CN115947842A - 用于检测白介素6的抗体组合及其应用 - Google Patents
用于检测白介素6的抗体组合及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了一种用于检测白介素6的抗体组合，所述抗体组合包括有第一抗体和/或第二抗体，抗体具有独特的CDR片段；同时还提供了此抗体组合的具体应用。本发明的优点在于，抗体组合对于白介素6抗原的亲和力强、检测灵敏度高、使用简便、检测快速稳定；正常人血液中IL6的浓度约为4.2 pg/mL，现有的常规低亲和力抗体针对此种情况难以实现有效的检测，而本发明的提供的高亲和力抗体组合和含有此抗体组合的采用双抗体夹心方法的白介素6定量检测试剂盒，能够有效实现超低浓度白介素6的定量检测，经验证，试剂盒的灵敏度可达到0.9 pg/mL。
Description
技术领域
本发明涉及体外诊断技术领域，具体涉及用于检测白介素6的抗体组合及其应用。
背景技术
白介素6（IL-6）是急性感染早期诊断的灵敏指标，可作为早期炎症及早期脓毒症的鉴别诊断指标，并对制定患者治疗方案和改善预后具有重要的参考意义。IL-6升高与疾病的严重程度呈正相关，增高幅度反应病情的严重程度。在危重患者中可持续长时间高水平的表达，可作为评估脓毒症和MODS患者严重程度和预后的敏感指标，并能更快反映抗生素治疗的效果。对于炎症和感染性疾病，PCT联合IL-6检测既可以提高感染的早期诊断率，避免漏诊，又可以减少误诊，可作为脓毒症早期预警及快速诊断第一检，并有效指导抗生素的合理用药。尤其是新生儿起病急，病情发展快，临床症状不明显，更需要使用炎症二联检(IL-6+PCT)。自身免疫性疾病、肿瘤及术后、烧创伤等应激反应中IL-6均显著升高，且与相应疾病严重程度呈正相关趋势（如红斑狼疮性肾炎患者血清中IL-6水平显著升高，且与疾病活动性呈正相关）。
但由于正常人血液中IL6的浓度约为4.2 pg/mL，现有针对IL6的生物制品多为低亲和力抗体，其对IL6的检测准确度低、灵敏度也不高。
申请号201110322423.1的专利申请《抗hIL6R高亲和力抗体的制备及应用》，公开了一种高亲和力的人白细胞介素-6受体(hIL6R)鼠单克隆抗体，其所建立的 hIL6R酶联免疫方法的检测灵敏度达到0.031ng/ml。
申请号202110618231.9的专利申请《一种检测犬IL-6的ELISA试剂盒及其应用》，制备出犬IL-6的单克隆抗体和多克隆抗体，分别将两种抗体作为检测抗体和捕获载体用于ELISA双抗夹心试剂盒，可以定量检测样品中IL-6，其最低检测值为1.17ng/mL，检测范围为1.17ng/mL～300ng/mL。
申请号202111448761.X的专利申请《检测小鼠白介素6的单克隆抗体及其制备方法和应用》，其公开了以杂交瘤细胞株20-A4-D5分泌的抗体用吖啶酯标记得到检测抗体，以杂交瘤细胞株10-B8-C9分泌的抗体用生物素标记得到捕获抗体，再将检测抗体和捕获抗体应用于检测小鼠白介素6的化学发光试剂盒，此试剂盒的灵敏度＜1.5pg/mL，对小鼠白细胞介素6的检测的线性范围为6.25-400pg/mL。
发明内容
针对上述存在的拘束局限性，本发明提出了一种用于检测白介素6的抗体组合及其应用；克服了背景技术中提到的不足和缺陷。
为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：
本发明的发明点是提供了一种用于检测白介素6的抗体组合，所述抗体组合包括有第一抗体和/或第二抗体，所述第一抗体重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1的第26-34、54-60、102-112位氨基酸序列所示，轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:2的第23-36、52-60、95-103位氨基酸序列所示；所述第二抗体重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3的第26-33、54-61、103-112位氨基酸序列所示，轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4的第24-34、50-57、90-98位氨基酸序列所示。
第一抗体是4E5，第二抗体为8F2。
第一抗体重链可变区的CDR1为：GFAGFSKDY；
第一抗体重链可变区的CDR2为：NGBAGDS；
第一抗体重链可变区的CDR3为：DLLYAFWGDS；
第一抗体轻链可变区的CDR1为：TLRSGINVPTYRIY；
第一抗体轻链可变区的CDR2为：YKSDSDKGS；
第一抗体轻链可变区的CDR3为：AIWHSSAWV；
第二抗体重链可变区的CDR1为：GFERKFNR；
第二抗体重链可变区的CDR2为：NYRNKQYG；
第二抗体重链可变区的CDR3为：ESYGYTDTSY；
第二抗体轻链可变区的CDR1为：NVTQAIGTSLS；
第二抗体轻链可变区的CDR2为：NADATIAR；
第二抗体轻链可变区的CDR3为：LQPNSTPYT。
在一个优选的实施方案中，用于检测白介素6的抗体组合，所述第一抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示或为与SEQ ID NO:1序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQID NO:2所示或为与SEQ ID NO:2序列同源性大于90%的氨基酸序列；所述第二抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或为与SEQ IDNO:3序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQID NO:4所示或为与SEQ ID NO:4序列同源性大于90%的氨基酸序列。
第一抗体重链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:1为：
QVQLVETGGDLVRPGGSLRLSCAASGFAGFSKDYAMTWVRQGPGKRLEWVSSINGBAGDSTYYADSVKGRFTISRDNFKNTVDLHLSSLRPEDTALYYCAKDLLYAFWGDSRGQGTLVTVSS；
第一抗体轻链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:2为：
QAVLTQPSSLSASPGASVSLTCTLRSGINVPTYRIYWYQQKPGSPPQFLLRYKSDSDKGSGVPSRFSGSRDASANAGILLISGLRSEDEADYYCAIWHSSAWVFGGGTQLEIK；
第二抗体重链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:3为：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFERKFNRYFMNWVRQAPGKGLEWVAQMNYRNKQYGTYYAESLEGRFTISRDDSKNSLYLQMNSLKTEDTAVYYCARESYGYTDTSYWGQGTLVTVSS；
第二抗体轻链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:4为：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCNVTQAIGTSLSWYQQKPGKAPKLLIYNADATIARGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQPNSTPYTFGQGTKLEIK。
在一个优选的实施方案中，用于检测白介素6的抗体组合，所述第一抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示或为与SEQ ID NO:5序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQID NO:6所示或为与SEQ ID NO:6序列同源性大于90%的氨基酸序列；所述第二抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示或为与SEQ IDNO:7序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQID NO:8所示或为与SEQ ID NO:8序列同源性大于90%的氨基酸序列。
第一抗体重链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:5为：
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK；
第一抗体轻链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:6为：
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS；
第二抗体重链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:7为：
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK；
第二抗体轻链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:8为：
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS。
用于检测白介素6的抗体组合，所述第一抗体和第二抗体独立的为包被抗体或检测抗体。
进一步的，上述的用于检测白介素6的抗体组合，所述抗体组合选自以下任意一种组合形式：第一抗体做为检测抗体、第二抗体做为检测抗体、第一抗体做为包被抗体+第二抗体做为检测抗体、第二抗体做为包被抗体+第一抗体做为检测抗体；优选为第一抗体做为包被抗体+第二抗体做为检测抗体。
也即是说，第一抗体和第二抗体都可以单独的做为白介素6的检测抗体，此时可采用常规的单抗检测方法以第一抗体或第二抗体进行白介素6的检测，同时，也可将第一抗体做为包被抗体、第二抗体做为检测抗体，以双抗夹心的方法进行白介素6的检测；或将第二抗体做为包被抗体、第一抗体做为检测抗体，以双抗夹心的方法进行白介素6的检测。
本发明的第二个发明点是提供了一种编码上述的用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸，编码所述第一抗体的重链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示或为与SEQ ID NO:9序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第一抗体的轻链可变区的多核苷酸序列如SEQID NO:10所示或为与SEQ ID NO:10序列同源性大于90%的核苷酸序列；编码所述第二抗体的重链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示或为与SEQ IDNO:11序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第二抗体的轻链可变区的多核苷酸序列如SEQID NO:12所示或为与SEQ ID NO:12序列同源性大于90%的核苷酸序列。
编码第一抗体重链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:9为：
caggtgcagctggtggagaccggcggcgacctggtgaggcccggcggcagcctgaggctgagctgcgccgccagcggcttcgccggcttcagcaaggactacgccatgacctgggtgaggcagggccccggcaagaggctggagtgggtgagcagcatcaacggcgacgccggcgacagcacctactacgccgacagcgtgaagggcaggttcaccatcagcagggacaacttcaagaacaccgtggacctgcacctgagcagcctgaggcccgaggacaccgccctgtactactgcgccaaggacctgctgtacgccttctggggcgacagcaggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagc；
编码第一抗体轻链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:10为：
caggcggtgctgacccagccgagcagcctgagcgcgagcccgggcgcgagcgtgagcctgacctgcaccctgcgcagcggcattaacgtgccgacctatcgcatttattggtatcagcagaaaccgggcagcccgccgcagtttctgctgcgctataaaagcgatagcgataaaggcagcggcgtgccgagccgctttagcggcagccgcgatgcgagcgcgaacgcgggcattctgctgattagcggcctgcgcagcgaagatgaagcggattattattgcgcgatttggcatagcagcgcgtgggtgtttggcggcggcacccagctggaaattaaa；
编码第二抗体重链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:11为：
gaagtgcagctggtggaaagcggcggcggcctggtgcagccgggcggcagcctgcgcctgagctgcgcggcgagcggctttgaacgcaaatttaaccgctattttatgaactgggtgcgccaggcgccgggcaaaggcctggaatgggtggcgcagatgaactatcgcaacaaacagtatggcacctattatgcggaaagcctggaaggccgctttaccattagccgcgatgatagcaaaaacagcctgtatctgcagatgaacagcctgaaaaccgaagataccgcggtgtattattgcgcgcgcgaaagctatggctataccgataccagctattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagc；
编码第二抗体轻链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:12为：
gatattcagatgacccagagcccgagcagcctgagcgcgagcgtgggcgatcgcgtgaccattacctgcaacgtgacccaggcgattggcaccagcctgagctggtatcagcagaaaccgggcaaagcgccgaaactgctgatttataacgcggatgcgaccattgcgcgcggcgtgccgagccgctttagcggcagcggcagcggcaccgattttaccctgaccattagcagcctgcagccggaagattttgcgacctattattgcctgcagccgaacagcaccccgtatacctttggccagggcaccaaactggaaattaaa。
在一个优选的实施方案中，用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸，编码所述第一抗体的重链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示或为与SEQ IDNO:13序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第一抗体的轻链恒定区的多核苷酸序列如SEQID NO:14所示或为与SEQ ID NO:14序列同源性大于90%的核苷酸序列；编码所述第二抗体的重链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:15所示或为与SEQ ID NO:15序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第二抗体的轻链恒定区的多核苷酸序列如SEQID NO:16所示或为与SEQ ID NO:16序列同源性大于90%的核苷酸序列。
编码第一抗体重链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:13为：
gcgagcaccaaaggcccgagcgtgtttccgctggcgccgagcagcaaaagcaccagcggcggcaccgcggcgctgggctgcctggtgaaagattattttccggaaccggtgaccgtgagctggaacagcggcgcgctgaccagcggcgtgcatacctttccggcggtgctgcagagcagcggcctgtatagcctgagcagcgtggtgaccgtgccgagcagcagcctgggcacccagacctatatttgcaacgtgaaccataaaccgagcaacaccaaagtggataaaaaagtggaaccgaaaagctgcgataaaacccatacctgcccgccgtgcccggcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaaccgaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtggtggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggatggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtataacagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggctgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcgccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgcaggtgtataccctgccgccgagccgcgatgaactgaccaaaaaccaggtgagcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaatgggaaagcaacggccagccggaaaacaactataaaaccaccccgccggtgctggatagcgatggcagcttttttctgtatagcaaactgaccgtggataaaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaagcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcaaa；
编码第一抗体轻链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:14为：
ggccagccgaaagcggcgccgagcgtgaccctgtttccgccgagcagcgaagaactgcaggcgaacaaagcgaccctggtgtgcctgattagcgatttttatccgggcgcggtgaccgtggcgtggaaagcggatagcagcccggtgaaagcgggcgtggaaaccaccaccccgagcaaacagagcaacaacaaatatgcggcgagcagctatctgagcctgaccccggaacagtggaaaagccatcgcagctatagctgccaggtgacccatgaaggcagcaccgtggaaaaaaccgtggcgccgaccgaatgcagc；
编码第二抗体重链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:15为：
gcgagcaccaaaggcccgagcgtgtttccgctggcgccgagcagcaaaagcaccagcggcggcaccgcggcgctgggctgcctggtgaaagattattttccggaaccggtgaccgtgagctggaacagcggcgcgctgaccagcggcgtgcatacctttccggcggtgctgcagagcagcggcctgtatagcctgagcagcgtggtgaccgtgccgagcagcagcctgggcacccagacctatatttgcaacgtgaaccataaaccgagcaacaccaaagtggataaaaaagtggaaccgaaaagctgcgataaaacccatacctgcccgccgtgcccggcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaaccgaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtggtggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggatggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtataacagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggctgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcgccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgcaggtgtataccctgccgccgagccgcgatgaactgaccaaaaaccaggtgagcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaatgggaaagcaacggccagccggaaaacaactataaaaccaccccgccggtgctggatagcgatggcagcttttttctgtatagcaaactgaccgtggataaaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaagcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcaaa；
编码第二抗体轻链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:16为：
ggccagccgaaagcggcgccgagcgtgaccctgtttccgccgagcagcgaagaactgcaggcgaacaaagcgaccctggtgtgcctgattagcgatttttatccgggcgcggtgaccgtggcgtggaaagcggatagcagcccggtgaaagcgggcgtggaaaccaccaccccgagcaaacagagcaacaacaaatatgcggcgagcagctatctgagcctgaccccggaacagtggaaaagccatcgcagctatagctgccaggtgacccatgaaggcagcaccgtggaaaaaaccgtggcgccgaccgaatgcagc。
本发明的第三个发明点是提供了上述用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸的表达系统，所述表达系统为哺乳动物表达载体。
在一个优选的实施方案中，上述的表达系统，所述白介素6的抗原表达系统为Expi293表达系统。
在一个优选的实施方案中，上述的表达系统，所述抗体表达系统为CHO表达系统。
本发明的第四个发明点是提供了一种含有上述的表达系统的宿主细胞。
本发明的第五个发明点是提供了上述的抗体组合在制备用于体外定量检测白介素6含量的生物制品中的应用。
在一个优选的实施方案中，上述的应用，所述体外定量检测是指检测血清、血浆、全血和/或末梢血中白介素6的含量。
在一个优选的实施方案中，上述的应用，所述生物制品为试剂盒。
在一个优选的实施方案中，上述的应用，所述试剂盒为双抗体夹心法检测试剂盒。
与现有技术相对比，本发明具有以下优点：
本发明提供的用于检测白介素6的抗体组合及其应用，抗体组合对于白介素6抗原的亲和力强、检测灵敏度高、使用简便、检测快速稳定；正常人血液中IL6的浓度约为4.2pg/mL，现有的常规低亲和力抗体针对此种情况难以实现有效的检测，而本发明的提供的高亲和力抗体组合和含有此抗体组合的采用双抗体夹心方法的白介素6定量检测试剂盒，能够有效实现超低浓度白介素6的定量检测，经验证，试剂盒的灵敏度可达到0.9pg/mL。
本发明采用的双抗体夹心法测定样本中IL-6水平，也即是酶标板上包被的抗体与检测抗体和被测样品的IL-6形成了“包被抗体-抗原-检测抗体”的夹心复合物结构，更有利于IL-6的检出。另外本发明有效地采用亲和素-生物素-酶复合物实现了检测的高灵敏度。
本发明的检测试剂盒不仅可以快速、准确地测定血清中IL-6的含量，为炎症的早期诊断、早期治疗提供了可靠的临床参考价值；而且由于使用了两个特异性单克隆抗体的组合，实现了IL-6检测灵敏度的大幅提升。
附图说明
图1为本发明一实施例所提供的含有用于检测白介素6的抗体组合的ELISA试剂盒的标准曲线。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面对本发明进行进一步详细说明。但是应该理解，此处所描述仅仅用以解释本发明，并不用于限制本发明的范围。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术术语和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同，本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在限制本发明。本文中所使用的试剂和仪器均商购可得，所涉及的表征手段均可参阅现有技术中的相关描述，本文中不再赘述。
为了进一步了解本发明，下面结合最佳实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1
用于检测白介素6的抗体组合，所述抗体组合包括有第一抗体和/或第二抗体，所述第一抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1第26-34、54-60、102-112位氨基酸序列所示，轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:2第23-36、52-60、95-103位氨基酸序列所示；所述第二抗体的重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3第26-33、54-61、103-112位氨基酸序列所示，轻链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4第24-34、50-57、90-98位氨基酸序列所示。
其中的第一抗体可以单独用于检测白介素6，第二抗体也可以单独用于检测白介素6，但将第一抗体和第二抗体共同使用，检测白介素6的准确率和灵敏度最好。
第一抗体是4E5，第二抗体为8F2。
第一抗体重链可变区的CDR1为：GFAGFSKDY；
第一抗体重链可变区的CDR2为：NGBAGDS；
第一抗体重链可变区的CDR3为：DLLYAFWGDS；
第一抗体轻链可变区的CDR1为：TLRSGINVPTYRIY；
第一抗体轻链可变区的CDR2为：YKSDSDKGS；
第一抗体轻链可变区的CDR3为：AIWHSSAWV；
第二抗体重链可变区的CDR1为：GFERKFNR；
第二抗体重链可变区的CDR2为：NYRNKQYG；
第二抗体重链可变区的CDR3为：ESYGYTDTSY；
第二抗体轻链可变区的CDR1为：NVTQAIGTSLS；
第二抗体轻链可变区的CDR2为：NADATIAR；
第二抗体轻链可变区的CDR3为：LQPNSTPYT。
第一抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示或为与SEQ ID NO:1序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示或为与SEQID NO:2序列同源性大于90%的氨基酸序列；所述第二抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或为与SEQ ID NO:3序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示或为与SEQ ID NO:4序列同源性大于90%的氨基酸序列。
第一抗体重链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:1为：
QVQLVETGGDLVRPGGSLRLSCAASGFAGFSKDYAMTWVRQGPGKRLEWVSSINGBAGDSTYYADSVKGRFTISRDNFKNTVDLHLSSLRPEDTALYYCAKDLLYAFWGDSRGQGTLVTVSS；
第一抗体轻链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:2为：
QAVLTQPSSLSASPGASVSLTCTLRSGINVPTYRIYWYQQKPGSPPQFLLRYKSDSDKGSGVPSRFSGSRDASANAGILLISGLRSEDEADYYCAIWHSSAWVFGGGTQLEIK；
第二抗体重链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:3为：
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFERKFNRYFMNWVRQAPGKGLEWVAQMNYRNKQYGTYYAESLEGRFTISRDDSKNSLYLQMNSLKTEDTAVYYCARESYGYTDTSYWGQGTLVTVSS；
第二抗体轻链可变区氨基酸序列SEQ ID NO:4为：
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCNVTQAIGTSLSWYQQKPGKAPKLLIYNADATIARGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCLQPNSTPYTFGQGTKLEIK。
第一抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示或为与SEQ ID NO:5序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示或为与SEQID NO:6序列同源性大于90%的氨基酸序列；所述第二抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示或为与SEQ ID NO:7序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示或为与SEQ ID NO:8序列同源性大于90%的氨基酸序列。
第一抗体重链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:5为：
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK；
第一抗体轻链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:6为：
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS；
第二抗体重链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:7为：
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK；
第二抗体轻链恒定区氨基酸序列SEQ ID NO:8为：
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS。
编码上述的用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸，编码所述第一抗体的重链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示或为与SEQ ID NO:9序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第一抗体的轻链可变区的多核苷酸序列如SEQID NO:10所示或为与SEQ ID NO:10序列同源性大于90%的核苷酸序列；编码所述第二抗体的重链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示或为与SEQ ID NO:11序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第二抗体的轻链可变区的多核苷酸序列如SEQID NO:12所示或为与SEQ IDNO:12序列同源性大于90%的核苷酸序列。
编码第一抗体重链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:9为：
caggtgcagctggtggagaccggcggcgacctggtgaggcccggcggcagcctgaggctgagctgcgccgccagcggcttcgccggcttcagcaaggactacgccatgacctgggtgaggcagggccccggcaagaggctggagtgggtgagcagcatcaacggcgacgccggcgacagcacctactacgccgacagcgtgaagggcaggttcaccatcagcagggacaacttcaagaacaccgtggacctgcacctgagcagcctgaggcccgaggacaccgccctgtactactgcgccaaggacctgctgtacgccttctggggcgacagcaggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagc；
编码第一抗体轻链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:10为：
caggcggtgctgacccagccgagcagcctgagcgcgagcccgggcgcgagcgtgagcctgacctgcaccctgcgcagcggcattaacgtgccgacctatcgcatttattggtatcagcagaaaccgggcagcccgccgcagtttctgctgcgctataaaagcgatagcgataaaggcagcggcgtgccgagccgctttagcggcagccgcgatgcgagcgcgaacgcgggcattctgctgattagcggcctgcgcagcgaagatgaagcggattattattgcgcgatttggcatagcagcgcgtgggtgtttggcggcggcacccagctggaaattaaa；
编码第二抗体重链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:11为：
gaagtgcagctggtggaaagcggcggcggcctggtgcagccgggcggcagcctgcgcctgagctgcgcggcgagcggctttgaacgcaaatttaaccgctattttatgaactgggtgcgccaggcgccgggcaaaggcctggaatgggtggcgcagatgaactatcgcaacaaacagtatggcacctattatgcggaaagcctggaaggccgctttaccattagccgcgatgatagcaaaaacagcctgtatctgcagatgaacagcctgaaaaccgaagataccgcggtgtattattgcgcgcgcgaaagctatggctataccgataccagctattggggccagggcaccctggtgaccgtgagcagc；
编码第二抗体轻链可变区的多核苷酸序列SEQ ID NO:12为：
gatattcagatgacccagagcccgagcagcctgagcgcgagcgtgggcgatcgcgtgaccattacctgcaacgtgacccaggcgattggcaccagcctgagctggtatcagcagaaaccgggcaaagcgccgaaactgctgatttataacgcggatgcgaccattgcgcgcggcgtgccgagccgctttagcggcagcggcagcggcaccgattttaccctgaccattagcagcctgcagccggaagattttgcgacctattattgcctgcagccgaacagcaccccgtatacctttggccagggcaccaaactggaaattaaa。
编码所述第一抗体的重链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示或为与SEQID NO:13序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第一抗体的轻链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:14所示或为与SEQ ID NO:14序列同源性大于90%的核苷酸序列；编码所述第二抗体的重链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:15所示或为与SEQ ID NO:15序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第二抗体的轻链恒定区的多核苷酸序列如SEQ IDNO:16所示或为与SEQ ID NO:16序列同源性大于90%的核苷酸序列。
编码第一抗体重链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:13为：
gcgagcaccaaaggcccgagcgtgtttccgctggcgccgagcagcaaaagcaccagcggcggcaccgcggcgctgggctgcctggtgaaagattattttccggaaccggtgaccgtgagctggaacagcggcgcgctgaccagcggcgtgcatacctttccggcggtgctgcagagcagcggcctgtatagcctgagcagcgtggtgaccgtgccgagcagcagcctgggcacccagacctatatttgcaacgtgaaccataaaccgagcaacaccaaagtggataaaaaagtggaaccgaaaagctgcgataaaacccatacctgcccgccgtgcccggcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaaccgaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtggtggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggatggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtataacagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggctgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcgccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgcaggtgtataccctgccgccgagccgcgatgaactgaccaaaaaccaggtgagcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaatgggaaagcaacggccagccggaaaacaactataaaaccaccccgccggtgctggatagcgatggcagcttttttctgtatagcaaactgaccgtggataaaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaagcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcaaa；
编码第一抗体轻链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:14为：
ggccagccgaaagcggcgccgagcgtgaccctgtttccgccgagcagcgaagaactgcaggcgaacaaagcgaccctggtgtgcctgattagcgatttttatccgggcgcggtgaccgtggcgtggaaagcggatagcagcccggtgaaagcgggcgtggaaaccaccaccccgagcaaacagagcaacaacaaatatgcggcgagcagctatctgagcctgaccccggaacagtggaaaagccatcgcagctatagctgccaggtgacccatgaaggcagcaccgtggaaaaaaccgtggcgccgaccgaatgcagc；
编码第二抗体重链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:15为：
gcgagcaccaaaggcccgagcgtgtttccgctggcgccgagcagcaaaagcaccagcggcggcaccgcggcgctgggctgcctggtgaaagattattttccggaaccggtgaccgtgagctggaacagcggcgcgctgaccagcggcgtgcatacctttccggcggtgctgcagagcagcggcctgtatagcctgagcagcgtggtgaccgtgccgagcagcagcctgggcacccagacctatatttgcaacgtgaaccataaaccgagcaacaccaaagtggataaaaaagtggaaccgaaaagctgcgataaaacccatacctgcccgccgtgcccggcgccggaactgctgggcggcccgagcgtgtttctgtttccgccgaaaccgaaagataccctgatgattagccgcaccccggaagtgacctgcgtggtggtggatgtgagccatgaagatccggaagtgaaatttaactggtatgtggatggcgtggaagtgcataacgcgaaaaccaaaccgcgcgaagaacagtataacagcacctatcgcgtggtgagcgtgctgaccgtgctgcatcaggattggctgaacggcaaagaatataaatgcaaagtgagcaacaaagcgctgccggcgccgattgaaaaaaccattagcaaagcgaaaggccagccgcgcgaaccgcaggtgtataccctgccgccgagccgcgatgaactgaccaaaaaccaggtgagcctgacctgcctggtgaaaggcttttatccgagcgatattgcggtggaatgggaaagcaacggccagccggaaaacaactataaaaccaccccgccggtgctggatagcgatggcagcttttttctgtatagcaaactgaccgtggataaaagccgctggcagcagggcaacgtgtttagctgcagcgtgatgcatgaagcgctgcataaccattatacccagaaaagcctgagcctgagcccgggcaaa；
编码第二抗体轻链恒定区的多核苷酸序列SEQ ID NO:16为：
ggccagccgaaagcggcgccgagcgtgaccctgtttccgccgagcagcgaagaactgcaggcgaacaaagcgaccctggtgtgcctgattagcgatttttatccgggcgcggtgaccgtggcgtggaaagcggatagcagcccggtgaaagcgggcgtggaaaccaccaccccgagcaaacagagcaacaacaaatatgcggcgagcagctatctgagcctgaccccggaacagtggaaaagccatcgcagctatagctgccaggtgacccatgaaggcagcaccgtggaaaaaaccgtggcgccgaccgaatgcagc。
用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸的表达系统，表达系统为哺乳动物表达载体。
白介素6（IL6）的抗原表达系统为Expi 293表达系统。
抗体表达系统为CHO表达系统。
含有上述表达系统的宿主细胞。
用于检测白介素6的抗体组合在制备用于体外定量检测白介素6含量的生物制品中的应用。
体外定量检测是指检测血清、血浆、全血和/或末梢血中白介素6的含量。
生物制品为试剂盒。
试剂盒为双抗体夹心法检测试剂盒。
实施例2
第一抗体和第二抗体，均是采用噬菌体展示的方法筛选得到的，再以NHS-Biotin试剂标记纯化好的蛋白，白介素6（IL6）抗原是采用Expi293 表达系统表达的，其表达序列如SEQ ID NO:17所示或为与SEQ ID NO:17序列同源性大于90%的氨基酸序列。
SEQ ID NO:17序列：
VPPGEDSKDVAAPHRQPLTSSERIDKQIRYILDGISALRKETCNKSNMCESSKEALAENNLNLPKMAEKDGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYLEYLQNRFESSEEQARAVQMSTKVLIQFLQKKAKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQWLQDMTTHLILRSFKEFLQSSLRALRQM。
白介素6（IL6）抗原的核苷酸序列如SEQ ID NO:18所示或为与SEQ ID NO:18序列同源性大于90%的核苷酸序列。
SEQ ID NO:18序列：
gtgccgccgggcgaagatagcaaagatgtggcggcgccgcatcgccagccgctgaccagcagcgaacgcattgataaacagattcgctatattctggatggcattagcgcgctgcgcaaagaaacctgcaacaaaagcaacatgtgcgaaagcagcaaagaagcgctggcggaaaacaacctgaacctgccgaaaatggcggaaaaagatggctgctttcagagcggctttaacgaagaaacctgcctggtgaaaattattaccggcctgctggaatttgaagtgtatctggaatatctgcagaaccgctttgaaagcagcgaagaacaggcgcgcgcggtgcagatgagcaccaaagtgctgattcagtttctgcagaaaaaagcgaaaaacctggatgcgattaccaccccggatccgaccaccaacgcgagcctgctgaccaaactgcaggcgcagaaccagtggctgcaggatatgaccacccatctgattctgcgcagctttaaagaatttctgcagagcagcctgcgcgcgctgcgccagatg。
实施例3
含有2种抗体的试剂盒的具体组成以及各组成的具体浓度如表1所示。
表1
试剂如下所示：
（1）ELISA实验包被缓冲液(PH9.6 0.05 M碳酸盐缓冲液)：
NaHCO31.59克，
NaHCO32.93克，
加蒸馏水至1000 ml；
（2）ELISA实验洗涤缓冲液(PH7.4 PBS)：0.15 M
KH2PO40.2克，
Na2HPO4·12H2O2.9克，
NaCl8.0克，
KCl0.2克，
Tween-200.05% 0.5 ml，
加蒸馏水至1000 ml；
（3）ELISA样本稀释液：
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克，
加洗涤缓冲液至100 ml；
（4）ELISA实验终止液(2 M H2SO4)：
蒸馏水178.3 ml，逐滴加入浓硫酸(98%)21.7 ml；
（5）ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸氢二钠柠檬酸)：
0.2 M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7 ml，
0.1 M 柠檬酸(19.2克/L) 24.3 ml，
加蒸馏水50 ml；
（6）ELISA实验TMB(四甲基联苯胺)使用液：
TMB(10 mg/5 ml无水乙醇) 0.5 ml，
底物缓冲液(PH5.5) 10 ml，
0.75%H2O232 μl；
（7）ELISA实验封闭液：
牛血清白蛋白(BSA) 5克，
加洗涤缓冲液至100 ml。
实施例4
1、含有2种抗体的试剂盒用于白介素6检测的具体操作过程如下所示。
步骤：
抗体预包被：用包被缓冲液稀释4E5抗体至浓度为 1μg/mL，100 μL每孔加入酶标板中，4℃过夜；
封闭：每孔加入100 μL的封闭液，37℃封闭0.5-1小时，用洗涤缓冲液洗板3 次，每次30 s，拍干；
标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔和空白对照孔16孔，用样本稀释液梯度稀释hIL6抗原，每个浓度200μL，浓度分别为500 pg/mL、125 pg/mL、62.5pg/mL、31.25 pg/mL、15.6 pg/mL、7.8 pg/mL、3.9pg/mL，每个浓度两个复孔，各孔加样量都为100μl，空白孔每孔各加100 μL样本稀释液；
待测样本的稀释与加样：将样本稀释液240 μl，然后再加待测样品60 μl（样品最终稀释度为5倍），共三个复孔，每孔100 μL将样品加于酶标板孔底部；
温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟，小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，用洗涤缓冲液洗板3 次，每次30 s，拍干；
生物素标记抗体孵育：于各反应孔中，加入新鲜稀释的生物素标记抗体，每孔100μL，37℃，0.5 - 1 h，用洗涤缓冲液洗板3 次，每次30 s，拍干；
显色：每孔先加入TMB显色剂各50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟；
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）；
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值），测定应在加终止液后15分钟以内进行。
2、样本要求：
用无菌管收集血清，室温血液自然凝固 10-20 分钟，2-8℃条件离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分），仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
含有抗体组合的试剂盒，在用于体外定量检测人血清、血浆、全血、末梢血中白介素6（IL-6）的含量的结果判定标准如下表2所示。
表2
本发明试剂盒的标准曲线如图1所示。
实施例5
以背景技术所记载的三篇相关专利申请所记载的技术方案分别做为对比例1-3（即申请号201110322423.1、202110618231.9和202111448761.X的三篇专利文献），以市售的IL-6检测试剂盒做为对比例4，与本发明实施例4提供的试剂盒分别对样本进行了检测。
检测过程中，先对试剂盒的基本特征进行了对比，具体如下表3所示。
表3
从表3可以看出，各试剂盒的基本特征已经存在了差别，实施例4针对的是样本为人血清中的白介素6(IL6)，而对比例2和3则是分别针对犬血清和鼠血清的，对比例1虽然是针对的人血清样本，但其抗原是白介素6的重组蛋白受体(hIL6R)，其目的是为了“重组hIL6R和重组IL6的结合”，只有对比例4是针对了同样的人IL6抗原；实施例4的包被抗体和检测抗体也与对比例1-4完全不同，在此前体下，实施例4所提供试剂盒的检测灵敏度大大超过了对比例4，同时，其检测范围也远高于对比例4，对比例1的试剂盒灵敏度虽然比实施例4更高，但其针对的检测抗原又与实施例4不同，而且通常情况下，进行了人为重组的受体由于其重组的目的性较强，灵敏度也必然要高于普通抗原。
进一步的，以血液样本进行了IL6检测，检测方法具体为：收集炎症或者感染患者和正常人血清样本各10例，分别用本专利的试剂盒及市售的IL6检测试剂盒（对比例4）进行了IL6检测，结果具体如下表4所示，表4中H组为健康机体血清，P组为炎症或感染机体血清；由于对比例1是针对不同的人源血清样本IL6抗原受体（hIL6R）、对比例2-3是针对犬和鼠源血清样本IL6抗原，三者无法进行统一比较，故此只提供了同样用于检测IL6检测的市售试剂盒对比例4的检测结果比较数据。
表4
综合表2的判定标准，可以确定若血清IL6浓度>7pg/mL，表明可能存在炎症或其他感染，在上述表4的检测数据对比中，可以看出，市售达科为试剂盒（对比例4）在针对P1、P8、P9的检测中，均出现了由于灵敏度低从而漏检的情况，漏检率达到了30%，已属于漏检率较高水平；而相对的本发明试剂盒检测结果则为未出现漏检，也即是漏检率为0，说明了本发明含有抗体组合的试剂盒，其灵敏度要远高于现有产品。
实施例6
本发明提供了用于检测人源血清样本中白介素6的两种抗体，即第一抗体4E5和第二抗体8F2，并将其组合后采用双抗体夹心法进行检测，但实际上，以噬菌体展示的方法筛选得到的上述两种抗体，单独使用以及调换使用时，也同样具备检测人源血清样本中白介素6的功能，为验证其单独使用及调换使用时的效果，申请人采用实施例1-6相似的方法进行了检测（单抗是采用了常规方法检测，双抗是采用夹心方法检测），并将结果进行了对比，具体如下。
单独第一抗体4E5、单独第二抗体8F2、抗体组合4E5（包被）+8F2（检测）、抗体组合8F2（包被）+4E5（检测）组成试剂盒的基本特征比较结果如表5所示。
表5
从表5可以看出，单独使用第一抗体4E5和单独使用第二抗体8F2均能够有效的对人源血清样本白介素6进行检测，且二者单独使用时的检测灵敏度和检测范围也要优于现有市售产品（Dakewei-IL6试剂盒），而将第一抗体第二抗体调换的抗体组合8F2（包被）+4E5（检测），其效果要更优于第一抗体和第二抗体的单独使用，更进一步的是，采用本发明所记载的抗体组合4E5+8F2，其检测灵敏度和检测范围是所有选择里面最好的，不仅优于现有产品，也同样更优于单独使用和调换使用的方式。
为了测试实际的使用效果，申请人也进行了随机的人源血液样本进行了IL6检测，检测方法与得出表4结论的检测方法相似，其具体结果如表6所示。
表6
同样综合表2的判定标准，可以确定若血清IL6浓度>7pg/mL，表明可能存在炎症或其他感染，在上述表6的检测数据对比中，可以看出，市售达科为试剂盒（对比例4）在针对P1、P8、P9的检测中，均出现了由于灵敏度低从而漏检的情况，漏检率达到了30%，已属于漏检率较高水平；而相对的抗体组合4E5+8F2试剂盒和抗体组合8F2+4E5试剂盒的检测结果则未出现漏检，也即是漏检率为0，且其中抗体组合4E5+8F2的检测结果要更远离判定标准（即7pg/mL），说明了此种抗体组合的效果相对更好；单独使用第一抗体4E5在针对P1和P8的检测中，出现了漏检，漏检率为20%；单独使用第二抗体8F2在针对P8的检测中，出现了漏检，漏检率为10%；由此对比结果可以说明，单独使用第一抗体和第二抗体，其检测灵敏度要比抗体组合使用略低，但仍要优于现有的市售达科为试剂盒。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (13)
1.用于检测白介素6的抗体组合，其特征在于，所述抗体组合包括有第一抗体和/或第二抗体，所述第一抗体重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1的第26-34、54-60、102-112位氨基酸序列所示，轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:2的第23-36、52-60、95-103位氨基酸序列所示；所述第二抗体重链可变区的CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:3的第26-33、54-61、103-112位氨基酸序列所示，轻链可变区CDR1、CDR2和CDR3区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4的第24-34、50-57、90-98位氨基酸序列所示。
2.根据权利要求1所述的用于检测白介素6的抗体组合，其特征在于，所述第一抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示或为与SEQ ID NO:1序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示或为与SEQ ID NO:2序列同源性大于90%的氨基酸序列；所述第二抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或为与SEQ ID NO:3序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示或为与SEQ ID NO:4序列同源性大于90%的氨基酸序列。
3.根据权利要求2所述的用于检测白介素6的抗体组合，其特征在于，所述第一抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示或为与SEQ ID NO:5序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示或为与SEQ ID NO:6序列同源性大于90%的氨基酸序列；所述第二抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示或为与SEQ ID NO:7序列同源性大于90%的氨基酸序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示或为与SEQ ID NO:8序列同源性大于90%的氨基酸序列。
4.根据权利要求1-3任一所述的用于检测白介素6的抗体组合，其特征在于，所述第一抗体和第二抗体独立的为包被抗体或检测抗体。
5.根据权利要求4所述的用于检测白介素6的抗体组合，其特征在于，所述抗体组合选自以下任意一种组合形式：第一抗体做为检测抗体、第二抗体做为检测抗体、第一抗体做为包被抗体+第二抗体做为检测抗体、第二抗体做为包被抗体+第一抗体做为检测抗体；优选为第一抗体做为包被抗体+第二抗体做为检测抗体。
6.一种编码权利要求1-5任一所述的用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸，其特征在于，编码所述第一抗体的重链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示或为与SEQ ID NO:9序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第一抗体的轻链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示或为与SEQ ID NO:10序列同源性大于90%的核苷酸序列；编码所述第二抗体的重链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:11所示或为与SEQ IDNO:11序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第二抗体的轻链可变区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示或为与SEQ ID NO:12序列同源性大于90%的核苷酸序列。
7.根据权利要求6所述的用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸，其特征在于，编码所述第一抗体的重链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示或为与SEQID NO:13序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第一抗体的轻链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:14所示或为与SEQ ID NO:14序列同源性大于90%的核苷酸序列；编码所述第二抗体的重链恒定区的多核苷酸序列如SEQ ID NO:15所示或为与SEQ ID NO:15序列同源性大于90%的核苷酸序列，编码所述第二抗体的轻链恒定区的多核苷酸序列如SEQ IDNO:16所示或为与SEQ ID NO:16序列同源性大于90%的核苷酸序列。
8.权利要求6-7所述用于检测白介素6的抗体组合的重链和轻链的多核苷酸的表达系统，其特征在于，所述表达系统为哺乳动物表达载体。
9.根据权利要求8所述的表达系统，其特征在于，所述白介素6的抗原表达系统为Expi293表达系统；
所述抗体表达系统为CHO表达系统。
10.一种含有权利要求8或9所述的表达系统的宿主细胞。
11.权利要求1-5任一所述的抗体组合在制备用于体外定量检测白介素6含量的生物制品中的应用。
12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述体外定量检测是指检测血清、血浆、全血和/或末梢血中白介素6的含量；
所述生物制品为试剂盒。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述试剂盒为双抗体夹心法检测试剂盒。
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