CN115997822B - 一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于发酵乳领域，具体公开了一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶及其制备方法，该方法首次采用后添加的方式将罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)CGMCC NO.25389添加入酸奶基料中，制备得到含有罗伊氏乳杆菌活菌的酸奶，该酸奶在25℃常温保藏6个月后，活菌数高，质地稳定，依然受到消费者的喜爱。披露了添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389制备高活性常温酸奶的新工艺。与添加了其他常规乳酸菌制备的酸奶相比，添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389所制备的酸奶经长期常温保藏后，活菌数更高，酸奶质地更稳定。
Description
技术领域
本发明属于发酵乳制品领域，具体涉及一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备方法。此外，本发明还涉及一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶。
背景技术
酸奶是以牛奶为主要原料，通过乳酸菌发酵而成的食品，以其良好的口感与生理功能深受广大消费者的青睐。由于许多乳酸菌本身具有一定的益生作用，且发酵过程中产生了许多生理活性的有益物质，因此酸奶不但具备牛奶的全部优点，而且在此基础上又增加了许多有益于人体的营养物质、兼顾了发酵制品的所有益处。酸奶的保健作用主要有：调节胃肠道菌群、增强免疫系统、抗肿瘤、降胆固醇、抑制内毒素、抗氧化、延缓衰老等。
众所周知，传统的酸奶产品主要以冷藏形式为主，这类产品的普及和推广需要连续的冷链运输和冷藏保存，非常不利于相关产品的市场深耕和业务扩张，因此，迎合这一市场需求的常温酸奶便应运而生了。为了达到货架期产品状态稳定的目的，此类酸奶通常是通过发酵后的再次杀菌(二次灭菌)的方式制备而成的，但是活性乳酸菌的杀灭无疑也清除了乳酸菌带来的潜在增益效果，对消费者而言，是莫大的损失。鉴于目前使用的乳酸菌(保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌等)常温下也会在产品中持续发酵生长，从而破坏产品品质的稳定性，因此，寻找一种可在常温条件下稳定存活于酸奶中，并且不对酸奶质地造成显著影响的菌株来应用制备高活性常温酸奶，是本领域技术人员亟待解决的问题。
发明内容
基于上述技术问题，本发明提供了一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶及其制备方法。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备方法，包括以下步骤：(a)将发酵剂接种于发酵基料中进行发酵、灭菌后，得到无菌的酸奶基料；(b)将罗伊氏乳杆菌CGMCCNO.25389添加入无菌的酸奶基料混匀，即得。
进一步地，上述步骤(a)中，发酵剂为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌，其中，所述保加利亚乳杆菌的接种量为5x105～4.5x107CFU/mL，所述嗜热链球菌的接种量为4.5x106～7.5x106CFU/mL。
进一步地，上述步骤(a)中，发酵基料包括牛奶、蔗糖、乳蛋白粉和增稠剂，其中，牛奶占发酵基料的质量百分比为90～93％，蔗糖占发酵基料的质量百分比为5.5～7.5％，乳蛋白粉为全乳蛋白粉或乳清蛋白粉中的一种，占发酵基料的质量百分比为0～3％，增稠剂为变性淀粉、琼脂、果胶和明胶中的一种或多种，占发酵基料的质量百分比为0～0.7％。
进一步地，上述步骤(a)中，发酵温度为39℃～43℃；发酵时间为5～7h。
进一步地，上述步骤(b)中，罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的添加量为5x105～5x107CFU/mL。
另一方面，还提供一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶，由上述任一种制备方法制得。
进一步地，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶在常温保藏6个月后，其活菌数＞3x105CFU/mL。在一个具体实施方式中，所述常温是指25℃。
进一步地，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶在常温保藏6个月后，其pH＞4.00。在一个具体实施方式中，所述常温是指25℃。
进一步地，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶在常温保藏6个月后，其滴定酸度＜90°T。在一个具体实施方式中，所述常温是指25℃。
进一步地，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶在常温保藏6个月后，黏度下降率＜9％。在一个具体实施方式中，所述常温是指25℃。
上述技术方案中的制备方法，首次采用后添加的方式将罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)CGMCC NO.25389添加入酸奶基料中，制备得到含有罗伊氏乳杆菌活菌的酸奶，该酸奶在25℃常温保藏6个月后，活菌数高，质地稳定，依然受到消费者的喜爱。披露了添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389制备高活性常温酸奶的新工艺。与添加了其他常规乳酸菌制备的酸奶相比，添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389所制备的酸奶经长期常温保藏后，活菌数更高，酸奶质地更稳定。
具体实施方式
为更清楚的对本发明技术方案予以阐述，下面将结合具体实施方式对本发明的技术方案进行进一步阐述：
在一个具体的实施方式中，提供了一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备方法，包括以下步骤：(a)将发酵剂接种于发酵基料中进行发酵、灭菌后，得到无菌的酸奶基料；(b)将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389添加入无菌的酸奶基料混匀，即得。
上述技术方案中的制备方法，首次采用后添加的方式将罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)CGMCC NO.25389添加入酸奶基料中，制备得到含有罗伊氏乳杆菌活菌的酸奶，该酸奶在25℃常温保藏6个月后，活菌数高，质地稳定，依然受到消费者的喜爱。披露了添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389制备高活性常温酸奶的新工艺。与添加了其他常规乳酸菌制备的酸奶相比，添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389所制备的酸奶经长期常温保藏后，活菌数更高，酸奶质地更稳定。上述产品打破了市场上没有高活性常温酸奶的乳制品格局。
进一步地，步骤(a)中，发酵剂为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌，其中，保加利亚乳杆菌的接种量为5x105～4.5x107CFU/mL，较佳地为2.25x106～1.75x107CFU/mL，更佳地为5x106CFU/mL，嗜热链球菌的接种量为4.5x106～7.5x106CFU/mL，较佳地为5x106～5.25x106CFU/mL，更佳地为5x106CFU/mL。
进一步地，步骤(a)中，发酵基料包括牛奶、蔗糖、乳蛋白粉和增稠剂，其中，牛奶占发酵基料的质量百分比为90～93％，蔗糖占发酵基料的质量百分比为5.5～7.5％，乳蛋白粉为全乳蛋白粉或乳清蛋白粉中的一种，占发酵基料的质量百分比为0～3％，增稠剂为变性淀粉、琼脂、果胶和明胶中的一种或多种，占发酵基料的质量百分比为0～0.7％。
进一步地，步骤(a)中，发酵温度为39℃～43℃，较佳地为40℃～42℃，最佳地为41℃；发酵时间为5～7h，较佳地为5.5～6.5h，最佳地为6h。
进一步地，步骤(b)中，罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的分类命名为罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)，于2022年7月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。其添加量为5x105～5x107CFU/mL，较佳地为1x106～1x107CFU/mL，最佳地为5x106CFU/mL。
结合实施例1和对比例1亦可知，在优选的酸奶制备工艺参数的范围之外时，所制备的酸奶经25℃常温保藏6个月后，酸奶中的活菌数量明显下降。例如，在嗜热链球菌接种量过少或牛奶浓度过低或发酵温度过低或发酵时间过短时，嗜热链球菌发酵过慢，所产生的可被罗伊氏乳杆菌再次利用的代谢产物较少，使得罗伊氏乳杆菌在长期的常温保藏过程中因维持正常代谢的营养物质(嗜热链球菌的代谢产物)过少而大量衰亡。又例如，当罗伊氏乳杆菌添加量过多时，罗伊氏乳杆菌利用酸奶中的嗜热链球菌代谢产物，迅速合成并大量积累包括乳酸在内的代谢产物，后者直接恶化了生境，从而影响了自身的存活能力，最终导致活菌数大幅下降。
而在优选范围之内，嗜热链球菌接种量，牛奶浓度，发酵温度，发酵时间以及罗伊氏乳杆菌添加量相互影响，使得所制备的酸奶经常温保藏6个月后，其中的活菌数依然稳定维持在3x105CFU/mL以上。
在另一个具体的实施方式中，提供了一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶，该酸奶由上述任一种制备方法制得。
进一步的，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶常温保藏6个月后，其活菌数＞3x105CFU/mL。结合对比例亦可知，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶的活菌数显著高于添加其他常规乳酸菌制备而成的常温酸奶。
进一步地，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶常温保藏6个月后，其pH＞4.00。
进一步地，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶常温保藏6个月后，其滴定酸度＜90°T。
进一步地，上述罗伊氏乳杆菌常温酸奶常温保藏6个月后，黏度下降率＜9％。
下面通过实施例进一步说明上述具体实施方式，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。实施例中所使用的牛奶由光明乳业股份有限公司提供，所使用的乳蛋白粉由戴维林国际贸易有限公司提供，所使用的增稠剂由奕方农业科技股份有限公司提供，所使用的试剂若未加说明，均为分析纯试剂，购买自国药集团。其他试验仪器、试剂，如未做特别说明，均可通过商业途径直接购得。
实施例1
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)或罗伊氏乳杆菌菌剂的制备：
保加利亚乳杆菌种子：将保加利亚乳杆菌LB-340(由丹尼斯克公司提供，丹麦)的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于MRS固体培养基(购买自Merck Co.，美国)，37℃厌氧培养48h取出，用接种环挑取单菌落放入10mL MRS液体培养基(购买自Merck Co.，美国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基，37℃再次培养24h后，培养物15,000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到发酵用的种子，种子液的菌浓度为4x109CFU/mL。
嗜热链球菌种子：将嗜热链球菌ST-BODY-3(由科.汉森公司提供，丹麦)的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于M17固体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，37℃厌氧培养48h取出，用接种环挑取单菌落放入10mL M17液体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于M17液体培养基，37℃再次培养24h后，培养物15,000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到发酵用的种子，种子液的菌浓度为8.5x108CFU/mL。
罗伊氏乳杆菌菌剂：将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于MRS固体培养基(购买自Merck Co.，美国)，37℃厌氧培养48h取出，用接种环挑取单菌落放入10mL MRS液体培养基(购买自Merck Co.，美国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基，37℃再次培养24h后，培养物15,000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到用于后添加的罗伊氏乳杆菌菌剂，该菌剂浓度为3x109CFU/mL。
罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的分类命名为罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)，于2022年7月22日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。
(b)发酵基料的制备：
将质量百分比为93％的牛奶与7％的蔗糖混匀，充分溶解后，90℃灭菌10min，冷却至室温，即得所需的无菌发酵基料。
2、罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备
将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌种子分别以初始接种量5x106CFU/mL和5x106CFU/mL无菌接种于上述无菌的发酵基料中，41℃培养6h后灭菌，得无菌的酸奶基料。将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的菌剂以初始添加量5x107CFU/mL添加入无菌的酸奶基料中混匀，即得本实施例的酸奶A。
经检测，酸奶A的pH为4.5，酸度为74°T，黏度为346cP。
实施例2
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)或罗伊氏乳杆菌菌剂的制备：同实施例1。
(b)发酵基料的制备：
将质量百分比为90％的牛奶、7.5％的蔗糖和2.5％的全乳蛋白粉混匀，充分溶解后，135℃灭菌5s，冷却至室温，即得所需的无菌发酵基料。
2、罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备
将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌种子分别以初始接种量5x105CFU/mL和4.5x106CFU/mL无菌接种于上述无菌的发酵基料中，40℃培养7h后灭菌，得无菌的酸奶基料。将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的菌剂以初始添加量1x106CFU/mL添加入无菌的酸奶基料中混匀，即得本实施例的酸奶B。
经检测，酸奶B的pH为4.28，酸度为80°T，黏度为363cP。
实施例3
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)或罗伊氏乳杆菌菌剂的制备：同实施例1。
(b)发酵基料的制备：
将质量百分比为92.8％的牛奶、6.5％的蔗糖、0.17％的琼脂和0.53％的变性淀粉混匀，充分溶解后，90℃灭菌10min，冷却至室温，即得所需的无菌发酵基料。
2、罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备
将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌种子分别以初始接种量2.25x106CFU/mL和5.25x106CFU/mL无菌接种于上述无菌的发酵基料中，42℃培养7h后灭菌，得无菌的酸奶基料。将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的菌剂以初始添加量5x105CFU/mL添加入无菌的酸奶基料中混匀，即得本实施例的酸奶C。
经检测，酸奶C的pH为4.22，酸度为83°T，黏度为447cP。
实施例4
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)或罗伊氏乳杆菌菌剂的制备：同实施例1。
(b)发酵基料的制备：
将质量百分比为92.4％的牛奶、5.5％的蔗糖、1.5％的全乳蛋白粉、0.35％的变性淀粉和0.25％的果胶混匀，充分溶解后，135℃灭菌5s，冷却至室温，即得所需的无菌发酵基料。
2、罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备
将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌种子分别以初始接种量1.75x107CFU/mL和7.5x106CFU/mL无菌接种于上述无菌的发酵基料中，39℃培养5.5h后灭菌，得无菌的酸奶基料。将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的菌剂以初始添加量7.5x105CFU/mL添加入无菌的酸奶基料中混匀，即得本实施例的酸奶D。
经检测，酸奶D的pH为4.35，酸度为77°T，黏度为455cP。
实施例5
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)或罗伊氏乳杆菌菌剂的制备：同实施例1。
(b)发酵基料的制备：
将质量百分比为91.1％的牛奶、7％的蔗糖、1.5％的乳清蛋白粉、0.25％的果胶和0.15％的明胶混匀，充分溶解后，90℃灭菌10min，冷却至室温，即得所需的无菌发酵基料。
2、罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备
将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌种子分别以初始接种量4.5x107CFU/mL和5x106CFU/mL无菌接种于上述无菌的发酵基料中，43℃培养5h后灭菌，得无菌的酸奶基料。将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的菌剂以初始添加量5x106CFU/mL添加入无菌的酸奶基料中混匀，即得本实施例的酸奶E。
经检测，酸奶E的pH为4.23，酸度为84°T，黏度为444cP。
实施例6
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)或罗伊氏乳杆菌菌剂的制备：同实施例1。
(b)发酵基料的制备：
将质量百分比为91.3％的牛奶、6％的蔗糖、1％的全乳蛋白粉、1％的乳清蛋白粉、0.15％的琼脂、0.15％的变性淀粉、0.2％的果胶和0.2％的明胶混匀，充分溶解后，135℃灭菌5s，冷却至室温，即得所需的无菌发酵基料。
2、罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备
将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌种子分别以初始接种量5x106CFU/mL和5x106CFU/mL无菌接种于上述无菌的发酵基料中，41℃培养6.5h后灭菌，得无菌的酸奶基料。将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389的菌剂以初始添加量1x107CFU/mL添加入无菌的酸奶基料中混匀，即得本实施例的酸奶F。
经检测，酸奶F的pH为4.45，酸度为75°T，黏度为456cP。
效果实施例1 25℃常温保藏实验
取上述实施例1-6所制备的酸奶A、B、C、D、E和F置于25℃常温条件下进行保藏，并于0、2个月、4个月和6个月时取出，分别测定各样品的活菌数、pH、酸度、黏度(黏度下降率＝(初始黏度-实测黏度)÷初始黏度×100％)，结果如表1-4所示。
表1 25℃常温保藏期内酸奶的活菌数统计表
表2 25℃常温保藏期内酸奶的pH统计表
表3 25℃常温保藏期内酸奶的酸度统计表
表4 25℃常温保藏期内酸奶的黏度及黏度下降率统计表
由表1-4可知，所有测试的酸奶在25℃常温保藏期内，活菌数均稳定维持在3x105CFU/mL以上，pH均保持在4.00以上，滴定酸度始终在90°T以下，黏度下降率不到9％。
效果实施例2酸奶口味与喜好程度测试
将上述实施例1-6所制备的酸奶A、B、C、D、E和F置于25℃常温保藏6个月后，进行口味测试。测试人数50人。品尝方式：采用不记名打分的方式进行品尝；分别对上述酸奶的色泽、酸甜比、风味、口感、营养项进行单独打分，每一项满分是20分，计算平均分及其总分，统计结果记录于表5。同时，根据对产品的整体喜好程度给出的意见，统计对每个单品的喜好人数，统计结果记录于表6。
表5酸奶口味测试结果统计表
表6酸奶喜好程度测试结果统计表
从酸奶口味测试和喜好程度统计结果可以看出，总体而言，通过本发明技术方案中的方法所制得的罗伊氏乳杆菌常温酸奶在产品风味、酸甜比、风味、口感、营养等方面可被大部分消费者所接受。
对比例1
将实施例1中的嗜热链球菌接种量，牛奶浓度，发酵温度，发酵时间以及罗伊氏乳杆菌添加量逐一进行调整，获得了以下一组不同方法制备的酸奶，将各组所得酸奶置于25℃常温条件下保藏6个月，分别测定各样品的活菌数，结果如表7所示。
表7不同方法制备所得酸奶经25℃常温保藏6个月后的活菌数比较
从表7所示的结果中可以得出，将所述酸奶的制备方法中嗜热链球菌接种量，牛奶浓度，发酵温度，发酵时间以及罗伊氏乳杆菌添加量调整到优选范围之外的时候，所制备的酸奶经25℃常温保藏6个月后，酸奶中依然有活菌存在，但是活菌数量明显下降。
对比例2添加不同乳酸菌制备的酸奶的常温保藏效果比较
参考实施例1所述方法，比较添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389、发酵乳杆菌CGMCC No.17321(由光明乳业股份有限公司提供，中国上海)、双歧杆菌(B.animalis)BB12(由科.汉森公司提供，丹麦)、干酪乳杆菌(L.casei)ATCC 393(购买自ATCC)、鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)LGG(由科.汉森公司提供，丹麦)制备的酸奶经25℃常温保藏6个月后的活菌数，具体操作如下：
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)或不同乳酸菌菌剂的制备：
保加利亚乳杆菌种子：同实施例1。
嗜热链球菌种子：同实施例1。
罗伊氏乳杆菌菌剂：同实施例1。
双歧杆菌菌剂：将双歧杆菌BB12的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于TPY固体培养基(购买自Merck Co.，美国)，37℃厌氧培养48h取出，用接种环挑取单菌落放入10mL TPY液体培养基(购买自Merck Co.，美国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于TPY液体培养基，37℃再次培养24h后，培养物15,000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到用于后添加的双歧杆菌菌剂，该菌剂浓度为4.3x108CFU/mL。
干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、发酵乳杆菌菌剂：将干酪乳杆菌ATCC 393、鼠李糖乳杆菌LGG、发酵乳杆菌CGMCC No.17321的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于MRS固体培养基(购买自Merck Co.，美国)，37℃厌氧培养48h取出，用接种环挑取单菌落放入10mL MRS液体培养基(购买自Merck Co.，美国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基，37℃再次培养24h后，培养物15,000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到用于后添加的菌剂，三种乳酸菌菌剂浓度分别为2.7x109CFU/mL、5.9x109CFU/mL和5x109CFU/mL。
(b)发酵基料的制备：同实施例1。
2、添加不同乳酸菌的酸奶的制备
将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌种子分别以初始接种量5x106CFU/mL和5x106CFU/mL无菌接种于上述无菌的发酵基料中，41℃培养6h后灭菌，得无菌的酸奶基料。将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389、双歧杆菌BB12、干酪乳杆菌ATCC 393、鼠李糖乳杆菌LGG、发酵乳杆菌CGMCC No.17321的菌剂分别以初始添加量5x107CFU/mL添加入无菌的酸奶基料中混匀，即得添加不同乳酸菌制备而成的酸奶。
2、25℃常温保藏
将上述添加不同乳酸菌制备而成的酸奶置于25℃常温保藏6个月，测定其中的活菌数，结果如表8所示。
表8添加不同乳酸菌制备的酸奶经25℃常温保藏6个月后活菌数比较
由表8可知，添加罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389制备的酸奶经25℃常温保藏6个月后，其中活菌数达到2×106CFU/mL，存活效果显著高于添加了发酵乳杆菌的常温酸奶(3.6×105CFU/mL)，而添加了其他常规乳酸菌制备的酸奶在相同条件下无菌体存活。
以上对本发明所提供的罗伊氏乳杆菌常温酸奶及其制备方法进行了详细介绍。本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。
Claims (2)
1.一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）将发酵剂接种于发酵基料中进行发酵、灭菌后，得到无菌的酸奶基料；这里的发酵剂为保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌，其中，所述保加利亚乳杆菌的接种量为5x105~4.5x107 CFU/mL，所述嗜热链球菌的接种量为4.5x106~7.5x106 CFU/mL；所述的发酵基料包括牛奶、蔗糖、乳蛋白粉和增稠剂，其中，牛奶占发酵基料的质量百分比为90~93%，蔗糖占发酵基料的质量百分比为5.5~7.5%，乳蛋白粉为全乳蛋白粉或乳清蛋白粉中的一种，占发酵基料的质量百分比为0~3%，增稠剂为变性淀粉、琼脂、果胶和明胶中的一种或多种，占发酵基料的质量百分比为0~0.7%；发酵过程的发酵温度为39℃~43℃，发酵时间为5~7h；（b）将罗伊氏乳杆菌CGMCC NO.25389添加入无菌的酸奶基料混匀；这里的罗伊氏乳杆菌CGMCC NO. 25389的添加量为5x105~5x107 CFU/mL。
2.一种罗伊氏乳杆菌常温酸奶，其特征在于，由权利要求1所述的制备方法制得，该酸奶常温保藏6个月后，其活菌数＞3x105 CFU/mL，pH＞4.00，滴定酸度＜90 oT，黏度下降率＜9%。
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