CN116103309A - 油菜BnHOS1基因及其提高植物抗寒性中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于植物基因工程技术领域，具体为油菜BnHOS1基因及其在提高植物抗寒性中的应用，BnHOS1基因的三个拷贝的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示，通过编辑油菜低温应答负调控因子BnHOS1，获得了具有耐冻性的油菜新材料，丰富了油菜的种质资源，具有良好的应用前景。

Description

油菜BnHOS1基因及其提高植物抗寒性中的应用
技术领域
本发明涉及植物基因工程技术领域，具体涉及油菜BnHOS1基因在提高抗寒中的应用。
背景技术
基因编辑技术作为生命科学领域的重大发现，为作物育种提供了新的方法和策略，基因编辑技术在农业上的广泛应用缩短了传统育种的周期，加速了育种进程，有助于农作物性状的精准遗传改良和特异新种质的创制。
油菜是世界范围内重要的油料作物，兼油用、菜用、蜜用、花用、饲用、肥用。油菜分为冬油菜和春油菜，其中冬油菜在我国种植范围最广、种植面积最大，生长温度是影响油菜苗期生长、光合效率、产量的重要因素，而冬油菜生长的有效积温下降，植株生长缓慢，容易遭受低温伤害，从而导致作物光合作用减弱、生物量积累减缓、产量下降。油菜品种抗寒性的强弱直接关系着油菜的安全越冬性以及限制着油菜的种植范围，因此，创制抗寒油菜特异种质，对于培育抗寒油菜具有十分重要的意义。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供了油菜BnHOS1基因及其提高植物抗寒性中的应用。
一种与植物抗寒性状相关的油菜BnHOS1基因，所述BnHOS1基因的三个拷贝的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。
油菜BnHOS1基因在提高植物抗寒性中的应用，所述BnHOS1基因的三个拷贝的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。
优选的，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除植物的负调控基因BnHOS1基因，得到抗寒、抗冻的新植物材料。
优选的，所述植物为甘蓝型油菜。
优选的，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ IDNO.3中任一个或几个序列，得到抗寒、抗冻的新植物材料。
优选的，抗寒、抗冻的新植物材料的具体获得方法包括：
(1)根据甘蓝型油菜的BnHOS1基因三个拷贝的序列合成构建载体所需要的带接头的引物；
(2)利用步骤(1)设计的引物构建CRISPR/Cas9表达载体与质粒抽提；
(3)通过农杆菌介导的方式利用步骤(2)构建的CRISPR/Cas9表达载体遗传转化甘蓝型油菜下胚轴，利用潮霉素抗性在转基因后代中筛选，获得转基因阳性植株。
优选的，利用3个拷贝共有的靶序列合成所述引物；
所述靶序列的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示。
一种提高油菜抗寒性的方法，在油菜中转入含有BnHOS1基因拷贝的靶序列的CRISPR/Cas9表达载体，获得BnHOS1基因突变体，提高油菜抗寒性。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除甘蓝型油菜抗寒相关负调控基因BnHOS1基因(BnHOS1a，BnHOS1b，BnHOS1c)3个拷贝中的一个或一个以上，获得可以提高抗寒、抗冻的甘蓝型油菜突变新材料，与植株冻结相比，抗寒突变材料在-2℃冷冻3小时仍可保持正常生长发育，植株不冻结，叶面不结冰，呈现出显著的抗寒特性。该抗冻性材料的创制，不仅丰富了油菜抗寒新种质，同时为抗寒新品种培育奠定了基础。
附图说明
图1为CRISPR/Cas9编辑3个BnHOS1拷贝的双靶点位置以及基因结构、保守结构域示意图；
图2为验证CRISPR/Cas9编辑BnHOS1产生的突变体靶位点测序结果；
图3为-2℃处理基因编辑突变体的表型图，图中从左往右依次是K407、抗寒突变植株L10和L28株系，(A)为处理前正常生长的甘蓝型油菜幼苗，(B)为-2℃处理3h后的甘蓝型油菜幼苗。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1：甘蓝型油菜BnHOS1基因CRISPR/Cas9靶序列设计与表达载体构建。
通过甘蓝型油菜数据库BRAD(http://brassicadb.cn/#/Annotations/)查询BnHOS1基因三个拷贝的序列，然后比较其序列的相似性，基于CRISPR RGEN tools网站(http://www.rgenome.net/cas-designer/？tdsourcetag＝s_pcqq_aiomsg)设计出两个为三个拷贝共有的合适靶序列，第一个靶序列为5’-ATGATCTGGTGCATAAGACA-3’，第二个靶序列为5’-CAGAGTACAGTCAAGACATA-3’，其序列如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示，且均位于第五个外显子中，靶标位点如图1所示。在杨凌天润奥科生物科技有限公司分别合成接头引物用于构建CRISPR/Cas9的双靶点载体，引物如下表所示：
表1靶序列引物列表
Figure BDA0003956573680000031
Figure BDA0003956573680000041
BnHOS1基因CRISPR/Cas9载体的构建
第一轮PCR：以pCBC-DT1T2载体为模板，BnHOS1-T1F和BnHOS1-T2R为引物，用高保真酶
Figure BDA0003956573680000042
Max DNA Polymerase(Takara)进行第一轮PCR扩增。
表2第一轮PCR扩增体系
试剂 使用量
PrimeSTAR Max Premix(2X) 10μl
BnHOS1-T1F 1μl
BnHOS1-T2R 1μl
Template 2μl
<![CDATA[dd H<sub>2</sub>O]]> 6μl
表3第一轮PCR扩增程序
Figure BDA0003956573680000043
第二轮PCR：以稀释后的第一轮PCR扩增产物为模板，BnHOS1-T1-BsF和BnHOS1-T2-BsR为引物进行第二轮PCR扩增，然后对PCR产物切胶回收(
Figure BDA0003956573680000044
Quick GelExtractionKit，北京全式金生物技术有限公司)
表4第二轮PCR扩增体系
试剂 使用量
PrimeSTAR Max Premix(2X) 10μl
BnHOS1-T1-BsF 1μl
BnHOS1-T2-BsR 1μl
Template 1μl
<![CDATA[dd H<sub>2</sub>O]]> 7μl
表5第二轮PCR扩增程序
Figure BDA0003956573680000051
靶位点连接到CRISPR终载体：经Bsa I酶切PCR产物和pHSE401载体，失活后，再用T4 DNALigase进行连接。
表6酶切PCR产物反应体系
Figure BDA0003956573680000052
表7酶切pHSE401质粒反应体系
Figure BDA0003956573680000053
表8连接反应体系
反应物 体积
T4 DNA Ligase 1μl
T4 DNA Ligase Buffer 2μl
pHSE401质粒片段 1.5μl
PCR片段 3.5μl
Nuclease-free water 12μl
将T4 DNA Ligase转化大肠杆菌感受态细胞DH5α，涂布于含卡那霉素抗性的LB平板筛选抗性单菌落，送杨凌天润奥科生物科技有限公司测序验证。将测序正确的单克隆菌液转接至大瓶LB液体中摇菌，按照OMEGA质粒提取试剂盒(Plasmid Mini Kit I D6943，Omega Bio-Tek公司)进行质粒提取，并保存质粒于-80℃冰箱，为构建成功的包含双靶点的BnHOS1基因CRISPR/Cas9载体，命名为BnHOS1-T1T2。
BnHOS1-T1T2转化农杆菌GV3101
取1μL构建好的BnHOS1-T1T2载体用电转法转入电转感受态细胞GV3101中，将PCR检测正确的阳性菌落挑取5个分别加到含有利福平、卡那霉素、庆大霉素的液体LB培养基中，于28℃/200rpm摇床过夜培养。
BnHOS1-T1T2农杆菌遗传转化甘蓝型油菜下胚轴
(1)通过农杆菌介导的方式遗传转化甘蓝型油菜自交系K407下胚轴，利用潮霉素抗性在转基因后代中筛选，获得转基因阳性植株。
(2)在靶序列附近设计引物，PCR扩增阳性植株中BnHOS1基因的3个不同拷贝，通过一代测序检测基因编辑突变体植株中各BnHOS1拷贝的编辑事件。
具体步骤参照Bhalla PL,Singh MB(2008)Agrobacterium-mediatedtransformation of Brassica napus and Brassica oleracea.Nature protocols 3:181-189.
实施例2：转基因油菜植株DNA的提取与阳性植株检测
(1)转基因油菜的DNA提取
采用CTAB法提取转基因植株DNA，具体操作方法为：称取每份转基因材料的幼嫩叶片0.1g于已加入1颗钢珠、1mL CTAB溶液(含20μLβ-巯基乙醇)的2ml离心管中，用组织研磨仪研碎后65℃水浴30min，期间每10min混匀一次，水浴结束后每个离心管加入500μL氯仿，混匀后离心10min，吸取上清液加入2倍体积的无水乙醇，混匀，静置30min，离心后小心倒掉上清，沉淀用1ml，75％的乙醇悬浮，再次离心，倒掉上清，沉淀于室温晾干，用100-200μLddH2O溶解后，测浓度，存储于-20℃冰箱。
(2)转基因油菜的鉴定
以提取的转基因油菜基因组DNA为模板，以表9所示的引物为扩增引物(BnHOS1-YZ-A4-F和BnHOS1-YZ-A4-R用于验证BnHOS1a，BnHOS1-C3-YZ-2F和BnHOS1-C3-R用于鉴定BnHOS1b，BnHOS1-YZ-C4-3F和BnHOS1-YZ-I5-R用于验证BnHOS1c)，对BnHOS1基因的3个拷贝分别进行PCR扩增，并将扩增产物切胶纯化，测定浓度后，将PCR回收产物送到测序公司进行测序，分析测序结果，确定基因编辑突变体中BnHOS1基因编辑情况。
表9鉴定引物列表：
Figure BDA0003956573680000071
分析测序结果发现，获得的两株BnHOS1基因编辑株系L10和L28均编辑了BnHOS1a和BnHOS1b，BnHOS1c基因都没被编辑(如图2所示)。其中，L10株系的BnHOS1a基因的第一个靶点处插入碱基G，第二个靶点处插入了碱基C；BnHOS1b基因的第一个靶位点没发生编辑事件，第二个靶位点处插入碱基A。L28株系的BnHOS1a基因第一个和第二个靶位点处均插入碱基C；BnHOS1b基因第一个靶点插入碱基A，第二个靶点插入碱基C。
对生长3周的突变体L10和L28和对照(K407)株系在4℃冷驯化24h后，经-2℃低温冷冻处理3h，K407株系表现为叶柄向下弯曲，叶片萎蔫，颜色深绿，呈水渍状，而L10和L28突变体株系大部分茎秆挺直，叶片平展，表明基因编辑BnHOS1，获得的新材料抗寒性得到了显著提高(如图3A，B所示)。以上研究，为抗寒油菜育种奠定了材料基础，同时为抗寒农作物新种质创制提供了新途径。
实施例3：转基因油菜植株的表型调查
进一步将生长在温室环境中(16/8h，光照/黑暗，22℃)的和T3代L10和L28基因编辑株系进行全生育期的表型观察和统计，我们发现，相比于K407，大多数BnHOS1编辑株系出现早开花现象，开花可提前一周，并且耐热性降低，此外伴随有植株生长后期抗病性降低的现象。
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (8)

1.一种与植物抗寒性状相关的油菜BnHOS1基因，其特征在于，所述BnHOS1基因的三个拷贝的序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述油菜BnHOS1基因在提高植物抗寒性中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除植物的负调控基因BnHOS1，得到抗寒、抗冻的新植物材料。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述植物为甘蓝型油菜。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除SEQID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3中任一个或几个序列，得到抗寒、抗冻的新植物材料。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，抗寒、抗冻的新植物材料的具体获得方法包括：
(1)根据甘蓝型油菜的BnHOS1基因三个拷贝的序列，合成构建载体所需要的带接头的引物；
(2)利用步骤(1)设计的引物构建CRISPR/Cas9表达载体与质粒抽提；
(3)通过农杆菌介导的方式利用步骤(2)构建的CRISPR/Cas9表达载体遗传转化甘蓝型油菜下胚轴，利用潮霉素抗性在转基因后代中筛选，获得转基因阳性植株。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，利用3个拷贝共有的靶序列合成所述引物；
所述靶序列的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示。
8.一种提高油菜抗寒性的方法，其特征在于，利用权利要求6所述的应用，在油菜中转入含有BnHOS1基因拷贝的靶序列的CRISPR/Cas9表达载体，获得BnHOS1基因突变体，提高油菜抗寒性。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080229450A1 (en) * 2006-08-15 2008-09-18 Mcavoy Richard James Method and composition for increasing plant survival & viability under cold storage, or dark and cold storage conditions
WO2013190322A1 (en) * 2012-06-22 2013-12-27 The University Of Exeter Regulation of seed dormancy
CN111560371A (zh) * 2020-04-26 2020-08-21 西北农林科技大学 一种基于CRISPR/Cas9的甘蓝型油菜基因编辑材料
CN112760331A (zh) * 2020-11-13 2021-05-07 中国农业科学院作物科学研究所 大豆GmHOS1a基因和GmHOS1b基因及其应用
CN114150000A (zh) * 2021-10-29 2022-03-08 中国农业科学院油料作物研究所 油菜BnLAC2基因在提高抗寒早花中的应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080229450A1 (en) * 2006-08-15 2008-09-18 Mcavoy Richard James Method and composition for increasing plant survival & viability under cold storage, or dark and cold storage conditions
WO2013190322A1 (en) * 2012-06-22 2013-12-27 The University Of Exeter Regulation of seed dormancy
CN111560371A (zh) * 2020-04-26 2020-08-21 西北农林科技大学 一种基于CRISPR/Cas9的甘蓝型油菜基因编辑材料
CN112760331A (zh) * 2020-11-13 2021-05-07 中国农业科学院作物科学研究所 大豆GmHOS1a基因和GmHOS1b基因及其应用
CN114150000A (zh) * 2021-10-29 2022-03-08 中国农业科学院油料作物研究所 油菜BnLAC2基因在提高抗寒早花中的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MIN SONG等: "Identification of nuclear pore complexes (NPCs) and revealed outer-ring component BnHOS1 related to cold tolerance in B. napus", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES》, vol. 223, pages 1450 - 1461 *
佚名: "登录号：XM_013832239.3", 《GENBANK》, pages 1 - 11 *
佚名: "登录号：XM_013889373.3", 《GENBANK》, pages 1 - 6 *

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