CN116121075A - 一株具有高木质素降解活性的白腐菌株及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一株高木质素降解活性的白腐菌株及其在纸浆生产、废水脱色中的应用。该白腐菌株为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1CGMCC No.40195。该菌株能够选择性降解木质素，具有漆酶(Lac)、锰过氧化物酶(Mnp)和木质素过氧化物酶(Lip)的高活性分泌特点，该菌株具有低淀粉酶和低木聚糖酶活性特点。桉木不用酸或者碱等化学处理方式而直接经该粗毛栓孔菌株发酵液处理后，能够使桉木片获得高得浆率，制得的粗浆质量提高，由此纸浆制得的纸张柔韧性提高、白度增加。该菌株发酵液处理造纸废水，脱色率达到80％以上。

Description

一株具有高木质素降解活性的白腐菌株及其应用
技术领域
本发明涉及一株具有高木质素降解酶活性的白腐菌株及其在生物制浆、废水脱色中的应用。
背景技术
制浆是指形成造纸纤维原料的过程，通过打破木本原料或其他原料(如非木材、草和农用残留物)的化学键来进行的。在制浆过程中应尽可能去除不需要的木质素组分，避免纤维素的分解，一般采用化学制浆法。在化学制浆中，原料与适当的化学物质在水溶液中高温高压蒸煮从而使木质素溶解，化学制浆法溶解木质素有三种，包括碱法、硫酸盐法和亚硫酸盐法。碱法、硫酸盐法和亚硫酸盐法中起到溶解木质素作用的分别是氢氧化钠，氢氧化钠加硫化钠和亚硫酸。化学制浆是整个造纸环节中产生污染物最多的环节。
生物制浆被认为是一种环境友好且有经济效益的木质纤维素原料脱木质素的方法，因为生物预处理减少了制浆过程中化学品的使用量，被认为是传统制浆的潜在替代方法。在制浆之前，使用白腐菌预处理木质纤维素原料，当真菌在原料上生长时，会产生木质素降解酶，如木质素过氧化物酶、漆酶和锰过氧化物酶，从而选择性的降解木质素而保留纤维素。制浆的先决条件就是木质素和半纤维素在半纤维素酶和木质素降解酶的共同作用下被去除。
发明内容
基于此，本发明的目的是提供一种具备高木质素降解酶活性的白腐菌，该白腐菌能够产生大量木质素降解酶而产生较低纤维素酶，更适合用于生物制浆。而且木材经白腐菌降解后，由于木质素的氧化和流失而产生漂白作用，最终形成了白色纤维状木材。本发明的白腐菌能充分分解中层的木质素，使完整的细胞分离成纤维。这会选择性脱木质素从而形成浓缩纤维素。本发明的白腐菌产生的胞外氧化酶包括锰过氧化物酶(MnP)、木质素过氧化物酶(LiP)和漆酶，这些酶会参与木质素在木材中的降解。本发明白腐菌具有以下特点：
1)它应该有相对较快的生长速率；
2)它不应产生色素，从而对纸浆的亮度产生不利影响；
3)具备高木质素降解酶活性和尽可能早的产生木质素降解酶。
基于此，本发明利用白腐菌降解木质素的作用而处理废水使其净化后再流入环境中，减少对环境的破坏，避免了传统造纸工业废水中含有大量的木质素及其相关衍生物等缺陷。
本发明提供的白腐菌，来源于颐和园古树上采集的子实体并分离纯化，在实验室继代培养。由于从自然界中直接分离活性较高。
具体的，发明所提供的来自古树上分离的白腐真菌为粗毛栓孔菌(Trameteshirsuta)菌株，名称为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1。本发明中通过ITS引物鉴定其种属。
所述粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1是从颐和园古树上采集子实体并分离纯化得到，分类名称为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)，已于2022年05月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.40195。
上述的粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在生物制浆中的应用。
本发明还提供所述的粗毛栓孔(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在木质素降解中的应用，特别是在选择性降解木质素中的应用。
本发明还提供所述的粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在生产漆酶、锰过氧化物酶和/或木质素过氧化物酶中的应用。
本发明还提供所述的粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在造纸过程中废水脱色中的应用。
本发明还要求保护一种生物制浆方法，其预处理真菌采用粗毛栓孔菌(Trameteshirsuta)XY1 CGMCC No.40195。
本发明所得的菌株具有生长繁殖快、菌丝白色无杂色。该菌株能够选择性降解木质素，具有高漆酶、高锰过氧化物酶、高木质素过氧化物酶活性。该菌株具有低淀粉酶和低木聚糖酶活性特点。桉木不用酸或者碱等化学处理方式而直接经该毛栓菌株发酵液处理后，能够使桉木片获得高得浆率，制得的粗浆质量提高，由此纸浆制得的纸张柔韧性提高、白度增加。该菌株预处理木材所制得的纸浆拉伸指数、撕裂指数、破裂指数、断裂长度和折叠耐力均有显著提高，显著改善了纸张的强度和亮度。该菌株发酵液处理造纸废水，使其脱色率达到80％以上。
附图说明
图1为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和其他白腐菌对照YH9-4、YH17-6子实体和在PDA培养基上的培养性状，a、b分别为XY1子实体和PDA培养基上的菌丝菌落生长性态；c、d分别为YH9-4子实体和PDA培养基上的菌丝菌落生长性态；e、f分别为YH17-6子实体和PDA培养基上的菌丝菌落生长性态。
图2为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和对照YH9-4、YH17-6在愈创木酚培养基上初筛的显色图片，a、b分别为XY1在愈创木酚培养基上的菌丝菌落和显色状态；c、d分别为YH9-4在愈创木酚培养基上的菌丝菌落和显色状态；e、f分别为YH17-6在愈创木酚培养基上的菌丝菌落和显色状态。
图3为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和对照YH9-4、YH17-6液体培养摇培第8天至第13天漆酶分泌活性曲线。
图4为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和对照YH9-4、YH17-6液体培养摇培第8天至第13天锰过氧化物酶分泌活性曲线。
图5为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和对照YH9-4、YH17-6液体培养摇培第8天至第13天木质素过氧化物酶分泌活性曲线。
图6为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和对照YH9-4、YH17-6液体培养摇培第8天至第13天总木质素降解酶分泌活性曲线。
图7为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和对照YH9-4、YH17-6液体培养摇培第8天至第13天淀粉酶分泌活性曲线。
图8为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195和对照YH9-4、YH17-6液体培养摇培第8天至第13天半纤维素酶分泌活性曲线。
图9为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195发酵液对废水脱色前后。
具体实施方式
下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。
实施例1、粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株的分离、纯化和生长性状初筛
1)、菌株分离、纯化
采集颐和园碧桃树上的真菌子实体，实验室无菌操作台上表面消毒后，切取少量子实体组织分离和纯化，得到XY1、YH9-4和YH17-6三株菌。图1中a、c、e分别为三株真菌采集的子实体照片。
2)三株真菌的PDA培养性状和生长速率测试
将XY1、YH9-4、YH17-6纯化菌株在PDA培养基上培养5～10天，用内径5mm的打孔器打出菌饼，接种在倒有PDA培养基的培养皿中，置于温度28℃、相对湿度80％的培养箱内培养，观察各真菌在PDA培养基上的菌落生长特性，测量观察各菌在不同培养基上的菌丝长势、菌落形态、菌丝和菌落颜色变化，量取并记录菌落直径，计算每天菌落生长速率(菌落生长速率＝总生长量/生长天数)(表1)。
表1三株真菌的基本生长性状
Figure BDA0003837210030000041
XY1、YH9-4、YH17-6三种菌每天的生长速率分别为16.5cm、22.81cm和17.35cm，生长较快；其菌丝在PDA培养基上均白色、无杂色，满足具有较快生长速率，不产生杂色色素的基本要求。图1b、d、f分别为三株真菌纯化物在PDA培养基上的培养性状。
3)愈创木酚初筛
漆酶的产生是生物制浆菌株的基本特征，为测试菌株是否产生漆酶，实验室采用愈创木酚平板法，培养基组成为每400ml PDA培养基另加入100微升愈创木酚，121℃灭菌30min，灭菌后倒皿。使用打孔器在PDA平皿中培养的菌落边缘打出5mm直径的菌饼接种于培养基中心，每菌重复三皿。27℃温度下培养4-5天后观察变色圈情况。图2为三株菌显色情况，都有红色色圈，说明三种菌都有漆酶分泌。
4)质量损失率测试
参照标准LY/T 1283-2011和GB/T 13942.1-2009，先制备PDA培养基，接着将三株菌接种到此培养基上，培养7～10天，然后转到砂基培养基中培养，待菌丝长满饲木后，将同一组试样放到盛有用5mL蒸馏水浸泡的滤纸的密闭容器中，放在蒸汽灭菌器中，在105±2℃下汽蒸30分钟，冷却后，在无菌条件下，将杨木试件以宽面与培养瓶中被菌丝覆盖的饲木相接触，放在饲木上，每片饲木上放1块试样，每1培养瓶中分别放2块饲木和2块试样，将盛有试样的培养瓶放置于培养室中，保持温度28±2℃，相对湿度75～85％，受试菌侵染12周。除检查时必须开灯外，其余时间不开灯。经侵染后，将试样从培养瓶中取出，仔细地刮除试样表面的菌丝和杂质，将试样放到鼓风干燥箱中，在103±2℃条件下干燥至恒重，然后逐个称重试样，精确至0.01g。计算培养前后试块的质量损失率。
