:依据压力传感器的检测数值,核酸纯化分离设备中注射组件将相对应体积的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液注射到样品溶液试管中;
S203:注射完成后,核酸纯化分离设备中的摇动组件、自转组件和环形齿带相互配合使样品溶液试管进行摇动和自转,核酸纯化分离设备中的自转组件和吸排组件配合使溶液进行搅拌;
S204:在步骤S203中样品溶液试管进行摇动的过程中,核酸纯化分离设备中的电磁铁和吸排组件配合对样品溶液试管中的溶液进行完全的抽吸和排出,通过压力传感器检测数值的变化,核酸纯化分离设备自行调整电磁铁的吸力大小,进而调节吸排组件的抽吸量。
实施例2
基于实施例1所述的一种核酸纯化分离方法,在步骤二进行制备包含水溶性有机溶剂的样品溶液时,其过程繁杂,为此,提出以下技术方案:
如图2至图10所示的一种核酸纯化分离设备,包括底座1、摇动组件2、自转组件3、吸排组件4和注射组件5,摇动组件2固定设置于底座1的上端,底座1顶端设置有竖板6,竖板6靠近摇动组件2的一端设置有电磁铁7,底座1顶端还设置有圆环8,圆环8内侧壁设置有环形齿带9,摇动组件2、自转组件3和圆环8内侧的环形齿带9配合使自转组件3中的试管302进行旋转移动,并且随着试管302的转动,吸管409对试管302中的样品溶液进行搅拌,同时电磁铁7和吸排组件4配合对试管302中的样品溶液进行抽吸和排出,注射组件5用于将水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液添加进入到试管302中的样品溶液内。
进一步的,摇动组件2包括转盘201,转盘201固定设置于电机202的输出端,电机202固定设置于底座1的顶端,自转组件3包括转筒301,转筒301转动设置于转盘201上,转筒301顶端设置有试管302,转筒301底端固定设置有齿轮303,电机202带动转盘201的转动,转盘201的转动使试管302进行摇动,随着转盘201的转动,齿轮303与环形齿带9进行啮合传动使转筒301进行转动。
更进一步的,吸排组件4包括吸筒401,吸筒401设置于转盘201的顶端,吸筒401内设置有圆杆402,圆杆402远离吸筒401的一端固定设置有铁磁块403,注射组件5包括蠕动泵501,蠕动泵501位于自转组件3的上方,随着转盘201的转动,铁磁块403在靠近电磁铁7时,铁磁块403受到电磁铁7的吸引使圆杆402进行移动,铁磁块403在远离电磁铁7时,受到吸筒401内压力弹簧408的作用,圆杆402进行反向移动,进而使吸排组件4进行抽吸和排出。
摇动组件2上设置有多组自转组件3,摇动组件2上还设置有多组吸排组件4,每组吸排组件4对应一组自转组件3,摇动组件2位于圆环8内部,齿轮303与环形齿带9进行啮合传动,转盘201的底端与圆环8的顶端不接触,齿轮303与电机202不接触,每组自转组件3对应一组吸排组件4,且转盘201进行转动过程中,齿轮303与环形齿带9进行啮合传动带动转筒301的转动,转盘201与圆环8不接触保证转盘201转动的稳定性。
转筒301顶端设置有凹槽304,试管302位于凹槽304内,凹槽304底端设置有固定底垫305,凹槽304内壁上设置有橡胶卡环306,试管302的底端卡在固定底垫305中,试管302穿过橡胶卡环306,试管302通过橡胶卡环306和固定底垫305进行辅助固定,使转筒301转动时带动试管302的转动。
吸筒401固定设置在转盘201顶端,圆杆402位于吸筒401内的一端固定设置有移动盘405,移动盘405的外端设置有密封垫406,吸筒401远离铁磁块403的顶端固定设置有管道407,圆杆402外端设置有压力弹簧408,压力弹簧408位于吸筒401内,电磁铁7对铁磁块403的吸引力大于压力弹簧408的压力时,圆杆402由吸筒401内向外移动,进而使移动盘405和密封垫406移动,使吸筒401进行抽吸动作,电磁铁7对铁磁块403的吸引力小于压力弹簧408的压力时,圆杆402由吸筒401外部向内移动,进而使移动盘405和密封垫406移动,使吸筒401进行排出动作。
管道407与吸筒401连通,管道407顶端设置有一次性吸管409,一次性吸管409的一端插入到管道407内,一次性吸管409的另一端插入到试管302内,一次性吸管409插入到试管302的一端与试管302内壁不接触,一次性吸管409插入到试管302的末端设置为斜面,吸筒401进行抽吸和排出动作时,通过管道407和一次性吸管409的辅助使试管302内的样品溶液进入到一次性吸管内并重新排出到试管302中,并且随着试管302的转动,一次性吸管409对试管302中的样品溶液进行搅拌,同时一次性吸管409可拆卸更换,便于试管302的取出,且保证每次试验的精确性,吸筒401进行抽吸动作时,圆杆402向外移动到极限时,试管302内的样品溶液进入到一次性吸管409中的高度低于一次性吸管409的最高点。
