CN116075298A - 用于治疗冠状病毒感染的方法 - Google Patents

Abstract

提供了治疗受试者的冠状病毒感染的组合物和方法。该方法通常包括向受试者施用有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐。该方法可以是治疗性和/或预防性的。丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐的量可以有效地例如减少病毒复制，减少与病毒相关的疾病、病症或病的一种或多种症状，或其组合。在优选的实施方案中，病毒是严重急性呼吸综合征相关的冠状病毒，例如SARS‑CoV‑2或SARS‑CoV，中东呼吸综合征相关的冠状病毒，例如MERS‑CoV，或引起普通感冒的冠状病毒。

Description

用于治疗冠状病毒感染的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2020年4月10日提交的美国临时申请号63/008,624、2020年5月11日提交的美国临时申请号63/023,021、2020年5月15日提交的U.S.S.N.16/875,487、2020年10月15日提交的欧洲专利申请第号20202059.0和2021年2月19日提交的美国临时申请号63/151,551的权益，每个都以整体通过引用的方式具体并入本文。

对序列表的引用

根据37C.F.R.§1.52(e)(5)，序列表通过引用并入本文，其作为文本文件提交，名为“UGA_2020_148_06_PCT.txt”，创建于2021年4月2日，大小为167,524字节。

发明领域

本发明的领域一般涉及用于治疗和预防冠状病毒相关疾病的组合物和方法。

背景技术

最近发现了第七种人类冠状病毒(国际病毒分类学委员会冠状病毒科研究组，NatMicrobiol 2020.DOI:10.1038/s41564-020-0695-z,WHO；世界卫生组织：在线，2020)。该病毒于2019年12月被发现后最初被描述为COVID-19，现在已被归类为与严重急性呼吸系统综合症冠状病毒(SARS-CoV)相同物种的β冠状病毒(国际病毒分类委员会冠状病毒科研究组，Nat Microbiol 2020.DOI:10.1038/s41564-020-0695-z；Ratia等人,Proc Natl Acad SciU S A2008,105(42),16119-24.DOI:10.1073/pnas.0805240105；Karim等人,MedRxiv,5(4):536-44(2020),DOI:10.1101/2020.05.26.20104497)。因此，COVID-19现在已被归类为严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)。尽管SARS-CoV-2似乎不像SARS-CoV那样致命，但根据世界卫生组织的情况报告，它已在全球迅速传播。SARS-CoV-2的迅速传播及其导致死亡的能力(特别是在老年人或有潜在病况的人中)使得人们迫切需要抗病毒疗法和用于对抗病毒的疫苗(“CDC People at Risk for Serious Illness from COVID-19”CDC网站)。

靶向SARS-CoV-2病毒的抗病毒化学治疗剂尚不可用，并且耐药毒株可能迅速出现。因此，迫切需要鉴定新的抗SARS-CoV-2疗法，特别是那些靶向病毒复制所需的宿主基因产物的疗法，以降低耐药性的可能性。

尽管人们一直非常关注消除或控制SARS-CoV-2感染的疫苗接种。然而，疫苗的有效性受到有限的生产能力、冷链储存要求、病毒感染突破、有限的功效数据、无症状免疫受试者的病毒脱落、疫苗推出的延迟和/或分阶段推出、对疫苗的恐惧、病毒发生突变/进化的影响，COVID-19可能在世界范围内继续流行。因此，仍然强烈需要治疗和预防SARS-CoV-2感染和COVID-19疾病的治疗选择。

因此，本发明的目的是提供治疗由冠状病毒(特别是引起严重急性呼吸系统综合征的冠状病毒，包括但不限于SARS-CoV-2)引起的感染的组合物和方法。

发明概述

提供了治疗受试者的冠状病毒感染的组合物和方法。该方法通常包括向受试者施用有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐。丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐的量可以有效地例如减少病毒复制，减少与病毒相关的疾病、病症或病的一种或多种症状，或其组合。症状包括但不限于发烧、鼻窦和/或肺部充血、流鼻涕或鼻塞、咳嗽、打喷嚏、喉咙痛、身体疼痛、疲劳、呼吸急促、胸闷、呼气时喘息、发冷、肌肉疼痛、头痛、腹泻、疲倦、恶心、呕吐及其组合。受试者可以是例如哺乳动物或鸟类。在优选的实施方案中，受试者是人。

受试者可以是有症状的或无症状的。在一些实施方案中，受试者已经或将要暴露于病毒。在一些实施方案中，治疗开始于暴露于病毒之前或之后1、2、3、4、5或更多小时、天或周。在一些实施方案中，受试者尚未暴露于病毒。在一些实施方案中，受试者预期暴露于病毒。因此，还提供了预防和预防方法，并包含在术语“治疗”中。

该病毒可以是严重急性呼吸综合征相关冠状病毒、蹄蝠乙型冠状病毒浙江2013(Bat Hp-betacoronavirus Zhejiang2013)、棕果蝠冠状病毒GCCDC1(Rousettus batcoronavirus GCCDC1)、棕果蝠冠状病毒HKU9(Rousettus bat coronavirus HKU9)、黄毛果蝠冠状病毒C704(Eidolon bat coronavirus C704)、伏翼蝠冠状病毒HKU5(Pipistrellusbat coronavirus HKU5)、扁颅蝠冠状病毒HKU4(Tylonycteris bar coronavirus HKU4)、中东呼吸系统综合征相关冠状病毒、刺猬冠状病毒、鼠冠状病毒、人冠状病毒HKU1、中国家鼠冠状病毒HKU24、β冠状病毒1、田鼠冠状病毒2JL14(Myodes coronavirus 2JL14)、人冠状病毒NL63、人冠状病毒229E或人冠状病毒OC43。

在优选的实施方案中，病毒是严重急性呼吸综合征相关冠状病毒，例如SARS-CoV-2、SARS-CoV、SARSr-CoV RaTG13、SARS-CoV PC4-227或SARSr-CoV BtKY72。

在一些实施方案中，病毒是严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)，其具有由与SEQ ID NO:1或2具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

在一些实施方案中，SARS-CoV-2包括刺突(Spike)蛋白，其与SEQ ID NO:5具有至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性。例如，SAR-CoV-2可以具有一个或多个相对于SEQ IDNO:5的突变。在一些实施方案中，突变选自H69，任选地其缺失；V70，任选地其缺失；G142，任选地G142D；K417，任选地K417N或K417T；E484，任选地E484K；F486，任选地F486L；和N501突变，任选地N501Y或N501T，及其组合。SARS-CoV-2可以来自例如B.1.1.7,B.1.351,P.1,B.1.1.207,B.1.429,B.1.427,或B.1.525谱系。

在一些实施方案中，严重急性呼吸综合征相关冠状病毒是严重急性呼吸系统综合征冠状病毒(SARS-CoV)，例如，具有由与SEQ ID NO:3具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组的SAR-CoV。

在一些实施方案中，病毒是中东呼吸系统综合征相关冠状病毒，例如中东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV)，其具有由与SEQ ID NO:4具有至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

在一些实施方案中，受试者患有与病毒相关的疾病或病症。例如，在实施方案中，受试者暴露于或感染了SARS-CoV-2，并且任选地患有冠状病毒疾病2019(COVID-19)。在一些实施方案中，受试者未感染流感。

在一些实施方案中，在治疗之前、期间或之后在受试者中检测或诊断病毒感染。病毒感染的检测和诊断可能包括但不限于旨在检测病毒RNA的PCR测试，以及旨在检测针对病毒的抗体的血清学和免疫诊断测试。用于SARS-CoV-2感染/COVID-19的示例性测试是iAMPCOVID-19检测试剂盒，它是一种实时荧光等温测定，可用于未提取RNA的原始样本。

在一些实施方案中，受试者与已病毒检测呈阳性或患有COVID-19的人密切接触。这样的人可能会或可能不会表现出一种或多种感染症状。在一些实施方案中，治疗的受试者通过接触者追踪被鉴定为已暴露于病毒，或一名或多名感染病毒的人。

丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐通常在包含药学上可接受的载体和/或赋形剂的药物组合物中施用。因此，还提供了药物组合物。还提供了剂型并且包括但不限于500mg丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐的片剂。在一些实施方案中，每天1、2、3、4或5次向受试者施用10mg-1,000mg或50mg-500mg剂量的丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，给药方案是脉冲给药方案，其包括非常接近的1、2、3或更大(1,000mg或更多)推注剂量(例如，至多5、10、15、30、45或60分钟，或间隔1、2、3、4、5、6小时或更长时间)。在一些实施方案中，推注剂量之后是药物施用假期(例如，至少12小时，或1、2、3、4、5或更多天)，任选地直到受试者血清中的药物水平降至零或接近零(例如，不超过血清峰值水平的1％、5％、10％或20％)。

丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐可以全身或局部施用。示例性施用途径包括但不限于口服、肠胃外、局部或粘膜。在一些实施方案中，通过口服吸入或鼻内施用将组合物施用至肺(例如，肺部施用)。在一些实施方案中，将组合物鼻内施用至鼻粘膜。

附图简述

图1是条形图，其显示了(从左到右)使用斑块减少测定法的丙磺舒(5μM、2.5μM、1μM或0.1μM)相比于对照(DMSO(感染)、DMSO(仅))对病毒复制的影响。

图2是条形图，其显示了(从左到右)使用斑块减少测定法的丙磺舒预处理(5μM,2.5μM,1μM,0.1μM 0.01μM,0.001μM,或0.0001μM)相比于对照(DMSO(感染)、DMSO(仅))对病毒复制的影响。

图3是条形图，其显示了(从左到右)使用斑块减少测定法的丙磺舒后处理(5μM,2.5μM,1μM,0.1μM 0.01μM,0.001μM,或0.0001μM)相比于对照(DMSO(感染)、DMSO(仅))对病毒复制的影响。

图4是流程图，其显示了测试丙磺舒对仓鼠体内SARS-CoV-2的预防(感染前)和治疗(感染后)效果的测定法。

图5是显示对照组和实验组在用丙磺舒处理和/或感染之前和之后的仓鼠体重的线图。

图6是显示来自用丙磺舒处理的仓鼠肺的TCID50(Log TCID50/ml)的条形图。

图7是条形图，显示了来自用丙磺舒处理的仓鼠肺的斑块测定结果(Log PFU/ml)。

图8A是条形图，显示在开放标签中登记的人类受试者的体重指数(BMI)，十名患者，二十八(28)天，研究者发起的研究(IIS)(“临床试验”)测试丙磺舒用于轻度至中度SARS-CoV-2感染的受试者。

图8B是条形图，显示了登记临床试验的受试者的年龄(岁)。

图9是条形图，显示了临床试验受试者中SARS-CoV-2测试结果为阴性的日期。

图10是显示临床试验期间受试者症状改善的条形图。

图11是显示临床试验期间受试者体温变化的图。

图12是显示在临床试验期间受试者中高灵敏度C反应蛋白(hs-CRP)的变化的图。

图13是显示临床试验期间受试者中d-二聚体变化的图。

图14是显示临床试验期间受试者中纤维蛋白原变化的图。

图15是显示临床试验期间受试者中乳酸脱氢酶(LDH)变化的图。

图16A-16C是条形图，显示用(从左到右)50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦预防性处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞、病毒对照或细胞对照(16A)；100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM丙磺舒、病毒对照或细胞对照(16B)；或0.1μM丙磺舒+100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM瑞德西韦、病毒对照或细胞对照(16C)的反应者平均强度百分比。

图17A-17C是条形图，显示在感染时用(从左到右)50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞、病毒对照或细胞对照(17A)；100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM丙磺舒、病毒对照或细胞对照(17B)；或0.1μM丙磺舒+50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM瑞德西韦、病毒对照或细胞对照(17C)的反应者平均强度百分比。

图18A-18C是条形图，显示用(从左到右)100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦预防性处理的SARS-CoV-2感染的Vero细胞、病毒对照或细胞对照(18A)；100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM丙磺舒、病毒对照或细胞对照(18B)；或0.1μM丙磺舒+100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM瑞德西韦、病毒对照或细胞对照(18C)的反应者平均强度百分比。

图19A-19C是条形图，显示在感染时用(从左到右)100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦处理的SARS-CoV-2感染的Vero细胞、病毒对照或细胞对照(19A)；100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM丙磺舒、病毒对照或细胞对照(19B)；或0.1μM丙磺舒+100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM瑞德西韦、病毒对照或细胞对照(19C)的反应者平均强度百分比。

图20A是条形图，显示在感染时用(从左到右)100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞、病毒对照或细胞对照的PFU/ml。图20B是条形图，显示在感染时用(从左到右)100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞或病毒对照的％感染。图20C是条形图，显示在感染时用(从左到右)100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的丙磺舒处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞、病毒对照或细胞对照的PFU/ml。图20D是条形图，显示在感染时用(从左到右)100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的丙磺舒处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞或病毒对照的％感染。图20E是条形图，显示在感染时用(从左到右)0.1μM丙磺舒+100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞、病毒对照或细胞对照的PFU/ml。图20F是条形图，显示在感染时用(从左到右)0.1μM丙磺舒+100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的瑞德西韦处理的SARS-CoV-2感染的正常人支气管上皮(NHBE)细胞或病毒对照的％感染。

图21是条形图，显示在感染时用(从左到右)100μM、50μM、25μM、12μM、6μM、3μM、1μM、0.1μM、0.01μM、0.001μM、0.0001μM或0.00001μM的丙磺舒处理的SARS-CoV-2B.1.1.7感染的Vero细胞、病毒对照或细胞对照的斑块数量。

具体实施方式

I.定义

如本文所用，术语“个体”、“宿主”、“受试者”和“患者”在本文中可互换使用，是指动物，特别是鸟类和哺乳动物，包括但不限于灵长类动物，例如人类、蝙蝠、啮齿动物，例如小鼠和大鼠，以及其他实验室动物。

如本文所用，术语“有效量”或“治疗有效量”是指足以治疗、抑制或减轻所治疗疾病状态的一种或多种症状或以其他方式提供所需药理和/或生理作用的剂量。精确剂量将根据多种因素而变化，例如依赖于受试者的变量(例如年龄、免疫系统健康等)、疾病和所施用的治疗。

如本文所用，术语“载体”或“赋形剂”是指与一种或多种活性成分组合的制剂中的有机或无机成分、天然或合成的非活性成分。

如本文所用，术语“药学上可接受的”是指不干扰活性成分的生物活性的有效性的无毒材料。

如本文所用，术语“治疗”是指旨在治愈、改善、稳定或预防疾病、病理状况或病症的患者的医学管理。该术语包括积极治疗，即专门针对改善疾病、病理状况或病症的治疗，还包括因果治疗，即针对消除相关疾病、病理状况或病症的原因的治疗。此外，该术语还包括姑息治疗，即旨在缓解症状而不是治愈疾病、病理状况或病症的治疗；预防性治疗，即旨在最小化或部分或完全抑制相关疾病、病理状况或病症的发展的治疗；和支持治疗，即用于补充另一种针对改善相关疾病、病理状况或病症的特定疗法的治疗。

除非在本文中另有说明，否则本文中数值范围的列举仅旨在用作单独引用落入该范围内的每个单独值的速记方法，并且每个单独的值被并入说明书中，就好像它在本文中单独列举一样。

使用术语“约”旨在描述高于或低于规定值的值，范围约为+/-10％；在其他形式中，这些值的范围可以高于或低于规定的值，范围约为+/-5％；在其他形式中，这些值的范围可以高于或低于规定的值，范围约为+/-2％；在其他形式中，这些值的范围可以高于或低于规定的值，范围约为+/-1％。前述范围旨在通过上下文变得清楚，并且不暗示进一步的限制。

公开了可以用于所公开的方法和组合物，可以与所公开的方法和组合物结合使用，可以用于制备所公开的方法和组合物，或者是所公开的方法和组合物的产品的材料、组合物和组分。这些和其他材料在本文中公开，并且应当理解，当公开这些材料的组合、子集、相互作用、基团等时，虽然可能未明确公开这些化合物的每一种各种单独和集体组合和排列的具体参考，但每一个都在本文中被具体考虑和描述。例如，如果公开和讨论了配体，并且讨论了可以对包括该配体在内的许多分子进行的许多修饰，那么除非有相反的特别说明，否则特别考虑配体的每一种组合和排列以及可能的修饰。因此，如果公开了分子A、B和C的类别以及分子D、E和F的类别并公开了组合分子A-D的实例，那么即使没有单独列举每个，但每个都是单独和集体考虑的。因此，在该示例中，A-E、A-F、B-D、B-E、B-F、C-D、C-E和C-F的组合中的每一个都被具体考虑并且应该被认为从A、B和C；D、E和F；和示例组合A-D的公开中公开。同样，这些的任何子集或组合也被具体考虑和公开。因此，例如，A-E、B-F和C-E的子组被具体考虑并且应该被认为从A、B和C；D、E和F；和示例组合A-D的公开中公开。此外，如上所设想和公开的材料、组合物、组分等中的每一个也可以具体地且独立地包括或排除在此类材料的任何组、子组、列表、集合等中。

这些概念适用于本申请的所有方面，包括但不限于制造和使用所公开的组合物的方法中的步骤。因此，如果存在可以执行的多个附加步骤，则应当理解，这些附加步骤中的每一个都可以用所公开方法的任何特定实施方案或实施方案的组合来执行，并且每个这样的组合都被具体考虑并且应该是视为公开的。

除非另有说明或与上下文明显矛盾，否则本文所述的所有方法都可以以任何合适的顺序执行。本文提供的任何和所有示例或示例性语言(例如，“诸如”)的使用仅旨在更好地阐明实施方案并且不对实施方案的范围构成限制，除非另有声明。说明书中的任何语言都不应被解释为指示任何未要求保护的元素对于本发明的实践是必不可少的。

II.组合物

A.丙磺舒、代谢物、类似物和其药学上可接受的盐

所公开的方法包括向有需要的受试者施用有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐，包括但不限于其钠盐。

丙磺舒(4-[(二丙氨基)磺酰基1]苯甲酸(CAS No.57-66-9))具有以下结构：

并以

和

品牌销售。

丙磺舒是高度脂溶性的苯甲酸衍生物，具有出色的安全性谱，在1950年代开发用于减少青霉素的肾小管排泄。丙磺舒，USP是一种白色或接近白色的细结晶粉末。丙磺舒可溶于稀碱、乙醇、氯仿和丙酮；它实际上不溶于水和稀酸。它的半衰期为6-12小时。另见Drugbank登录号DB01032(APRD00167)和PubChem CID 4911。

丙磺舒的代谢物和类似物是已知的，参见，例如，Guarino等人,“Mass spectralidentification of probenecid metabolites in rat bile,”Eur.J.Pharmacol.,8,244-252(1969),Perel等人,“Identification and renal excretion of probenecidmetabolites in man,”Life Sciences,9,23,1337-1343(1970),Perel等人,“Studies ofthe renal excretion of probenecid acyl glucuronide in man,”Eur.J.Clin.Pharmacol,3,106-112(1971),Dayton和Perel,“The metabolism ofprobenecid in man,”.N.Y.Acad.Sci.,179,399-402(1971),Dayton等人,“The effect ofprobenecid,phenylbutazone and their analogues on the excretion of L-ascorbicacid in rats,”J.Med.Chem.9,941–944(1966),和Israili等人,“Metabolites ofprobenecid.Chemical,physical,and pharmacological studies,”J.Med.Chem.,15,7,709-713(1972)，每一篇都通过引用的方式以其整体具体并入。

在一些实施方案中，代谢物是丙磺舒的葡糖苷酸衍生物，例如酰基葡糖苷酸或β-醚葡糖苷酸。

示例性丙磺舒代谢物和类似物包括但不限于，

dl-p-(N-Propy-N-2-羟丙基氨磺酰基)苯甲酸，

丙氨丙基乙酸酯，

丙氨基丙醇-3-醇，

对-(N-丙基-N-3-羟丙基氨磺酰基)苯甲酸，

丙氨基丙腈(Propylaminopropionitrile)，

对-(N-丙基-N-3-丙腈氨磺酰基)苯甲酸，

对-(N-丙基-N-2-羧乙基氨磺酰基)苯甲酸，

对-(N-丙基氨磺酰基)苯甲酸，

对-(N,N-五亚甲基氨磺酰基)苯甲酸(哌啶基类似物)，

对-(N-丙基-N-2-丙烯基氨磺酰基)苯甲酸，和

对-(N-丙基-N-2-氧代丙基氨磺酰基)苯甲酸。

通常，代谢物或类似物在以本文讨论的有效量施用时可以单独或通过受试者进一步代谢时治疗冠状病毒。例如，在一些实施方案中，代谢物或类似物可以单独或通过受试者进一步代谢时减少病毒复制。

B.制剂

丙磺舒、其代谢物和类似物、以及其药学上可接受的盐可以配制成药物组合物。药物组合物可用于通过肠胃外(肌内、腹膜内、静脉内(IV)或皮下注射)、肠内、经皮(被动或使用离子电渗疗法或电穿孔)或经粘膜(鼻、肺、阴道、直肠或舌下)施用途径或使用可生物侵蚀(bioerodible)的插入物来施用，并且可以配制成适合每种施用途径的剂型。

该组合物可以全身施用。

组合物可以配制成速释、延长释放或改良释放。延迟释放剂型是在施用后不立即释放药物(或多种药物)的剂型。延长释放剂型是与作为常规剂型(例如作为溶液或快速药物释放的常规固体剂型)呈现的药物相比允许给药频率至少减少两倍的剂型。改良释放剂型是这样一种剂型，其选择时间过程和/或位置的药物释放特性以实现常规剂型如溶液剂、软膏剂或速溶剂型所不提供的治疗或便利性目标。延迟释放和延长释放剂型及其组合是改良释放剂型的类型。

制剂是使用药学上可接受的“载体”制备的，该“载体”由被认为安全有效的并且可以施用于个体而不会引起不希望的生物副作用或不希望的相互作用的材料组成。“载体”是存在于药物制剂中的除活性成分外的所有成分。术语“载体”包括但不限于稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、填料和包衣组合物。

“载体”还包括包衣组合物的所有组分，其可包括增塑剂、颜料、着色剂、稳定剂和助流剂。延迟释放剂型可以如参考文献中所述制备，例如“Pharmaceutical dosage forms:tablets”,eds.Liberman等人(纽约，Marcel Dekker,Inc.,1989),“Remington–Thescience and practice of pharmacy”,第21版,Lippincott Williams&Wilkins,Baltimore,MD,2006,和“Ansel’sPharmaceutical dosage forms and drug deliverysystems”,第11版,Loyd Allen.,(Media,PA:Williams and Wilkins,2017)，其提供了关于用于制备片剂和胶囊以及片剂、胶囊和颗粒剂的延迟释放剂型的载体、材料、设备和工艺的信息。

该化合物可以在有或没有递送运载体(vehicle)的帮助下施用于受试者。化合物的适当递送运载体是本领域已知的并且可以选择以适合特定的活性剂。例如，在一些实施方案中，活性剂被掺入纳米颗粒、微粒、胶束、合成脂蛋白颗粒或碳纳米管中或被其包封或与其结合。例如，可以将组合物掺入运载体例如聚合物微粒中，其提供活性剂的受控释放。在一些实施方案中，药物的释放通过活性剂扩散出微粒和/或聚合物颗粒通过水解和/或酶促降解而降解来控制。

合适的聚合物包括乙基纤维素和其他天然或合成纤维素衍生物。缓慢溶解并在水性环境中形成凝胶的聚合物，例如羟丙基甲基纤维素或聚环氧乙烷，也可适合用作含有药物的微粒或颗粒的材料。其他聚合物包括但不限于聚酸酐，聚(酯酸酐)，聚羟基酸，例如聚丙交酯(PLA)，聚乙交酯(PGA)，聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)，聚3-羟基丁酸酯(PHB)及其共聚物，聚4-羟基丁酸酯(P4HB)及其共聚物，聚己内酯及其共聚物，以及它们的组合。在一些实施方案中，将两种药剂掺入相同的颗粒中并配制用于在不同时间和/或在不同时间段内释放。例如，在一些实施方案中，其中一种药剂在第二种药剂开始释放之前从颗粒中完全释放。在其他实施方案中，第一药剂的释放开始，然后是第二药剂的释放，然后所有第一药剂被释放。在又其他的实施方案中，两种药剂在相同时间段内或在不同时间段内同时释放。

1.口服速释制剂

合适的口服剂型包括片剂、胶囊、溶液、混悬剂、糖浆和锭剂。因此，该组合物可以配制成固体或液体。片剂可以使用本领域熟知的压缩或模制技术制备。明胶或非明胶胶囊可以使用本领域公知的技术制备成硬胶囊壳或软胶囊壳，其可以包封液体、固体和半固体填充材料。

合适的包衣材料的示例包括但不限于纤维素聚合物，例如乙酸邻苯二甲酸纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素和乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯；聚乙酸邻苯二甲酸乙烯酯、丙烯酸聚合物和共聚物，以及商品名为

(Roth Pharma,Westerstadt,德国)的市售的甲基丙烯酸树脂、玉米蛋白、虫胶和多糖。

此外，包衣材料可包含常规载体，例如增塑剂、颜料、着色剂、助流剂、稳定剂、成孔剂和表面活性剂。

存在于含药片剂、珠粒、细粒(granule)或颗粒中的任选的药学上可接受的赋形剂包括但不限于稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、稳定剂和表面活性剂。稀释剂，也称为“填充剂”，通常是增加固体剂型体积所必需的，以便为片剂的压制或珠粒和细粒的形成提供实用的尺寸。合适的稀释剂包括但不限于二水合磷酸二钙、硫酸钙、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、纤维素、微晶纤维素、高岭土、氯化钠、干淀粉、水解淀粉、预糊化淀粉、二氧化硅、二氧化钛、硅酸铝镁和糖粉。

粘合剂用于赋予固体剂型以粘合特性，从而确保片剂或珠粒或细粒在剂型形成后保持完整。合适的粘合剂材料包括但不限于淀粉、预胶化淀粉、明胶、糖类(包括蔗糖、葡萄糖、右旋糖、乳糖和山梨糖醇)、聚乙二醇、蜡、天然和合成树胶如阿拉伯胶、黄蓍胶、海藻酸钠、纤维素，包括羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、乙基纤维素和硅酸镁铝(veegum)，以及合成聚合物，例如丙烯酸和甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸共聚物、甲基丙烯酸甲酯共聚物、甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物、聚丙烯酸/聚甲基丙烯酸和聚乙烯吡咯烷酮。

润滑剂用于促进片剂的制造。合适的润滑剂的示例包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、山嵛酸甘油酯(glycerol behenate)、聚乙二醇、滑石和矿物油。

崩解剂用于促进剂型在施用后崩解或“分解”，通常包括但不限于淀粉、羟基乙酸淀粉钠、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、预胶化淀粉、粘土、纤维素、藻蛋白碱(alginine)、胶或交联聚合物，例如交联PVP(来自GAF Chemical Corp的PolyplasdoneXL)。

稳定剂用于抑制或延缓药物分解反应，包括例如氧化反应。

表面活性剂可以是阴离子、阳离子、两性或非离子表面活性剂。合适的阴离子表面活性剂包括但不限于含有羧酸根、磺酸根和硫酸根离子的那些。阴离子表面活性剂的实例包括长链烷基磺酸盐和烷基芳基磺酸盐的钠、钾、铵盐，例如十二烷基苯磺酸钠；二烷基磺基琥珀酸钠，例如十二烷基苯磺酸钠；二烷基磺基琥珀酸钠，例如双-(2-乙基硫氧基)-磺基琥珀酸钠；和烷基硫酸盐，例如月桂基硫酸钠。阳离子表面活性剂包括但不限于季铵化合物，例如苯扎氯铵、苄索氯铵、西曲溴铵、硬脂基二甲基苄基氯化铵、聚氧乙烯和椰子胺。非离子表面活性剂的实例包括乙二醇单硬脂酸酯、肉豆蔻酸丙二醇酯、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、聚4-油酸甘油酯、脱水山梨糖醇酯、蔗糖酰化物、PEG-150月桂酸酯、PEG-400单月桂酸酯、聚氧乙烯单月桂酸酯、聚山梨醇酯、聚氧乙烯辛基苯基醚、PEG-1000十六烷基醚、聚氧乙烯十三烷基醚、聚丙二醇丁基醚、

401、硬脂酰单异丙醇酰胺和聚氧乙烯氢化牛油酰胺。两性表面活性剂的实例包括N-十二烷基-β-丙氨酸钠、N-月桂基-β-亚氨基二丙酸钠、肉豆蔻两性乙酸盐(myristoamphoacetate)、月桂基甜菜碱和月桂基磺基甜菜碱。

如果需要，片剂、珠粒或颗粒还可以包含少量无毒辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、染料、pH缓冲剂和防腐剂。

2.延长释放剂型

延长释放制剂通常制备为扩散或渗透系统，例如，如“Remington–The scienceand practice of pharmacy”(第21版，Lippincott Williams&Wilkins,Baltimore,MD,2006)中所述。扩散系统通常由两种类型的装置，储存器和基质组成，并且在本领域中是众所周知的和已描述的。基质装置通常通过将药物与缓慢溶解的聚合物载体压缩成片剂形式来制备。用于制备基质装置的三种主要类型的材料是不溶性塑料、亲水性聚合物和脂肪化合物。塑料基质包括但不限于丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲酯、聚氯乙烯和聚乙烯。亲水聚合物包括但不限于甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和卡波普(carbopol)934、聚环氧乙烷。脂肪化合物包括但不限于各种蜡，例如棕榈蜡和三硬脂酸甘油酯。

或者，可以使用渗透系统或通过向剂型施加半渗透包衣来制备延长释放制剂。在后一种情况下，可以通过以合适的比例组合低渗透性和高渗透性包衣材料来实现所需的药物释放曲线。

上述具有不同药物释放机制的装置可以组合成包含单个或多个单元的最终剂型。多个单元的实例包括多层片剂，含有片剂，珠，细粒的胶囊等。

速释部分可以通过使用包衣或压缩工艺将速释层施加到延长释放核心的顶部或在多单元系统例如包含延长释放和速释珠的胶囊中添加到延长释放系统中。

含有亲水性聚合物的延长释放片剂通过本领域公知的技术制备，例如直接压制、湿法制粒或干法制粒工艺。它们的制剂通常包含聚合物、稀释剂、粘合剂和润滑剂以及活性药物成分。常用的稀释剂包括惰性粉状物质，例如任何许多不同种类的淀粉，粉状纤维素，尤其是结晶和微晶纤维素，糖例如果糖，甘露醇和蔗糖，谷物粉和类似的可食用粉末。典型的稀释剂包括例如各种类型的淀粉、乳糖、甘露醇、高岭土、磷酸钙或硫酸钙、无机盐如氯化钠和粉状糖。粉状纤维素衍生物也是有用的。典型的片剂粘合剂包括以下物质，例如淀粉、明胶和诸如乳糖、果糖和葡萄糖的糖类。也可以使用天然和合成树胶，包括阿拉伯树胶、藻酸盐、甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷。聚乙二醇、亲水聚合物、乙基纤维素和蜡也可以用作粘合剂。片剂制剂中需要润滑剂以防止片剂和冲头粘在模具中。润滑剂选自滑石、硬脂酸镁和硬脂酸钙等光滑固体、硬脂酸和氢化植物油。

含有蜡材料的延长释放片剂通常使用本领域已知的方法制备，例如直接混合方法、凝结方法和水分散法。在凝结方法中，将药物与蜡材料混合，然后喷雾凝结或凝结并筛选和加工。

3.延迟释放剂型

延迟释放制剂是通过用聚合物膜包衣固体剂型而制成的，其中所述聚合物膜不溶于胃的酸性环境，而溶于小肠的中性环境。

例如，可以通过用选择的包衣材料包衣药物或含药物的组合物来制备延迟释放剂量单位。含药组合物可以是例如用于掺入胶囊的片剂、用作“包衣芯”剂型中的内核的片剂或用于掺入片剂或胶囊中的多个含药珠、颗粒或细粒。优选的包衣材料包括可生物侵蚀的、逐渐水解的、逐渐水溶性的和/或可酶降解的聚合物，并且可以是常规的“肠溶”聚合物。如本领域技术人员将理解的，肠溶聚合物在下胃肠道的较高pH环境中变得可溶或随着剂型通过胃肠道而缓慢侵蚀，而可酶促降解的聚合物被存在于下胃肠道尤其是结肠内的细菌酶降解。用于实现延迟释放的合适包衣材料包括但不限于纤维素聚合物，例如羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基纤维素、乙基纤维素、乙酸纤维素、醋酸邻苯二甲酸纤维素、醋酸偏苯三酸纤维素和羧甲基纤维素钠；丙烯酸聚合物和共聚物，优选由以下形成：丙烯酸、甲基丙烯酸、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸甲酯和/或甲基丙烯酸乙酯，以及以下商品名的市售可得的其他甲基丙烯酸树脂：

(Rohm Pharma；Westerstadt,德国),包括

L30D-55和L100-55(可溶于pH 5.5及以上),

L-100(可溶于pH 6.0及以上),

S(可溶于pH 7.0及以上，由于酯化程度较高)，和

NE,RL和RS(具有不同程度的渗透性和膨胀性的水不溶性聚合物)；乙烯基聚合物和共聚物，例如聚乙烯吡咯烷酮、乙酸乙烯酯、乙酸邻苯二甲酸乙烯酯、乙酸乙烯酯巴豆酸共聚物、和乙烯-乙酸乙烯酯共聚物；可酶降解的聚合物，例如偶氮聚合物、果胶、壳聚糖、直链淀粉和瓜尔胶；玉米醇溶蛋白和虫胶。也可以使用不同包衣材料的组合。也可以应用使用不同聚合物的多层包衣。

特定包衣材料的优选包衣重量可由本领域技术人员通过评估用不同量的各种包衣材料制备的片剂、珠和细粒的单独释放曲线来容易地确定。正是材料、方法和应用形式的组合产生了所需的释放特性，这只能从临床研究中确定。

包衣组合物可包含常规添加剂，例如增塑剂、颜料、着色剂、稳定剂、助流剂等。增塑剂通常存在以降低包衣的脆性，并且相对于聚合物的干重通常占约10重量％至50重量％。典型增塑剂的实例包括聚乙二醇、丙二醇、甘油三乙酸酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、癸二酸二丁酯、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、乙酰柠檬酸三乙酯、蓖麻油和乙酰化甘油单酯。优选使用稳定剂来稳定分散体中的颗粒。典型的稳定剂是非离子乳化剂，例如脱水山梨糖醇酯、聚山梨醇酯和聚乙烯吡咯烷酮。推荐助流剂以减少成膜和干燥过程中的粘着效应，并且通常将占包衣溶液中聚合物重量的约25重量％至100重量％。一种有效的助流剂是滑石。也可以使用其他助流剂，例如硬脂酸镁和单硬脂酸甘油酯。也可以使用颜料如二氧化钛。少量消泡剂，例如硅酮(例如二甲硅油)，也可以添加到包衣组合物中。

制造方法

如本领域技术人员将理解的并且如相关文本和文献中所述，许多方法可用于制备提供多种药物释放曲线的含药物片剂、珠、细粒或颗粒。此类方法包括但不限于以下：用通常但不一定掺入聚合物材料的适当包衣材料包衣药物或含药物的组合物，增加药物粒度，将药物置于基质中，并形成药物与合适的络合剂的络合物。

可以使用常规技术，例如，使用常规包衣锅、无气喷涂技术、流化床包衣设备(带有或不带有Wurster插入物)，用延迟释放聚合物包衣对延迟释放剂量单位进行包衣。有关制备片剂和延迟释放剂型的材料、设备和工艺的详细信息，请参见Pharmaceutical DosageForms:Tablets,eds.Lieberman et al.(New York:Marcel Dekker,Inc.,1989),和Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,第11版.(Media,PA:Williams&Wilkins,2017)。

制备延长释放片剂的优选方法是通过压制使用直接混合、湿法制粒或干法制粒工艺制备的含药物混合物，例如细粒混合物。延长释放片剂也可以模制而不是压制，从含有合适水溶性润滑剂的潮湿材料开始。然而，片剂优选使用压缩而不是模制来制造。形成延长释放含药混合物的优选方法是将药物颗粒与一种或多种赋形剂例如稀释剂(或填充剂)、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂和着色剂直接混合。作为直接混合的替代方法，可以通过使用湿法制粒或干法制粒工艺来制备含药混合物。含有活性剂的珠也可以通过许多常规技术中的任何一种来制备，通常从流体分散开始。例如，制备含药珠的典型方法包括将活性剂分散或溶解在包衣悬浮液或溶液中，所述包衣悬浮液或溶液含有药用赋形剂如聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、滑石、金属硬脂酸盐、二氧化硅、增塑剂等。该混合物用于包衣珠芯，例如具有大约60至20目大小的糖球(或所谓的“non-pareil”)。

制备药珠的备选方法是将药物与一种或多种药学上可接受的赋形剂混合，例如微晶纤维素、乳糖、纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、滑石、硬脂酸镁、崩解剂等，挤出混合物，将挤出物滚圆，干燥和任选包衣以形成速释珠。

4.用于粘膜和肺施用的制剂

丙磺舒、其代谢物和类似物、以及其药物组合物可以配制用于肺部或粘膜施用。施用可包括将组合物递送至肺、鼻、口腔(舌下、含服)、阴道或直肠粘膜。在具体的实施方案中，该组合物被配制用于舌下施用并递送至受试者。

在一些实施方案中，化合物被配制用于肺部递送，例如鼻内施用或口服吸入。呼吸道是参与大气和血流之间气体交换的结构。肺是分支结构，最终以发生气体交换的肺泡结束。肺泡表面积是呼吸系统中最大的，也是药物吸收的地方。肺泡被没有纤毛或粘液毯的薄上皮覆盖并分泌表面活性磷脂。呼吸道包括上气道，包括口咽和喉部，然后是下气道，其包括气管，然后分叉到支气管和细支气管。上下气道称为传导气道。终末细支气管然后分成呼吸细支气管，然后通向最终的呼吸区、肺泡或深肺。深肺或肺泡是用于全身药物递送的吸入治疗气雾剂的主要靶标。

已经观察到肺部施用由低分子量药物组成的治疗组合物，例如β-雄激素拮抗剂来治疗哮喘。其他在肺部有活性的治疗剂已被全身施用并通过肺部吸收靶向。

鼻腔递送被认为是一种有前途的用于治疗剂施用的技术，原因如下：由于上皮表面被许多微绒毛覆盖，鼻腔有很大的表面积可用于药物吸收，上皮下层是高度血管化的，来自鼻腔的静脉血液直接进入全身循环，因此避免了肝脏中首过代谢的药物损失，它提供更低的剂量，更快地达到治疗血液水平，更快的药理活性发作，更少的副作用，高每立方厘米的总血流，多孔的内皮基底膜，并且容易接近。

在一些实施方案中，组合物被配制成气雾剂。如本文所用，术语气雾剂是指颗粒细雾的任何制剂，其可以是溶液或悬浮液，无论其是否使用推进剂产生。气雾剂可以使用标准技术生产，例如超声处理或高压处理。

丙磺舒已被用于减少静脉内施用时西多福韦的肾毒性。将西多福韦直接递送到呼吸道也被证明是一种有效的预防策略，可以最大化初始病毒复制部位的组织浓度，同时最小化其在肾脏中的积聚(Roy等人，Antimicrob Agents Chemother.,47(9):2933–2937(2003))。

用于肺部制剂的载体可分为用于干粉制剂的载体和作为溶液施用的载体。用于将治疗剂递送至呼吸道的气雾剂在本领域中是已知的。对于通过上呼吸道施用，制剂可以配制成缓冲或非缓冲的溶液，例如水或等渗盐水，或作为悬浮液，用于作为滴剂或喷雾剂的鼻内施用。优选地，这样的溶液或悬浮液相对于鼻分泌物是等渗的并且具有大约相同的pH，例如从大约pH 4.0到大约pH 7.4，或从pH 6.0到pH 7.0。缓冲液应该是生理相容的，并且包括，例如，磷酸盐缓冲液。例如，代表性的鼻减充血剂被描述为缓冲至约6.2的pH值。本领域技术人员可以容易地确定用于鼻和/或上呼吸道施用的无害水性溶液的合适的盐水含量和pH。

优选地，水性溶液是水，含有盐和/或缓冲剂的生理学上可接受的水性溶液，例如磷酸盐缓冲盐水(PBS)，或任何其他可接受的用于施用于动物或人的水性溶液。这样的溶液是本领域技术人员熟知的并且包括但不限于蒸馏水、去离子水、纯水或超纯水、盐水、磷酸盐缓冲盐水(PBS)。其他合适的水性运载体包括但不限于林格溶液和等渗氯化钠。水性悬浮液可包括悬浮剂如纤维素衍生物、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和黄蓍胶，以及润湿剂如卵磷脂。适用于水性悬浮液的防腐剂包括对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸正丙酯。

在另一个实施方案中，低毒性有机(即非水性)第3类残留溶剂的溶剂，例如乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙醚和丙醇可用于制剂。溶剂的选择基于其容易使制剂雾化的能力。溶剂不应有害地与化合物反应。应使用合适的溶剂来溶解化合物或形成化合物的悬浮液。溶剂应是充分易挥发的以能够形成溶液或悬浮液的气雾剂。可以根据需要添加额外的溶剂或雾化剂，例如氟利昂，以增加溶液或悬浮液的挥发性。

在一个实施方案中，组合物可以包含少量的聚合物、表面活性剂或本领域技术人员熟知的其他赋形剂。在本文中，“少量”是指不存在可能影响或介导化合物在肺中摄取的赋形剂，并且存在的赋形剂的存在量不会对肺中化合物的摄取产生不利影响。

由于其疏水特性，干脂质粉末可以直接分散在乙醇中。对于储存在诸如氯仿的有机溶剂中的脂质，将所需量的溶液放入小瓶中，然后在氮气流下蒸发氯仿，以便在玻璃小瓶表面形成干燥的薄膜。当用乙醇复原时，膜很容易膨胀。为了在有机溶剂中充分分散脂质分子，对悬浮液进行超声处理。也可以使用可重复使用的PARI LC Jet+雾化器(PARIRespiratory Equipment,Monterey,CA)在无水乙醇中制备脂质的非水性悬浮液。

具有大粒径的干粉制剂(“DPF”)具有改进的流动性特征，例如更少的聚集、更容易雾化和潜在的更少的吞噬作用。用于吸入疗法的干粉气雾剂通常以主要在小于5微米范围内的平均直径生产，尽管优选的范围是空气动力学直径在1和10微米之间。大“载体”颗粒(不含药物)与治疗性气雾剂共同递送，以帮助实现有效的雾化以及其他可能的益处。

可以使用单乳液和双乳液溶剂蒸发、喷雾干燥、溶剂萃取、溶剂蒸发、相分离、单凝聚和复凝聚、界面聚合以及本领域普通技术人员熟知的其他方法制备聚合物颗粒。可以使用本领域已知的用于制备微球体或微胶囊的方法制备颗粒。优选的制造方法是喷雾干燥和冷冻干燥，这需要使用含有表面活性剂的溶液，喷雾以形成所需大小的液滴，并且除去溶剂。

可以用适当的材料、表面粗糙度、直径和振实密度来制造颗粒，以用于局部递送到呼吸道的选定区域，例如深肺或上呼吸道。例如，更高密度或更大的颗粒可用于上呼吸道递送。类似地，可以在一次施用中施用具有相同或不同活性剂的不同尺寸颗粒的混合物以靶向肺的不同区域。

组合物和制备包括丙磺舒的吸入型药物组合物的方法描述于美国公开的申请号2015/0272870中。

因此，提供了制剂和通过鼻内递送将所公开的组合物施用至鼻粘膜和/或肺以及通过口服吸入施用至肺的方法。关于鼻内递送，可以选择和制备制剂和递送装置以驱动通过鼻粘膜或肺的吸收。与其他黏膜相比，鼻黏膜易于接近，并为小分子和大分子提供了实用的入口(Bitter等人，“Nasal Drug Delivery in Humans,”在Surber等人(编)中:TopicalApplications and the Mucosa.Curr Probl Dermatol.Basel,Karger,2011,vol 40,pp20–35,Pires等人,J Pharm Pharmaceut Sci.,12(3)288-311,2009,和Djupesland,DrugDeliv.and Transl.Res.,3:42–62(2013)DOI 10.1007/s13346-012-0108-9)。鼻内施用可提供快速起效的治疗效果、减少首过效应、减少胃肠道降解和肺毒性、无创性、基本上无痛的应用，并且易于患者(特别适合儿童)或紧急情况下的医生的使用。例如，Flu

是一种示例性的有效鼻流感疫苗喷雾剂。

许多递送装置可用于鼻内施用。装置在输送准确性、剂量再现性、成本和易用性方面各不相同。计量剂量系统提供剂量准确性和再现性。递送力、喷雾模式和喷出的液滴大小也存在差异。后者对于药物在鼻腔内的沉积很重要。可以调节参数以增强沉积同时限制能够绕过鼻子并进入肺部的小颗粒的比例，或减少沉积同时增加能够绕过鼻子并进入肺部的小颗粒的比例。

鼻解剖学的以下方面会影响药物递送。呼气时软腭自动闭合，将鼻腔和口腔分开。因此，可以在鼻喷雾剂中使用更小的颗粒并且仍然避免肺部沉积。此外，在软腭闭合期间，两个鼻孔之间有连通路径，位于分隔两个通道的壁后面。在这种情况下，气流有可能从一个鼻孔进入并从另一个鼻孔离开。这种双向递送概念将两个解剖学事实结合到一个功能完全的装置中。该装置通过密封喷嘴插入一个鼻孔，患者向吹嘴吹气。闭合软腭和密封喷嘴的组合产生了气流，该气流进入一个鼻孔，通过连通路径旋转180°，并通过另一个鼻孔流出(双向流动)。由于在呼气过程中进行递送，因此小颗粒无法进入肺部。

可以调整颗粒大小、流速和方向，以有效地递送到鼻粘膜。通过添加出口电阻器来额外控制输入压力，可以改善鼻窦和中耳的分布。对流动模式的操纵可以将其递送到嗅觉区域，从而可能实现直接的“鼻至脑”递送。隔膜后面的180度转弯将捕获仍在空气中的颗粒，从而将货物靶向递送到腺样体。

通过鼻和肺途径增强药物吸收的策略也是本领域已知的并且可以用于所公开的制剂和递送方法中。此类策略包括，例如，使用吸收促进剂，如表面活性剂、环糊精、蛋白酶抑制剂和紧密连接调节剂，以及应用载体，如脂质体和纳米颗粒。参见例如Ghadiri等人，Pharmaceutics，11(3):113(2019)。

5.用于肠胃外施用的制剂

丙磺舒、其代谢物和类似物以及其药物组合物可以在水溶液中通过肠胃外注射或输注施用。该制剂也可以是悬浮液或乳液的形式。通常，提供药物组合物包括有效量的活性剂并且任选地包括药学上可接受的稀释剂、防腐剂、增溶剂、乳化剂、佐剂和/或载体。此类组合物包括稀释剂无菌水、各种缓冲液含量(例如，Tris-HCl、乙酸盐、磷酸盐)、pH和离子强度的缓冲盐水；和任选的添加剂，例如去污剂和增溶剂(例如

20、

80也称为

20或80)、抗氧化剂(例如抗坏血酸、焦亚硫酸钠)和防腐剂(例如Thimersol，苯甲醇)和膨胀物质(例如，乳糖、甘露醇)。非水性溶剂或运载体的实例是丙二醇，聚乙二醇，植物油，例如橄榄油和玉米油，明胶，以及可注射的有机酯，例如油酸乙酯。制剂可以在使用前立即冻干和再溶解/再悬浮。可以通过例如通过细菌截留过滤器过滤、通过将杀菌剂掺入组合物中、通过照射组合物或通过加热组合物来对制剂进行消毒。

III.治疗方法

提供了在有需要的受试者中治疗病毒感染的方法。在一些实施方案中，病毒可以是引起呼吸道疾病或病症的病毒。因此，还提供了治疗呼吸道疾病或病症的方法，特别是在感染病毒的受试者中。

该方法可以包括向受试者施用有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐以减少病毒复制、感染或其组合。在一些实施方案中，该量有效减少受试者中的病毒滴度、减少宿主细胞组装病毒、减少和/或限制与感染相关的过度炎症和/或一种或多种严重的呼吸道症状。

在一些实施方案中，受试者已经或将要暴露于病毒。在一些实施方案中，受试者已经暴露于病毒或正在经历活跃的病毒感染。

在一些实施方案中，病毒感染通过以下检测：设计用于检测来自受试者的样品(例如，鼻拭子、咽拭子、唾液或其他体液)中的病毒RNA的PCR测试；或设计用于检测通常在受试者的血液样品中的抗体(身体的免疫系统响应于感染而产生的抗体)的血清学或免疫诊断测试。

组合物也可以预防性施用，例如，减少或预防未来暴露于病毒的影响以及可能与之相关的感染。因此，在一些实施方案中，受试者尚未暴露于病毒和/或尚未经历活跃的病毒感染。在一些实施方案中，受试者是健康受试者。

在一些实施方案中，受试者与已病毒检测呈阳性的受试者密切接触。这样的受试者可能或可能不表现出一种或多种感染症状。密切接触可能是或包括，例如，在距离感染者2米范围内总共15分钟或更长时间，在家中为感染者提供护理，与感染者直接身体接触(拥抱或亲吻他们)，与感染者共用饮食器具，被打喷嚏，咳嗽或以其他方式接触感染者的呼吸道飞沫。

在一些实施方案中，受试者在接触追踪中被鉴定为已暴露于病毒，或一名或多名被病毒感染的受试者。

在一些实施方案中，受试者将暴露于病毒。示例性的对象是将治疗感染者的医疗保健工作者。

在一些实施方案中，治疗开始于暴露于病毒之前或之后1、2、3、4、5或更多小时、天或周。

在一些实施方案中，丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐以有效量施用以减轻或预防病毒感染的一种或多种症状。症状包括急性呼吸道疾病的症状，例如发烧、鼻窦和/或肺部充血、流鼻涕或鼻塞、咳嗽、打喷嚏、喉咙痛、身体酸痛、疲劳、呼吸急促、胸闷和呼气时喘息。因此，与感染相关的示例性病毒和特定症状将在下面更详细地讨论。最典型的是，该病毒是冠状病毒。

在一些实施方案中，受试者没有痛风、需要延长的青霉素(或其他抗生素)血清水平、盆腔炎或淋病。

在一些实施方案中，受试者患有流感感染。参见例如Perwitasari等人，Antimicrob Agents Chemother,57(1):475-83(2013).doi:10.1128/AAC.01532-12.))。例如，在一些实施方案中，受试者患有流感(例如，甲型流感、乙型流感、丙型流感和/或丁型流感)感染和来自另一种病毒例如冠状病毒的感染。在一些实施方案中，受试者没有流感病毒感染。

受试者可以是男性和/或女性、成年人(例如，18岁或以上)和/或18岁以下的儿童。

A.示例性剂量和方案

丙磺舒、其代谢物和类似物及其药学上可接受的盐可以在药物组合物中施用至受试者，例如上文讨论的那些，并且可以通过肠胃外(肌肉内、腹膜内、静脉内(IV)或皮下注射)，肠内，经皮(被动或使用离子电渗疗法或电穿孔)或经粘膜(鼻、肺、阴道、直肠或舌下)途径施用，如上文更详细讨论的。

精确剂量将根据多种因素例如受试者依赖性变量(例如年龄、免疫系统健康、临床症状、递送途径等)而变化。

为治疗痛风，丙磺舒以250mg口服/口服(PO)每日两次施用，持续1周；随着剂量增加500mg，增加到500mg PO每天两次直至最大2g/天。

为了延长青霉素血清水平，丙磺舒以500mg PO每天4次施用。

对于盆腔炎性疾病，丙磺舒以1g PO和2g头孢西丁肌内注射(IM)作为单剂量施用。

对于淋病，丙磺舒以1g PO和2g头孢西丁IM作为单剂量施用。

典型的儿科(例如，年龄：2至14岁且体重小于50kg)作为抗生素治疗的辅药施用是初始：25mg/kg(或0.7g/m2)口服一次；维持：每天40mg/kg(或1.2g/m2)口服施用，每天4次，分4次等分给药。

因此，一般而言，仅举例来说，在所公开的方法中有用的剂型可以包括0.1mg至3,000mg；25mg至2,000mg；25mg至1,000mg；50mg至1,000mg；100mg至1,000mg；或250mg至1,000mg范围内的剂量，示例性剂量为10mg,25mg,45mg,50mg,100mg,150mg,200mg,250mg,300mg,350mg,400mg,450mg,500mg,550mg,600mg,750mg和1,000mg的剂量，例如，可以每天、每周、每两周等1、2、3、4或5次施用，持续1、2、3、4周或更长时间，例如直到症状改善或消失。在一些实施方案中，可以间隔1、2、3、4、5、6、7或更多天、数周或数月重复单次治疗。

在一些实施方案中，治疗方案与上述针对例如痛风、延长青霉素血清水平、盆腔炎、淋病等的方案相似。

在具体实施方案中，丙磺舒或其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐以250mg每天两次施用。

下面的结果表明，2mg/kg和200mg/kg的剂量在体内治疗仓鼠方面都是有效的。因此，在一些实施方案中，剂量在2mg/kg和200mg/kg之间，包括端值。

如上文所介绍的，本文中的数值范围(包括本文上述和其他地方的剂量范围)的列举仅旨在用作单独提及落入该范围内的每个单独的值的速记方法，并且每个单独的值被并入说明书中，就好像在本文中单独引用。

给药方案可以是例如间歇给药或连续给药(例如持续输注)。给药方案可以包括相同或不同剂量的施用。因此，给药方案可以包括剂量递增、剂量减少或其组合。

在一些实施方案中，组合物以脉冲给药方案施用。脉冲给药是指在给药间隔早期产生升高的药物水平然后延长的无剂量期的给药方法。例如，在一些实施方案中，药物施用是通过例如1、2、3、4或5次连续推注施用来预先加载的，之后允许药物水平降低直到下一次给药。在一些实施方案中，允许血清药物水平降低至约0。

这种类型的药物递送技术可以提供治疗优势，例如降低给药频率和提高患者依从性。与间歇给药相比，脉冲给药前端加载药物，允许延长的无剂量期，在此期间药物浓度下降接近于零。然而，与单次大推注剂量(例如，每天一次)不同，短时间的药物爆发由短的无剂量期间隔，允许血清浓度波动(Ibrahim等人,Antimicrobial Agents andChemotherapy,48(11):4195–4199(2004))。在特定实施方案中，脉冲给药通过口服施用或静脉内施用进行。例如，在一些实施方案中，治疗包括在短时间内不连续/间歇性地静脉输注非常高剂量的丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐的大推注剂量在约1,000mg至5,000mg之间包括端值，或介于其间的任何子范围或特定剂量。

丙磺舒的最大推荐剂量为对于成人、青少年和体重超过50公斤的儿童2克/天PO，以及对于青少年和体重50kg或更低的儿童40mg/kg/天(1.2克/m2/天)PO(不超过2克/天PO)。因此，在一些实施方案中，施用不超过每天5g、4g、3g或2g。在一些实施方案中，施用不超过40mg/kg/天。另见“probenecid-Drug Summary”，医生办公参考手册(thePrescribers’Digital Reference)。

在一些实施方案中，用于口服施用的片剂包含例如500mg丙磺舒和任选的一种或多种以下非活性成分：微晶纤维素、十二烷基硫酸钠、羟基乙酸淀粉钠、淀粉(玉米)、聚维酮、胶体二氧化硅、硬脂酸镁、聚乙烯醇、二氧化钛、聚乙二醇、滑石、D&C Yellow#10铝色淀、FD&C Yellow#6铝色淀和FD&C Blue#2铝色淀。

在一些实施方案中，每天两次(B.I.D.)口服(P.O.)向受试者施用500mg丙磺舒或其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐，持续14天。

在一些实施方案中，治疗在受试者症状消退后0、1、2、3、4或5天结束，受试者登记一项、两项或更多项病毒感染阴性测试(例如，阴性SARS-CoV-2/COVID-19测试)或其组合。

B.联合疗法

在一些实施方案中，丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐与一种或多种另外的活性剂联合施用。联合疗法可以包括将活性剂在相同的混合物或单独的混合物中一起施用。因此，在一些实施方案中，药物组合物包含两种、三种或更多种活性剂。此类制剂通常包括有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，第二活性剂是抗病毒剂(即，第二抗病毒剂)、退烧剂、抗炎剂、镇痛剂或其组合。在具体实施方案中，抗病毒药是磷酸奥司他韦

达菲是一种处方药，用于治疗年龄为2周及以上有流感症状的人群的流感(流行性感冒)。丙磺舒或其代谢物或类似物或药用盐可以增强抗病毒剂(如磷酸奥司他韦)的功效，因为它有助于在治疗期间保持药物的排泄。

可能与该药物相互作用的一些产品包括：癌症化疗、巴瑞替尼(baricitinib)、二羟丙茶碱、酮咯酸、甲氨蝶呤、吡嗪酰胺、水杨酸盐(如大剂量阿司匹林)、齐多夫定、某些通过肾脏从体内排出的药物(如头孢他啶/阿维巴坦)、氨苯砜、肝素、磷霉素)。因此，在一些实施方案中，受试者在用丙磺舒或其代谢物或类似物或药用盐治疗时不施用一种或多种这些药物。

在一些实施方案中，一种或多种另外的活性剂是瑞德西韦。

C.示例性病毒和症状

还提供了通过所公开的方法治疗的示例性病毒和源自病毒感染的疾病症状。该病毒通常是冠状病毒。当前的冠状病毒分类识别出27个亚属、5个属和2个亚科中的39个物种，属于冠状病毒科、Cornidovirineae亚目、套式病毒(Nidovirales)目和核糖病毒(Riboviria)域(国际病毒分类委员会冠状病毒科研究组，Nat Microbiol 2020.DOI:10.1038/s41564-020-0695-z)。它们是具有正向单链RNA基因组和螺旋对称核衣壳的包膜病毒。冠状病毒的基因组大小从大约26到32kb不等，是RNA病毒中最大的基因组之一。

冠状病毒导致哺乳动物和鸟类疾病。最典型的是，α冠状病毒和β冠状病毒感染哺乳动物，而γ冠状病毒和δ冠状病毒主要感染鸟类。这些病毒中至少有七种可以感染人：229E(α)NL63(α)OC43(β)HKU1(β)MERS-CoV(β)病毒，SARS-CoV(β)和SARS-CoV-2(β).

在优选的实施方案中，受试者是人。在人中，冠状病毒可引起从轻微到致命的呼吸道感染。轻度疾病包括一些普通感冒病例，而更致命的种类可导致SARS、MERS和COVID-19(即由SARS-CoV-2引起)。

受试者可能具有一种或多种SARS、MERS或COVID-19的特征性的症状。

SARS(即SARS-CoV)通常以流感样的体征和症状开始，例如发烧、发冷、肌肉疼痛、头痛和偶尔的腹泻。大约一周后，体征和症状包括100.5F(38C)或更高的发烧、干咳和呼吸急促。

对于确诊病例，报告的COVID-19疾病(即由SARS-CoV-2引起)的范围从轻微症状到严重疾病和死亡。最常见的症状是发烧、疲倦、干咳、嗅觉丧失(失去味觉和/或嗅觉)和呼吸急促。流鼻涕、呕吐、腹泻、皮疹(特别是脚趾和手指)、喉咙痛、疲劳、肌肉或身体疼痛、头痛和喉咙痛也有报道。这些症状可能在暴露后2-14天出现。

大多数确认具有MERS-CoV感染的人都患有严重的呼吸道疾病，伴有发烧、咳嗽和/或呼吸急促的症状。有些人还出现腹泻和恶心/呕吐。对于许多患有MERS的人来说，随之而来的是更严重的并发症，例如肺炎和肾衰竭。一些感染者有轻微症状(如感冒样症状)或根本没有症状。

在一些实施方案中，受试者具有潜在病况，例如哮喘、心脏病、糖尿病、癌症、慢性肺病、慢性心脏病、慢性肾病或其组合。

受试者的年龄范围可以从年轻儿童，包括儿科受试者，到老年人。在一些实施方案中，受试者至少2岁，特别是如果具有一种或多种症状，例如咳嗽发烧和/或本文讨论的其他症状等。如果受试者是男性和/或超过40、50、60、70或80岁，治疗被特别指出。在一些实施方案中，受试者肥胖(BMI超过30，其中BMI是体重指数，计算为以千克为单位的人的体重除以他或她以米为单位的身高的平方)。

在一些实施方案中，受试者在治疗前具有至少一种轻度或中度COVID-19症状，例如发烧或发冷、咳嗽、呼吸急促或呼吸困难、疲劳、肌肉或身体疼痛、头痛、新的味觉或嗅觉丧失、喉咙痛、鼻塞或流鼻涕、恶心、呕吐或腹泻持续6、5、4、3、2或1天或更短时间。

在其他实施方案中，受试者是非人哺乳动物或鸟类。冠状病毒感染非人类物种引起的症状各不相同：在鸡中，它们会引起上呼吸道疾病，而在牛和猪中，它们会引起腹泻。

冠状病毒种及其代表病毒包括[(种)的代表性病毒]：SARSr-CoV BtKY72(严重急性呼吸综合征相关冠状病毒)，SARS-CoV-2(严重急性呼吸综合征相关冠状病毒)，SARSr-CoV RaTG13(严重急性呼吸综合征相关冠状病毒)，SARS-CoV PC4-227(严重急性呼吸综合征相关冠状病毒)，SARS-CoV(严重急性呼吸综合征相关冠状病毒)，Bat-Hp-Beta CovC(蹄蝠乙型冠状病毒浙江2013)，Ro-BatCoV GCCDC1(棕果蝠冠状病毒GCCDC1)，Ro-BatCoV HKU9(棕果蝠冠状病毒HKU9)，Ei-BatCoV C704(黄毛果蝠冠状病毒C704)，Pi-BatCoV HKU5(伏翼蝠冠状病毒HKU5)，Ty-BatCoV HKU4(扁颅蝠冠状病毒HKU4)，MERS-CoV(中东呼吸综合征相关冠状病毒)，EriCoV(刺猬冠状病毒)，MHV(鼠冠状病毒)，HCoV HKU1(人冠状病毒HKU1)，ChRCoV HKU24(中国鼠冠状病毒HKU24)，ChRCovC HKU24(β冠状病毒1)，MrufCoV 2JL14(田鼠冠状病毒2JL14)，HCoV NL63(人冠状病毒NL63)，HCoV 229E(人冠状病毒229E)和HCoVOC43(人冠状病毒OC43)。参见，例如，国际病毒分类委员会冠状病毒科研究组，NatMicrobiol 2020.DOI:10.1038/s41564-020-0695-z)，其全部内容以引用的方式并入本文。在一些实施方案中，冠状病毒是普通感冒冠状病毒，例如229E、NL63、OC43和HKU1。

在特别优选的实施方案中，病毒是严重急性呼吸综合征相关病毒，例如SARSr-CoVBtKY72,SARS-CoV-2,SARSr-CoV RaTG13,SARS-CoV PC4-227或SARS-CoV，优选感染人类的病毒，例如SARS-CoV或SARS-CoV-2。

在一些实施方案中，该病毒是中东呼吸综合征相关病毒，例如MERS-CoV。

在一些实施方案中，病毒是SARS-CoV-2。属于GISAID S进化枝/PANGO A谱系/Nextstrain 19B进化枝的序列WIV04/2019被认为最接近地反映了感染人类的最初SARS-CoV-2的序列。它被称为“零序列”，被广泛用作参考序列。在首次分离后，已鉴定出许多WIV04/2019的SARS-CoV-2病毒序列变体，其中一些可能特别重要，因为它们具有增加的传播性(transmissibility)、增加的毒力和降低的疫苗针对它们的效力的潜力。具有WIV04/2019序列变异的SARS-CoV-2包括但不限于：

B.1.1.7谱系(又名Concern(VOC)202012/01的20I/501Y.V1变体)。该变体在刺突蛋白的受体结合结构域(RBD)中在位置501处具有突变，其中氨基酸天冬酰胺(N)已被酪氨酸(Y)替换。这种突变的简写是N501Y。该变体还具有其他几个突变，包括：

69/70缺失：自发发生多次，可能导致刺突蛋白的构象变化。

P681H：靠近S1/S2弗林蛋白酶切割位点，这是冠状病毒高度变异的位点。这种突变也多次自发出现。

B.1.351谱系(又名20H/501Y.V2)。该变体在刺突蛋白中有多个突变，包括K417N、E484K、N501Y。与在英国检测到的B.1.1.7谱系不同，该变体不包含69/70处的缺失。

P.1谱系(又名20J/501Y.V3)。P.1变体是B.1.1.28谱系的一个分支，该谱系由日本国立传染病研究所(NIID)在来自巴西的四名旅行者中首次报告，在东京郊外的羽田机场进行例行筛查时取样。P.1谱系在刺突蛋白受体结合结构域中包含三个突变：K417T、E484K和N501Y。

其他感兴趣的谱系和突变包括但不限于B.1.1.207、B.1.429、B.1.427、B.1.525和刺突(Spike)蛋白中的其他两个突变(例如N501T-G142D)或三个突变(例如，N501T-G142D-F486L)变体。所有与WIV04/2019毒株相关的这些谱系和序列替代物也被认为是SARS-CoV-2病毒。在一些实施方案中，SARS-CoV-2是一种毒株或分离株，相比于WIV04/2019，引起人类疾病的风险升高或潜在升高。参见，例如，Science Brief,Emerging SARS-CoV-2variants(CDC网站,更新于2021年1月28日),Horby,等人,“NERVTAG note on B.1.1.7severity.”SAGE会议报告.2021年1月21日；Wu等人“mRNA-1273vaccine induces neutralizingantibodies against spike mutants from global SARS-CoV-2variants.”bioRxiv.发布于2021年1月25日；Xie等人,“Neutralization ofN501Y mutant SARS-CoV-2by BNT162b2vaccine-elicited sera.”bioRxiv.发布于2021年1月7日；Greaney等人“Comprehensivemapping of mutations to the SARS-CoV-2receptor-binding domain that affectrecognition by polyclonal human serum antibodies.”bioRxiv.[预印本于2021年1月4日在线发布]；Weisblum等人,“Escape from neutralizing antibodies by SARS-CoV-2spike protein variants.”eLife 2020；9:e61312；Resende等人“Spike E484K mutationin the first SARS-CoV-2reinfection case confirmed in Brazil,”2020。[于2021年1月10日在virological.org上发布]

前述病毒的各种毒株和分离株是已知的并且包括以下代表性基因组序列：作为例如SEQ ID No:1-4提供的序列，例如在国际病毒分类委员会冠状病毒科研究组,NatMicrobiol 2020.DOI:10.1038/s41564-020-0695-z)和提供数百个SARS-CoV-2序列的NCBI和GISAID中提供的那些序列和登录号。

在一些实施方案中，SARS-CoV-2在其刺突蛋白中具有相对于例如WIV04/2019、SEQID NO:1和/或SEQ ID NO:2或其他参考序列例如其中提供的那些序列的1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25或更多个突变。SEQ ID NO:1的刺突蛋白序列是

其由GenBank:MN908947.3(SEQ ID NO:1),/gene＝"S",/note＝"structuralprotein",/codon_start＝1/product＝"surface glycoprotein",/protein_id＝"QHD43416.1")的21563..25384编码。

在一些实施方案中，SARS-CoV-2的刺突蛋白与SEQ ID NO：1或2中的一个或多个的刺突蛋白或本文提供的另一个病毒登录号具有至少70％、75％或80％，优选至少85％，更优选至少86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％序列同一性。

在一些实施方案中，SARS-CoV-2的刺突蛋白与SEQ ID NO:5具有至少70％,75％,80％,85％,86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％序列同一性。

突变可以是置换、插入、缺失或其组合。示例性突变包括本文讨论的那些，例如刺突蛋白序列中的一个或多个以下突变：

H69，任选地其缺失；

V70，任选地其缺失；

G142，任选地G142D；

K417，任选地K417N或K417T；

E484，任选地E484K；

F486，任选地F486L；和/或

N501突变，任选地N501Y或N501T。

这些突变被单独和以所有组合提供。这些残基在上面的SEQ ID NO：5中用粗体/斜体/阴影来说明。

在一些实施方案中，SARS-CoV-2属于B.1.1.7、B.1.351、P.1、B.1.1.207、B.1.429、B.1.427或B.1.525谱系。

在示例性实施方案中，SARS-CoV-2是分离株USA/CA_CDC_5574/2020，或与其相对于原始分离株共享一个或突变的另一种分离株。根据GISAID(全球流感共享数据库)(Global Initiative on Sharing All Influenza Data)引入的命名系统，使用命名全球爆发谱系的系统发育分配(Phylogenetic Assignment of Named Global OutbreakLINeages)(PANGOLIN)工具(GISAID网站,3.Rambaut等人,Nat.Microbiol.5(2020):1403-1407.PubMed:32669681；Mercatelli等人,Front.Microbiol.(2020):doi.org/10.3389/fmicb.2020.01800.PubMed:32793182.，SARS-CoV-2，分离株USA/CA_CDC_5574/2020被分配谱系B.1.1.7和GISAID进化枝GR。SARS-CoV-2，分离株USA/CA_CDC_5574/2020的全基因组已测序(GISAID:EPI_ISL_751801)。临床分离株中存在以下突变：

刺突A570D,刺突D614G,刺突D1118H,刺突H69del,刺突N501Y,刺突P681H,刺突S982A,刺突T716I,刺突V70del,刺突Y145del,M(膜蛋白)V70L,N(核衣壳蛋白)D3L,NG204R,N R203K,N S235F,NS3 T223I,NS8(非结构蛋白8)Q27stop,NS8 R52I,NS8 Y73C,NSP3(非结构蛋白3)A890D,NSP3 I1412T,NSP3 T183I,NSP6(非结构蛋白6)F108del,NSP6G107del,NSP6 S106del,NSP12(非结构蛋白12)P323L,NSP13(非结构蛋白13)A454V,NSP13 K460R。与临床标本相比，在保藏的第二代病毒中报告了ORF1ab L3826F中的一个额外SNP。另见BEI Resources，目录号NR-54011及其描述，通过引用将其整体并入本文。

然而，这些是非限制性实例，并且所公开的组合物和方法也可用于治疗其他冠状病毒株，特别是SARS和MERS冠状病毒。在一些实施方案中，病毒基因组的(DNA序列)具有与以下序列具有至少70％、75％或80％、优选至少85％、更优选至少86％,87％,88％,89％,90％,91％,92％,93％,94％,95％,96％,97％,98％,99％或100％序列同一性的序列：SEQID NO:1、2、3或4中的一个或多个，或本文提供的另一病毒登录号，或国际病毒分类委员会冠状病毒科研究组提供的序列或登录号，Nat Microbiol 2020.DOI:10.1038/s41564-020-0695-z，所有这些在此特别通过引用将其全部内容并入本文。应当理解，序列作为DNA序列提供，但病毒基因组本身通常具有相应的RNA序列。因此，本文还明确提供了相应的RNA序列。

GenBank登录号MN908947.3，NCBI登录号NC_045512.2(其通过引用整体并入本文)提供了SARS-CoV-2(严重急性呼吸综合征冠状病毒2分离株武汉-Hu-1，完整基因组)的(DNA)基因组序列：(SEQ ID NO：1)。

GenBank登录号MN985325.1(其通过引用整体具体并入本文)提供了SARS-CoV-2(严重急性呼吸综合征冠状病毒2分离株2019-nCoV/USA-WA1/2020，完整基因组)的(DNA)基因组序列：(SEQ ID NO：2)。

GenBank登录号GenBank:AY274119.3(其通过引用整体具体并入本文)提供了SARS-CoV(严重急性呼吸综合征相关冠状病毒分离株Tor2，完整基因组)的(DNA)基因组序列：(SEQ ID NO：3)。

GenBank登录号GenBank:JX869059.2(其通过引用整体具体并入本文)提供了MERS-CoV(人β冠状病毒2c EMC/2012，完整基因组)的(DNA)基因组序列：(SEQ ID NO：4)。

在一些实施方案中，在首次施用丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐之前，受试者被诊断出SARS-CoV-2病毒测试结果呈阳性并具有至少一种轻度或中度COVID-19症状(即发烧或发冷、咳嗽、呼吸急促或呼吸困难、疲劳、肌肉或身体疼痛、头痛、新的味觉或嗅觉丧失、喉咙痛、鼻塞或流鼻涕、恶心、呕吐或腹泻)持续6天或更短时间。

通过以下编号的段落可以进一步理解所公开的组合物和方法。

1.治疗受试者的冠状病毒感染的方法，包括向所述受试者施用有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐。

2.段落1所述的方法，其中所述方法包括向所述受试者施用丙磺舒。

3.段落1或2所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐在进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂的药物组合物中。

4.段落1-3中任一项所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐是全身施用的。

5.段落1-4中任一项所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐经口、肠胃外、局部或粘膜施用。

6.段落1-4中任一项所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐是口服施用的。

7.段落1-4中任一项所述的方法，其中将所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐施用于肺(例如，肺施用)。

8.段落1-4中任一项所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐是鼻内施用的。

9.段落1-8中任一项所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐以有效量施用以减少病毒复制。

10.段落1-9中任一项所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐以有效量施用以减轻与病毒相关的疾病、病症或病的一种或多种症状。

11.段落1-10中任一项所述的方法，其中所述症状包括发烧、鼻窦和/或肺充血、流鼻涕或鼻塞、咳嗽、打喷嚏、喉咙痛、身体疼痛、疲劳、呼吸急促、胸闷、呼气时喘息、发冷、肌肉疼痛、头痛、腹泻、疲倦、恶心、呕吐、嗅觉丧失、皮疹及其组合。

12.段落1-11中任一项所述的方法，其中所述病毒是严重急性呼吸综合征相关冠状病毒、蹄蝠乙型冠状病毒浙江2013、棕果蝠冠状病毒GCCDC1、棕果蝠冠状病毒HKU9、黄毛果蝠冠状病毒C704、伏翼蝠冠状病毒HKU5、扁颅蝠冠状病毒HKU4、中东呼吸系统综合征相关冠状病毒、刺猬冠状病毒、鼠冠状病毒、人冠状病毒HKU1、中国家鼠冠状病毒HKU24、β冠状病毒1、田鼠冠状病毒2JL14、人冠状病毒NL63、人冠状病毒229E或人冠状病毒OC43。

13.段落12所述的方法，其中所述病毒是严重急性呼吸综合征相关冠状病毒。

14.段落13所述的方法，其中所述严重急性呼吸综合征相关冠状病毒是SARS-CoV-2、SARS-CoV、SARSr-CoV RaTG13、SARS-CoV PC4-227或SARSr-CoV BtKY72。

15.段落14所述的方法，其中所述严重急性呼吸综合征相关冠状病毒是SARS-CoV-2。

16.段落15所述的方法，其中所述SARS-CoV-2包含由与SEQ ID NO:1或2包含至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

17.段落14所述的方法，其中所述严重急性呼吸综合征相关冠状病毒是SARS-CoV。

18.段落17所述的方法，其中所述SARS-CoV包含由与SEQ ID NO:3包含至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

19.段落12所述的方法，其中所述病毒是中东呼吸综合征相关冠状病毒。

20.段落19所述的方法，其中所述中东呼吸综合征相关冠状病毒是MERS-CoV。

21.20所述的方法，其中所述MERS-CoV包含由与SEQ ID NO:4包含至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

22.段落1-21中任一项所述的方法，其中所述受试者已暴露于冠状病毒。

23.段落22所述的方法，其中所述受试者目前正患有冠状病毒感染。

24.段落23所述的方法，其中所述受试者患有COVID-19。

25.段落1-20中任一项所述的方法，其中所述受试者是无症状的。

26.段落1-25中任一项所述的方法，其中所述受试者已暴露于冠状病毒。

27.段落1-26中任一项所述的方法，其中所述治疗用于预防受试者中的冠状病毒感染。

28.权利要求27所述的方法，其中所述受试者与冠状病毒感染者密切接触。

29.治疗受试者的SAR-CoV-2感染的方法，包括向所述受试者施用有效量的丙磺舒或其药学上可接受的盐。

30.段落29所述的方法，其中所述受试者患有COVID-19。

31.预防方法，包括向未暴露于冠状病毒的受试者施用有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐，以便相对于没有治疗时的病毒感染，减少所述受试者暴露于病毒后的病毒感染。

32.预防冠状病毒感染的方法，包括向受试者施用有效量的丙磺舒或其药学上可接受的盐，以减少在暴露于冠状病毒之前受试者的冠状病毒感染。

33.权利要求29-32中任一项所述的方法，其中所述冠状病毒是SAR-CoV-2。

34.段落1-33中任一项所述的方法，其中每天1至5次向所述受试者施用10mg-1,000mg或50mg-500mg的丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐，直到症状减轻，感染清除，或其组合。

35.段落1-34中任一项所述的方法，其中通过脉冲给药治疗所述受试者。

36.段落35所述的方法，其中所述脉冲给药包括1-5次推注剂量的1,000mg至5,000mg丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐。

37.段落36所述的方法，其中所述推注剂量之后是任选的药物假期，直到丙磺舒、其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐的血清水平为约0。

38.段落35-37中任一项所述的方法，其中所述丙磺舒、其代谢物或类似物、或其药学上可接受的盐是口服或通过输注施用的。

39.药物组合物，其包含有效量的丙磺舒、其代谢物或类似物，或其药学上可接受的盐，用于段落1-39中任一项所述的方法中。

40.用于治疗有需要的受试者的冠状病毒感染的化合物，其中所述化合物是丙磺舒或其代谢物或类似物或其药学上可接受的盐。

41.段落40中使用的化合物，其中所述受试者具有与冠状病毒相关的疾病、病症或病的一种或多种症状，任选地其中所述症状选自发烧、鼻窦和/或肺充血,流鼻涕或鼻塞,咳嗽,打喷嚏,喉咙痛,身体疼痛,疲劳,呼吸急促,胸闷,呼气时喘息,发冷,肌肉疼痛,头痛,腹泻,疲倦,恶心,嗅觉丧失,皮疹,及其组合。

42.段落40或42中使用的化合物，其中所述受试者患有COVID-19。

43.段落40中使用的化合物，其中所述受试者是无症状的。

44.段落40中使用的化合物，其中所述治疗用于预防受试者中的冠状病毒感染。

45.段落44中使用的化合物，其中所述受试者与冠状病毒感染者密切接触。

46.段落40-45中任一项使用的化合物，其中化合物在进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂的药物组合物中。

47.段落40-46中任一项使用的化合物，其中所述治疗包括将所述化合物全身性地施用于所述受试者。

48.段落40-47中任一项使用的化合物，其中所述治疗包括将所述化合物经口、肠胃外、局部或粘膜施用至所述受试者。

49.段落48中使用的化合物，其中所述治疗包括将所述化合物经粘膜施用于所述受试者至肺、鼻粘膜或其组合。

50.段落40-49任一项中使用的化合物，所述化合物是有效量的以减少或防止所述受试者中的病毒复制。

51.段落40-50中任一项所述的化合物，其中所述冠状病毒是严重急性呼吸综合征相关冠状病毒、蹄蝠乙型冠状病毒浙江2013、棕果蝠冠状病毒GCCDC1、棕果蝠冠状病毒HKU9、黄毛果蝠冠状病毒C704、伏翼蝠冠状病毒HKU5、扁颅蝠冠状病毒HKU4、中东呼吸系统综合征相关冠状病毒、刺猬冠状病毒、鼠冠状病毒、人冠状病毒HKU1、中国家鼠冠状病毒HKU24、β冠状病毒1、田鼠冠状病毒2JL14、人冠状病毒NL63、人冠状病毒229E或人冠状病毒OC43。。

52.段落40-51中任一项使用的化合物，其中所述冠状病毒是严重急性呼吸综合征相关冠状病毒，任选地其中所述严重急性呼吸综合征相关冠状病毒是SARS-CoV-2，SARS-CoV，SARSr-CoV RaTG13，SARS-CoV PC4-227或SARSr-CoV BtKY72。

53.段落52中使用的化合物，其中所述严重急性呼吸综合征相关冠状病毒是SARS-CoV-2，任选地其中所述SARS-CoV-2包含由与SEQ ID NO:1或2包含至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

54.段落40-53中任一项使用的化合物，其中所述治疗包括以下各项的一个或多个

(i)向受试者施用10mg-1,000mg或50mg-500mg丙磺舒或其药学上可接受的盐，任选每天两次，任选持续14天；和

(ii)脉冲给药方案，任选地其中脉冲给药包括1-5次推注剂量的1,000mg至5,000mg丙磺舒或其药学上可接受的盐，任选地随后是药物假期。

55.前述段落中任一项所述的化合物或方法，其中所述SARS-CoV-2包含刺突蛋白，所述刺突蛋白包含与SEQ ID NO:5包含至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性。

56.前述段落中任一项所述的化合物或方法，其中所述SAR-CoV-2包含相对于SEQID NO:5的一个或多个突变，所述突变选自H69，任选地其缺失；V70，任选地其缺失；G142，任选地G142D；K417，任选地K417N或K417T；E484，任选地E484K；F486，任选地F486L；和N501突变，任选地N501Y或N501T。

57.前述段落中任一项所述的化合物或方法，其中所述SARS-CoV-2来自B.1.1.7、B.1.351、P.1、B.1.1.207、B.1.429、B.1.427，或B.1.525谱系。

实施例

实施例1:丙磺舒在体外减少SARS-CoV-2斑块形成

材料和方法

斑块减少测定

预防性治疗

Vero E6细胞(ATCC CRL-1586)以5x10⁵个细胞/孔接种在12孔板中并孵育过夜。

用PBS洗涤细胞1次，并且将0.1μM、1μM、2.5μM或5μM的丙磺舒或将运载体对照添加到培养基中的孔中并孵育24小时(图1)。所有孔均标准化为0.05％ DMSO。每个浓度都一式两份完成。

预处理后，弃去培养基，并用含有丙磺舒(如上)和SARS-CoV-2(从分离株USA-WA1/2020生长的品种(stock)，BEI资源目录参考号NR-52281)的培养基补充细胞。SARS-CoV-2,USA-WA1/2020的完整基因组已被测序(分离株–GenBank登录号：MN985325，并在Vero细胞中传代一次后-GenBank登录号：MT020880，和在Vero细胞中传代四次后-GenBank登录号：MT246667)。

以0.01的MOI感染细胞4天。感染后的细胞被固定并染色以显现斑块。手动量化斑块(图1)。

使用单因素方差分析和Dunnett的多重比较检验(治疗对DMSO)进行统计分析。P<0.05^*使用重复测量设计。

在另一个实验中，添加了0.0001μM、0.001μM、0.01μM、0.1μM、1μM、2.5μM或5μM的丙磺舒(图2)。将Vero E6细胞以8E5细胞/孔接种在6孔板中并孵育过夜。用PBS洗涤细胞一次，将化合物加入培养基中的孔中并孵育24小时。所有孔均标准化为0.05％ DMSO。每个浓度都一式两份完成。预处理后，丢弃培养基并用含有药物(如上)和SARS-CoV-2的培养基补充细胞。以0.01的MOI感染细胞4天。感染后将细胞固定并染色以显现斑块。对斑块进行量化(图2)。

治疗性治疗

将Vero E6细胞以8E5细胞/孔接种在6孔板中并孵育过夜。细胞用PBS洗涤一次并以0.01的MOI用病毒感染1小时。感染1小时后，将0.0001μM、0.001μM、0.01μM、0.1μM、1μM、2.5μM或5μM的丙磺舒添加到覆盖培养基中的孔中并孵育4天。感染后将细胞固定并染色以显现斑块。对斑块进行量化(图3)。

结果

使用体外斑块形成测定研究丙磺舒对病毒复制的影响。

在两个独立实验中，对于测试浓度(5μM-0.1μM)，丙磺舒预处理导致斑块形成的剂量依赖性减少。与DMSO处理的感染对照相比，5μM–0.1μM分别将斑块形成从约89％减少到72％(图1)。

在另一个实验中，在两个独立实验中，对于测试浓度(5μM-0.0001μM)，丙磺舒预处理导致斑块形成的剂量依赖性减少。与DMSO处理的感染对照相比，5μM–0.0001μM分别将斑块形成从约93％减少到50％(图2)。

在另一个实验中，对于测试浓度(5μM-0.0001μM)，丙磺舒后处理导致斑块形成的剂量依赖性减少。与DMSO处理的感染对照相比，5μM–0.0001μM分别将斑块减少约90％至40％(图3)。

这些结果表明，在测试浓度下进行24小时预处理，丙磺舒显著减少病毒滴度/斑块形成。这些结果还表明，在测试浓度下进行后处理，丙磺舒显著减少病毒滴度/斑块形成。

实施例2:预防性和治疗性丙磺舒治疗减少体内病毒载量。

材料和方法

获得84只仓鼠并用作测定的受试者，以确定丙磺舒是否对体内SARS-CoV-2感染(从分离株USA-WA1/2020生长的品种(stock)，BEI资源目录参考号NR-52281)感染具有预防性和/或治疗性作用。

在第-1天进行预防性丙磺舒治疗。通过在第0天以50μl体积鼻内递送病毒来诱导感染(1x10³ PFU)。感染后/治疗性丙磺舒治疗在第2天进行。对动物实施安乐死并在第0天、第3天和第7天收集组织用于分析。参见图5。

组

·未感染(n＝2/时间点)

·PBS感染(n＝2/时间点)

·预防性，感染前24小时，200mg/kg(n＝6/时间点)

·预防性，感染前24小时，2mg/kg(n＝6/时间点)

·治疗，感染后48小时，

·200mg/kg(n＝6/时间点)

·治疗，感染后48小时，2mg/kg(n＝6/时间点)

·n＝3个时间点(感染后第0、3、7天)

·n＝84只动物总数

终点

·体重和临床症状(每天)

·病毒滴度/载量(n＝3/组/时间点)

ο使肺均质化

ο滴度(斑块测定和TCID₅₀)

οRNA提取和qPCR

·组织病理学(n＝3/组/时间点)

ο放血(保存血清用于中和测定、ELISA、qPCR)

ο用福尔马林溶液充气

ο在福尔马林中固定>72小时

οH&E染色，读数

TCID₅₀测定

TCID50在Vero E6细胞的96孔板中完成。连续稀释肺匀浆，并且每孔加入200ul。将板孵育72小时。然后将板固定并染色。

斑块测定

在Vero E6细胞的12孔板中完成斑块测定。连续稀释肺匀浆，并且每孔加入500ul。将板孵育96小时。然后将板固定并染色。

结果

仓鼠在治疗前称重，然后在感染(第0天)后每天称重。在整个研究过程中，未感染组的体重不断增加。其他动物在感染后体重停止增加，但体重没有显著减轻。参见图5。

结果表明，在未感染仓鼠的肺部中未检测到病毒。在感染后(pi)第3天，与PBS处理的(1E9+)相比，所有丙磺舒处理的仓鼠具有低肺病毒滴度(1E5)。结果表明丙磺舒降低了几个病毒对数的肺病毒滴度。尽管仓鼠接受单次剂量，但2mg和200mg的治疗同样有效。预防性和治疗性治疗的作用相似。TCID₅₀和斑块数据几乎相同。在感染后第7天没有可检测到的肺病毒。请参见图6和图7。

实施例3:丙磺舒改善人类受试者从SARS-CoV-2感染中的恢复。

材料和方法

在开放标签中，对十名患者(二十八(28)天，轻至中度SARS-CoV-2感染的非住院患者中的研究者发起的研究(IIS))进行了丙磺舒治疗(“临床试验”)。

纳入标准：

·在筛查/基线/首剂访视1的前5天内诊断为SARS-CoV-2RNA测试呈阳性的非住院患者。

·患者在筛查后5天或更短时间内出现至少一种轻度或中度COVID-19症状(即，发烧或发冷、咳嗽、呼吸急促或呼吸困难、疲劳、肌肉或身体疼痛、头痛、新的味觉或嗅觉丧失、喉咙痛、鼻塞或流鼻涕、恶心、呕吐或腹泻)。

·男性和女性，≥18岁。

·使用Cockcroft-Gault公式，患者评估肾小球滤过率(eGFR)≥30mL/min。

·愿意参与本研究，签署知情同意书并愿意在研究期间参与定期随访。

·能够理解并配合学习程序。

排除标准：

·患者在登记时住院或需要住院。

·患者因人类免疫缺陷病毒(HIV)或其他“免疫受损”状况而受到免疫受损。

·患者患有严重的认知障碍或精神疾病。

·在研究期间正在哺乳、怀孕、打算怀孕或打算哺乳，或者在筛查时尿妊娠试验呈阳性的育龄女性(阴性结果是合格的强制性要求)。

·可能对研究药物过敏且PI认为研究药物不适合该患者的患者。

·同时参加其他临床研究。

·研究人员认为，患有可能干扰药物代谢或吸收的医疗状况(例如，短肠综合征、克罗恩病等)的患者。

·研究人员认为重大医疗状况或实验室发现的证据，例如恶性肿瘤、尿酸肾结石病史、已知的血质不调(blood dyscrasias)或其他不稳定/临床重大疾病使患者不希望参加试验。

·已知的慢性阻塞性肺病(COPD)病史。

·在过去30天内接受过任何抗COVID-19疗法的研究性治疗，例如瑞德西韦、卡莫司他、利托那韦、羟氯喹、阿奇霉素、芦可替尼(ruxolitinib)或皮质类固醇。

·接受器官、干细胞或骨髓移植。

分析变量：

·筛查变量由基线患者特征组成：完整的体格检查、身高和体重、生命体征、血液学、化学检测和尿液妊娠测试。

·功效变量由以下组成：定性SARS-CoV-2测试、SpO2、体温和呼吸道症状分级(按顺序量表划分的WHO临床状态)、入院时间、住院时长。

·常规和特殊安全变量由以下组成：AE/SAE评估、临床实验室评估：CBC、CMP、TG、AA、OM-3比率、EPA和DHA、hs-CRP、LDH、CPK、ALT、肌酐、铁蛋白、纤维蛋白原、D-二聚体和冯维勒布兰德(von Willebrand)因子(vWF)抗原。

在第1天对COVID-19呈阳性的患者进行筛查并进行体格检查，并使用iAMP定性SARS-CoV-2RNA测试进行重新测试。第1天还进行了安全实验室测试，其中包括具有差异的CBC、综合代谢谱(CMB)以及COVID-19的炎症标志物(即高灵敏度(hr-CRP)、铁蛋白、d-二聚体、CPK和LDH)。

在第2天，在审查了安全实验室值后，主要研究者确定患者是否可以继续研究，并施用第一剂研究药物丙磺舒500mg。患者每天两次接受500mg，持续14天，即，研究第2天至研究第15天。

患者在研究第5、10、15天返回诊所，并在研究第28天完成。

本研究中的年龄人口统计数据(demographics)范围为42至81岁。患者1、3和8存在同病。登记研究的患者具有表1和图8A和8B中的特征。

结果

临床试验旨在测试丙磺舒对人受试者SARS-CoV-2感染的效果。对通过14天(第15天)治疗的10名患者的数据进行了监测，包括：阳性/阴性SARS-CoV-2测试、症状改善、安全性、凝血、炎症实验室值和不良事件，每一个都在下面进行了更详细地讨论。

SARS-CoV-2测试

在最近的计算机研究中，作者进行了文献检索以了解SARS-CoV-2的病毒脱落。七十七(77)项研究/报告符合纳入条件。检查发现，对于轻度至中度疾病从呼吸道源脱落病毒的合并中位持续时间为17.2天(Cevik等人,“SARS-CoV-2,SARS-CoV,and MERS-CoV viralload dynamics,duration of viral shedding,and infectiousness:a systematicreview and meta-analysis,”The Lancet,2(1),E13-E22(2021),DOI:10.1016/S2666-5247(20)30172-5)。在来自这项丙磺舒的IIS研究的治疗患者中，除一名患者(患者003)外，所有患者的病毒脱落均低于合并中位数。

在登记研究的10名SARS-CoV-2测试呈阳性的患者中，2人在治疗第4天转为阴性，4人在第9天转为阴性，9人在第14天转为阴性。

图9总结了SARS-CoV-2阴性测试结果。观察到体重作为一种同病，患者003体重>300磅，在治疗第14天仍保持阳性。

症状改善

图10总结了症状的改善。两种症状持续存在：呼吸急促和味觉或嗅觉丧失。对于SARS-CoV-2感染，这些症状随着时间的推移持续存在并不少见。

患者001是一名八十一(81)岁男性，患有高血压同病，在治疗的第5天至第11天因呼吸急促住院。患者继续服用研究药物，在住院期间接受2-3升氧气，并通过鼻导管吸入2升氧气返回家中。住院期间，患者接受了地塞米松和希舒美，但没有恢复期血浆和瑞德西韦。

指标结果和炎症反应

低淋巴细胞、高纤维蛋白原和升高的d-二聚体可能是较差结果的指标。患者001在登记时淋巴细胞值较低，研究第15天时恢复正常。患者001在研究15天期间具有升高的纤维蛋白原和d-二聚体，并在第15天时具有升高的LDH。

患者005在研究第15天也去了急诊室。她被诊断出患有肺炎，但由于氧饱和度正常而出院回家。她被给予类固醇和抗生素。患者005在研究15天期间具有升高的d-二聚体。

图11显示了所有患者的体温分辨率。

高灵敏度C反应蛋白(hs-CRP)是针对SARS-CoV-2的早期炎症反应的指标。>3.1的值表示感染和炎症。2名患者的hs-CRP值升高，但在治疗期间下降。到研究第15天(治疗的第14天)，hs-CRP没有恢复正常。图12显示了所有患者的hs-CRP值和对治疗的反应。

D-二聚体是与SARS-CoV-2感染相关的早期凝血障碍和炎症反应的另一个指标。D-二聚体的正常范围低于0.5mcg/ml。所有10名患者均表现出与SARS-CoV-2相关的早期凝血障碍和炎症标志。在研究的治疗阶段，10名患者中有8名低于1mcg/ml。患者003在登记时具有最高值，在治疗期间接近正常值。患者001d-二聚体值在研究15天期间一直很高。图13显示了所有患者在治疗期间的d-二聚体值。

高于425mg/dL的升高的纤维蛋白原指示凝血或血栓的发展。三名患者具有超过正常上限的纤维蛋白原值。如上所述，患者001在研究15天期间具有升高的纤维蛋白原水平。患者007具有升高的纤维蛋白原水平，在治疗第9天时降低至正常水平，并且患者008在治疗第14天时降低至正常水平。图14显示了所有患者的纤维蛋白原值。

在这个年龄人群中，超过250U/L的升高的乳酸脱氢酶(LDH)是组织损伤的标志。需要住院和吸氧的患者001在出院后LDH升高。患者010在治疗第14天具有略微升高的水平。所有患者的LDH显示在图15中。

结论

这项针对10名连续登记的非住院患者的开放标签研究表明，丙磺舒治疗可减少SARS-CoV-2的病毒脱落，低于17.2天的合并中位数(Cevik等人，“SARS-CoV-2,SARS-CoV,and MERS-CoV viral load dynamics,duration of viral shedding,andinfectiousness:a systematic review and meta-analysis,”The Lancet,2(1),E13-E22(2021),DOI:10.1016/S2666-5247(20)30172-5)虽然没有使用评分分级系统，但患者症状显示了改善。凝血和炎症标志物大多维持在正常范围内，但一名患者(患者001)除外，该患者在登记时具有若干个升高的生物标志物。

实施例4:丙磺舒在体外斑块测定中与瑞德西韦相比具有优势。

瑞德西韦是腺苷类似物抗病毒剂的核苷酸前药，于2020年10月22日获FDA批准，用于治疗需要住院治疗的COVID-19。实验旨在比较丙磺舒、瑞德西韦以及丙磺舒和瑞德西韦组合的抗病毒活性。预防性和治疗性(感染时)实验通常如上文实施例1所述在NHBE和Vero细胞中进行。所有实验均进行>3次独立实验，一式三份。结果显示在图16A-20F中。

结果显示，与对照相比，在用丙磺胺预防性或治疗性治疗时，病毒斑块形成的剂量依赖性减少。

用丙磺舒的预防性治疗可防止SARS-CoV-2在哺乳动物细胞中复制(例如，与实施例1中呈现的结果相似，用不同浓度丙磺舒治疗的Vero E6细胞抑制SARS-CoV-2复制)。

在预防性和治疗性条件下，以及在两种测试的细胞类型中，丙磺舒的IC50和IC90均低于瑞德西韦。

结果还表明，0.1μM丙磺舒与瑞德西韦的共同施用可提高瑞德西韦在感染CoV2的NHBE细胞中的功效。

实施例5:丙磺舒在体外减少SARS-CoV-2 B.1.1.7斑块形成

材料和方法

来自SARS相关冠状病毒2分离株USA/CA_CDC_5574/2020(谱系B.1.1.7)(BEIResources，目录号NR-55244)的基因组RNA

SARS-CoV-2，分离株USA/CA_CDC_5574/2020是于2020年12月29日在美国加利福尼亚州圣地亚哥县从鼻咽拭子中分离的(例如，参见GISAID网站)。根据GISAID(全球流感共享数据库)引入的命名系统，使用命名全球爆发谱系的系统发育分配(PhylogeneticAssignment of Named Global Outbreak LINeages)(PANGOLIN)工具(GISAID网站,3.Rambaut等人,Nat.Microbiol.5(2020):1403-1407.PubMed:32669681；Mercatelli等人,Front.Microbiol.(2020):doi.org/10.3389/fmicb.2020.01800.PubMed:32793182.，SARS-CoV-2，分离株USA/CA_CDC_5574/2020被分配谱系B.1.1.7和GISAID进化枝GR。SARS-CoV-2，分离株USA/CA_CDC_5574/2020的全基因组已测序(GISAID:EPI_ISL_751801)。

临床分离株中存在以下突变：刺突A570D,刺突D614G,刺突D1118H,刺突H69del,刺突N501Y,刺突P681H,刺突S982A,刺突T716I,刺突V70del,刺突Y145del,M(膜蛋白)V70L,N(核衣壳蛋白)D3L,N G204R,N R203K,N S235F,NS3 T223I,NS8(非结构蛋白8)Q27stop,NS8R52I,NS8 Y73C,NSP3(非结构蛋白3)A890D,NSP3 I1412T,NSP3 T183I,NSP6(非结构蛋白6)F108del,NSP6 G107del,NSP6 S106del,NSP12(非结构蛋白12)P323L,NSP13(非结构蛋白13)A454V,NSP13 K460R。与临床标本相比，在保藏的第二代病毒中报告了ORF1ab L3826F中的一个额外SNP。

hCoV-19/Wuhan/WIV04/2019(WIV04)是GISAID使用的官方参考序列(EPI_ISL_402124)。选择WIV04是因为其高质量的基因组序列，并且因为它代表了少数早期提交的关于导致COVID-19的β冠状病毒的共有序列。(Okada等人,Euro Surveill.,25(8),5页(2020)pii＝2000097.DOI:10.2807/1560-7917.ES.2020.25.8.2000097。WIV04是早期暴发序列的代表，并且与早期暴发序列相同。WIV04是武汉病毒研究所于2019年12月30日从湖北省武汉市金银潭医院从有症状患者(工作于华南海鲜批发市场的零售商)采集的支气管肺泡灌洗液(BALF)的临床样品中分离出来的。

感染时间测定

在感染时以12孔格式测试Vero细胞。丙磺舒的评估浓度为：100,50,25,12,6,3,1,0.1,0.01,0.001,0.0001和0.00001μM。允许该测定持续3天。将细胞固定并染色以显现斑块。对斑块进行量化。

结果

一般如上文所讨论的，使用SARS-CoV-2，分离株USA/CA_CDC_5574/2020作为SARS-CoV-2测试病毒进行体外斑块测定。由于传播性增加，这种原始SARS-CoV-2分离株的变体被归类为受关注的变体。

图21中的数据显示，与SARS-CoV-2株2019-nCoV/USA-WA1/2020相比，丙磺舒在SARS-CoV-2分离株hu/USA/CA_CDC_5574/2020中具有相似的病毒滴度降低，如实施例1和相关图所示。

除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语与所公开的发明所属领域的技术人员通常理解的具有相同的含义。本文引用的出版物和引用它们的材料通过引用具体并入。

本领域技术人员将认识到或能够仅使用常规实验来确定本文描述的本发明的特定实施方案的许多等效物。这些等效物旨在被以下权利要求所涵盖。

                         序列表

<110>  佐治亚大学研究基金会股份有限公司

       拉尔夫·A·特里普

       杰克琳·默里

       罗伯特·杰夫·霍根

<120>  用于治疗冠状病毒感染的方法

<130>  UGA 2020-148-05

<150>  63/008,624

<151>  2020-04-10

<150>  63/023,021

<151>  2020-05-11

<150>  16/875,487

<151>  2020-05-15

<150>  EP20202059.0

<151>  2020-10-15

<150>  63/151,551

<151>  2021-02-19

<160>  5

<170>  PatentIn version 3.5

<210>  1

<211>  29903

<212>  DNA

<213>  人冠状病毒

<400>  1

attaaaggtt tataccttcc caggtaacaa accaaccaac tttcgatctc ttgtagatct      60

gttctctaaa cgaactttaa aatctgtgtg gctgtcactc ggctgcatgc ttagtgcact     120

cacgcagtat aattaataac taattactgt cgttgacagg acacgagtaa ctcgtctatc     180

ttctgcaggc tgcttacggt ttcgtccgtg ttgcagccga tcatcagcac atctaggttt     240

cgtccgggtg tgaccgaaag gtaagatgga gagccttgtc cctggtttca acgagaaaac     300

acacgtccaa ctcagtttgc ctgttttaca ggttcgcgac gtgctcgtac gtggctttgg     360

agactccgtg gaggaggtct tatcagaggc acgtcaacat cttaaagatg gcacttgtgg     420

cttagtagaa gttgaaaaag gcgttttgcc tcaacttgaa cagccctatg tgttcatcaa     480

acgttcggat gctcgaactg cacctcatgg tcatgttatg gttgagctgg tagcagaact     540

cgaaggcatt cagtacggtc gtagtggtga gacacttggt gtccttgtcc ctcatgtggg     600

cgaaatacca gtggcttacc gcaaggttct tcttcgtaag aacggtaata aaggagctgg     660

tggccatagt tacggcgccg atctaaagtc atttgactta ggcgacgagc ttggcactga     720

tccttatgaa gattttcaag aaaactggaa cactaaacat agcagtggtg ttacccgtga     780

actcatgcgt gagcttaacg gaggggcata cactcgctat gtcgataaca acttctgtgg     840

ccctgatggc taccctcttg agtgcattaa agaccttcta gcacgtgctg gtaaagcttc     900

atgcactttg tccgaacaac tggactttat tgacactaag aggggtgtat actgctgccg     960

tgaacatgag catgaaattg cttggtacac ggaacgttct gaaaagagct atgaattgca    1020

gacacctttt gaaattaaat tggcaaagaa atttgacacc ttcaatgggg aatgtccaaa    1080

ttttgtattt cccttaaatt ccataatcaa gactattcaa ccaagggttg aaaagaaaaa    1140

gcttgatggc tttatgggta gaattcgatc tgtctatcca gttgcgtcac caaatgaatg    1200

caaccaaatg tgcctttcaa ctctcatgaa gtgtgatcat tgtggtgaaa cttcatggca    1260

gacgggcgat tttgttaaag ccacttgcga attttgtggc actgagaatt tgactaaaga    1320

aggtgccact acttgtggtt acttacccca aaatgctgtt gttaaaattt attgtccagc    1380

atgtcacaat tcagaagtag gacctgagca tagtcttgcc gaataccata atgaatctgg    1440

cttgaaaacc attcttcgta agggtggtcg cactattgcc tttggaggct gtgtgttctc    1500

ttatgttggt tgccataaca agtgtgccta ttgggttcca cgtgctagcg ctaacatagg    1560

ttgtaaccat acaggtgttg ttggagaagg ttccgaaggt cttaatgaca accttcttga    1620

aatactccaa aaagagaaag tcaacatcaa tattgttggt gactttaaac ttaatgaaga    1680

gatcgccatt attttggcat ctttttctgc ttccacaagt gcttttgtgg aaactgtgaa    1740

aggtttggat tataaagcat tcaaacaaat tgttgaatcc tgtggtaatt ttaaagttac    1800

aaaaggaaaa gctaaaaaag gtgcctggaa tattggtgaa cagaaatcaa tactgagtcc    1860

tctttatgca tttgcatcag aggctgctcg tgttgtacga tcaattttct cccgcactct    1920

tgaaactgct caaaattctg tgcgtgtttt acagaaggcc gctataacaa tactagatgg    1980

aatttcacag tattcactga gactcattga tgctatgatg ttcacatctg atttggctac    2040

taacaatcta gttgtaatgg cctacattac aggtggtgtt gttcagttga cttcgcagtg    2100

gctaactaac atctttggca ctgtttatga aaaactcaaa cccgtccttg attggcttga    2160

agagaagttt aaggaaggtg tagagtttct tagagacggt tgggaaattg ttaaatttat    2220

ctcaacctgt gcttgtgaaa ttgtcggtgg acaaattgtc acctgtgcaa aggaaattaa    2280

ggagagtgtt cagacattct ttaagcttgt aaataaattt ttggctttgt gtgctgactc    2340

tatcattatt ggtggagcta aacttaaagc cttgaattta ggtgaaacat ttgtcacgca    2400

ctcaaaggga ttgtacagaa agtgtgttaa atccagagaa gaaactggcc tactcatgcc    2460

tctaaaagcc ccaaaagaaa ttatcttctt agagggagaa acacttccca cagaagtgtt    2520

aacagaggaa gttgtcttga aaactggtga tttacaacca ttagaacaac ctactagtga    2580

agctgttgaa gctccattgg ttggtacacc agtttgtatt aacgggctta tgttgctcga    2640

aatcaaagac acagaaaagt actgtgccct tgcacctaat atgatggtaa caaacaatac    2700

cttcacactc aaaggcggtg caccaacaaa ggttactttt ggtgatgaca ctgtgataga    2760

agtgcaaggt tacaagagtg tgaatatcac ttttgaactt gatgaaagga ttgataaagt    2820

acttaatgag aagtgctctg cctatacagt tgaactcggt acagaagtaa atgagttcgc    2880

ctgtgttgtg gcagatgctg tcataaaaac tttgcaacca gtatctgaat tacttacacc    2940

actgggcatt gatttagatg agtggagtat ggctacatac tacttatttg atgagtctgg    3000

tgagtttaaa ttggcttcac atatgtattg ttctttctac cctccagatg aggatgaaga    3060

agaaggtgat tgtgaagaag aagagtttga gccatcaact caatatgagt atggtactga    3120

agatgattac caaggtaaac ctttggaatt tggtgccact tctgctgctc ttcaacctga    3180

agaagagcaa gaagaagatt ggttagatga tgatagtcaa caaactgttg gtcaacaaga    3240

cggcagtgag gacaatcaga caactactat tcaaacaatt gttgaggttc aacctcaatt    3300

agagatggaa cttacaccag ttgttcagac tattgaagtg aatagtttta gtggttattt    3360

aaaacttact gacaatgtat acattaaaaa tgcagacatt gtggaagaag ctaaaaaggt    3420

aaaaccaaca gtggttgtta atgcagccaa tgtttacctt aaacatggag gaggtgttgc    3480

aggagcctta aataaggcta ctaacaatgc catgcaagtt gaatctgatg attacatagc    3540

tactaatgga ccacttaaag tgggtggtag ttgtgtttta agcggacaca atcttgctaa    3600

acactgtctt catgttgtcg gcccaaatgt taacaaaggt gaagacattc aacttcttaa    3660

gagtgcttat gaaaatttta atcagcacga agttctactt gcaccattat tatcagctgg    3720

tatttttggt gctgacccta tacattcttt aagagtttgt gtagatactg ttcgcacaaa    3780

tgtctactta gctgtctttg ataaaaatct ctatgacaaa cttgtttcaa gctttttgga    3840

aatgaagagt gaaaagcaag ttgaacaaaa gatcgctgag attcctaaag aggaagttaa    3900

gccatttata actgaaagta aaccttcagt tgaacagaga aaacaagatg ataagaaaat    3960

caaagcttgt gttgaagaag ttacaacaac tctggaagaa actaagttcc tcacagaaaa    4020

cttgttactt tatattgaca ttaatggcaa tcttcatcca gattctgcca ctcttgttag    4080

tgacattgac atcactttct taaagaaaga tgctccatat atagtgggtg atgttgttca    4140

agagggtgtt ttaactgctg tggttatacc tactaaaaag gctggtggca ctactgaaat    4200

gctagcgaaa gctttgagaa aagtgccaac agacaattat ataaccactt acccgggtca    4260

gggtttaaat ggttacactg tagaggaggc aaagacagtg cttaaaaagt gtaaaagtgc    4320

cttttacatt ctaccatcta ttatctctaa tgagaagcaa gaaattcttg gaactgtttc    4380

ttggaatttg cgagaaatgc ttgcacatgc agaagaaaca cgcaaattaa tgcctgtctg    4440

tgtggaaact aaagccatag tttcaactat acagcgtaaa tataagggta ttaaaataca    4500

agagggtgtg gttgattatg gtgctagatt ttacttttac accagtaaaa caactgtagc    4560

gtcacttatc aacacactta acgatctaaa tgaaactctt gttacaatgc cacttggcta    4620

tgtaacacat ggcttaaatt tggaagaagc tgctcggtat atgagatctc tcaaagtgcc    4680

agctacagtt tctgtttctt cacctgatgc tgttacagcg tataatggtt atcttacttc    4740

ttcttctaaa acacctgaag aacattttat tgaaaccatc tcacttgctg gttcctataa    4800

agattggtcc tattctggac aatctacaca actaggtata gaatttctta agagaggtga    4860

taaaagtgta tattacacta gtaatcctac cacattccac ctagatggtg aagttatcac    4920

ctttgacaat cttaagacac ttctttcttt gagagaagtg aggactatta aggtgtttac    4980

aacagtagac aacattaacc tccacacgca agttgtggac atgtcaatga catatggaca    5040

acagtttggt ccaacttatt tggatggagc tgatgttact aaaataaaac ctcataattc    5100

acatgaaggt aaaacatttt atgttttacc taatgatgac actctacgtg ttgaggcttt    5160

tgagtactac cacacaactg atcctagttt tctgggtagg tacatgtcag cattaaatca    5220

cactaaaaag tggaaatacc cacaagttaa tggtttaact tctattaaat gggcagataa    5280

caactgttat cttgccactg cattgttaac actccaacaa atagagttga agtttaatcc    5340

acctgctcta caagatgctt attacagagc aagggctggt gaagctgcta acttttgtgc    5400

acttatctta gcctactgta ataagacagt aggtgagtta ggtgatgtta gagaaacaat    5460

gagttacttg tttcaacatg ccaatttaga ttcttgcaaa agagtcttga acgtggtgtg    5520

taaaacttgt ggacaacagc agacaaccct taagggtgta gaagctgtta tgtacatggg    5580

cacactttct tatgaacaat ttaagaaagg tgttcagata ccttgtacgt gtggtaaaca    5640

agctacaaaa tatctagtac aacaggagtc accttttgtt atgatgtcag caccacctgc    5700

tcagtatgaa cttaagcatg gtacatttac ttgtgctagt gagtacactg gtaattacca    5760

gtgtggtcac tataaacata taacttctaa agaaactttg tattgcatag acggtgcttt    5820

acttacaaag tcctcagaat acaaaggtcc tattacggat gttttctaca aagaaaacag    5880

ttacacaaca accataaaac cagttactta taaattggat ggtgttgttt gtacagaaat    5940

tgaccctaag ttggacaatt attataagaa agacaattct tatttcacag agcaaccaat    6000

tgatcttgta ccaaaccaac catatccaaa cgcaagcttc gataatttta agtttgtatg    6060

tgataatatc aaatttgctg atgatttaaa ccagttaact ggttataaga aacctgcttc    6120

aagagagctt aaagttacat ttttccctga cttaaatggt gatgtggtgg ctattgatta    6180

taaacactac acaccctctt ttaagaaagg agctaaattg ttacataaac ctattgtttg    6240

gcatgttaac aatgcaacta ataaagccac gtataaacca aatacctggt gtatacgttg    6300

tctttggagc acaaaaccag ttgaaacatc aaattcgttt gatgtactga agtcagagga    6360

cgcgcaggga atggataatc ttgcctgcga agatctaaaa ccagtctctg aagaagtagt    6420

ggaaaatcct accatacaga aagacgttct tgagtgtaat gtgaaaacta ccgaagttgt    6480

aggagacatt atacttaaac cagcaaataa tagtttaaaa attacagaag aggttggcca    6540

cacagatcta atggctgctt atgtagacaa ttctagtctt actattaaga aacctaatga    6600

attatctaga gtattaggtt tgaaaaccct tgctactcat ggtttagctg ctgttaatag    6660

tgtcccttgg gatactatag ctaattatgc taagcctttt cttaacaaag ttgttagtac    6720

aactactaac atagttacac ggtgtttaaa ccgtgtttgt actaattata tgccttattt    6780

ctttacttta ttgctacaat tgtgtacttt tactagaagt acaaattcta gaattaaagc    6840

atctatgccg actactatag caaagaatac tgttaagagt gtcggtaaat tttgtctaga    6900

ggcttcattt aattatttga agtcacctaa tttttctaaa ctgataaata ttataatttg    6960

gtttttacta ttaagtgttt gcctaggttc tttaatctac tcaaccgctg ctttaggtgt    7020

tttaatgtct aatttaggca tgccttctta ctgtactggt tacagagaag gctatttgaa    7080

ctctactaat gtcactattg caacctactg tactggttct ataccttgta gtgtttgtct    7140

tagtggttta gattctttag acacctatcc ttctttagaa actatacaaa ttaccatttc    7200

atcttttaaa tgggatttaa ctgcttttgg cttagttgca gagtggtttt tggcatatat    7260

tcttttcact aggtttttct atgtacttgg attggctgca atcatgcaat tgtttttcag    7320

ctattttgca gtacatttta ttagtaattc ttggcttatg tggttaataa ttaatcttgt    7380

acaaatggcc ccgatttcag ctatggttag aatgtacatc ttctttgcat cattttatta    7440

tgtatggaaa agttatgtgc atgttgtaga cggttgtaat tcatcaactt gtatgatgtg    7500

ttacaaacgt aatagagcaa caagagtcga atgtacaact attgttaatg gtgttagaag    7560

gtccttttat gtctatgcta atggaggtaa aggcttttgc aaactacaca attggaattg    7620

tgttaattgt gatacattct gtgctggtag tacatttatt agtgatgaag ttgcgagaga    7680

cttgtcacta cagtttaaaa gaccaataaa tcctactgac cagtcttctt acatcgttga    7740

tagtgttaca gtgaagaatg gttccatcca tctttacttt gataaagctg gtcaaaagac    7800

ttatgaaaga cattctctct ctcattttgt taacttagac aacctgagag ctaataacac    7860

taaaggttca ttgcctatta atgttatagt ttttgatggt aaatcaaaat gtgaagaatc    7920

atctgcaaaa tcagcgtctg tttactacag tcagcttatg tgtcaaccta tactgttact    7980

agatcaggca ttagtgtctg atgttggtga tagtgcggaa gttgcagtta aaatgtttga    8040

tgcttacgtt aatacgtttt catcaacttt taacgtacca atggaaaaac tcaaaacact    8100

agttgcaact gcagaagctg aacttgcaaa gaatgtgtcc ttagacaatg tcttatctac    8160

ttttatttca gcagctcggc aagggtttgt tgattcagat gtagaaacta aagatgttgt    8220

tgaatgtctt aaattgtcac atcaatctga catagaagtt actggcgata gttgtaataa    8280

ctatatgctc acctataaca aagttgaaaa catgacaccc cgtgaccttg gtgcttgtat    8340

tgactgtagt gcgcgtcata ttaatgcgca ggtagcaaaa agtcacaaca ttgctttgat    8400

atggaacgtt aaagatttca tgtcattgtc tgaacaacta cgaaaacaaa tacgtagtgc    8460

tgctaaaaag aataacttac cttttaagtt gacatgtgca actactagac aagttgttaa    8520

tgttgtaaca acaaagatag cacttaaggg tggtaaaatt gttaataatt ggttgaagca    8580

gttaattaaa gttacacttg tgttcctttt tgttgctgct attttctatt taataacacc    8640

tgttcatgtc atgtctaaac atactgactt ttcaagtgaa atcataggat acaaggctat    8700

tgatggtggt gtcactcgtg acatagcatc tacagatact tgttttgcta acaaacatgc    8760

tgattttgac acatggttta gccagcgtgg tggtagttat actaatgaca aagcttgccc    8820

attgattgct gcagtcataa caagagaagt gggttttgtc gtgcctggtt tgcctggcac    8880

gatattacgc acaactaatg gtgacttttt gcatttctta cctagagttt ttagtgcagt    8940

tggtaacatc tgttacacac catcaaaact tatagagtac actgactttg caacatcagc    9000

ttgtgttttg gctgctgaat gtacaatttt taaagatgct tctggtaagc cagtaccata    9060

ttgttatgat accaatgtac tagaaggttc tgttgcttat gaaagtttac gccctgacac    9120

acgttatgtg ctcatggatg gctctattat tcaatttcct aacacctacc ttgaaggttc    9180

tgttagagtg gtaacaactt ttgattctga gtactgtagg cacggcactt gtgaaagatc    9240

agaagctggt gtttgtgtat ctactagtgg tagatgggta cttaacaatg attattacag    9300

atctttacca ggagttttct gtggtgtaga tgctgtaaat ttacttacta atatgtttac    9360

accactaatt caacctattg gtgctttgga catatcagca tctatagtag ctggtggtat    9420

tgtagctatc gtagtaacat gccttgccta ctattttatg aggtttagaa gagcttttgg    9480

tgaatacagt catgtagttg cctttaatac tttactattc cttatgtcat tcactgtact    9540

ctgtttaaca ccagtttact cattcttacc tggtgtttat tctgttattt acttgtactt    9600

gacattttat cttactaatg atgtttcttt tttagcacat attcagtgga tggttatgtt    9660

cacaccttta gtacctttct ggataacaat tgcttatatc atttgtattt ccacaaagca    9720

tttctattgg ttctttagta attacctaaa gagacgtgta gtctttaatg gtgtttcctt    9780

tagtactttt gaagaagctg cgctgtgcac ctttttgtta aataaagaaa tgtatctaaa    9840

gttgcgtagt gatgtgctat tacctcttac gcaatataat agatacttag ctctttataa    9900

taagtacaag tattttagtg gagcaatgga tacaactagc tacagagaag ctgcttgttg    9960

tcatctcgca aaggctctca atgacttcag taactcaggt tctgatgttc tttaccaacc   10020

accacaaacc tctatcacct cagctgtttt gcagagtggt tttagaaaaa tggcattccc   10080

atctggtaaa gttgagggtt gtatggtaca agtaacttgt ggtacaacta cacttaacgg   10140

tctttggctt gatgacgtag tttactgtcc aagacatgtg atctgcacct ctgaagacat   10200

gcttaaccct aattatgaag atttactcat tcgtaagtct aatcataatt tcttggtaca   10260

ggctggtaat gttcaactca gggttattgg acattctatg caaaattgtg tacttaagct   10320

taaggttgat acagccaatc ctaagacacc taagtataag tttgttcgca ttcaaccagg   10380

acagactttt tcagtgttag cttgttacaa tggttcacca tctggtgttt accaatgtgc   10440

tatgaggccc aatttcacta ttaagggttc attccttaat ggttcatgtg gtagtgttgg   10500

ttttaacata gattatgact gtgtctcttt ttgttacatg caccatatgg aattaccaac   10560

tggagttcat gctggcacag acttagaagg taacttttat ggaccttttg ttgacaggca   10620

aacagcacaa gcagctggta cggacacaac tattacagtt aatgttttag cttggttgta   10680

cgctgctgtt ataaatggag acaggtggtt tctcaatcga tttaccacaa ctcttaatga   10740

ctttaacctt gtggctatga agtacaatta tgaacctcta acacaagacc atgttgacat   10800

actaggacct ctttctgctc aaactggaat tgccgtttta gatatgtgtg cttcattaaa   10860

agaattactg caaaatggta tgaatggacg taccatattg ggtagtgctt tattagaaga   10920

tgaatttaca ccttttgatg ttgttagaca atgctcaggt gttactttcc aaagtgcagt   10980

gaaaagaaca atcaagggta cacaccactg gttgttactc acaattttga cttcactttt   11040

agttttagtc cagagtactc aatggtcttt gttctttttt ttgtatgaaa atgccttttt   11100

accttttgct atgggtatta ttgctatgtc tgcttttgca atgatgtttg tcaaacataa   11160

gcatgcattt ctctgtttgt ttttgttacc ttctcttgcc actgtagctt attttaatat   11220

ggtctatatg cctgctagtt gggtgatgcg tattatgaca tggttggata tggttgatac   11280

tagtttgtct ggttttaagc taaaagactg tgttatgtat gcatcagctg tagtgttact   11340

aatccttatg acagcaagaa ctgtgtatga tgatggtgct aggagagtgt ggacacttat   11400

gaatgtcttg acactcgttt ataaagttta ttatggtaat gctttagatc aagccatttc   11460

catgtgggct cttataatct ctgttacttc taactactca ggtgtagtta caactgtcat   11520

gtttttggcc agaggtattg tttttatgtg tgttgagtat tgccctattt tcttcataac   11580

tggtaataca cttcagtgta taatgctagt ttattgtttc ttaggctatt tttgtacttg   11640

ttactttggc ctcttttgtt tactcaaccg ctactttaga ctgactcttg gtgtttatga   11700

ttacttagtt tctacacagg agtttagata tatgaattca cagggactac tcccacccaa   11760

gaatagcata gatgccttca aactcaacat taaattgttg ggtgttggtg gcaaaccttg   11820

tatcaaagta gccactgtac agtctaaaat gtcagatgta aagtgcacat cagtagtctt   11880

actctcagtt ttgcaacaac tcagagtaga atcatcatct aaattgtggg ctcaatgtgt   11940

ccagttacac aatgacattc tcttagctaa agatactact gaagcctttg aaaaaatggt   12000

ttcactactt tctgttttgc tttccatgca gggtgctgta gacataaaca agctttgtga   12060

agaaatgctg gacaacaggg caaccttaca agctatagcc tcagagttta gttcccttcc   12120

atcatatgca gcttttgcta ctgctcaaga agcttatgag caggctgttg ctaatggtga   12180

ttctgaagtt gttcttaaaa agttgaagaa gtctttgaat gtggctaaat ctgaatttga   12240

ccgtgatgca gccatgcaac gtaagttgga aaagatggct gatcaagcta tgacccaaat   12300

gtataaacag gctagatctg aggacaagag ggcaaaagtt actagtgcta tgcagacaat   12360

gcttttcact atgcttagaa agttggataa tgatgcactc aacaacatta tcaacaatgc   12420

aagagatggt tgtgttccct tgaacataat acctcttaca acagcagcca aactaatggt   12480

tgtcatacca gactataaca catataaaaa tacgtgtgat ggtacaacat ttacttatgc   12540

atcagcattg tgggaaatcc aacaggttgt agatgcagat agtaaaattg ttcaacttag   12600

tgaaattagt atggacaatt cacctaattt agcatggcct cttattgtaa cagctttaag   12660

ggccaattct gctgtcaaat tacagaataa tgagcttagt cctgttgcac tacgacagat   12720

gtcttgtgct gccggtacta cacaaactgc ttgcactgat gacaatgcgt tagcttacta   12780

caacacaaca aagggaggta ggtttgtact tgcactgtta tccgatttac aggatttgaa   12840

atgggctaga ttccctaaga gtgatggaac tggtactatc tatacagaac tggaaccacc   12900

ttgtaggttt gttacagaca cacctaaagg tcctaaagtg aagtatttat actttattaa   12960

aggattaaac aacctaaata gaggtatggt acttggtagt ttagctgcca cagtacgtct   13020

acaagctggt aatgcaacag aagtgcctgc caattcaact gtattatctt tctgtgcttt   13080

tgctgtagat gctgctaaag cttacaaaga ttatctagct agtgggggac aaccaatcac   13140

taattgtgtt aagatgttgt gtacacacac tggtactggt caggcaataa cagttacacc   13200

ggaagccaat atggatcaag aatcctttgg tggtgcatcg tgttgtctgt actgccgttg   13260

ccacatagat catccaaatc ctaaaggatt ttgtgactta aaaggtaagt atgtacaaat   13320

acctacaact tgtgctaatg accctgtggg ttttacactt aaaaacacag tctgtaccgt   13380

ctgcggtatg tggaaaggtt atggctgtag ttgtgatcaa ctccgcgaac ccatgcttca   13440

gtcagctgat gcacaatcgt ttttaaacgg gtttgcggtg taagtgcagc ccgtcttaca   13500

ccgtgcggca caggcactag tactgatgtc gtatacaggg cttttgacat ctacaatgat   13560

aaagtagctg gttttgctaa attcctaaaa actaattgtt gtcgcttcca agaaaaggac   13620

gaagatgaca atttaattga ttcttacttt gtagttaaga gacacacttt ctctaactac   13680

caacatgaag aaacaattta taatttactt aaggattgtc cagctgttgc taaacatgac   13740

ttctttaagt ttagaataga cggtgacatg gtaccacata tatcacgtca acgtcttact   13800

aaatacacaa tggcagacct cgtctatgct ttaaggcatt ttgatgaagg taattgtgac   13860

acattaaaag aaatacttgt cacatacaat tgttgtgatg atgattattt caataaaaag   13920

gactggtatg attttgtaga aaacccagat atattacgcg tatacgccaa cttaggtgaa   13980

cgtgtacgcc aagctttgtt aaaaacagta caattctgtg atgccatgcg aaatgctggt   14040

attgttggtg tactgacatt agataatcaa gatctcaatg gtaactggta tgatttcggt   14100

gatttcatac aaaccacgcc aggtagtgga gttcctgttg tagattctta ttattcattg   14160

ttaatgccta tattaacctt gaccagggct ttaactgcag agtcacatgt tgacactgac   14220

ttaacaaagc cttacattaa gtgggatttg ttaaaatatg acttcacgga agagaggtta   14280

aaactctttg accgttattt taaatattgg gatcagacat accacccaaa ttgtgttaac   14340

tgtttggatg acagatgcat tctgcattgt gcaaacttta atgttttatt ctctacagtg   14400

ttcccaccta caagttttgg accactagtg agaaaaatat ttgttgatgg tgttccattt   14460

gtagtttcaa ctggatacca cttcagagag ctaggtgttg tacataatca ggatgtaaac   14520

ttacatagct ctagacttag ttttaaggaa ttacttgtgt atgctgctga ccctgctatg   14580

cacgctgctt ctggtaatct attactagat aaacgcacta cgtgcttttc agtagctgca   14640

cttactaaca atgttgcttt tcaaactgtc aaacccggta attttaacaa agacttctat   14700

gactttgctg tgtctaaggg tttctttaag gaaggaagtt ctgttgaatt aaaacacttc   14760

ttctttgctc aggatggtaa tgctgctatc agcgattatg actactatcg ttataatcta   14820

ccaacaatgt gtgatatcag acaactacta tttgtagttg aagttgttga taagtacttt   14880

gattgttacg atggtggctg tattaatgct aaccaagtca tcgtcaacaa cctagacaaa   14940

tcagctggtt ttccatttaa taaatggggt aaggctagac tttattatga ttcaatgagt   15000

tatgaggatc aagatgcact tttcgcatat acaaaacgta atgtcatccc tactataact   15060

caaatgaatc ttaagtatgc cattagtgca aagaatagag ctcgcaccgt agctggtgtc   15120

tctatctgta gtactatgac caatagacag tttcatcaaa aattattgaa atcaatagcc   15180

gccactagag gagctactgt agtaattgga acaagcaaat tctatggtgg ttggcacaac   15240

atgttaaaaa ctgtttatag tgatgtagaa aaccctcacc ttatgggttg ggattatcct   15300

aaatgtgata gagccatgcc taacatgctt agaattatgg cctcacttgt tcttgctcgc   15360

aaacatacaa cgtgttgtag cttgtcacac cgtttctata gattagctaa tgagtgtgct   15420

caagtattga gtgaaatggt catgtgtggc ggttcactat atgttaaacc aggtggaacc   15480

tcatcaggag atgccacaac tgcttatgct aatagtgttt ttaacatttg tcaagctgtc   15540

acggccaatg ttaatgcact tttatctact gatggtaaca aaattgccga taagtatgtc   15600

cgcaatttac aacacagact ttatgagtgt ctctatagaa atagagatgt tgacacagac   15660

tttgtgaatg agttttacgc atatttgcgt aaacatttct caatgatgat actctctgac   15720

gatgctgttg tgtgtttcaa tagcacttat gcatctcaag gtctagtggc tagcataaag   15780

aactttaagt cagttcttta ttatcaaaac aatgttttta tgtctgaagc aaaatgttgg   15840

actgagactg accttactaa aggacctcat gaattttgct ctcaacatac aatgctagtt   15900

aaacagggtg atgattatgt gtaccttcct tacccagatc catcaagaat cctaggggcc   15960

ggctgttttg tagatgatat cgtaaaaaca gatggtacac ttatgattga acggttcgtg   16020

tctttagcta tagatgctta cccacttact aaacatccta atcaggagta tgctgatgtc   16080

tttcatttgt acttacaata cataagaaag ctacatgatg agttaacagg acacatgtta   16140

gacatgtatt ctgttatgct tactaatgat aacacttcaa ggtattggga acctgagttt   16200

tatgaggcta tgtacacacc gcatacagtc ttacaggctg ttggggcttg tgttctttgc   16260

aattcacaga cttcattaag atgtggtgct tgcatacgta gaccattctt atgttgtaaa   16320

tgctgttacg accatgtcat atcaacatca cataaattag tcttgtctgt taatccgtat   16380

gtttgcaatg ctccaggttg tgatgtcaca gatgtgactc aactttactt aggaggtatg   16440

agctattatt gtaaatcaca taaaccaccc attagttttc cattgtgtgc taatggacaa   16500

gtttttggtt tatataaaaa tacatgtgtt ggtagcgata atgttactga ctttaatgca   16560

attgcaacat gtgactggac aaatgctggt gattacattt tagctaacac ctgtactgaa   16620

agactcaagc tttttgcagc agaaacgctc aaagctactg aggagacatt taaactgtct   16680

tatggtattg ctactgtacg tgaagtgctg tctgacagag aattacatct ttcatgggaa   16740

gttggtaaac ctagaccacc acttaaccga aattatgtct ttactggtta tcgtgtaact   16800

aaaaacagta aagtacaaat aggagagtac acctttgaaa aaggtgacta tggtgatgct   16860

gttgtttacc gaggtacaac aacttacaaa ttaaatgttg gtgattattt tgtgctgaca   16920

tcacatacag taatgccatt aagtgcacct acactagtgc cacaagagca ctatgttaga   16980

attactggct tatacccaac actcaatatc tcagatgagt tttctagcaa tgttgcaaat   17040

tatcaaaagg ttggtatgca aaagtattct acactccagg gaccacctgg tactggtaag   17100

agtcattttg ctattggcct agctctctac tacccttctg ctcgcatagt gtatacagct   17160

tgctctcatg ccgctgttga tgcactatgt gagaaggcat taaaatattt gcctatagat   17220

aaatgtagta gaattatacc tgcacgtgct cgtgtagagt gttttgataa attcaaagtg   17280

aattcaacat tagaacagta tgtcttttgt actgtaaatg cattgcctga gacgacagca   17340

gatatagttg tctttgatga aatttcaatg gccacaaatt atgatttgag tgttgtcaat   17400

gccagattac gtgctaagca ctatgtgtac attggcgacc ctgctcaatt acctgcacca   17460

cgcacattgc taactaaggg cacactagaa ccagaatatt tcaattcagt gtgtagactt   17520

atgaaaacta taggtccaga catgttcctc ggaacttgtc ggcgttgtcc tgctgaaatt   17580

gttgacactg tgagtgcttt ggtttatgat aataagctta aagcacataa agacaaatca   17640

gctcaatgct ttaaaatgtt ttataagggt gttatcacgc atgatgtttc atctgcaatt   17700

aacaggccac aaataggcgt ggtaagagaa ttccttacac gtaaccctgc ttggagaaaa   17760

gctgtcttta tttcacctta taattcacag aatgctgtag cctcaaagat tttgggacta   17820

ccaactcaaa ctgttgattc atcacagggc tcagaatatg actatgtcat attcactcaa   17880

accactgaaa cagctcactc ttgtaatgta aacagattta atgttgctat taccagagca   17940

aaagtaggca tactttgcat aatgtctgat agagaccttt atgacaagtt gcaatttaca   18000

agtcttgaaa ttccacgtag gaatgtggca actttacaag ctgaaaatgt aacaggactc   18060

tttaaagatt gtagtaaggt aatcactggg ttacatccta cacaggcacc tacacacctc   18120

agtgttgaca ctaaattcaa aactgaaggt ttatgtgttg acatacctgg catacctaag   18180

gacatgacct atagaagact catctctatg atgggtttta aaatgaatta tcaagttaat   18240

ggttacccta acatgtttat cacccgcgaa gaagctataa gacatgtacg tgcatggatt   18300

ggcttcgatg tcgaggggtg tcatgctact agagaagctg ttggtaccaa tttaccttta   18360

cagctaggtt tttctacagg tgttaaccta gttgctgtac ctacaggtta tgttgataca   18420

cctaataata cagatttttc cagagttagt gctaaaccac cgcctggaga tcaatttaaa   18480

cacctcatac cacttatgta caaaggactt ccttggaatg tagtgcgtat aaagattgta   18540

caaatgttaa gtgacacact taaaaatctc tctgacagag tcgtatttgt cttatgggca   18600

catggctttg agttgacatc tatgaagtat tttgtgaaaa taggacctga gcgcacctgt   18660

tgtctatgtg atagacgtgc cacatgcttt tccactgctt cagacactta tgcctgttgg   18720

catcattcta ttggatttga ttacgtctat aatccgttta tgattgatgt tcaacaatgg   18780

ggttttacag gtaacctaca aagcaaccat gatctgtatt gtcaagtcca tggtaatgca   18840

catgtagcta gttgtgatgc aatcatgact aggtgtctag ctgtccacga gtgctttgtt   18900

aagcgtgttg actggactat tgaatatcct ataattggtg atgaactgaa gattaatgcg   18960

gcttgtagaa aggttcaaca catggttgtt aaagctgcat tattagcaga caaattccca   19020

gttcttcacg acattggtaa ccctaaagct attaagtgtg tacctcaagc tgatgtagaa   19080

tggaagttct atgatgcaca gccttgtagt gacaaagctt ataaaataga agaattattc   19140

tattcttatg ccacacattc tgacaaattc acagatggtg tatgcctatt ttggaattgc   19200

aatgtcgata gatatcctgc taattccatt gtttgtagat ttgacactag agtgctatct   19260

aaccttaact tgcctggttg tgatggtggc agtttgtatg taaataaaca tgcattccac   19320

acaccagctt ttgataaaag tgcttttgtt aatttaaaac aattaccatt tttctattac   19380

tctgacagtc catgtgagtc tcatggaaaa caagtagtgt cagatataga ttatgtacca   19440

ctaaagtctg ctacgtgtat aacacgttgc aatttaggtg gtgctgtctg tagacatcat   19500

gctaatgagt acagattgta tctcgatgct tataacatga tgatctcagc tggctttagc   19560

ttgtgggttt acaaacaatt tgatacttat aacctctgga acacttttac aagacttcag   19620

agtttagaaa atgtggcttt taatgttgta aataagggac actttgatgg acaacagggt   19680

gaagtaccag tttctatcat taataacact gtttacacaa aagttgatgg tgttgatgta   19740

gaattgtttg aaaataaaac aacattacct gttaatgtag catttgagct ttgggctaag   19800

cgcaacatta aaccagtacc agaggtgaaa atactcaata atttgggtgt ggacattgct   19860

gctaatactg tgatctggga ctacaaaaga gatgctccag cacatatatc tactattggt   19920

gtttgttcta tgactgacat agccaagaaa ccaactgaaa cgatttgtgc accactcact   19980

gtcttttttg atggtagagt tgatggtcaa gtagacttat ttagaaatgc ccgtaatggt   20040

gttcttatta cagaaggtag tgttaaaggt ttacaaccat ctgtaggtcc caaacaagct   20100

agtcttaatg gagtcacatt aattggagaa gccgtaaaaa cacagttcaa ttattataag   20160

aaagttgatg gtgttgtcca acaattacct gaaacttact ttactcagag tagaaattta   20220

caagaattta aacccaggag tcaaatggaa attgatttct tagaattagc tatggatgaa   20280

ttcattgaac ggtataaatt agaaggctat gccttcgaac atatcgttta tggagatttt   20340

agtcatagtc agttaggtgg tttacatcta ctgattggac tagctaaacg ttttaaggaa   20400

tcaccttttg aattagaaga ttttattcct atggacagta cagttaaaaa ctatttcata   20460

acagatgcgc aaacaggttc atctaagtgt gtgtgttctg ttattgattt attacttgat   20520

gattttgttg aaataataaa atcccaagat ttatctgtag tttctaaggt tgtcaaagtg   20580

actattgact atacagaaat ttcatttatg ctttggtgta aagatggcca tgtagaaaca   20640

ttttacccaa aattacaatc tagtcaagcg tggcaaccgg gtgttgctat gcctaatctt   20700

tacaaaatgc aaagaatgct attagaaaag tgtgaccttc aaaattatgg tgatagtgca   20760

acattaccta aaggcataat gatgaatgtc gcaaaatata ctcaactgtg tcaatattta   20820

aacacattaa cattagctgt accctataat atgagagtta tacattttgg tgctggttct   20880

gataaaggag ttgcaccagg tacagctgtt ttaagacagt ggttgcctac gggtacgctg   20940

cttgtcgatt cagatcttaa tgactttgtc tctgatgcag attcaacttt gattggtgat   21000

tgtgcaactg tacatacagc taataaatgg gatctcatta ttagtgatat gtacgaccct   21060

aagactaaaa atgttacaaa agaaaatgac tctaaagagg gttttttcac ttacatttgt   21120

gggtttatac aacaaaagct agctcttgga ggttccgtgg ctataaagat aacagaacat   21180

tcttggaatg ctgatcttta taagctcatg ggacacttcg catggtggac agcctttgtt   21240

actaatgtga atgcgtcatc atctgaagca tttttaattg gatgtaatta tcttggcaaa   21300

ccacgcgaac aaatagatgg ttatgtcatg catgcaaatt acatattttg gaggaataca   21360

aatccaattc agttgtcttc ctattcttta tttgacatga gtaaatttcc ccttaaatta   21420

aggggtactg ctgttatgtc tttaaaagaa ggtcaaatca atgatatgat tttatctctt   21480

cttagtaaag gtagacttat aattagagaa aacaacagag ttgttatttc tagtgatgtt   21540

cttgttaaca actaaacgaa caatgtttgt ttttcttgtt ttattgccac tagtctctag   21600

tcagtgtgtt aatcttacaa ccagaactca attaccccct gcatacacta attctttcac   21660

acgtggtgtt tattaccctg acaaagtttt cagatcctca gttttacatt caactcagga   21720

cttgttctta cctttctttt ccaatgttac ttggttccat gctatacatg tctctgggac   21780

caatggtact aagaggtttg ataaccctgt cctaccattt aatgatggtg tttattttgc   21840

ttccactgag aagtctaaca taataagagg ctggattttt ggtactactt tagattcgaa   21900

gacccagtcc ctacttattg ttaataacgc tactaatgtt gttattaaag tctgtgaatt   21960

tcaattttgt aatgatccat ttttgggtgt ttattaccac aaaaacaaca aaagttggat   22020

ggaaagtgag ttcagagttt attctagtgc gaataattgc acttttgaat atgtctctca   22080

gccttttctt atggaccttg aaggaaaaca gggtaatttc aaaaatctta gggaatttgt   22140

gtttaagaat attgatggtt attttaaaat atattctaag cacacgccta ttaatttagt   22200

gcgtgatctc cctcagggtt tttcggcttt agaaccattg gtagatttgc caataggtat   22260

taacatcact aggtttcaaa ctttacttgc tttacataga agttatttga ctcctggtga   22320

ttcttcttca ggttggacag ctggtgctgc agcttattat gtgggttatc ttcaacctag   22380

gacttttcta ttaaaatata atgaaaatgg aaccattaca gatgctgtag actgtgcact   22440

tgaccctctc tcagaaacaa agtgtacgtt gaaatccttc actgtagaaa aaggaatcta   22500

tcaaacttct aactttagag tccaaccaac agaatctatt gttagatttc ctaatattac   22560

aaacttgtgc ccttttggtg aagtttttaa cgccaccaga tttgcatctg tttatgcttg   22620

gaacaggaag agaatcagca actgtgttgc tgattattct gtcctatata attccgcatc   22680

attttccact tttaagtgtt atggagtgtc tcctactaaa ttaaatgatc tctgctttac   22740

taatgtctat gcagattcat ttgtaattag aggtgatgaa gtcagacaaa tcgctccagg   22800

gcaaactgga aagattgctg attataatta taaattacca gatgatttta caggctgcgt   22860

tatagcttgg aattctaaca atcttgattc taaggttggt ggtaattata attacctgta   22920

tagattgttt aggaagtcta atctcaaacc ttttgagaga gatatttcaa ctgaaatcta   22980

tcaggccggt agcacacctt gtaatggtgt tgaaggtttt aattgttact ttcctttaca   23040

atcatatggt ttccaaccca ctaatggtgt tggttaccaa ccatacagag tagtagtact   23100

ttcttttgaa cttctacatg caccagcaac tgtttgtgga cctaaaaagt ctactaattt   23160

ggttaaaaac aaatgtgtca atttcaactt caatggttta acaggcacag gtgttcttac   23220

tgagtctaac aaaaagtttc tgcctttcca acaatttggc agagacattg ctgacactac   23280

tgatgctgtc cgtgatccac agacacttga gattcttgac attacaccat gttcttttgg   23340

tggtgtcagt gttataacac caggaacaaa tacttctaac caggttgctg ttctttatca   23400

ggatgttaac tgcacagaag tccctgttgc tattcatgca gatcaactta ctcctacttg   23460

gcgtgtttat tctacaggtt ctaatgtttt tcaaacacgt gcaggctgtt taataggggc   23520

tgaacatgtc aacaactcat atgagtgtga catacccatt ggtgcaggta tatgcgctag   23580

ttatcagact cagactaatt ctcctcggcg ggcacgtagt gtagctagtc aatccatcat   23640

tgcctacact atgtcacttg gtgcagaaaa ttcagttgct tactctaata actctattgc   23700

catacccaca aattttacta ttagtgttac cacagaaatt ctaccagtgt ctatgaccaa   23760

gacatcagta gattgtacaa tgtacatttg tggtgattca actgaatgca gcaatctttt   23820

gttgcaatat ggcagttttt gtacacaatt aaaccgtgct ttaactggaa tagctgttga   23880

acaagacaaa aacacccaag aagtttttgc acaagtcaaa caaatttaca aaacaccacc   23940

aattaaagat tttggtggtt ttaatttttc acaaatatta ccagatccat caaaaccaag   24000

caagaggtca tttattgaag atctactttt caacaaagtg acacttgcag atgctggctt   24060

catcaaacaa tatggtgatt gccttggtga tattgctgct agagacctca tttgtgcaca   24120

aaagtttaac ggccttactg ttttgccacc tttgctcaca gatgaaatga ttgctcaata   24180

cacttctgca ctgttagcgg gtacaatcac ttctggttgg acctttggtg caggtgctgc   24240

attacaaata ccatttgcta tgcaaatggc ttataggttt aatggtattg gagttacaca   24300

gaatgttctc tatgagaacc aaaaattgat tgccaaccaa tttaatagtg ctattggcaa   24360

aattcaagac tcactttctt ccacagcaag tgcacttgga aaacttcaag atgtggtcaa   24420

ccaaaatgca caagctttaa acacgcttgt taaacaactt agctccaatt ttggtgcaat   24480

ttcaagtgtt ttaaatgata tcctttcacg tcttgacaaa gttgaggctg aagtgcaaat   24540

tgataggttg atcacaggca gacttcaaag tttgcagaca tatgtgactc aacaattaat   24600

tagagctgca gaaatcagag cttctgctaa tcttgctgct actaaaatgt cagagtgtgt   24660

acttggacaa tcaaaaagag ttgatttttg tggaaagggc tatcatctta tgtccttccc   24720

tcagtcagca cctcatggtg tagtcttctt gcatgtgact tatgtccctg cacaagaaaa   24780

gaacttcaca actgctcctg ccatttgtca tgatggaaaa gcacactttc ctcgtgaagg   24840

tgtctttgtt tcaaatggca cacactggtt tgtaacacaa aggaattttt atgaaccaca   24900

aatcattact acagacaaca catttgtgtc tggtaactgt gatgttgtaa taggaattgt   24960

caacaacaca gtttatgatc ctttgcaacc tgaattagac tcattcaagg aggagttaga   25020

taaatatttt aagaatcata catcaccaga tgttgattta ggtgacatct ctggcattaa   25080

tgcttcagtt gtaaacattc aaaaagaaat tgaccgcctc aatgaggttg ccaagaattt   25140

aaatgaatct ctcatcgatc tccaagaact tggaaagtat gagcagtata taaaatggcc   25200

atggtacatt tggctaggtt ttatagctgg cttgattgcc atagtaatgg tgacaattat   25260

gctttgctgt atgaccagtt gctgtagttg tctcaagggc tgttgttctt gtggatcctg   25320

ctgcaaattt gatgaagacg actctgagcc agtgctcaaa ggagtcaaat tacattacac   25380

ataaacgaac ttatggattt gtttatgaga atcttcacaa ttggaactgt aactttgaag   25440

caaggtgaaa tcaaggatgc tactccttca gattttgttc gcgctactgc aacgataccg   25500

atacaagcct cactcccttt cggatggctt attgttggcg ttgcacttct tgctgttttt   25560

cagagcgctt ccaaaatcat aaccctcaaa aagagatggc aactagcact ctccaagggt   25620

gttcactttg tttgcaactt gctgttgttg tttgtaacag tttactcaca ccttttgctc   25680

gttgctgctg gccttgaagc cccttttctc tatctttatg ctttagtcta cttcttgcag   25740

agtataaact ttgtaagaat aataatgagg ctttggcttt gctggaaatg ccgttccaaa   25800

aacccattac tttatgatgc caactatttt ctttgctggc atactaattg ttacgactat   25860

tgtatacctt acaatagtgt aacttcttca attgtcatta cttcaggtga tggcacaaca   25920

agtcctattt ctgaacatga ctaccagatt ggtggttata ctgaaaaatg ggaatctgga   25980

gtaaaagact gtgttgtatt acacagttac ttcacttcag actattacca gctgtactca   26040

actcaattga gtacagacac tggtgttgaa catgttacct tcttcatcta caataaaatt   26100

gttgatgagc ctgaagaaca tgtccaaatt cacacaatcg acggttcatc cggagttgtt   26160

aatccagtaa tggaaccaat ttatgatgaa ccgacgacga ctactagcgt gcctttgtaa   26220

gcacaagctg atgagtacga acttatgtac tcattcgttt cggaagagac aggtacgtta   26280

atagttaata gcgtacttct ttttcttgct ttcgtggtat tcttgctagt tacactagcc   26340

atccttactg cgcttcgatt gtgtgcgtac tgctgcaata ttgttaacgt gagtcttgta   26400

aaaccttctt tttacgttta ctctcgtgtt aaaaatctga attcttctag agttcctgat   26460

cttctggtct aaacgaacta aatattatat tagtttttct gtttggaact ttaattttag   26520

ccatggcaga ttccaacggt actattaccg ttgaagagct taaaaagctc cttgaacaat   26580

ggaacctagt aataggtttc ctattcctta catggatttg tcttctacaa tttgcctatg   26640

ccaacaggaa taggtttttg tatataatta agttaatttt cctctggctg ttatggccag   26700

taactttagc ttgttttgtg cttgctgctg tttacagaat aaattggatc accggtggaa   26760

ttgctatcgc aatggcttgt cttgtaggct tgatgtggct cagctacttc attgcttctt   26820

tcagactgtt tgcgcgtacg cgttccatgt ggtcattcaa tccagaaact aacattcttc   26880

tcaacgtgcc actccatggc actattctga ccagaccgct tctagaaagt gaactcgtaa   26940

tcggagctgt gatccttcgt ggacatcttc gtattgctgg acaccatcta ggacgctgtg   27000

acatcaagga cctgcctaaa gaaatcactg ttgctacatc acgaacgctt tcttattaca   27060

aattgggagc ttcgcagcgt gtagcaggtg actcaggttt tgctgcatac agtcgctaca   27120

ggattggcaa ctataaatta aacacagacc attccagtag cagtgacaat attgctttgc   27180

ttgtacagta agtgacaaca gatgtttcat ctcgttgact ttcaggttac tatagcagag   27240

atattactaa ttattatgag gacttttaaa gtttccattt ggaatcttga ttacatcata   27300

aacctcataa ttaaaaattt atctaagtca ctaactgaga ataaatattc tcaattagat   27360

gaagagcaac caatggagat tgattaaacg aacatgaaaa ttattctttt cttggcactg   27420

ataacactcg ctacttgtga gctttatcac taccaagagt gtgttagagg tacaacagta   27480

cttttaaaag aaccttgctc ttctggaaca tacgagggca attcaccatt tcatcctcta   27540

gctgataaca aatttgcact gacttgcttt agcactcaat ttgcttttgc ttgtcctgac   27600

ggcgtaaaac acgtctatca gttacgtgcc agatcagttt cacctaaact gttcatcaga   27660

caagaggaag ttcaagaact ttactctcca atttttctta ttgttgcggc aatagtgttt   27720

ataacacttt gcttcacact caaaagaaag acagaatgat tgaactttca ttaattgact   27780

tctatttgtg ctttttagcc tttctgctat tccttgtttt aattatgctt attatctttt   27840

ggttctcact tgaactgcaa gatcataatg aaacttgtca cgcctaaacg aacatgaaat   27900

ttcttgtttt cttaggaatc atcacaactg tagctgcatt tcaccaagaa tgtagtttac   27960

agtcatgtac tcaacatcaa ccatatgtag ttgatgaccc gtgtcctatt cacttctatt   28020

ctaaatggta tattagagta ggagctagaa aatcagcacc tttaattgaa ttgtgcgtgg   28080

atgaggctgg ttctaaatca cccattcagt acatcgatat cggtaattat acagtttcct   28140

gtttaccttt tacaattaat tgccaggaac ctaaattggg tagtcttgta gtgcgttgtt   28200

cgttctatga agacttttta gagtatcatg acgttcgtgt tgttttagat ttcatctaaa   28260

cgaacaaact aaaatgtctg ataatggacc ccaaaatcag cgaaatgcac cccgcattac   28320

gtttggtgga ccctcagatt caactggcag taaccagaat ggagaacgca gtggggcgcg   28380

atcaaaacaa cgtcggcccc aaggtttacc caataatact gcgtcttggt tcaccgctct   28440

cactcaacat ggcaaggaag accttaaatt ccctcgagga caaggcgttc caattaacac   28500

caatagcagt ccagatgacc aaattggcta ctaccgaaga gctaccagac gaattcgtgg   28560

tggtgacggt aaaatgaaag atctcagtcc aagatggtat ttctactacc taggaactgg   28620

gccagaagct ggacttccct atggtgctaa caaagacggc atcatatggg ttgcaactga   28680

gggagccttg aatacaccaa aagatcacat tggcacccgc aatcctgcta acaatgctgc   28740

aatcgtgcta caacttcctc aaggaacaac attgccaaaa ggcttctacg cagaagggag   28800

cagaggcggc agtcaagcct cttctcgttc ctcatcacgt agtcgcaaca gttcaagaaa   28860

ttcaactcca ggcagcagta ggggaacttc tcctgctaga atggctggca atggcggtga   28920

tgctgctctt gctttgctgc tgcttgacag attgaaccag cttgagagca aaatgtctgg   28980

taaaggccaa caacaacaag gccaaactgt cactaagaaa tctgctgctg aggcttctaa   29040

gaagcctcgg caaaaacgta ctgccactaa agcatacaat gtaacacaag ctttcggcag   29100

acgtggtcca gaacaaaccc aaggaaattt tggggaccag gaactaatca gacaaggaac   29160

tgattacaaa cattggccgc aaattgcaca atttgccccc agcgcttcag cgttcttcgg   29220

aatgtcgcgc attggcatgg aagtcacacc ttcgggaacg tggttgacct acacaggtgc   29280

catcaaattg gatgacaaag atccaaattt caaagatcaa gtcattttgc tgaataagca   29340

tattgacgca tacaaaacat tcccaccaac agagcctaaa aaggacaaaa agaagaaggc   29400

tgatgaaact caagccttac cgcagagaca gaagaaacag caaactgtga ctcttcttcc   29460

tgctgcagat ttggatgatt tctccaaaca attgcaacaa tccatgagca gtgctgactc   29520

aactcaggcc taaactcatg cagaccacac aaggcagatg ggctatataa acgttttcgc   29580

ttttccgttt acgatatata gtctactctt gtgcagaatg aattctcgta actacatagc   29640

acaagtagat gtagttaact ttaatctcac atagcaatct ttaatcagtg tgtaacatta   29700

gggaggactt gaaagagcca ccacattttc accgaggcca cgcggagtac gatcgagtgt   29760

acagtgaaca atgctaggga gagctgccta tatggaagag ccctaatgtg taaaattaat   29820

tttagtagtg ctatccccat gtgattttaa tagcttctta ggagaatgac aaaaaaaaaa   29880

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa                                           29903

<210>  2

<211>  29882

<212>  DNA

<213>  人冠状病毒

<400>  2

attaaaggtt tataccttcc caggtaacaa accaaccaac tttcgatctc ttgtagatct      60

gttctctaaa cgaactttaa aatctgtgtg gctgtcactc ggctgcatgc ttagtgcact     120

cacgcagtat aattaataac taattactgt cgttgacagg acacgagtaa ctcgtctatc     180

ttctgcaggc tgcttacggt ttcgtccgtg ttgcagccga tcatcagcac atctaggttt     240

cgtccgggtg tgaccgaaag gtaagatgga gagccttgtc cctggtttca acgagaaaac     300

acacgtccaa ctcagtttgc ctgttttaca ggttcgcgac gtgctcgtac gtggctttgg     360

agactccgtg gaggaggtct tatcagaggc acgtcaacat cttaaagatg gcacttgtgg     420

cttagtagaa gttgaaaaag gcgttttgcc tcaacttgaa cagccctatg tgttcatcaa     480

acgttcggat gctcgaactg cacctcatgg tcatgttatg gttgagctgg tagcagaact     540

cgaaggcatt cagtacggtc gtagtggtga gacacttggt gtccttgtcc ctcatgtggg     600

cgaaatacca gtggcttacc gcaaggttct tcttcgtaag aacggtaata aaggagctgg     660

tggccatagt tacggcgccg atctaaagtc atttgactta ggcgacgagc ttggcactga     720

tccttatgaa gattttcaag aaaactggaa cactaaacat agcagtggtg ttacccgtga     780

actcatgcgt gagcttaacg gaggggcata cactcgctat gtcgataaca acttctgtgg     840

ccctgatggc taccctcttg agtgcattaa agaccttcta gcacgtgctg gtaaagcttc     900

atgcactttg tccgaacaac tggactttat tgacactaag aggggtgtat actgctgccg     960

tgaacatgag catgaaattg cttggtacac ggaacgttct gaaaagagct atgaattgca    1020

gacacctttt gaaattaaat tggcaaagaa atttgacacc ttcaatgggg aatgtccaaa    1080

ttttgtattt cccttaaatt ccataatcaa gactattcaa ccaagggttg aaaagaaaaa    1140

gcttgatggc tttatgggta gaattcgatc tgtctatcca gttgcgtcac caaatgaatg    1200

caaccaaatg tgcctttcaa ctctcatgaa gtgtgatcat tgtggtgaaa cttcatggca    1260

gacgggcgat tttgttaaag ccacttgcga attttgtggc actgagaatt tgactaaaga    1320

aggtgccact acttgtggtt acttacccca aaatgctgtt gttaaaattt attgtccagc    1380

atgtcacaat tcagaagtag gacctgagca tagtcttgcc gaataccata atgaatctgg    1440

cttgaaaacc attcttcgta agggtggtcg cactattgcc tttggaggct gtgtgttctc    1500

ttatgttggt tgccataaca agtgtgccta ttgggttcca cgtgctagcg ctaacatagg    1560

ttgtaaccat acaggtgttg ttggagaagg ttccgaaggt cttaatgaca accttcttga    1620

aatactccaa aaagagaaag tcaacatcaa tattgttggt gactttaaac ttaatgaaga    1680

gatcgccatt attttggcat ctttttctgc ttccacaagt gcttttgtgg aaactgtgaa    1740

aggtttggat tataaagcat tcaaacaaat tgttgaatcc tgtggtaatt ttaaagttac    1800

aaaaggaaaa gctaaaaaag gtgcctggaa tattggtgaa cagaaatcaa tactgagtcc    1860

tctttatgca tttgcatcag aggctgctcg tgttgtacga tcaattttct cccgcactct    1920

tgaaactgct caaaattctg tgcgtgtttt acagaaggcc gctataacaa tactagatgg    1980

aatttcacag tattcactga gactcattga tgctatgatg ttcacatctg atttggctac    2040

taacaatcta gttgtaatgg cctacattac aggtggtgtt gttcagttga cttcgcagtg    2100

gctaactaac atctttggca ctgtttatga aaaactcaaa cccgtccttg attggcttga    2160

agagaagttt aaggaaggtg tagagtttct tagagacggt tgggaaattg ttaaatttat    2220

ctcaacctgt gcttgtgaaa ttgtcggtgg acaaattgtc acctgtgcaa aggaaattaa    2280

ggagagtgtt cagacattct ttaagcttgt aaataaattt ttggctttgt gtgctgactc    2340

tatcattatt ggtggagcta aacttaaagc cttgaattta ggtgaaacat ttgtcacgca    2400

ctcaaaggga ttgtacagaa agtgtgttaa atccagagaa gaaactggcc tactcatgcc    2460

tctaaaagcc ccaaaagaaa ttatcttctt agagggagaa acacttccca cagaagtgtt    2520

aacagaggaa gttgtcttga aaactggtga tttacaacca ttagaacaac ctactagtga    2580

agctgttgaa gctccattgg ttggtacacc agtttgtatt aacgggctta tgttgctcga    2640

aatcaaagac acagaaaagt actgtgccct tgcacctaat atgatggtaa caaacaatac    2700

cttcacactc aaaggcggtg caccaacaaa ggttactttt ggtgatgaca ctgtgataga    2760

agtgcaaggt tacaagagtg tgaatatcac ttttgaactt gatgaaagga ttgataaagt    2820

acttaatgag aagtgctctg cctatacagt tgaactcggt acagaagtaa atgagttcgc    2880

ctgtgttgtg gcagatgctg tcataaaaac tttgcaacca gtatctgaat tacttacacc    2940

actgggcatt gatttagatg agtggagtat ggctacatac tacttatttg atgagtctgg    3000

tgagtttaaa ttggcttcac atatgtattg ttctttctac cctccagatg aggatgaaga    3060

agaaggtgat tgtgaagaag aagagtttga gccatcaact caatatgagt atggtactga    3120

agatgattac caaggtaaac ctttggaatt tggtgccact tctgctgctc ttcaacctga    3180

agaagagcaa gaagaagatt ggttagatga tgatagtcaa caaactgttg gtcaacaaga    3240

cggcagtgag gacaatcaga caactactat tcaaacaatt gttgaggttc aacctcaatt    3300

agagatggaa cttacaccag ttgttcagac tattgaagtg aatagtttta gtggttattt    3360

aaaacttact gacaatgtat acattaaaaa tgcagacatt gtggaagaag ctaaaaaggt    3420

aaaaccaaca gtggttgtta atgcagccaa tgtttacctt aaacatggag gaggtgttgc    3480

aggagcctta aataaggcta ctaacaatgc catgcaagtt gaatctgatg attacatagc    3540

tactaatgga ccacttaaag tgggtggtag ttgtgtttta agcggacaca atcttgctaa    3600

acactgtctt catgttgtcg gcccaaatgt taacaaaggt gaagacattc aacttcttaa    3660

gagtgcttat gaaaatttta atcagcacga agttctactt gcaccattat tatcagctgg    3720

tatttttggt gctgacccta tacattcttt aagagtttgt gtagatactg ttcgcacaaa    3780

tgtctactta gctgtctttg ataaaaatct ctatgacaaa cttgtttcaa gctttttgga    3840

aatgaagagt gaaaagcaag ttgaacaaaa gatcgctgag attcctaaag aggaagttaa    3900

gccatttata actgaaagta aaccttcagt tgaacagaga aaacaagatg ataagaaaat    3960

caaagcttgt gttgaagaag ttacaacaac tctggaagaa actaagttcc tcacagaaaa    4020

cttgttactt tatattgaca ttaatggcaa tcttcatcca gattctgcca ctcttgttag    4080

tgacattgac atcactttct taaagaaaga tgctccatat atagtgggtg atgttgttca    4140

agagggtgtt ttaactgctg tggttatacc tactaaaaag gctggtggca ctactgaaat    4200

gctagcgaaa gctttgagaa aagtgccaac agacaattat ataaccactt acccgggtca    4260

gggtttaaat ggttacactg tagaggaggc aaagacagtg cttaaaaagt gtaaaagtgc    4320

cttttacatt ctaccatcta ttatctctaa tgagaagcaa gaaattcttg gaactgtttc    4380

ttggaatttg cgagaaatgc ttgcacatgc agaagaaaca cgcaaattaa tgcctgtctg    4440

tgtggaaact aaagccatag tttcaactat acagcgtaaa tataagggta ttaaaataca    4500

agagggtgtg gttgattatg gtgctagatt ttacttttac accagtaaaa caactgtagc    4560

gtcacttatc aacacactta acgatctaaa tgaaactctt gttacaatgc cacttggcta    4620

tgtaacacat ggcttaaatt tggaagaagc tgctcggtat atgagatctc tcaaagtgcc    4680

agctacagtt tctgtttctt cacctgatgc tgttacagcg tataatggtt atcttacttc    4740

ttcttctaaa acacctgaag aacattttat tgaaaccatc tcacttgctg gttcctataa    4800

agattggtcc tattctggac aatctacaca actaggtata gaatttctta agagaggtga    4860

taaaagtgta tattacacta gtaatcctac cacattccac ctagatggtg aagttatcac    4920

ctttgacaat cttaagacac ttctttcttt gagagaagtg aggactatta aggtgtttac    4980

aacagtagac aacattaacc tccacacgca agttgtggac atgtcaatga catatggaca    5040

acagtttggt ccaacttatt tggatggagc tgatgttact aaaataaaac ctcataattc    5100

acatgaaggt aaaacatttt atgttttacc taatgatgac actctacgtg ttgaggcttt    5160

tgagtactac cacacaactg atcctagttt tctgggtagg tacatgtcag cattaaatca    5220

cactaaaaag tggaaatacc cacaagttaa tggtttaact tctattaaat gggcagataa    5280

caactgttat cttgccactg cattgttaac actccaacaa atagagttga agtttaatcc    5340

acctgctcta caagatgctt attacagagc aagggctggt gaagctgcta acttttgtgc    5400

acttatctta gcctactgta ataagacagt aggtgagtta ggtgatgtta gagaaacaat    5460

gagttacttg tttcaacatg ccaatttaga ttcttgcaaa agagtcttga acgtggtgtg    5520

taaaacttgt ggacaacagc agacaaccct taagggtgta gaagctgtta tgtacatggg    5580

cacactttct tatgaacaat ttaagaaagg tgttcagata ccttgtacgt gtggtaaaca    5640

agctacaaaa tatctagtac aacaggagtc accttttgtt atgatgtcag caccacctgc    5700

tcagtatgaa cttaagcatg gtacatttac ttgtgctagt gagtacactg gtaattacca    5760

gtgtggtcac tataaacata taacttctaa agaaactttg tattgcatag acggtgcttt    5820

acttacaaag tcctcagaat acaaaggtcc tattacggat gttttctaca aagaaaacag    5880

ttacacaaca accataaaac cagttactta taaattggat ggtgttgttt gtacagaaat    5940

tgaccctaag ttggacaatt attataagaa agacaattct tatttcacag agcaaccaat    6000

tgatcttgta ccaaaccaac catatccaaa cgcaagcttc gataatttta agtttgtatg    6060

tgataatatc aaatttgctg atgatttaaa ccagttaact ggttataaga aacctgcttc    6120

aagagagctt aaagttacat ttttccctga cttaaatggt gatgtggtgg ctattgatta    6180

taaacactac acaccctctt ttaagaaagg agctaaattg ttacataaac ctattgtttg    6240

gcatgttaac aatgcaacta ataaagccac gtataaacca aatacctggt gtatacgttg    6300

tctttggagc acaaaaccag ttgaaacatc aaattcgttt gatgtactga agtcagagga    6360

cgcgcaggga atggataatc ttgcctgcga agatctaaaa ccagtctctg aagaagtagt    6420

ggaaaatcct accatacaga aagacgttct tgagtgtaat gtgaaaacta ccgaagttgt    6480

aggagacatt atacttaaac cagcaaataa tagtttaaaa attacagaag aggttggcca    6540

cacagatcta atggctgctt atgtagacaa ttctagtctt actattaaga aacctaatga    6600

attatctaga gtattaggtt tgaaaaccct tgctactcat ggtttagctg ctgttaatag    6660

tgtcccttgg gatactatag ctaattatgc taagcctttt cttaacaaag ttgttagtac    6720

aactactaac atagttacac ggtgtttaaa ccgtgtttgt actaattata tgccttattt    6780

ctttacttta ttgctacaat tgtgtacttt tactagaagt acaaattcta gaattaaagc    6840

atctatgccg actactatag caaagaatac tgttaagagt gtcggtaaat tttgtctaga    6900

ggcttcattt aattatttga agtcacctaa tttttctaaa ctgataaata ttataatttg    6960

gtttttacta ttaagtgttt gcctaggttc tttaatctac tcaaccgctg ctttaggtgt    7020

tttaatgtct aatttaggca tgccttctta ctgtactggt tacagagaag gctatttgaa    7080

ctctactaat gtcactattg caacctactg tactggttct ataccttgta gtgtttgtct    7140

tagtggttta gattctttag acacctatcc ttctttagaa actatacaaa ttaccatttc    7200

atcttttaaa tgggatttaa ctgcttttgg cttagttgca gagtggtttt tggcatatat    7260

tcttttcact aggtttttct atgtacttgg attggctgca atcatgcaat tgtttttcag    7320

ctattttgca gtacatttta ttagtaattc ttggcttatg tggttaataa ttaatcttgt    7380

acaaatggcc ccgatttcag ctatggttag aatgtacatc ttctttgcat cattttatta    7440

tgtatggaaa agttatgtgc atgttgtaga cggttgtaat tcatcaactt gtatgatgtg    7500

ttacaaacgt aatagagcaa caagagtcga atgtacaact attgttaatg gtgttagaag    7560

gtccttttat gtctatgcta atggaggtaa aggcttttgc aaactacaca attggaattg    7620

tgttaattgt gatacattct gtgctggtag tacatttatt agtgatgaag ttgcgagaga    7680

cttgtcacta cagtttaaaa gaccaataaa tcctactgac cagtcttctt acatcgttga    7740

tagtgttaca gtgaagaatg gttccatcca tctttacttt gataaagctg gtcaaaagac    7800

ttatgaaaga cattctctct ctcattttgt taacttagac aacctgagag ctaataacac    7860

taaaggttca ttgcctatta atgttatagt ttttgatggt aaatcaaaat gtgaagaatc    7920

atctgcaaaa tcagcgtctg tttactacag tcagcttatg tgtcaaccta tactgttact    7980

agatcaggca ttagtgtctg atgttggtga tagtgcggaa gttgcagtta aaatgtttga    8040

tgcttacgtt aatacgtttt catcaacttt taacgtacca atggaaaaac tcaaaacact    8100

agttgcaact gcagaagctg aacttgcaaa gaatgtgtcc ttagacaatg tcttatctac    8160

ttttatttca gcagctcggc aagggtttgt tgattcagat gtagaaacta aagatgttgt    8220

tgaatgtctt aaattgtcac atcaatctga catagaagtt actggcgata gttgtaataa    8280

ctatatgctc acctataaca aagttgaaaa catgacaccc cgtgaccttg gtgcttgtat    8340

tgactgtagt gcgcgtcata ttaatgcgca ggtagcaaaa agtcacaaca ttgctttgat    8400

atggaacgtt aaagatttca tgtcattgtc tgaacaacta cgaaaacaaa tacgtagtgc    8460

tgctaaaaag aataacttac cttttaagtt gacatgtgca actactagac aagttgttaa    8520

tgttgtaaca acaaagatag cacttaaggg tggtaaaatt gttaataatt ggttgaagca    8580

gttaattaaa gttacacttg tgttcctttt tgttgctgct attttctatt taataacacc    8640

tgttcatgtc atgtctaaac atactgactt ttcaagtgaa atcataggat acaaggctat    8700

tgatggtggt gtcactcgtg acatagcatc tacagatact tgttttgcta acaaacatgc    8760

tgattttgac acatggttta gtcagcgtgg tggtagttat actaatgaca aagcttgccc    8820

attgattgct gcagtcataa caagagaagt gggttttgtc gtgcctggtt tgcctggcac    8880

gatattacgc acaactaatg gtgacttttt gcatttctta cctagagttt ttagtgcagt    8940

tggtaacatc tgttacacac catcaaaact tatagagtac actgactttg caacatcagc    9000

ttgtgttttg gctgctgaat gtacaatttt taaagatgct tctggtaagc cagtaccata    9060

ttgttatgat accaatgtac tagaaggttc tgttgcttat gaaagtttac gccctgacac    9120

acgttatgtg ctcatggatg gctctattat tcaatttcct aacacctacc ttgaaggttc    9180

tgttagagtg gtaacaactt ttgattctga gtactgtagg cacggcactt gtgaaagatc    9240

agaagctggt gtttgtgtat ctactagtgg tagatgggta cttaacaatg attattacag    9300

atctttacca ggagttttct gtggtgtaga tgctgtaaat ttacttacta atatgtttac    9360

accactaatt caacctattg gtgctttgga catatcagca tctatagtag ctggtggtat    9420

tgtagctatc gtagtaacat gccttgccta ctattttatg aggtttagaa gagcttttgg    9480

tgaatacagt catgtagttg cctttaatac tttactattc cttatgtcat tcactgtact    9540

ctgtttaaca ccagtttact cattcttacc tggtgtttat tctgttattt acttgtactt    9600

gacattttat cttactaatg atgtttcttt tttagcacat attcagtgga tggttatgtt    9660

cacaccttta gtacctttct ggataacaat tgcttatatc atttgtattt ccacaaagca    9720

tttctattgg ttctttagta attacctaaa gagacgtgta gtctttaatg gtgtttcctt    9780

tagtactttt gaagaagctg cgctgtgcac ctttttgtta aataaagaaa tgtatctaaa    9840

gttgcgtagt gatgtgctat tacctcttac gcaatataat agatacttag ctctttataa    9900

taagtacaag tattttagtg gagcaatgga tacaactagc tacagagaag ctgcttgttg    9960

tcatctcgca aaggctctca atgacttcag taactcaggt tctgatgttc tttaccaacc   10020

accacaaacc tctatcacct cagctgtttt gcagagtggt tttagaaaaa tggcattccc   10080

atctggtaaa gttgagggtt gtatggtaca agtaacttgt ggtacaacta cacttaacgg   10140

tctttggctt gatgacgtag tttactgtcc aagacatgtg atctgcacct ctgaagacat   10200

gcttaaccct aattatgaag atttactcat tcgtaagtct aatcataatt tcttggtaca   10260

ggctggtaat gttcaactca gggttattgg acattctatg caaaattgtg tacttaagct   10320

taaggttgat acagccaatc ctaagacacc taagtataag tttgttcgca ttcaaccagg   10380

acagactttt tcagtgttag cttgttacaa tggttcacca tctggtgttt accaatgtgc   10440

tatgaggccc aatttcacta ttaagggttc attccttaat ggttcatgtg gtagtgttgg   10500

ttttaacata gattatgact gtgtctcttt ttgttacatg caccatatgg aattaccaac   10560

tggagttcat gctggcacag acttagaagg taacttttat ggaccttttg ttgacaggca   10620

aacagcacaa gcagctggta cggacacaac tattacagtt aatgttttag cttggttgta   10680

cgctgctgtt ataaatggag acaggtggtt tctcaatcga tttaccacaa ctcttaatga   10740

ctttaacctt gtggctatga agtacaatta tgaacctcta acacaagacc atgttgacat   10800

actaggacct ctttctgctc aaactggaat tgccgtttta gatatgtgtg cttcattaaa   10860

agaattactg caaaatggta tgaatggacg taccatattg ggtagtgctt tattagaaga   10920

tgaatttaca ccttttgatg ttgttagaca atgctcaggt gttactttcc aaagtgcagt   10980

gaaaagaaca atcaagggta cacaccactg gttgttactc acaattttga cttcactttt   11040

agttttagtc cagagtactc aatggtcttt gttctttttt ttgtatgaaa atgccttttt   11100

accttttgct atgggtatta ttgctatgtc tgcttttgca atgatgtttg tcaaacataa   11160

gcatgcattt ctctgtttgt ttttgttacc ttctcttgcc actgtagctt attttaatat   11220

ggtctatatg cctgctagtt gggtgatgcg tattatgaca tggttggata tggttgatac   11280

tagtttgtct ggttttaagc taaaagactg tgttatgtat gcatcagctg tagtgttact   11340

aatccttatg acagcaagaa ctgtgtatga tgatggtgct aggagagtgt ggacacttat   11400

gaatgtcttg acactcgttt ataaagttta ttatggtaat gctttagatc aagccatttc   11460

catgtgggct cttataatct ctgttacttc taactactca ggtgtagtta caactgtcat   11520

gtttttggcc agaggtattg tttttatgtg tgttgagtat tgccctattt tcttcataac   11580

tggtaataca cttcagtgta taatgctagt ttattgtttc ttaggctatt tttgtacttg   11640

ttactttggc ctcttttgtt tactcaaccg ctactttaga ctgactcttg gtgtttatga   11700

ttacttagtt tctacacagg agtttagata tatgaattca cagggactac tcccacccaa   11760

gaatagcata gatgccttca aactcaacat taaattgttg ggtgttggtg gcaaaccttg   11820

tatcaaagta gccactgtac agtctaaaat gtcagatgta aagtgcacat cagtagtctt   11880

actctcagtt ttgcaacaac tcagagtaga atcatcatct aaattgtggg ctcaatgtgt   11940

ccagttacac aatgacattc tcttagctaa agatactact gaagcctttg aaaaaatggt   12000

ttcactactt tctgttttgc tttccatgca gggtgctgta gacataaaca agctttgtga   12060

agaaatgctg gacaacaggg caaccttaca agctatagcc tcagagttta gttcccttcc   12120

atcatatgca gcttttgcta ctgctcaaga agcttatgag caggctgttg ctaatggtga   12180

ttctgaagtt gttcttaaaa agttgaagaa gtctttgaat gtggctaaat ctgaatttga   12240

ccgtgatgca gccatgcaac gtaagttgga aaagatggct gatcaagcta tgacccaaat   12300

gtataaacag gctagatctg aggacaagag ggcaaaagtt actagtgcta tgcagacaat   12360

gcttttcact atgcttagaa agttggataa tgatgcactc aacaacatta tcaacaatgc   12420

aagagatggt tgtgttccct tgaacataat acctcttaca acagcagcca aactaatggt   12480

tgtcatacca gactataaca catataaaaa tacgtgtgat ggtacaacat ttacttatgc   12540

atcagcattg tgggaaatcc aacaggttgt agatgcagat agtaaaattg ttcaacttag   12600

tgaaattagt atggacaatt cacctaattt agcatggcct cttattgtaa cagctttaag   12660

ggccaattct gctgtcaaat tacagaataa tgagcttagt cctgttgcac tacgacagat   12720

gtcttgtgct gccggtacta cacaaactgc ttgcactgat gacaatgcgt tagcttacta   12780

caacacaaca aagggaggta ggtttgtact tgcactgtta tccgatttac aggatttgaa   12840

atgggctaga ttccctaaga gtgatggaac tggtactatc tatacagaac tggaaccacc   12900

ttgtaggttt gttacagaca cacctaaagg tcctaaagtg aagtatttat actttattaa   12960

aggattaaac aacctaaata gaggtatggt acttggtagt ttagctgcca cagtacgtct   13020

acaagctggt aatgcaacag aagtgcctgc caattcaact gtattatctt tctgtgcttt   13080

tgctgtagat gctgctaaag cttacaaaga ttatctagct agtgggggac aaccaatcac   13140

taattgtgtt aagatgttgt gtacacacac tggtactggt caggcaataa cagttacacc   13200

ggaagccaat atggatcaag aatcctttgg tggtgcatcg tgttgtctgt actgccgttg   13260

ccacatagat catccaaatc ctaaaggatt ttgtgactta aaaggtaagt atgtacaaat   13320

acctacaact tgtgctaatg accctgtggg ttttacactt aaaaacacag tctgtaccgt   13380

ctgcggtatg tggaaaggtt atggctgtag ttgtgatcaa ctccgcgaac ccatgcttca   13440

gtcagctgat gcacaatcgt ttttaaacgg gtttgcggtg taagtgcagc ccgtcttaca   13500

ccgtgcggca caggcactag tactgatgtc gtatacaggg cttttgacat ctacaatgat   13560

aaagtagctg gttttgctaa attcctaaaa actaattgtt gtcgcttcca agaaaaggac   13620

gaagatgaca atttaattga ttcttacttt gtagttaaga gacacacttt ctctaactac   13680

caacatgaag aaacaattta taatttactt aaggattgtc cagctgttgc taaacatgac   13740

ttctttaagt ttagaataga cggtgacatg gtaccacata tatcacgtca acgtcttact   13800

aaatacacaa tggcagacct cgtctatgct ttaaggcatt ttgatgaagg taattgtgac   13860

acattaaaag aaatacttgt cacatacaat tgttgtgatg atgattattt caataaaaag   13920

gactggtatg attttgtaga aaacccagat atattacgcg tatacgccaa cttaggtgaa   13980

cgtgtacgcc aagctttgtt aaaaacagta caattctgtg atgccatgcg aaatgctggt   14040

attgttggtg tactgacatt agataatcaa gatctcaatg gtaactggta tgatttcggt   14100

gatttcatac aaaccacgcc aggtagtgga gttcctgttg tagattctta ttattcattg   14160

ttaatgccta tattaacctt gaccagggct ttaactgcag agtcacatgt tgacactgac   14220

ttaacaaagc cttacattaa gtgggatttg ttaaaatatg acttcacgga agagaggtta   14280

aaactctttg accgttattt taaatattgg gatcagacat accacccaaa ttgtgttaac   14340

tgtttggatg acagatgcat tctgcattgt gcaaacttta atgttttatt ctctacagtg   14400

ttcccaccta caagttttgg accactagtg agaaaaatat ttgttgatgg tgttccattt   14460

gtagtttcaa ctggatacca cttcagagag ctaggtgttg tacataatca ggatgtaaac   14520

ttacatagct ctagacttag ttttaaggaa ttacttgtgt atgctgctga ccctgctatg   14580

cacgctgctt ctggtaatct attactagat aaacgcacta cgtgcttttc agtagctgca   14640

cttactaaca atgttgcttt tcaaactgtc aaacccggta attttaacaa agacttctat   14700

gactttgctg tgtctaaggg tttctttaag gaaggaagtt ctgttgaatt aaaacacttc   14760

ttctttgctc aggatggtaa tgctgctatc agcgattatg actactatcg ttataatcta   14820

ccaacaatgt gtgatatcag acaactacta tttgtagttg aagttgttga taagtacttt   14880

gattgttacg atggtggctg tattaatgct aaccaagtca tcgtcaacaa cctagacaaa   14940

tcagctggtt ttccatttaa taaatggggt aaggctagac tttattatga ttcaatgagt   15000

tatgaggatc aagatgcact tttcgcatat acaaaacgta atgtcatccc tactataact   15060

caaatgaatc ttaagtatgc cattagtgca aagaatagag ctcgcaccgt agctggtgtc   15120

tctatctgta gtactatgac caatagacag tttcatcaaa aattattgaa atcaatagcc   15180

gccactagag gagctactgt agtaattgga acaagcaaat tctatggtgg ttggcacaac   15240

atgttaaaaa ctgtttatag tgatgtagaa aaccctcacc ttatgggttg ggattatcct   15300

aaatgtgata gagccatgcc taacatgctt agaattatgg cctcacttgt tcttgctcgc   15360

aaacatacaa cgtgttgtag cttgtcacac cgtttctata gattagctaa tgagtgtgct   15420

caagtattga gtgaaatggt catgtgtggc ggttcactat atgttaaacc aggtggaacc   15480

tcatcaggag atgccacaac tgcttatgct aatagtgttt ttaacatttg tcaagctgtc   15540

acggccaatg ttaatgcact tttatctact gatggtaaca aaattgccga taagtatgtc   15600

cgcaatttac aacacagact ttatgagtgt ctctatagaa atagagatgt tgacacagac   15660

tttgtgaatg agttttacgc atatttgcgt aaacatttct caatgatgat actctctgac   15720

gatgctgttg tgtgtttcaa tagcacttat gcatctcaag gtctagtggc tagcataaag   15780

aactttaagt cagttcttta ttatcaaaac aatgttttta tgtctgaagc aaaatgttgg   15840

actgagactg accttactaa aggacctcat gaattttgct ctcaacatac aatgctagtt   15900

aaacagggtg atgattatgt gtaccttcct tacccagatc catcaagaat cctaggggcc   15960

ggctgttttg tagatgatat cgtaaaaaca gatggtacac ttatgattga acggttcgtg   16020

tctttagcta tagatgctta cccacttact aaacatccta atcaggagta tgctgatgtc   16080

tttcatttgt acttacaata cataagaaag ctacatgatg agttaacagg acacatgtta   16140

gacatgtatt ctgttatgct tactaatgat aacacttcaa ggtattggga acctgagttt   16200

tatgaggcta tgtacacacc gcatacagtc ttacaggctg ttggggcttg tgttctttgc   16260

aattcacaga cttcattaag atgtggtgct tgcatacgta gaccattctt atgttgtaaa   16320

tgctgttacg accatgtcat atcaacatca cataaattag tcttgtctgt taatccgtat   16380

gtttgcaatg ctccaggttg tgatgtcaca gatgtgactc aactttactt aggaggtatg   16440

agctattatt gtaaatcaca taaaccaccc attagttttc cattgtgtgc taatggacaa   16500

gtttttggtt tatataaaaa tacatgtgtt ggtagcgata atgttactga ctttaatgca   16560

attgcaacat gtgactggac aaatgctggt gattacattt tagctaacac ctgtactgaa   16620

agactcaagc tttttgcagc agaaacgctc aaagctactg aggagacatt taaactgtct   16680

tatggtattg ctactgtacg tgaagtgctg tctgacagag aattacatct ttcatgggaa   16740

gttggtaaac ctagaccacc acttaaccga aattatgtct ttactggtta tcgtgtaact   16800

aaaaacagta aagtacaaat aggagagtac acctttgaaa aaggtgacta tggtgatgct   16860

gttgtttacc gaggtacaac aacttacaaa ttaaatgttg gtgattattt tgtgctgaca   16920

tcacatacag taatgccatt aagtgcacct acactagtgc cacaagagca ctatgttaga   16980

attactggct tatacccaac actcaatatc tcagatgagt tttctagcaa tgttgcaaat   17040

tatcaaaagg ttggtatgca aaagtattct acactccagg gaccacctgg tactggtaag   17100

agtcattttg ctattggcct agctctctac tacccttctg ctcgcatagt gtatacagct   17160

tgctctcatg ccgctgttga tgcactatgt gagaaggcat taaaatattt gcctatagat   17220

aaatgtagta gaattatacc tgcacgtgct cgtgtagagt gttttgataa attcaaagtg   17280

aattcaacat tagaacagta tgtcttttgt actgtaaatg cattgcctga gacgacagca   17340

gatatagttg tctttgatga aatttcaatg gccacaaatt atgatttgag tgttgtcaat   17400

gccagattac gtgctaagca ctatgtgtac attggcgacc ctgctcaatt acctgcacca   17460

cgcacattgc taactaaggg cacactagaa ccagaatatt tcaattcagt gtgtagactt   17520

atgaaaacta taggtccaga catgttcctc ggaacttgtc ggcgttgtcc tgctgaaatt   17580

gttgacactg tgagtgcttt ggtttatgat aataagctta aagcacataa agacaaatca   17640

gctcaatgct ttaaaatgtt ttataagggt gttatcacgc atgatgtttc atctgcaatt   17700

aacaggccac aaataggcgt ggtaagagaa ttccttacac gtaaccctgc ttggagaaaa   17760

gctgtcttta tttcacctta taattcacag aatgctgtag cctcaaagat tttgggacta   17820

ccaactcaaa ctgttgattc atcacagggc tcagaatatg actatgtcat attcactcaa   17880

accactgaaa cagctcactc ttgtaatgta aacagattta atgttgctat taccagagca   17940

aaagtaggca tactttgcat aatgtctgat agagaccttt atgacaagtt gcaatttaca   18000

agtcttgaaa ttccacgtag gaatgtggca actttacaag ctgaaaatgt aacaggactt   18060

tttaaagatt gtagtaaggt aatcactggg ttacatccta cacaggcacc tacacacctc   18120

agtgttgaca ctaaattcaa aactgaaggt ttatgtgttg acatacctgg catacctaag   18180

gacatgacct atagaagact catctctatg atgggtttta aaatgaatta tcaagttaat   18240

ggttacccta acatgtttat cacccgcgaa gaagctataa gacatgtacg tgcatggatt   18300

ggcttcgatg tcgaggggtg tcatgctact agagaagctg ttggtaccaa tttaccttta   18360

cagctaggtt tttctacagg tgttaaccta gttgctgtac ctacaggtta tgttgataca   18420

cctaataata cagatttttc cagagttagt gctaaaccac cgcctggaga tcaatttaaa   18480

cacctcatac cacttatgta caaaggactt ccttggaatg tagtgcgtat aaagattgta   18540

caaatgttaa gtgacacact taaaaatctc tctgacagag tcgtatttgt cttatgggca   18600

catggctttg agttgacatc tatgaagtat tttgtgaaaa taggacctga gcgcacctgt   18660

tgtctatgtg atagacgtgc cacatgcttt tccactgctt cagacactta tgcctgttgg   18720

catcattcta ttggatttga ttacgtctat aatccgttta tgattgatgt tcaacaatgg   18780

ggttttacag gtaacctaca aagcaaccat gatctgtatt gtcaagtcca tggtaatgca   18840

catgtagcta gttgtgatgc aatcatgact aggtgtctag ctgtccacga gtgctttgtt   18900

aagcgtgttg actggactat tgaatatcct ataattggtg atgaactgaa gattaatgcg   18960

gcttgtagaa aggttcaaca catggttgtt aaagctgcat tattagcaga caaattccca   19020

gttcttcacg acattggtaa ccctaaagct attaagtgtg tacctcaagc tgatgtagaa   19080

tggaagttct atgatgcaca gccttgtagt gacaaagctt ataaaataga agaattattc   19140

tattcttatg ccacacattc tgacaaattc acagatggtg tatgcctatt ttggaattgc   19200

aatgtcgata gatatcctgc taattccatt gtttgtagat ttgacactag agtgctatct   19260

aaccttaact tgcctggttg tgatggtggc agtttgtatg taaataaaca tgcattccac   19320

acaccagctt ttgataaaag tgcttttgtt aatttaaaac aattaccatt tttctattac   19380

tctgacagtc catgtgagtc tcatggaaaa caagtagtgt cagatataga ttatgtacca   19440

ctaaagtctg ctacgtgtat aacacgttgc aatttaggtg gtgctgtctg tagacatcat   19500

gctaatgagt acagattgta tctcgatgct tataacatga tgatctcagc tggctttagc   19560

ttgtgggttt acaaacaatt tgatacttat aacctctgga acacttttac aagacttcag   19620

agtttagaaa atgtggcttt taatgttgta aataagggac actttgatgg acaacagggt   19680

gaagtaccag tttctatcat taataacact gtttacacaa aagttgatgg tgttgatgta   19740

gaattgtttg aaaataaaac aacattacct gttaatgtag catttgagct ttgggctaag   19800

cgcaacatta aaccagtacc agaggtgaaa atactcaata atttgggtgt ggacattgct   19860

gctaatactg tgatctggga ctacaaaaga gatgctccag cacatatatc tactattggt   19920

gtttgttcta tgactgacat agccaagaaa ccaactgaaa cgatttgtgc accactcact   19980

gtcttttttg atggtagagt tgatggtcaa gtagacttat ttagaaatgc ccgtaatggt   20040

gttcttatta cagaaggtag tgttaaaggt ttacaaccat ctgtaggtcc caaacaagct   20100

agtcttaatg gagtcacatt aattggagaa gccgtaaaaa cacagttcaa ttattataag   20160

aaagttgatg gtgttgtcca acaattacct gaaacttact ttactcagag tagaaattta   20220

caagaattta aacccaggag tcaaatggaa attgatttct tagaattagc tatggatgaa   20280

ttcattgaac ggtataaatt agaaggctat gccttcgaac atatcgttta tggagatttt   20340

agtcatagtc agttaggtgg tttacatcta ctgattggac tagctaaacg ttttaaggaa   20400

tcaccttttg aattagaaga ttttattcct atggacagta cagttaaaaa ctatttcata   20460

acagatgcgc aaacaggttc atctaagtgt gtgtgttctg ttattgattt attacttgat   20520

gattttgttg aaataataaa atcccaagat ttatctgtag tttctaaggt tgtcaaagtg   20580

actattgact atacagaaat ttcatttatg ctttggtgta aagatggcca tgtagaaaca   20640

ttttacccaa aattacaatc tagtcaagcg tggcaaccgg gtgttgctat gcctaatctt   20700

tacaaaatgc aaagaatgct attagaaaag tgtgaccttc aaaattatgg tgatagtgca   20760

acattaccta aaggcataat gatgaatgtc gcaaaatata ctcaactgtg tcaatattta   20820

aacacattaa cattagctgt accctataat atgagagtta tacattttgg tgctggttct   20880

gataaaggag ttgcaccagg tacagctgtt ttaagacagt ggttgcctac gggtacgctg   20940

cttgtcgatt cagatcttaa tgactttgtc tctgatgcag attcaacttt gattggtgat   21000

tgtgcaactg tacatacagc taataaatgg gatctcatta ttagtgatat gtacgaccct   21060

aagactaaaa atgttacaaa agaaaatgac tctaaagagg gttttttcac ttacatttgt   21120

gggtttatac aacaaaagct agctcttgga ggttccgtgg ctataaagat aacagaacat   21180

tcttggaatg ctgatcttta taagctcatg ggacacttcg catggtggac agcctttgtt   21240

actaatgtga atgcgtcatc atctgaagca tttttaattg gatgtaatta tcttggcaaa   21300

ccacgcgaac aaatagatgg ttatgtcatg catgcaaatt acatattttg gaggaataca   21360

aatccaattc agttgtcttc ctattcttta tttgacatga gtaaatttcc ccttaaatta   21420

aggggtactg ctgttatgtc tttaaaagaa ggtcaaatca atgatatgat tttatctctt   21480

cttagtaaag gtagacttat aattagagaa aacaacagag ttgttatttc tagtgatgtt   21540

cttgttaaca actaaacgaa caatgtttgt ttttcttgtt ttattgccac tagtctctag   21600

tcagtgtgtt aatcttacaa ccagaactca attaccccct gcatacacta attctttcac   21660

acgtggtgtt tattaccctg acaaagtttt cagatcctca gttttacatt caactcagga   21720

cttgttctta cctttctttt ccaatgttac ttggttccat gctatacatg tctctgggac   21780

caatggtact aagaggtttg ataaccctgt cctaccattt aatgatggtg tttattttgc   21840

ttccactgag aagtctaaca taataagagg ctggattttt ggtactactt tagattcgaa   21900

gacccagtcc ctacttattg ttaataacgc tactaatgtt gttattaaag tctgtgaatt   21960

tcaattttgt aatgatccat ttttgggtgt ttattaccac aaaaacaaca aaagttggat   22020

ggaaagtgag ttcagagttt attctagtgc gaataattgc acttttgaat atgtctctca   22080

gccttttctt atggaccttg aaggaaaaca gggtaatttc aaaaatctta gggaatttgt   22140

gtttaagaat attgatggtt attttaaaat atattctaag cacacgccta ttaatttagt   22200

gcgtgatctc cctcagggtt tttcggcttt agaaccattg gtagatttgc caataggtat   22260

taacatcact aggtttcaaa ctttacttgc tttacataga agttatttga ctcctggtga   22320

ttcttcttca ggttggacag ctggtgctgc agcttattat gtgggttatc ttcaacctag   22380

gacttttcta ttaaaatata atgaaaatgg aaccattaca gatgctgtag actgtgcact   22440

tgaccctctc tcagaaacaa agtgtacgtt gaaatccttc actgtagaaa aaggaatcta   22500

tcaaacttct aactttagag tccaaccaac agaatctatt gttagatttc ctaatattac   22560

aaacttgtgc ccttttggtg aagtttttaa cgccaccaga tttgcatctg tttatgcttg   22620

gaacaggaag agaatcagca actgtgttgc tgattattct gtcctatata attccgcatc   22680

attttccact tttaagtgtt atggagtgtc tcctactaaa ttaaatgatc tctgctttac   22740

taatgtctat gcagattcat ttgtaattag aggtgatgaa gtcagacaaa tcgctccagg   22800

gcaaactgga aagattgctg attataatta taaattacca gatgatttta caggctgcgt   22860

tatagcttgg aattctaaca atcttgattc taaggttggt ggtaattata attacctgta   22920

tagattgttt aggaagtcta atctcaaacc ttttgagaga gatatttcaa ctgaaatcta   22980

tcaggccggt agcacacctt gtaatggtgt tgaaggtttt aattgttact ttcctttaca   23040

atcatatggt ttccaaccca ctaatggtgt tggttaccaa ccatacagag tagtagtact   23100

ttcttttgaa cttctacatg caccagcaac tgtttgtgga cctaaaaagt ctactaattt   23160

ggttaaaaac aaatgtgtca atttcaactt caatggttta acaggcacag gtgttcttac   23220

tgagtctaac aaaaagtttc tgcctttcca acaatttggc agagacattg ctgacactac   23280

tgatgctgtc cgtgatccac agacacttga gattcttgac attacaccat gttcttttgg   23340

tggtgtcagt gttataacac caggaacaaa tacttctaac caggttgctg ttctttatca   23400

ggatgttaac tgcacagaag tccctgttgc tattcatgca gatcaactta ctcctacttg   23460

gcgtgtttat tctacaggtt ctaatgtttt tcaaacacgt gcaggctgtt taataggggc   23520

tgaacatgtc aacaactcat atgagtgtga catacccatt ggtgcaggta tatgcgctag   23580

ttatcagact cagactaatt ctcctcggcg ggcacgtagt gtagctagtc aatccatcat   23640

tgcctacact atgtcacttg gtgcagaaaa ttcagttgct tactctaata actctattgc   23700

catacccaca aattttacta ttagtgttac cacagaaatt ctaccagtgt ctatgaccaa   23760

gacatcagta gattgtacaa tgtacatttg tggtgattca actgaatgca gcaatctttt   23820

gttgcaatat ggcagttttt gtacacaatt aaaccgtgct ttaactggaa tagctgttga   23880

acaagacaaa aacacccaag aagtttttgc acaagtcaaa caaatttaca aaacaccacc   23940

aattaaagat tttggtggtt ttaatttttc acaaatatta ccagatccat caaaaccaag   24000

caagaggtca tttattgaag atctactttt caacaaagtg acacttgcag atgctggctt   24060

catcaaacaa tatggtgatt gccttggtga tattgctgct agagacctca tttgtgcaca   24120

aaagtttaac ggccttactg ttttgccacc tttgctcaca gatgaaatga ttgctcaata   24180

cacttctgca ctgttagcgg gtacaatcac ttctggttgg acctttggtg caggtgctgc   24240

attacaaata ccatttgcta tgcaaatggc ttataggttt aatggtattg gagttacaca   24300

gaatgttctc tatgagaacc aaaaattgat tgccaaccaa tttaatagtg ctattggcaa   24360

aattcaagac tcactttctt ccacagcaag tgcacttgga aaacttcaag atgtggtcaa   24420

ccaaaatgca caagctttaa acacgcttgt taaacaactt agctccaatt ttggtgcaat   24480

ttcaagtgtt ttaaatgata tcctttcacg tcttgacaaa gttgaggctg aagtgcaaat   24540

tgataggttg atcacaggca gacttcaaag tttgcagaca tatgtgactc aacaattaat   24600

tagagctgca gaaatcagag cttctgctaa tcttgctgct actaaaatgt cagagtgtgt   24660

acttggacaa tcaaaaagag ttgatttttg tggaaagggc tatcatctta tgtccttccc   24720

tcagtcagca cctcatggtg tagtcttctt gcatgtgact tatgtccctg cacaagaaaa   24780

gaacttcaca actgctcctg ccatttgtca tgatggaaaa gcacactttc ctcgtgaagg   24840

tgtctttgtt tcaaatggca cacactggtt tgtaacacaa aggaattttt atgaaccaca   24900

aatcattact acagacaaca catttgtgtc tggtaactgt gatgttgtaa taggaattgt   24960

caacaacaca gtttatgatc ctttgcaacc tgaattagac tcattcaagg aggagttaga   25020

taaatatttt aagaatcata catcaccaga tgttgattta ggtgacatct ctggcattaa   25080

tgcttcagtt gtaaacattc aaaaagaaat tgaccgcctc aatgaggttg ccaagaattt   25140

aaatgaatct ctcatcgatc tccaagaact tggaaagtat gagcagtata taaaatggcc   25200

atggtacatt tggctaggtt ttatagctgg cttgattgcc atagtaatgg tgacaattat   25260

gctttgctgt atgaccagtt gctgtagttg tctcaagggc tgttgttctt gtggatcctg   25320

ctgcaaattt gatgaagacg actctgagcc agtgctcaaa ggagtcaaat tacattacac   25380

ataaacgaac ttatggattt gtttatgaga atcttcacaa ttggaactgt aactttgaag   25440

caaggtgaaa tcaaggatgc tactccttca gattttgttc gcgctactgc aacgataccg   25500

atacaagcct cactcccttt cggatggctt attgttggcg ttgcacttct tgctgttttt   25560

cagagcgctt ccaaaatcat aaccctcaaa aagagatggc aactagcact ctccaagggt   25620

gttcactttg tttgcaactt gctgttgttg tttgtaacag tttactcaca ccttttgctc   25680

gttgctgctg gccttgaagc cccttttctc tatctttatg ctttagtcta cttcttgcag   25740

agtataaact ttgtaagaat aataatgagg ctttggcttt gctggaaatg ccgttccaaa   25800

aacccattac tttatgatgc caactatttt ctttgctggc atactaattg ttacgactat   25860

tgtatacctt acaatagtgt aacttcttca attgtcatta cttcaggtga tggcacaaca   25920

agtcctattt ctgaacatga ctaccagatt ggtggttata ctgaaaaatg ggaatctgga   25980

gtaaaagact gtgttgtatt acacagttac ttcacttcag actattacca gctgtactca   26040

actcaattga gtacagacac tggtgttgaa catgttacct tcttcatcta caataaaatt   26100

gttgatgagc ctgaagaaca tgtccaaatt cacacaatcg acggttcatc cggagttgtt   26160

aatccagtaa tggaaccaat ttatgatgaa ccgacgacga ctactagcgt gcctttgtaa   26220

gcacaagctg atgagtacga acttatgtac tcattcgttt cggaagagac aggtacgtta   26280

atagttaata gcgtacttct ttttcttgct ttcgtggtat tcttgctagt tacactagcc   26340

atccttactg cgcttcgatt gtgtgcgtac tgctgcaata ttgttaacgt gagtcttgta   26400

aaaccttctt tttacgttta ctctcgtgtt aaaaatctga attcttctag agttcctgat   26460

cttctggtct aaacgaacta aatattatat tagtttttct gtttggaact ttaattttag   26520

ccatggcaga ttccaacggt actattaccg ttgaagagct taaaaagctc cttgaacaat   26580

ggaacctagt aataggtttc ctattcctta catggatttg tcttctacaa tttgcctatg   26640

ccaacaggaa taggtttttg tatataatta agttaatttt cctctggctg ttatggccag   26700

taactttagc ttgttttgtg cttgctgctg tttacagaat aaattggatc accggtggaa   26760

ttgctatcgc aatggcttgt cttgtaggct tgatgtggct cagctacttc attgcttctt   26820

tcagactgtt tgcgcgtacg cgttccatgt ggtcattcaa tccagaaact aacattcttc   26880

tcaacgtgcc actccatggc actattctga ccagaccgct tctagaaagt gaactcgtaa   26940

tcggagctgt gatccttcgt ggacatcttc gtattgctgg acaccatcta ggacgctgtg   27000

acatcaagga cctgcctaaa gaaatcactg ttgctacatc acgaacgctt tcttattaca   27060

aattgggagc ttcgcagcgt gtagcaggtg actcaggttt tgctgcatac agtcgctaca   27120

ggattggcaa ctataaatta aacacagacc attccagtag cagtgacaat attgctttgc   27180

ttgtacagta agtgacaaca gatgtttcat ctcgttgact ttcaggttac tatagcagag   27240

atattactaa ttattatgag gacttttaaa gtttccattt ggaatcttga ttacatcata   27300

aacctcataa ttaaaaattt atctaagtca ctaactgaga ataaatattc tcaattagat   27360

gaagagcaac caatggagat tgattaaacg aacatgaaaa ttattctttt cttggcactg   27420

ataacactcg ctacttgtga gctttatcac taccaagagt gtgttagagg tacaacagta   27480

cttttaaaag aaccttgctc ttctggaaca tacgagggca attcaccatt tcatcctcta   27540

gctgataaca aatttgcact gacttgcttt agcactcaat ttgcttttgc ttgtcctgac   27600

ggcgtaaaac acgtctatca gttacgtgcc agatcagttt cacctaaact gttcatcaga   27660

caagaggaag ttcaagaact ttactctcca atttttctta ttgttgcggc aatagtgttt   27720

ataacacttt gcttcacact caaaagaaag acagaatgat tgaactttca ttaattgact   27780

tctatttgtg ctttttagcc tttctgctat tccttgtttt aattatgctt attatctttt   27840

ggttctcact tgaactgcaa gatcataatg aaacttgtca cgcctaaacg aacatgaaat   27900

ttcttgtttt cttaggaatc atcacaactg tagctgcatt tcaccaagaa tgtagtttac   27960

agtcatgtac tcaacatcaa ccatatgtag ttgatgaccc gtgtcctatt cacttctatt   28020

ctaaatggta tattagagta ggagctagaa aatcagcacc tttaattgaa ttgtgcgtgg   28080

atgaggctgg ttctaaatca cccattcagt acatcgatat cggtaattat acagtttcct   28140

gttcaccttt tacaattaat tgccaggaac ctaaattggg tagtcttgta gtgcgttgtt   28200

cgttctatga agacttttta gagtatcatg acgttcgtgt tgttttagat ttcatctaaa   28260

cgaacaaact aaaatgtctg ataatggacc ccaaaatcag cgaaatgcac cccgcattac   28320

gtttggtgga ccctcagatt caactggcag taaccagaat ggagaacgca gtggggcgcg   28380

atcaaaacaa cgtcggcccc aaggtttacc caataatact gcgtcttggt tcaccgctct   28440

cactcaacat ggcaaggaag accttaaatt ccctcgagga caaggcgttc caattaacac   28500

caatagcagt ccagatgacc aaattggcta ctaccgaaga gctaccagac gaattcgtgg   28560

tggtgacggt aaaatgaaag atctcagtcc aagatggtat ttctactacc taggaactgg   28620

gccagaagct ggacttccct atggtgctaa caaagacggc atcatatggg ttgcaactga   28680

gggagccttg aatacaccaa aagatcacat tggcacccgc aatcctgcta acaatgctgc   28740

aatcgtgcta caacttcctc aaggaacaac attgccaaaa ggcttctacg cagaagggag   28800

cagaggcggc agtcaagcct cttctcgttc ctcatcacgt agtcgcaaca gttcaagaaa   28860

ttcaactcca ggcagcagta ggggaacttc tcctgctaga atggctggca atggcggtga   28920

tgctgctctt gctttgctgc tgcttgacag attgaaccag cttgagagca aaatgtctgg   28980

taaaggccaa caacaacaag gccaaactgt cactaagaaa tctgctgctg aggcttctaa   29040

gaagcctcgg caaaaacgta ctgccactaa agcatacaat gtaacacaag ctttcggcag   29100

acgtggtcca gaacaaaccc aaggaaattt tggggaccag gaactaatca gacaaggaac   29160

tgattacaaa cattggccgc aaattgcaca atttgccccc agcgcttcag cgttcttcgg   29220

aatgtcgcgc attggcatgg aagtcacacc ttcgggaacg tggttgacct acacaggtgc   29280

catcaaattg gatgacaaag atccaaattt caaagatcaa gtcattttgc tgaataagca   29340

tattgacgca tacaaaacat tcccaccaac agagcctaaa aaggacaaaa agaagaaggc   29400

tgatgaaact caagccttac cgcagagaca gaagaaacag caaactgtga ctcttcttcc   29460

tgctgcagat ttggatgatt tctccaaaca attgcaacaa tccatgagca gtgctgactc   29520

aactcaggcc taaactcatg cagaccacac aaggcagatg ggctatataa acgttttcgc   29580

ttttccgttt acgatatata gtctactctt gtgcagaatg aattctcgta actacatagc   29640

acaagtagat gtagttaact ttaatctcac atagcaatct ttaatcagtg tgtaacatta   29700

gggaggactt gaaagagcca ccacattttc accgaggcca cgcggagtac gatcgagtgt   29760

acagtgaaca atgctaggga gagctgccta tatggaagag ccctaatgtg taaaattaat   29820

tttagtagtg ctatccccat gtgattttaa tagcttctta ggagaatgac aaaaaaaaaa   29880

aa                                                                  29882

<210>  3

<211>  29751

<212>  DNA

<213>  人冠状病毒

<400>  3

atattaggtt tttacctacc caggaaaagc caaccaacct cgatctcttg tagatctgtt      60

ctctaaacga actttaaaat ctgtgtagct gtcgctcggc tgcatgccta gtgcacctac     120

gcagtataaa caataataaa ttttactgtc gttgacaaga aacgagtaac tcgtccctct     180

tctgcagact gcttacggtt tcgtccgtgt tgcagtcgat catcagcata cctaggtttc     240

gtccgggtgt gaccgaaagg taagatggag agccttgttc ttggtgtcaa cgagaaaaca     300

cacgtccaac tcagtttgcc tgtccttcag gttagagacg tgctagtgcg tggcttcggg     360

gactctgtgg aagaggccct atcggaggca cgtgaacacc tcaaaaatgg cacttgtggt     420

ctagtagagc tggaaaaagg cgtactgccc cagcttgaac agccctatgt gttcattaaa     480

cgttctgatg ccttaagcac caatcacggc cacaaggtcg ttgagctggt tgcagaaatg     540

gacggcattc agtacggtcg tagcggtata acactgggag tactcgtgcc acatgtgggc     600

gaaaccccaa ttgcataccg caatgttctt cttcgtaaga acggtaataa gggagccggt     660

ggtcatagct atggcatcga tctaaagtct tatgacttag gtgacgagct tggcactgat     720

cccattgaag attatgaaca aaactggaac actaagcatg gcagtggtgc actccgtgaa     780

ctcactcgtg agctcaatgg aggtgcagtc actcgctatg tcgacaacaa tttctgtggc     840

ccagatgggt accctcttga ttgcatcaaa gattttctcg cacgcgcggg caagtcaatg     900

tgcactcttt ccgaacaact tgattacatc gagtcgaaga gaggtgtcta ctgctgccgt     960

gaccatgagc atgaaattgc ctggttcact gagcgctctg ataagagcta cgagcaccag    1020

acacccttcg aaattaagag tgccaagaaa tttgacactt tcaaagggga atgcccaaag    1080

tttgtgtttc ctcttaactc aaaagtcaaa gtcattcaac cacgtgttga aaagaaaaag    1140

actgagggtt tcatggggcg tatacgctct gtgtaccctg ttgcatctcc acaggagtgt    1200

aacaatatgc acttgtctac cttgatgaaa tgtaatcatt gcgatgaagt ttcatggcag    1260

acgtgcgact ttctgaaagc cacttgtgaa cattgtggca ctgaaaattt agttattgaa    1320

ggacctacta catgtgggta cctacctact aatgctgtag tgaaaatgcc atgtcctgcc    1380

tgtcaagacc cagagattgg acctgagcat agtgttgcag attatcacaa ccactcaaac    1440

attgaaactc gactccgcaa gggaggtagg actagatgtt ttggaggctg tgtgtttgcc    1500

tatgttggct gctataataa gcgtgcctac tgggttcctc gtgctagtgc tgatattggc    1560

tcaggccata ctggcattac tggtgacaat gtggagacct tgaatgagga tctccttgag    1620

atactgagtc gtgaacgtgt taacattaac attgttggcg attttcattt gaatgaagag    1680

gttgccatca ttttggcatc tttctctgct tctacaagtg cctttattga cactataaag    1740

agtcttgatt acaagtcttt caaaaccatt gttgagtcct gcggtaacta taaagttacc    1800

aagggaaagc ccgtaaaagg tgcttggaac attggacaac agagatcagt tttaacacca    1860

ctgtgtggtt ttccctcaca ggctgctggt gttatcagat caatttttgc gcgcacactt    1920

gatgcagcaa accactcaat tcctgatttg caaagagcag ctgtcaccat acttgatggt    1980

atttctgaac agtcattacg tcttgtcgac gccatggttt atacttcaga cctgctcacc    2040

aacagtgtca ttattatggc atatgtaact ggtggtcttg tacaacagac ttctcagtgg    2100

ttgtctaatc ttttgggcac tactgttgaa aaactcaggc ctatctttga atggattgag    2160

gcgaaactta gtgcaggagt tgaatttctc aaggatgctt gggagattct caaatttctc    2220

attacaggtg tttttgacat cgtcaagggt caaatacagg ttgcttcaga taacatcaag    2280

gattgtgtaa aatgcttcat tgatgttgtt aacaaggcac tcgaaatgtg cattgatcaa    2340

gtcactatcg ctggcgcaaa gttgcgatca ctcaacttag gtgaagtctt catcgctcaa    2400

agcaagggac tttaccgtca gtgtatacgt ggcaaggagc agctgcaact actcatgcct    2460

cttaaggcac caaaagaagt aacctttctt gaaggtgatt cacatgacac agtacttacc    2520

tctgaggagg ttgttctcaa gaacggtgaa ctcgaagcac tcgagacgcc cgttgatagc    2580

ttcacaaatg gagctatcgt tggcacacca gtctgtgtaa atggcctcat gctcttagag    2640

attaaggaca aagaacaata ctgcgcattg tctcctggtt tactggctac aaacaatgtc    2700

tttcgcttaa aagggggtgc accaattaaa ggtgtaacct ttggagaaga tactgtttgg    2760

gaagttcaag gttacaagaa tgtgagaatc acatttgagc ttgatgaacg tgttgacaaa    2820

gtgcttaatg aaaagtgctc tgtctacact gttgaatccg gtaccgaagt tactgagttt    2880

gcatgtgttg tagcagaggc tgttgtgaag actttacaac cagtttctga tctccttacc    2940

aacatgggta ttgatcttga tgagtggagt gtagctacat tctacttatt tgatgatgct    3000

ggtgaagaaa acttttcatc acgtatgtat tgttcctttt accctccaga tgaggaagaa    3060

gaggacgatg cagagtgtga ggaagaagaa attgatgaaa cctgtgaaca tgagtacggt    3120

acagaggatg attatcaagg tctccctctg gaatttggtg cctcagctga aacagttcga    3180

gttgaggaag aagaagagga agactggctg gatgatacta ctgagcaatc agagattgag    3240

ccagaaccag aacctacacc tgaagaacca gttaatcagt ttactggtta tttaaaactt    3300

actgacaatg ttgccattaa atgtgttgac atcgttaagg aggcacaaag tgctaatcct    3360

atggtgattg taaatgctgc taacatacac ctgaaacatg gtggtggtgt agcaggtgca    3420

ctcaacaagg caaccaatgg tgccatgcaa aaggagagtg atgattacat taagctaaat    3480

ggccctctta cagtaggagg gtcttgtttg ctttctggac ataatcttgc taagaagtgt    3540

ctgcatgttg ttggacctaa cctaaatgca ggtgaggaca tccagcttct taaggcagca    3600

tatgaaaatt tcaattcaca ggacatctta cttgcaccat tgttgtcagc aggcatattt    3660

ggtgctaaac cacttcagtc tttacaagtg tgcgtgcaga cggttcgtac acaggtttat    3720

attgcagtca atgacaaagc tctttatgag caggttgtca tggattatct tgataacctg    3780

aagcctagag tggaagcacc taaacaagag gagccaccaa acacagaaga ttccaaaact    3840

gaggagaaat ctgtcgtaca gaagcctgtc gatgtgaagc caaaaattaa ggcctgcatt    3900

gatgaggtta ccacaacact ggaagaaact aagtttctta ccaataagtt actcttgttt    3960

gctgatatca atggtaagct ttaccatgat tctcagaaca tgcttagagg tgaagatatg    4020

tctttccttg agaaggatgc accttacatg gtaggtgatg ttatcactag tggtgatatc    4080

acttgtgttg taataccctc caaaaaggct ggtggcacta ctgagatgct ctcaagagct    4140

ttgaagaaag tgccagttga tgagtatata accacgtacc ctggacaagg atgtgctggt    4200

tatacacttg aggaagctaa gactgctctt aagaaatgca aatctgcatt ttatgtacta    4260

ccttcagaag cacctaatgc taaggaagag attctaggaa ctgtatcctg gaatttgaga    4320

gaaatgcttg ctcatgctga agagacaaga aaattaatgc ctatatgcat ggatgttaga    4380

gccataatgg caaccatcca acgtaagtat aaaggaatta aaattcaaga gggcatcgtt    4440

gactatggtg tccgattctt cttttatact agtaaagagc ctgtagcttc tattattacg    4500

aagctgaact ctctaaatga gccgcttgtc acaatgccaa ttggttatgt gacacatggt    4560

tttaatcttg aagaggctgc gcgctgtatg cgttctctta aagctcctgc cgtagtgtca    4620

gtatcatcac cagatgctgt tactacatat aatggatacc tcacttcgtc atcaaagaca    4680

tctgaggagc actttgtaga aacagtttct ttggctggct cttacagaga ttggtcctat    4740

tcaggacagc gtacagagtt aggtgttgaa tttcttaagc gtggtgacaa aattgtgtac    4800

cacactctgg agagccccgt cgagtttcat cttgacggtg aggttctttc acttgacaaa    4860

ctaaagagtc tcttatccct gcgggaggtt aagactataa aagtgttcac aactgtggac    4920

aacactaatc tccacacaca gcttgtggat atgtctatga catatggaca gcagtttggt    4980

ccaacatact tggatggtgc tgatgttaca aaaattaaac ctcatgtaaa tcatgagggt    5040

aagactttct ttgtactacc tagtgatgac acactacgta gtgaagcttt cgagtactac    5100

catactcttg atgagagttt tcttggtagg tacatgtctg ctttaaacca cacaaagaaa    5160

tggaaatttc ctcaagttgg tggtttaact tcaattaaat gggctgataa caattgttat    5220

ttgtctagtg ttttattagc acttcaacag cttgaagtca aattcaatgc accagcactt    5280

caagaggctt attatagagc ccgtgctggt gatgctgcta acttttgtgc actcatactc    5340

gcttacagta ataaaactgt tggcgagctt ggtgatgtca gagaaactat gacccatctt    5400

ctacagcatg ctaatttgga atctgcaaag cgagttctta atgtggtgtg taaacattgt    5460

ggtcagaaaa ctactacctt aacgggtgta gaagctgtga tgtatatggg tactctatct    5520

tatgataatc ttaagacagg tgtttccatt ccatgtgtgt gtggtcgtga tgctacacaa    5580

tatctagtac aacaagagtc ttcttttgtt atgatgtctg caccacctgc tgagtataaa    5640

ttacagcaag gtacattctt atgtgcgaat gagtacactg gtaactatca gtgtggtcat    5700

tacactcata taactgctaa ggagaccctc tatcgtattg acggagctca ccttacaaag    5760

atgtcagagt acaaaggacc agtgactgat gttttctaca aggaaacatc ttacactaca    5820

accatcaagc ctgtgtcgta taaactcgat ggagttactt acacagagat tgaaccaaaa    5880

ttggatgggt attataaaaa ggataatgct tactatacag agcagcctat agaccttgta    5940

ccaactcaac cattaccaaa tgcgagtttt gataatttca aactcacatg ttctaacaca    6000

aaatttgctg atgatttaaa tcaaatgaca ggcttcacaa agccagcttc acgagagcta    6060

tctgtcacat tcttcccaga cttgaatggc gatgtagtgg ctattgacta tagacactat    6120

tcagcgagtt tcaagaaagg tgctaaatta ctgcataagc caattgtttg gcacattaac    6180

caggctacaa ccaagacaac gttcaaacca aacacttggt gtttacgttg tctttggagt    6240

acaaagccag tagatacttc aaattcattt gaagttctgg cagtagaaga cacacaagga    6300

atggacaatc ttgcttgtga aagtcaacaa cccacctctg aagaagtagt ggaaaatcct    6360

accatacaga aggaagtcat agagtgtgac gtgaaaacta ccgaagttgt aggcaatgtc    6420

atacttaaac catcagatga aggtgttaaa gtaacacaag agttaggtca tgaggatctt    6480

atggctgctt atgtggaaaa cacaagcatt accattaaga aacctaatga gctttcacta    6540

gccttaggtt taaaaacaat tgccactcat ggtattgctg caattaatag tgttccttgg    6600

agtaaaattt tggcttatgt caaaccattc ttaggacaag cagcaattac aacatcaaat    6660

tgcgctaaga gattagcaca acgtgtgttt aacaattata tgccttatgt gtttacatta    6720

ttgttccaat tgtgtacttt tactaaaagt accaattcta gaattagagc ttcactacct    6780

acaactattg ctaaaaatag tgttaagagt gttgctaaat tatgtttgga tgccggcatt    6840

aattatgtga agtcacccaa attttctaaa ttgttcacaa tcgctatgtg gctattgttg    6900

ttaagtattt gcttaggttc tctaatctgt gtaactgctg cttttggtgt actcttatct    6960

aattttggtg ctccttctta ttgtaatggc gttagagaat tgtatcttaa ttcgtctaac    7020

gttactacta tggatttctg tgaaggttct tttccttgca gcatttgttt aagtggatta    7080

gactcccttg attcttatcc agctcttgaa accattcagg tgacgatttc atcgtacaag    7140

ctagacttga caattttagg tctggccgct gagtgggttt tggcatatat gttgttcaca    7200

aaattctttt atttattagg tctttcagct ataatgcagg tgttctttgg ctattttgct    7260

agtcatttca tcagcaattc ttggctcatg tggtttatca ttagtattgt acaaatggca    7320

cccgtttctg caatggttag gatgtacatc ttctttgctt ctttctacta catatggaag    7380

agctatgttc atatcatgga tggttgcacc tcttcgactt gcatgatgtg ctataagcgc    7440

aatcgtgcca cacgcgttga gtgtacaact attgttaatg gcatgaagag atctttctat    7500

gtctatgcaa atggaggccg tggcttctgc aagactcaca attggaattg tctcaattgt    7560

gacacatttt gcactggtag tacattcatt agtgatgaag ttgctcgtga tttgtcactc    7620

cagtttaaaa gaccaatcaa ccctactgac cagtcatcgt atattgttga tagtgttgct    7680

gtgaaaaatg gcgcgcttca cctctacttt gacaaggctg gtcaaaagac ctatgagaga    7740

catccgctct cccattttgt caatttagac aatttgagag ctaacaacac taaaggttca    7800

ctgcctatta atgtcatagt ttttgatggc aagtccaaat gcgacgagtc tgcttctaag    7860

tctgcttctg tgtactacag tcagctgatg tgccaaccta ttctgttgct tgaccaagct    7920

cttgtatcag acgttggaga tagtactgaa gtttccgtta agatgtttga tgcttatgtc    7980

gacacctttt cagcaacttt tagtgttcct atggaaaaac ttaaggcact tgttgctaca    8040

gctcacagcg agttagcaaa gggtgtagct ttagatggtg tcctttctac attcgtgtca    8100

gctgcccgac aaggtgttgt tgataccgat gttgacacaa aggatgttat tgaatgtctc    8160

aaactttcac atcactctga cttagaagtg acaggtgaca gttgtaacaa tttcatgctc    8220

acctataata aggttgaaaa catgacgccc agagatcttg gcgcatgtat tgactgtaat    8280

gcaaggcata tcaatgccca agtagcaaaa agtcacaatg tttcactcat ctggaatgta    8340

aaagactaca tgtctttatc tgaacagctg cgtaaacaaa ttcgtagtgc tgccaagaag    8400

aacaacatac cttttagact aacttgtgct acaactagac aggttgtcaa tgtcataact    8460

actaaaatct cactcaaggg tggtaagatt gttagtactt gttttaaact tatgcttaag    8520

gccacattat tgtgcgttct tgctgcattg gtttgttata tcgttatgcc agtacataca    8580

ttgtcaatcc atgatggtta cacaaatgaa atcattggtt acaaagccat tcaggatggt    8640

gtcactcgtg acatcatttc tactgatgat tgttttgcaa ataaacatgc tggttttgac    8700

gcatggttta gccagcgtgg tggttcatac aaaaatgaca aaagctgccc tgtagtagct    8760

gctatcatta caagagagat tggtttcata gtgcctggct taccgggtac tgtgctgaga    8820

gcaatcaatg gtgacttctt gcattttcta cctcgtgttt ttagtgctgt tggcaacatt    8880

tgctacacac cttccaaact cattgagtat agtgattttg ctacctctgc ttgcgttctt    8940

gctgctgagt gtacaatttt taaggatgct atgggcaaac ctgtgccata ttgttatgac    9000

actaatttgc tagagggttc tatttcttat agtgagcttc gtccagacac tcgttatgtg    9060

cttatggatg gttccatcat acagtttcct aacacttacc tggagggttc tgttagagta    9120

gtaacaactt ttgatgctga gtactgtaga catggtacat gcgaaaggtc agaagtaggt    9180

atttgcctat ctaccagtgg tagatgggtt cttaataatg agcattacag agctctatca    9240

ggagttttct gtggtgttga tgcgatgaat ctcatagcta acatctttac tcctcttgtg    9300

caacctgtgg gtgctttaga tgtgtctgct tcagtagtgg ctggtggtat tattgccata    9360

ttggtgactt gtgctgccta ctactttatg aaattcagac gtgtttttgg tgagtacaac    9420

catgttgttg ctgctaatgc acttttgttt ttgatgtctt tcactatact ctgtctggta    9480

ccagcttaca gctttctgcc gggagtctac tcagtctttt acttgtactt gacattctat    9540

ttcaccaatg atgtttcatt cttggctcac cttcaatggt ttgccatgtt ttctcctatt    9600

gtgccttttt ggataacagc aatctatgta ttctgtattt ctctgaagca ctgccattgg    9660

ttctttaaca actatcttag gaaaagagtc atgtttaatg gagttacatt tagtaccttc    9720

gaggaggctg ctttgtgtac ctttttgctc aacaaggaaa tgtacctaaa attgcgtagc    9780

gagacactgt tgccacttac acagtataac aggtatcttg ctctatataa caagtacaag    9840

tatttcagtg gagccttaga tactaccagc tatcgtgaag cagcttgctg ccacttagca    9900

aaggctctaa atgactttag caactcaggt gctgatgttc tctaccaacc accacagaca    9960

tcaatcactt ctgctgttct gcagagtggt tttaggaaaa tggcattccc gtcaggcaaa   10020

gttgaagggt gcatggtaca agtaacctgt ggaactacaa ctcttaatgg attgtggttg   10080

gatgacacag tatactgtcc aagacatgtc atttgcacag cagaagacat gcttaatcct   10140

aactatgaag atctgctcat tcgcaaatcc aaccatagct ttcttgttca ggctggcaat   10200

gttcaacttc gtgttattgg ccattctatg caaaattgtc tgcttaggct taaagttgat   10260

acttctaacc ctaagacacc caagtataaa tttgtccgta tccaacctgg tcaaacattt   10320

tcagttctag catgctacaa tggttcacca tctggtgttt atcagtgtgc catgagacct   10380

aatcatacca ttaaaggttc tttccttaat ggatcatgtg gtagtgttgg ttttaacatt   10440

gattatgatt gcgtgtcttt ctgctatatg catcatatgg agcttccaac aggagtacac   10500

gctggtactg acttagaagg taaattctat ggtccatttg ttgacagaca aactgcacag   10560

gctgcaggta cagacacaac cataacatta aatgttttgg catggctgta tgctgctgtt   10620

atcaatggtg ataggtggtt tcttaataga ttcaccacta ctttgaatga ctttaacctt   10680

gtggcaatga agtacaacta tgaacctttg acacaagatc atgttgacat attgggacct   10740

ctttctgctc aaacaggaat tgccgtctta gatatgtgtg ctgctttgaa agagctgctg   10800

cagaatggta tgaatggtcg tactatcctt ggtagcacta ttttagaaga tgagtttaca   10860

ccatttgatg ttgttagaca atgctctggt gttaccttcc aaggtaagtt caagaaaatt   10920

gttaagggca ctcatcattg gatgctttta actttcttga catcactatt gattcttgtt   10980

caaagtacac agtggtcact gtttttcttt gtttacgaga atgctttctt gccatttact   11040

cttggtatta tggcaattgc tgcatgtgct atgctgcttg ttaagcataa gcacgcattc   11100

ttgtgcttgt ttctgttacc ttctcttgca acagttgctt actttaatat ggtctacatg   11160

cctgctagct gggtgatgcg tatcatgaca tggcttgaat tggctgacac tagcttgtct   11220

ggttataggc ttaaggattg tgttatgtat gcttcagctt tagttttgct tattctcatg   11280

acagctcgca ctgtttatga tgatgctgct agacgtgttt ggacactgat gaatgtcatt   11340

acacttgttt acaaagtcta ctatggtaat gctttagatc aagctatttc catgtgggcc   11400

ttagttattt ctgtaacctc taactattct ggtgtcgtta cgactatcat gtttttagct   11460

agagctatag tgtttgtgtg tgttgagtat tacccattgt tatttattac tggcaacacc   11520

ttacagtgta tcatgcttgt ttattgtttc ttaggctatt gttgctgctg ctactttggc   11580

cttttctgtt tactcaaccg ttacttcagg cttactcttg gtgtttatga ctacttggtc   11640

tctacacaag aatttaggta tatgaactcc caggggcttt tgcctcctaa gagtagtatt   11700

gatgctttca agcttaacat taagttgttg ggtattggag gtaaaccatg tatcaaggtt   11760

gctactgtac agtctaaaat gtctgacgta aagtgcacat ctgtggtact gctctcggtt   11820

cttcaacaac ttagagtaga gtcatcttct aaattgtggg cacaatgtgt acaactccac   11880

aatgatattc ttcttgcaaa agacacaact gaagctttcg agaagatggt ttctcttttg   11940

tctgttttgc tatccatgca gggtgctgta gacattaata ggttgtgcga ggaaatgctc   12000

gataaccgtg ctactcttca ggctattgct tcagaattta gttctttacc atcatatgcc   12060

gcttatgcca ctgcccagga ggcctatgag caggctgtag ctaatggtga ttctgaagtc   12120

gttctcaaaa agttaaagaa atctttgaat gtggctaaat ctgagtttga ccgtgatgct   12180

gccatgcaac gcaagttgga aaagatggca gatcaggcta tgacccaaat gtacaaacag   12240

gcaagatctg aggacaagag ggcaaaagta actagtgcta tgcaaacaat gctcttcact   12300

atgcttagga agcttgataa tgatgcactt aacaacatta tcaacaatgc gcgtgatggt   12360

tgtgttccac tcaacatcat accattgact acagcagcca aactcatggt tgttgtccct   12420

gattatggta cctacaagaa cacttgtgat ggtaacacct ttacatatgc atctgcactc   12480

tgggaaatcc agcaagttgt tgatgcggat agcaagattg ttcaacttag tgaaattaac   12540

atggacaatt caccaaattt ggcttggcct cttattgtta cagctctaag agccaactca   12600

gctgttaaac tacagaataa tgaactgagt ccagtagcac tacgacagat gtcctgtgcg   12660

gctggtacca cacaaacagc ttgtactgat gacaatgcac ttgcctacta taacaattcg   12720

aagggaggta ggtttgtgct ggcattacta tcagaccacc aagatctcaa atgggctaga   12780

ttccctaaga gtgatggtac aggtacaatt tacacagaac tggaaccacc ttgtaggttt   12840

gttacagaca caccaaaagg gcctaaagtg aaatacttgt acttcatcaa aggcttaaac   12900

aacctaaata gaggtatggt gctgggcagt ttagctgcta cagtacgtct tcaggctgga   12960

aatgctacag aagtacctgc caattcaact gtgctttcct tctgtgcttt tgcagtagac   13020

cctgctaaag catataagga ttacctagca agtggaggac aaccaatcac caactgtgtg   13080

aagatgttgt gtacacacac tggtacagga caggcaatta ctgtaacacc agaagctaac   13140

atggaccaag agtcctttgg tggtgcttca tgttgtctgt attgtagatg ccacattgac   13200

catccaaatc ctaaaggatt ctgtgacttg aaaggtaagt acgtccaaat acctaccact   13260

tgtgctaatg acccagtggg ttttacactt agaaacacag tctgtaccgt ctgcggaatg   13320

tggaaaggtt atggctgtag ttgtgaccaa ctccgcgaac ccttgatgca gtctgcggat   13380

gcatcaacgt ttttaaacgg gtttgcggtg taagtgcagc ccgtcttaca ccgtgcggca   13440

caggcactag tactgatgtc gtctacaggg cttttgatat ttacaacgaa aaagttgctg   13500

gttttgcaaa gttcctaaaa actaattgct gtcgcttcca ggagaaggat gaggaaggca   13560

atttattaga ctcttacttt gtagttaaga ggcatactat gtctaactac caacatgaag   13620

agactattta taacttggtt aaagattgtc cagcggttgc tgtccatgac tttttcaagt   13680

ttagagtaga tggtgacatg gtaccacata tatcacgtca gcgtctaact aaatacacaa   13740

tggctgattt agtctatgct ctacgtcatt ttgatgaggg taattgtgat acattaaaag   13800

aaatactcgt cacatacaat tgctgtgatg atgattattt caataagaag gattggtatg   13860

acttcgtaga gaatcctgac atcttacgcg tatatgctaa cttaggtgag cgtgtacgcc   13920

aatcattatt aaagactgta caattctgcg atgctatgcg tgatgcaggc attgtaggcg   13980

tactgacatt agataatcag gatcttaatg ggaactggta cgatttcggt gatttcgtac   14040

aagtagcacc aggctgcgga gttcctattg tggattcata ttactcattg ctgatgccca   14100

tcctcacttt gactagggca ttggctgctg agtcccatat ggatgctgat ctcgcaaaac   14160

cacttattaa gtgggatttg ctgaaatatg attttacgga agagagactt tgtctcttcg   14220

accgttattt taaatattgg gaccagacat accatcccaa ttgtattaac tgtttggatg   14280

ataggtgtat ccttcattgt gcaaacttta atgtgttatt ttctactgtg tttccaccta   14340

caagttttgg accactagta agaaaaatat ttgtagatgg tgttcctttt gttgtttcaa   14400

ctggatacca ttttcgtgag ttaggagtcg tacataatca ggatgtaaac ttacatagct   14460

cgcgtctcag tttcaaggaa cttttagtgt atgctgctga tccagctatg catgcagctt   14520

ctggcaattt attgctagat aaacgcacta catgcttttc agtagctgca ctaacaaaca   14580

atgttgcttt tcaaactgtc aaacccggta attttaataa agacttttat gactttgctg   14640

tgtctaaagg tttctttaag gaaggaagtt ctgttgaact aaaacacttc ttctttgctc   14700

aggatggcaa cgctgctatc agtgattatg actattatcg ttataatctg ccaacaatgt   14760

gtgatatcag acaactccta ttcgtagttg aagttgttga taaatacttt gattgttacg   14820

atggtggctg tattaatgcc aaccaagtaa tcgttaacaa tctggataaa tcagctggtt   14880

tcccatttaa taaatggggt aaggctagac tttattatga ctcaatgagt tatgaggatc   14940

aagatgcact tttcgcgtat actaagcgta atgtcatccc tactataact caaatgaatc   15000

ttaagtatgc cattagtgca aagaatagag ctcgcaccgt agctggtgtc tctatctgta   15060

gtactatgac aaatagacag tttcatcaga aattattgaa gtcaatagcc gccactagag   15120

gagctactgt ggtaattgga acaagcaagt tttacggtgg ctggcataat atgttaaaaa   15180

ctgtttacag tgatgtagaa actccacacc ttatgggttg ggattatcca aaatgtgaca   15240

gagccatgcc taacatgctt aggataatgg cctctcttgt tcttgctcgc aaacataaca   15300

cttgctgtaa cttatcacac cgtttctaca ggttagctaa cgagtgtgcg caagtattaa   15360

gtgagatggt catgtgtggc ggctcactat atgttaaacc aggtggaaca tcatccggtg   15420

atgctacaac tgcttatgct aatagtgtct ttaacatttg tcaagctgtt acagccaatg   15480

taaatgcact tctttcaact gatggtaata agatagctga caagtatgtc cgcaatctac   15540

aacacaggct ctatgagtgt ctctatagaa atagggatgt tgatcatgaa ttcgtggatg   15600

agttttacgc ttacctgcgt aaacatttct ccatgatgat tctttctgat gatgccgttg   15660

tgtgctataa cagtaactat gcggctcaag gtttagtagc tagcattaag aactttaagg   15720

cagttcttta ttatcaaaat aatgtgttca tgtctgaggc aaaatgttgg actgagactg   15780

accttactaa aggacctcac gaattttgct cacagcatac aatgctagtt aaacaaggag   15840

atgattacgt gtacctgcct tacccagatc catcaagaat attaggcgca ggctgttttg   15900

tcgatgatat tgtcaaaaca gatggtacac ttatgattga aaggttcgtg tcactggcta   15960

ttgatgctta cccacttaca aaacatccta atcaggagta tgctgatgtc tttcacttgt   16020

atttacaata cattagaaag ttacatgatg agcttactgg ccacatgttg gacatgtatt   16080

ccgtaatgct aactaatgat aacacctcac ggtactggga acctgagttt tatgaggcta   16140

tgtacacacc acatacagtc ttgcaggctg taggtgcttg tgtattgtgc aattcacaga   16200

cttcacttcg ttgcggtgcc tgtattagga gaccattcct atgttgcaag tgctgctatg   16260

accatgtcat ttcaacatca cacaaattag tgttgtctgt taatccctat gtttgcaatg   16320

ccccaggttg tgatgtcact gatgtgacac aactgtatct aggaggtatg agctattatt   16380

gcaagtcaca taagcctccc attagttttc cattatgtgc taatggtcag gtttttggtt   16440

tatacaaaaa cacatgtgta ggcagtgaca atgtcactga cttcaatgcg atagcaacat   16500

gtgattggac taatgctggc gattacatac ttgccaacac ttgtactgag agactcaagc   16560

ttttcgcagc agaaacgctc aaagccactg aggaaacatt taagctgtca tatggtattg   16620

ccactgtacg cgaagtactc tctgacagag aattgcatct ttcatgggag gttggaaaac   16680

ctagaccacc attgaacaga aactatgtct ttactggtta ccgtgtaact aaaaatagta   16740

aagtacagat tggagagtac acctttgaaa aaggtgacta tggtgatgct gttgtgtaca   16800

gaggtactac gacatacaag ttgaatgttg gtgattactt tgtgttgaca tctcacactg   16860

taatgccact tagtgcacct actctagtgc cacaagagca ctatgtgaga attactggct   16920

tgtacccaac actcaacatc tcagatgagt tttctagcaa tgttgcaaat tatcaaaagg   16980

tcggcatgca aaagtactct acactccaag gaccacctgg tactggtaag agtcattttg   17040

ccatcggact tgctctctat tacccatctg ctcgcatagt gtatacggca tgctctcatg   17100

cagctgttga tgccctatgt gaaaaggcat taaaatattt gcccatagat aaatgtagta   17160

gaatcatacc tgcgcgtgcg cgcgtagagt gttttgataa attcaaagtg aattcaacac   17220

tagaacagta tgttttctgc actgtaaatg cattgccaga aacaactgct gacattgtag   17280

tctttgatga aatctctatg gctactaatt atgacttgag tgttgtcaat gctagacttc   17340

gtgcaaaaca ctacgtctat attggcgatc ctgctcaatt accagccccc cgcacattgc   17400

tgactaaagg cacactagaa ccagaatatt ttaattcagt gtgcagactt atgaaaacaa   17460

taggtccaga catgttcctt ggaacttgtc gccgttgtcc tgctgaaatt gttgacactg   17520

tgagtgcttt agtttatgac aataagctaa aagcacacaa ggataagtca gctcaatgct   17580

tcaaaatgtt ctacaaaggt gttattacac atgatgtttc atctgcaatc aacagacctc   17640

aaataggcgt tgtaagagaa tttcttacac gcaatcctgc ttggagaaaa gctgttttta   17700

tctcacctta taattcacag aacgctgtag cttcaaaaat cttaggattg cctacgcaga   17760

ctgttgattc atcacagggt tctgaatatg actatgtcat attcacacaa actactgaaa   17820

cagcacactc ttgtaatgtc aaccgcttca atgtggctat cacaagggca aaaattggca   17880

ttttgtgcat aatgtctgat agagatcttt atgacaaact gcaatttaca agtctagaaa   17940

taccacgtcg caatgtggct acattacaag cagaaaatgt aactggactt tttaaggact   18000

gtagtaagat cattactggt cttcatccta cacaggcacc tacacacctc agcgttgata   18060

taaagttcaa gactgaagga ttatgtgttg acataccagg cataccaaag gacatgacct   18120

accgtagact catctctatg atgggtttca aaatgaatta ccaagtcaat ggttacccta   18180

atatgtttat cacccgcgaa gaagctattc gtcacgttcg tgcgtggatt ggctttgatg   18240

tagagggctg tcatgcaact agagatgctg tgggtactaa cctacctctc cagctaggat   18300

tttctacagg tgttaactta gtagctgtac cgactggtta tgttgacact gaaaataaca   18360

cagaattcac cagagttaat gcaaaacctc caccaggtga ccagtttaaa catcttatac   18420

cactcatgta taaaggcttg ccctggaatg tagtgcgtat taagatagta caaatgctca   18480

gtgatacact gaaaggattg tcagacagag tcgtgttcgt cctttgggcg catggctttg   18540

agcttacatc aatgaagtac tttgtcaaga ttggacctga aagaacgtgt tgtctgtgtg   18600

acaaacgtgc aacttgcttt tctacttcat cagatactta tgcctgctgg aatcattctg   18660

tgggttttga ctatgtctat aacccattta tgattgatgt tcagcagtgg ggctttacgg   18720

gtaaccttca gagtaaccat gaccaacatt gccaggtaca tggaaatgca catgtggcta   18780

gttgtgatgc tatcatgact agatgtttag cagtccatga gtgctttgtt aagcgcgttg   18840

attggtctgt tgaataccct attataggag atgaactgag ggttaattct gcttgcagaa   18900

aagtacaaca catggttgtg aagtctgcat tgcttgctga taagtttcca gttcttcatg   18960

acattggaaa tccaaaggct atcaagtgtg tgcctcaggc tgaagtagaa tggaagttct   19020

acgatgctca gccatgtagt gacaaagctt acaaaataga ggaactcttc tattcttatg   19080

ctacacatca cgataaattc actgatggtg tttgtttgtt ttggaattgt aacgttgatc   19140

gttacccagc caatgcaatt gtgtgtaggt ttgacacaag agtcttgtca aacttgaact   19200

taccaggctg tgatggtggt agtttgtatg tgaataagca tgcattccac actccagctt   19260

tcgataaaag tgcatttact aatttaaagc aattgccttt cttttactat tctgatagtc   19320

cttgtgagtc tcatggcaaa caagtagtgt cggatattga ttatgttcca ctcaaatctg   19380

ctacgtgtat tacacgatgc aatttaggtg gtgctgtttg cagacaccat gcaaatgagt   19440

accgacagta cttggatgca tataatatga tgatttctgc tggatttagc ctatggattt   19500

acaaacaatt tgatacttat aacctgtgga atacatttac caggttacag agtttagaaa   19560

atgtggctta taatgttgtt aataaaggac actttgatgg acacgccggc gaagcacctg   19620

tttccatcat taataatgct gtttacacaa aggtagatgg tattgatgtg gagatctttg   19680

aaaataagac aacacttcct gttaatgttg catttgagct ttgggctaag cgtaacatta   19740

aaccagtgcc agagattaag atactcaata atttgggtgt tgatatcgct gctaatactg   19800

taatctggga ctacaaaaga gaagccccag cacatgtatc tacaataggt gtctgcacaa   19860

tgactgacat tgccaagaaa cctactgaga gtgcttgttc ttcacttact gtcttgtttg   19920

atggtagagt ggaaggacag gtagaccttt ttagaaacgc ccgtaatggt gttttaataa   19980

cagaaggttc agtcaaaggt ctaacacctt caaagggacc agcacaagct agcgtcaatg   20040

gagtcacatt aattggagaa tcagtaaaaa cacagtttaa ctactttaag aaagtagacg   20100

gcattattca acagttgcct gaaacctact ttactcagag cagagactta gaggatttta   20160

agcccagatc acaaatggaa actgactttc tcgagctcgc tatggatgaa ttcatacagc   20220

gatataagct cgagggctat gccttcgaac acatcgttta tggagatttc agtcatggac   20280

aacttggcgg tcttcattta atgataggct tagccaagcg ctcacaagat tcaccactta   20340

aattagagga ttttatccct atggacagca cagtgaaaaa ttacttcata acagatgcgc   20400

aaacaggttc atcaaaatgt gtgtgttctg tgattgatct tttacttgat gactttgtcg   20460

agataataaa gtcacaagat ttgtcagtga tttcaaaagt ggtcaaggtt acaattgact   20520

atgctgaaat ttcattcatg ctttggtgta aggatggaca tgttgaaacc ttctacccaa   20580

aactacaagc aagtcaagcg tggcaaccag gtgttgcgat gcctaacttg tacaagatgc   20640

aaagaatgct tcttgaaaag tgtgaccttc agaattatgg tgaaaatgct gttataccaa   20700

aaggaataat gatgaatgtc gcaaagtata ctcaactgtg tcaatactta aatacactta   20760

ctttagctgt accctacaac atgagagtta ttcactttgg tgctggctct gataaaggag   20820

ttgcaccagg tacagctgtg ctcagacaat ggttgccaac tggcacacta cttgtcgatt   20880

cagatcttaa tgacttcgtc tccgacgcag attctacttt aattggagac tgtgcaacag   20940

tacatacggc taataaatgg gaccttatta ttagcgatat gtatgaccct aggaccaaac   21000

atgtgacaaa agagaatgac tctaaagaag ggtttttcac ttatctgtgt ggatttataa   21060

agcaaaaact agccctgggt ggttctatag ctgtaaagat aacagagcat tcttggaatg   21120

ctgaccttta caagcttatg ggccatttct catggtggac agcttttgtt acaaatgtaa   21180

atgcatcatc atcggaagca tttttaattg gggctaacta tcttggcaag ccgaaggaac   21240

aaattgatgg ctataccatg catgctaact acattttctg gaggaacaca aatcctatcc   21300

agttgtcttc ctattcactc tttgacatga gcaaatttcc tcttaaatta agaggaactg   21360

ctgtaatgtc tcttaaggag aatcaaatca atgatatgat ttattctctt ctggaaaaag   21420

gtaggcttat cattagagaa aacaacagag ttgtggtttc aagtgatatt cttgttaaca   21480

actaaacgaa catgtttatt ttcttattat ttcttactct cactagtggt agtgaccttg   21540

accggtgcac cacttttgat gatgttcaag ctcctaatta cactcaacat acttcatcta   21600

tgaggggggt ttactatcct gatgaaattt ttagatcaga cactctttat ttaactcagg   21660

atttatttct tccattttat tctaatgtta cagggtttca tactattaat catacgtttg   21720

gcaaccctgt catacctttt aaggatggta tttattttgc tgccacagag aaatcaaatg   21780

ttgtccgtgg ttgggttttt ggttctacca tgaacaacaa gtcacagtcg gtgattatta   21840

ttaacaattc tactaatgtt gttatacgag catgtaactt tgaattgtgt gacaaccctt   21900

tctttgctgt ttctaaaccc atgggtacac agacacatac tatgatattc gataatgcat   21960

ttaattgcac tttcgagtac atatctgatg ccttttcgct tgatgtttca gaaaagtcag   22020

gtaattttaa acacttacga gagtttgtgt ttaaaaataa agatgggttt ctctatgttt   22080

ataagggcta tcaacctata gatgtagttc gtgatctacc ttctggtttt aacactttga   22140

aacctatttt taagttgcct cttggtatta acattacaaa ttttagagcc attcttacag   22200

ccttttcacc tgctcaagac atttggggca cgtcagctgc agcctatttt gttggctatt   22260

taaagccaac tacatttatg ctcaagtatg atgaaaatgg tacaatcaca gatgctgttg   22320

attgttctca aaatccactt gctgaactca aatgctctgt taagagcttt gagattgaca   22380

aaggaattta ccagacctct aatttcaggg ttgttccctc aggagatgtt gtgagattcc   22440

ctaatattac aaacttgtgt ccttttggag aggtttttaa tgctactaaa ttcccttctg   22500

tctatgcatg ggagagaaaa aaaatttcta attgtgttgc tgattactct gtgctctaca   22560

actcaacatt tttttcaacc tttaagtgct atggcgtttc tgccactaag ttgaatgatc   22620

tttgcttctc caatgtctat gcagattctt ttgtagtcaa gggagatgat gtaagacaaa   22680

tagcgccagg acaaactggt gttattgctg attataatta taaattgcca gatgatttca   22740

tgggttgtgt ccttgcttgg aatactagga acattgatgc tacttcaact ggtaattata   22800

attataaata taggtatctt agacatggca agcttaggcc ctttgagaga gacatatcta   22860

atgtgccttt ctcccctgat ggcaaacctt gcaccccacc tgctcttaat tgttattggc   22920

cattaaatga ttatggtttt tacaccacta ctggcattgg ctaccaacct tacagagttg   22980

tagtactttc ttttgaactt ttaaatgcac cggccacggt ttgtggacca aaattatcca   23040

ctgaccttat taagaaccag tgtgtcaatt ttaattttaa tggactcact ggtactggtg   23100

tgttaactcc ttcttcaaag agatttcaac catttcaaca atttggccgt gatgtttctg   23160

atttcactga ttccgttcga gatcctaaaa catctgaaat attagacatt tcaccttgcg   23220

cttttggggg tgtaagtgta attacacctg gaacaaatgc ttcatctgaa gttgctgttc   23280

tatatcaaga tgttaactgc actgatgttt ctacagcaat tcatgcagat caactcacac   23340

cagcttggcg catatattct actggaaaca atgtattcca gactcaagca ggctgtctta   23400

taggagctga gcatgtcgac acttcttatg agtgcgacat tcctattgga gctggcattt   23460

gtgctagtta ccatacagtt tctttattac gtagtactag ccaaaaatct attgtggctt   23520

atactatgtc tttaggtgct gatagttcaa ttgcttactc taataacacc attgctatac   23580

ctactaactt ttcaattagc attactacag aagtaatgcc tgtttctatg gctaaaacct   23640

ccgtagattg taatatgtac atctgcggag attctactga atgtgctaat ttgcttctcc   23700

aatatggtag cttttgcaca caactaaatc gtgcactctc aggtattgct gctgaacagg   23760

atcgcaacac acgtgaagtg ttcgctcaag tcaaacaaat gtacaaaacc ccaactttga   23820

aatattttgg tggttttaat ttttcacaaa tattacctga ccctctaaag ccaactaaga   23880

ggtcttttat tgaggacttg ctctttaata aggtgacact cgctgatgct ggcttcatga   23940

agcaatatgg cgaatgccta ggtgatatta atgctagaga tctcatttgt gcgcagaagt   24000

tcaatggact tacagtgttg ccacctctgc tcactgatga tatgattgct gcctacactg   24060

ctgctctagt tagtggtact gccactgctg gatggacatt tggtgctggc gctgctcttc   24120

aaataccttt tgctatgcaa atggcatata ggttcaatgg cattggagtt acccaaaatg   24180

ttctctatga gaaccaaaaa caaatcgcca accaatttaa caaggcgatt agtcaaattc   24240

aagaatcact tacaacaaca tcaactgcat tgggcaagct gcaagacgtt gttaaccaga   24300

atgctcaagc attaaacaca cttgttaaac aacttagctc taattttggt gcaatttcaa   24360

gtgtgctaaa tgatatcctt tcgcgacttg ataaagtcga ggcggaggta caaattgaca   24420

ggttaattac aggcagactt caaagccttc aaacctatgt aacacaacaa ctaatcaggg   24480

ctgctgaaat cagggcttct gctaatcttg ctgctactaa aatgtctgag tgtgttcttg   24540

gacaatcaaa aagagttgac ttttgtggaa agggctacca ccttatgtcc ttcccacaag   24600

cagccccgca tggtgttgtc ttcctacatg tcacgtatgt gccatcccag gagaggaact   24660

tcaccacagc gccagcaatt tgtcatgaag gcaaagcata cttccctcgt gaaggtgttt   24720

ttgtgtttaa tggcacttct tggtttatta cacagaggaa cttcttttct ccacaaataa   24780

ttactacaga caatacattt gtctcaggaa attgtgatgt cgttattggc atcattaaca   24840

acacagttta tgatcctctg caacctgagc ttgactcatt caaagaagag ctggacaagt   24900

acttcaaaaa tcatacatca ccagatgttg atcttggcga catttcaggc attaacgctt   24960

ctgtcgtcaa cattcaaaaa gaaattgacc gcctcaatga ggtcgctaaa aatttaaatg   25020

aatcactcat tgaccttcaa gaattgggaa aatatgagca atatattaaa tggccttggt   25080

atgtttggct cggcttcatt gctggactaa ttgccatcgt catggttaca atcttgcttt   25140

gttgcatgac tagttgttgc agttgcctca agggtgcatg ctcttgtggt tcttgctgca   25200

agtttgatga ggatgactct gagccagttc tcaagggtgt caaattacat tacacataaa   25260

cgaacttatg gatttgttta tgagattttt tactcttaga tcaattactg cacagccagt   25320

aaaaattgac aatgcttctc ctgcaagtac tgttcatgct acagcaacga taccgctaca   25380

agcctcactc cctttcggat ggcttgttat tggcgttgca tttcttgctg tttttcagag   25440

cgctaccaaa ataattgcgc tcaataaaag atggcagcta gccctttata agggcttcca   25500

gttcatttgc aatttactgc tgctatttgt taccatctat tcacatcttt tgcttgtcgc   25560

tgcaggtatg gaggcgcaat ttttgtacct ctatgccttg atatattttc tacaatgcat   25620

caacgcatgt agaattatta tgagatgttg gctttgttgg aagtgcaaat ccaagaaccc   25680

attactttat gatgccaact actttgtttg ctggcacaca cataactatg actactgtat   25740

accatataac agtgtcacag atacaattgt cgttactgaa ggtgacggca tttcaacacc   25800

aaaactcaaa gaagactacc aaattggtgg ttattctgag gataggcact caggtgttaa   25860

agactatgtc gttgtacatg gctatttcac cgaagtttac taccagcttg agtctacaca   25920

aattactaca gacactggta ttgaaaatgc tacattcttc atctttaaca agcttgttaa   25980

agacccaccg aatgtgcaaa tacacacaat cgacggctct tcaggagttg ctaatccagc   26040

aatggatcca atttatgatg agccgacgac gactactagc gtgcctttgt aagcacaaga   26100

aagtgagtac gaacttatgt actcattcgt ttcggaagaa acaggtacgt taatagttaa   26160

tagcgtactt ctttttcttg ctttcgtggt attcttgcta gtcacactag ccatccttac   26220

tgcgcttcga ttgtgtgcgt actgctgcaa tattgttaac gtgagtttag taaaaccaac   26280

ggtttacgtc tactcgcgtg ttaaaaatct gaactcttct gaaggagttc ctgatcttct   26340

ggtctaaacg aactaactat tattattatt ctgtttggaa ctttaacatt gcttatcatg   26400

gcagacaacg gtactattac cgttgaggag cttaaacaac tcctggaaca atggaaccta   26460

gtaataggtt tcctattcct agcctggatt atgttactac aatttgccta ttctaatcgg   26520

aacaggtttt tgtacataat aaagcttgtt ttcctctggc tcttgtggcc agtaacactt   26580

gcttgttttg tgcttgctgc tgtctacaga attaattggg tgactggcgg gattgcgatt   26640

gcaatggctt gtattgtagg cttgatgtgg cttagctact tcgttgcttc cttcaggctg   26700

tttgctcgta cccgctcaat gtggtcattc aacccagaaa caaacattct tctcaatgtg   26760

cctctccggg ggacaattgt gaccagaccg ctcatggaaa gtgaacttgt cattggtgct   26820

gtgatcattc gtggtcactt gcgaatggcc ggacactccc tagggcgctg tgacattaag   26880

gacctgccaa aagagatcac tgtggctaca tcacgaacgc tttcttatta caaattagga   26940

gcgtcgcagc gtgtaggcac tgattcaggt tttgctgcat acaaccgcta ccgtattgga   27000

aactataaat taaatacaga ccacgccggt agcaacgaca atattgcttt gctagtacag   27060

taagtgacaa cagatgtttc atcttgttga cttccaggtt acaatagcag agatattgat   27120

tatcattatg aggactttca ggattgctat ttggaatctt gacgttataa taagttcaat   27180

agtgagacaa ttatttaagc ctctaactaa gaagaattat tcggagttag atgatgaaga   27240

acctatggag ttagattatc cataaaacga acatgaaaat tattctcttc ctgacattga   27300

ttgtatttac atcttgcgag ctatatcact atcaggagtg tgttagaggt acgactgtac   27360

tactaaaaga accttgccca tcaggaacat acgagggcaa ttcaccattt caccctcttg   27420

ctgacaataa atttgcacta acttgcacta gcacacactt tgcttttgct tgtgctgacg   27480

gtactcgaca tacctatcag ctgcgtgcaa gatcagtttc accaaaactt ttcatcagac   27540

aagaggaggt tcaacaagag ctctactcgc cactttttct cattgttgct gctctagtat   27600

ttttaatact ttgcttcacc attaagagaa agacagaatg aatgagctca ctttaattga   27660

cttctatttg tgctttttag cctttctgct attccttgtt ttaataatgc ttattatatt   27720

ttggttttca ctcgaaatcc aggatctaga agaaccttgt accaaagtct aaacgaacat   27780

gaaacttctc attgttttga cttgtatttc tctatgcagt tgcatatgca ctgtagtaca   27840

gcgctgtgca tctaataaac ctcatgtgct tgaagatcct tgtaaggtac aacactaggg   27900

gtaatactta tagcactgct tggctttgtg ctctaggaaa ggttttacct tttcatagat   27960

ggcacactat ggttcaaaca tgcacaccta atgttactat caactgtcaa gatccagctg   28020

gtggtgcgct tatagctagg tgttggtacc ttcatgaagg tcaccaaact gctgcattta   28080

gagacgtact tgttgtttta aataaacgaa caaattaaaa tgtctgataa tggaccccaa   28140

tcaaaccaac gtagtgcccc ccgcattaca tttggtggac ccacagattc aactgacaat   28200

aaccagaatg gaggacgcaa tggggcaagg ccaaaacagc gccgacccca aggtttaccc   28260

aataatactg cgtcttggtt cacagctctc actcagcatg gcaaggagga acttagattc   28320

cctcgaggcc agggcgttcc aatcaacacc aatagtggtc cagatgacca aattggctac   28380

taccgaagag ctacccgacg agttcgtggt ggtgacggca aaatgaaaga gctcagcccc   28440

agatggtact tctattacct aggaactggc ccagaagctt cacttcccta cggcgctaac   28500

aaagaaggca tcgtatgggt tgcaactgag ggagccttga atacacccaa agaccacatt   28560

ggcacccgca atcctaataa caatgctgcc accgtgctac aacttcctca aggaacaaca   28620

ttgccaaaag gcttctacgc agagggaagc agaggcggca gtcaagcctc ttctcgctcc   28680

tcatcacgta gtcgcggtaa ttcaagaaat tcaactcctg gcagcagtag gggaaattct   28740

cctgctcgaa tggctagcgg aggtggtgaa actgccctcg cgctattgct gctagacaga   28800

ttgaaccagc ttgagagcaa agtttctggt aaaggccaac aacaacaagg ccaaactgtc   28860

actaagaaat ctgctgctga ggcatctaaa aagcctcgcc aaaaacgtac tgccacaaaa   28920

cagtacaacg tcactcaagc atttgggaga cgtggtccag aacaaaccca aggaaatttc   28980

ggggaccaag acctaatcag acaaggaact gattacaaac attggccgca aattgcacaa   29040

tttgctccaa gtgcctctgc attctttgga atgtcacgca ttggcatgga agtcacacct   29100

tcgggaacat ggctgactta tcatggagcc attaaattgg atgacaaaga tccacaattc   29160

aaagacaacg tcatactgct gaacaagcac attgacgcat acaaaacatt cccaccaaca   29220

gagcctaaaa aggacaaaaa gaaaaagact gatgaagctc agcctttgcc gcagagacaa   29280

aagaagcagc ccactgtgac tcttcttcct gcggctgaca tggatgattt ctccagacaa   29340

cttcaaaatt ccatgagtgg agcttctgct gattcaactc aggcataaac actcatgatg   29400

accacacaag gcagatgggc tatgtaaacg ttttcgcaat tccgtttacg atacatagtc   29460

tactcttgtg cagaatgaat tctcgtaact aaacagcaca agtaggttta gttaacttta   29520

atctcacata gcaatcttta atcaatgtgt aacattaggg aggacttgaa agagccacca   29580

cattttcatc gaggccacgc ggagtacgat cgagggtaca gtgaataatg ctagggagag   29640

ctgcctatat ggaagagccc taatgtgtaa aattaatttt agtagtgcta tccccatgtg   29700

attttaatag cttcttagga gaatgacaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa a            29751

<210>  4

<211>  30119

<212>  DNA

<213>  人冠状病毒

<400>  4

gatttaagtg aatagcttgg ctatctcact tcccctcgtt ctcttgcaga actttgattt      60

taacgaactt aaataaaagc cctgttgttt agcgtatcgt tgcacttgtc tggtgggatt     120

gtggcattaa tttgcctgct catctaggca gtggacatat gctcaacact gggtataatt     180

ctaattgaat actatttttc agttagagcg tcgtgtctct tgtacgtctc ggtcacaata     240

cacggtttcg tccggtgcgt ggcaattcgg ggcacatcat gtctttcgtg gctggtgtga     300

ccgcgcaagg tgcgcgcggt acgtatcgag cagcgctcaa ctctgaaaaa catcaagacc     360

atgtgtctct aactgtgcca ctctgtggtt caggaaacct ggttgaaaaa ctttcaccat     420

ggttcatgga tggcgaaaat gcctatgaag tggtgaaggc catgttactt aaaaaggagc     480

cacttctcta tgtgcccatc cggctggctg gacacactag acacctccca ggtcctcgtg     540

tgtacctggt tgagaggctc attgcttgtg aaaatccatt catggttaac caattggctt     600

atagctctag tgcaaatggc agcctggttg gcacaacttt gcagggcaag cctattggta     660

tgttcttccc ttatgacatc gaacttgtca caggaaagca aaatattctc ctgcgcaagt     720

atggccgtgg tggttatcac tacaccccat tccactatga gcgagacaac acctcttgcc     780

ctgagtggat ggacgatttt gaggcggatc ctaaaggcaa atatgcccag aatctgctta     840

agaagttgat tggcggtgat gtcactccag ttgaccaata catgtgtggc gttgatggaa     900

aacccattag tgcctacgca tttttaatgg ccaaggatgg aataaccaaa ctggctgatg     960

ttgaagcgga cgtcgcagca cgtgctgatg acgaaggctt catcacatta aagaacaatc    1020

tatatagatt ggtttggcat gttgagcgta aagacgttcc atatcctaag caatctattt    1080

ttactattaa tagtgtggtc caaaaggatg gtgttgaaaa cactcctcct cactatttta    1140

ctcttggatg caaaatttta acgctcaccc cacgcaacaa gtggagtggc gtttctgact    1200

tgtccctcaa acaaaaactc ctttacacct tctatggtaa ggagtcactt gagaacccaa    1260

cctacattta ccactccgca ttcattgagt gtggaagttg tggtaatgat tcctggctta    1320

cagggaatgc tatccaaggg tttgcctgtg gatgtggggc atcatataca gctaatgatg    1380

tcgaagtcca atcatctggc atgattaagc caaatgctct tctttgtgct acttgcccct    1440

ttgctaaggg tgatagctgt tcttctaatt gcaaacattc agttgctcag ttggttagtt    1500

acctttctga acgctgtaat gttattgctg attctaagtc cttcacactt atctttggtg    1560

gcgtagctta cgcctacttt ggatgtgagg aaggtactat gtactttgtg cctagagcta    1620

agtctgttgt ctcaaggatt ggagactcca tctttacagg ctgtactggc tcttggaaca    1680

aggtcactca aattgctaac atgttcttgg aacagactca gcattccctt aactttgtgg    1740

gagagttcgt tgtcaacgat gttgtcctcg caattctctc tggaaccaca actaatgttg    1800

acaaaatacg ccagcttctc aaaggtgtca cccttgacaa gttgcgtgat tatttagctg    1860

actatgacgt agcagtcact gccggcccat tcatggataa tgctattaat gttggtggta    1920

caggattaca gtatgccgcc attactgcac cttatgtagt tctcactggc ttaggtgagt    1980

cctttaagaa agttgcaacc ataccgtata aggtttgcaa ctctgttaag gatactctgg    2040

cttattatgc tcacagcgtg ttgtacagag tttttcctta tgacatggat tctggtgtgt    2100

catcctttag tgaactactt tttgattgcg ttgatctttc agtagcttct acctattttt    2160

tagtccgcat cttgcaagat aagactggcg actttatgtc tacaattatt acttcctgcc    2220

aaactgctgt tagtaagctt ctagatacat gttttgaagc tacagaagca acatttaact    2280

tcttgttaga tttggcagga ttgttcagaa tctttctccg caatgcctat gtgtacactt    2340

cacaagggtt tgtggtggtc aatggcaaag tttctacact tgtcaaacaa gtgttagact    2400

tgcttaataa gggtatgcaa cttttgcata caaaggtctc ctgggctggt tctaaaatca    2460

ttgctgttat ctacagcggc agggagtctc taatattccc atcgggaacc tattactgtg    2520

tcaccactaa ggctaagtcc gttcaacaag atcttgacgt tattttgcct ggtgagtttt    2580

ccaagaagca gttaggactg ctccaaccta ctgacaattc tacaactgtt agtgttactg    2640

tatccagtaa catggttgaa actgttgtgg gtcaacttga gcaaactaat atgcatagtc    2700

ctgatgttat agtaggtgac tatgtcatta ttagtgaaaa attgtttgtg cgtagtaagg    2760

aagaagacgg atttgccttc taccctgctt gcactaatgg tcatgctgta ccgactctct    2820

ttagacttaa gggaggtgca cctgtaaaaa aagtagcctt tggcggtgat caagtacatg    2880

aggttgctgc tgtaagaagt gttactgtcg agtacaacat tcatgctgta ttagacacac    2940

tacttgcttc ttctagtctt agaacctttg ttgtagataa gtctttgtca attgaggagt    3000

ttgctgacgt agtaaaggaa caagtctcag acttgcttgt taaattactg cgtggaatgc    3060

cgattccaga ttttgattta gacgatttta ttgacgcacc atgctattgc tttaacgctg    3120

agggtgatgc atcctggtct tctactatga tcttctctct tcaccccgtc gagtgtgacg    3180

aggagtgttc tgaagtagag gcttcagatt tagaagaagg tgaatcagag tgcatttctg    3240

agacttcaac tgaacaagtt gacgtttctc atgagacttc tgacgacgag tgggctgctg    3300

cagttgatga agcgttccct ctcgatgaag cagaagatgt tactgaatct gtgcaagaag    3360

aagcacaacc agtagaagta cctgttgaag atattgcgca ggttgtcata gctgacacct    3420

tacaggaaac tcctgttgtg cctgatactg ttgaagtccc accgcaagtg gtgaaacttc    3480

cgtctgcacc tcagactatc cagcccgagg taaaagaagt tgcacctgtc tatgaggctg    3540

ataccgaaca gacacagaat gttactgtta aacctaagag gttacgcaaa aagcgtaatg    3600

ttgacccttt gtccaatttt gaacataagg ttattacaga gtgcgttacc atagttttag    3660

gtgacgcaat tcaagtagcc aagtgctatg gggagtctgt gttagttaat gctgctaaca    3720

cacatcttaa gcatggcggt ggtatcgctg gtgctattaa tgcggcttca aaaggggctg    3780

tccaaaaaga gtcagatgag tatattctgg ctaaagggcc gttacaagta ggagattcag    3840

ttctcttgca aggccattct ctagctaaga atatcctgca tgtcgtaggc ccagatgccc    3900

gcgctaaaca ggatgtttct ctccttagta agtgctataa ggctatgaat gcatatcctc    3960

ttgtagtcac tcctcttgtt tcagcaggca tatttggtgt aaaaccagct gtgtcttttg    4020

attatcttat tagggaggct aagactagag ttttagtcgt cgttaattcc caagatgtct    4080

ataagagtct taccatagtt gacattccac agagtttgac tttttcatat gatgggttac    4140

gtggcgcaat acgtaaagct aaagattatg gttttactgt ttttgtgtgc acagacaact    4200

ctgctaacac taaagttctt aggaacaagg gtgttgatta tactaagaag tttcttacag    4260

ttgacggtgt gcaatattat tgctacacgt ctaaggacac tttagatgat atcttacaac    4320

aggctaataa gtctgttggt attatatcta tgcctttggg atatgtgtct catggtttag    4380

acttaatgca agcagggagt gtcgtgcgta gagttaacgt gccctacgtg tgtctcctag    4440

ctaataaaga gcaagaagct attttgatgt ctgaagacgt taagttaaac ccttcagaag    4500

attttataaa gcacgtccgc actaatggtg gttacaattc ttggcattta gtcgagggtg    4560

aactattggt gcaagactta cgcttaaata agctcctgca ttggtctgat caaaccatat    4620

gctacaagga tagtgtgttt tatgttgtaa agaatagtac agcttttcca tttgaaacac    4680

tttcagcatg tcgtgcgtat ttggattcac gcacgacaca gcagttaaca atcgaagtct    4740

tagtgactgt cgatggtgta aattttagaa cagtcgttct aaataataag aacacttata    4800

gatcacagct tggatgcgtt ttctttaatg gtgctgatat ttctgacacc attcctgatg    4860

agaaacagaa tggtcacagt ttatatctag cagacaattt gactgctgat gaaacaaagg    4920

cgcttaaaga gttatatggc cccgttgatc ctactttctt acacagattc tattcactta    4980

aggctgcagt ccatgggtgg aagatggttg tgtgtgataa ggtacgttct ctcaaattga    5040

gtgataataa ttgttatctt aatgcagtta ttatgacact tgatttattg aaggacatta    5100

aatttgttat acctgctcta cagcatgcat ttatgaaaca taagggcggt gattcaactg    5160

acttcatagc cctcattatg gcttatggca attgcacatt tggtgctcca gatgatgcct    5220

ctcggttact tcataccgtg cttgcaaagg ctgagttatg ctgttctgca cgcatggttt    5280

ggagagagtg gtgcaatgtc tgtggcataa aagatgttgt tctacaaggc ttaaaagctt    5340

gttgttacgt gggtgtgcaa actgttgaag atctgcgtgc tcgcatgaca tatgtatgcc    5400

agtgtggtgg tgaacgtcat cggcaattag tcgaacacac caccccctgg ttgctgctct    5460

caggcacacc aaatgaaaaa ttggtgacaa cctccacggc gcctgatttt gtagcattta    5520

atgtctttca gggcattgaa acggctgttg gccattatgt tcatgctcgc ctgaagggtg    5580

gtcttatttt aaagtttgac tctggcaccg ttagcaagac ttcagactgg aagtgcaagg    5640

tgacagatgt acttttcccc ggccaaaaat acagtagcga ttgtaatgtc gtacggtatt    5700

ctttggacgg taatttcaga acagaggttg atcccgacct atctgctttc tatgttaagg    5760

atggtaaata ctttacaagt gaaccacccg taacatattc accagctaca attttagctg    5820

gtagtgtcta cactaatagc tgccttgtat cgtctgatgg acaacctggc ggtgatgcta    5880

ttagtttgag ttttaataac cttttagggt ttgattctag taaaccagtc actaagaaat    5940

acacttactc cttcttgcct aaagaagacg gcgatgtgtt gttggctgag tttgacactt    6000

atgaccctat ttataagaat ggtgccatgt ataaaggcaa accaattctt tgggtcaata    6060

aagcatctta tgatactaat cttaataagt tcaatagagc tagtttgcgt caaatttttg    6120

acgtagcccc cattgaactc gaaaataaat tcacaccttt gagtgtggag tctacaccag    6180

ttgaacctcc aactgtagat gtggtagcac ttcaacagga aatgacaatt gtcaaatgta    6240

agggtttaaa taaacctttc gtgaaggaca atgtcagttt cgttgctgat gattcaggta    6300

ctcccgttgt tgagtatctg tctaaagaag acctacatac attgtatgta gaccctaagt    6360

atcaagtcat tgtcttaaaa gacaatgtac tttcttctat gcttagattg cacaccgttg    6420

agtcaggtga tattaacgtt gttgcagctt ccggatcttt gacacgtaaa gtgaagttac    6480

tatttagggc ttcattttat ttcaaagaat ttgctacccg cactttcact gctaccactg    6540

ctgtaggtag ttgtataaag agtgtagtgc ggcatctagg tgttactaaa ggcatattga    6600

caggctgttt tagttttgcc aagatgttat ttatgcttcc actagcttac tttagtgatt    6660

caaaactcgg caccacagag gttaaagtga gtgctttgaa aacagccggc gttgtgacag    6720

gtaatgttgt aaaacagtgt tgcactgctg ctgttgattt aagtatggat aagttgcgcc    6780

gtgtggattg gaaatcaacc ctacggttgt tacttatgtt atgcacaact atggtattgt    6840

tgtcttctgt gtatcacttg tatgtcttca atcaggtctt atcaagtgat gttatgtttg    6900

aagatgccca aggtttgaaa aagttctaca aagaagttag agcttaccta ggaatctctt    6960

ctgcttgtga cggtcttgct tcagcttata gggcgaattc ctttgatgta cctacattct    7020

gcgcaaaccg ttctgcaatg tgtaattggt gcttgattag ccaagattcc ataactcact    7080

acccagctct taagatggtt caaacacatc ttagccacta tgttcttaac atagattggt    7140

tgtggtttgc atttgagact ggtttggcat acatgctcta tacctcggcc ttcaactggt    7200

tgttgttggc aggtacattg cattatttct ttgcacagac ttccatattt gtagactggc    7260

ggtcatacaa ttatgctgtg tctagtgcct tctggttatt cacccacatt ccaatggcgg    7320

gtttggtacg aatgtataat ttgttagcat gcctttggct tttacgcaag ttttatcagc    7380

atgtaatcaa tggttgcaaa gatacggcat gcttgctctg ctataagagg aaccgactta    7440

ctagagttga agcttctacc gttgtctgtg gtggaaaacg tacgttttat atcacagcaa    7500

atggcggtat ttcattctgt cgtaggcata attggaattg tgtggattgt gacactgcag    7560

gtgtggggaa taccttcatc tgtgaagaag tcgcaaatga cctcactacc gccctacgca    7620

ggcctattaa cgctacggat agatcacatt attatgtgga ttccgttaca gttaaagaga    7680

ctgttgttca gtttaattat cgtagagacg gtcaaccatt ctacgagcgg tttcccctct    7740

gcgcttttac aaatctagat aagttgaagt tcaaagaggt ctgtaaaact actactggta    7800

tacctgaata caactttatc atctacgact catcagatcg tggccaggaa agtttagcta    7860

ggtctgcatg tgtttattat tctcaagtct tgtgtaaatc aattcttttg gttgactcaa    7920

gtttggttac ttctgttggt gattctagtg aaatcgccac taaaatgttt gattcctttg    7980

ttaatagttt cgtctcgctg tataatgtca cacgcgataa gttggaaaaa cttatctcta    8040

ctgctcgtga tggcgtaagg cgaggcgata acttccatag tgtcttaaca acattcattg    8100

acgcagcacg aggccccgca ggtgtggagt ctgatgttga gaccaatgaa attgttgact    8160

ctgtgcagta tgctcataaa catgacatac aaattactaa tgagagctac aataattatg    8220

taccctcata tgttaaacct gatagtgtgt ctaccagcga tttaggtagt ctcattgatt    8280

gtaatgcggc ttcagttaac caaattgtct tgcgtaattc taatggtgct tgcatttgga    8340

acgctgctgc atatatgaaa ctctcggatg cacttaaacg acagattcgc attgcatgcc    8400

gtaagtgtaa tttagctttc cggttaacca cctcaaagct acgcgctaat gataatatct    8460

tatcagttag attcactgct aacaaaattg ttggtggtgc tcctacatgg tttaatgcgt    8520

tgcgtgactt tacgttaaag ggttatgttc ttgctaccat tattgtgttt ctgtgtgctg    8580

tactgatgta tttgtgttta cctacatttt ctatggcacc tgttgaattt tatgaagacc    8640

gcatcttgga ctttaaagtt cttgataatg gtatcattag ggatgtaaat cctgatgata    8700

agtgctttgc taataagcac cggtccttca cacaatggta tcatgagcat gttggtggtg    8760

tctatgacaa ctctatcaca tgcccattga cagttgcagt aattgctgga gttgctggtg    8820

ctcgcattcc agacgtacct actacattgg cttgggtgaa caatcagata attttctttg    8880

tttctcgagt ctttgctaat acaggcagtg tttgctacac tcctatagat gagataccct    8940

ataagagttt ctctgatagt ggttgcattc ttccatctga gtgcactatg tttagggatg    9000

cagagggccg tatgacacca tactgccatg atcctactgt tttgcctggg gcttttgcgt    9060

acagtcagat gaggcctcat gttcgttacg acttgtatga tggtaacatg tttattaaat    9120

ttcctgaagt agtatttgaa agtacactta ggattactag aactctgtca actcagtact    9180

gccggttcgg tagttgtgag tatgcacaag agggtgtttg tattaccaca aatggctcgt    9240

gggccatttt taatgaccac catcttaata gacctggtgt ctattgtggc tctgatttta    9300

ttgacattgt caggcggtta gcagtatcac tgttccagcc tattacttat ttccaattga    9360

ctacctcatt ggtcttgggt ataggtttgt gtgcgttcct gactttgctc ttctattata    9420

ttaataaagt aaaacgtgct tttgcagatt acacccagtg tgctgtaatt gctgttgttg    9480

ctgctgttct taatagcttg tgcatctgct ttgttacctc tataccattg tgtatagtac    9540

cttacactgc attgtactat tatgctacat tctattttac taatgagcct gcatttatta    9600

tgcatgtttc ttggtacatt atgttcgggc ctatcgttcc catatggatg acctgcgtct    9660

atacagttgc aatgtgcttt agacacttct tctgggtttt agcttatttt agtaagaaac    9720

atgtagaagt ttttactgat ggtaagctta attgtagttt ccaggacgct gcctctaata    9780

tctttgttat taacaaggac acttatgcag ctcttagaaa ctctttaact aatgatgcct    9840

attcacgatt tttggggttg tttaacaagt ataagtactt ctctggtgct atggaaacag    9900

ccgcttatcg tgaagctgca gcatgtcatc ttgctaaagc cttacaaaca tacagcgaga    9960

ctggtagtga tcttctttac caaccaccca actgtagcat aacctctggc gtgttgcaaa   10020

gcggtttggt gaaaatgtca catcccagtg gagatgttga ggcttgtatg gttcaggtta   10080

cctgcggtag catgactctt aatggtcttt ggcttgacaa cacagtctgg tgcccacgac   10140

acgtaatgtg cccggctgac cagttgtctg atcctaatta tgatgccttg ttgatttcta   10200

tgactaatca tagtttcagt gtgcaaaaac acattggcgc tccagcaaac ttgcgtgttg   10260

ttggtcatgc catgcaaggc actcttttga agttgactgt cgatgttgct aaccctagca   10320

ctccagccta cacttttaca acagtgaaac ctggcgcagc atttagtgtg ttagcatgct   10380

ataatggtcg tccgactggt acattcactg ttgtaatgcg ccctaactac acaattaagg   10440

gttcctttct gtgtggttct tgtggtagtg ttggttacac caaggagggt agtgtgatca   10500

atttctgtta catgcatcaa atggaacttg ctaatggtac acataccggt tcagcatttg   10560

atggtactat gtatggtgcc tttatggata aacaagtgca ccaagttcag ttaacagaca   10620

aatactgcag tgttaatgta gtagcttggc tttacgcagc aatacttaat ggttgcgctt   10680

ggtttgtaaa acctaatcgc actagtgttg tttcttttaa tgaatgggct cttgccaacc   10740

aattcactga atttgttggc actcaatccg ttgacatgtt agctgtcaaa acaggcgttg   10800

ctattgaaca gctgctttat gcgatccaac aactgtatac tgggttccag ggaaagcaaa   10860

tccttggcag taccatgttg gaagatgaat tcacacctga ggatgttaat atgcagatta   10920

tgggtgtggt tatgcagagt ggtgtgagaa aagttacata tggtactgcg cattggttgt   10980

ttgcgaccct tgtctcaacc tatgtgataa tcttacaagc cactaaattt actttgtgga   11040

actacttgtt tgagactatt cccacacagt tgttcccact cttatttgtg actatggcct   11100

tcgttatgtt gttggttaaa cacaaacaca cctttttgac acttttcttg ttgcctgtgg   11160

ctatttgttt gacttatgca aacatagtct acgagcccac tactcccatt tcgtcagcgc   11220

tgattgcagt tgcaaattgg cttgccccca ctaatgctta tatgcgcact acacatactg   11280

atattggtgt ctacattagt atgtcacttg tattagtcat tgtagtgaag agattgtaca   11340

acccatcact ttctaacttt gcgttagcat tgtgcagtgg tgtaatgtgg ttgtacactt   11400

atagcattgg agaagcctca agccccattg cctatctggt ttttgtcact acactcacta   11460

gtgattatac gattacagtc tttgttactg tcaaccttgc aaaagtttgc acttatgcca   11520

tctttgctta ctcaccacag cttacacttg tgtttccgga agtgaagatg atacttttat   11580

tatacacatg tttaggtttc atgtgtactt gctattttgg tgtcttctct cttttgaacc   11640

ttaagcttag agcacctatg ggtgtctatg actttaaggt ctcaacacaa gagttcagat   11700

tcatgactgc taacaatcta actgcaccta gaaattcttg ggaggctatg gctctgaact   11760

ttaagttaat aggtattggc ggtacacctt gtataaaggt tgctgctatg cagtctaaac   11820

ttacagatct taaatgcaca tctgtggttc tcctctctgt gctccaacag ttacacttag   11880

aggctaatag tagggcctgg gctttctgtg ttaaatgcca taatgatata ttggcagcaa   11940

cagaccccag tgaggctttc gagaaattcg taagtctctt tgctacttta atgacttttt   12000

ctggtaatgt agatcttgat gcgttagcta gtgatatttt tgacactcct agcgtacttc   12060

aagctactct ttctgagttt tcacacttag ctacctttgc tgagttggaa gctgcgcaga   12120

aagcctatca ggaagctatg gactctggtg acacctcacc acaagttctt aaggctttgc   12180

agaaggctgt taatatagct aaaaacgcct atgagaagga taaggcagtg gcccgtaagt   12240

tagaacgtat ggctgatcag gctatgactt ctatgtataa gcaagcacgt gctgaagaca   12300

agaaagcaaa aattgtcagt gctatgcaaa ctatgttgtt tggtatgatt aagaagctcg   12360

acaacgatgt tcttaatggt atcatttcta acgctaggaa tggttgtata cctcttagtg   12420

tcatcccact gtgtgcttca aataaacttc gcgttgtaat tcctgacttc accgtctgga   12480

atcaggtagt cacatatccc tcgcttaact acgctggggc tttgtgggac attacagtta   12540

taaacaatgt ggacaatgaa attgttaagt cttcagatgt tgtagacagc aatgaaaatt   12600

taacatggcc acttgtttta gaatgcacta gggcatccac ttctgccgtt aagttgcaaa   12660

ataatgagat caaaccttca ggtctaaaaa ccatggttgt gtctgcgggt caagagcaaa   12720

ctaactgtaa tactagttcc ttagcttatt acgaacctgt gcagggtcgt aaaatgctga   12780

tggctcttct ttctgataat gcctatctca aatgggcgcg tgttgaaggt aaggacggat   12840

ttgtcagtgt agagctacaa cctccttgca aattcttgat tgcgggacca aaaggacctg   12900

aaatccgata tctctatttt gttaaaaatc ttaacaacct tcatcgcggg caagtgttag   12960

ggcacattgc tgcgactgtt agattgcaag ctggttctaa caccgagttt gcctctaatt   13020

cctcggtgtt gtcacttgtt aacttcaccg ttgatcctca aaaagcttat ctcgatttcg   13080

tcaatgcggg aggtgcccca ttgacaaatt gtgttaagat gcttactcct aaaactggta   13140

caggtatagc tatatctgtt aaaccagaga gtacagctga tcaagagact tatggtggag   13200

cttcagtgtg tctctattgc cgtgcgcata tagaacatcc tgatgtctct ggtgtttgta   13260

aatataaggg taagtttgtc caaatccctg ctcagtgtgt ccgtgaccct gtgggatttt   13320

gtttgtcaaa taccccctgt aatgtctgtc aatattggat tggatatggg tgcaattgtg   13380

actcgcttag gcaagcagca ctgccccaat ctaaagattc caatttttta aacgagtccg   13440

gggttctatt gtaaatgccc gaatagaacc ctgttcaagt ggtttgtcca ctgatgtcgt   13500

ctttagggca tttgacatct gcaactataa ggctaaggtt gctggtattg gaaaatacta   13560

caagactaat acttgtaggt ttgtagaatt agatgaccaa gggcatcatt tagactccta   13620

ttttgtcgtt aagaggcata ctatggagaa ttatgaacta gagaagcact gttacgactt   13680

gttacgtgac tgtgatgctg tagctcccca tgatttcttc atctttgatg tagacaaagt   13740

taaaacacct catattgtac gtcagcgttt aactgagtac actatgatgg atcttgtata   13800

tgccctgagg cactttgatc aaaatagcga agtgcttaag gctatcttag tgaagtatgg   13860

ttgctgtgat gttacctact ttgaaaataa actctggttt gattttgttg aaaatcccag   13920

tgttattggt gtttatcata aacttggaga acgtgtacgc caagctatct taaacactgt   13980

taaattttgt gaccacatgg tcaaggctgg tttagtcggt gtgctcacac tagacaacca   14040

ggaccttaat ggcaagtggt atgattttgg tgacttcgta atcactcaac ctggttcagg   14100

agtagctata gttgatagct actattctta tttgatgcct gtgctctcaa tgaccgattg   14160

tctggccgct gagacacata gggattgtga ttttaataaa ccactcattg agtggccact   14220

tactgagtat gattttactg attataaggt acaactcttt gagaagtact ttaaatattg   14280

ggatcagacg tatcacgcaa attgcgttaa ttgtactgat gaccgttgtg tgttacattg   14340

tgctaatttc aatgtattgt ttgctatgac catgcctaag acttgtttcg gacccatagt   14400

ccgaaagatc tttgttgatg gcgtgccatt tgtagtatct tgtggttatc actacaaaga   14460

attaggttta gtcatgaata tggatgttag tctccataga cataggctct ctcttaagga   14520

gttgatgatg tatgccgctg atccagccat gcacattgcc tcctctaacg cttttcttga   14580

tttgaggaca tcatgtttta gtgtcgctgc acttacaact ggtttgactt ttcaaactgt   14640

gcggcctggc aattttaacc aagacttcta tgatttcgtg gtatctaaag gtttctttaa   14700

ggagggctct tcagtgacgc tcaaacattt tttctttgct caagatggta atgctgctat   14760

tacagattat aattactatt cttataatct gcctactatg tgtgacatca aacaaatgtt   14820

gttctgcatg gaagttgtaa acaagtactt cgaaatctat gacggtggtt gtcttaatgc   14880

ttctgaagtg gttgttaata atttagacaa gagtgctggc catcctttta ataagtttgg   14940

caaagctcgt gtctattatg agagcatgtc ttaccaggag caagatgaac tttttgccat   15000

gacaaagcgt aacgtcattc ctaccatgac tcaaatgaat ctaaaatatg ctattagtgc   15060

taagaataga gctcgcactg ttgcaggcgt gtccatactt agcacaatga ctaatcgcca   15120

gtaccatcag aaaatgctta agtccatggc tgcaactcgt ggagcgactt gcgtcattgg   15180

tactacaaag ttctacggtg gctgggattt catgcttaaa acattgtaca aagatgttga   15240

taatccgcat cttatgggtt gggattaccc taagtgtgat agagctatgc ctaatatgtg   15300

tagaatcttc gcttcactca tattagctcg taaacatggc acttgttgta ctacaaggga   15360

cagattttat cgcttggcaa atgagtgtgc tcaggtgcta agcgaatatg ttctatgtgg   15420

tggtggttac tacgtcaaac ctggaggtac cagtagcgga gatgccacca ctgcatatgc   15480

caatagtgtc tttaacattt tgcaggcgac aactgctaat gtcagtgcac ttatgggtgc   15540

taatggcaac aagattgttg acaaagaagt taaagacatg cagtttgatt tgtatgtcaa   15600

tgtttacagg agcactagcc cagaccccaa atttgttgat aaatactatg cttttcttaa   15660

taagcacttt tctatgatga tactgtctga tgacggtgtc gtttgctata atagtgatta   15720

tgcagctaag ggttacattg ctggaataca gaattttaag gaaacgctgt attatcagaa   15780

caatgtcttt atgtctgaag ctaaatgctg ggtggaaacc gatctgaaga aagggccaca   15840

tgaattctgt tcacagcata cgctttatat taaggatggc gacgatggtt acttccttcc   15900

ttatccagac ccttcaagaa ttttgtctgc cggttgcttt gtagatgata tcgttaagac   15960

tgacggtaca ctcatggtag agcggtttgt gtctttggct atagatgctt accctctcac   16020

aaagcatgaa gatatagaat accagaatgt attctgggtc tacttacagt atatagaaaa   16080

actgtataaa gaccttacag gacacatgct tgacagttat tctgtcatgc tatgtggtga   16140

taattctgct aagttttggg aagaggcatt ctatagagat ctctatagtt cgcctaccac   16200

tttgcaggct gtcggttcat gcgttgtatg ccattcacag acttccctac gctgtgggac   16260

atgcatccgt agaccatttc tctgctgtaa atgctgctat gatcatgtta tagcaactcc   16320

acataagatg gttttgtctg tttctcctta cgtttgtaat gcccctggtt gtggcgtttc   16380

agacgttact aagctatatt taggtggtat gagctacttt tgtgtagatc atagacctgt   16440

gtgtagtttt ccactttgcg ctaatggtct tgtattcggc ttatacaaga atatgtgcac   16500

aggtagtcct tctatagttg aatttaatag gttggctacc tgtgactgga ctgaaagtgg   16560

tgattacacc cttgccaata ctacaacaga accactcaaa ctttttgctg ctgagacttt   16620

acgtgccact gaagaggcgt ctaagcagtc ttatgctatt gccaccatca aagaaattgt   16680

tggtgagcgc caactattac ttgtgtggga ggctggcaag tccaaaccac cactcaatcg   16740

taattatgtt tttactggtt atcatataac caaaaatagt aaagtgcagc tcggtgagta   16800

cattttcgag cgcattgatt atagtgatgc tgtatcctac aagtctagta caacgtataa   16860

actgactgta ggtgacatct tcgtacttac ctctcactct gtggctacct tgacggcgcc   16920

cacaattgtg aatcaagaga ggtatgttaa aattactggg ttgtacccaa ccattacggt   16980

acctgaagag ttcgcaagtc atgttgccaa cttccaaaaa tcaggttata gtaaatatgt   17040

cactgttcag ggaccacctg gcactggcaa aagtcatttt gctatagggt tagcgattta   17100

ctaccctaca gcacgtgttg tttatacagc atgttcacac gcagctgttg atgctttgtg   17160

tgaaaaagct tttaaatatt tgaacattgc taaatgttcc cgtatcattc ctgcaaaggc   17220

acgtgttgag tgctatgaca ggtttaaagt taatgagaca aattctcaat atttgtttag   17280

tactattaat gctctaccag aaacttctgc cgatattctg gtggttgatg aggttagtat   17340

gtgcactaat tatgatcttt caattattaa tgcacgtatt aaagctaagc acattgtcta   17400

tgtaggagat ccagcacagt tgccagctcc taggactttg ttgactagag gcacattgga   17460

accagaaaat ttcaatagtg tcactagatt gatgtgtaac ttaggtcctg acatattttt   17520

aagtatgtgc tacaggtgtc ctaaggaaat agtaagcact gtgagcgctc ttgtctacaa   17580

taataaattg ttagccaaga aggagctttc aggccagtgc tttaaaatac tctataaggg   17640

caatgtgacg catgatgcta gctctgccat taatagacca caactcacat ttgtgaagaa   17700

ttttattact gccaatccgg catggagtaa ggcagtcttt atttcgcctt acaattcaca   17760

gaatgctgtg tctcgttcaa tgctgggtct taccactcag actgttgatt cctcacaggg   17820

ttcagaatac cagtacgtta tcttctgtca aacagcagat acggcacatg ctaacaacat   17880

taacagattt aatgttgcaa tcactcgtgc ccaaaaaggt attctttgtg ttatgacatc   17940

tcaggcactc tttgagtcct tagagtttac tgaattgtct tttactaatt acaagctcca   18000

gtctcagatt gtaactggcc tttttaaaga ttgctctaga gaaacttctg gcctctcacc   18060

tgcttatgca ccaacatatg ttagtgttga tgacaagtat aagacgagtg atgagctttg   18120

cgtgaatctt aatttacccg caaatgtccc atactctcgt gttatttcca ggatgggctt   18180

taaactcgat gcaacagttc ctggatatcc taagcttttc attactcgtg aagaggctgt   18240

aaggcaagtt cgaagctgga taggcttcga tgttgagggt gctcatgctt cccgtaatgc   18300

atgtggcacc aatgtgcctc tacaattagg attttcaact ggtgtgaact ttgttgttca   18360

gccagttggt gttgtagaca ctgagtgggg taacatgtta acgggcattg ctgcacgtcc   18420

tccaccaggt gaacagttta agcacctcgt gcctcttatg cataaggggg ctgcgtggcc   18480

tattgttaga cgacgtatag tgcaaatgtt gtcagacact ttagacaaat tgtctgatta   18540

ctgtacgttt gtttgttggg ctcatggctt tgaattaacg tctgcatcat acttttgcaa   18600

gataggtaag gaacagaagt gttgcatgtg caatagacgc gctgcagcgt actcttcacc   18660

tctgcaatct tatgcctgct ggactcattc ctgcggttat gattatgtct acaacccttt   18720

ctttgtcgat gttcaacagt ggggttatgt aggcaatctt gctactaatc acgatcgtta   18780

ttgctctgtc catcaaggag ctcatgtggc ttctaatgat gcaataatga ctcgttgttt   18840

agctattcat tcttgtttta tagaacgtgt ggattgggat atagagtatc cttatatctc   18900

acatgaaaag aaattgaatt cctgttgtag aatcgttgag cgcaacgtcg tacgtgctgc   18960

tcttcttgcc ggttcatttg acaaagtcta tgatattggc aatcctaaag gaattcctat   19020

tgttgatgac cctgtggttg attggcatta ttttgatgca cagcccttga ccaggaaggt   19080

acaacagctt ttctatacag aggacatggc ctcaagattt gctgatgggc tctgcttatt   19140

ttggaactgt aatgtaccaa aatatcctaa taatgcaatt gtatgcaggt ttgacacacg   19200

tgtgcattct gagttcaatt tgccaggttg tgatggcggt agtttgtatg ttaacaagca   19260

cgcttttcat acaccagcat atgatgtgag tgcattccgt gatctgaaac ctttaccatt   19320

cttttattat tctactacac catgtgaagt gcatggtaat ggtagtatga tagaggatat   19380

tgattatgta cccctaaaat ctgcagtctg tattacagct tgtaatttag ggggcgctgt   19440

ttgtaggaag catgctacag agtacagaga gtatatggaa gcatataatc ttgtctctgc   19500

atcaggtttc cgcctttggt gttataagac ctttgatatt tataatctct ggtctacttt   19560

tacaaaagtt caaggtttgg aaaacattgc ttttaatgtt gttaaacaag gccattttat   19620

tggtgttgag ggtgaactac ctgtagctgt agtcaatgat aagatcttca ccaagagtgg   19680

cgttaatgac atttgtatgt ttgagaataa aaccactttg cctactaata tagcttttga   19740

actctatgct aagcgtgctg tacgctcgca tcccgatttc aaattgctac acaatttaca   19800

agcagacatt tgctacaagt tcgtcctttg ggattatgaa cgtagcaata tttatggtac   19860

tgctactatt ggtgtatgta agtacactga tattgatgtt aattcagctt tgaatatatg   19920

ttttgacata cgcgataatt gttcattgga gaagttcatg tctactccca atgccatctt   19980

tatttctgat agaaaaatca agaaataccc ttgtatggta ggtcctgatt atgcttactt   20040

caatggtgct atcatccgtg atagtgatgt tgttaaacaa ccagtgaagt tctacttgta   20100

taagaaagtc aataatgagt ttattgatcc tactgagtgt atttacactc agagtcgctc   20160

ttgtagtgac ttcctacccc tttctgacat ggagaaagac tttctatctt ttgatagtga   20220

tgttttcatt aagaagtatg gcttggaaaa ctatgctttt gagcacgtag tctatggaga   20280

cttctctcat actacgttag gcggtcttca cttgcttatt ggtttataca agaagcaaca   20340

ggaaggtcat attattatgg aagaaatgct aaaaggtagc tcaactattc ataactattt   20400

tattactgag actaacacag cggcttttaa ggcggtgtgt tctgttatag atttaaagct   20460

tgacgacttt gttatgattt taaagagtca agaccttggc gtagtatcca aggttgtcaa   20520

ggttcctatt gacttaacaa tgattgagtt tatgttatgg tgtaaggatg gacaggttca   20580

aaccttctac cctcgactcc aggcttctgc agattggaaa cctggtcatg caatgccatc   20640

cctctttaaa gttcaaaatg taaaccttga acgttgtgag cttgctaatt acaagcaatc   20700

tattcctatg cctcgcggtg tgcacatgaa catcgctaaa tatatgcaat tgtgccagta   20760

tttaaatact tgcacattag ccgtgcctgc caatatgcgt gttatacatt ttggcgctgg   20820

ttctgataaa ggtatcgctc ctggtacctc agttttacga cagtggcttc ctacagatgc   20880

cattattata gataatgatt taaatgagtt cgtgtcagat gctgacataa ctttatttgg   20940

agattgtgta actgtacgtg tcggccaaca agtggatctt gttatttccg acatgtatga   21000

tcctactact aagaatgtaa caggtagtaa tgagtcaaag gctttattct ttacttacct   21060

gtgtaacctc attaataata atcttgctct tggtgggtct gttgctatta aaataacaga   21120

acactcttgg agcgttgaac tttatgaact tatgggaaaa tttgcttggt ggactgtttt   21180

ctgcaccaat gcaaatgcat cctcatctga aggattcctc ttaggtatta attacttggg   21240

tactattaaa gaaaatatag atggtggtgc tatgcacgcc aactatatat tttggagaaa   21300

ttccactcct atgaatctga gtacttactc actttttgat ttatccaagt ttcaattaaa   21360

attaaaagga acaccagttc ttcaattaaa ggagagtcaa attaacgaac tcgtaatatc   21420

tctcctgtcg cagggtaagt tacttatccg tgacaatgat acactcagtg tttctactga   21480

tgttcttgtt aacacctaca gaaagttacg ttgatgtagg gccagattct gttaagtctg   21540

cttgtattga ggttgatata caacagactt tctttgataa aacttggcct aggccaattg   21600

atgtttctaa ggctgacggt attatatacc ctcaaggccg tacatattct aacataacta   21660

tcacttatca aggtcttttt ccctatcagg gagaccatgg tgatatgtat gtttactctg   21720

caggacatgc tacaggcaca actccacaaa agttgtttgt agctaactat tctcaggacg   21780

tcaaacagtt tgctaatggg tttgtcgtcc gtataggagc agctgccaat tccactggca   21840

ctgttattat tagcccatct accagcgcta ctatacgaaa aatttaccct gcttttatgc   21900

tgggttcttc agttggtaat ttctcagatg gtaaaatggg ccgcttcttc aatcatactc   21960

tagttctttt gcccgatgga tgtggcactt tacttagagc tttttattgt attctagagc   22020

ctcgctctgg aaatcattgt cctgctggca attcctatac ttcttttgcc acttatcaca   22080

ctcctgcaac agattgttct gatggcaatt acaatcgtaa tgccagtctg aactctttta   22140

aggagtattt taatttacgt aactgcacct ttatgtacac ttataacatt accgaagatg   22200

agattttaga gtggtttggc attacacaaa ctgctcaagg tgttcacctc ttctcatctc   22260

ggtatgttga tttgtacggc ggcaatatgt ttcaatttgc caccttgcct gtttatgata   22320

ctattaagta ttattctatc attcctcaca gtattcgttc tatccaaagt gatagaaaag   22380

cttgggctgc cttctacgta tataaacttc aaccgttaac tttcctgttg gatttttctg   22440

ttgatggtta tatacgcaga gctatagact gtggttttaa tgatttgtca caactccact   22500

gctcatatga atccttcgat gttgaatctg gagtttattc agtttcgtct ttcgaagcaa   22560

aaccttctgg ctcagttgtg gaacaggctg aaggtgttga atgtgatttt tcacctcttc   22620

tgtctggcac acctcctcag gtttataatt tcaagcgttt ggtttttacc aattgcaatt   22680

ataatcttac caaattgctt tcactttttt ctgtgaatga ttttacttgt agtcaaatat   22740

ctccagcagc aattgctagc aactgttatt cttcactgat tttggattac ttttcatacc   22800

cacttagtat gaaatccgat ctcagtgtta gttctgctgg tccaatatcc cagtttaatt   22860

ataaacagtc cttttctaat cccacatgtt tgattttagc gactgttcct cataacctta   22920

ctactattac taagcctctt aagtacagct atattaacaa gtgctctcgt cttctttctg   22980

atgatcgtac tgaagtacct cagttagtga acgctaatca atactcaccc tgtgtatcca   23040

ttgtcccatc cactgtgtgg gaagacggtg attattatag gaaacaacta tctccacttg   23100

aaggtggtgg ctggcttgtt gctagtggct caactgttgc catgactgag caattacaga   23160

tgggctttgg tattacagtt caatatggta cagacaccaa tagtgtttgc cccaagcttg   23220

aatttgctaa tgacacaaaa attgcctctc aattaggcaa ttgcgtggaa tattccctct   23280

atggtgtttc gggccgtggt gtttttcaga attgcacagc tgtaggtgtt cgacagcagc   23340

gctttgttta tgatgcgtac cagaatttag ttggctatta ttctgatgat ggcaactact   23400

actgtttgcg tgcttgtgtt agtgttcctg tttctgtcat ctatgataaa gaaactaaaa   23460

cccacgctac tctatttggt agtgttgcat gtgaacacat ttcttctacc atgtctcaat   23520

actcccgttc tacgcgatca atgcttaaac ggcgagattc tacatatggc ccccttcaga   23580

cacctgttgg ttgtgtccta ggacttgtta attcctcttt gttcgtagag gactgcaagt   23640

tgcctcttgg tcaatctctc tgtgctcttc ctgacacacc tagtactctc acacctcgca   23700

gtgtgcgctc tgttccaggt gaaatgcgct tggcatccat tgcttttaat catcctattc   23760

aggttgatca acttaatagt agttatttta aattaagtat acccactaat ttttcctttg   23820

gtgtgactca ggagtacatt cagacaacca ttcagaaagt tactgttgat tgtaaacagt   23880

acgtttgcaa tggtttccag aagtgtgagc aattactgcg cgagtatggc cagttttgtt   23940

ccaaaataaa ccaggctctc catggtgcca atttacgcca ggatgattct gtacgtaatt   24000

tgtttgcgag cgtgaaaagc tctcaatcat ctcctatcat accaggtttt ggaggtgact   24060

ttaatttgac acttctagaa cctgtttcta tatctactgg cagtcgtagt gcacgtagtg   24120

ctattgagga tttgctattt gacaaagtca ctatagctga tcctggttat atgcaaggtt   24180

acgatgattg catgcagcaa ggtccagcat cagctcgtga tcttatttgt gctcaatatg   24240

tggctggtta caaagtatta cctcctctta tggatgttaa tatggaagcc gcgtatactt   24300

catctttgct tggcagcata gcaggtgttg gctggactgc tggcttatcc tcctttgctg   24360

ctattccatt tgcacagagt atcttttata ggttaaacgg tgttggcatt actcaacagg   24420

ttctttcaga gaaccaaaag cttattgcca ataagtttaa tcaggctctg ggagctatgc   24480

aaacaggctt cactacaact aatgaagctt ttcagaaggt tcaggatgct gtgaacaaca   24540

atgcacaggc tctatccaaa ttagctagcg agctatctaa tacttttggt gctatttccg   24600

cctctattgg agacatcata caacgtcttg atgttctcga acaggacgcc caaatagaca   24660

gacttattaa tggccgtttg acaacactaa atgcttttgt tgcacagcag cttgttcgtt   24720

ccgaatcagc tgctctttcc gctcaattgg ctaaagataa agtcaatgag tgtgtcaagg   24780

cacaatccaa gcgttctgga ttttgcggtc aaggcacaca tatagtgtcc tttgttgtaa   24840

atgcccctaa tggcctttac ttcatgcatg ttggttatta ccctagcaac cacattgagg   24900

ttgtttctgc ttatggtctt tgcgatgcag ctaaccctac taattgtata gcccctgtta   24960

atggctactt tattaaaact aataacacta ggattgttga tgagtggtca tatactggct   25020

cgtccttcta tgcacctgag cccattacct cccttaatac taagtatgtt gcaccacagg   25080

tgacatacca aaacatttct actaacctcc ctcctcctct tctcggcaat tccaccggga   25140

ttgacttcca agatgagttg gatgagtttt tcaaaaatgt tagcaccagt atacctaatt   25200

ttggttccct aacacagatt aatactacat tactcgatct tacctacgag atgttgtctc   25260

ttcaacaagt tgttaaagcc cttaatgagt cttacataga ccttaaagag cttggcaatt   25320

atacttatta caacaaatgg ccgtggtaca tttggcttgg tttcattgct gggcttgttg   25380

ccttagctct atgcgtcttc ttcatactgt gctgcactgg ttgtggcaca aactgtatgg   25440

gaaaacttaa gtgtaatcgt tgttgtgata gatacgagga atacgacctc gagccgcata   25500

aggttcatgt tcactaatta acgaactatt aatgagagtt caaagaccac ccactctctt   25560

gttagtgttt tcactctctc ttttggtcac tgcatcctca aaacctctct atgtacctga   25620

gcattgtcag aattattctg gttgcatgct tagggcttgt attaaaactg cccaagctga   25680

tacagctggt ctttatacaa attttcgaat tgacgtccca tctgcagaat caactggtac   25740

tcaatcagtt tctgtcgatc ttgagtcaac ttcaactcat gatggtccta ccgaacatgt   25800

tactagtgtg aatctttttg acgttggtta ctcagttaat taacgaactc tatggattac   25860

gtgtctctgc ttaatcaaat ttggcagaag taccttaact caccgtatac tacttgtttg   25920

tacatcccta aacccacagc taagtataca cctttagttg gcacttcatt gcaccctgtg   25980

ctgtggaact gtcagctatc ctttgctggt tatactgaat ctgctgttaa ttctacaaaa   26040

gctttggcca aacaggacgc agctcagcga atcgcttggt tgctacataa ggatggagga   26100

atccctgatg gatgttccct ctacctccgg cactcaagtt tattcgcgca aagcgaggaa   26160

gaggagccat tctccaacta agaaactgcg ctacgttaag cgtagatttt ctcttctgcg   26220

ccatgaagac cttagtgtta ttgtccaacc aacacactat gtcagggtta cattttcaga   26280

ccccaacatg tggtatctac gttcgggtca tcatttacac tcagttcaca attggcttaa   26340

accttatggc ggccaacctg tttctgagta ccatattact ctagctttgc taaatctcac   26400

tgatgaagat ttagctagag atttttcacc cattgcgctc tttttgcgca atgtcagatt   26460

tgagctacat gagttcgcct tgctgcgcaa aactcttgtt cttaatgcat cagagatcta   26520

ctgtgctaac atacatagat ttaagcctgt gtatagagtt aacacggcaa tccctactat   26580

taaggattgg cttctcgttc agggattttc cctttaccat agtggcctcc ctttacatat   26640

gtcaatctct aaattgcatg cactggatga tgttactcgc aattacatca ttacaatgcc   26700

atgctttaga acttaccctc aacaaatgtt tgttactcct ttggccgtag atgttgtctc   26760

catacggtct tccaatcagg gtaataaaca aattgttcat tcttatccca ttttacatca   26820

tccaggattt taacgaacta tggctttctc ggcgtcttta tttaaacccg tccagctagt   26880

cccagtttct cctgcatttc atcgcattga gtctactgac tctattgttt tcacatacat   26940

tcctgctagc ggctatgtag ctgctttagc tgtcaatgtg tgtctcattc ccctattatt   27000

actgctacgt caagatactt gtcgtcgcag cattatcaga actatggttc tctatttcct   27060

tgttctgtat aactttttat tagccattgt actagtcaat ggtgtacatt atccaactgg   27120

aagttgcctg atagccttct tagttatcct cataatactt tggtttgtag atagaattcg   27180

tttctgtctc atgctgaatt cctacattcc actgtttgac atgcgttccc actttattcg   27240

tgttagtaca gtttcttctc atggtatggt ccctgtaata cacaccaaac cattatttat   27300

tagaaacttc gatcagcgtt gcagctgttc tcgttgtttt tatttgcact cttccactta   27360

tatagagtgc acttatatta gccgttttag taagattagc ctagtttctg taactgactt   27420

ctccttaaac ggcaatgttt ccactgtttt cgtgcctgca acgcgcgatt cagttcctct   27480

tcacataatc gccccgagct cgcttatcgt ttaagcagct ctgcgctact atgggtcccg   27540

tgtagaggct aatccattag tctctctttg gacatatgga aaacgaacta tgttaccctt   27600

tgtccaagaa cgaatagggt tgttcatagt aaactttttc atttttaccg tagtatgtgc   27660

tataacactc ttggtgtgta tggctttcct tacggctact agattatgtg tgcaatgtat   27720

gacaggcttc aataccctgt tagttcagcc cgcattatac ttgtataata ctggacgttc   27780

agtctatgta aaattccagg atagtaaacc ccctctacca cctgacgagt gggtttaacg   27840

aactccttca taatgtctaa tatgacgcaa ctcactgagg cgcagattat tgccattatt   27900

aaagactgga actttgcatg gtccctgatc tttctcttaa ttactatcgt actacagtat   27960

ggatacccat cccgtagtat gactgtctat gtctttaaaa tgtttgtttt atggctccta   28020

tggccatctt ccatggcgct atcaatattt agcgccgttt atccaattga tctagcttcc   28080

cagataatct ctggcattgt agcagctgtt tcagctatga tgtggatttc ctactttgtg   28140

cagagtatcc ggctgtttat gagaactgga tcatggtggt cattcaatcc tgagactaat   28200

tgccttttga acgttccatt tggtggtaca actgtcgtac gtccactcgt agaggactct   28260

accagtgtaa ctgctgttgt aaccaatggc cacctcaaaa tggctggcat gcatttcggt   28320

gcttgtgact acgacagact tcctaatgaa gtcaccgtgg ccaaacccaa tgtgctgatt   28380

gctttaaaaa tggtgaagcg gcaaagctac ggaactaatt ccggcgttgc catttaccat   28440

agatataagg caggtaatta caggagtccg cctattacgg cggatattga acttgcattg   28500

cttcgagctt aggctcttta gtaagagtat cttaattgat tttaacgaat ctcaatttca   28560

ttgttatggc atcccctgct gcacctcgtg ctgtttcctt tgccgataac aatgatataa   28620

caaatacaaa cctatctcga ggtagaggac gtaatccaaa accacgagct gcaccaaata   28680

acactgtctc ttggtacact gggcttaccc aacacgggaa agtccctctt acctttccac   28740

ctgggcaggg tgtacctctt aatgccaatt ctacccctgc gcaaaatgct gggtattggc   28800

ggagacagga cagaaaaatt aataccggga atggaattaa gcaactggct cccaggtggt   28860

acttctacta cactggaact ggacccgaag cagcactccc attccgggct gttaaggatg   28920

gcatcgtttg ggtccatgaa gatggcgcca ctgatgctcc ttcaactttt gggacgcgga   28980

accctaacaa tgattcagct attgttacac aattcgcgcc cggtactaag cttcctaaaa   29040

acttccacat tgaggggact ggaggcaata gtcaatcatc ttcaagagcc tctagcttaa   29100

gcagaaactc ttccagatct agttcacaag gttcaagatc aggaaactct acccgcggca   29160

cttctccagg tccatctgga atcggagcag taggaggtga tctactttac cttgatcttc   29220

tgaacagact acaagccctt gagtctggca aagtaaagca atcgcagcca aaagtaatca   29280

ctaagaaaga tgctgctgct gctaaaaata agatgcgcca caagcgcact tccaccaaaa   29340

gtttcaacat ggtgcaagct tttggtcttc gcggaccagg agacctccag ggaaactttg   29400

gtgatcttca attgaataaa ctcggcactg aggacccacg ttggccccaa attgctgagc   29460

ttgctcctac agccagtgct tttatgggta tgtcgcaatt taaacttacc catcagaaca   29520

atgatgatca tggcaaccct gtgtacttcc ttcggtacag tggagccatt aaacttgacc   29580

caaagaatcc caactacaat aagtggttgg agcttcttga gcaaaatatt gatgcctaca   29640

aaaccttccc taagaaggaa aagaaacaaa aggcaccaaa agaagaatca acagaccaaa   29700

tgtctgaacc tccaaaggag cagcgtgtgc aaggtagcat cactcagcgc actcgcaccc   29760

gtccaagtgt tcagcctggt ccaatgattg atgttaacac tgattagtgt cactcaaagt   29820

aacaagatcg cggcaatcgt ttgtgtttgg caaccccatc tcaccatcgc ttgtccactc   29880

ttgcacagaa tggaatcatg ttgtaattac agtgcaataa ggtaattata acccatttaa   29940

ttgatagcta tgctttatta aagtgtgtag ctgtagagag aatgttaaag actgtcacct   30000

ctgcttgatt gcaagtgaac agtgcccccc gggaagagct ctacagtgtg aaatgtaaat   30060

aaaaaatagc tattattcaa ttagattagg ctaattagat gatttgcaaa aaaaaaaaa    30119

<210>  5

<211>  1273

<212>  PRT

<213>  人冠状病毒

<400>  5

Met Phe Val Phe Leu Val Leu Leu Pro Leu Val Ser Ser Gln Cys Val

1               5                   10                  15

Asn Leu Thr Thr Arg Thr Gln Leu Pro Pro Ala Tyr Thr Asn Ser Phe

            20                  25                  30

Thr Arg Gly Val Tyr Tyr Pro Asp Lys Val Phe Arg Ser Ser Val Leu

        35                  40                  45

His Ser Thr Gln Asp Leu Phe Leu Pro Phe Phe Ser Asn Val Thr Trp

    50                  55                  60

Phe His Ala Ile His Val Ser Gly Thr Asn Gly Thr Lys Arg Phe Asp

65                  70                  75                  80

Asn Pro Val Leu Pro Phe Asn Asp Gly Val Tyr Phe Ala Ser Thr Glu

                85                  90                  95

Lys Ser Asn Ile Ile Arg Gly Trp Ile Phe Gly Thr Thr Leu Asp Ser

            100                 105                 110

Lys Thr Gln Ser Leu Leu Ile Val Asn Asn Ala Thr Asn Val Val Ile

        115                 120                 125

Lys Val Cys Glu Phe Gln Phe Cys Asn Asp Pro Phe Leu Gly Val Tyr

    130                 135                 140

Tyr His Lys Asn Asn Lys Ser Trp Met Glu Ser Glu Phe Arg Val Tyr

145                 150                 155                 160

Ser Ser Ala Asn Asn Cys Thr Phe Glu Tyr Val Ser Gln Pro Phe Leu

                165                 170                 175

Met Asp Leu Glu Gly Lys Gln Gly Asn Phe Lys Asn Leu Arg Glu Phe

            180                 185                 190

Val Phe Lys Asn Ile Asp Gly Tyr Phe Lys Ile Tyr Ser Lys His Thr

        195                 200                 205

Pro Ile Asn Leu Val Arg Asp Leu Pro Gln Gly Phe Ser Ala Leu Glu

    210                 215                 220

Pro Leu Val Asp Leu Pro Ile Gly Ile Asn Ile Thr Arg Phe Gln Thr

225                 230                 235                 240

Leu Leu Ala Leu His Arg Ser Tyr Leu Thr Pro Gly Asp Ser Ser Ser

                245                 250                 255

Gly Trp Thr Ala Gly Ala Ala Ala Tyr Tyr Val Gly Tyr Leu Gln Pro

            260                 265                 270

Arg Thr Phe Leu Leu Lys Tyr Asn Glu Asn Gly Thr Ile Thr Asp Ala

        275                 280                 285

Val Asp Cys Ala Leu Asp Pro Leu Ser Glu Thr Lys Cys Thr Leu Lys

    290                 295                 300

Ser Phe Thr Val Glu Lys Gly Ile Tyr Gln Thr Ser Asn Phe Arg Val

305                 310                 315                 320

Gln Pro Thr Glu Ser Ile Val Arg Phe Pro Asn Ile Thr Asn Leu Cys

                325                 330                 335

Pro Phe Gly Glu Val Phe Asn Ala Thr Arg Phe Ala Ser Val Tyr Ala

            340                 345                 350

Trp Asn Arg Lys Arg Ile Ser Asn Cys Val Ala Asp Tyr Ser Val Leu

        355                 360                 365

Tyr Asn Ser Ala Ser Phe Ser Thr Phe Lys Cys Tyr Gly Val Ser Pro

    370                 375                 380

Thr Lys Leu Asn Asp Leu Cys Phe Thr Asn Val Tyr Ala Asp Ser Phe

385                 390                 395                 400

Val Ile Arg Gly Asp Glu Val Arg Gln Ile Ala Pro Gly Gln Thr Gly

                405                 410                 415

Lys Ile Ala Asp Tyr Asn Tyr Lys Leu Pro Asp Asp Phe Thr Gly Cys

            420                 425                 430

Val Ile Ala Trp Asn Ser Asn Asn Leu Asp Ser Lys Val Gly Gly Asn

        435                 440                 445

Tyr Asn Tyr Leu Tyr Arg Leu Phe Arg Lys Ser Asn Leu Lys Pro Phe

    450                 455                 460

Glu Arg Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln Ala Gly Ser Thr Pro Cys

465                 470                 475                 480

Asn Gly Val Glu Gly Phe Asn Cys Tyr Phe Pro Leu Gln Ser Tyr Gly

                485                 490                 495

Phe Gln Pro Thr Asn Gly Val Gly Tyr Gln Pro Tyr Arg Val Val Val

            500                 505                 510

Leu Ser Phe Glu Leu Leu His Ala Pro Ala Thr Val Cys Gly Pro Lys

        515                 520                 525

Lys Ser Thr Asn Leu Val Lys Asn Lys Cys Val Asn Phe Asn Phe Asn

    530                 535                 540

Gly Leu Thr Gly Thr Gly Val Leu Thr Glu Ser Asn Lys Lys Phe Leu

545                 550                 555                 560

Pro Phe Gln Gln Phe Gly Arg Asp Ile Ala Asp Thr Thr Asp Ala Val

                565                 570                 575

Arg Asp Pro Gln Thr Leu Glu Ile Leu Asp Ile Thr Pro Cys Ser Phe

            580                 585                 590

Gly Gly Val Ser Val Ile Thr Pro Gly Thr Asn Thr Ser Asn Gln Val

        595                 600                 605

Ala Val Leu Tyr Gln Asp Val Asn Cys Thr Glu Val Pro Val Ala Ile

    610                 615                 620

His Ala Asp Gln Leu Thr Pro Thr Trp Arg Val Tyr Ser Thr Gly Ser

625                 630                 635                 640

Asn Val Phe Gln Thr Arg Ala Gly Cys Leu Ile Gly Ala Glu His Val

                645                 650                 655

Asn Asn Ser Tyr Glu Cys Asp Ile Pro Ile Gly Ala Gly Ile Cys Ala

            660                 665                 670

Ser Tyr Gln Thr Gln Thr Asn Ser Pro Arg Arg Ala Arg Ser Val Ala

        675                 680                 685

Ser Gln Ser Ile Ile Ala Tyr Thr Met Ser Leu Gly Ala Glu Asn Ser

    690                 695                 700

Val Ala Tyr Ser Asn Asn Ser Ile Ala Ile Pro Thr Asn Phe Thr Ile

705                 710                 715                 720

Ser Val Thr Thr Glu Ile Leu Pro Val Ser Met Thr Lys Thr Ser Val

                725                 730                 735

Asp Cys Thr Met Tyr Ile Cys Gly Asp Ser Thr Glu Cys Ser Asn Leu

            740                 745                 750

Leu Leu Gln Tyr Gly Ser Phe Cys Thr Gln Leu Asn Arg Ala Leu Thr

        755                 760                 765

Gly Ile Ala Val Glu Gln Asp Lys Asn Thr Gln Glu Val Phe Ala Gln

    770                 775                 780

Val Lys Gln Ile Tyr Lys Thr Pro Pro Ile Lys Asp Phe Gly Gly Phe

785                 790                 795                 800

Asn Phe Ser Gln Ile Leu Pro Asp Pro Ser Lys Pro Ser Lys Arg Ser

                805                 810                 815

Phe Ile Glu Asp Leu Leu Phe Asn Lys Val Thr Leu Ala Asp Ala Gly

            820                 825                 830

Phe Ile Lys Gln Tyr Gly Asp Cys Leu Gly Asp Ile Ala Ala Arg Asp

        835                 840                 845

Leu Ile Cys Ala Gln Lys Phe Asn Gly Leu Thr Val Leu Pro Pro Leu

    850                 855                 860

Leu Thr Asp Glu Met Ile Ala Gln Tyr Thr Ser Ala Leu Leu Ala Gly

865                 870                 875                 880

Thr Ile Thr Ser Gly Trp Thr Phe Gly Ala Gly Ala Ala Leu Gln Ile

                885                 890                 895

Pro Phe Ala Met Gln Met Ala Tyr Arg Phe Asn Gly Ile Gly Val Thr

            900                 905                 910

Gln Asn Val Leu Tyr Glu Asn Gln Lys Leu Ile Ala Asn Gln Phe Asn

        915                 920                 925

Ser Ala Ile Gly Lys Ile Gln Asp Ser Leu Ser Ser Thr Ala Ser Ala

    930                 935                 940

Leu Gly Lys Leu Gln Asp Val Val Asn Gln Asn Ala Gln Ala Leu Asn

945                 950                 955                 960

Thr Leu Val Lys Gln Leu Ser Ser Asn Phe Gly Ala Ile Ser Ser Val

                965                 970                 975

Leu Asn Asp Ile Leu Ser Arg Leu Asp Lys Val Glu Ala Glu Val Gln

            980                 985                 990

Ile Asp Arg Leu Ile Thr Gly Arg  Leu Gln Ser Leu Gln  Thr Tyr Val

        995                 1000                 1005

Thr Gln  Gln Leu Ile Arg Ala  Ala Glu Ile Arg Ala  Ser Ala Asn

    1010                 1015                 1020

Leu Ala  Ala Thr Lys Met Ser  Glu Cys Val Leu Gly  Gln Ser Lys

    1025                 1030                 1035

Arg Val  Asp Phe Cys Gly Lys  Gly Tyr His Leu Met  Ser Phe Pro

    1040                 1045                 1050

Gln Ser  Ala Pro His Gly Val  Val Phe Leu His Val  Thr Tyr Val

    1055                 1060                 1065

Pro Ala  Gln Glu Lys Asn Phe  Thr Thr Ala Pro Ala  Ile Cys His

    1070                 1075                 1080

Asp Gly  Lys Ala His Phe Pro  Arg Glu Gly Val Phe  Val Ser Asn

    1085                 1090                 1095

Gly Thr  His Trp Phe Val Thr  Gln Arg Asn Phe Tyr  Glu Pro Gln

    1100                 1105                 1110

Ile Ile  Thr Thr Asp Asn Thr  Phe Val Ser Gly Asn  Cys Asp Val

    1115                 1120                 1125

Val Ile  Gly Ile Val Asn Asn  Thr Val Tyr Asp Pro  Leu Gln Pro

    1130                 1135                 1140

Glu Leu  Asp Ser Phe Lys Glu  Glu Leu Asp Lys Tyr  Phe Lys Asn

    1145                 1150                 1155

His Thr  Ser Pro Asp Val Asp  Leu Gly Asp Ile Ser  Gly Ile Asn

    1160                 1165                 1170

Ala Ser  Val Val Asn Ile Gln  Lys Glu Ile Asp Arg  Leu Asn Glu

    1175                 1180                 1185

Val Ala  Lys Asn Leu Asn Glu  Ser Leu Ile Asp Leu  Gln Glu Leu

    1190                 1195                 1200

Gly Lys  Tyr Glu Gln Tyr Ile  Lys Trp Pro Trp Tyr  Ile Trp Leu

    1205                 1210                 1215

Gly Phe  Ile Ala Gly Leu Ile  Ala Ile Val Met Val  Thr Ile Met

    1220                 1225                 1230

Leu Cys  Cys Met Thr Ser Cys  Cys Ser Cys Leu Lys  Gly Cys Cys

    1235                 1240                 1245

Ser Cys  Gly Ser Cys Cys Lys  Phe Asp Glu Asp Asp  Ser Glu Pro

    1250                 1255                 1260

Val Leu  Lys Gly Val Lys Leu  His Tyr Thr

    1265                 1270

Claims (32)

1.治疗受试者的严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)感染的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的化合物，所述化合物选自丙磺舒、其代谢物、其类似物和前述任何一项的药学上可接受的盐。

2.权利要求1所述的方法，其中所述受试者具有与SARS-CoV-2相关的疾病、病症或病的一种或多种症状。

3.权利要求2所述的方法，其中所述一种或多种症状选自发烧、鼻窦和/或肺充血、流鼻涕或鼻塞、咳嗽、打喷嚏、喉咙痛、身体疼痛、疲劳、呼吸急促、胸闷、呼气时喘息、发冷、肌肉疼痛、头痛、腹泻、疲倦、恶心、嗅觉丧失、皮疹及其组合。

4.权利要求1所述的方法，其中所述受试者患有COVID-19。

5.权利要求1所述的方法，其中所述受试者是无症状的。

6.权利要求1所述的方法，其中所述SARS-CoV-2包含由与SEQ IDNO:1或2包含至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

7.权利要求1所述的方法，其中所述SARS-CoV-2包含刺突蛋白，所述刺突蛋白与SEQ IDNO:5包含至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性。

8.权利要求1所述的方法，其中所述SAR-CoV-2包含相对于SEQ IDNO:5的一个或多个刺突蛋白突变，所述突变选自H69，任选地其缺失；V70，任选地其缺失；G142，任选地G142D；K417，任选地K417N或K417T；E484，任选地E484K；F486，任选地F486L；和N501突变，任选地N501Y或N501T。

9.权利要求1所述的方法，其中所述SARS-CoV-2来自B.1.1.7、B.1.351、P.1、B.1.1.207、B.1.429、B.1.427，或B.1.525谱系。

10.权利要求1所述的方法，其中所述化合物是丙磺舒或其药学上可接受的盐。

11.预防严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV-2)感染的方法，其包括向有需要的受试者施用有效量的化合物，所述化合物选自丙磺舒、其代谢物、其类似物和前述任何一项的药学上可接受的盐。

12.权利要求11所述的方法，其中，所述受试者已暴露于所述SARS-CoV-2。

13.权利要求11所述的方法，其中所述受试者已与SARS-CoV-2感染者密切接触。

14.权利要求11所述的方法，其中所述SARS-CoV-2包含由与SEQ IDNO:1或2包含至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的核酸序列编码的基因组。

15.权利要求11所述的方法，其中所述SARS-CoV-2包含刺突蛋白，所述刺突蛋白与SEQID NO:5包含至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性。

16.权利要求11所述的方法，其中所述SAR-CoV-2包含相对于SEQ ID NO:5的一个或多个突变，所述突变选自H69，任选地其缺失；V70，任选地其缺失；G142，任选地G142D；K417，任选地K417N或K417T；E484，任选地E484K；F486，任选地F486L；和N501突变，任选地N501Y或N501T。

17.权利要求11所述的方法，其中所述SARS-CoV-2来自B.1.1.7、B.1.351、P.1、B.1.1.207、B.1.429、B.1.427，或B.1.525谱系。

18.权利要求11所述的方法，其中所述化合物是丙磺舒或其药学上可接受的盐。

19.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物在进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂的药物组合物中。

20.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物是全身施用的。

21.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物经口服、肠胃外、局部或粘膜施用。

22.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物通过粘膜施用于肺、鼻粘膜或其组合。

23.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物以有效量施用以减少病毒复制。

24.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物的剂量为10mg-1,000mg或50mg-500mg，任选地每天两次，任选地持续14天。

25.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中通过脉冲给药治疗所述受试者。

26.权利要求25所述的方法，其中所述脉冲给药包括1-5次推注剂量的1,000mg至5,000mg所述化合物。

27.权利要求26所述的方法，其中所述推注剂量之后是药物假期。

28.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物通过口服或通过输注施用。

29.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中，所述受试者是人。

30.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物以250mg至1,000mg的剂量每天一次或两次施用。

31.权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述化合物以500mg的剂量每天两次施用。

32.权利要求1-18中任一项所述的方法，将化合物施用至所述受试者持续两周或更长时间。

Images