表2三株真菌侵染杨木的质量损失率
菌种 质量损失率(％)
XY1 70.92
YH9-4 6.35
YH17-6 10.36
表2显示，XY1引起杨木70.92％质量损失率，而YH9-4和YH17-6仅分别对杨木只有6.35％和10.36％的质量损失率，初步判断XY1具备更高的木质素降解酶活性。
4)、菌株粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1的分子鉴定
利用通用引物ITS4、ITS5扩增XY1的ITS1-5.8S-ITS2段序列(序列表中序列1)，产物送上海生物工程技术服务有限公司测序，所得序列信息通过TrichoKEY软件进行序列比对，鉴定菌株种类。
序列表中序列1如下所示：
acctgcggaa ggatcattaa cgagttttga aatgggttgt tgctggcctt ccgaggcatg 60
tgcacgccct gctcatccac tctacacctg tgcacttact gtaggttggc gtgggtttct 120
agcctccggg tttggaagca ttctgccggc ctatgtacac tacaaactct taaagtatca 180
gaatgtaaac gcgtctaacg catcttaata caactttcag caacggatct cttggctctc 240
gcatcgatga agaacgcagc gaaatgcgat aagtaatgtg aattgcagaa ttcagtgaat 300
catcgaatct ttgaacgcac cttgcgctcc ttggtattcc gaggagcatg cctgtttgag 360
tgtcatgaaa ttctcaaccc ataaatcctt gtgatctatg ggcttggatt tggaggcttg 420
ctggccctag cggtcggctc ctcttgaatg cattagcttg attccgtgcg gatcggctct 480
cagtgtgata attgtctacg ctgtgaccgt gaagcgtttt ggcaagcttc taaccgtcca 540
ttaggacaat tttataacat ctgacctcaa atcaggtagg actacccgct gaacttaagc 600
atatcaataa ggcggagga 619
通过上述子实体形态特征和分子序列特征鉴定XY1为毛栓菌(Trameteshirsuta)，名称为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1，已于2022年6月8日保藏于中国微生物菌种保藏管委理员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.40195。
另鉴定YH9-4为撕裂蜡孔菌Ceriporia lacereta，YH17-6为白囊耙齿菌Irpexlacteus。图1中a、c、e分别为三株真菌采集的子实体照片。
实施例2、粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株木质素降解酶系分泌活性测定
1)、粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195粗酶液的制备
培养基制备：
液体培养基(g/L):PD 26g；胰蛋白胨10g；WYS(微量元素液)100ml。
微量元素液组成：NTA 1.5g；MgSO4·7H2O 3.0g,；MnSO4 0.5g；NaCl 1.0g；FeSO4·7H2O 0.1g,；CoCl2 0.1g,；ZnSO4·7H2O 0.1g；CuSO4·5H2O 0.1g,；KAl(SO4)2·12H2O10mg,；H3BO3 10mg,；Na2MoO4·2H2O 10mg，蒸馏水800ml，采用NaOH调PH值6.5，定容至1000ml，然后121℃高压灭菌器灭菌15分钟备用。
将菌株经过PDA培养基活化后，使用5mm打孔器在菌落边缘打出菌饼接种于液体培养基中，于恒温振荡器中以29℃，160r/min摇培。于第4天开始每天测定酶活。
2)粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株的漆酶活性测试
漆酶(Lac)酶活测定采用ABTS法，以ABTS为底物，总反应体系3ml，其中0.1mol/L乙酸钠2700微升，粗酶液100微升，1mmol/L的ABTS 200μL，于37℃水浴锅中反应5min。测其反应体系在波长为420nm处的吸光度变化，定义应体系每分钟使吸光值增加0.1所需的酶量为一个酶活单位(U),其中420nm处ABTS的摩尔吸光系数为36000L/(mol·cm)。
图3显示从第8天开始XY1粗酶液的漆酶活性显著增高，达到了1032.6U/ml，第9天第10天持续上升，第10天达到最高，有1438.8U/ml，后保持在1200-1350U/ml之间。但YH9-4和YH17-6一直比较低，YH17-6第12天才开始上升，第13天也只有554.4U/ml。XY1的漆酶活性显著高于YH9-4和YH17-6，并且开始大量分泌漆酶的时间也最早，在第8天开始。
3)粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株的锰过氧化物酶(Mnp)活性测试
Mnp酶活测定参考2，6-DMP法，采用以2，6-DMP为底物测定锰过氧化物酶的活力。反应体系为0.1mol/L的酒石酸-酒石酸钠缓冲液(PH＝4.5)共3.3mL，40mmol/L的MnSO4与40mmol/L的2，6-DMP溶液各0.1mL，加入0.1mL4mmol/L的H2O2及0.4mL酶液上清液启动反应。于30℃温水浴3min，测定3min内λ＝469nm处吸光度变化。DMP被氧化形成产物的消光系数为ε＝55000(mol/L)-1cm-1，定义每分钟氧化1μmolDMP的酶量为一个酶活单位(U)。
图4显示，XY1和YH9-4在第8天锰过氧化物酶活性开始增高，XY1达到1143.6U/ml，YH9-4达到620.23U/ml，后几天基本维持在这个水平，YH17-6第12天开始增加，第13天也仅达到320.5U/ml。显示XY1的锰过氧化物酶活性显著高于YH17-6，是YH9-4的2倍，并且开始大量分泌漆酶的时间也最早从第8天开始。
4)粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株的木质素过氧化物酶(Lip)活性测试
Lip酶活测定参考VA法，采用以藜芦醇(VA)为底物测定木质素过氧化物酶活性。反应体系为50mmol/L的酒石酸-酒石酸钠缓冲液(PH＝3.0)1mL，10mmol/L的VA溶液500μL以及酶液上清液1mL，于30℃温水浴10min后加入20mmol/L的H2O2溶液20μL。测反应最初3min内λ＝310nm处吸光度变化，定义每分钟氧化1μmolVA的酶量为一个酶活单位(U)，计算中ε＝9300(mol/L)-1cm-1。
图5显示三株菌的木质素过氧化物酶都是第8天开始增高，XY1达到1293U/ml，YH9-4达到1380.6U/ml，YH17-6也达到了1032.6U/ml，后几天基本维持各自的水平，显示XY1的木质素过氧化物酶活性与YH9-4相当，高于YH17-6。
三种酶活相加，从第8天开始的木质素降解酶活性见表3和图6。
表3三株白腐菌菌株粗酶液第8天到第13天木质素降解酶活性(U/ml)
天数/菌株 XY1 YH9-4 YH17-6
8d 3469.20 2027.91 1149.86
9d 3822.43 2078.49 1066.20
10d 3903.17 2135.03 1110.51
11d 3756.60 2157.26 1097.91
12d 3689.74 2070.94 1543.20
13d 3879.94 2141.31 1881.69
表3和图6显示粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195的木质素降解酶活性从第8天开始一直维持在较高的活性水平，远超过YH9-4和YH17-6菌株，是普通菌株的2倍以上。
实施例3、粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株淀粉酶分泌活性测定
纤维素酶是一系列酶的总称，其可将纤维素水解成葡萄糖或由两个葡萄糖分子组成的纤维二糖。纤维素酶按照功能的不同主要包括三大类：内切葡聚糖酶(Endoglucanase)、外切葡聚糖酶(Exoglucanase)和β-葡萄糖苷酶(β-Glucosidase)。淀粉酶属于水解酶类，其是催化淀粉、糖原和糊精的一类酶的统称。淀粉酶能够将淀粉中α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键断裂，从而将淀粉水解成寡聚糖或单糖分子。水解α-1,4-糖苷键的淀粉酶为液化淀粉酶，水解α-1,6-糖苷键的淀粉酶为糖化淀粉酶。淀粉酶活性以1％淀粉溶液为底物进行测定。将DNS溶液等试剂与底物进行水浴加热，随后用分光光度计检测540nm处吸光度，测定五种水解酶活性。酶活单位为1min产生1μmol葡萄糖所需要的酶量。
具体步骤：
1.内切葡聚糖酶检测：CMC-Na法
1)葡萄糖标准曲线制作
准备试管，按表1分别加入浓度为1mg/ml的葡萄糖标准溶液，蒸馏水和DNS试剂见下表：
表4溶液准备
Figure BDA0003837210030000091
2)加羟甲基纤维素钠1.6ml,酶液0.4ml,于50℃水浴3min,保温30min,加入3,5-二硝基水杨酸2ml(DNS显色剂)，沸水浴5min，冷却后测540nm处吸光度值
3)计算酶活
2.滤纸酶(FPA)活力测量：
酶液，缓冲液，新华滤纸，代入公式(葡萄糖标准线)
图7显示粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195淀粉酶比普通白腐菌含量低，YH9-4最高时分泌达到460以上，专利菌株分泌一直保持低位，该特性有利于制浆过程中提高得浆率。
实施例4、粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株木聚糖酶分泌活性测定
由于半纤维素在单糖组成上的多样性与结构上的高度分支化，半纤维素酶系的种类要比纤维素酶更复杂，完全并彻底地降解半纤维素同样也需要多种酶协同完成。现阶段关于半纤维素酶的研究主要集中在木聚糖酶上。木聚糖酶活性以1％木聚糖溶液为底物进行测定。将DNS溶液等试剂与底物进行水浴加热，随后用分光光度计检测540nm处吸光度，测定五种水解酶活性。酶活单位为1min产生1μmol葡萄糖所需要的酶量。具体步骤：
1)木聚糖标准浓度曲线绘制
量取0-0.5ml木糖标准溶液补齐2ml，加入2mlDNS，沸水浴5min，定容10ml，测540nm处OD
2)取1.8ml的0.5％木聚糖溶液，酶液0.2ml，50℃水浴10min，加入DNS 2ml，沸水浴5min，定容10ml测540nm处OD
图8显示粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195木聚糖酶比普通白腐菌含量低，YH17-6最高时分泌近100U/ml以上，XY1菌株分泌一直保持低位，高木质素降解酶活性低半纤维素酶和低纤维素酶活性有利于制浆过程中提高得浆率。
实施例5、粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株处理尾巨桉的纤维制浆测试
木片预处理采用碱预处理(对照)和生物预水解两种方式。预处理反应温度90～180℃，碱浓度1％～14％，升温时间2h，保温时间2h，液比1：4～1：6。生物预处理反应温度45℃，升温时间90min，保温时间120min，液比1：5～1：10。预处理反应结束后，将提取液与木片分离后用于比色法测定。预处理反应后的木片用蒸馏水反复洗涤并浸泡24h，期间经常换水，至浸泡液无色后取出风干；然后用蒸馏水冲洗后风干。其得浆差异见表5。
表5两种预处理得浆差异比较
处理 得浆率(％) 卡伯值 粘度/ml/g 聚合度
碱预处理(对照) 47.00 22 855 1255
生物预处理 58.79 20 890 1330
生物预处理的比碱处理得浆率提升，从47％提升至58.79％，卡伯值相差不大，都比较低，说明都比较容易成浆；粘度值和聚合度都略高，反映纸浆机械强度以及加工适应性都有所提升。
纸浆送至工厂生产出的纸张测试结果显示：通过粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株处理的生物纸浆值得的纸张其拉伸指数、破裂指数和抗折性分别提高了27.5％、18.9％和45％，撕裂指数下降了15％。
实施例5、粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株发酵液脱色测试
将30℃条件下培养8d的菌丝体转接至含数颗玻璃珠的改进PDA培养基中，200r/min、30℃培养4d后，离心分离(n＝8000r/min、10min)菌丝用无菌水冲洗3～4次，在漂白废水培养基中对菌丝进行均质化备用。然后将经均质化菌丝悬浮液按10％接种到装有90mL已灭菌的漂白废水培养基的三角瓶中四层纱布封口，摇床(n＝150r/min，35℃)培养。处理过的漂白废水用玻璃过滤坩埚抽滤，滤液再经离心分离(n＝8000r/min、10min)，调pH至7.6，用蒸馏水作参比，在721型分光光度计测定A465nm。
结果显示：发酵液对废水的脱色率为82.7％(图9)。

Claims (7)

1.一株粗毛栓孔菌菌株，其特征在于，名称为粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC No.40195。
2.权利要求1所述的粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在生物制浆中的应用。
3.一种生物制浆方法，其预处理真菌采用粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1CGMCCNo.40195。
4.权利要求1所述的粗毛栓孔(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在木质素降解中的应用。
5.权利要求1所述的粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在生产漆酶、锰过氧化物酶和/或木质素过氧化物酶中的应用。
6.权利要求1所述的粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在选择性降解木质素中的应用。
7.权利要求1所述的粗毛栓孔菌(Trametes hirsuta)XY1 CGMCC No.40195菌株在造纸过程中废水脱色中的应用。
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