CN115968941A - 一种益生菌羊奶片及其制备方法 - Google Patents

一种益生菌羊奶片及其制备方法 Download PDF

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CN115968941A CN202310166804.8A CN202310166804A CN115968941A CN 115968941 A CN115968941 A CN 115968941A CN 202310166804 A CN202310166804 A CN 202310166804A CN 115968941 A CN115968941 A CN 115968941A
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Abstract

本发明公开了一种益生菌羊奶片及其制备方法,具体涉及保健食品技术领域,所述益生菌羊奶片按照质量百分比包括70‑82%的全脂羊奶粉、2‑5%的低聚果糖、2‑5%的异麦芽糖、10‑12%的小米淀粉、0.2‑1%的冻干益生菌菌粉、1‑7%的功能性混合粉、1‑4%的柠檬酸。本发明所述的一种益生菌羊奶片及其制备方法,以羊奶作为主要成分,同时增加了益生菌,使得本发明所公开的益生菌羊奶片具有改善肠道菌群结构、促进肠道中有益菌的增殖、抑制有害菌的生长、消除致癌因子、提高机体免疫力、降低胆固醇、减缓乳糖不耐症等重要生理功效,通过增加了党参、山楂、枸杞、薄荷叶,可调理肠胃,消积化滞、舒气散瘀,口感清凉,使得本发明所述的益生菌羊奶片能够具有较为良好的药食两用价值。

Description

一种益生菌羊奶片及其制备方法
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域,特别涉及一种益生菌羊奶片及其制备方法。
背景技术
羊奶是人类的主要乳源之一,全世界大约有一半左右的人口食用羊奶。羊奶与牛奶的主要组成相近,某些营养素比牛奶高出很多。含有牛奶不具备的一些特殊物质,如:EGF表皮生长因子,免疫球蛋白。不含牛奶引起的过敏物质α-S1的酪蛋白。羊奶脂肪球小(仅为牛奶的1/3),且羊奶中中、短链不饱和脂肪酸含量丰富,尤其是中链脂肪酸含量高的,人体易吸收。并可增强机体免疫力,调节人体营养平衡,提高睡眠质量,其偏碱性的良好缓冲特性对肾炎、结核及哮喘等疾病也具有促进康复的作用,是婴幼儿、孕妇、老人和病人的上佳保健品。
益生菌(Prob iot ics),又称益生素、促生素、生菌素、活菌素等,即是指某种微生物制剂或发酵制品,通过调节宿主黏膜与系统免疫功能以及改善肠道营养与菌群平衡,对宿主产生有益的生理作用,通过定殖作用改变宿主某一部位菌群的组成,从而产生有利于宿主健康作用的单一或组成明确的混合微生物。迄今为止,科学家已发现的益生菌大体上可分成三大类,其中包括:①乳杆菌类(如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、保加利亚乳杆菌、胚牙乳杆菌等);②双歧杆菌类(如长双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌等);革兰氏阳性球菌(如粪链球菌、乳球菌、中介链球菌等)。益生菌作为一个新领域,近年来,益生菌的特殊生理活性在食品中应用广泛,除应用于发酵乳制品外,也正逐步被应用于开发各种功能性食品。目前,益生菌主要用于食品、功能性食品、膳食补充剂、药用生物制品及饲料等领域。把含有益生菌的食品统称为益生菌食品,主要包括直接添加益生菌的食品和经益生菌发酵的食品。益生菌在食品领域中最普遍的应用仍是乳制品领域,包括发酵乳、活性乳酸菌饮料、干酪、酸奶油、酸乳酒,果汁、谷类食品、饼干等。用的益生菌菌种有双歧杆菌(Bif idobater ia)、乳酸杆菌和一些链球菌,其中,乳酸杆菌常用的有嗜酸乳杆菌(Lactobicu l l usacidoph i l us)、干酪乳杆菌(L.case i)、保加利亚乳杆菌(L.bu l gar icus)等。目前我国卫生部批准的可用于保健食品的益生菌菌种有:嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌、青青双歧杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热乳链球菌等。
目前国内开发的益生菌产品主要为益生菌制剂和发酵乳及乳饮料等产品,益生菌羊奶片制备技术的报道不多。
发明内容
本发明的主要目的在于提供一种益生菌羊奶片及其制备方法,可以有效解决背景技术中的问题。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:
一种益生菌羊奶片,按照质量百分比包括70-82%的全脂羊奶粉、2-5%的低聚果糖、2-5%的异麦芽糖、10-12%的小米淀粉、0.2-1%的冻干益生菌菌粉、1-7%的功能性混合粉、1-4%的柠檬酸;
所述功能性混合粉为由党参、山楂、枸杞、薄荷叶所制备的粉末混合后的产物,所述冻干益生菌菌粉为活化后的益生菌与复合冻干剂的混合物,其中,益生菌与复合冻干剂的混合比例为每g益生菌混合2ml复合冻干剂。
优选的,所述功能性混合粉中党参、山楂、枸杞、薄荷叶的质量配比为1∶2∶1:1。
优选的,所述复合冻干剂按照质量百分比包括45-60%的脱脂羊奶粉、35-50%的磷酸缓冲液、1-3%的滑石粉、1-4%的硬脂酸镁,混合制成所述复合冻干剂。
优选的,所述益生菌为双歧杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌中的一种或任意几种任意比例的混合。
本发明还公开了一种制备益生菌羊奶片的方法,具体步骤如下:
(1)、将新鲜山楂洗净,去皮去籽后干燥至恒重,按照质量比为1∶2∶1:1的配比将党参、山楂、枸杞、薄荷叶混合,然后粉碎至粉末状,过50-60目筛,得到功能性混合粉;
(2)、将益生菌活化,活化后将益生菌集中到培养基中,在35-45℃的温度下,充入氮气培养24h,并且每隔3-4h搅拌一次,然后将其在1-10℃的温度下离心,去除上清液,收集益生菌菌体;
(3)、将45-60%的脱脂羊奶粉、35-50%的磷酸缓冲液、1-3%的滑石粉、1-4%的硬脂酸镁进行混合,然后加入步骤(2)中收集的益生菌菌体,于1-10℃的温度下静置2-3h,然后采用真空冷冻干燥剂于-40--20℃的温度下冻干24h,即得冻干益生菌菌粉;
(4)、将70-82%的全脂羊奶粉、2-5%的低聚果糖、2-5%的异麦芽糖、10-12%的小米淀粉、0.2-1%的冻干益生菌菌粉、1-7%的功能性混合粉、1-4%的柠檬酸混合,制粒,干燥,得到中间颗粒;
(5)、将步骤(4)中得到的中间颗粒采用压片机进行压片,得到成品的益生菌羊奶片。
优选的,所述步骤(2)中的培养基为由10-15%的乳清培养基作为基础培养基,再添加酵母抽提物至其质量浓度为1%~10%,添加玉米浆至其体积浓度为1%~5%。
优选的,所述益生菌的活化方法如下:将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,双歧杆菌在MRS液体培养基中添加培养基体积0.05%的半胱氨酸盐酸盐在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,每次以5%的接种量转接,其中前两次均在37℃培养条件下培养20-24h,第三次在37℃培养条件下培养18h,然后进行镜检、测OD值,确定无杂菌后将第三次活化得到活化益生菌。
所述步骤(5)中采用的压片机为单冲式压片机,最大压片压力:15KN;压片直径:φ10~14mm;片中为0.5~0.7g;硬度在5-7N。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
1、本发明以羊奶作为主要成分,由于羊奶富含对人体健康有重要作用的白蛋白、球蛋白等高质量蛋白质和脂肪酸以及多种矿物质,对营养吸收不良综合症患者具有良好的保健和治疗作用,同时增加了益生菌,使得本发明所公开的益生菌羊奶片,具有改善肠道菌群结构、促进肠道中有益菌的增殖、抑制有害菌的生长、消除致癌因子、提高机体免疫力、降低胆固醇、减缓乳糖不耐症等重要生理功效。
2、本发明中,通过增加了党参、山楂、枸杞、薄荷叶,可调理肠胃,消积化滞、舒气散瘀,口感清凉,使得本发明所述的益生菌羊奶片能够具有较为良好的药食两用价值。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1
本实施例公开的益生菌羊奶片的具体制备步骤如下:
(1)、将新鲜山楂洗净,去皮去籽后干燥至恒重,按照质量比为1∶2∶1:1的配比将党参、山楂、枸杞、薄荷叶混合,然后粉碎至粉末状,过50-60目筛,得到功能性混合粉;
(2)、将益生菌活化,活化后将益生菌集中到培养基中,在35-45℃的温度下,充入氮气培养24h,并且每隔3-4h搅拌一次,然后将其在1-10℃的温度下离心,去除上清液,收集益生菌菌体;
其中,益生菌的活化方法如下:将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,双歧杆菌在MRS液体培养基中添加培养基体积0.05%的半胱氨酸盐酸盐在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,每次以5%的接种量转接,其中前两次均在37℃培养条件下培养20-24h,第三次在37℃培养条件下培养18h,然后进行镜检、测OD值,确定无杂菌后将第三次活化得到活化益生菌;
由10-15%的乳清培养基作为基础培养基,再添加酵母抽提物至其质量浓度为5%,添加玉米浆至其体积浓度为5%;
(3)、将55%的脱脂羊奶粉、50%的磷酸缓冲液、3%的滑石粉、2%的硬脂酸镁进行混合,然后加入步骤(2)中收集的益生菌菌体,于1-10℃的温度下静置2-3h,然后采用真空冷冻干燥剂于-40--20℃的温度下冻干24h,即得冻干益生菌菌粉;
(4)、将82%的全脂羊奶粉、2%的低聚果糖、1%的异麦芽糖、10%的小米淀粉、1%的冻干益生菌菌粉、2%的功能性混合粉、2%的柠檬酸混合,制粒,干燥,得到中间颗粒;
(5)、将步骤(4)中得到的中间颗粒采用压片机进行压片,得到成品的益生菌羊奶片,具体的,所采用的单冲式压片机,最大压片压力:15KN;压片直径:φ10~14mm;片中为0.5~0.7g;硬度在5-7N。
实施例2
本实施例公开的益生菌羊奶片的具体制备步骤如下:
(1)、将新鲜山楂洗净,去皮去籽后干燥至恒重,按照质量比为1∶2∶1:1的配比将党参、山楂、枸杞、薄荷叶混合,然后粉碎至粉末状,过50-60目筛,得到功能性混合粉;
(2)、将益生菌活化,活化后将益生菌集中到培养基中,在35-45℃的温度下,充入氮气培养24h,并且每隔3-4h搅拌一次,然后将其在1-10℃的温度下离心,去除上清液,收集益生菌菌体;
其中,益生菌的活化方法如下:将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,双歧杆菌在MRS液体培养基中添加培养基体积0.05%的半胱氨酸盐酸盐在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,每次以5%的接种量转接,其中前两次均在37℃培养条件下培养20-24h,第三次在37℃培养条件下培养18h,然后进行镜检、测OD值,确定无杂菌后将第三次活化得到活化益生菌;
由10-15%的乳清培养基作为基础培养基,再添加酵母抽提物至其质量浓度为1%~10%,添加玉米浆至其体积浓度为1%~5%;
(3)、将50%的脱脂羊奶粉、45%的磷酸缓冲液、1%的滑石粉、4%的硬脂酸镁进行混合,然后加入步骤(2)中收集的益生菌菌体,于1-10℃的温度下静置2-3h,然后采用真空冷冻干燥剂于-40--20℃的温度下冻干24h,即得冻干益生菌菌粉;
(4)、将80%的全脂羊奶粉、2%的低聚果糖、2%的异麦芽糖、11%的小米淀粉、0.5%的冻干益生菌菌粉、1.5%的功能性混合粉、3%的柠檬酸混合,制粒,干燥,得到中间颗粒;
(5)、将步骤(4)中得到的中间颗粒采用压片机进行压片,得到成品的益生菌羊奶片,具体的,所采用的单冲式压片机,最大压片压力:15KN;压片直径:φ10~14mm;片中为0.5~0.7g;硬度在5-7N。
实施例3
本实施例公开的益生菌羊奶片的具体制备步骤如下:
(1)、将新鲜山楂洗净,去皮去籽后干燥至恒重,按照质量比为1∶2∶1:1的配比将党参、山楂、枸杞、薄荷叶混合,然后粉碎至粉末状,过50-60目筛,得到功能性混合粉;
(2)、将益生菌活化,活化后将益生菌集中到培养基中,在35-45℃的温度下,充入氮气培养24h,并且每隔3-4h搅拌一次,然后将其在1-10℃的温度下离心,去除上清液,收集益生菌菌体;
其中,益生菌的活化方法如下:将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,双歧杆菌在MRS液体培养基中添加培养基体积0.05%的半胱氨酸盐酸盐在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,每次以5%的接种量转接,其中前两次均在37℃培养条件下培养20-24h,第三次在37℃培养条件下培养18h,然后进行镜检、测OD值,确定无杂菌后将第三次活化得到活化益生菌;
由10-15%的乳清培养基作为基础培养基,再添加酵母抽提物至其质量浓度为1%~10%,添加玉米浆至其体积浓度为1%~5%;
(3)、将50%的脱脂羊奶粉、45%的磷酸缓冲液、1%的滑石粉、4%的硬脂酸镁进行混合,然后加入步骤(2)中收集的益生菌菌体,于1-10℃的温度下静置2-3h,然后采用真空冷冻干燥剂于-40--20℃的温度下冻干24h,即得冻干益生菌菌粉;
(4)、将76%的全脂羊奶粉、4%的低聚果糖、5%的异麦芽糖、11%的小米淀粉、0.5%的冻干益生菌菌粉、2.5%的功能性混合粉、1%的柠檬酸混合,制粒,干燥,得到中间颗粒;
(5)、将步骤(4)中得到的中间颗粒采用压片机进行压片,得到成品的益生菌羊奶片,具体的,所采用的单冲式压片机,最大压片压力:15KN;压片直径:φ10~14mm;片中为0.5~0.7g;硬度在5-7N。
实施例4
本实施例公开的益生菌羊奶片的具体制备步骤如下:
(1)、将新鲜山楂洗净,去皮去籽后干燥至恒重,按照质量比为1∶2∶1:1的配比将党参、山楂、枸杞、薄荷叶混合,然后粉碎至粉末状,过50-60目筛,得到功能性混合粉;
(2)、将益生菌活化,活化后将益生菌集中到培养基中,在35-45℃的温度下,充入氮气培养24h,并且每隔3-4h搅拌一次,然后将其在1-10℃的温度下离心,去除上清液,收集益生菌菌体;
其中,益生菌的活化方法如下:将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,双歧杆菌在MRS液体培养基中添加培养基体积0.05%的半胱氨酸盐酸盐在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,每次以5%的接种量转接,其中前两次均在37℃培养条件下培养20-24h,第三次在37℃培养条件下培养18h,然后进行镜检、测OD值,确定无杂菌后将第三次活化得到活化益生菌;
由10-15%的乳清培养基作为基础培养基,再添加酵母抽提物至其质量浓度为1%~10%,添加玉米浆至其体积浓度为1%~5%;
(3)、将47%的脱脂羊奶粉、48%的磷酸缓冲液、3%的滑石粉、2%的硬脂酸镁进行混合,然后加入步骤(2)中收集的益生菌菌体,于1-10℃的温度下静置2-3h,然后采用真空冷冻干燥剂于-40--20℃的温度下冻干24h,即得冻干益生菌菌粉;
(4)、将75%的全脂羊奶粉、2%的低聚果糖、3%的异麦芽糖、12%的小米淀粉、0.8%的冻干益生菌菌粉、6%的功能性混合粉、1.2%的柠檬酸混合,制粒,干燥,得到中间颗粒;
(5)、将步骤(4)中得到的中间颗粒采用压片机进行压片,得到成品的益生菌羊奶片,具体的,所采用的单冲式压片机,最大压片压力:15KN;压片直径:φ10~14mm;片中为0.5~0.7g;硬度在5-7N。
实施例5
本实施例公开的益生菌羊奶片的具体制备步骤如下:
(1)、将新鲜山楂洗净,去皮去籽后干燥至恒重,按照质量比为1∶2∶1:1的配比将党参、山楂、枸杞、薄荷叶混合,然后粉碎至粉末状,过50-60目筛,得到功能性混合粉;
(2)、将益生菌活化,活化后将益生菌集中到培养基中,在35-45℃的温度下,充入氮气培养24h,并且每隔3-4h搅拌一次,然后将其在1-10℃的温度下离心,去除上清液,收集益生菌菌体;
其中,益生菌的活化方法如下:将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,双歧杆菌在MRS液体培养基中添加培养基体积0.05%的半胱氨酸盐酸盐在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,每次以5%的接种量转接,其中前两次均在37℃培养条件下培养20-24h,第三次在37℃培养条件下培养18h,然后进行镜检、测OD值,确定无杂菌后将第三次活化得到活化益生菌;
由10-15%的乳清培养基作为基础培养基,再添加酵母抽提物至其质量浓度为1%~10%,添加玉米浆至其体积浓度为1%~5%;
(3)、将60%的脱脂羊奶粉、35%的磷酸缓冲液、3%的滑石粉、2%的硬脂酸镁进行混合,然后加入步骤(2)中收集的益生菌菌体,于1-10℃的温度下静置2-3h,然后采用真空冷冻干燥剂于-40--20℃的温度下冻干24h,即得冻干益生菌菌粉;
(4)、将70%的全脂羊奶粉、5%的低聚果糖、3%的异麦芽糖、12%的小米淀粉、0.3%的冻干益生菌菌粉、5.7%的功能性混合粉、4%的柠檬酸混合,制粒,干燥,得到中间颗粒;
(5)、将步骤(4)中得到的中间颗粒采用压片机进行压片,得到成品的益生菌羊奶片,具体的,所采用的单冲式压片机,最大压片压力:15KN;压片直径:φ10~14mm;片中为0.5~0.7g;硬度在5-7N。
针对实施例1-5中制备的益生菌羊奶片进行试验:
在医院的亚健康门诊选取200名患者进行试食调研,患者标准为无器质性病变,仅身体处于亚健康状态,患者出现免疫力低下,易疲乏无力、便秘等症状。200名志愿者患者中男女人数各半,年龄为30-55岁,平均年龄为45.5岁。要求调研者每天服用实施例3的益生菌羊奶片30克,连续服用60天。。
结果如表1:
食用人数 改善人数 改善率
实施例1 200 178 89%
实施例2 200 182 91%
实施例3 200 185 92.5%
实施例4 200 173 86.5%
实施例5 200 188 94%
根据表1调研结果显示:连续食用此益生菌羊奶片,能显著达到增强免疫力的功效。具体表现为:面色红润、精力充沛、免疫力增强、便秘改善
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (8)

1.一种益生菌羊奶片,其特征在于:按照质量百分比包括70-82%的全脂羊奶粉、2-5%的低聚果糖、2-5%的异麦芽糖、10-12%的小米淀粉、0.2-1%的冻干益生菌菌粉、1-7%的功能性混合粉、1-4%的柠檬酸;
所述功能性混合粉为由党参、山楂、枸杞、薄荷叶所制备的粉末混合后的产物,所述冻干益生菌菌粉为活化后的益生菌与复合冻干剂的混合物,其中,益生菌与复合冻干剂的混合比例为每g益生菌混合2ml复合冻干剂。
2.根据权利要求1所述的一种益生菌羊奶片,其特征在于:所述功能性混合粉中党参、山楂、枸杞、薄荷叶的质量配比为1∶2∶1:1。
3.根据权利要求1所述的一种益生菌羊奶片,其特征在于:所述复合冻干剂按照质量百分比包括45-60%的脱脂羊奶粉、35-50%的磷酸缓冲液、1-3%的滑石粉、1-4%的硬脂酸镁,混合制成所述复合冻干剂。
4.根据权利要求1所述的一种益生菌羊奶片,其特征在于:所述益生菌为双歧杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌中的一种或任意几种任意比例的混合。
5.一种制备权利要求1-4任一项所述的益生菌羊奶片的方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)、将新鲜山楂洗净,去皮去籽后干燥至恒重,按照质量比为1∶2∶1:1的配比将党参、山楂、枸杞、薄荷叶混合,然后粉碎至粉末状,过50-60目筛,得到功能性混合粉;
(2)、将益生菌活化,活化后将益生菌集中到培养基中,在35-45℃的温度下,充入氮气培养24h,并且每隔3-4h搅拌一次,然后将其在1-10℃的温度下离心,去除上清液,收集益生菌菌体;
(3)、将45-60%的脱脂羊奶粉、35-50%的磷酸缓冲液、1-3%的滑石粉、1-4%的硬脂酸镁进行混合,然后加入步骤(2)中收集的益生菌菌体,于1-10℃的温度下静置2-3h,然后采用真空冷冻干燥剂于-40--20℃的温度下冻干24h,即得冻干益生菌菌粉;
(4)、将70-82%的全脂羊奶粉、2-5%的低聚果糖、2-5%的异麦芽糖、10-12%的小米淀粉、0.2-1%的冻干益生菌菌粉、1-7%的功能性混合粉、1-4%的柠檬酸混合,制粒,干燥,得到中间颗粒;
(5)、将步骤(4)中得到的中间颗粒采用压片机进行压片,得到成品的益生菌羊奶片。
6.根据权利要求5所述的一种益生菌羊奶片制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中的培养基为由10-15%的乳清培养基作为基础培养基,再添加酵母抽提物至其质量浓度为1%~10%,添加玉米浆至其体积浓度为1%~5%。
7.根据权利要求5所述的一种益生菌羊奶片制备方法,其特征在于,所述益生菌的活化方法如下:将干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,双歧杆菌在MRS液体培养基中添加培养基体积0.05%的半胱氨酸盐酸盐在37℃培养条件下采用MRS液体培养基活化三次,每次以5%的接种量转接,其中前两次均在37℃培养条件下培养20-24h,第三次在37℃培养条件下培养18h,然后进行镜检、测OD值,确定无杂菌后将第三次活化得到活化益生菌。
8.根据权利要求5所述的一种益生菌羊奶片制备方法,其特征在于:所述步骤(5)中采用的压片机为单冲式压片机,最大压片压力:15KN;压片直径:φ10~14mm;片中为0.5~0.7g;硬度在5-7N。
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