CN116042809A - X连锁凋亡抑制蛋白在慢性肾脏病诊断中的应用 - Google Patents

X连锁凋亡抑制蛋白在慢性肾脏病诊断中的应用 Download PDF

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Abstract

本申请涉及疾病诊断技术领域，具体涉及X连锁凋亡抑制蛋白在慢性肾脏病诊断中的应用。

Description

X连锁凋亡抑制蛋白在慢性肾脏病诊断中的应用
技术领域
本申请涉及疾病诊断技术领域，具体涉及XIAP在慢性肾脏病诊断以及制备诊断产品中的应用。
背景技术
慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)随着全球人口老龄化进程的加剧，高血压、糖尿病和代谢性疾病发病率明显升高，慢性肾脏病(Chronic kidney disease,CKD)在全球范围内发病率亦呈逐年增加趋势。CKD可持续进展至ESRD阶段，且往往伴随着心血管疾病等并发症的发生，导致CKD患者预后差、医疗费用高，对患者家庭、社会和国家均造成了巨大的经济负担。
进展至终末期肾衰竭是CKD患者主要的临床严重后果，是影响CKD患者死亡和长期预后的最主要因素。CKD起病隐匿，在早期阶段往往无明显症状，因此对CKD患者应尽早诊断，及时开展干预措施，以减少肾脏的进展性损伤，改善患者预后。如何在CKD发病早期进行干预，避免昂贵的肾脏替代治疗(透析或肾移植)，是目前肾内科领域研究的重点问题之一。
尽管目前已有一些肾脏疾病的诊断方法，如血清肌酐(serum creatinine，SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、蛋白尿、肾脏组织活检等，但是这些方法尚难以满足临床需求，存在需创伤性检查，敏感度和特异度不高等局限。筛选潜在肾损伤分子标识，发现能早期、高效预测慢性肾脏病发生、发展风险的生物标志物(Biomarker)，是目前临床工作中亟需解决的难题。
尿液是直接反映肾脏病变的“窗口”，肾内损伤的信号往往能通过检测尿液中特定生物标志物得以发现，“一滴尿检测”的无创手段将有助于临床医生进行规模化筛查，有效甄别高危患者，从而实现精准监测、精准防治的目的。随着各类肾损伤发病机制研究的深入以及高通量转录组学和蛋白组学技术的进步，近年已发现了若干能够预测CKD进展风险的生物标志物，如肾损伤分子-1(Kidney Injury Molecule-1，KIM-1)、组织金属蛋白酶-2抑制物(Tissue Inhibitor of Metalloprotienase-2，TIMP-2)和胰岛素样生长因子结合蛋白-7(Insulin-like Growth Factor-Binding Protein-7，IGFBP-7)、基质金属蛋白酶-7(Matrix Metalloproteinase-7，MMP-7)、表皮生长因子(Epidermal Growth Factor，EGF)等，但它们对预测CKD进展的灵敏度、特异度和可重复性不足。临床上，不仅需要早期发现肾脏损伤，更需要对CKD向肾衰竭的风险进行预测，以预防和减少终末期肾脏病的发生。
X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis，XIAP)是凋亡抑制蛋白家族(IAPs)的重要成员之一，IAPs是一类高度保守的多功能蛋白，参与一系列细胞活动，其功能包括但不限于凋亡调控。临床中，由于血清或尿液中的XIAP获取具有无创伤或低创伤性，表达稳定、存储方便，故常被作为新型的生物标志物用于肿瘤、心血管病等多种疾病的诊断和判断预后。现有技术中，虽有提及XIAP可作为肾透明细胞癌的诊断指标，但对于CKD疾病的诊断或治疗价值并未公开。
有鉴于此，提出本申请。
发明概述
为了解决上述技术问题，本申请通过系列生物信息学方法惊奇发现，XIAP可作为慢性肾脏病的诊断指征。因此提出XIAP核酸或者XIAP蛋白可作为慢性肾脏病诊断判断的生物标志物，弥补了现有慢性肾脏病相关指标的不足，具有显著的临床价值。
所以，本申请至少具有如下目的：
本申请的第一目的是寻求一种针对慢性肾脏病疾病诊断的全新用途；
本申请的第二目的是寻求一种适于慢性肾脏病诊断的全新产品；
本申请的第三目的是寻求一种针对慢性肾脏病疾病诊断的全新方法；
本申请的第四目的是寻求一种治疗慢性肾脏病，尤其延缓肾脏纤维化进展方面的应用。
为实现上述目的，本申请提出如下具体技术方案：
本申请首先提供一种XIAP作为标志物在诊断慢性肾脏病中的应用，或获取样本中XIAP水平的检测剂或组件在制备用于诊断慢性肾脏病的产品中的应用。
在一些方面，所述产品包括但不限于试剂盒形式、系统装置形式、计算机可读介质或计算机系统形式。
在一些方面，所述XIAP作为慢性肾脏病诊断的独立指征。
在一些方面，所述水平包括核酸水平或蛋白水平。
在一些方面，所述核酸水平包括DNA水平或RNA水平。
在一些方面，所述核酸水平或蛋白水平包括但不限于核酸或蛋白的丰度或浓度；在一些方面还可以包括诸如核酸或蛋白的突变丰度或浓度。
进一步的，所述核酸水平通过测序技术、核酸扩增技术、核酸杂交技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术获取。
进一步的，核酸水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：基因测序法、聚合酶链反应法、等温扩增反应法、基因芯片法、探针杂交法、凝胶电泳法、RNA印迹法、核酸质谱法或液相色谱法。
进一步的，所述蛋白水平通过测序技术、免疫技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术获取。
进一步的，蛋白水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：氨基酸测序法、酶联免疫法、化学发光法、免疫层析法、放射免疫法、免疫组化法、免疫印迹法、流式细胞术、凝胶电泳法、蛋白质谱法或液相色谱法。
在一些方面，所述产品中还包括获取其他标志物水平的检测剂或组件。
进一步的，所述其他标志物包括但不限于SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF之一或多个。
在一些方面，所述产品中还包括样本的处理试剂，所述样本的处理试剂包括样本裂解试剂、样本纯化试剂以及样本提取试剂中的至少一种。
在一些方面，所述产品还包括标准品、校准品、对照品、缓冲液中的至少一种。
在一些方面，所述样本包括组织、细胞、体液、血清、血浆、全血(外周血)、尿液、精液、唾液、胸水、腹水、脑脊液、粪便或滑液；优选的为血清或尿液。
在一些方面，所述诊断包括但不限于针对慢性肾脏病的筛查、早期诊断、辅助确诊、确诊、预测/判断疾病严重程度、评估疾病活动度、监测治疗等；优选的针对早期诊断。
本申请还提供一种用于诊断慢性肾脏病的产品，包括获取样本中XIAP水平的检测剂或组件。
在一些方面，所述产品包括但不限于：试剂盒形式、系统装置形式、计算机可读介质或计算机系统形式的产品。
在一些方面，所述XIAP可独立作为慢性肾脏病诊断的指征。
在一些方面，所述水平包括核酸水平或蛋白水平。
在一些方面，所述核酸水平或蛋白水平包括但不限于核酸或蛋白的丰度或浓度；在一些方面还可以包括诸如核酸或蛋白的突变丰度或浓度。
进一步的，所述核酸水平通过测序技术、核酸扩增技术、核酸杂交技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术获取。
进一步的，核酸水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：基因测序法、聚合酶链反应法、等温扩增反应法、基因芯片法、探针杂交法、凝胶电泳法、RNA印迹法、核酸质谱法或液相色谱法。
进一步的，所述蛋白水平通过测序技术、免疫技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术获取。
优选的，蛋白水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：氨基酸测序法、酶联免疫法、化学发光法、免疫层析法、放射免疫法、免疫组化法、免疫印迹法、流式细胞术、凝胶电泳法、蛋白质谱法或液相色谱法。
在一些方面，所述产品中还包括获取其他标志物水平的检测剂或组件。
进一步的，所述其他标志物包括但不限于SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF之一或多个。
在一些方面，所述产品中还包括样本的处理试剂，所述样本的处理试剂包括样本裂解试剂、样本纯化试剂以及样本提取试剂中的至少一种。
在一些方面，所述产品还包括标准品、校准品、对照品中的至少一种。
在一些方面，所述样本包括组织、细胞、体液、血清、血浆、全血(外周血)、尿液、精液、唾液、胸水、腹水、脑脊液、粪便或滑液；优选的为血清或尿液。
在一些方面，所述诊断包括但不限于针对慢性肾脏病的筛查、早期诊断、辅助确诊、确诊、预测/判断疾病严重程度、评估疾病活动度、监测治疗；优选的针对早期诊断。
本申请还提供一种在体内或体外诊断慢性肾脏病的方法，包括对受试者样本中XIAP水平进行获取的步骤。
在一些方面，所述方法包括如下步骤：
(i)获取所述受试者样本中XIAP水平；
(ii)与对照样本进行XIAP水平比较；其中，所述受试者样本与所述对照样本中XIAP的水平存在显著性差异是所述受试者患有慢性肾脏病的指征；或者，
(ii)与设定的阈值绝对量进行比较；其中，所述受试者样本水平高于阈值绝对量是所述受试者患有慢性肾脏病的指征。
在一些方面，所述XIAP可独立作为慢性肾脏病诊断的指征。
在一些方面，所述水平包括核酸水平或蛋白水平。
在一些方面，所述核酸水平或蛋白水平包括但不限于核酸或蛋白的丰度或浓度；在一些方面还可以包括诸如核酸或蛋白的突变丰度或浓度。
进一步的，所述核酸水平通过测序技术、核酸扩增技术、核酸杂交技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术获取。
进一步的，核酸水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：基因测序法、聚合酶链反应法、等温扩增反应法、基因芯片法、探针杂交法、凝胶电泳法、RNA印迹法、核酸质谱法或液相色谱法。
进一步的，所述蛋白水平通过测序技术、免疫技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术获取。
进一步的，蛋白水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：氨基酸测序法、酶联免疫法、化学发光法、免疫层析法、放射免疫法、免疫组化法、免疫印迹法、流式细胞术、凝胶电泳法、蛋白质谱法或液相色谱法。
在一些方面，所述方法中还包括对受试者样本中其他标志物水平进行获取的步骤。
进一步的，所述其他标志物包括但不限于SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF之一或多个。
在一些方面，所述样本包括组织、细胞、体液、血清、血浆、全血(外周血)、尿液、精液、唾液、胸水、腹水、脑脊液、粪便或滑液；优选的为血清或尿液。
在一些方面，所述诊断包括但不限于针对慢性肾脏病的筛查、早期诊断、辅助确诊、确诊、预测/判断疾病严重程度、评估疾病活动度、监测治疗；优选的针对早期诊断。
在一些方面，所述受试者优选为人。
本申请还提供一种在体内或体外检测患有或怀疑患有慢性肾脏病的受试者中标志物的方法，所述方法包括确定或检测来自受试者样本中XIAP水平。
进一步的，所述方法还包括确定或检测来自受试者样本中SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF之一或多个的水平。
在一些方面，所述方法可以为疾病诊断用途，也可以是非疾病诊断用途。
本申请还可提供一种用于评价或筛选慢性肾脏病的诊断标志物的方法，包含将潜在生物标志物与XIAP进行相关性或一致性分析的步骤，通过相关性或一致性的结论去验证潜在标志物的诊断价值。
本申请还提供一种体内或体外筛选慢性肾脏病治疗剂的方法，所述方法包括对经治疗剂处理后的样本进行XIAP水平评价的步骤。
本申请还提供一种用于诊断慢性肾脏病的标志物，包括XIAP核酸或蛋白。
本申请还提供一种XIAP抑制剂在治疗慢性肾脏病，尤其延缓肾脏纤维化进展方面的应用，以及相应的XIAP抑制剂在制备治疗慢性肾脏病，尤其延缓肾脏纤维化进展方面的药物中的应用。
本申请的有益技术效果：
本申请通过筛选慢性肾脏病患者与健康对照组差异表达的基因或其蛋白质，首次提出XIAP可能与CKD的发生和进展高度相关，并进一步证实了XIAP核酸或蛋白可作为慢性肾脏病诊断判断的生物标志物，弥补了现有慢性肾脏病疾病诊断的不足，具有显著的临床价值。
与现有技术相比，本发明中检测人体尿液中的凋亡抑制蛋白XIAP，不仅测定方法简便，而且能够以良好的精度评价慢性肾脏病有无发病，因此可作为早期发现原发性慢性肾脏病事件的慢性肾脏病患者的评价风险因子，除此之外还能够预测和预防肾衰竭的发生，能够在早期的阶段有效地干预肾脏形成不可逆损伤，具体的：
1、肾脏活检病理检查对于肾脏疾病的临床诊断、指导治疗、判断预后具有重大意义，常作为肾脏病诊断的金标准，但目前国内对肾活检病理诊断流程缺乏统一规范，且存在必须住院行肾穿刺活检术、等待时间长、出血、感染等风险，以及禁忌症较多、取样误差大、主观判断偏倚等局限性。通过收集临床患者尿液，应用酶联免疫吸附法对XIAP进行检测，具有检测速度快、费用低廉、仪器简单易携、灵敏度高和选择性强等优点，可用于现场检验，能够动态的、客观的、高敏感性的、非创伤性的对CKD的患者进行早期评估。
2、血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、蛋白尿是目前临床工作中作为评判肾功能的重要指标，具有检测简便、价格低廉的特点，因此被广泛应用于CKD的临床诊断。①但SCr、BUN易受到种族、性别、年龄、饮食、肌肉含量等多种因素的影响，而且在肾脏受损的早期阶段，由于肾脏具有强大的代偿功能，血清肌酐含量往往并不能及时出现变化，因此，难以做出早期敏感而可靠的诊断，也缺乏有效的预后价值。②蛋白尿水平是一个可以预测患者预后，且反映干预方法是否有效的生物标志物，但它每日变化较大，最高能到达40％，容易受到尿液浓度的影响，可靠性较低。③肾小球滤过率(e-GFR)是评价肾功能的主要指标，也是慢性肾脏病诊断与分期的主要依据，然而不同公式计算得到的eGFR差距较大，计算复杂且无统一标准。而XIAP能提示肾脏早期的损伤，且表达稳定、即在肾小管上皮细胞向间质转化的过程中，XIAP的表达就出现了明显的上调，能更早一步发现肾脏损伤。
3、JAMA 2019年发布的一项新发CKD预测模型，基于年龄、性别、种族、估算的肾小球滤过率(eGFR)、心血管疾病史、吸烟、高血压、身体质量指数(BMI)以及尿微量白蛋白肌酐比(ACR)等传统风险因素，该模型在中国CKD人群(n＝5291例)5年进展风险的预测准确率仅为76％。当下学界对于CKD风险预测模型的实践，还未可知全貌，仍然存在许多水土不服的问题需要解决。因此，建立符合我国CKD患者的风险预测体系，仍然是临床和科研工作者共同的努力方向。XIAP作为新兴的CKD生物学标志物，可能在风险预测模型中也有一定的贡献比例。
综上，本申请中的凋亡抑制蛋白XIAP作为标志物对于原发性慢性肾脏病患者具有早期诊断，早期干预，改善生活质量，医疗费用减少等效果。
附图说明
为了更清楚地说明本申请具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本申请的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1、数据集差异表达基因热图；
图2、IAP家族成员在CKD中的表达水平；
图3、XIAP水平与血清肌酐、尿素氮的相关性分析；
图4、XIAP浓度诊断CKD的ROC曲线。
发明详述
本申请公开了一种XIAP在慢性肾脏病诊断中的应用，本领域技术人员可以参考本文内容实现其应用，特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本申请内。本申请的方法及应用已经通过较佳的实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本申请内容、精神和范围内对本文制备方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本申请技术。除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本申请所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。
以下基本术语或定义仅仅是为了帮助理解本申请而提供。这些定义不应被理解为具有小于本领域技术人员所理解的范围。除非在下文中另有定义，本申请具体实施方式中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本申请。
如本申请中所使用，术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。术语“由…组成”被认为是术语“包含”的优选实施方案。如果在下文中某一组被定义为包含至少一定数目的实施方案，这也应被理解为揭示了一个优选地仅由这些实施方案组成的组。
在提及单数形式名词时使用的不定冠词或定冠词例如“一个”或“一种”，“所述”，包括该名词的复数形式。
本申请中的术语“大约”、“大体”表示本领域技术人员能够理解的仍可保证论及特征的技术效果的准确度区间。该术语通常表示偏离指示数值的±10％，优选±5％。
此外，说明书和权利要求书中的术语第一、第二、第三、(a)、(b)、(c)以及诸如此类，是用于区分相似的元素，不是描述顺序或时间次序必须的。应理解，如此应用的术语在适当的环境下可互换，并且本申请描述的实施方案能以不同于本申请描述或举例说明的其它顺序实施。
现将详细地提供本申请实施方式的参考，其一个或多个实例描述于下文。提供每一实例作为解释而非限制本申请。对本领域技术人员而言，显而易见的是，可以对本申请进行多种修改和变化而不背离本申请的范围或精神。例如，作为一个实施方式的部分而说明或描述的特征可以用于另一实施方式中，来产生更进一步的实施方式。因此，旨在本申请覆盖落入所附权利要求的范围及其等同范围中的此类修改和变化。本申请的其它对象、特征和方面公开于以下详细描述中或从中是显而易见的。本领域普通技术人员应理解本讨论仅是示例性实施方式的描述，而非意在限制本申请更广阔的方面。
诊断用途
本申请通过数据集差异表达基因筛选出慢性肾脏病患者与健康对照组差异表达的蛋白质XIAP，Pearson相关分析显示，患者尿液中XIAP水平与血清肌酐水平存在显著的正相关关系(r＝0.3762,P<0.0001)，尿液中XIAP水平与尿素氮水平存在显著的强正相关关系(r＝0.4225,P<0.0001)；绘制XIAP受试者工作特征(Receiver Operating CharacteristicCurve，ROC)曲线，发现XIAP的对于慢性肾脏病的检验的灵敏度高达94.59％，特异度达82.5％，表明XIAP对慢性肾脏病患者和正常人群区分性能良好。
因此在本公开的各方面，提供了包含了XIAP可作为标志物用于慢性肾脏病(CKD)的诊断用途，以及检测样本中XIAP的检测剂在制备用于诊断慢性肾脏病的产品中的用途。
如本文使用的术语“慢性肾脏病”和“CKD”是可互换，通常是指肾脏损害和(或)GFR下降[＜60ml/(min·1.73m2)]超过3个月。临床表现上，CKD不同阶段临床表现各不相同，在CKD1期和2期，患者可无任何症状，或仅有轻微乏力、腰酸和夜尿增多等；少数患者有食欲缺乏、轻度贫血等。CKD3期后，上述症状可加重，可出现高血压、心衰、酸碱平衡紊乱、电解质紊乱、消化道症状、贫血、矿物质-骨代谢异常、中枢神经系统障碍等。
如本文使用的术语“XIAP”或“X-linked inhibitor of apoptosis”可以互换使用，是凋亡抑制蛋白家族(IAPs)的重要成员之一，IAPs是一类高度保守的多功能蛋白，参与一系列细胞活动，其功能包括但不限于凋亡调控。临床中，由于血清或尿液中的XIAP获取具有无创伤或低创伤性，表达稳定、存储方便，故常被作为新型的生物标志物用于肿瘤、心血管病等多种疾病的诊断和判断预后。
如本文使用的术语“诊断”指的是通过其体征、症状、且尤其是各种诊断过程(包括检测从个体中获得的生物样品(如血清或尿液)中的XIAP水平)的结果来鉴定医学疾患或疾病(如CKD)的过程。而且，作为本文使用的术语“诊断”包括疾病的筛查、早期诊断、辅助确诊、确诊(判断是否存在疾病)、预测或者判断疾病的严重程度、评估疾病活动度、监控治疗，例如治疗过程中监测疾病恶化或复发、评价疾病的治疗效力、以及给定治疗方案的选择等。不作限制，在一些具体的实施例中，本申请已充分证实基于XIAP水平可用于判断受试者CKD的存在与否，进而可用于筛查、早期诊断、辅助确诊或确诊等。
如本文使用的术语“样品”、“样本”、“受试样品”、“受试者样本”等包括从患者、个体或受试者获得的并可用于诊断或监测测定的各种样品类型。患者样品可以从健康受试者、患病患者或具有CKD相关症状的患者获得。此外，从患者获得的样品可以被分成部分，并且可以将仅一部分用于诊断。此外，样品或其一部分可以在保持样品以供随后分析的条件下储存。该定义具体包括血液和生物来源的其他液体样品(包括但不限于组织、细胞、体液、血清、血浆、全血、尿液、精液、唾液、胸水、腹水、脑脊液、粪便和滑液等)。在一个具体实施方案中，样品包括尿液样品。在一个具体实施方案中，样品包括血液样品。在另一个实施方案中，使用血清样品。该定义还包括在样品取得之后以任何方式被操作的样品，例如通过离心、过滤、沉淀、透析、色谱法、用试剂处理、洗涤或富集某些细胞群体。这些术语还包括临床样品，并且还包括培养物中的细胞、细胞上清液、组织样品、器官等。样品还可以包括新鲜冷冻的和/或福尔马林固定的、石蜡包埋的组织块，例如从临床或病理活组织检查物制备的块，制备用于通过免疫组织化学的病理分析或研究。样品可以在收集后立即进行测试、在RT、4摄氏度、-20摄氏度或-80摄氏度储存并且在储存24小时、1周、1个月、1年、10年或多达30年后进行测试。
术语“个体”、“对象”、“受试者”和“患者”在本文中可互换使用，并且是指需要诊断、治疗或疗法的任何哺乳动物对象，特别是人。
如本文使用的术语“ROC”或“ROC曲线”可以指受体操作特征曲线。ROC曲线可以是二元分类器系统的性能的图形表示。对于任何给定方法，ROC曲线可以通过在多种阈值设置下针对特异性绘制灵敏度来产生。此外，只要提供三种参数(例如灵敏度、特异性和阈值设定)中的至少一种，并且ROC曲线可以确定任何未知参数的值或预期值。未知参数可以使用针对ROC曲线拟合的曲线测定。
如本文使用的术语“AUC”或“ROC-AUC”通常是指受体操作特征曲线下面积。这一度量考虑方法的灵敏度和特异性，可以提供方法的诊断效用的测量值。通常，ROC-AUC在0.5到1.0范围内，其中更接近0.5的值表明方法具有有限的诊断效用(例如较低的灵敏度和/或特异性)，并且更接近1.0的值表明方法具有较大的诊断效用(例如较高的灵敏度和/或特异性)。参见例如Pepe等人,“Limitations of the Odds Ratio in Gauging thePerformance of a Diagnostic,Prognostic,or Screening Marker”,Am.J.Epidemiol2004,159(9):882-890，其通过引用全文并入本文中。使用似然函数、优势比、信息理论、预测值、校准(包括拟合优度)和再分类测量表征诊断效用的其它方法是根据Cook,“Use andMisuse of the Receiver Operating Characteristic Curve in Risk Prediction)”,Circulation 2007,115:928-935概述，其通过引用全文并入本文中。
获取样本中XIAP水平的检测剂或组件，可以理解地包括直接获取样本中XIAP水平的检测试剂，或者间接获取样本中XIAP水平的组件(如计算机程序直接获取已经被检测好的样本中XIAP水平的指标)。
根据本申请一些实施例，可以于核酸水平、蛋白水平等任一种方式获取标志物水平指标。检测方式不作限制，但凡能够用于直接或间接评价XIAP核酸或蛋白水平的方式都适于本申请。可以理解,核酸水平可以包括DNA水平或RNA水平。本领域对于DNA或RNA水平检测的方式有多种，包括但不限于通过测序技术、核酸扩增技术、核酸杂交技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术，这些技术都能够用于本申请。在本申请的一些具体实施例中，包括但不限于以下任一种具体方法：基因测序法、聚合酶链反应法、等温扩增反应法、基因芯片法、探针杂交法、凝胶电泳法、RNA印迹法、核酸质谱法或液相色谱法。
举例而言，在具体一些实施方式中，所述聚合酶链反应法包括用于XIAP扩增的引物，其中，引物是指能够特异性扩增XIAP基因的引物，例如一定长度的多核苷酸，如约35个核苷酸或者更长的引物，其能够与模板序列的至少部分进行杂交并用作合成引物延伸产品的起始位点。在一些具体实施方式中，所述探针杂交法包括XIAP的探针，其中，探针是指能够特异性识别XIAP基因或者该基因转录本的探针，其是一种能够结合另一个分子的特定序列或子序列或其他部分的分子，通常是指通过互补碱基配对结合另一个核酸(即作为靶核苷酸的XIAP的特异性序列)的核酸探针。在一些具体实施方式中，所述基因芯片是指在基底材料(具体包括但不限于聚合物如尼龙膜、硝酸纤维素膜以及玻璃等)上固定有前述的探针的阵列所形成的复合结构。在一些实施方式中，需要检测RNA时需要逆转录获得cDNA，再通过XIAP扩增的引物实施检测。
可以理解本领域的蛋白检测方式有多种包括但不限于测序技术、免疫技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术，这些技术都能够用于本申请；在本申请的一些具体实施例中，包括但不限于以下任一种具体方法：氨基酸测序法、酶联免疫法、化学发光法、免疫层析法、放射免疫法、免疫组化法、免疫印迹法、流式细胞术、凝胶电泳法、蛋白质谱法或液相色谱法。
举例而言，在一些实施方式中，在蛋白水平上定量检测XIAP的方法中包括了特异性抗体。其中，特异性抗体是指能够特异性识别XIAP编码蛋白的抗体，具体包括但不限于单克隆抗体(例如全长或完整的单克隆抗体)、多克隆抗体、多价抗体、多特异性抗体(例如具有预期的生物学活性的双特异性抗体)、纳米抗体或者包括某些抗体片段中的至少一种。可以理解的是，抗体可以是人、人源化和/或亲和力成熟的抗体。
根据本申请的实验数据可知，所述XIAP可作为慢性肾脏病诊断的独立指征，仅依据XIAP即可实现慢性肾脏病的有效诊断。
可以理解的是，为了进一步增强对慢性肾脏病的诊断效果，试剂所检测的生物标志物还可以是其它本领域技术人员所熟知的具有诊断作用的核酸片段、蛋白质、代谢物等可以作为标志物使用的生物材料，通过这种方式实现多种生物标志物的组合使用，相互之间进行配合达成更好对慢性肾脏病患者的诊断效果，从而达成更有效的诊断评估。因此，所述XIAP除了可作为慢性肾脏病诊断的独立指征，还可以与其他现有已知的诊断标记物进行联合检测，从而提升诊断效能。
比如在一些具体实施例中，所述诊断中还包括检测其他基因或蛋白的诊断试剂，比如本申请中提及的SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF等，联合检测可以是联合其中任一或多个。
在本申请的一些实施例中，本申请所述的受试样品可以选自组织、细胞、体液血清、血浆、全血(外周血)、尿液、精液、唾液、胸水、腹水、脑脊液、粪便和滑液；在优选的实施方式中，受试样品选自血清、血浆、全血或尿液的任一种。
治疗用途
本申请亦通过研究发现抑制XIAP能够抑制肾小管上皮细胞间质转化进而延缓肾脏纤维化进展，因此，本申请还包含XIAP在治疗慢性肾脏病患者方面的，应用，尤其在延缓肾脏纤维化进展方面的应用。
诊断方法
申请人发现慢性肾脏病患者中XIAP的水平高于健康人中的XIAP水平，因此可以根据XIAP的水平(比如表达水平)对慢性肾脏病的诊断(尤其早期诊断)做出较为准确的预测。
诊断方法的核心包括了对受试者样本中XIAP进行检测或确定的步骤；
在一些具体的实施方式中，所述方法包括如下步骤：
(i)检测或确定所述受试样品中XIAP的水平；
(ii)与对照样本进行XIAP的水平比较；其中，所述受试样品与所述对照样品中XIAP的水平存在显著性差异是所述受试者患有慢性肾脏病的指征；
或者，
(ii)与设定的阈值绝对量进行比较；其中，所述受试者样本水平高于阈值绝对量是所述受试者患有慢性肾脏病的指征。
在一些实施方式中，文中“XIAP的水平”或“XIAP水平”包括但不限于XIAP核酸或蛋白的丰度或浓度，比如在一些具体的实施方式中，是相应蛋白的表达丰度或浓度。
可以理解，对照样本可以根据实际需求选定，比如在疾病诊断中，所述对照样本为正常人群样本，而在用于预后评估时，则可以是不同预后情况的对照样本。
在一些具体的实施方式中，可以给出一个XIAP表达水平的设定值，该设定值可以根据正常人和/或非慢性肾脏病患者的正常样本的XIAP的表达水平而确定，例如，选择合适样本数量的正常样本的XIAP的表达水平的平均值，或基于该平均值设定一个合理的倍数，如0.9倍、0.8倍、0.7倍、0.6倍、0.5倍等，当受试者的XIAP的表达水平高于该设定值时，判断为慢性肾脏病。可以理解的是，基于平均值，或平均值的倍数所确定的设定值的需要具有良好的分类意义，可以通过基于该设定值的分类对已知样本采用常用的统计学检验方法进行检验，当结果具有统计学意义时，表明该设定值可以作为判断标准使用。其中，XIAP的水平是指针对受试者的这一生物标志物通过直接测量或根据直接测量进一步间接推导出的值，其通常至少部分来源于受试者的样品中的生物标志物的丰度或浓度。其中，间接推导出的值的方式包括通过将函数应用于这一生物标志物的测量值而推导得到的。直接测量值包括但不限于通过测序、杂交、质谱、免疫测定、免疫荧光、流式细胞术等其中至少一种方式确定的生物标志物的值。
产品
根据本申请核心诊断用途可知，可以将用于检测XIAP水平的流程配置成相应产品形式，用于慢性肾脏病的诊断或预测。该产品包括了检测XIAP生物标志物的试剂或组件。可以理解，此类产品形式是多样的，包括但不限于试剂盒形式、系统装置、计算机可读介质或计算机系统形式。
试剂盒形式
在本申请的一些实施例中，本文还公开了用于检测或分析XIAP水平以预测CKD疾病的试剂盒。这样的试剂盒可以包括用于检测一种或多种标志物的水平的试剂和用于根据检测到的水平来预测CKD疾病的说明书。
试剂盒可以包括一组试剂，用于通过至少一次测定生成数据集。该组试剂能够检测定量XIAP水平。该组试剂也可进一步检测一种或多种其他标志物水平。在某些方面，所述试剂是于核酸或蛋白的水平进行检测。
当所述检测剂于核酸水平进行检测时，可以理解本领域的核酸检测方式有多种，包括单不限于通过测序技术、核酸扩增技术、核酸杂交技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术，这些技术都能够用于本申请。在本申请的一些具体实施例中，包括但不限于以下任一种具体方法：基因测序法、聚合酶链反应法、等温扩增反应法、基因芯片法、探针杂交法、凝胶电泳法、RNA印迹法、核酸质谱法或液相色谱法。
因此举例而言，在一些具体实施方式中，所述试剂可以为测序试剂，比如一代Sanger测序试剂、二代测序(“NGS”)试剂、第三代测序试剂等。在另一些具体实施方式中，所述试剂为PCR引物试剂，其中，引物是指能够特异性扩增XIAP基因的引物，例如一定长度的多核苷酸，如约35个核苷酸或者更长的引物，其能够与模板序列的至少部分进行杂交并用作合成引物延伸产品的起始位点。在另一些具体实施方式中，所述试剂为探针试剂，其中，探针是指能够特异性识别XIAP基因或者该基因转录本的探针，其是一种能够结合另一个分子的特定序列或子序列或其他部分的分子，通常是指通过互补碱基配对结合另一个核酸(即作为靶核苷酸的XIAP的特异性序列)的核酸探针。
当所述检测剂于蛋白水平进行检测时，可以理解本领域的蛋白检测方式有多种包括但不限于测序技术、免疫技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术，这些技术都能够用于本申请；在本申请的一些具体实施例中，包括但不限于以下任一种具体方法：氨基酸测序法、酶联免疫法、放射免疫法、免疫组化法、免疫印迹法、流式细胞术、凝胶电泳法、蛋白质谱法或液相色谱法。
因此举例而言，在一些具体实施方式中，所述试剂为特异性抗体，其中，特异性抗体是指能够特异性识别XIAP编码蛋白的抗体，具体包括但不限于单克隆抗体(例如全长或完整的单克隆抗体)、多克隆抗体、多价抗体、多特异性抗体(例如具有预期的生物学活性的双特异性抗体)或者包括某些抗体片段中的至少一种。可以理解的是，抗体可以是人、人源化和/或亲和力成熟的抗体。
在一些实施方案中，这样的试剂盒可包括载体、包装或容器，所述包装或容器被区室化为接收一个或多个容器，比如小瓶、管等，每个容器包含有待在所述方法中使用的独立要素之一。本申请的试剂盒可包括如上所述的容器以及一个或多个包含出于商业终端用户立场需要的物质的其他容器，所述物质包括缓冲液、稀释剂、过滤器和带有使用说明的包装说明书。
在一些实施方案中，所述试剂盒中还包括样品的处理试剂，所述样品的处理试剂可以包括样品裂解试剂、样品纯化试剂以及样品提取试剂中的至少一种。
在一些实施方案中，所述产品还包括标准品、校准品、对照品、缓冲液中的至少一种。其中，对照品是检验实验有效性的控制品，并作为判断结果的对照。缓冲液可以是本领域所公知的任何能够在检测过程中提供适当的缓冲条件的溶液。
试剂盒可以包括一组试剂的使用说明书。例如，试剂盒可以包括用于执行至少一种测定法的说明书，例如免疫测定法、蛋白结合测定法、基于抗体的测定法、基于抗原结合蛋白的测定法、基于蛋白质的阵列、酶联免疫吸附测定(ELISA)、流式细胞术、蛋白质阵列、印迹、蛋白质印迹、散射比浊法、比浊法、色谱法、质谱法、酶活性和免疫测定法，所述免疫测定法选自RIA、免疫荧光、免疫化学发光、免疫电化学发光、免疫电泳、竞争性免疫测定法和免疫沉淀。
除了上述组件之外，试剂盒将进一步包括用于实施主题方法的说明书。这些说明书可以多种形式存在于主题试剂盒中，其中的一种或多种形式可存在于所述试剂盒中。其中这些说明书可以存在的一种形式是其为在适合的介质或基材上的印刷信息，例如，在其上印刷信息的一张或多张纸，所述纸在试剂盒的包装中，呈包装插页形式，等等。
系统装置
在本申请的一些实施例中，本文还公开了用于检测或分析XIAP水平以预测CKD疾病的系统。这样的系统可以包括一组试剂，其用于检测一种或多种标志物的水平；一个装置，其被配置为接收一种或多种试剂的混合物和从受试者获得的测试样品以测量所述XIAP水平；以及一个计算机系统，其与所述装置通信耦合以获得测量的水平并确定预测CKD患者中的CKD疾病的可能性的评分。
所述装置被配置为检测试剂和测试样品的混合物中的XIAP水平。例如，所述装置可以通过免疫测定法或用于核酸检测的测定法来确定XIAP水平。可以通过各种容器将试剂和测试样品的混合物提供给所述装置，这些容器的实例包括孔板(例如，96孔板)的孔、小瓶或管。正因为如此，所述装置可以具有开口(例如，狭槽、腔、开口、滑动托盘)，所述开口可以接收容纳试剂测试样品混合物的容器并进行读取以生成可溶性介质的定量表达值。装置的实例包括酶标仪(例如，发光酶标仪、吸光酶标仪、荧光酶标仪)、分光计和分光光度计。
所述计算机系统与所述装置通信以接收可溶性介质的定量表达值。所述计算机系统通过应用预测模型分析定量表达值并确定受试者中的CKD疾病活动事件的可能性。
计算机系统或计算机可读介质形式
在本申请的一些实施例中，可利用计算机上进行本申请的方法或用途，包括通过计算机检测或分析XIAP水平以预测CKD疾病。
例如，用于生成评分(例如，LFPI评分)的预测模型的构建和执行可以在硬件或软件或两者的组合中实现。在一个实施方案中，提供了一种可读存储介质，例如介质包括用机器可读数据编码的数据存储材料，当使用以利用所述数据的指令编程的机器时，所述数据存储材料能够显示本申请的预测模型的任何数据集以及执行和结果。这样的数据可以用于多种目的，比如CKD患者监测、诊断、治疗考虑等。上述方法的实施方案可以在可编程计算机上执行的计算机程序中实现，所述计算机包括处理器、数据存储系统、图形适配器、网络适配器、至少一个输入设备和至少一个输出设备等。显示器与图形适配器耦合。将程序代码应用于输入数据以执行上述功能并生成输出信息。以已知方式将输出信息应用于一个或多个输出设备。计算机可以例如是个人计算机、微型计算机或传统设计的工作站。
每个程序可以在高级程序或面向对象的编程语言中实施，从而与计算机系统通信。然而，如果期望的话，所述程序可以在汇编或机器语言中实施。在任何情况下，所述语言可以是编译语言或解释语言。每个这样的计算机程序优选存储在通用或专用可编程计算机可读的存储介质或设备(例如，ROM或磁盘)上，用于当计算机读取存储介质或设备时配置和操作计算机以执行本文所述的程序。所述系统还可以视为以配置有计算机程序的计算机可读存储介质的形式实施，其中如此配置的存储介质使计算机以特定和预定义的方式运行以执行本文所述的功能。
可以在各种介质中提供特征模式及其数据库以促进它们的使用。“介质”是指含有本申请的特征模式信息的制造品。本申请的数据库可以记录在计算机可读介质上，例如计算机可以直接读取和访问的任何介质。这样的介质包括但不限于：磁存储介质，比如软盘、硬盘存储介质和磁带；光存储介质，比如CD-ROM；RAM和ROM等电子存储介质；以及这些类别的混合体，比如磁/光存储介质。本领域技术人员可以容易地理解如何可以将任何目前已知的计算机可读介质用于产生包含当前数据库信息的记录的制造品。“记录”是指使用本领域已知的任何此类方法在计算机可读介质上存储信息的过程。基于用于访问存储信息的方式，可以选择任何方便的数据存储结构。可以使用多种数据处理器程序和格式进行存储，例如文字处理文本文件、数据库格式等。
其他方面
可以理解，在确信XIAP可作为慢性肾脏病诊断标志物的基础上，本领域技术人员可以据此评价或筛选慢性肾脏病的其他潜在诊断标志物，通常将潜在生物标志物与XIAP通过相关性评价，在得出正相关的结论基础上，有助于说明潜在诊断标志物的价值。
本申请还可涉及一种在体内或体外检测患有或怀疑患有慢性肾脏病的受试者中标志物的方法，所述方法包括确定或检测来自受试者的生物样本中XIAP的水平，所述方法可以包含非疾病诊断的用途。
另外，本申请还可涉及体内或体外筛选慢性肾脏病治疗剂的方法，所述方法包括对经治疗剂处理后的样本进行XIAP水平评价的步骤，基于XIAP水平评价治疗剂的治疗效果，比如，当XIAP表达水平下降时，可确定该治疗剂的治疗效果。
下面结合实施例对本申请的实施方案进行详细描述。
实施例1
1、临床样本：
设立健康对照组、CKD组，其中健康对照组为无临床慢性肾脏病的健康人群，CKD组为临床实践中根据“改善全球肾脏病预后组织”(Kidney disease：improving globaloutcomes,KDIGO)制定的CKD临床工作指南，即符合以下所述原发性慢性肾脏病患者符合以下条件：诊断为原发性慢性肾脏病4-5期，其中原发性慢性肾脏病4-5期是指：被测个体eGFR<30mL/min·1.73m2，时间≥3个月，且无立即透析替代治疗需要，无合并急性感染性疾病及肿瘤，排除继发性肾病，所述继发性肾病包括狼疮性肾炎、糖尿病肾病过敏性紫癜性肾炎、ANCA肾炎或梗阻性肾病。
2、纳入标准：
年龄18-65岁；临床诊断为慢性肾脏病1-5期；感染、酸中毒、电解质紊乱、高血压等得到有效控制。排除标准：年龄<18岁或>65岁；妊娠及哺乳期女性；伴有其他系统严重原发性疾病者；无法合作者。健康对照组纳入排除标准与CKD组条件相同，且无肾脏疾病。
3、实验设计和结果
①从基因表达综合数据库(GEO)中下载包含CKD患者肾小球组份的表达谱GSE29677数据集。利用R软件包做数据处理并选取log2FC>1或log2FC<-1，P Value<0.05确定为差异表达基因(DEGs)。使用R语言ggplot包绘制DEG热图，可见凋亡抑制蛋白IAP家族的成员(c-IAP1、c-IAP2、ML-IAP、Survivin、XIAP)在慢性肾脏病中的表达，与对照组相比，均有明显上调(图1)。
为了进一步验证IAP家族与慢性肾脏病的关系，本申请利用Nephroseq在线数据库，发现IAP家族中的c-IAP1、c-IAP2、ML-IAP、Survivin、XIAP和TS-IAP在慢性肾脏病患者中的表达均显著上调(图2)。其中，XIAP是凋亡抑制蛋白家族的关键成员，可直接通过与启动子caspase-9、3和7结合抑制凋亡，参与恶性细胞间质转化，研究发现抑制XIAP信号通路可减轻糖尿病肾病大鼠肾脏损伤。本申请的前期实验研究表明，α7nAChR选择性受体拮抗剂MLA可以通过抑制凋亡抑制蛋白XIAP来抑制肾小管上皮细胞间质转化进而延缓肾脏纤维化进展。因此XIAP在肾脏纤维化以及慢性肾脏病的发生发展中发挥一定的作用。
②本申请自2021年08月至2022年10月，在山西医科大学附属人民医院肾内科收集了128例CKD患者(CKD组)和40例健康对照人群(健康对照组)。CKD患者通过病理学或临床诊断为原发性肾小球肾炎。收集入选者年龄、性别、体重指数(BMI)、原发病、血肌酐、尿素氮、eGFR等资料。本研究得到了山西医科大学附属人民医院伦理委员会批准，参与研究的人群签署了知情同意书。尿液XIAP检测标本的收集：受试者在清晨留取清洁中段尿5ml，4℃使用3000r/min的速度离心15分钟，收集尿液上清保存于-80℃冰箱中。收集住院患者以及对照组的尿液，用酶联免疫吸附法(ELISA)对尿液中XIAP蛋白的含量进行定量检测。用IBM SPSSStatistics 20软件进行统计分析，连续性变量进行正态性检验，符合正态分布的计量资料使用均数±标准差(x±s)表示，Pearson相关分析尿液中XIAP浓度与血清肌酐、尿素氮浓度的相关性。以P<0.05为二者存在显著相关关系，具体检测到患者尿液中XIAP浓度与血清肌酐、尿素氮的数据情况如下表。
表、患者尿液中XIAP浓度与血清肌酐、尿素氮的数据情况
Figure BDA0003994260690000181
Figure BDA0003994260690000191
Figure BDA0003994260690000201
Figure BDA0003994260690000211
Figure BDA0003994260690000221
4、血清肌酐浓度与XIAP浓度的统计分析
Pearson相关分析：Pearson相关分析显示，患者尿液中XIAP水平与血清肌酐水平存在显著的正相关关系(r＝0.3762,P<0.0001)，尿液中XIAP水平与尿素氮水平存在显著的强正相关关系(r＝0.4225,P<0.0001)，具体可视化结果如图3所示。
Figure BDA0003994260690000222
Figure BDA0003994260690000231
实施例2
进一步的，本实施例评价了XIAP在诊断方面的灵敏度和特异性。实验上，另外选取80例CKD患者(CKD组)和40例健康对照人群(健康对照组)作为实验数据集，以eGFR作为临床工作中诊断CKD的金标准，利用Graphpad Prism软件绘制受试者工作曲线(ROC Curve)，采用曲线下面积AUC值评价筛选的XIAP是否可以作为诊断的早期生物学标志物，计算XIAP诊断慢性肾脏病的特异度以及灵敏度，并筛选得到合适的临界值，作为临床工作中XIAP诊断慢性肾脏病以及进展风险的参考值上限。
结果如图4所示，可得出XIAP的分界值为724.9ng/L时，AUC为0.9610,灵敏度可高达94.59％，特异度达82.5％，因此XIAP对CKD的发生和进展有着极为优秀的敏感性和特异性。
研究发现，XIAP在CKD的早期即有显著升高，且与反映肾功能的指标(血清肌酐和尿素氮)呈正相关关系，随肾功能的恶化有逐渐升高趋势。XIAP与CKD的发生和进展高度相关，可作为CKD早期诊断及进展评价的新的生物学标志物，具有显著临床价值。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本申请的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本申请进行了详细的说明，但本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本申请各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.获取样本中XIAP水平的检测剂或组件在制备用于诊断慢性肾脏病的产品中的应用，或XIAP作为标志物在诊断慢性肾脏病中的应用。
2.一种用于诊断慢性肾脏病的产品，其特征在于，包含获取样本中XIAP水平的检测剂或组件。
3.根据权利要求1所述的应用或权利要求2所述的产品，其特征在于，所述水平包括核酸水平或蛋白水平。
4.根据权利要求3所述的应用或权利要求2所述的产品，其特征在于，所述核酸水平通过测序技术、核酸扩增技术、核酸杂交技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术进行获取；优选的，核酸水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：基因测序法、聚合酶链反应法、等温扩增反应法、基因芯片法、探针杂交法、凝胶电泳法、RNA印迹法、核酸质谱法或液相色谱法。
5.根据权利要求3所述的应用或权利要求2所述的产品，其特征在于，所述蛋白水平通过测序技术、免疫技术、电泳技术、生物质谱技术或色谱技术进行获取；优选的，蛋白水平获取方法包括但不限于以下任一种方法：氨基酸测序法、酶联免疫法、化学发光法、免疫层析法、放射免疫法、免疫组化法、免疫印迹法、流式细胞术、凝胶电泳法、蛋白质谱法或液相色谱法。
6.根据权利要求1所述的应用或权利要求2所述的产品，其特征在于，所述产品中还包括获取其他标志物水平的检测剂或组件；优选的，所述其他标志物包括但不限于SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF之一或多个。
7.根据权利要求1所述的应用或或权利要求2所述的产品，其特征在于，所述样本包括组织、细胞、体液、血清、血浆、全血、尿液、精液、唾液、胸水、腹水、粪便或滑液之一或多个；优选的，所述样本为血清、血浆、全血或尿液。
8.一种在体内或体外诊断慢性肾脏病的方法，其特征在于，包括对受试者样本中XIAP水平进行获取的步骤；
优选的，所述方法包括如下步骤：
(i)获取样本中所述受试者样本中XIAP水平；
(ii)与对照样本进行XIAP水平比较；其中，所述受试者样本与所述对照样本中XIAP水平存在显著性差异是所述受试者患有慢性肾脏病的指征；或者，
(ii)与设定的阈值绝对量进行比较；其中，所述受试者样本水平高于阈值绝对量是所述受试者患有慢性肾脏病的指征；
优选的，所述方法中还包括对受试者样本中其他标志物水平进行获取的步骤，优选地，所述其他标志物包括但不限于如SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF之一或多个。
9.一种在体内或体外检测患有或怀疑患有慢性肾脏病的受试者中标志物的方法，其特征在于，所述方法包括确定或检测来自受试者样本中XIAP水平；
优选地，所述其他标志物包括但不限于如SCr、BUN、KIM-1、TIMP-2、IGFBP-7、MMP-7或EGF之一或多个的水平。
10.一种用于评价或筛选慢性肾脏病的诊断标志物的方法，其特征在于，包含将潜在生物标志物与XIAP进行相关性或者一致性分析的步骤。
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