蠕动泵501固定设置于安装架502远离转盘201中心的一侧,安装架502固定设置于安装板503靠近转盘201的一侧,安装板503固定设置于底座1的顶端,安装架502顶端设置有储液罐504,储液罐504的底端设置有软管505,软管505穿过蠕动泵501,软管505的底端设置有喷头506,喷头506位于试管302上方,水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液添加进入到储液罐504内进行储存,蠕动泵501与软管505配合将储液罐504内的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液抽出并由喷头506排出到试管302内。
转盘201的顶端中心固定设置有稳定杆203,稳定杆203与稳定盘204转动连接,稳定盘204固定设置于安装架502靠近转盘201中心的一侧,稳定杆203和稳定盘204使转盘201进行转动时更加稳定。
底座1的顶端设置有环形槽10,环形槽10内设置有玻璃罩11,玻璃罩11的顶端外部固定设置有把手12,玻璃罩11位于摇动组件2、自转组件3、吸排组件4和注射组件5的外端,玻璃罩11用于保证设备进行实验时的密闭,避免外来杂物的污染。
本装置在使用时,将包含核酸样品溶液的试管302插入到转筒301上的凹槽304内,将一次性吸管409的一端插入到管道407中,一次性吸管409的另一端插入到试管302的底端,启动蠕动泵501,蠕动泵501与软管505配合将储液罐504内的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液抽出并由喷头506排出到试管302内,而后启动电机202,电机202带动转盘201的转动,进而使下一个试管302移动到喷头506的下端进行水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加。
随着转盘201的转动,试管302进行摇动,并且齿轮303与环形齿带9进行啮合传动带动转筒301的转动,进而使试管302进行转动,试管302的转动与一次性吸管409配合对试管302中的溶液进行搅拌。
对电磁铁7进行通电,随着转盘201的转动,铁磁块403在靠近电磁铁7时,电磁铁7对铁磁块403的吸引力大于压力弹簧408的压力,圆杆402由吸筒401内向外移动,进而使移动盘405和密封垫406移动,使吸筒401进行抽吸动作,随着转盘201的转动,铁磁块403在远离电磁铁7时,电磁铁7对铁磁块403的吸引力小于压力弹簧408的压力,圆杆402由吸筒401外部向内移动,进而使移动盘405和密封垫406移动,使吸筒401进行排出动作,从而使经过电磁铁7的试管302完成一次溶液的抽吸和排出。
试管302中水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液添加完成后,将一次性吸管409拆卸后再将试管302取出进行下一步试验。
实施例3
基于上述实施例2的一种核酸纯化分离设备,虽然该装置代替了人工对试管302进行水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加,并且在每次添加后对试管302进行摇动、搅拌、抽吸和排出等操作,但是该装置在实际使用过程中,在对样品溶液进行水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加时,需要根据样品溶液的量来确定水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加量,因此每次添加溶液的体积需要进行定量以避免添加过多或过少,而普通的吸管难以准确定量添加,并且随着试管302中液体体积的增大,抽吸和排出溶液的量需要相应增加,并且在进行摇动、搅拌、抽吸和排出等动作时,溶液中的溶质容易粘在试管302的内壁,进而使试管302内的反应不充分,为此,提出以下技术方案:
如图2至图11所示的一种核酸纯化分离设备,圆环8的外侧设置有控制器,压力弹簧408与移动盘405之间设置有压力传感器,一次性吸管409远离管道407的一侧设置有铁磁片404,一次性吸管409靠近试管302一侧的顶部弯折处具有弹性,铁磁片404密封在一次性吸管409的管壁内,一次性吸管409插入到试管302的一端设置为倾斜状态,压力传感器用于检测电磁铁7和试管302中的溶液作用于移动盘405上的力,控制器用于控制设备的协同运作。
本装置在使用时,将试管302插入到转筒301顶端的凹槽304内,而后将一次性吸管409的竖直端插入到管道407中,一次性吸管409的倾斜端插入到试管302中,将样品溶液添加进入到试管302中,随着样品溶液的添加,试管302内液面的压力通过一次性吸管409和管道407作用在移动盘405侧端,进而使压力传感器的检测数值增大,当样品溶液添加完成后,压力传感器的检测数值对应试管302中样品溶液的体积。
随着转盘201的顺时针转动,试管302移动到喷头506的下方,该试管302对应的压力传感器将检测数值输入到控制器内,控制器依据压力传感器的数值控制蠕动泵501的转数,进而控制添加进入到该试管302中水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的体积,样品溶液体积增加对应的需要更多体积的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的体积进行反应,因此当压力传感器的数值增大时,对应的样品溶液体积增加,对应的控制器控制蠕动泵501的转数增加,使添加进入到试管302中的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的体积增加,当压力传感器的数值减小时,对应的样品溶液体积减少,对应的控制器控制蠕动泵501的转数减少,使添加进入到试管302中的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的体积减少,同时,在对试管302进行第二次水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液添加时,其添加量与第一次的添加量相同而不受后续压力传感器的影响,使每次水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加更加精确。
随着转盘201的顺时针转动,试管302在即将靠近电磁铁7时,控制器通过压力传感器的辅助依据试管302中液体的体积调整电磁铁7的通电电流大小,进而控制吸筒401的抽吸量,试管302中液体体积增加时,需要更大的抽吸量来保证混合效果,因此当压力传感器的数值增大时,对应的试管302中的液体体积增大,对应的电磁铁7的通电电流增加,使电磁铁7的吸力增加,从而使吸筒401的抽吸量增加,当压力传感器的数值减小时,对应的试管302中的液体体积减小,对应的电磁铁7的通电电流减小,使电磁铁7的吸力减小,从而使吸筒401的抽吸量减小,保证试管302中不同体积溶液进行抽吸和排出时,混合效果更好。
随着转盘201的顺时针转动,试管302在靠近电磁铁7时,电磁铁7的吸力作用在铁磁片404上,使一次性吸管409的倾斜端逐渐靠近吸筒401,试管302在远离电磁铁7时,一次性吸管409的倾斜端逐渐远离吸筒401,进而使试管302转动的过程中,加强了一次性吸管409对试管302的搅拌效果,且由于试管302的转动离心力,试管302中的液面中间低而四周高,一次性吸管409倾斜端的该动作保证了吸筒401的抽吸效果,同时随着一次性吸管409倾斜端靠近试管302内壁,一次性吸管409对吸附在试管302内壁的溶质进行清理,使反应更加充分。
随着转盘201的转动,压力传感器的检测数值逐渐增大,当压力传感器的检测数值达到最大时,电磁铁7和自转组件3之间的距离最小,并且此时注射组件5位于另一个自转组件3的正上方,通过压力传感器的辅助进行辅助定位,使设备在运行时更加稳定精确。
水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液的添加需要分三次进行,当设备开始运行后,当每个压力传感器均达到过第三次控制器设定的阈值时,控制器控制电机202停止,通过压力传感器的辅助对电机202进行控制,使设备的使用更加稳定。
本发明通过设置摇动组件2、自转组件3、吸排组件4和注射组件5,通过摇动组件2、自转组件3、吸排组件4和注射组件5之间的配合使水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液进行添加时,每次添加后均经过旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作,并且通过压力传感器的辅助进行试管302中溶液体积的测定,提高了设备试验的便捷性和准确性。
本发明的一种核酸纯化分离方法及设备,其安装方式、连接方式或设置方式均为常见机械方式,只要能够达成其有益效果的均可进行实施。
本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和变型,这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种核酸纯化分离方法,其特征在于,所述核酸纯化分离方法包括以下步骤:
S1:向生物材料中加入裂解溶液,以制备包含核酸的样品溶液;
S2:将包含核酸的样品溶液试管安装在核酸纯化分离设备上,添加水溶性有机溶剂,使核酸纯化分离设备对样品溶液试管中的溶液进行旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作,制备出样品溶液;
S3:使所述包含水溶性有机溶剂的样品溶液与固相接触,从而将核酸吸附在所述固相上;
S4:使洗涤液与所述固相接触,从而在核酸被吸附在所述固相上的状态下,洗涤所述固相;
S5:使所述固相与回收液接触,从而使核酸从所述固相解吸;
在步骤S2中旋转移动、搅拌、抽吸和排出溶液的操作按照如下步骤进行:
S201:将包含核酸的样品溶液试管插入到核酸纯化分离设备中的自转组件上,在核酸纯化分离设备中压力传感器的辅助下测量出样品溶液试管中样品溶液的体积;
S202:依据压力传感器的检测数值,核酸纯化分离设备中注射组件将相对应体积的水溶性有机溶剂或包含水溶性有机溶剂的溶液注射到样品溶液试管中;
S203:注射完成后,核酸纯化分离设备中的摇动组件、自转组件和环形齿带相互配合使样品溶液试管进行摇动和自转,核酸纯化分离设备中的自转组件和吸排组件配合使溶液进行搅拌;
S204:在步骤S203中样品溶液试管进行摇动的过程中,核酸纯化分离设备中的电磁铁和吸排组件配合对样品溶液试管中的溶液进行完全的抽吸和排出,并且通过压力传感器检测数值的变化,核酸纯化分离设备自行调整电磁铁的吸力大小,进而调节吸排组件的抽吸量。
2.一种核酸纯化分离设备,所述核酸纯化分离设备利用权利要求1所述的一种核酸纯化分离方法制备包含水溶性有机溶剂的样品溶液,其特征在于,包括底座(1)、摇动组件(2)、自转组件(3)、吸排组件(4)和注射组件(5),所述摇动组件(2)固定设置于底座(1)的上端,所述底座(1)顶端设置有竖板(6),所述竖板(6)靠近摇动组件(2)的一端设置有电磁铁(7),所述底座(1)顶端还设置有圆环(8),所述圆环(8)内侧壁设置有环形齿带(9),所述圆环(8)的外侧设置有控制器;
所述摇动组件(2)包括转盘(201),所述转盘(201)固定设置于电机(202)的输出端,所述电机(202)固定设置于底座(1)的顶端;
所述自转组件(3)包括转筒(301),所述转筒(301)转动设置于转盘(201)上,所述转筒(301)顶端设置有试管(302),所述转筒(301)底端固定设置有齿轮(303);
所述吸排组件(4)包括吸筒(401),所述吸筒(401)内设置有圆杆(402),所述圆杆(402)远离吸筒(401)的一端固定设置有铁磁块(403),所述圆杆(402)位于吸筒(401)内的一端固定设置有移动盘(405),所述圆杆(402)外端设置有压力弹簧(408),所述压力弹簧(408)与移动盘(405)之间设置有压力传感器;
所述注射组件(5)包括蠕动泵(501),所述蠕动泵(501)位于自转组件(3)的上方。
3.如权利要求2所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述摇动组件(2)上设置有多组自转组件(3),所述摇动组件(2)上还设置有多组吸排组件(4),每组所述吸排组件(4)对应一组自转组件(3),所述摇动组件(2)位于圆环(8)内部,所述齿轮(303)与环形齿带(9)进行啮合传动,所述转盘(201)的底端与圆环(8)的顶端不接触,所述齿轮(303)与电机(202)不接触。
4.如权利要求2所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述转筒(301)顶端设置有凹槽(304),所述试管(302)位于凹槽(304)内,所述凹槽(304)底端设置有固定底垫(305),所述凹槽(304)内壁上设置有橡胶卡环(306),所述试管(302)的底端卡在固定底垫(305)中,所述试管(302)穿过橡胶卡环(306)。
5.如权利要求2所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述吸筒(401)固定设置在转盘(201)顶端,所述移动盘(405)的外端设置有密封垫(406),所述吸筒(401)远离铁磁块(403)的顶端固定设置有管道(407),所述压力弹簧(408)位于吸筒(401)内,所述管道(407)与吸筒(401)连通,所述管道(407)顶端设置有一次性吸管(409)。
6.如权利要求5所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述一次性吸管(409)的一端插入到管道(407)内,所述一次性吸管(409)的另一端插入到试管(302)内,所述一次性吸管(409)插入到试管(302)的一端与试管(302)内壁不接触,所述一次性吸管(409)插入到试管(302)的末端设置为斜面,所述一次性吸管(409)插入到试管(302)的一端设置为倾斜状态。
7.如权利要求6所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述一次性吸管(409)远离管道(407)的一侧设置有铁磁片(404),所述一次性吸管(409)靠近试管(302)一侧的顶部弯折处具有弹性,所述铁磁片(404)密封在一次性吸管(409)的管壁内。
8.如权利要求2所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述蠕动泵(501)固定设置于安装架(502)远离转盘(201)中心的一侧,所述安装架(502)固定设置于安装板(503)靠近转盘(201)的一侧,所述安装板(503)固定设置于底座(1)的顶端,所述安装架(502)顶端设置有储液罐(504),所述储液罐(504)的底端设置有软管(505),所述软管(505)穿过蠕动泵(501),所述软管(505)的底端设置有喷头(506),所述喷头(506)位于试管(302)上方。
9.如权利要求2所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述转盘(201)的顶端中心固定设置有稳定杆(203),所述稳定杆(203)与稳定盘(204)转动连接,所述稳定盘(204)固定设置于安装架(502)靠近转盘(201)中心的一侧。
10.如权利要求2所述的一种核酸纯化分离设备,其特征在于,所述底座(1)的顶端设置有环形槽(10),所述环形槽(10)内设置有玻璃罩(11),所述玻璃罩(11)的顶端外部固定设置有把手(12),所述玻璃罩(11)位于摇动组件(2)、自转组件(3)、吸排组件(4)和注射组件(5)的外端。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310392508.XA CN116121239B (zh) | 2023-04-13 | 2023-04-13 | 一种核酸纯化分离方法及设备 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202310392508.XA CN116121239B (zh) | 2023-04-13 | 2023-04-13 | 一种核酸纯化分离方法及设备 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN116121239A true CN116121239A (zh) | 2023-05-16 |
CN116121239B CN116121239B (zh) | 2023-07-07 |
Family
ID=86299441
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202310392508.XA Active CN116121239B (zh) | 2023-04-13 | 2023-04-13 | 一种核酸纯化分离方法及设备 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN116121239B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN117819034A (zh) * | 2024-02-27 | 2024-04-05 | 苏州格锐思生物科技有限公司 | 一种可提升反应速率的生物酶试剂盒 |
Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5580524A (en) * | 1990-09-18 | 1996-12-03 | Anagen Limited | Assay or reaction apparatus with agitating device |
JPH10175532A (ja) * | 1996-12-18 | 1998-06-30 | Denso Corp | 電磁ソレノイド式ポンプおよびこのポンプを用いたブレーキシステム |
US6488647B1 (en) * | 1999-06-29 | 2002-12-03 | Hiromu Miura | Automated solution injection-discharge system and automated peritoneal dialysis system (APDS) |
CN101103109A (zh) * | 2005-02-04 | 2008-01-09 | 富士胶片株式会社 | 用于分离和纯化核酸的方法 |
WO2015072941A1 (en) * | 2013-11-15 | 2015-05-21 | Anatolia Tani Ve Biyoteknoloji Urunleri Arastirma Gelistirme Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi | Laboratory automation system |
WO2020057189A1 (zh) * | 2018-09-19 | 2020-03-26 | 苏恩本 | 试液搅拌装置以及试液搅拌吸取装置 |
US20200377845A1 (en) * | 2017-03-31 | 2020-12-03 | Kurashiki Boseki Kabushiki Kaisha | Nucleic acid separating apparatus |
US20220119799A1 (en) * | 2019-03-12 | 2022-04-21 | Hui Chen | Nucleic acid extraction apparatus |
WO2022088472A1 (zh) * | 2020-10-27 | 2022-05-05 | 广州和实生物技术有限公司 | 一体化核酸检测工作站 |
CN115427780A (zh) * | 2020-02-27 | 2022-12-02 | 莫拉雷研究公司 | 生物样本自动提取系统和装置 |
-
2023
- 2023-04-13 CN CN202310392508.XA patent/CN116121239B/zh active Active
Patent Citations (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5580524A (en) * | 1990-09-18 | 1996-12-03 | Anagen Limited | Assay or reaction apparatus with agitating device |
JPH10175532A (ja) * | 1996-12-18 | 1998-06-30 | Denso Corp | 電磁ソレノイド式ポンプおよびこのポンプを用いたブレーキシステム |
US6488647B1 (en) * | 1999-06-29 | 2002-12-03 | Hiromu Miura | Automated solution injection-discharge system and automated peritoneal dialysis system (APDS) |
CN101103109A (zh) * | 2005-02-04 | 2008-01-09 | 富士胶片株式会社 | 用于分离和纯化核酸的方法 |
WO2015072941A1 (en) * | 2013-11-15 | 2015-05-21 | Anatolia Tani Ve Biyoteknoloji Urunleri Arastirma Gelistirme Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi | Laboratory automation system |
US20200377845A1 (en) * | 2017-03-31 | 2020-12-03 | Kurashiki Boseki Kabushiki Kaisha | Nucleic acid separating apparatus |
WO2020057189A1 (zh) * | 2018-09-19 | 2020-03-26 | 苏恩本 | 试液搅拌装置以及试液搅拌吸取装置 |
US20220119799A1 (en) * | 2019-03-12 | 2022-04-21 | Hui Chen | Nucleic acid extraction apparatus |
CN115427780A (zh) * | 2020-02-27 | 2022-12-02 | 莫拉雷研究公司 | 生物样本自动提取系统和装置 |
WO2022088472A1 (zh) * | 2020-10-27 | 2022-05-05 | 广州和实生物技术有限公司 | 一体化核酸检测工作站 |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN117819034A (zh) * | 2024-02-27 | 2024-04-05 | 苏州格锐思生物科技有限公司 | 一种可提升反应速率的生物酶试剂盒 |
CN117819034B (zh) * | 2024-02-27 | 2024-04-26 | 苏州格锐思生物科技有限公司 | 一种可提升反应速率的生物酶试剂盒 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN116121239B (zh) | 2023-07-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3551293B2 (ja) | 核酸抽出装置 | |
CN116121239B (zh) | 一种核酸纯化分离方法及设备 | |
US11679382B2 (en) | Nucleic acid extraction system | |
CN104893969A (zh) | 一种结构紧凑的自动质粒提取装置 | |
CN104535776A (zh) | 一种基于免疫散射比浊法的全自动检测装置及其方法 | |
JP3425902B2 (ja) | 検体の前処理装置 | |
CN213482274U (zh) | 一种反应管自动加样系统 | |
EP2854979A1 (en) | Magnetic particle washing apparatus and method | |
CN201974434U (zh) | 一种用于样品针快速清洗的自动化装置 | |
CN112213509A (zh) | 一种反应管自动加样系统 | |
CN108562759B (zh) | 全自动分析仪 | |
JPH074220B2 (ja) | プラスミド自動分離装置 | |
CN110068493B (zh) | 用于提取生物活性物质的耗材、自动化装置和方法 | |
CN207908242U (zh) | 用于提取生物活性物质的耗材和自动化装置 | |
CN217261445U (zh) | 一种核酸提取设备及试剂管包装组件与试剂管组件 | |
WO2023202033A1 (zh) | 一种rna自动制备装置及制备方法 | |
KR101544076B1 (ko) | 원심분리기 | |
JPH03296428A (ja) | 撹拌装置 | |
US20210388307A1 (en) | Large-scale magnetic purification system | |
JPH0422611B2 (zh) | ||
CN110303001A (zh) | 一种血流变仪器清洗装置 | |
CN210442390U (zh) | 一种生化分析仪的上试剂机构 | |
CN209362480U (zh) | 快速取样反应釜 | |
CN219574129U (zh) | 一种具有超声波功能的全自动生化仪 | |
CN221007520U (zh) | 一种氯氰菊酯复合剂毒性检测装置 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |