CN115996922B - Rho相关蛋白激酶抑制剂的盐、其固体形式及其制备方法和用途 - Google Patents

Rho相关蛋白激酶抑制剂的盐、其固体形式及其制备方法和用途 Download PDF

Info

Publication number
CN115996922B
CN115996922B CN202180053323.5A CN202180053323A CN115996922B CN 115996922 B CN115996922 B CN 115996922B CN 202180053323 A CN202180053323 A CN 202180053323A CN 115996922 B CN115996922 B CN 115996922B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
carcinoma
disease
cancer
medicament
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202180053323.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115996922A (zh
Inventor
赵焰平
王红军
冯泽旺
田娜娜
魏来
曹想荣
陈婕
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd
Priority claimed from PCT/CN2021/115198 external-priority patent/WO2022042712A1/zh
Publication of CN115996922A publication Critical patent/CN115996922A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115996922B publication Critical patent/CN115996922B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明涉及(6‑(4‑((4‑(1H‑吡唑‑4‑基)苯基)氨基)嘧啶‑2‑基)‑1‑甲基‑1H‑吲哚‑2‑基)(3，3‑二氟氮杂环丁烷‑1‑基)甲酮(在下文中称作“化合物A”)的盐及其固体形式，制备所述固体形式的方法、包含所述固体形式的药物组合物，以及所述固体形式用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂的用途。

Description

Rho相关蛋白激酶抑制剂的盐、其固体形式及其制备方法和 用途
发明领域
本发明涉及(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(在下文中称作“化合物A”)的盐及其固体形式，制备所述固体形式的方法、包含所述固体形式的药物组合物，以及所述固体形式用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂的用途。
发明背景
Rho相关蛋白激酶(ROCK)为AGC激酶家族的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其包括两种亚型，ROCK1和ROCK2。ROCK1和ROCK2在特定组织中被差异性地表达和调节。例如ROCK1以相对高的水平普遍表达，而ROCK2在心脏、脑和骨骼肌中优先表达。ROCK是第一个被发现的Rho蛋白下游效应因子，其通过磷酸化下游的效应蛋白(MLC、Lin-11、Isl-1、LIMK、ERM、MARCKS、CRMP-2等)来实现其生物学功能。研究表明多种疾病(如肺纤维化、心脑血管疾病、神经系统疾病和癌症等)与ROCK介导的通路有关，因此在药物研发中，ROCK被认为是一类重要的靶点。
本申请人已发现(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮可用作有效的Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂(参见PCT/CN2018/093713，将其整体通过援引加入本文)，但对于该化合物的盐及其固体形式尚未有任何报道。
发明概述
在一个方面中，本发明提供如下所示的化合物A((6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮)的盐：
在另一方面中，本发明提供化合物A的盐及其溶剂合物的晶型。
本发明的优选晶型不仅在预防或治疗Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病中具有优异的效果，还具有其它优点。例如，本发明的优选晶型具有优良的物理性质(包括溶解度、溶出率、耐光照性、低吸湿性、耐高温性、耐高湿性、流动性等)，并且在诸如生物利用度、物理和/或化学稳定性及易于制备性等性质上，本发明的优选晶型可具有更优异的性质。本发明的优选晶型具有良好的粉体学性质，更适合和便于大量制造和用于形成制剂，可减少刺激性并提高吸收，解决了代谢速度方面的问题，显著降低了药物蓄积带来的毒性，提高了安全性，有效保证了药物产品的质量和效能。
在另一方面中，本发明提供制备本发明的晶型的方法。
在另一方面中，本发明提供药物组合物，其包含本发明中的任意一种或多种晶型，以及一种或多种药学上可接受的载体。
在另一方面中，本发明提供本发明的晶型在制备用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂的药物中的用途。
附图简要说明
图1为化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I的X射线粉末衍射(XRPD)图谱。
图2为化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I的差示扫描量热(DSC)图谱。
图3为化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I的热重分析(TGA)图谱。
图4为化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I的扫描电子显微镜照片。
图5为化合物A的单盐酸盐二水合物的晶型II的XRPD图谱。
图6为化合物A的单盐酸盐二水合物的晶型II的DSC-TGA图谱。
图7为化合物A的单盐酸盐二水合物的晶型II的扫描电子显微镜照片。
图8为化合物A的单盐酸盐倍半水合物的晶型III的XRPD图谱。
图9为化合物A的单盐酸盐倍半水合物的晶型III的DSC-TGA图谱。
图10为化合物A的单盐酸盐倍半水合物的晶型III的扫描电子显微镜照片。
图11为化合物A的单盐酸盐单二甲基亚砜合物的晶型IV的XRPD图谱。
图12为化合物A的单盐酸盐单二甲基亚砜合物的晶型IV的DSC图谱。
图13为化合物A的单盐酸盐单二甲基亚砜合物的晶型IV的TGA图谱。
图14为化合物A的单盐酸盐单二甲基亚砜合物的晶型IV扫描电子显微镜照片。
图15为实验例2的固体稳定性测试中获得的样品的XRPD图谱。
图16为实验例4的DVS测定前后样品的XRPD图谱。
图17为实验例5的水中晶型转变实验前后样品的XRPD图谱。
图18为实验例6的研磨实验中获得的样品的XRPD图谱。
图19为实验例7的固体稳定性测试中获得的样品的XRPD图谱。
图20为实验例7的固体稳定性测试中获得的样品的TGA图谱。
发明详细描述
定义
除非在下文中另有定义，本文中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。提及本文中使用的技术意图指在本领域中通常所理解的技术，包括那些对本领域技术人员显而易见的技术的变化或等效技术的替换。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本发明。
如本文中所使用的术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”及其在本文中的其它变体形式为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。
如本文中所使用的词语“约”是指本领域的普通技术人员认为在所述值的可接受的标准误差内，例如±0.05、±0.1、±0.2、±0.3、±1、±2或±3等。
本发明所使用的术语“固体形式”包括化合物A或其任意溶剂合物的所有固态形式，例如晶体形式或无定形形式。
如本文中所使用的术语“无定形”是指三维上无排序的任意固体物质。在一些情况中，无定形固体可通过已知技术表征，所述技术包括XRPD晶体学、固态核磁共振(ssNMR)波谱学、DSC或这些技术的一些组合。如以下所说明，无定形固体产生弥散的XRPD图谱，其通常包括一个或两个宽峰(即具有约5°2θ或更大的基宽的峰)。
如本文中所使用的术语“晶型”或“晶体”是指呈现三维排序的任意固体物质，与无定形固体物质相反，其产生具有边界清楚的峰的特征性XRPD图谱。
如本文中所使用的术语“X射线粉末衍射图谱(XRPD图谱)”是指实验观察的衍射图或源于其的参数。XRPD图谱通常由峰位(横坐标)和/或峰强度(纵坐标)表征。
如本文中所使用的术语“2θ”是指基于X射线衍射实验的实验设置的以度数表示的峰位，并且通常是在衍射图谱中的横坐标单位。如果当入射束与某晶格面形成θ角时反射被衍射，则实验设置需要以2θ角记录反射束。应当理解，在本文中提到的特定晶体形式的特定2θ值意图表示使用本文所述的x射线衍射实验条件所测量的2θ值(以度数表示)。例如，如本文所述，使用Cu-Kα(Kα11.540598和Kα21.544426)作为辐射源。
如本文中所使用，“I％”表示峰强度百分比。
如本文中所使用的术语“差示扫描量热(DSC)图谱”是指由差示扫描量热仪记录到的曲线。
如本文中所使用的术语“热重分析(TGA)图谱”是指由热重分析仪记录到的曲线。
如本文中所使用的，对于X射线衍射峰位的术语“基本上相同”意指将代表性峰位和强度变化考虑在内。例如，本领域技术人员会理解峰位(2θ)会显示一些变化，通常多达0.1-0.2度，并且用于测量衍射的仪器也会显示一些变化。另外，本领域技术人员会理解相对峰强度会显示仪器间的变化以及由于结晶性程度、择优取向、制备的样品表面以及本领域技术人员已知的其它因素的变化。相似地，如本文中所使用，对于DSC图谱的“基本上相同”也意图涵盖本领域技术人员已知的与这些分析技术有关的变化。例如，对于边界清楚的峰，在差示扫描量热图谱通常会具有多达±0.2℃的变化，对于宽峰甚至更大(例如多达±1℃)。
本申请中的液态核磁谱图优选在BrukerAdvance300核磁共振仪上采集，除非另外说明，以DMSO-d6作为溶剂。
本申请中的偏光显微数据优选通过Polarizing Microscope ECLIPSE LV100POL(Nikon，JPN)进行采集。
如本文中所使用的数值范围(如“1-10个”、“1-6个”、“2-10个”、“2-6个”、“3-10个”、“5-10个”、“3-6个”)等涵盖所述数值范围中的任意个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个)。
可将制备的盐或其晶体形式通过包括倾析、离心、蒸发、重力过滤、抽滤或者在加压下或在减压下的任何其它用于固体回收的技术在内的方法进行回收。可将回收的固体任选地进行干燥。本发明中的“干燥”是在减压(优选真空)下进行直到残留溶剂的含量降低至International Conference on Harmonisation of Technical Requirements forRegistration of Pharmaceuticals for Human Use(“ICH”)指南所给出的限度的范围内。残留溶剂含量取决于溶剂的类型，但不超过约5000ppm、或优选约4000ppm、或更优选约3000ppm。所述干燥可以在盘式干燥器、真空烘箱、空气烘箱、锥形真空干燥器(cone vacuumdryer)、旋转式真空干燥器、流化床干燥器、旋转闪蒸干燥器、快速干燥器等中进行。所述干燥可以在低于约100℃、低于约80℃、低于约60℃、低于约50℃、低于约30℃的温度或任何其它合适的温度下，在大气压或减压(优选真空)下在能够实现期望的结果的任何期望的时间内(如约1、2、3、5、10、15、20、24小时或者过夜)进行，只要盐的品质不劣化。所述干燥可以进行任何期望的次数，直到实现所需的产物品质。干燥的产物可以任选地经历粉碎操作，以产生期望的粒度。可在产物的干燥前或干燥完成后进行研磨或微粉化。可用于减小粒度的技术包括但不限于球磨、辊磨和锤磨，以及喷射研磨(jet milling)。
如本文中所使用的术语“无水物”优选意指其中不含有水分子作为结构要素的晶型。
化合物A的盐、其晶型及其制备方法
在一些实施方案中，本发明提供化合物A的盐，
其为无机酸盐或有机酸盐。
在优选的实施方案中，本发明提供化合物A的盐，其为化合物A的盐酸盐；
优选地，所述化合物A的盐酸盐为化合物A的单盐酸盐；
优选地，所述化合物A的盐酸盐为化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I；
所述晶型I的XRPD图谱包括在约8.3±0.2°、12.6±0.2°和18.5±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
优选包括在约8.3±0.2°、12.6±0.2°、16.5±0.2°、17.3±0.2°、17.8±0.2°、18.5±0.2°、24.4±0.2°、26.0±0.2°和29.1±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
最优选包括在约8.3±0.2°、11.2±0.2°、12.6±0.2°、16.5±0.2°、17.3±0.2°、17.8+0.2°、18.5±0.2°、19.5±0.2°、19.8±0.2°、20.6±0.2°、21.0±0.2°、21.7±0.2°、23.7±0.2°、24.4±0.2°、25.5±0.2°、26.0±0.2°、29.1±0.2°和33.6±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰。
在更优选的实施方案中，所述晶型I的XRPD图谱包括在以下衍射角(2θ)处的峰：
在更优选的实施方案中，所述晶型I的XRPD图谱包括与图1所示基本上相同的衍射角(2θ)处的峰。在最优选的实施方案中，所述晶型I的XRPD图谱与图1所示基本上相同。
在更优选的实施方案中，所述晶型I的DSC图谱包括在约105℃、约146℃和约245℃处的吸热峰。
在更优选的实施方案中，所述晶型I的DSC图谱包括与图2所示基本上相同的特征峰。在最优选的实施方案中，所述晶型I的DSC图谱与图2所示基本上相同。
在更优选的实施方案中，在热重分析中，所述晶型I在加热至约169℃时有约3.4％的失重。
所述晶型I的DSC图谱显示在75-169℃有连续两个吸热峰，对应TGA图谱中在169℃之前有约3.4％的失重，说明晶型I在温度高于75℃时开始失水。
在最优选的实施方案中，所述晶型I的TGA图谱与图3所示基本上相同。
在最优选的实施方案中，所述晶型I的扫描电子显微镜照片与图4所示基本上相同。
在一些实施方案中，本发明提供制备晶型I的方法，其包括向化合物A中加入酮类溶剂(优选具有3-6个碳原子的酮，其包括但不限于丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮)，在加热下(优选加热至约40-80℃，例如约50℃或约60℃)搅拌，然后加入水(所述酮类溶剂和水的体积比优选为约(1-15)∶1，优选约10∶1)，以使化合物A完全溶解；随后加入盐酸(盐酸浓度优选为2-15mol/L，优选12mol/L(即浓盐酸)，化合物A和HCl的摩尔比为1∶(1-1.3))，在加热下(优选加热至约40-80℃，例如约50℃或60℃)搅拌，过滤并任选地干燥得到晶体。
在优选的实施方案中，所述化合物A的盐酸盐为化合物A的单盐酸盐二水合物的晶型II；
所述晶型II的XRPD图谱包括在约9.9±0.2°、13.2±0.2°和16.2±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
优选包括在约9.9±0.2°、11.0±0.2°、13.2±0.2°、13.5±0.2°、13.8±0.2°、16.2±0.2°、19.4±0.2°和25.2±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
最优选包括在约6.5±0.2°、9.9±0.2°、11.0±0.2°、11.6±0.2°、11.8±0.2°、13.2±0.2°、13.5±0.2°、13.8±0.2°、16.2±0.2°、16.6±0.2°、17.1±0.2°、18.2±0.2°、19.4±0.2°、20.0±0.2°、20.3±0.2°、20.9±0.2°、22.6±0.2°、24.9±0.2°、25.2±0.2°和25.9±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰。
在更优选的实施方案中，所述晶型II的XRPD图谱包括在以下衍射角(2θ)处的峰：
峰编号 2θ(°)±0.2° I％ 峰编号 2θ(°)±0.2° I％ 峰编号 2θ(°)±0.2° I％
1 6.5 16.1 14 18.2 10.9 27 29.2 7.7
2 8.1 9.5 15 19.4 22.9 28 30.0 7
3 9.9 100 16 20.0 11.5 29 30.4 7.6
4 11.0 24.6 17 20.3 16.9 30 31.8 4.7
5 11.6 13.3 18 20.9 15.4 31 32.8 6.9
6 11.8 17.4 19 22.6 12.2 32 33.5 6.3
7 13.2 32.6 20 23.8 7 33 34.1 8.1
8 13.5 26.8 21 24.9 15.7 34 35.0 5.3
9 13.8 20 22 25.2 18.4 35 35.9 5.5
10 15.4 7.5 23 25.9 12.3 36 36.8 5
11 16.2 29.9 24 26.8 8.4 37 39.3 5.9
12 16.6 14 25 27.1 8.2 38
13 17.1 12.9 26 27.9 7 39
在更优选的实施方案中，所述晶型II的XRPD图谱包括与图5所示基本上相同的衍射角(2θ)处的峰。在最优选的实施方案中，所述晶型II的XRPD图谱与图5所示基本上相同。
在更优选的实施方案中，所述晶型II的DSC图谱包括在约25-180℃处的宽吸热峰以及在约217-243℃处的吸热峰。
在更优选的实施方案中，在热重分析中，所述晶型II在加热至约180℃时有约7.1％的失重。
所述晶型II的DSC图谱显示在25-180℃有一个宽吸热峰，对应TGA图谱中在180℃之前有约7.1％的失重，说明晶型II在温度高于25℃后开始失水。
在最优选的实施方案中，所述晶型II的DSC-TGA图谱与图6所示基本上相同。
在最优选的实施方案中，所述晶型II的扫描电子显微镜照片与图7所示基本上相同。
在一些实施方案中，本发明提供制备化合物A的单盐酸盐二水合物的晶型II的方法，其包括将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I加入至含水的具有1-10个碳原子的醇类溶剂(所述醇类溶剂优选为具有1-6个碳原子的醇，其包括但不限于甲醇、乙醇、1-丙醇(正丙醇)、2-丙醇(异丙醇)、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇；所述晶型I和所述醇类溶剂的重量体积比(g/mL)为约1∶(1-100)，优选约1∶50)中，将溶液在约10-40℃(例如约20-30℃)的温度下搅拌约10-60小时(例如约50小时)，过滤并任选地干燥得到晶体。
在优选的实施方案中，所述化合物A的盐酸盐为化合物A的单盐酸盐倍半水合物的晶型III；
所述晶型III的XRPD图谱包括在约5.1±0.2°、9.1±0.2°和10.2±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
优选包括在约5.1±0.2°、5.4±0.2°、6.0+0.2°、9.1±0.2°、10.2±0.2°、11.2±0.2°和18.0±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
最优选包括在约5.1±0.2°、5.4±0.2°、6.0±0.2°、6.3±0.2°、7.5±0.2°、7.8±0.2°、8.4±0.2°、9.1±0.2°、10.2±0.2°、10.7±0.2°、11.2±0.2°、12.2±0.2°、12.5±0.2°、12.9±0.2°、13.7±0.2°、13.9±0.2°、15.4±0.2°、15.7±0.2°、16.2±0.2°、16.8±0.2°、18.0±0.2°、18.7±0.2°、19.3±0.2°、20.0±0.2°、20.6±0.2°、21.5±0.2°和23.3±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰。
在更优选的实施方案中，所述晶型III的XRPD图谱包括在以下衍射角(2θ)处的峰：
峰编号 2θ(°)±0.2° I％ 峰编号 2θ(°)±0.2° I％ 峰编号 2θ(°)±0.2° I％
1 5.1 100 12 12.2 23.2 23 19.3 19.7
2 5.4 34.8 13 12.5 28.5 24 20.0 20.9
3 6.0 36 14 12.9 26 25 20.6 1 1.2
4 6.3 26.5 15 13.7 18.8 26 21.5 13.5
5 7.5 18.8 16 13.9 19.8 27 23.3 21.7
6 7.8 30.1 17 15.4 15.5 28 24.6 8.9
7 8.4 19.7 18 15.7 17.2 29 25.2 9.1
8 9.1 90.7 19 16.2 13.9 30 26.1 7.9
9 10.2 59 20 16.8 14.1 31 27.8 8.5
10 10.7 26.8 21 18.0 52.7 32 31.0 7
11 11.2 40.3 22 18.7 16.6
在更优选的实施方案中，所述晶型III的XRPD图谱包括与图8所示基本上相同的衍射角(2θ)处的峰。在最优选的实施方案中，所述晶型III的XRPD图谱与图8所示基本上相同。
在更优选的实施方案中，所述晶型III的DSC图谱包括在约25-134℃处的宽吸热峰以及在约137℃和约251℃处的吸热峰。
在更优选的实施方案中，在热重分析中，所述晶型III在加热至约180℃时有约4.3％的失重。
所述晶型III的DSC图谱显示在25-180℃有一个宽吸热峰和一个小吸热峰，对应TGA图谱中在180℃之前有约4.3％的失重，说明所述的晶型III在温度高于25℃时开始失水。
在最优选的实施方案中，所述晶型III的DSC-TGA图谱与图9所示基本上相同。
在最优选的实施方案中，所述晶型III的扫描电子显微镜照片与图10所示基本上相同。
在一些实施方案中，本发明提供制备化合物A的单盐酸盐倍半水合物的晶型III的方法，其包括将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I加入至含水的具有1-10个碳原子的醇类溶剂(所述醇类溶剂优选为具有1-6个碳原子的醇，其包括但不限于甲醇、乙醇、1-丙醇(正丙醇)、2-丙醇(异丙醇)、1-丁醇、2-丁醇和叔丁醇；所述晶型I和所述醇类溶剂的重量体积比(g/mL)为约1∶(1-100)，优选约1∶50)中，在约10-40℃(例如约20-30℃)的温度下加入具有6-10个碳原子的芳烃类溶剂(例如甲苯；所述醇类溶剂和所述芳烃类溶剂的体积比优选为约1∶(1-15)，例如约1∶5)，将溶液搅拌约1-6小时(例如约2小时)，过滤并任选地干燥得到晶体。
在优选的实施方案中，所述化合物A的盐酸盐为化合物A的单盐酸盐单二甲基亚砜合物的晶型IV；
所述晶型IV的XRPD图谱包括在约6.6±0.2°、8.9±0.2°和18.5±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
优选包括在约6.6±0.2°、8.9±0.2°、11.6±0.2°、14.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°、24.7±0.2°和25.0±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰；
最优选包括在约4.1±0.2°、6.6±0.2°、8.9±0.2°、11.2±0.2°、11.6±0.2°、13.3±0.2°、13.8±0.2°、14.6±0.2°、15.7±0.2°、17.7±0.2°、18.1±0.2°、18.5±0.2°、19.4±0.2°、20.0±0.2°、20.7±0.2°、21.4±0.2°、22.0±0.2°、22.6±0.2°、23.0±0.2°、23.8±0.2°、24.7±0.2°、25.0±0.2°、26.5±0.2°、27.9±0.2°、29.7±0.2°和32.8±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰。
在更优选的实施方案中，所述晶型IV的XRPD图谱包括在以下衍射角(2θ)处的峰：
峰编号 2θ(°)±0.2° I％ 峰编号 2θ(°)±0.2° I％ 峰编号 2θ(°)±0.2° I％
1 4.1 26.8 10 17.7 54.3 19 23.0 22.9
2 6.6 64.5 11 18.1 28.6 20 23.8 18.1
3 8.9 71.3 12 18.5 100 21 24.7 38.1
4 11.2 18.4 13 19.4 23.6 22 25.0 38.6
5 11.6 55.5 14 20.0 26.2 23 26.5 17.9
6 13.3 18.4 15 20.7 27.8 24 27.9 21.6
7 13.8 19.4 16 21.4 21.1 25 29.7 16.8
8 14.6 39.4 17 22.0 24.8 26 32.8 10.9
9 15.7 21 18 22.6 26.5
在更优选的实施方案中，所述晶型IV的XRPD图谱包括与图11所示基本上相同的衍射角(2θ)处的峰。在最优选的实施方案中，所述晶型IV的XRPD图谱与图11所示基本上相同。
在更优选的实施方案中，所述晶型IV的DSC图谱包括在约47℃、约93℃和约210℃处的吸热峰。
在更优选的实施方案中，所述晶型IV的DSC图谱包括与图12所示基本上相同的特征峰。在最优选的实施方案中，所述晶型IV的DSC图谱与图12所示基本上相同。
在更优选的实施方案中，在热重分析中，所述晶型IV在加热至约217℃时有约14.1％的失重。
所述晶型IV的DSC图谱显示在30-217℃有吸热峰，对应TGA图谱中在217℃之前有约14.1％的失重，说明晶型IV在温度高于30℃开始失去络合的溶剂(DMSO)。
在最优选的实施方案中，所述晶型IV的TGA图谱与图13所示基本上相同。
在最优选的实施方案中，所述晶型IV的扫描电子显微镜照片与图14所示基本上相同。
在一些实施方案中，本发明提供制备化合物A的单盐酸盐单二甲基亚砜合物的晶型IV的方法，其包括将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I加入至二甲基亚砜(所述晶型I和所述二甲基亚砜的重量体积比(g/mL)为约1∶(1-100)，优选约1∶50)中，在约10-40℃(例如约20-30℃)的温度下加入具有6-10个碳原子的芳烃类溶剂(例如甲苯；二甲基亚砜和所述芳烃类溶剂的体积比优选为约1∶(1-15)，例如约1∶9)，将溶液搅拌约1-6小时(例如约2小时)，过滤并任选地干燥得到晶体。
药物组合物、治疗方法和用途
在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含本发明的化合物A的盐及其晶型I、II、III和IV中的任意一种或多种，以及一种或多种药学上可接受的载体。
在一些实施方案中，本发明提供本发明的化合物A的盐及其晶型I、II、III和IV中的任意一种或多种在制备用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明提供本发明的化合物A的盐及其晶型I、II、III和IV中的任意一种或多种，其用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂，优选选择性ROCK2抑制剂。
在一些实施方案中，本发明提供预防或治疗Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病的方法，其包括向需要其的个体(优选哺乳动物)给药预防或治疗有效量的本发明的化合物A的盐及其晶型I、II、III和IV中的任意一种或多种。
在一些实施方案中，所述Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病包括自身免疫性疾病(其包括类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮(SLE；狼疮)、银屑病、克罗恩病、特应性皮炎、湿疹或移植物抗宿主病(GVHD))；心血管病症(其包括高血压、动脉粥样硬化、再狭窄、心脏肥大、脑缺血、脑血管痉挛或勃起功能障碍)；炎症(其包括哮喘、心血管炎症、溃疡性结肠炎或肾脏炎症)；中枢神经系统病症(其包括神经元变性或脊髓损伤；所述中枢神经系统病症优选为亨延顿氏病、帕金森氏病、阿尔茨海默病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)或多发性硬化症)；动脉血栓性病症(其包括血小板聚集或白细胞聚集)；纤维化病症(其包括肝纤维化、肺纤维化或肾纤维化)；瘤性疾病(其包括淋巴瘤、癌(例如鳞状细胞癌、小细胞肺癌、垂体癌、食道癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、脑癌、子宫内膜癌、睾丸癌、胆管癌、胆囊癌、胃癌、黑色素瘤或头颈部癌症)、白血病、星形细胞瘤、软组织肉瘤、肉瘤或母细胞瘤)；代谢综合征；胰岛素抗性；高胰岛素血症；2型糖尿病；葡萄糖耐受不良；骨质疏松症；眼部病症(其包括高眼压、年龄相关性黄斑变性(AMD)、脉络膜新生血管形成(CNV)、糖尿病性黄斑水肿(DME)、虹膜新生血管形成、葡萄膜炎、青光眼(其包括原发性开角型青光眼、急性闭角型青光眼、色素性青光眼、先天性青光眼、正常张力青光眼、继发青光眼或新生血管性青光眼)或早产儿视网膜病变(ROP))。
在一些实施方案中，所述Rho相关蛋白激酶(ROCK)介导的疾病包括狼疮肾炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎(RA)、血管瘤、血管纤维瘤、肺纤维化、银屑病、角膜移植排斥、胰岛素依赖型糖尿病、多发性硬化症、重症肌无力、克罗恩病、自身免疫性肾炎、原发性胆汁性肝硬化、急性胰腺炎、异体排异、过敏性炎症、接触性皮炎、迟发型超敏反应、炎症性肠病、感染性休克、骨质疏松、骨关节炎、神经元炎症、Osler-Weber综合征、再狭窄、真菌感染、寄生虫感染和病毒感染。
如本文中所使用的术语“药学上可接受的载体”是指与治疗剂一同给药的稀释剂、辅剂、赋形剂或媒介物，并且其在合理的医学判断的范围内适于接触人类和/或其它动物的组织而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或与合理的益处/风险比相应的其它问题或并发症。
在本发明的药物组合物中可使用的药学上可接受的载体包括但不限于无菌液体，例如水和油，包括那些石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。当所述药物组合物通过静脉内给药时，水是示例性载体。还可以使用生理盐水和葡萄糖及甘油水溶液作为液体载体，特别是用于注射液。适合的药物赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽糖、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙二醇、水、乙醇等。所述组合物还可以视需要包含少量的湿润剂、乳化剂或pH缓冲剂。口服制剂可以包含标准载体，如药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。适合的药学上可接受的载体的实例如在Remington’s PharmaceuticalSciences(1990)中所述。
本发明的组合物可以系统地作用和/或局部地作用。为此目的，它们可以适合的途径给药，例如通过注射、静脉内、动脉内、皮下、腹膜内、肌内或经皮给药；或通过口服、含服、经鼻、透粘膜、局部、以眼用制剂的形式或通过吸入给药。
对于这些给药途径，可以适合的剂型给药本发明的组合物。
所述剂型可为固体制剂、半固体制剂、液体制剂或气态制剂，具体包括但不限于片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、锭剂、硬糖剂、散剂、喷雾剂、乳膏剂、软膏剂、栓剂、凝胶剂、糊剂、洗剂、软膏剂、水性混悬剂、可注射溶液剂、混悬剂、酏剂、糖浆剂。
本发明所述的药物组合物可以通过本领域熟知的任何方法来制备，例如通过混合、溶解、制粒、糖包衣、碾磨、乳化、冻干等处理来制备。
如本文中所使用的术语“治疗有效量”指被给药后会在一定程度上缓解所治疗病症的一或多种症状的化合物的量。
可调整给药方案以提供最佳所需响应。例如，可给药单次推注，可随时间给药数个分剂量，或可如治疗情况的急需所表明而按比例减少或增加剂量。要注意，剂量值可随要减轻的病况的类型及严重性而变化，且可包括单次或多次剂量。要进一步理解，对于任何特定个体，具体的给药方案应根据个体需要及给药组合物或监督组合物的给药的人员的专业判断来随时间调整。
所给药的本发明的化合物的量会取决于所治疗的个体、病症或病况的严重性、给药的速率、化合物的处置及处方医师的判断。一般而言，有效剂量在每日每kg体重约0.0001至约50mg，例如约0.01至约10mg/kg/日(单次或分次给药)。对70kg的人而言，这会合计为约0.007mg/日至约3500mg/日，例如约0.7mg/日至约700mg/日。在一些情况下，不高于前述范围的下限的剂量水平可以是足够的，而在其它情况下，仍可在不引起任何有害副作用的情况下采用较大剂量，条件是首先将所述较大剂量分成数个较小剂量以在一整天中给药。
本发明的化合物在药物组合物中的含量或用量可以是约0.01mg至约1000mg，适合地是0.1-500mg，优选0.5-300mg，更优选1-150mg，特别优选1-50mg，例如1.5mg、2mg、4mg、10mg和25mg等。
除非另外说明，否则如本文中所使用，术语“治疗(treating)”意指逆转、减轻、抑制这样的术语所应用的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状的进展，或预防这样的病症或病况或者这样的病症或病况的一或多种症状。
如本文所使用的“个体”包括人或非人动物。示例性人个体包括患有疾病(例如本文所述的疾病)的人个体(称为患者)或正常个体。本发明中“非人动物”包括所有脊椎动物，例如非哺乳动物(例如鸟类、两栖动物、爬行动物)和哺乳动物，例如非人灵长类、家畜和/或驯化动物(例如绵羊、犬、猫、奶牛、猪等)。
实施例
以下将结合实施例更详细地解释本发明，本发明的实施例仅用于说明本发明的技术方案，并非用于限定本发明的范围，本领域技术人员可进行一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
除非另有说明，以下实施例中使用的原料和试剂均为市售商品，或者可以通过已知方法制备。
以下实施例中使用的检测仪器及条件如下：
(1)X-射线粉末衍射(xRPD)
(a)仪器型号：Bruker D8 advance，配备LynxEye检测器
测试条件：阳极靶材料为铜，光管设定为(40KV 40mA)，样品的2θ扫描角度从3°到40°，扫描步长为0.02°。
(b)仪器型号：Bruker D2 phaser
测试条件：阳极靶材料为铜，光管设定为(30KV 10mA)，样品的2θ扫描角度从4°到50°，扫描步长为0.02°。
(2)差示扫描量热分析(DSC)
仪器型号：(a)TA Discovery DSC 250(TA Instruments，US)；(b)TA DiscoveryDSC25(TA Instruments，US)
测试条件：升温速率为10℃/min，干燥氮气用作吹扫气体。
(3)热重分析(TGA)
仪器型号：(a)Discovery TGA 55(TA Instruments，US)；(b)TGA 4000(PerkinElmer，Germany)
测试条件：加热炉内自动称量，升温速率为10℃/min，干燥氮气用作吹扫气体。
(4)偏光显微镜分析(PLM)
仪器型号：Polarizing Microscope ECLIPSE LV100POL(Nikon，JPN)
(5)核磁共振(1H NMR)
仪器型号：Bruker Advance 400，配备有B-ACS 120自动进样系统
(6)动态水分吸脱附分析(DVS)
仪器型号：DVS Intrinsic(SMS，UK)
测试条件：采用梯度模式，湿度范围为0％至90％，各梯度的湿度增量为10％，各梯度的保持时间为1h。
实施例1：(6-(4-((4-(1H-吡唑-4-基)苯基)氨基)嘧啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚-2-基)(3，3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(化合物A)的制备(参照PCT/CN2018/093713，将其整体通过援引加入本文)
第一步：
在500mL烧瓶中加入化合物A-1(20g，83.31mmol)和乙醇(200mL)，加入氯化亚砜(19.82g，166.63mmol)，然后60℃反应3小时。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10：1)检测显示反应完全。将反应液浓缩得到粗品，将粗品在二氯甲烷(500mL)中溶解，将所得溶液用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次(每次150mL)。将有机相再用饱和食盐水洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到化合物A-2(21g，棕色固体，产率：94.01％)。MS m/z(ESI)：266.1；268.1[M-H]。
第二步：
将化合物A-2(21g，78.33mmol)和联硼酸频哪醇酯(26.85g，105.74mmol)溶于1，4-二氧六环(200mL)中，加入乙酸钾(23.06g，234.98mmol)及Pd(dppf)Cl2(3.24g，3.91mmol)，氩气置换3次，置于80℃油浴中反应过夜。LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物通过柱色谱法分离(石油醚/乙酸乙酯＝100∶1到5∶1)纯化得到化合物A-3(17.5g，白色固体，产率：70.89％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.92(s，1H)，7.92(s，1H)，7.69(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57(d，J＝8.1Hz，1H)，7.22-7.18(m，1H)，4.42(q，J＝7.1Hz，2H)，1.42(t，J＝7.1Hz，3H)，1.37(s，12H).MS m/z(ESI)：316.2[M+H]。
第三步：
将化合物A-3(10.0g，31.8mmol)溶于四氢呋喃(250mL)中，冰浴下加入氢化钠(1.91g，47.8mmol)后反应30分钟，将碘甲烷(13.5g，95.4mmol)缓慢加入到反应液中，室温反应过夜。薄层色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)显示反应完全。将反应液用水(100mL)淬灭，用乙酸乙酯(150mL x 2)萃取，将合并的有机相依次用饱和氯化铵水溶液(200mL x 2)和饱和食盐水(300mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将粗品用柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝15∶1)分离纯化得到化合物A-4(6.5g，黄色固体，产率：62.5％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.91(s，1H)，7.68-7.65(m，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，1H)，7.27(s，1H)，4.12(s，3H)，3.91(s，3H)，1.38(s，12H).
第四步：
将化合物Reg-1-16(1.00g，2.70mmol)和A-4(1.33g，4.04mmol)溶于乙醇/水(8∶1)的混合液(120mL)中，加入碳酸钠(572mg，5.40mmol)及Pd(PPh3)Cl2(189mg，0.27mmol)，氩气置换3次，置于110℃油浴中反应过夜，LC-MS显示反应完全。将反应液冷却至室温，减压浓缩，将残留物用水(30mL)稀释，用6N HCl调节pH至1，有大量固体析出，过滤，将固体用甲醇润洗得到化合物A-5(900mg，黄色固体，粗品)。
1H NMR(400MHz，DMSo-d6)δ11.54(s，1H)，8.77(s，1H)，8.38(d，J＝7.2Hz，1H)，8.14(s，2H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，7.92(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80-7.69(m，4H)，7.33(s，1H)，7.07(d，J＝8.0Hz，1H)，4.16(s，3H).
第五步：
将化合物A-5(300mg，0.73mmol)溶于N，N-二甲基甲酰胺(6mL)，加入HATU(335mg，0.88mmol)和DIEA(377mg，2.92mmol)，室温反应30min后加入化合物A-a(114mg，0.88mmol)，继续室温反应2小时。LC-MS显示反应完全。将反应液减压浓缩，将粗品用高效液相色谱法纯化得到化合物A(185mg，黄色固体，产率：52.1％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.63(s，1H)，8.52(s，1H)，8.41(d，J＝6.4Hz，1H)，8.09(s，2H)，8.06(dd，J＝8.4，1.2Hz，1H)，7.83(d，J＝8.4Hz，1H)，7.77(d，J＝8.0Hz，2H)，7.72(d，J＝8.4Hz，2H)，7.13(s，1H)，6.86(d，J＝6.4Hz，1H)，4.91(s，2H)，4.57(s，2H)，4.05(s，3H).MS m/z(ESI)：486.2[M+H]。
实施例2：化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I的制备
将化合物A(3.7g)加入到反应瓶中，加入丙酮(250ml)，加热反应液至50℃，搅拌10min，固体完全溶解，加入水(26.7ml)，搅拌，溶液澄清，加入浓盐酸(12mol/L)(0.641ml)，析出大量固体，控温50℃搅拌18h，过滤，收集固体，50℃真空干燥8h，得到晶体(2.5g，收率60.8％)。经X-射线粉末衍射检测，其XRPD图谱如图1所示；经DSC和TGA分析，其DSC图谱如图2所示，TGA图谱如图3所示；将样品在扫描电子显微镜下观察，晶体形貌如图4所示。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.19(s，1H)，8.68(s，1H)，8.39(d，J＝6.8Hz，1H)，8.11(s，2H)，8.04(d，J＝8Hz，1H)，7.86(d，J＝8Hz，1H)，7.78-7.73(m，4H)，7.14(s，1H)，6.99(d，J＝6.4Hz，1H)，4.99-4.57(brs，4H)，4.07(s，3H).
实施例3：化合物A的单盐酸盐二水合物的晶型II的制备
将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I(2.0g)加入到甲醇(100ml，水分含量为0.08％)中，控温20-30℃，搅拌48h，过滤，收集固体，50℃真空干燥8h，得到晶体(1.0g，收率48.4％)。经X-射线粉末衍射检测，其XRPD图谱如图5所示；经DSC和TGA分析，其DSC-TGA图谱如图6所示；将样品在扫描电子显微镜下观察，晶体形貌如图7所示。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.18(s，1H)，8.65(s，1H)，8.39(d，J＝6.8Hz，1H)，8.10(s，2H)，8.04(d，J＝8Hz，1H)，7.86(d，J＝8Hz，1H)，7.778-7.73(m，4H)，7.14(s，1H)，6.97(d，J＝6.4Hz，1H)，4.91-4.57(brs，4H)，4.06(s，3H).
实施例4：化合物A的单盐酸盐倍半水合物的晶型III的制备
将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I(2.0g)加入到甲醇(100ml，水分含量为0.08％)中，控温20-30℃，滴加甲苯(560ml)，析出固体，搅拌2h，过滤，收集固体，50℃真空干燥8h，得到晶体(1.1g，收率54.2％)。经X-射线粉末衍射检测，其XRPD图谱如图8所示；经DSC和TGA分析，其DSC-TGA图谱如图9所示；将样品在扫描电子显微镜下观察，晶体形貌如图10所示。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：10.98(s，1H)，8.61(s，1H)，8.37(d，J＝6.8Hz，1H)，8.10(s，2H)，8.04(d，J＝8Hz，1H)，7.85(d，J＝8Hz，1H)，7.77-7.72(m，4H)，7.13(s，1H)，6.94(d，J＝6.4Hz，1H)，4.91-4.57(brs，4H)，4.05(s，3H).
实施例5：化合物A的单盐酸盐单二甲基亚砜合物的晶型IV的制备
将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I(2.0g)加入到二甲基亚砜(100ml)中，控温20-30℃，滴加甲苯(900ml)，析出固体，搅拌2h，过滤，收集固体，50℃真空干燥8h，得到晶体(0.8g，收率36.0％)。经x-射线粉末衍射检测，其XRPD图谱如图11所示；经DSC和TGA分析，其DSC图谱如图12所示，TGA图谱如图13所示；将样品在扫描电子显微镜下观察，晶体形貌如图14所示。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.06(s，1H)，8.64(s，1H)，8.37(d，J＝6.8Hz，1H)，8.10(s，2H)，8.04(d，J＝8Hz，1H)，7.85(d，J＝8Hz，1H)，7.77-7.72(m，4H)，7.13(s，1H)，6.94(d，J＝6.4Hz，1H)，4.95-4.57(brs，4H)，4.06(s，3H)，2.36(s，6H).
实验例
实验例1：药物代谢动力学实验
向两组比格犬以20mpk的剂量分别单次口服给药化合物A的单盐酸盐一水合物晶型I和化合物A(溶媒均为0.5％CMC-Na)，并在给药前(0h)以及给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8和24h时采集血液样品，将样品处理后进行色谱法检测。检测结果如下表所示：
药物 Cmax(ng/mL) AUC0-last(ng·h/mL)
化合物A的单盐酸盐一水合物晶型I 3856.987 19433.501
化合物A 146.605 521.765
由以上结果可见，化合物A的单盐酸盐一水合物晶型I口服暴露量显著优于化合物A。
实验例2：固体稳定性测试
将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I分别在40℃/75％RH和60℃/90％RH的环境下放置7天，经X-射线粉末衍射检测，检测结果如图15所示。结果表明化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I未发生变化。
实验例3：溶解度测试
将化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I分别在模拟胃液(SGF)、饥饿状态模拟肠液(FeSSIF)、饱食状态模拟肠液(FaSSIF)溶媒中测试溶解度，测试结果如下：
SGF：0.0012mg/ml；
FeSSIF：0.017mg/ml；
FaSSIF：0.00028mg/ml。
实验例4：DVS实验
使用DVS Intrinsic(SMS，UK)，采用梯度模式，湿度范围为0％至90％，各梯度的湿度增量为10％，各梯度的保持时间为1h，测定化合物A单盐酸盐一水合物晶型I的动态水分吸脱附曲线，并采用XRPD测试样品在DVS测试前后的晶型。DVS显示化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I在0-10％RH吸水量为0.67％，10-90％RH吸水量为0.9％；DVS测定前后样品的XRPD图谱如图16所示。由图16可见，化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I在DVS测试后样品晶型不变。
实验例5：晶型转变实验
将晶型I、晶型II和晶型III各约5mg混合放置于4mL小瓶中，再加入0.8mL水。将混悬液于室温条件下搅拌7天。在第4天和第7天对混合物进行X-射线粉末衍射检测，检测结果如图17所示。结果表明，混合物在第4天转变为晶型I和晶型II的混晶，晶型III消失；在第7天时，混合物完全转变为晶型I。这表明室温下在水中最稳定的晶型为晶型I。
实验例6：研磨实验
称取适量化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I，分别研磨2分钟和5分钟后进行X-射线粉末衍射检测，检测结果如图18所示。结果表明晶型未发生改变。
实验例7：固体稳定性实验
称取20.8mg化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I于4mL小瓶中，敞口置于50℃下真空干燥2天，样品进行X-射线粉末衍射和TGA分析，结果如图19和图20所示。
称取19.3mg化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I于4mL小瓶中，敞口置于25℃/92.5％RH条件下7天，样品进行X-射线粉末衍射分析，结果如图19所示。
图19和图20中的结果化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I的物理稳定性良好，晶型未发生改变。干燥后样品的TGA失重未变化，说明晶型I中的水分子与药物分子结合较牢固。
实验例8：电位滴定法检测样品中的氯离子含量
称取270mg化合物A单盐酸盐一水合物晶型I到滴定烧杯中，先加25mL二甲基亚砜溶解，再加15mL水，搅拌均匀，使用梅特勒T50电位滴定仪，采用DMI141-SC银电极，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)进行滴定，根据硝酸银滴定液的消耗量计算样品中的氯离子含量。采用此法测定多批样品中的氯离子含量均在6.5～6.7％之间，而化合物A单盐酸盐一水合物中氯离子的理论含量为6.6％，测定值与理论值相符。
批次 氯离子含量(％)
1 6.5％
2 6.7％
3 6.5％
4 6.5％
5 6.6％
实验例9：卡尔费休法检测样品中的水分含量
称取50mg化合物A单盐酸盐一水合物晶型I，将其加入到卡氏样品瓶中并封好，加热至160℃，使用Metrohm KF 831库仑仪，采用库仑加热炉法测定样品中的水分含量。采用此法测定多批样品中的水分含量均在3.2～4.0％之间，而化合物A单盐酸盐一水合物的理论含水量为3.3％，测定值与理论值相符。
批次 水分含量(％)
1 3.6％
2 3.7％
3 3.5％
4 4.0％
5 3.2％
除本文中描述的那些外，根据前述描述，本发明的多种修改对本领域技术人员而言会是显而易见的。这样的修改也意图落入所附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请、期刊文章、书籍及任何其它公开)均以其整体援引加入本文。

Claims (29)

1.化合物A的盐，
其为化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I；
其中所述晶型I的XRPD图谱包括在8.3±0.2°、12.6±0.2°、16.5±0.2°、17.3±0.2°、17.8±0.2°、18.5±0.2°、24.4±0.2°、26.0±0.2°和29.1±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰。
2.权利要求1的化合物A的盐，其中所述晶型I的XRPD图谱包括在8.3±0.2°、11.2±0.2°、12.6±0.2°、16.5±0.2°、17.3±0.2°、17.8±0.2°、18.5±0.2°、19.5±0.2°、19.8±0.2°、20.6±0.2°、21.0±0.2°、21.7±0.2°、23.7±0.2°、24.4±0.2°、25.5±0.2°、26.0±0.2°、29.1±0.2°和33.6±0.2°的衍射角(2θ)处的特征峰。
3.权利要求1-2中任一项的化合物A的盐，其中所述晶型I的XRPD图谱包括与图1所示基本上相同的衍射角(2θ)处的峰。
4.权利要求1-2中任一项的化合物A的盐，其中所述晶型I的XRPD图谱与图1所示基本上相同。
5.权利要求1-2中任一项的化合物A的盐，其中晶型I的DSC图谱包括在105℃、146℃和245℃处的吸热峰。
6.权利要求1-2中任一项的化合物A的盐，其中在热重分析中，所述晶型I在加热至169℃时有3.4％的失重。
7.药物组合物，其包含权利要求1-6中任一项的化合物A的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体。
8.权利要求1-6中任一项的化合物A的盐在制备用作Rho相关蛋白激酶(ROCK)抑制剂的药物中的用途。
9.权利要求1-6中任一项的化合物A的盐在制备用作选择性ROCK2抑制剂的药物中的用途。
10.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗选自下列的疾病：
心血管病症，其中所述心血管病症选自高血压、动脉粥样硬化、再狭窄、心脏肥大、脑缺血、脑血管痉挛和勃起功能障碍；
炎症，其中所述炎症选自哮喘、心血管炎症、溃疡性结肠炎和肾脏炎症；
中枢神经系统病症，其中所述中枢神经系统病症选自神经元变性和脊髓损伤；
动脉血栓性病症，其中所述动脉血栓性病症为血小板聚集或白细胞聚集；
瘤性疾病，其中所述瘤性疾病选自淋巴瘤、白血病、星形细胞瘤、肉瘤和母细胞瘤；
代谢综合征；
胰岛素抗性；
高胰岛素血症；
2型糖尿病；
葡萄糖耐受不良；
骨质疏松症；
眼部病症，其中所述眼部病症选自高眼压、年龄相关性黄斑变性(AMD)、脉络膜新生血管形成(CNV)、糖尿病性黄斑水肿(DME)、虹膜新生血管形成、葡萄膜炎、青光眼和早产儿视网膜病变(ROP)。
11.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗选自下列的疾病：狼疮肾炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎(RA)、血管瘤、肺纤维化、银屑病、角膜移植排斥、胰岛素依赖型糖尿病、多发性硬化症、重症肌无力、克罗恩病、原发性胆汁性肝硬化、急性胰腺炎、接触性皮炎、迟发型超敏反应、感染性休克、骨质疏松、骨关节炎、神经元炎症、Osler-Weber综合征、再狭窄、真菌感染、寄生虫感染和病毒感染。
12.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗自身免疫性疾病，所述自身免疫性疾病选自类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮(SLE)、银屑病、克罗恩病、特应性皮炎、湿疹和移植物抗宿主病(GVHD)。
13.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗中枢神经系统病症，所述中枢神经系统病症选自亨延顿氏病、帕金森氏病、阿尔茨海默病、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)和多发性硬化症。
14.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗纤维化病症，所述纤维化病症为肝纤维化、肺纤维化或肾纤维化。
15.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗瘤性疾病，所述瘤性疾病选自鳞状细胞癌、小细胞肺癌、食道癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、腹膜癌、肝细胞癌、胃肠癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、子宫癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、睾丸癌、胆管癌、胆囊癌、黑色素瘤和头颈部癌症。
16.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗瘤性疾病，所述瘤性疾病选自垂体癌、唾液腺癌、甲状腺癌、脑癌、结肠癌、胃癌和子宫内膜癌。
17.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗结直肠癌。
18.权利要求10的用途，其中所述青光眼选自原发性开角型青光眼、急性闭角型青光眼、色素性青光眼、先天性青光眼、正常张力青光眼、继发青光眼和新生血管性青光眼。
19.权利要求8或9的用途，其中所述药物用于预防或治疗选自下列的疾病：狼疮、血管纤维瘤、自身免疫性肾炎、异体排异、过敏性炎症、炎症性肠病和软组织肉瘤。
20.制备权利要求1-6中任一项的化合物A的单盐酸盐一水合物的晶型I的方法，其包括向化合物A中加入酮类溶剂，在加热下搅拌，然后加入水，以使化合物A完全溶解；随后加入盐酸，在加热下搅拌，过滤并任选地干燥得到晶体，
其中所述酮类溶剂为丙酮、丁酮、甲基乙基酮、甲基异丁基酮和二乙基酮。
21.权利要求20的方法，其包括向化合物A中加入酮类溶剂，加热至40-80℃并搅拌，然后加入水。
22.权利要求21的方法，其包括向化合物A中加入酮类溶剂，加热至50℃或60℃并搅拌，然后加入水。
23.权利要求20的方法，其中所述酮类溶剂和水的体积比为(1-15):1。
24.权利要求23的方法，其中所述酮类溶剂和水的体积比为10:1。
25.权利要求20的方法，其中所述盐酸的浓度为2-15mol/L。
26.权利要求25的方法，其中所述盐酸的浓度为12mol/L。
27.权利要求20的方法，其中化合物A和HCl的摩尔比为1:(1-1.3)。
28.权利要求20的方法，其中在加入盐酸后，加热至40-80℃并搅拌。
29.权利要求28的方法，其中在加入盐酸后，加热至50℃或60℃并搅拌。
CN202180053323.5A 2020-08-31 2021-08-30 Rho相关蛋白激酶抑制剂的盐、其固体形式及其制备方法和用途 Active CN115996922B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNPCT/CN2020/112500 2020-08-31
CN2020112500 2020-08-31
PCT/CN2021/115198 WO2022042712A1 (zh) 2020-08-31 2021-08-30 Rho相关蛋白激酶抑制剂的盐、其固体形式及其制备方法和用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115996922A CN115996922A (zh) 2023-04-21
CN115996922B true CN115996922B (zh) 2024-07-05

Family

ID=

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019001572A1 (zh) * 2017-06-30 2019-01-03 北京泰德制药股份有限公司 Rho 相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019001572A1 (zh) * 2017-06-30 2019-01-03 北京泰德制药股份有限公司 Rho 相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110582491B (zh) Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途
CN110573501B (zh) Rho相关蛋白激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其制备方法和用途
JP2011515370A (ja) ４−アミノ−５−フルオロ−３−［５−（４−メチルピペラジン−１−イル）−１ｈ−ベンズイミダゾール−２−イル］キノリン−２（１ｈ）−オン乳酸塩の結晶形態及び２つの溶媒和物形態
WO2022042712A1 (zh) Rho相关蛋白激酶抑制剂的盐、其固体形式及其制备方法和用途
EP3665176B1 (en) Solid forms of 3-(5-fluorobenzofuran-3-yl)-4-(5-methyl-5h[1,3]dioxolo[4,5-f]indol-7-yl)pyrrole-2,5-dione
CN114437084A (zh) 杂环类化合物及其制备方法和应用
IL279579B (en) Crystalline form of a compound to inhibit the activity of cdk4/6 and its use
CN113993858B (zh) 二氨基嘧啶类化合物或其水合物的固体形式及其制备方法和用途
CN114008027B (zh) 二氨基嘧啶类化合物的盐、其固体形式及其制备方法和用途
CN115916791A (zh) 结晶ret抑制剂
CN115996922B (zh) Rho相关蛋白激酶抑制剂的盐、其固体形式及其制备方法和用途
CN113840605B (zh) N-(5-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-5-氟-4-(3-异丙基-2-甲基-2h-吲唑-5-基)嘧啶-2-胺盐酸盐的结晶形式及其用途
CN118119615A (zh) Rho相关蛋白激酶抑制剂或其溶剂合物的固体形式及其制备方法和用途
EP4169915A1 (en) Crystalline form of compound
EP3941472B1 (en) Crystalline and amorphous forms of-(5-((4-ethylpiperazin-1-yl)methyl)pyridine-2-yl)-5-fluoro-4-(3-isopropyl-2-methyl-2 <ns1:i>h</ns1:i>?-indazol-5-yl)pyrimidin-2-amine and its salts, and preparation methods and therapeutic uses thereof
WO2023116895A1 (zh) Kras抑制剂的多晶型物及其制备方法和用途
CN111484489B (zh) 无定形的b-raf激酶二聚体抑制剂
TW202333672A (zh) Ｒｏｃｋ抑制劑的鹽及鹽的晶型、組合物和藥物用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant