CN115948303B - 同时产苯乙醛和d-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌及其用途 - Google Patents
同时产苯乙醛和d-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌及其用途 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于生物发酵技术领域,具体涉及同时产苯乙醛和D‑苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌及其用途。针对现有研究中已筛选或通过基因改造手段获得高产苯乳酸的菌种作用靶点相对单一,且直接应用于食品发酵体系的菌株安全性不确定的问题,本发明分离筛选出一株同时产苯乙醛和D‑苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillus parabuchneri),保藏编号为CGMCC No.25143。该菌株能同时产苯乙醛和D‑苯基乳酸,能作为微生物源生物防腐剂;而且该副布氏慢生乳杆菌安全无致病性,能应用于传统酿造食品体系,对食品中出现的致病菌和腐败菌发挥抑制作用。
Description
技术领域
本发明属于生物发酵技术领域,具体涉及同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌及其用途。
背景技术
食品的营养丰富,极易受微生物污染而腐败变质,为了保证食品的食用安全性,可采用多种保藏方法,如盐渍、罐藏、冷藏、风干等,在一定时间内保护食品不受食品腐败菌的危害,但其保护时间短、破坏食品原有营养成分及风味。随着食品的工业发展催生了化学食品防腐剂,对防止食品的腐败有显著的效果。近几十年来,由于人类对天然无公害健康食品的要求越来越高,添加了化学食品防腐剂的食品给人体所带来的危害越来越受到人们的重视,有研究表明长期食用含有某些化学食品添加剂的食物可以导致癌症、遗传物质畸形和慢性食物中毒等。天然生物防腐剂被逐渐重视,生物防腐剂指从生物体通过生物培养、提取和分离技术获得的,具有抑制和杀灭微生物作用的一类高效防腐剂。相对于化学食品防腐剂,生物防腐剂是一种对人体没有毒害作用的食品防腐剂,但也有化学性质不稳定、抗菌谱窄、应用条件苛刻等缺点。
生物防腐剂的种类有微生物源生物防腐剂(如乳酸链球菌素、那他霉素)、动物源生物防腐剂(如壳聚糖、鱼精蛋白)、植物源生物防腐剂(如茶多酚、香精油)。其中微生物源生物防腐剂是由微生物代谢产生的具有抑菌活性的物质,主要有细菌素类、有机酸类、溶菌酶类等。其作用机制主要是破坏细胞壁或细胞膜的完整性,导致细胞系统破坏,从而抑制微生物的生长。
苯乙醛是一种脂肪醛,外观为无色或淡黄色液体,呈强烈风信子香气,低浓度时有杏仁、樱桃香味,主要应用于调制香料。现有研究中发现,苯乙醛同时具有抑菌活性。梁海燕等(梁海燕,王国昌,秦雪峰,等.6种芳香族挥发性有机物对黄曲霉的抑菌作用[J].环境与健康杂志,2013,30(2):3.)研究了6种芳香族挥发性有机物(苯甲醇、苯乙醇、苯乙醛、苯甲醛、丁酸苯乙酯、乙酸苯酯)对黄曲霉的抑菌作用,检测指标为黄曲霉菌丝生长和产孢量,结果显示,6种芳香族挥发性有机物对黄曲霉菌有不同程度的抑制作用。唐小辉(唐小辉.肉桂醛,丁香酚及其结构类似物的抑菌活性与化学结构的关系[D].湘潭大学,2013.)以平板稀释法测试肉桂醛及其结构类似物苯丙醛、苯乙醛、苯甲醛、丙醛、乙醛、甲醛对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、猪丹毒杆菌、肺炎链球菌和啤酒酵母菌的抑菌活性。
苯乳酸是一种天然的小分子有机酸,近年发现的一种天然生物防腐剂,抑菌谱宽、溶解性高、稳定性强、安全无毒,在食品工业中具有良好的应用前景。与微生物所产细菌素不同,苯乳酸对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均有抑菌作用。它的第2个碳原子为手性碳原子,因此存在2种对映异构体:D构型苯基乳酸和L构型苯基乳酸,研究表明D构型苯基乳酸抑菌效果稍优于L构型苯基乳酸。
现有研究中已筛选或通过基因改造手段获得高产苯乳酸的菌种,但作用靶点相对单一,不同种类的抑菌物质复合使用,可协同增效。且直接应用于食品发酵体系的菌株需考虑其安全性。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明自泸州老窖白酒酿造酒醅中分离筛选出一株应用于食品发酵体系的乳酸菌:副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillus parabuchneri),其产多种抑菌物质,具有广谱抑菌作用,为生物防腐技术在食品制造业的发展提供良好的菌种选择。
本发明提供了一株同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillus parabuchneri),保藏编号:CGMCC No.25143。保藏时间为2022年06月21日,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编:100101。
其中,上述同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌的16S rDNA序列如SEQ IDNO:1所示。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌的生长条件为:生长温度为10℃~45℃,最适温度为30~37℃。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌的生物学特征为:菌落圆形,表面光滑,隆起,边缘整齐,乳白色,不透明;革兰氏阳性兼性厌氧,菌体短杆状,成对排列,无鞭毛、不产芽孢。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌能同时产苯乙醛和D-苯基乳酸。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸产量分别为5.45mg/L、68.77mg/L。
本发明还提供了采用上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法,包括以下步骤:将上述副布氏慢生乳杆菌种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基中,培养即可。
其中,所述MRS液体培养基配方为:葡萄糖20g/L,蛋白胨10g/L,酵母粉4g/L,牛肉浸粉5g/L,吐温80 1g/L,柠檬酸三铵2g/L,醋酸钠5g/L,硫酸镁0.2g/L,硫酸锰0.05g/L,磷酸氢二钾1g/L,pH6.0,115℃下高压蒸汽灭菌20分钟。
其中,所述副布氏慢生乳杆菌种子液是以1%~10%接种量接种于MRS液体培养基中30~37℃静置培养1~2天所得。
优选地,所述副布氏慢生乳杆菌种子液是以5%接种量接种于37℃静置培养1天所得。
其中,所述苯丙氨酸浓度为0.5~1.5g/L。优选地,所述含苯丙氨酸的MRS液体培养基中苯丙氨酸为1g/L。
其中,种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的接种量为1%~10%。
优选地,种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的接种量为2%。
其中,种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的培养温度为30~37℃,培养时间为24~72h。
优选地,种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的培养温度为37℃,培养时间为72h。
本发明还提供上述副布氏慢生乳杆菌在制备微生物源生物防腐剂的用途。
本发明还提供上述副布氏慢生乳杆菌在制备食品抑菌剂方面的用途。
其中,所述抑菌剂是抑制革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌或真菌中至少一种。
优选地,所述抑菌剂是抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、猪丹毒杆菌、肺炎链球菌或啤酒酵母菌中至少一种。
有益效果:本发明从泸州老窖白酒酿造酒醅中分离筛选出一株同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillus parabuchneri),保藏编号为CGMCCNo.25143。该菌株能同时产苯乙醛和D-苯基乳酸,产量分别为5.45mg/L、68.77mg/L。本发明提供的副布氏慢生乳杆菌,由于其能同时产苯乙醛和D-苯基乳酸,可作为微生物源生物防腐剂。而且该副布氏慢生乳杆菌安全无致病性,可应用于传统酿造食品体系,对食品中出现的致病菌和腐败菌发挥抑制作用。
附图说明
图1为本发明实施例2中菌株发酵液中苯乙醛表达量图;
图2本发明实施例2中菌株发酵液中D-苯基乳酸表达量图;
图3为本发明实施例3中菌株rsj15对于金黄色葡萄球菌抑菌圈效果图。
本发明的同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillusparabuchneri),保藏编号:CGMCC No.25143。保藏时间为2022年06月21日,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编:100101。分类命名为:副布氏慢生乳杆菌Lentilactobacillus parabuchneri。
具体实施方式
本发明首次从从泸州老窖白酒酿造酒醅中分离筛选出一株同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillus parabuchneri),保藏编号:CGMCCNo.25143。保藏时间为2022年06月21日,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,邮编:100101。
其中,上述同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌的16S rDNA序列如SEQ IDNO:1所示。
同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌的16S rDNA序列SEQ ID NO:1:
GAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCTTGAAGTAGGGGATAACACTTGGAAACAGGTGCTAATACCGTATAACAACCAAAACCACCTGGTTTTGGTTTAAAAGATGGCTTCGGCTATCACTTTAGGATGGACCCGCGGCGTATTAGCTTGTTGGTAAGGTAACGGCCTACCAAGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTGGAGAAGAACAGGTGTGAGAGTAACTGTTCACATCTTGACGGTATCCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTCTTAGGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTTAACCGGAGAAGTGCATCGGAAACCAGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCATGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCTTCTGCCAACCTAAGAGATTAGGCGTTCCCTTCGGGGACAGAATGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATTGTTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAGCAAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGACGGTACAACGAGTCGCGAAACCGCGAGGTCAAGCTAATCTCTTAAAGCCGTTCTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGTTGGAACCGTAGGGTTTGATCGAGCATCAGTACGTGGTGACAAGGTAGCCGTACAGTTTGATCCTGGCTCAGTAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTAGAGTTTGATCCTGGCTCAGTAAGTCGTAACAAGGTAGCCGTTGGAGTT。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌的生长条件为:生长温度为10℃~45℃,最适温度为30~37℃。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌的生物学特征为:菌落圆形,表面光滑,隆起,边缘整齐,乳白色,不透明;革兰氏阳性兼性厌氧,菌体短杆状,成对排列,无鞭毛、不产芽孢。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌能同时产苯乙醛和D-苯基乳酸。
其中,上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸产量分别为5.45mg/L、68.77mg/L。
本发明还提供了采用上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法,包括以下步骤:将上述副布氏慢生乳杆菌菌株甘油保存管溶解后,按1%~10%接种量接种于10mL装液量的MRS液体培养基中,30~37℃静置培养1~2天以获得种子液,将种子液按1%~10%接种量接种于添加了0.5~1.5g/L苯丙氨酸的MRS液体培养基中,30~37℃静置培养24~72h后,即可。
其中,所述MRS液体培养基配方为:葡萄糖20g/L,蛋白胨10g/L,酵母粉4g/L,牛肉浸粉5g/L,吐温80 1g/L,柠檬酸三铵2g/L,醋酸钠5g/L,硫酸镁0.2g/L,硫酸锰0.05g/L,磷酸氢二钾1g/L,pH6.0,115℃下高压蒸汽灭菌20分钟。
在本发明的一个优选方案中,采用上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法中,所述含苯丙氨酸的MRS液体培养基中苯丙氨酸为1g/L。
在本发明的一个优选方案中,采用上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法中,所述副布氏慢生乳杆菌种子液是以5%接种量接种于37℃静置培养1天所得。
在本发明的一个优选方案中,采用上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法中,种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的接种量为2%。
在本发明的一个优选方案中,采用上述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法中,种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的培养温度为37℃,培养时间为72h。
本发明还提供上述副布氏慢生乳杆菌在制备微生物源生物防腐剂的用途。
本发明还提供上述副布氏慢生乳杆菌在制备食品抑菌剂方面的用途。
其中,所述抑菌剂是抑制革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌或真菌中至少一种。
优选地,所述抑菌剂是抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、猪丹毒杆菌、肺炎链球菌或啤酒酵母菌中至少一种。
本发明筛选出的同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌对于金黄色葡萄球菌具有很好的抑菌效果,其抑菌圈直径可达21.08mm。而且本发明筛选出的副布氏慢生乳杆菌zqw49接种于添加了1g/L苯丙氨酸的MRS培养基中,37℃静置培养72h后,其产苯乙醛和D-苯基乳酸产量分别达到5.45、68.77mg/L。因此,本发明的副布氏慢生乳杆菌zqw49可作为微生物源生物防腐剂;副布氏慢生乳杆菌安全无致病性,可应用于传统酿造食品体系,对食品中出现的致病菌和腐败菌发挥抑制作用。
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解,下面的实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的,按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例中涉及的培养基配方,溶剂均为蒸馏水:
MRS液体培养基:葡萄糖20g/L,蛋白胨10g/L,酵母粉4g/L,牛肉浸粉5g/L,吐温801g/L,柠檬酸三铵2g/L,醋酸钠5g/L,硫酸镁0.2g/L,硫酸锰0.05g/L,磷酸氢二钾1g/L,pH6.0,115℃下高压蒸汽灭菌20分钟。
MRS固体培养基:在MRS液体培养基基础上添加15g/L的琼脂,115℃下高压蒸汽灭菌20分钟。
LB液体培养基:胰蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,NaCl 10g/L,pH7.0,121℃下高压蒸汽灭菌20分钟
LB固体培养基:在LB液体培养基基础上添加15g/L的琼脂,121℃下高压蒸汽灭菌20分钟。
实施例1:菌株的分离筛选
(1)分离方法:取20g泸州老窖白酒酿造酒醅样品,放入装有180mL无菌蒸馏水的锥形瓶中,恒温摇床振荡10min将样品充分打散、混匀。取1mL样品悬液,采用倍比稀释法,稀释至10-2~10-7,从每个梯度的稀释液中吸取100μL,均匀涂布于MRS固体培养基平板上,平行制备两块平板,倒置,放于37℃厌氧下培养36-48h,并及时观察。
(2)划线纯化:将长出菌落的平板取出,挑取不同菌落形态的单菌落,进行二次划线,直至纯化出所有单菌落。
(3)菌种保藏:将纯化完成后的每种菌株的单菌落挑入5mL MRS液体培养基中,置于37℃厌氧下静置培养20-24h,吸取1mL菌液至保菌管中,加入0.5mL60%的无菌甘油溶液,重悬,置于-80℃保存。
实施例2:代谢产物分析
(1)准备菌株发酵液:将筛选得到20株菌株甘油保存管溶解后接种于MRS液体培养基中,并于37℃静置培养24h,活化三代后按2%(体积比)接种量接入50Mlmrs液体培养基中,37℃静置培养24h,发酵结束后得到发酵液;
(2)发酵液非靶向代谢产物分析:送往上海美吉生物医药科技有限公司对每株菌进行LC-MS非靶向代谢产物检测,通过美吉生物平台数据库推测化合物结构及各物质的表达量。
检测结果如图1、图2所示,在20株筛选的菌株中编号为rsj15可产苯乙醛,D-苯基乳酸的表达量最高。
实施例3:抑菌效果检测
将金黄色葡萄球菌在LB培养基进行活化培养,筛选得到的20株菌株在MRS液体培养基中进行活化培养,离心后获得菌株发酵上清液;向已冷却至50℃左右的LB固体培养基中注入一定量的金黄色葡萄球菌菌液,混合均匀,倾注平板(约20mL/平板),水平静置凝固后在培养基表面垂直摆放牛津杯,轻压后使其与培养基接触无空隙,向牛津杯中加入稀释后的发酵上清液,37℃静置培养16-18h后,用毫米尺量取抑菌圈直径。
实验结果显示,筛选的菌株中rsj15的抑菌圈较大,直径可达21.08mm。
实施例4:细菌的分子鉴定
16S rDNA序列扩增:吸取1mL rsj15菌液8000rpm离心3min,去上清,得菌泥,加入CTAB溶液及苯酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)萃取核酸DNA,12500rpm离心5min取上清,加入等体积的氯仿-异戊醇(24:1),混匀后12000rpm离心5min取上清,乙醇溶液漂洗两次,12000rpm离心5min去上清,沉淀吹干,加入50μL无菌水重悬,即得菌株DNA模板。
引物为27F(SEQ ID NO:2):5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′和1492R(SEQ IDNO:3):5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′。
反应体系(50μl)
混合上述体系后进行PCR扩增。
测序获得16S rDNA片段的基因序列,通过NCBI的BLAST比对,确定菌株种属信息,鉴定其为副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillus parabuchneri),并命名为副布氏慢生乳杆菌zqw49,其序列如SEQ ID NO:1所示。
实施例5菌株的生物学特征
将副布氏慢生乳杆菌zqw49接种于MRS固体培养基,37℃静置培养2天后,观察该菌株的菌落及细胞形态。
适宜生长的温度测定:取对数生长期的副布氏慢生乳杆菌zqw49,按接种量2%接种于MRS液体培养基,分别在5、10、15、20、30、37、45、50℃下培养18h后测定其菌液OD600值;
实验结果显示,副布氏慢生乳杆菌zqw49的生长条件为:生长温度为10℃~45℃,最适温度为30~37℃。生物学特征为:菌落圆形,表面光滑,隆起,边缘整齐,乳白色,不透明;革兰氏阳性兼性厌氧,菌体短杆状,成对排列,无鞭毛、不产芽孢。
实施例6:发酵液中苯乙醛含量检测
将副布氏慢生乳杆菌zqw49菌株甘油保存管溶解后,按5%接种量接种于10mL装液量的MRS液体培养基中,37℃静置培养24h以获得种子液,将种子液按2%接种量接种于添加了1g/L苯丙氨酸的MRS液体培养基中,37℃静置培养72h后,采用顶空固相微萃取/气相色谱-质谱联用仪技术检测发酵液中的苯乙醛含量。
取发酵上清液,加入顶空瓶中,加入饱和NaCl溶液,以0.822mg/ml的2-辛醇为内标物,将制备好的样品于60℃保温平衡5min后,用50/30μmDVB/CAR/PDMS萃取头在60℃萃取50min,萃取结束后在GC进样口250℃解吸5min。化合物检索结果与NIST标准谱库进行匹配,相似度达到80%以上确认为目的化合物。以未添加菌发酵的培养液为空白对照组,计算各挥发性物质的含量。
GC-MS检测色谱条件:
气相色谱条件:HP-INNOWAX色谱柱(60m×0.25mm×0.25μm);升温程序:起始温度40℃,保持5min,以4℃/min升到100℃,再以6℃/min升至230℃,保持10min,载气为高纯氦气(1.0mL/min);进样口温度250℃,不分流。
质谱条件:电子电离源,电子能量70eV;电子倍增器电压350V;离子源温度230℃;传输线温度250℃;质量范围40~450m/z。
检测结果如表1所示,副布氏慢生乳杆菌zqw49发酵产生的苯乙醛含量为5.45mg/L。
实施例7:发酵液中D-苯基乳酸含量检测
将副布氏慢生乳杆菌zqw49菌株甘油保存管溶解后,按5%接种量接种于10mL装液量的MRS液体培养基中,37℃静置培养24h以获得种子液,将种子液按2%接种量接种于添加了1g/L苯丙氨酸的MRS液体培养基中,37℃静置培养72h后,采用高效液相色谱法检测发酵液中的D-苯基乳酸含量。
HPLC条件:流动相为0.05%的三氟乙酸/甲醇(A)和0.05%的三氟乙酸/水(B)的混合液,梯度洗脱程序为:0~20min由10%A线性变化至100%,20~23min保持100%A,23~25min由100%A线性变化至10%。流速1mL/min,检测波长210nm,柱温30℃。
检测结果如表1所示,副布氏慢生乳杆菌zqw49发酵产生的D-苯基乳酸含量为68.77mg/L。
表1发酵液中苯乙醛和D-苯基乳酸含量检测结果
检测物质 | 苯乙醛 | D-苯基乳酸 |
含量mg/L | 5.45 | 68.77 |
Claims (5)
1.同时产苯乙醛和D-苯基乳酸的副布氏慢生乳杆菌(Lentilactobacillus parabuchneri),其特征在于:保藏编号:CGMCC No. 25143。
2.权利要求1所述副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法,其特征在于:包括以下步骤:将权利要求1所述副布氏慢生乳杆菌种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基中,培养即可。
3.根据权利要求2所述的副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法,其特征在于:所述MRS液体培养基配方为:葡萄糖20g/L,蛋白胨10g/L,酵母粉4g/L,牛肉浸粉5g/L,吐温801g/L,柠檬酸三铵2g/L,醋酸钠5g/L,硫酸镁0.2g/L,硫酸锰0.05g/L,磷酸氢二钾1g/L,pH6.0,115℃下高压蒸汽灭菌20分钟。
4.根据权利要求3所述的副布氏慢生乳杆菌产苯乙醛和D-苯基乳酸的方法,其特征在于:
所述副布氏慢生乳杆菌种子液是以1%~10%接种量接种于MRS液体培养基中30~37℃静置培养1~2天所得;
所述苯丙氨酸浓度为0.5~1.5g/L;
种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的接种量为1%~10%;
种子液接种于含苯丙氨酸的MRS液体培养基的培养温度为30~37℃,培养时间为24~72h。
5.权利要求1所述副布氏慢生乳杆菌在制备食品抑菌剂上的用途,其特征在于:所述抑菌剂是抑制金黄色葡萄球菌。
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