CN116098054B - 一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法及其应用 - Google Patents

一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法及其应用，属于杂交育种技术领域，取出露白期的花苞的花药，液氮处理后，待液氮即将消散时，对所述花药进行按压，室温放置，收集花粉；或取出露白期的花苞的花药，液氮处理后，室温放置，收集花粉。本发明提供的上述方法不仅优化了柑橘杂交育种中父本花粉获取方法，也确保了在花粉粒活力和萌发率不受影响的前提下，解决了父本花粉获取困难的问题，同时缩短父本花粉获取时间，花粉散出较完全，实现新鲜花粉随采随用，提高杂交育种授粉效率，操作简单，也解决了花粉获取时，因干燥时间长或研磨导致的花粉活力和萌发率降低的问题，为高效完成柑橘杂交育种中新品种选育提供技术支撑。

Description

一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法及其应用
技术领域
本发明属于杂交育种技术领域，尤其涉及一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法。
背景技术
新品种一直是人们所追求的，杂交育种能综合父母本的优异性状获得超亲株系，是培育柑橘新品种不可替代的方式。在杂交育种中，杂交后代有一定的良种选出率，若杂交后代群体数量不足，很难从中选出优质的新株系，而杂交后代群体数量规模的形成，不仅依赖于品种特性，更依赖于杂交授粉效率，而授粉效率很大成度上取决于父本花粉的质量和数量。
为了获取花粉，柑橘杂交育种者采用的常规方法是将新鲜花药放置在28～30℃的环境下干燥处理48h，或将花药干燥后进行研磨，收集花粉用于授粉。在实际育种中发现，用常规方法获得的花粉进行授粉，在后期统计杂交种子数量时，较多杂交组合的杂交果实结籽率很低，有些杂交组合的结籽率几乎为0，不仅浪费大量人力财力，还严重延缓新品种选育进程。究其原因，主要有：1、对于散粉困难的柑橘品种，如红美人，采取常规方法干燥2天的处理，仅能释放出少量花粉，花粉不能完全散出，因散出的花粉量少，用此方法获得的花粉进行授粉，杂交果实结籽率不高，若想提高杂交种子结籽率，只能扩大授粉群体数，消耗不必要的人力财力；2、对于不能正常散粉的柑橘品种，如黄岩蜜桔，因花粉囊不易破碎，花药经干燥研磨后成片状，花粉粒难以释放，若干燥时间超过2天，即使干燥成度高，提高了花粉囊的研磨破损率，但花粉粒因干燥时间过长而活力降低，授粉后很难获得杂交种子；3、对于易散粉的柑橘品种，如鸡尾葡萄柚，需要将采集的新鲜花药干燥24h以上，花粉粒才能正常散出，而柑橘花期较短，杂交授粉工作量较大，干燥时间过长会延误杂交授粉进程，不利于授粉工作开展。若直接研磨新鲜花粉，因新鲜花粉囊中水分含量较高，研磨后粘壁现象严重，花粉提取困难，给授粉工作增加难度。
综上所述，传统常规方法获得的花粉活力低，由于花粉囊的阻隔，很难成功将花粉粒授粉至母本柱头上，授粉操作后，杂交果实结籽率低，为了增加杂交后代的结籽数，只能数倍的增加授粉群体数，徒增很多不必要的工作量，且柑橘花期较短，此常规方法制备花粉大大占用了杂交育种时间，容易错过花期，不利于授粉工作的开展。
因此，如何提供一种既不会对花粉粒活力造成影响，又能在短时间内使花粉囊快速破碎完全释放出花粉粒的柑橘杂交育种父本花粉的制备方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法及其应用，以解决上述现有技术存在的问题。
本发明提供了一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法，包括以下步骤：取出露白期的花苞的花药，液氮处理后，待液氮即将消散时，对所述花药进行按压，室温放置，收集散出的花粉；或取出露白期的花苞的花药，液氮处理后，室温放置，收集散出的花粉。
进一步地，所述按压为至花粉囊破碎，释放出花粉。
更进一步地，对花药按压后，再次加入液氮处理，待液氮即将消散时，对花药再次按压。
有益效果：再次加入液氮和再次按压能够确保花药的花粉囊完全破碎释放出花粉粒。
进一步地，所述室温放置的时间为0.5-1h。
有益效果：液氮处理后，室温放置一段时间有利于晾干花粉中多余的水分，更好地散出花粉。
本发明还提供了所述制备方法在柑橘杂交育种中的应用。
柑橘品种分类较多，对于花粉囊不易破碎散出花粉粒的柑橘品种，比如黄岩蜜桔和红美人等，在液氮处理后，需及时按压处理，室温放置后，花粉即从花粉囊中散出。摘取处于露白期的上述柑橘花苞，用镊子将花药取出，放入研钵，倒入液氮将花药冷冻处理，待液氮即将消散时，用研磨棒快速按压花药，使花粉囊破碎，重复加入液氮和按压操作一次，以确保花药的花粉囊完全破碎释放出花粉粒，处理后室温放置0.5-1h，收集花粉，即可获得用于杂交授粉的父本花粉，此法可使花粉成熟但因花粉囊不破导致不散粉的花粉散开较完全。
对于花粉囊易破碎散出花粉的柑橘品种，比如鸡尾葡萄柚和柚类等，在液氮处理后，无需按压处理，室温放置后，花粉即可以散开。摘取露白期的上述柑橘品种的花苞，用镊子将花药取出，放入研钵，再倒入适量液氮将花药冷冻处理，待液氮消散完全，室温放置0.5-1h，即获得用于杂交授粉的父本花粉粒，采用本方法无需按压，花粉即可完全散出，极大缩短了花药散粉时间。
本发明的有益效果：
本发明提供的柑橘杂交育种父本花粉的制备方法不仅优化了柑橘杂交育种过程中父本花粉获取方法，更在花粉活力和萌发率不受影响的前提下，解决了父本花粉获取困难的问题，同时缩短了父本花粉获取时间。
对于液氮处理后需要按压处理的柑橘品种，从加入液氮到按压破碎花粉囊，整体用时可控制在30s-2min，使花粉囊破裂散粉，花粉散出较完全。
对于液氮处理后不需要按压的柑橘品种，从液氮处理到室温放置至于花粉囊自行破碎，整体用时可控制在0.5-1h。
本发明提供的柑橘杂交育种父本花粉的制备方法实现了新鲜花粉随采随用，处理后花粉活力和萌发率不受影响，提高了杂交育种授粉效率，操作简单，同时也解决在花粉获取时，因干燥时间长或研磨导致的花粉活力和萌发率降低的问题，为高效完成育种过程中新品种选育提供技术支撑。
本发明提供的柑橘杂交育种父本花粉的制备方法，无需通过干燥研磨，便能快速获取父本花粉，极大缩短了父本花粉获取、干燥的等待时间，提高了柑橘杂交育种效率。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为效果验证例中花粉活力检测图，其中a、b、c、d、e、f、g、h依次为对比例1、对比例2、对比例3、实施例1、对比例4、对比例5、对比例6、实施例3所得花粉活力检测图；
图2为效果验证例中花粉萌发测定图，其中a、b、c、d、e、f、g、h依次为对比例1、对比例2、对比例3、实施例1、对比例4、对比例5、对比例6、实施例3所得花粉萌发测定图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。
关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明的室温指的是25±2℃。
实施例1
一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法
摘取露白期的黄岩蜜桔花苞，用镊子将花药取出并收集放置研钵中，倒入适量液氮，待液氮即将消散时，立即用研磨棒按压花药，使花粉囊破碎，然后室温放置0.5h后，收集花粉备用。本实施例中从加入液氮到花粉囊破碎，花粉散出，共用时30s，极大地缩短了花粉的制备时间。
实施例2
一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法
摘取露白期的黄岩蜜桔花苞，用镊子将花药取出并收集放置研钵中，倒入适量液氮，待液氮即将消散时，立即用研磨棒按压花药，再次加入适量液氮，待液氮即将消散时，立即用研磨棒再次按压花药，使花粉囊完全破碎；然后室温放置1h，收集花粉备用。本实施例中从加入液氮到花粉囊完全破碎，花粉散出，共用时2min，同样极大地缩短了花粉的制备时间。
对比例1
新鲜花粉的收集
摘取露白期的黄岩蜜桔花苞，用镊子将花药取出并收集备用。
对比例2
新鲜花粉研磨处理
摘取露白期的黄岩蜜桔花苞，用镊子将花药取出，放在研钵中直接研磨0.2h，备用。
对比例3
对花粉干燥研磨处理
摘取露白期的黄岩蜜桔花苞，用镊子将花药取出，放在研钵中，在29±1℃干燥2d，待花药干燥后研磨5min，收集备用。
实施例3
一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法
摘取露白期的鸡尾葡萄柚花苞，用镊子将花药取出，放在研钵中，倒入适量液氮处理，待液氮挥发完，花粉囊即破碎，室温放置0.5h后，花粉完全散出，收集花粉备用。
实施例4
一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法
摘取露白期的鸡尾葡萄柚花苞，用镊子将花药取出，放在研钵中，倒入液氮处理，待液氮挥发完，花粉囊即破碎，室温放置1h后，花粉完全散出，收集花粉备用。
对比例4
新鲜花粉的收集
摘取露白期的鸡尾葡萄柚花苞，用镊子将花药取出并收集备用。
对比例5
新鲜花粉研磨处理
摘取露白期的鸡尾葡萄柚花苞，用镊子将花药取出，放在研钵中直接研磨0.2h，备用。
对比例6
花粉干燥处理
摘取露白期的鸡尾葡萄柚花苞，用镊子将花药取出，放在培养皿中，放在29±1℃干燥环境下1d，待花粉干燥后，收集备用。
效果验证例
分别去除对比例1和4所得花粉粒的花粉囊壁，获得各自花粉，同实施例1、3以及对比例2、3、5和6所得花粉用于花粉活力检测试验中。
1.I2-KI法检测花粉活力
1.1I2-KI溶液的配制
称取1g的KI溶于5mL超纯水中，加入0.5g的I2，完全溶解后定容至150mL，存贮在棕色瓶中备用；
1.2花粉活力检测
分别将实施例1、实施例3、对比例1-6所得花粉置于载玻片上，加入一滴超纯水，再加入1滴I2-KI溶液，盖上盖玻片，在Nikon Eclipse E200Ti-E inverted Microscope生物电子显微镜下观察，每个处理查看5张玻片，一张片子查看6个不同视野，统计深褐色和浅褐色的花粉粒数，被I2-KI溶液染成深褐色的为淀粉含量高且活力较强的花粉粒，被I2-KI溶液染成浅褐色的为淀粉含量低且活性低的花粉，见图1，花粉活力％＝深褐色花粉粒数/(深褐色花粉粒数+浅褐色花粉粒数)*100。
2.花粉萌发测定
萌发培养基配方为200g/L蔗糖+0.02g/L硼酸+5g/L琼脂。
硼酸母液配制：称取0.2g硼酸放入100mL离子水中，溶化完全，装瓶备用。
培养基配制：用烧杯盛取45mL离子水，隔着石棉网用酒精灯加热，加入10g蔗糖、0.25g琼脂(强度为1300g/cm2)，再加入0.5mL硼酸母液，搅拌均匀，待琼脂、蔗糖完全融化后，加水至50mL备用。
培养基熔化后，用玻璃棒蘸取培养基涂布在载玻片上，放置在垫有湿润滤纸的培养皿中备用，分别将实施例1、实施例3对比例1-6所得花粉散落在载玻片上，并盖上培养皿盖，在25-28℃环境下培养20h，在电子显微镜下观察花粉萌发情况，每个处理查看5张玻片，每张片子查看6个视野，拍照记录并统计花粉萌发率，见图2，花粉萌发率％＝萌发花粉数/(萌发花粉数+未萌发花粉数)*100。
3杂交授粉试验
在2021年4月11日，分别将实施例1、实施例3、对比例2、3、5、6所得花粉以及对比例1和3所得花粉授粉到人工去掉的母本柑橘品种红美人柱头上，每个处理授粉3棵树，并于2021年10月28日果实成熟后，采下杂交果实，统计所得座果率和结籽数/果，见表2。
4.试验结果
采用Excel 2010进行数据统计和分析，差异显著性分析选用D.B.Duncan新复极差法，小写字母表示在0.05水平差异显著，不同方式处理对柑橘花粉活力及萌发的影响见表1，不同方式处理花粉对柑橘杂交授粉果实结籽量的影响见表2。
表1
表1中不同小写字母表示同一柑橘品种、同一列数据在0.05水平差异显著。
如表1所示，不同处理对柑橘花粉活力及花粉萌发的影响不同。
对于黄岩蜜桔和鸡尾葡萄柚花粉，液氮处理的花粉活力和花粉萌发率均显著高于新鲜花粉研磨、极显著高于花粉干燥研磨处理，与新鲜花粉无显著差异；说明干燥处理会显著降低花粉活力和花粉萌发率，新鲜花粉经研磨处理，亦显著降低花粉活力和花粉萌发率，液氮处理不影响花粉活力和花粉萌发率。
表2
表2中不同小写字母表示同一柑橘品种、同一列数据在0.05水平差异显著。
如表2所示，将不同处理后获得的花粉对红美人柑橘进行授粉，杂交果实结籽数不同。
采用黄岩蜜桔花粉对红美人柑橘进行授粉，液氮按压处理的杂交果实结籽率均显著高于新鲜花粉、新鲜研磨花粉和干燥研磨花粉。说明采用新鲜花粉授粉因花粉囊阻隔而使授粉结籽率较低，新鲜花粉研磨或干燥研磨降低花粉活力，导致杂交授粉结籽率较低，而采用液氮按压处理能确保在花粉活力和萌发率不受影响的前提下得到较多花粉，从而提高柑橘杂交育种授粉后杂交果实的结籽率。
采用鸡尾葡萄柚花粉对红美人柑橘进行授粉，液氮处理室温放置后，所得花粉的杂交果实结籽率均显著高于新鲜花粉、新鲜研磨花粉和干燥研磨花粉。说明采用新鲜花粉授粉因花粉囊阻隔而使授粉结籽率较低，新鲜花粉研磨或干燥研磨降低花粉活力，导致杂交授粉结籽率较低，而采用液氮处理，对花粉活力和萌发率影响较低，花粉囊能很快破碎散出花粉粒，室温放置晾干花粉水分，能散出大量花粉粒提高授粉效率，进而提高杂交果实结籽率。
综上，本发明方法不仅优化了柑橘杂交育种过程中父本花粉制备方法，更在花粉粒活力和萌发率不受影响的前提下，解决了父本花粉获取困难的问题，同时缩短父本花粉获取时间，花粉粒散出较完全，新鲜花粉随采随用，提高杂交育种授粉效率，操作简单，同时也解决在花粉获取时，因干燥时间久以及研磨导致的花粉活力以及萌发率降低的现象。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (4)

1.一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取出露白期的花苞的花药，液氮处理后，待液氮即将消散时，对所述花药进行按压，室温放置，收集花粉；
或对于花粉囊易破碎散出花粉的品种，取出露白期的花苞的花药，液氮处理后，无需按压处理，室温放置，即可收集花粉。
2.根据权利要求1所述一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法，其特征在于，所述按压为至花粉囊破碎，释放出花粉。
3.根据权利要求1所述一种柑橘杂交育种父本花粉的制备方法，其特征在于，所述室温放置的时间为0.5-1h。
4.权利要求1-3任一项所述制备方法在柑橘杂交育种中的应用。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4588134A (en) * 1983-07-18 1986-05-13 Saitama Bee-Keeping Co., Ltd. Method of treating pollen for pulverization thereof and extraction of essence therefrom
CA3068767A1 (en) * 2017-07-06 2019-01-10 Accelerated Ag Technologies, Llc Pollen preservation method
CN115651886A (zh) * 2022-01-26 2023-01-31 浙江科技学院 一种水稻花药组织分离与收集方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4588134A (en) * 1983-07-18 1986-05-13 Saitama Bee-Keeping Co., Ltd. Method of treating pollen for pulverization thereof and extraction of essence therefrom
CA3068767A1 (en) * 2017-07-06 2019-01-10 Accelerated Ag Technologies, Llc Pollen preservation method
CN115651886A (zh) * 2022-01-26 2023-01-31 浙江科技学院 一种水稻花药组织分离与收集方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
木本植物花粉采集、贮藏与活力检测的研究进展;刘宝等;《广西林业科学》;第37卷(第02期);第76-79页 *

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