CN115919697A - 包含死海水和多糖的组合物及其作为皮肤保护剂的用途 - Google Patents

Abstract

本申请涉及包含死海水和多糖的组合物及其作为皮肤保护剂的用途。本公开内容提供了包含至少一种死海提取物和至少一种多糖的组合物，其中所述多糖的重复单元是由两个D‑葡萄糖残基、一个L‑岩藻糖残基和一个D‑葡萄糖醛酸残基组成的四糖。本公开内容还提供了包含该组合物的制剂及其作为抵抗污染的皮肤保护剂的用途。

Description

包含死海水和多糖的组合物及其作为皮肤保护剂的用途

本申请是申请日为2017年8月3日，申请号为201780061513.5，发明名称为“包含死海水和多糖的组合物及其作为皮肤保护剂的用途”的申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及包含与一种或更多种多糖组合的死海提取物的组合物，所述组合物用于作为抵抗污染的皮肤保护剂使用。

发明背景

世界卫生组织(WHO)将污染定义为室内环境或室外环境被改变大气的天然特征的任何化学剂、物理剂或生物剂的污染。

在过去几年中，我们生活方式的演变和增加的城市化扩大了与污染相关的风险，使污染成为关注健康和美丽的主要来源之一。

已知由工业、车辆尾气(vehicle fumes)、香烟烟气(cigarette smoke)和其他来源引起的空气污染连同太阳辐射(紫外线，UV)对人类皮肤和身体健康都具有有害影响，并导致各种疾病。

污染可能是皮肤应激的来源，因为污染物可与皮肤反应，改变皮肤屏障，渗透皮肤屏障，并由于与皮肤细胞和其中的其他细胞生物分子诸如皮肤蛋白、脂质和DNA的反应而引起损伤，诸如氧化和炎症。

污染物对皮肤的影响可导致干燥皮肤、敏感皮肤、皮肤过早老化和加速老化，例如皱纹形成、异常色素沉着、皮肤干燥等等。污染物也可能与痤疮和皮肤癌有关。

城市污染对皮肤(健康皮肤和皮肤病理学两者)的负面影响已经在几项科学研究中被讨论[1]-[6]。

Vierkotter等人阐明了气载颗粒(airborne particle)暴露与外在皮肤老化，特别是色素斑形成之间的关联[1]。

Kim等人2013年研究了空气污染对患有特应性皮炎的患者的影响。已经显示，室外空气污染，包括颗粒物(PM)、气体和挥发性有机化合物(VOC)，可使特应性皮炎恶化，并且在管理这些患者时应该加以控制[2]。

Larrieu等人发现在暴露于10mg/m³ PM或臭氧水平的增加之后的三天内，发展皮疹的风险增加[3]。

Kramer等人2010年研究了交通相关的污染与6岁儿童中的湿疹之间的关系。他们发现，生活在交通相关的、高度污染的地区的儿童中患病率显著更高[4]。

Xu等人将因皮肤状况的急诊室访问与臭氧暴露相关联[5]。

Lu X等人阐明了10mg/m³的臭氧的增加导致荨麻疹、湿疹、接触性皮炎和皮疹的统计学显著增加[6]。

污染源可以被分为两个类型，即原生污染物和二次污染物[7]。

原生污染物包括两个主要组：颗粒物(PM)和气体[例如CO₂、CO、SO₂、NO、NO₂和其他NOx(氮氧化物，诸如N₂O、N₂O₂、N₂O₃、N₂O₄和N₂O₅)]，包括轻分子量烃，例如挥发性有机化合物(VOC)。颗粒还可以携带高度亲脂性的并且容易渗透皮肤的多环芳烃(PAH)。多氯联苯(PCB)是另一种有毒的PM。颗粒物在原生污染中起着主要作用。颗粒物含有有毒的有机化合物、重金属、行驶中汽车的烟气和来自工业工厂、农事(agriculture farming)和道路的燃烧的植物、烟气、污物和灰尘。

在某些大气条件下，二次污染物诸如臭氧和过氧乙酰硝酸酯(PAN)是由原生污染物、热和UV辐射之间的光化学反应形成的。这些污染物在大气层(对流层)中保持低位，并在城市和农村地区两者沉降，形成通常称为的烟雾。

污染水平和污染物浓度在全天之间、根据季节、地理位置以及根据人类活动水平而变化。特别地，在夏季期间当强烈的阳光增强通过原生污染物之间的光化学反应的臭氧产生时，臭氧水平增加。主要来自汽车燃气(combustion)和工业的含氮气体(nitrousgases)在南美、远东亚洲大城市和一些欧洲城市通常更高。

天然皮肤抵抗污染风险的自我防御能力是有限的。在皮肤保护中的主要因素是皮肤的完整性，并且因此皮肤屏障发挥作为抵抗污染物渗透的前线防护的作用。然而，延长且重复暴露于高水平的污染物损害皮肤的天然防御能力。

刺激皮肤屏障的天然防御可以通过长期地在生物学方面应对污染风险，或者通过在皮肤上物理地形成用作次级屏障的膜来进行，并且因此立即降低污染皮肤暴露和损伤。

死海的水、盐、矿物质和泥因其在治疗多种皮肤状况中的治疗效力以及其美容益处而被知悉[8]-[11]。

和

是包含高分子量的阴离子多糖的化妆品成分的商业名称。多糖是通过生物技术手段获得的，并且当被配制在化妆品制品中时，由于其形成基质的能力而用作抵抗污染的屏蔽物(screen)，该基质用作针对以下三种类型的污染应激的物理屏障：大气污染(碳颗粒、PM和重金属)；生活污染(Domestic pollution)(化学品)；和UV辐射。因此，

和

限制了由此类污染应激(例如氧化应激、炎症和线粒体毒性)诱发的细胞外的和细胞间的损伤[12]-[16]。

参考文献

[1]Vierkotter A，Schikowski T，Ranff U，Sugiri D，Matsui M，Kramer U，etal.Airborne particle exposure and extrinsic skinaging.J.Invest.Dermatol.2010，130，2719-2726.

[2]Kim J，Kim EH，Oh I，Jung K，Han Y，Cheong HK，et al.Symptoms of atopicdermatitis are influenced by outdoor pollution.J.Allergy.Clin.Inmunol.2013，132，495-497.

[3]Larrieu S，Lefranc A，Gault G，Chatignoux E，Couvy F，Jouves B，etal.Are the short-term effects of air pollution restricted tocardiorespiratory diseases.Am.J.Epidemiol.2009，169，1201-1208.

[4]

U，Sugiri D，Ranft U，Krutmann J，von Berg A，Berdel D，etal.Eczema，respiratory allergies，and traffic-related air pollution in birthcohorts from small-town areas.J Dermatol.Sci.2009，56，99-105.

[5]Xu F，Yan S，Wu M，Li F，Xu X，Song W，et al.Ambient ozone as a riskfactor for skin disorders.Br.J.Dermatol.2011，165，224-225.

[6]Lu X，Zhang X，Li LY，Chen H.Assessment of metals pollution andhealth risk in dust from nursery schools in Xi’an，China.Environ.Res.2014，128，27-34.

[7]Jean Krutmann et al.Pollution and skin：From epidemiological andmechanistic studies to clinical implications.Journal of DermatologicalScience 2014，76，163-168.

[8]Sukenik S.，et al.，Treatment of psoriatic arthritis at the DeadSea.J.Rheumatol.1994，21，1305-1309.

[9]S.Halevy.，et al.Dead Sea bath salt for the treatment of psoriasisvulgaris：a double-blind controlled study.Jounal of the European Academy ofDermatology and Venereology，1997，9，237-242.

[10]Maor Z.and Yehuda S.Skin smoothing effects of Dead Sea minerals：comparative profilometric evaluation of skin surface.International Journal ofCosmetic Science，1997，19，105-110.

[11]Shimon W.Moses，Michael David，Ehud Goldhammer，Asher Tal and ShaulSukenik.The Dead Sea，A Unique Natural Health Resort.IMAJ，2006，8，483-488.

[12]US 4,638,059

[13]FR 2837097

[14]FR 2837388

[15]FR 2856925

[16]

and

http：//www.aston-chemicals.com/news/2015/10/18/pollustop/.

发明概述

如本申请将进一步公开的，包含来自死海的天然提取物和具有特定特性的至少一种多糖(例如，在商购可得的产品

和

中发现的)的组合已经显示出抵抗环境污染物的保护活性。

具体地，本公开内容的发明人令人惊讶地发现死海提取物和至少一种特定多糖的组合提供抵抗各种污染物的皮肤保护。特别地，本发明人发现，虽然单独的死海提取物的溶液和单独的特定多糖的溶液未提供抵抗由于皮肤组织暴露于臭氧而引起的污染的任何作用，但是具有所述死海提取物和所述特定多糖两者的组合物则显示出抵抗臭氧的显著有效保护。本发明人已经发现，由皮肤组织暴露于臭氧水平诱发的炎症效应当这些组织用根据本公开内容的死海提取物和特定多糖的组合治疗时已经被显著降低。

此外，本公开内容的发明人令人惊讶地发现，单独的死海提取物的溶液具有抵抗对重金属和大气颗粒物(因诱发皮肤污染应激而被知悉)的混合物的皮肤暴露的保护作用。类似地，如预期地，包含

的特定多糖的组合物在重建的表皮上显示了抵抗对重金属和大气颗粒物的混合物的暴露的保护作用。这种保护活性通过包含死海提取物和

的特定多糖的组合的组合物而被保留。

死海成分因其有益的治疗和美容用途而被知悉。本发明提供了具有死海提取物连同多糖的组合物，后者因其抵抗特定污染应激的保护特性而被知悉。本发明提供了组合物，所述组合物不仅保留死海提取物的愈合和美容特性，而且还提供了作为抵抗污染物质(polluting agents)，特别是臭氧的皮肤保护剂的独特的特征，臭氧可能是损伤皮肤健康的主要的效应物，并且甚至可对人体和皮肤是致命的。

应当注意的是，污染水平和污染物浓度可以在全天之间、根据季节、地理位置以及根据人类活动水平而变化。因此，本公开内容的组合物可以以不同浓度和以活性组分(即死海提取物和多糖)之间的不同比率(例如摩尔、重量)使用，并且因此可以提供抵抗特定污染物的选择性和/或受控的保护，其随着后者的量和/或分布的变化而变化。

因此，在本发明的方面的一个方面，本发明提供了一种组合物，所述组合物包含至少一种死海提取物和至少一种多糖，其中多糖的重复单元是由两个D-葡萄糖残基、一个L-岩藻糖残基和一个D-葡萄糖醛酸残基组成的四糖。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗污染(例如，大气污染、生活污染和UV相关的污染)的皮肤保护剂使用。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗污染的制剂(和/或包含该制剂的物品(article)，例如贴剂)的用途。

在本发明的方面的又另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗至少一种污染物(例如，大气污染物(atmospheric air pollutant)、生活污染物，任选地与因UV辐射形成的污染物的组合)的皮肤保护剂使用。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗至少一种污染物的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途。

在本发明的方面的又另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的皮肤保护剂使用：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体、臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体、臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的皮肤保护剂使用：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体及其任何组合。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体及其任何组合。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的皮肤保护剂使用：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃及其任何组合。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃及其任何组合。

在本发明的方面的又另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的皮肤保护剂使用：颗粒物和重金属。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途：颗粒物和重金属。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的皮肤保护剂使用：臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗选自由以下组成的组的至少一种污染物的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途：臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗臭氧的皮肤保护剂使用。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于保护皮肤抵抗臭氧的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途。

在本发明的方面的又另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于预防和/或治疗受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱，所述疾病或紊乱与污染(例如，一种或更多种污染物质)相关和/或由污染(例如，一种或更多种污染物质)诱发。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备用于预防和/或治疗受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱的制剂(和/或包含该制剂的物品，例如贴剂)的用途，所述疾病或紊乱与污染(例如，一种或更多种污染物质)相关和/或由污染(例如，一种或更多种污染物质)诱发。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了一种用于保护受试者的皮肤抵抗污染的方法，所述方法包括将根据本发明的组合物(或其任何制剂)局部应用到受试者的(至少一个区域的)皮肤上。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了一种用于保护受试者的皮肤抵抗至少一种污染物的方法，所述方法包括将根据本发明的组合物(或其任何制剂)局部应用到受试者的(至少一个区域的)皮肤上。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了一种用于选择性保护受试者的皮肤抵抗至少一种污染物(有时两种或更多种污染物)的方法，所述方法包括将根据本发明的组合物(或其任何制剂)局部应用到受试者的(至少一个区域的)皮肤上。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了一种用于治疗和/或预防受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱的方法，其中所述疾病或紊乱与污染(例如，一种或更多种污染物)相关和/或由污染(例如，一种或更多种污染物)诱发，所述方法包括将根据本发明的组合物(或其任何制剂)局部应用到受试者的(至少一个区域的)皮肤上。

在本发明的方面的又另一个方面，本发明提供了包含根据本发明的组合物的浆液、洗剂(lotion)、软膏(ointment)、凝胶、洗发剂(shampoo)、保湿剂、防晒剂、乳膏(cream)、棒状物(stick)、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝(mousse)、固体、半固体或液体化妆品、粉底(foundation)或化妆品。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了包含根据本发明的组合物的贴剂。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备组合物/制剂的用途，所述组合物/制剂选自化妆品组合物/制剂、皮肤护理组合物/制剂、皮肤病学组合物/制剂或药物组合物/制剂。

在本发明的方面的又另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备贴剂的用途。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了组合物，所述组合物用于如本文描述和例示的被使用。

本申请提供了以下内容：

1.一种组合物，所述组合物包含至少一种死海提取物和至少一种多糖，其中所述多糖的重复单元是由两个D-葡萄糖残基、一个L-岩藻糖残基和一个D-葡萄糖醛酸残基组成的四糖。

2.根据项目1所述的组合物，其中所述多糖是阴离子多糖。

3.根据项目1或2所述的组合物，其中所述多糖是支链多糖。

4.根据项目1至3中任一项所述的组合物，其中所述多糖的重复单元具有以下式(I)：

其中D-GlcpA表示D-葡萄糖醛酸残基，L-Fucp表示L-岩藻糖残基，以及D-Glcp表示D-葡萄糖残基。

5.根据项目1至4中任一项所述的组合物，其中所述重复单元在所述多糖中被重复约2500次至约3500次之间。

6.根据项目1至5中任一项所述的组合物，其中所述多糖是完全脱乙酰化的。

7.根据项目1至6中任一项所述的组合物，其中所述多糖由以编号NCIB 11870提交的革兰氏杆菌肠杆菌属(Enterobacter)分泌。

8.根据项目1至6中任一项所述的组合物，其中所述多糖是以编号NCIB 11870提交的革兰氏杆菌肠杆菌属的发酵产物。

9.根据项目1至6中任一项所述的组合物，其中所述多糖由以编号ATCC 12657和12658保藏的产气克雷伯氏菌(Klebsiella aerogenes)类型54菌株A3分泌。

10.根据项目1至6中任一项所述的组合物，其中所述多糖是以编号ATCC 12657和12658保藏的产气克雷伯氏菌类型54菌株A3的发酵产物。

11.根据项目1至10中任一项所述的组合物，其中所述多糖是生物可降解的。

12.根据项目1至11中任一项所述的组合物，其中所述多糖具有约2000kDa的分子量。

13.根据项目1至12中任一项所述的组合物，其中所述多糖是生物糖胶-4。

14.根据项目1至13中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含来自商购可得的产品

的多糖。

15.根据项目14所述的组合物，其中所述组合物还包含1,2-己二醇。

16.根据项目1至13中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含来自商购可得的产品

的多糖。

17.根据项目16所述的组合物，其中所述组合物还包含苯氧乙醇。

18.根据项目1至17中任一项所述的组合物，其中所述多糖以约0.5％(w/w)至约5％(w/w)之间的浓度存在于所述组合物中。

19.根据项目18所述的组合物，其中所述多糖以约5％(w/w)的浓度存在于所述组合物中。

20.根据项目1至19中任一项所述的组合物，其中所述死海提取物选自从死海的水体和/或死海周围的泥和/或死海的土壤床获得的呈单一材料或天然材料的混合物的形式的一种或更多种天然材料。

21.根据项目1至20中任一项所述的组合物，其中所述死海提取物是死海水。

22.根据项目1至21中任一项所述的组合物，其中所述死海提取物是商购可得的产品Maris Sal。

23.根据项目1至22中任一项所述的组合物，其中所述死海提取物以约0.1％至约2.5％(w/w)之间的浓度存在于所述组合物中。

24.根据项目1至23中任一项所述的组合物，其中所述多糖以约5％(w/w)的浓度存在于所述组合物中，并且其中所述死海提取物以组合物总重量的约0.25％至约0.8％(w/w)之间的浓度存在于所述组合物中。

25.根据项目1至24中任一项所述的组合物，其中所述组合物还包含至少一种醇。

26.根据项目1至25中任一项所述的组合物，其中所述组合物还包含甘油。

27.根据项目1至26中任一项所述的组合物，其中所述组合物还包含乙二醇。

28.根据项目1至27中任一项所述的组合物，所述组合物是局部用组合物。

29.根据项目1至28中任一项所述的组合物，所述组合物是留置型组合物。

30.根据项目1至28中任一项所述的组合物，所述组合物是冲洗型组合物。

31.根据项目1至30中任一项所述的组合物，所述组合物呈选自以下的形式：浆液、洗剂、软膏、凝胶、乳膏、油包水或水包油乳液、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底和化妆品。

32.根据项目31所述的组合物，其中所述组合物呈凝胶的形式。

33.根据项目1至31中任一项所述的组合物，其中所述组合物呈膜的形式。

34.根据项目1至33中任一项所述的组合物，所述组合物被配制为个人皮肤护理产品。

35.根据项目34所述的组合物，其中所述产品是面部皮肤护理产品。

36.根据项目35所述的组合物，其中所述产品是眼部皮肤护理产品。

37.根据项目34所述的组合物，其中所述产品是身体护理产品。

38.根据项目1至31中任一项所述的组合物，所述组合物被配制为皮肤病学制剂。

39.根据项目38所述的组合物，其中所述皮肤病学制剂是药物制剂或化妆品制剂。

40.根据项目38或39所述的组合物，其中所述制剂包含至少一种药物分子。

41.一种浆液、洗剂、软膏、凝胶、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底或化妆品，所述浆液、洗剂、软膏、凝胶、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底或化妆品包含根据项目1至40中任一项所述的组合物。

42.一种贴剂，所述贴剂包含根据项目1至40中任一项所述的组合物。

43.根据项目1至40中任一项所述的组合物用于制备组合物/制剂的用途，所述组合物/制剂选自化妆品组合物/制剂、皮肤护理组合物/制剂、皮肤病学组合物/制剂和药物组合物/制剂。

44.根据项目1至40中任一项所述的组合物用于制备贴剂的用途。

45.根据项目1至40中任一项所述的组合物，用于作为抵抗至少一种污染物的皮肤保护剂使用。

46.根据项目45所述的组合物，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体、臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

47.根据项目46所述的组合物，其中所述重金属选自由以下组成的组：As、Cd、Co、Cr、Ni、Pb、Sr、Sb及其任何组合。

48.根据项目46所述的组合物，其中所述气体选自由以下组成的组：CO₂、CO、SO₂、NO、NO₂、N₂O、N₂O₂、N₂O₃、N₂O₄、N₂O₅、轻分子量烃及其任何组合。

49.根据项目45至48中任一项所述的组合物，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体及其任何组合。

50.根据项目45至48中任一项所述的组合物，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃及其任何组合。

51.根据项目45至48中任一项所述的组合物，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物和重金属。

52.根据项目45或项目46所述的组合物，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

53.根据项目45或项目46所述的组合物，其中所述至少一种污染物是臭氧。

54.根据项目1至40中任一项所述的组合物，其中所述组合物用于预防和/或治疗受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱，所述疾病或紊乱与污染相关和/或由污染诱发。

55.根据项目54所述的组合物，其中所述皮肤疾病或紊乱与炎症相关。

56.根据项目54所述的组合物，其中所述皮肤疾病或紊乱与氧化相关。

57.根据项目54所述的组合物，其中所述皮肤疾病或紊乱选自由以下组成的组：干燥皮肤、敏感皮肤、受刺激的皮肤、糖尿病性皮肤、光损伤的皮肤、银屑病皮肤、特应性皮肤、接触性皮炎皮肤、过早老化的皮肤、加速皮肤老化、皮肤异常色素沉着、痤疮、癌症及其任何组合。

58.一种用于保护受试者的皮肤抵抗至少一种污染物的方法，所述方法包括向所述受试者的皮肤应用根据项目1至40中任一项所述的组合物。

59.根据项目58所述的方法，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体、臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

60.根据项目59所述的方法，其中所述重金属选自由以下组成的组：As、Cd、Co、Cr、Ni、Pb、Sr、Sb及其任何组合。

61.根据项目59所述的方法，其中所述气体选自由以下组成的组：CO₂、CO、SO₂、NO、NO₂、N₂O、N₂O₂、N₂O₃、N₂O₄、N₂O₅、轻分子量烃及其任何组合。

62.根据项目58至62中任一项所述的方法，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体及其任何组合。

63.根据项目58至62中任一项所述的方法，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃及其任何组合。

64.根据项目58至63中任一项所述的方法，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物和重金属。

65.根据项目58或项目59所述的方法，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

66.根据项目58或项目59所述的方法，其中所述至少一种污染物是臭氧。

67.根据项目1至40中任一项所述的组合物在制备用于治疗和/或预防受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱的制剂中的用途，其中所述疾病或紊乱与污染相关和/或由污染诱发。

68.根据项目67所述的用途，其中所述皮肤疾病或紊乱与炎症相关。

69.根据项目67所述的用途，其中所述皮肤疾病或紊乱与氧化相关。

70.根据项目67所述的用途，其中所述皮肤疾病或紊乱选自由以下组成的组：干燥皮肤、敏感皮肤、受刺激的皮肤、糖尿病性皮肤、光损伤的皮肤、银屑病皮肤、特应性皮肤、接触性皮炎皮肤、红斑痤疮皮肤、痤疮、过早老化的皮肤、加速皮肤老化、皮肤异常色素沉着、痤疮、癌症及其任何组合。

附图概述

为了理解本发明并且领会如何在实践中实施本发明，现在将参考附图仅通过非限制性实例的方式描述实施方案，在附图中：

图1示出了如通过根据本发明的一些实施方案用死海提取物组合物(以不同浓度)、

组合物，以及死海提取物和

组合的组合物处理的样品观察到的暴露于臭氧后的表皮存活力。

图2示出了如通过根据本发明的一些实施方案用死海提取物组合物(以不同浓度)、

组合物，以及死海提取物和

组合的组合物处理的样品观察到的暴露于臭氧后的细胞炎症介质IL-1α的水平。

图3示出了如通过根据本发明的一些实施方案用死海提取物组合物(以不同浓度)、

组合物，以及死海提取物和

组合的组合物处理的样品观察到的暴露于臭氧后的前列腺素PGE2水平。

图4示出了根据本发明的一些实施方案在表皮未暴露于空气污染物混合物的情况下或在表皮暴露于空气污染物混合物后用死海提取物组合物(以不同浓度)、

组合物，以及死海提取物和

组合的组合物处理的不同样品的表皮存活力。

图5示出了如针对根据本发明的一些实施方案在未暴露于空气污染物混合物的情况下或在暴露于空气污染物混合物后用死海提取物组合物(以不同浓度)、

组合物，以及死海提取物和

组合的组合物处理的样品观察到的细胞炎症介质IL-1α。

发明详述

在本发明的方面的一个方面，本发明提供了包含至少一种死海提取物和至少一种多糖的组合物，其中多糖的重复单元是由两个D-葡萄糖残基、一个L-岩藻糖残基和一个D-葡萄糖醛酸残基组成的四糖。

如本文使用的术语“死海提取物”是指从死海的水体、死海周围的泥和/或死海的土壤床获得的呈单一材料(例如无机的、有机的、盐等)或天然材料的混合物的形式的一种或更多种天然材料。

在一些实施方案中，死海提取物是死海水。如本文使用的术语“死海水”(本文缩写为DSW)是指从死海(以色列或约旦)地区获得的盐水或通过将死海矿物质溶解在水性介质中制备的水性溶液。该术语还包括模拟此类天然溶液的水性溶液，即具有与测量的天然DSW的参数基本相同的至少一个参数的水性溶液，所述参数是以下的至少一个：盐含量、盐浓度、特定阳离子或阴离子的浓度、二价阳离子与一价阳离子的比率、TDS(总溶解盐(TotalDissolved Salt)，w/v)、可溶性天然物质和已知定义或表征天然DSW的其他参数。

在一些实施方案中，死海水具有：

1.1.25-1.35g/ml的比密度，

2.pH＝4.6-5.6(在25℃)，和/或

3.少于100cfu/g的非病原性微生物。

在一些另外的实施方案中，DSW是澄清无色粘性液体(在25℃)。

具有以上物理特征的死海水是包含(除其他金属盐离子以外)Ca⁺²、Mg⁺²、Na⁺和K⁺以及高浓度的阴离子诸如Cl^-和Br^-的死海水的浓缩提取物。

在一些实施方案中，如通过以色列地质调查局(the Geological Survey ofIsrael)进行的水分析评价的，这些离子的浓度是：

钙(Ca⁺²)：35,000-40,000mg/L

氯(Cl^-)：320,000-370,000mg/L

镁(Mg⁺²)：92,000-95,000mg/L

钠(Na⁺)：1800-3200mg/L

钾(K⁺)：2,500mg/L，和

溴(Br^-)：10,000-12,000mg/L。

其他矿物质也可以存在于所述水中。

在一些实施方案中，死海水包含：

钙(Ca⁺²)：35,000-40,000mg/L

氯(Cl^-)：320,000-370,000mg/L

镁(Mg⁺²)：92,000-95,000mg/L

钠(Na⁺)：2400-3200mg/L

钾(K⁺)：2,500mg/L，和

溴(Br^-)：10,000-12,000mg/L。

其他矿物质也可以存在于所述水中。

在一些实施方案中，死海水包含：

钙(Ca⁺²)：5,000-10,000mg/L

氯(Cl^-)：315,000-360,000mg/L

镁(Mg⁺²)：100,000-150,000mg/L

钠(Na⁺)：1800-2200mg/L

钾(K⁺)：1,000-2,000mg/L，和

溴(Br^-)：5,000-10,000mg/L。

其他矿物质也可以存在于所述水中。

在一些另外的实施方案中，死海水包含：

其他矿物质也可以存在于所述水中。

在一些实施方案中，死海水包含：

钙(Ca⁺²)：38,000mg/L

氯(Cl^-)：345,000mg/L

镁(Mg⁺²)：92,500mg/L

钠(Na⁺)：2000mg/L

锶(Sr⁺²)：800mg/L

钾(K⁺)：1,400mg/L，和

溴(Br^-)：11,500mg/L。

其他矿物质也可以存在于所述水中。

在一些实施方案中，DSW是已经过预处理的天然DSW，例如通过允许水蒸发(例如通过阳光蒸发)来浓缩，其后进行重构以提供溶液。

在一些实施方案中，死海提取物选自从死海的水体和/或死海周围的泥和/或死海的土壤床获得的呈单一材料或天然材料的混合物的形式的一种或更多种天然材料。

在一些实施方案中，死海提取物是死海水。

在一些实施方案中，死海提取物是以“Maris Sal”或“Maris Aqua”(AHAVA，以色列)(在本文下文中也称为“Osmoter”)商购可得的死海水制品。

在一些实施方案中，多糖是阴离子多糖。

在一些实施方案中，多糖是支链多糖。

在一些实施方案中，多糖的重复单元具有以下式(I)：

其中D-GlcpA表示D-葡萄糖醛酸残基，L-Fucp表示L-岩藻糖残基，以及D-Glcp表示D-葡萄糖残基。

在一些实施方案中，多糖的重复单元在所述多糖中被重复约2500次至约3500次之间。

在一些实施方案中，多糖是完全脱乙酰化的(包括重复单元)。

在一些实施方案中，多糖可以由以编号NCIB 11870保藏在苏格兰亚伯丁国立工业细菌收藏所(the National Collection of Industria Bacteria(Aberdeen,Scotland))的革兰氏杆菌(gram bacillus)肠杆菌属(Enterobacter)分泌。

在一些实施方案中，多糖是以编号NCIB 11870提交的革兰氏杆菌肠杆菌属的发酵产物。

在一些实施方案中，多糖的D-葡萄糖、L-岩藻糖和D-葡萄糖醛酸的摩尔比为约3:1:1。

在一些实施方案中，多糖可以由以编号ATCC 12657和12658保藏的产气克雷伯氏菌(Klebsiella aerogenes)类型54菌株A3分泌。

在一些实施方案中，D-葡萄糖、L-岩藻糖和D-葡萄糖醛酸的摩尔比为约2:1:1。

在一些实施方案中，多糖是以编号ATCC 12657和12658保藏的产气克雷伯氏菌类型54菌株A3的发酵产物。

在一些实施方案中，多糖是生物可降解的。

在一些实施方案中，多糖具有约2000kDa的分子量。

在一些实施方案中，多糖是生物糖胶-4(Biosaccharide gum-4)。

在一些实施方案中，组合物包含来自商购可得的产品

的多糖(

的多糖及其制剂是根据在出版物[12]至[15]中公开的已知程序获得的，这些出版物和在其中公开的出版物的内容通过引用并入本文)。

在一些实施方案中，例如，在

的情况下，组合物还可以包含1,2-己二醇。在一些实施方案中，组合物不含防腐剂。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物包含来自商购可得的产品Glycofilm的多糖。为此目的，组合物还可以包含苯氧乙醇。

在一些实施方案中，多糖是阴离子支链多糖，具有以下式(I)的重复单元：

其中D-GlcpA表示D-葡萄糖醛酸残基，L-Fucp表示L-岩藻糖残基，以及D-Glcp表示D-葡萄糖残基，并且所述多糖具有约2000kDa的分子量。

在一些实施方案中，多糖可以以约0.5％(w/w)至约5％(w/w)之间的浓度存在于组合物中，有时以约1％(w/w)至约5％(w/w)之间的浓度存在于组合物中。应当注意的是，w/w％应当被理解为多糖占组合物总重量的重量％。当提及根据本发明的制剂时也是如此。

在一些实施方案中，多糖可以以约0.5％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约1％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约2％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约3％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约4％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约5％(w/w)的浓度存在于组合物中。

以上重量百分比的中间值，例如1.5％(w/w)、2.5％(w/w)、3.5％(w/w)、4.5％(w/w)等也在本公开内容的范围内。

在一些实施方案中，死海提取物(例如Maris Sal)以约0.1％至约2.5％(w/w)之间的浓度存在于所述组合物中，有时以约0.25％至约2.5％(w/w)之间的浓度存在于所述组合物中。应当注意的是w/w％应当被理解为死海提取物占组合物总重量的重量％。当提及根据本发明的制剂时也是如此。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约0.1％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约0.25％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约0.5％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约0.8％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约1％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约1.5％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约2％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约2.4％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，死海提取物可以以约2.5％(w/w)的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约5％(w/w)的浓度存在于组合物中，并且死海提取物可以以组合物总重量的约0.25％至约0.8％(w/w)之间的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约5％(w/w)的浓度存在于组合物中，并且死海提取物可以以组合物总重量的约0.25％的浓度存在于组合物中。

在一些实施方案中，多糖可以以约5％(w/w)的浓度存在于组合物中，并且死海提取物可以以组合物总重量的约0.8％的浓度存在于组合物中。

如本文上文及下文使用的术语“约”是指指示的值的±10％。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物还可以包含至少一种醇(例如乙醇、2-丙醇、1-丙醇、甲醇)。为此目的，醇可以被用于将组合物配制为凝胶，如[12]-[14]中所公开的，其在这方面的内容通过引用完全并入本文。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物还可以包含至少一种胶凝剂，例如乙二醇。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物还可以包含甘油。

在一些实施方案中，本发明的组合物是局部用组合物。

在一些实施方案中，本发明的组合物是化妆品组合物。

在一些实施方案中，本发明的组合物是药物组合物。在另外的实施方案中，药物组合物用于局部应用(即局部用组合物)。

本发明的组合物可以被制成多种产品形式(例如制剂)，所述产品形式适于例如局部施用/应用到受试者的皮肤上。非限制性实例是浆液、洗剂、软膏、凝胶、乳膏、油包水或水包油乳液、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底和化妆品。多种化妆品或皮肤护理制剂包括固体、半固体或液体化妆品，诸如粉底、眼部化妆品等，也被包括在本公开内容中。

因此，在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了包含根据本发明的组合物的浆液、洗剂、软膏、凝胶、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底或化妆品。

在一些实施方案中，本发明的组合物被配制为洗剂。

在一些实施方案中，本发明的组合物被配制为浆液。

在一些实施方案中，本发明的组合物被配制为凝胶。

在一些实施方案中，本发明的组合物被配制为膜。

在一些实施方案中，本发明的组合物是膜形成制剂。

在一些实施方案中，组合物可以被配制为个人皮肤护理产品。在一些实施方案中，个人皮肤护理产品可以选自清洁产品或保湿产品。在一些实施方案中，清洁产品可以选自液体肥皂、沐浴凝胶(bath gel)或淋浴凝胶(shower gel)。在一些实施方案中，保湿产品可以选自乳膏、洗剂、凝胶-乳膏、浆液、面膜(facial mask)、调理剂(conditioner)或面膜(mask)。

在一些实施方案中，个人皮肤护理产品是面部皮肤产品，例如乳膏、凝胶、面膜(mask)、浆液、洗剂、化妆品等。

在一些实施方案中，个人皮肤护理产品是眼部皮肤护理产品。

在一些实施方案中，个人皮肤护理产品是身体护理产品。

本发明的组合物或其任何制剂的粘度可以根据形式(即洗剂、浆液、乳膏、凝胶、膜等)、活性组合(即死海提取物和多糖)的浓度、载体、目的(即化妆品或治疗剂)、最终使用者和其他参数而变化。

在一些实施方案中，组合物被配制于油包水(W/O)乳液中。

在一些实施方案中，本发明的组合物可以被配制为皮肤病学制剂。在一些实施方案中，皮肤病学制剂可以是药物制剂或化妆品制剂。在一些实施方案中，制剂可以包含至少一种药物分子。

根据本发明的组合物(化妆品或治疗剂)可以包含至少一种皮肤病学、化妆品上或药物学上可接受的添加剂，所述添加剂在惰性添加剂和效果诱导添加剂(effect-inducingadditive)中选择。在一些实施方案中，惰性添加剂选自：稀释剂、防腐剂、磨料、防结块剂、抗静电剂、粘合剂、缓冲剂、分散剂、润肤剂(emollient)、乳化剂、助乳化剂、纤维材料、膜形成剂、固定剂、发泡剂、泡沫稳定剂、泡沫促进剂(foam booster)、胶凝剂、润滑剂、防潮剂、遮光剂、塑化剂、防腐剂、喷射剂(propellant)、稳定剂、表面活性剂、悬浮剂、增稠剂、湿润剂、成膜剂、液化剂或其任何组合。

在仍一些实施方案中，惰性添加剂可以是润肤剂，所述润肤剂选自以下的一种或更多种：植物和动物脂肪、硅氧烷(silicone)和油，诸如蓖麻油、氢化蓖麻油、可可脂、红花油、棉籽油、玉米油、橄榄油、鱼肝油、杏仁油、鳄梨油、棕榈油、芝麻油、角鲨烯、植物角鲨烯、石栗油、母菊(chamomilla recutita)(母菊属(matricaria))花油、贯叶连翘(hypericumperforatum)油、大豆油和葡萄(vitis vinifera)(葡萄(grape))籽油；乙酸甘油酯类(acetoglyceride esters)，诸如乙酰化单甘油酯；具有10至24个碳原子的脂肪酸的烷基酯，其包括但不限于脂肪酸的甲基、异丙基和丁基酯，诸如月桂酸己酯、月桂酸异己酯、棕榈酸乙基己酯、棕榈酸异己酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸辛酯、油酸癸酯、油酸异癸酯、硬脂酸十六烷基酯、硬脂酸癸酯、异硬脂酸异丙酯、己二酸二异丙酯、己二酸二异己酯、己二酸二己基癸酯、癸二酸二异丙酯、乳酸月桂酯、乳酸肉豆蔻酯和乳酸鲸蜡酯(cetyl lactate)；具有10至20个碳原子的脂肪酸的烯基酯，诸如油醇肉豆蔻酸酯(oleyl myristate)、油醇硬脂酸酯(oleyl stearate)和油醇油酸酯；具有10至20个碳原子的脂肪酸，诸如壬酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸、羟基硬脂酸、油酸、亚油酸、蓖麻油酸、花生酸、山嵛酸和芥酸；具有10至20个碳原子的脂肪醇，诸如月桂醇、肉豆蔻醇、鲸蜡醇(cetyl alcohol)、十六烷基醇(hexadecyl alcohol)、硬脂醇、异硬脂醇、羟基硬脂醇、油醇、蓖麻油醇(ricinoleylalcohol)、山嵛醇、瓢儿菜醇(erucyl alcohol)和2-辛基十二烷基醇(2-octyl dodecanylalcohol)；脂肪醇醚，诸如具有10至20个碳原子的丙氧基化脂肪醇，其包括但不限于，具有附接至其的1至50个氧化丙烯基团的月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇、异硬脂醇、油醇和胆甾醇；羊毛脂和羊毛脂衍生物，诸如羊毛脂、羊毛脂油、羊毛脂蜡、羊毛脂醇、羊毛脂脂肪酸、羊毛脂酸异丙酯、乙氧基化羊毛脂、乙氧基化羊毛脂醇、乙氧基化胆甾醇、丙氧基化羊毛脂醇、乙酰化羊毛脂醇、羊毛脂醇亚油酸酯(lanolin alcohols linoleate)、羊毛脂醇蓖麻油酸酯(lanolin alcohols ricinoleate)、羊毛脂醇蓖麻油酸酯的乙酸盐/酯(acetate oflanolin alcohols ricinoleate)、乙氧基化醇酯的乙酸盐/酯、氢解羊毛脂(hydrogenolysis of lanolin)、乙氧基化山梨糖醇羊毛脂(ethoxylated sorbitollanolin)以及液态和半固态羊毛脂吸收基质；多元醇酯类，诸如乙二醇单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、二乙二醇单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、聚乙二醇(200-6000)单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、丙二醇单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、聚丙二醇2000单油酸酯、聚丙二醇2000单硬脂酸酯、甘油单脂肪酸酯和二脂肪酸酯、聚甘油聚脂肪酸酯(polyglycerol polyfatty esters)、乙氧基化甘油单硬脂酸酯、1,2-丁二醇单硬脂酸酯、1,2-丁二醇二硬脂酸酯、聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯(sorbitan fatty acid esters)和聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯；蜡酯类，诸如蜂蜡、鲸蜡、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、硬脂酰硬脂酸酯；形成醚酯的混合物；植物蜡，包括但不限于巴西棕榈蜡和小烛树蜡；表面活性硅氧烷衍生物，诸如环戊硅氧烷PEG/PPG-18/18二甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷、二甲聚硅氧烷交联聚合物、环聚二甲基硅氧烷(cyclomethicone)、环聚二甲基硅氧烷&聚二甲基硅氧烷醇；辛酸/癸酸甘油三酯；胆甾醇脂肪酸酯；或其任何混合物。

在一些实施方案中，效果诱导添加剂可以选自以下的一种或更多种：抗痤疮剂、抗老化剂、抗细菌剂、消脂剂(anti-cellulites agent)、去屑剂、抗真菌剂、抗炎剂、抗刺激剂、抗微生物剂、抗氧化剂、止汗剂、抗菌剂(antiseptic agent)、细胞刺激剂(cellstimulant)、清洁剂、调理剂、除臭剂、香味成分(fragrance ingredient)、脱毛剂、去垢剂、酶、精油、去角质剂、杀真菌剂、光泽剂(glosser)，头发调理剂(hair conditioner)(头发调理物质(hair conditioner agent))、头发定型树脂(hair set resin)、头发光泽剂(hairsheen agent)、卷发剂(hair waving agent)、湿润剂、保湿剂、软膏基质、香料、蛋白、皮肤镇定剂、皮肤清洁剂、皮肤调理剂(皮肤调理物质)、皮肤愈合剂、皮肤增亮剂、皮肤保护剂、皮肤平滑剂、皮肤柔软剂、皮肤舒缓剂、防晒剂、美黑促进剂(tanning accelerator)、维生素、着色剂、调味剂或其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种添加剂是防晒剂。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了包含根据本发明的组合物的贴剂(例如化妆品贴剂或药物贴剂，特别是皮肤病学的贴剂)。

在本发明的方面的又另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物用于制备贴剂的用途。

本发明的化妆品组合物/制剂或药物组合物/制剂还可以包含呈化学物质、材料或化合物形式的有用的药物活性物质，例如适于局部施用以诱导期望的局部或全身作用的药物活性物质。此类活性物质的非限制性实例是抗生素、抗病毒剂、止痛剂(例如布洛芬、乙酰水杨酸、萘普生等)、抗组胺剂、抗炎剂、止痒剂、退热剂、麻醉剂、诊断剂、激素、抗真菌剂、抗微生物剂、皮肤生长促进剂(cutaneous growth enhancer)、色素调节剂(pigmentmodulator)、抗增殖剂、抗银屑病剂、类视黄醇、抗痤疮药物(例如过氧化苯甲酰、硫磺(sulfur)等)、抗肿瘤剂、光疗剂、角质层分离剂(keratolys)(例如间苯二酚、水杨酸等)及其混合物。

用于美容/皮肤护理或治疗目的的本发明的组合物至受试者皮肤的施用可以取决于例如受试者的生理状况、施用的目的是美容还是治疗/预防以及医学从业者已知的其他因素以单剂量、以多剂量、以连续或间歇的方式进行。本发明的组合物的应用可以在预先选择的时间段内基本上是连续的，或者可以是一系列间隔的剂量。

此外，由于污染水平和污染物浓度可以在全天时间内变化，本发明的组合物/制剂可以用于过夜和/或日间使用。应用的量和频率可以取决于日间/夜晚期间污染的严重程度/量以及受试者的地理位置。

本发明的组合物通常通过将死海提取物和多糖以适当的浓度组合来制备。由本领域技术人员选择的其他活性或惰性添加剂可以被任选地添加。

在一些实施方案中，为了实现针对一种或更多种、两种或更多种、三种或更多种污染物等的选择性保护，根据本发明的组合物中的死海提取物和多糖的浓度可以被调整/优化(例如，以达到其有效量)以实现所需的保护。局部施用途径和频率也可以被调整，以用于控制抵抗各种类型污染物的保护。

基本上用于局部使用的本发明的组合物可以是皮肤护理制剂或治疗性制剂。

在一些实施方案中，本发明的组合物是用于化妆品和个人皮肤护理应用的皮肤护理或皮肤药物组合物(dermo-pharmaceutical compositions)(包括，例如，化妆用品(toiletries)、健康和美丽的辅助剂和药妆品(cosmeceuticals)。术语“化妆品组合物”或“皮肤护理组合物”涉及可以被用于美容目的、卫生或皮肤护理目的、或作为用于递送一种或更多种药物成分的基础的本发明的组合物。还可能的是，这些组合物在同一时间被用于这些相同目的中的两个或更多个。例如，含药的去屑洗发剂可以被用作个人护理产品，即以提供清洁的头发(例如，以去除头发中的污染物)，并同时具有药理学特性。

在一些实施方案中，化妆品组合物用于提高身体魅力，遮盖或掩饰紊乱或疾病的物理表现，调节或减轻哺乳动物的皮肤中的皱纹、光损伤、不均匀和干燥。组合物另外通过调节皮肤纹理中的可见和/或触觉不连续性(包括细纹、皱纹、毛孔粗大(enlarged pores)、粗糙和与老化的皮肤相关的其他皮肤纹理不连续性)来调节皮肤状况和皮肤老化迹象(所有可察觉的表现以及任何其他宏观或微观效果)，具有降低的刺激和干燥。

因此，本发明还提供了根据本发明的组合物用于制备组合物/制剂的用途，所述组合物/制剂选自化妆品组合物/制剂、皮肤护理组合物/制剂、皮肤病学组合物/制剂和药物组合物/制剂。

在一些实施方案中，除了皮肤护理和/或皮肤药物目的以外，根据本发明的组合物还提供抵抗污染的保护，例如皮肤保护。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗污染的皮肤保护剂使用。

在一些实施方案中，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗至少一种污染物的皮肤保护剂使用。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物的皮肤保护剂作用可以为选择性抵抗特定污染物或抵抗一种或更多种污染物的组合，有时抵抗两种或更多种污染物的组合。

在一些实施方案中，抵抗污染的皮肤保护可以被设想为例如通过物理防护皮肤改善皮肤屏障功能。

在一些实施方案中，抵抗污染的皮肤保护可以被设想为清除氧化污染物(例如，使氧化污染物失活)。

在一些实施方案中，抵抗污染的皮肤保护可以是生物和物理防御中的一种或两种。

在一些实施方案中，抵抗污染的皮肤保护可以是短期保护(例如，通过局部应用，提供抵抗对污染物的暴露的物理防护)和/或抵抗长期暴露于污染的皮肤保护(例如，通过连续局部应用，消除对皮肤的有害累积损伤的污染，该污染可导致一种或更多种皮肤疾病、紊乱和/或皮肤缺陷)。

如本文使用的，术语“污染”或其任何语言变化形式被设想为室内环境或室外环境被改变大气的天然特征的任何化学剂、物理剂或生物剂的污染。污染的非限制性实例是由工业、车辆尾气、香烟烟气和其他来源造成的空气污染，任选地与太阳辐射组合。灰尘(例如沙漠灰尘)以及由工业污水、农业生物杀伤剂(agricultural biocides)和洪水造成的水污染是污染的另外的非限制性实例。污染可以是大气污染、生活污染和UV污染(例如，由UV太阳辐射诱发的污染)中的一种或更多种。

本文以下提供污染物的非限制性实例：颗粒物[例如细颗粒(fine particles)(PM2.5)和粗颗粒(PM 10)]；气体，诸如CO₂、CO、SO₂、NO、NO₂和其他NOx(氮氧化物，诸如N₂O、N₂O₂、N₂O₃、N₂O₄和N₂O₅)，包括轻分子量烃，例如挥发性有机化合物(VOC)；由污染物颗粒携带的多环芳烃(PAH)；有机化合物；重金属；行驶中汽车的烟气；(例如来自工厂、农事(farming)和道路的)燃烧的植物；烟气；污物和灰尘；沙漠灰尘；城市灰尘；臭氧；过氧乙酰硝酸酯(PAN)；和烟雾。本领域已知的其他污染物例如多氯联苯(PCB)也在本公开内容的范围内。

如下文所阐述的，已经证明了单独的死海提取物和单独的多糖抵抗含有重金属和大气PM的污染物混合物的皮肤保护。个体组分(即死海提取物和多糖)抵抗暴露于臭氧的保护尚未被证明。仅它们的组合有效抵抗对臭氧的暴露。

因此，在一些实施方案中，包含死海提取物和多糖两者的本发明的组合物可以提供抵抗不同类型的污染物的广泛保护(例如，抵抗多于一种污染物、有时多于两种污染物、有时多于三种污染物等的保护)。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物可以提供抵抗至少一种原生污染物的保护。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物可以提供抵抗至少一种二次污染物的保护。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物可以提供抵抗至少一种原生污染物和至少一种二次污染物的保护。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物提供抵抗含有重金属和大气PM的污染物混合物的保护。

在一些实施方案中，根据本发明的组合物提供抵抗臭氧以及含有重金属和大气PM的污染物混合物的保护。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于作为抵抗至少一种污染物的皮肤保护剂使用，其中所述至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃(例如由颗粒物携带)、气体、臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在一些实施方案中，重金属选自由以下组成的组：As、Cd、Co、Cr、Ni、Pb、Sr、Sb及其任何组合(任选地以合金的形式)。

在一些实施方案中，气体选自由以下组成的组：CO₂、CO、SO₂、NO、NO₂、N₂O、N₂O₂、N₂O₃、N₂O₄、N₂O₅、轻分子量烃(例如挥发性有机化合物)及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物和重金属。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物是臭氧。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：至少一种颗粒物、至少一种重金属和臭氧。

根据本发明的组合物/制剂抵抗污染的保护作用提供了它们保护受试者的皮肤免受与污染相关的皮肤疾病或紊乱的益处。

因此，在本发明的方面的另一方面，本发明提供根据了根据本发明的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱，该疾病或紊乱与污染相关和/或由污染诱发。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱，该疾病或紊乱与任选地与暴露于太阳和/或UV辐射组合的污染相关和/或由任选地与暴露于太阳和/或UV辐射组合的污染诱发。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了根据本发明的组合物，所述组合物用于预防和/或治疗受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱，该疾病或紊乱与任选地与暴露于红外(IR)或其他电磁辐射组合的污染相关和/或由任选地与暴露于红外(IR)或其他电磁辐射组合的污染诱发。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与炎症相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与氧化相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与低氧和缺氧中的一种或两种相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与基因转录和翻译中的一种或两种的功能障碍(malfunctioning)相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与异常的蛋白和酶促折叠和/或功能中的一种或两种相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱(例如病理学)选自由以下组成的组：干燥皮肤、敏感皮肤、受刺激的皮肤、糖尿病性皮肤、光损伤的皮肤、银屑病皮肤、特应性皮肤、接触性皮炎皮肤、红斑痤疮皮肤、过早老化的皮肤、加速皮肤老化(例如皱纹形成)、皮肤异常色素沉着、痤疮、癌症及其任何组合。

在本发明的方面的另一个方面，本发明提供了一种用于保护受试者的皮肤抵抗至少一种污染物的方法，所述方法包括向受试者的皮肤应用根据本发明的组合物(或其任何制剂)。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体、臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在一些实施方案中，重金属选自由以下组成的组：As、Cd、Co、Cr、Ni、Pb、Sr、Sb及其任何组合。

在一些实施方案中，气体选自由以下组成的组：CO₂、CO、SO₂、NO、NO₂、N₂O、N₂O₂、N₂O₃、N₂O₄、N₂O₅、轻分子量烃(例如挥发性有机化合物)及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：颗粒物和重金属。

在一些实施方案中，至少一种污染物选自由以下组成的组：臭氧、过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其任何组合。

在一些实施方案中，至少一种污染物是臭氧。

在一些实施方案中，用于保护受试者的皮肤抵抗至少一种污染物的方法可以是选择性抵抗特定污染物或抵抗一种或更多种污染物的组合，或者有时甚至可以选择性抵抗两种或更多种污染物的组合。为此目的，根据本发明的组合物的剂量(例如，组合物中活性成分的浓度和比率)以及组合物的局部应用(例如，应用的持续时间和/或频率)可以被相应地调整。

在本发明的方面的又另外的方面，本发明提供了一种用于治疗和/或预防受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱的方法，其中疾病或紊乱与污染(例如，本文描述的至少一种污染剂)(任选地与暴露于太阳和/或UV辐射组合)相关和/或由污染(例如，本文描述的至少一种污染剂)(任选地与暴露于太阳和/或UV辐射组合)诱发，所述方法包括向受试者的皮肤应用根据本发明的组合物(或其任何制剂)。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱与炎症相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱与氧化相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与低氧和缺氧中的一种或两种相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与基因转录和翻译中的一种或两种的功能障碍相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与异常的蛋白和酶促折叠和/或功能中的一种或两种相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱选自由以下组成的组：干燥皮肤、敏感皮肤、受刺激的皮肤、糖尿病性皮肤、光损伤的皮肤、银屑病皮肤、特应性皮肤、接触性皮炎皮肤、红斑痤疮皮肤、痤疮、过早老化的皮肤、加速皮肤老化(例如皱纹形成)、皮肤异常色素沉着、痤疮、癌症及其任何组合。

在本发明的方面的另外的方面，本发明提供了根据本发明的组合物在制备用于治疗和/或预防受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱的制剂中的用途，其中所述疾病或紊乱与污染相关和/或由污染诱发。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱与炎症相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱与氧化相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与低氧和缺氧中的一种或两种相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与基因转录和翻译中的一种或两种的功能障碍相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱可以与异常的蛋白和酶促折叠和/或功能中的一种或两种相关。

在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱选自由以下组成的组：干燥皮肤、敏感皮肤、受刺激的皮肤、糖尿病性皮肤、光损伤的皮肤、银屑病皮肤、特应性皮肤、接触性皮炎皮肤、红斑痤疮皮肤、痤疮、过早老化的皮肤、加速皮肤老化(例如皱纹形成)、皮肤异常色素沉着、痤疮、癌症及其任何组合。

不希望受到理论的束缚，本发明的组合物/制剂的保护特性可以通过在皮肤表面上形成防护物来为皮肤提供物理保护，并且因此有助于降低皮肤上的污染物负荷，例如提供抵抗污染物向皮肤的渗透的屏蔽物。本发明的组合物还可以对有缺陷的皮肤具有治疗作用(例如，改善皮肤状态，预防和/或治疗皮肤缺陷，诸如干燥或暗沉的皮肤，以及死海盐和矿物质的其他已知的治疗特性)，并且因此提供皮肤抵抗污染物的增强的生物和/或物理保护。

因此，在一些实施方案中，根据本发明的组合物还可以用于治疗或预防受试者的皮肤疾病或紊乱，所述疾病或紊乱可以任选地与年龄、性别、肤色、皮肤伤口、痤疮、暴露于太阳、UV辐射、炎症、糖尿病性皮肤和与皮肤不相关的疾病的预先存在中的一种或更多种相关。在一些实施方案中，皮肤疾病或紊乱与太阳暴露相关，或者是与现存状况或炎症相关的继发性状况。在一些另外的实施方案中，皮肤疾病或紊乱是年龄相关的。在又另外的实施方案中，皮肤疾病或紊乱选自伤口、痤疮、银屑病、特应性皮肤、糖尿病性皮肤、皮炎、湿疹、干燥症、干燥皮肤和擦损皮肤(chafed skin)。应当注意的是，本发明的组合物的治疗和/或预防作用可以提供抵抗污染的增强的保护。

皮肤疾病或紊乱的非限制性实例是伤口、痤疮、银屑病、特应性皮肤、糖尿病性皮肤、皮炎、湿疹、干燥性的(xerotic)、干燥症(xerosis)、干燥皮肤、癌症和擦损皮肤。

在一些实施方案中，受试者正罹患皮肤疾病或紊乱，或具有罹患皮肤疾病或紊乱的倾向，或者是可能被暴露于增加罹患皮肤疾病或紊乱的机会的条件的受试者，所述疾病或紊乱任选地(可以或可以不)与年龄、性别、肤色、皮肤伤口、暴露于太阳、UV辐射、炎症、与皮肤不相关的疾病的预先存在等中的一种或更多种相关。

在根据本发明的一些实施方案中，疾病或紊乱可以是干燥性皮肤、敏感皮肤、过早皮肤老化和加速老化症状(例如皱纹形成、异常色素沉着和皮肤干燥)中的一种或更多种。

在根据本发明的一些实施方案中，疾病或紊乱可以是痤疮、湿疹、皮疹和皮肤癌中的一种或更多种。

在根据本发明的一些实施方案中，疾病或紊乱还可涉及对皮肤以外的其他器官的内在损伤(intrinsic damage)。

本发明的组合物或制剂可以通过任何一种已知的用于应用标准皮肤制品(例如乳膏、凝胶等)的方法被应用到皮肤上。应用可以持续短时间段，即呈合适形式的组合物(如本文所公开的)被局部应用，并且然后例如在几分钟内去除。可选地，组合物可以被应用到皮肤上，并且允许在较长时间段内与皮肤保持接触。在一些实施方案中，组合物可以被允许保持在皮肤上过夜。为了实现与皮肤的长期有效接触，本发明的组合物可以被吸收或装载到保持其形式的载体上；此类载体可以是呈提供与皮肤充分接触的形式的贴片、敷料或绷带。

因此，在本发明的一些实施方案中，组合物可以被配制为留置型(leave on)组合物，例如留置型乳膏、留置型浆液。在本发明的一些另外的实施方案中，组合物可以被配制为冲洗型(rinse-off)组合物。

如本文使用的，“留置型”(与“冲洗型”相对)组合物/制剂是指可以与皮肤长时间接触并且可以被应用至皮肤区域而无需以任何方式将其从皮肤上去除(例如，通过擦拭或将其冲洗掉)的组合物/制剂。

在一些实施方案中，留置型组合物/制剂可以被修改以适合于被应用至皮肤区域，并且留在皮肤上持续足以获得最终结果的时间。

为了易于使用，本发明的组合物/制剂可以被制成为试剂盒或商业包装，并且与使用说明一起提供。试剂盒或商业包装中包含的组合物/制剂可以呈适于短期或长期应用的量和组成，以用于一般或特定目的。

如本文使用的术语“局部”是指将根据本发明的组合物直接应用到受试者的皮肤(人类或非人类的皮肤)的至少一部分上，以便在应用部位例如皮肤的至少一个区域(例如面部皮肤)实现期望效果，例如美容效果或治疗效果。在一些实施方案中，在应用部位实现期望效果，而不诱发一种或更多种全身作用。在一些实施方案中，本发明的制剂诱发至少部分全身作用，所述至少部分全身作用有助于诱发至少一种期望效果。

如本文使用的术语“皮肤”是指人类或动物皮肤的任何部分，包括其整个表面、睫毛、眉毛、头发和指甲。在本公开内容的内容中，当组合物被局部应用到受试者的皮肤上时，应当理解应用是应用到皮肤的至少一部分/区域上。在一些实施方案中，皮肤是面部皮肤的至少一个区域。在一些另外的实施方案中，面部皮肤是眼周围的皮肤区域。

如本文使用的，术语“治疗”是指局部施用有效量的本发明的组合物，从而有效改善与皮肤疾病相关的不期望的症状、在此类症状发生之前预防它们的显现、减缓疾病的进展、减缓症状的恶化、增强缓解期的起始、减缓在疾病的进展性慢性阶段引起的不可逆的损伤、延迟所述进展性阶段的起始、减轻严重程度或治愈疾病、提高存活率或更快速恢复、或预防疾病发作或以上两种或更多种的组合。

“有效量”，无论是用于本文所描述目的的治疗有效量还是化妆品有效量，都是根据诸如可以被本领域已知的考虑因素确定的。量必须有效实现一种或更多种以上期望的治疗或美容效果，尤其取决于待治疗的疾病的类型和严重程度以及治疗方案。有效量通常在合适地设计的临床试验(剂量范围研究)中被确定并且本领域技术人员将知晓如何适当地进行此类试验以确定有效量。如通常知晓的，有效量取决于多种因素，包括配体对受体的亲和力、其分布谱、多种药理学参数诸如在皮肤上的半衰期，取决于不期望的副作用(如果有的话)，取决于诸如年龄和性别的因素等等。

应当理解的是，为了清楚起见被描述于单独的实施方案的上下文中的本发明的某些特征，还可以在单个实施方案中以组合方式来提供。相反，为了简洁起见被描述于单个实施方案的上下文中的本发明的多个特征，还可以单独提供，或以任何合适的子组合提供，或合适时在本发明的任何其他描述的实施方案中提供。在多种实施方案的上下文中描述的某些特征并不被认为是那些实施方案的必需特征，除非没有那些要素，实施方案无法实施。

如本文使用的，除非上下文另外清楚指明，否则单数形式“一(a)”、“一(an)”和“该(the)”包括复数指代物。例如，术语“一种提取物(an extract)”或“至少一种提取物”可以独立地包括多于一种(a plurality of)提取物，包括多种提取物。

如上文描述的以及如在下文权利要求部分中要求的本发明的各种实施方案和方面在以下实施例中找到实验支持。

具体实施方案

以下实施例不以任何方式意图限制如要求保护的本发明的范围。

实施例1-本公开内容的组合物的制备。

死海提取物：

在本公开内容中，使用了死海矿物质(DSM)的商业制品，在本文中称为“Osmoter”。该制品也被称为“Maris Sal”或“Maris Aqua”(死海水，DSW)(来源：地质调查局(Geological Survey)-以色列国国家基础设施部(Ministry of NationalInfrastructures,State of Israel)，特别地阿哈瓦死海实验室(Ahava-Dead SeaLaboratories)，CAS#INCI Monograph ID:11089)。

“Osmoter”溶液具有以下成分：

包含死海矿物质/死海水的溶液通过“Osmoter”制品的稀释来制备。使用不同浓度，即0.25％、0.5％和0.8％(w/w)的“Osmoter”制品。

多糖：

所使用的多糖制剂是

购自Solabia Group,Pantin Cedex,France(INCI名称：生物糖胶-4(和)1,2-己二醇；产品编码AC145，无防腐剂)。应当注意的是，在制剂中，多糖以凝胶形式提供，其中多糖的浓度为96.5％(w/w)，并且1,2-己二醇的浓度为3.5％(w/w)。

多糖、多糖制品和包含多糖的制剂在US 4,638,059、FR 2837097、FR2837388、FR2856925[12]-[15]和

和

[16]中公开，这些文献的每一个均通过引用并入本文。

测试样品的制备：

将Osmoter和

以不同浓度单独地或组合地与去离子的或反渗透纯化水混合，详见以下表1。

应当注意的是，本公开内容的组合物的各种成分的百分比在本文中以重量/重量比率(w/w)，即每100克组合物总重量的特定成分(例如Osmoter和

的多糖)的以克计的重量来提供。

表1：研究的组合物

样品编号	样品名称	溶剂
			1	Pollustop 5％	水
2	Osmoter 0.25％	水
			3	Osmoter 0.5％	水
4	Osmoter 0.8％	水
			5	Osmoter 0.25％+Pollustop 5％	水
6	Osmoter 0.5％+Pollustop 5％	水
			7	Osmoter 0.8％+Pollustop 5％	水

实施例2-皮肤的实验室污染模型

使用两种互补的实验室模型，单独地或组合地测试Osmoter和

的抗污染活性：

模型1：臭氧暴露，在重建的皮肤等同物(全厚度组织)上。

模型2：含有重金属和大气PM的污染物混合物，在重建的表皮上。

两种污染模型都是基于重建的表皮[对于臭氧暴露模型，由MatTek corporation,USA生产；和对于污染物混合物模型，由CellSystem,Germany生产(Troisdorf，批次100-AF0828-1)]。重建的表皮代表人类表皮的三维人工系统，包括正常的人类表皮角质形成细胞，生长为完整(integrated)的三维细胞培养模型，在体外完美模拟人类皮肤。重建的表皮表现出正常的屏障功能。

组织准备

在到达后，将表皮组织在4℃储存直到使用。在使用之前，将组织从琼脂糖运输盘中取出，并放置到含有0.9ml无氢化可的松的测定培养基(37℃)的6孔板中。允许组织在37℃和5％ CO₂下孵育至少1小时。在该初始孵育之后，用0.9ml新鲜培养基(37℃)替换测定培养基，并且将组织用试验材料、100mg/ml Trolox局部处理过夜，或者放置不处理。每项处理准备四个组织样品。

表皮存活力评价

将表皮组织冲洗，并用1mg/ml 3-[4,5-二甲基噻唑-2-基]-2,5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)溶液在37℃和5％ CO₂下处理3h。然后将溶液去除并用异丙醇替换，在室温孵育另外2h。在提取之后，将样品转移至96孔板，以进行吸光度读取。使用200μl异丙醇作为空白，用配备有酶标仪的比色计(Tecan model Sunrise remote)在波长540/570nm读取吸光度。

测试炎性生物标志物

使用两种炎性生物标志物，即白细胞介素1α(IL-1alpha，或IL-1α)和前列腺素(PGE)。

IL-1α水平检测程序：

IL-1α在角质形成细胞中合成并储存，并被鉴定为皮肤刺激和炎症的介质。使用ELISA测定在培养基中检测IL-1α水平。测试臭氧和污染物混合物暴露模型的该生物标志物。

使用ELISA测试(酶联免疫吸附测定)在处理的和未处理的表皮的培养基培养物(medium culture)中确定IL-1α。将100μl样品在室温在用抗细胞因子一抗预包被的板中孵育2小时。最后，将样品用合适的缓冲液洗涤。然后添加100μl生物素化的二抗，在室温进行另外2小时的孵育步骤。将样品用合适的缓冲液洗涤，并用链霉亲和素过氧化物酶(HP)溶液孵育30分钟。在洗涤5次之后，添加比色底物以检测与板结合的细胞因子。在发生足够水平的显色后，将50μl终止溶液(2N硫酸)添加至每个孔中，并使用酶标仪在460nm读取吸光度。

PGE2水平检测程序：

PGE在多种细胞中从花生四烯酸合成。花生四烯酸可以通过磷脂酶A2从膜磷脂释放，并且然后通过环氧化酶的作用形成前列腺素。前列腺素E₂(PGE2)已被证明参与皮肤的炎性通路，并且通常被用作显示抗炎物质效力的标志物。使用ELISA测定在培养基中检测PGE2水平。仅测试臭氧暴露模型的该生物标志物。

使用ELISA测试(酶联免疫吸附测定)在处理和未处理的表皮的培养基培养物中确定PGE2。制备范围为7.8pg/ml至1000pg/ml的一系列PGE2标准品。通过从板框架去除任何不需要的条来制备ELISA板，对于以下的每一个，记住指定两个孔：总活性(TA)孔、非特异性结合(NSB)孔、最大结合(MB)孔和底物空白孔(B0)。将150μl组织培养基添加至NSB孔中，同时将100μl培养基添加至B0孔。然后将100μl标准品或样品添加至各自的孔。将50μl PGE2碱性磷酸酶缀合物添加至所使用的每个孔(TA和B0除外)。接下来，将50μl PGE2碱性磷酸酶抗体溶液添加至每个孔(TA、NSB和SD孔除外)。将板遮盖并在2℃-8℃孵育18-24小时。在孵育之后，将每个孔用400μl洗涤缓冲液洗涤三次。在最后一次洗涤之后，将5μl PGE2碱性磷酸酶缀合物添加至TA孔，并将200μl新鲜埃尔曼试剂(Ellman’sReagent)添加至每个孔。将板在室温孵育，使用酶标仪在405nm定期检查吸光度读数。

2.1臭氧暴露模型

评价Osmoter和

单独地和组合地在暴露于臭氧之后抑制炎症介质IL-1α和PGE2释放的能力。

将组织用以上表1中详述的研究的组合物局部处理过夜。然后通过臭氧暴露引发组织中的炎性反应。将组织放置于填充有臭氧(20ppm)的暴露室中一小时。一组组织未暴露于臭氧，并用作为未臭氧暴露的对照。

抗氧化剂Trolox(6-羟基-2,5,7,8-四甲基苯并二氢吡喃-2-羧酸)用作为阳性对照(PC)，其为维生素E的水溶性类似物，并且因此在其炎性降低活性方面是已知的。将100μg/ml的Trolox溶液应用在皮肤样品上。

在臭氧暴露之后，将测试的组合物再次应用至组织上，并将组织在新鲜培养基中孵育过夜。在孵育24小时之后，收集细胞培养基并在-75℃储存，直到分析细胞因子，同时使用MTT测定确定组织存活力的变化。

结果：

表皮存活力

将暴露于臭氧后观察到的表皮存活力示于图1中。存活力被表示为未臭氧暴露的(未发炎的)对照的百分比，该未臭氧暴露的(未发炎的)对照被用于代表100％的存活力(未暴露于臭氧的皮肤样品代表100％的存活力)。未用任何组合物处理的皮肤样品代表阴性对照(NC)。代表阳性对照的Trolox显示出高存活力。图1中的符号*代表与未处理样品相比p<0.05。图中的结果表示为平均值±标准偏差。细胞存活力结果表明，本公开内容的测试的组合物不具有任何毒性作用(仅观察到组织存活力的17％的轻微下降)。

IL-1α水平

图2示出了将皮肤等同物暴露于臭氧后观察到的IL-1α水平。表皮等同物暴露于臭氧导致IL-1α释放的显著增加(320％)。图2中的符号*代表与未处理样品相比p<0.05。图中的结果被表示为平均值±标准偏差。未暴露于臭氧的样品提供低水平的IL-1α。类似地，用Trolox处理并用作阳性对照的样品提供相对低水平的IL-1α。虽然单独的

和Osmoter显示了相对高水平的IL-1α，与通过未处理的样品(NC)观察到的水平相当，因此表明炎症反应，但是与未处理的样品(NC)相比，具有0.8％(w/w)Osmoter和5％(w/w)

的组合物(表1中的样品#7)惊人地显示了低水平的IL-1α。具体地，样品#7将IL-1α分泌抑制了32％。

PGE2水平

图3示出了将皮肤等同物暴露于臭氧后观察到的PGE2水平。表皮等同物暴露于臭氧导致PGE2释放的显著增加(55％)。图3中的符号*代表与未处理样品相比p<0.05。图中的结果被表示为平均值±标准偏差。未暴露于臭氧的样品提供低水平的PGE2。类似地，用Trolox处理并用作阳性对照的样品提供相对低水平的PGE2。虽然单独的

和Osmoter显示了相对高水平的PGE2，与通过未处理的样品(NC)观察到的水平相当(因此表明了炎症反应)，但是与未处理的样品(NC)相比，具有0.25％(w/w)Osmoter和5％(w/w)

的组合物(表1中的样品#5)和具有0.8％(w/w)Osmoter和5％(w/w)

的组合物(表1中的样品#7)惊人地显示了低水平的PGE2。具体地，样品#5将PGE2分泌抑制了26％，并且样品#7将PGE2分泌抑制了24％。

以上结果清楚地显示，虽然Osmoter和

组合物两者作为单独的组合物在炎症抑制方面未显示出任何效力，但是它们的组合引起了显著的炎症抑制，显示出抵抗臭氧污染的保护作用。

2.2空气污染物混合物(重金属和标准大气PM)暴露模型

评价Osmoter和

单独地和组合地通过抑制细胞炎症介质IL-1α的释放抵抗空气污染物的保护作用。

所使用的重金属混合物详见以下表2。

表2：重金属混合物组成

元素	质量分数(ppm)
		As	115.5±3.9
Cd	73.7±2.3
		Co	17.93±0.68
Cr	402±13
		Ni	81.1±6.8
Pb	0.655±0.033
		Sr	215±17
Sb	45.4±1.4

大气PM被获得作为标准组合物，其由23种多卤化芳族化合物(PHA)、13种多氯联苯(PCB)和4种有机氯农药组成。标准大气PM由国家标准与技术研究所(National Instituteof Standards&Technology)(NIST)/EXAXO,Standard Reference

1649b UrbanDust提供(参见，https://www-s.nist.gov/srmors/certificates/1649B.pdf)。

将30μl测试的组合物与含有重金属和大气PM的污染物混合物(本文中称为MIX)应用在表皮上，并在表皮上维持48小时。将表皮单元每天用PBS缓冲液洗涤，并将测试的组合物(以及对照组合物)再次应用于表皮。仅用空气污染物混合物处理的表皮单元被用作刺激对照(irritating control)。将在37℃、5％ CO₂下进行PBS暴露/洗涤。在暴露时间(48h)结束时，收集培养基培养物，以用于使用ELISA测定的IL-1α确定。

结果：

表皮存活力

进行MTT测定以评价细胞存活。

将在未暴露空气污染物混合物的情况下和暴露于空气污染物混合物后观察到的表皮存活力示于图4中。图中的结果被表示为平均值±标准偏差。未暴露于污染物混合物的所有皮肤样品，对照样品以及用本公开内容的组合物处理的样品显示出高存活力，表明本公开内容的测试的组合物对皮肤不具有任何毒性作用。暴露于空气污染物混合物(MIX)的皮肤样品显示出组织存活力显著降低了74％。

IL-1α水平

表3详细说明了通过空气污染物混合物模型观察到的IL-1α结果。结果还被示于图5中。

表3：空气污染物混合物模型中IL-1α的分泌

*IL-1α抑制％按如下计算：100-(由用测试组合物的样品的pg/ml IL-1α释放/pg/ml IL-1α阴性对照)*100。

图5示出了将皮肤等同物暴露于空气污染物混合物(MIX)后观察到的IL-1α分泌的抑制程度。图5中的符号*代表与PBS(阴性对照，NC)相比p<0.05。图中的结果被表示为平均值±标准偏差。

从表3以及从图5清楚的是，单独的

将IL-1α分泌抑制了36.93％。进一步清楚的是，不同浓度的Osmoter溶液将IL-1α分泌抑制了47％-65％的范围。此外，具有

和Osmoter(在不同浓度)两者的组合物将IL-1α分泌抑制了40％-63％的范围。后一范围在通过单独的组合物观察到的范围内，即

和Osmoter两者的组合未显示出任何抵抗对PM和重金属的暴露的额外效应(added efficacy)。

本文以上详述的结果清楚地表明，Osmoter溶液和

溶液促成在抵抗城市污染诱发的炎症的保护中的选择性。

是一种具有特定多糖的制剂，在重建的表皮中使用PM诱发的氧化应激已经证明所述制剂提供抵抗原生污染的机械保护。此外，临床上显示，它提供抵抗碳颗粒和重金属的保护[16]。

本研究为

抵抗对PM和重金属的暴露的据称的保护特性提供了支持。该保护特性从使用IL-1α作为刺激指示物(indicator)观察到的炎症抑制特性反映出。本研究还显示了Osmoter溶液抵抗对PM和重金属的暴露的保护特性。不希望受到理论的束缚，Osmoter的保护作用可能是由于死海矿物质的生化信号传导。

应当注意的是，虽然

组合物和Osmoter组合物两者在以上提及的模型2中都显示抵抗污染(含有重金属和大气PM的污染物混合物)的显著的保护作用，但是在以上提及的模型1中未观察到这些个体组分抵抗污染(臭氧暴露)的保护作用。仅观察到包含

和Osmoter两者的组合物抵抗臭氧暴露的保护。

实施例3-测试组合物抵抗特定污染物的选择性

如以上所述，污染水平和污染物浓度可以在全天之间、根据季节、地理位置以及根据人类活动水平而变化。抵抗污染物的保护皮肤的需求可以相应变化。

例如，虽然在特定地理位置可能需要抵抗特定污染物或特定污染物组的保护，但在另一个地理位置可能需要不同的保护。这同样适用于不同的季节和一天中的不同时间。

因此，虽然有时可能需要抵抗各种污染物的广泛保护，但有时可能仅需要抵抗特定的一种或更多种污染物的保护。

为了筛选包含本发明的活性成分(即DSW和多糖)的具有抵抗污染的选择性保护特性的特定组合物的目的，测试具有以不同比率(例如重量和/或分子)的不同浓度的Osmoter和

的组合物，以确定它们抵抗各种污染物(例如，如本文以上详述的，例如城市灰尘、重金属、PM、烟气等)的选择性活性。

将表皮组织在用或不用具有Osmoter和

的组合的组合物进行预处理的情况下暴露于各种污染物。

测试表皮组织的存活力。

炎症测试例如通过如本文描述的IL-1α和/或PGE测定进行。

在特定浓度和比率，组合物显示抵抗一种或更多种污染物、有时抵抗两种或多种污染物的选择性活性。

这提供了具有选择性活性的组合物，利用所述组合物抵抗特定的一种或更多种污染物，例如为由于受试者地理位置等而暴露于这些特定污染物的受试者提供益处。

Claims (14)

1.一种组合物，所述组合物包含如下作为活性组合：

(i)至少一种死海提取物，和

(ii)至少一种多糖，

其中所述多糖的重复单元是由两个D-葡萄糖残基、一个L-岩藻糖残基和一个D-葡萄糖醛酸残基组成的四糖；

其中所述死海提取物选自由死海水、死海的泥和死海的土壤床组成的组；

其中所述死海水是从死海地区获得的盐水、所述盐水的浓缩物或具有与所述盐水或所述浓缩物基本相同的内容物的水溶液，

其中所述组合物是用于抵抗二次污染物的皮肤保护剂组合物，所述二次污染物是臭氧。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述多糖是生物糖胶-4。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述组合物包含来自商购可得的产品

的多糖。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含来自商购可得的产品

的多糖。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述多糖以约0.5％(w/w)至约5％(w/w)之间的浓度存在于所述组合物中。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述死海提取物是商购可得的产品Maris Sal。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中所述死海提取物以约0.1％至约2.5％(w/w)之间的浓度存在于所述组合物中。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，所述组合物呈选自以下的形式：浆液、洗剂、软膏、凝胶、乳膏、油包水或水包油乳液、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底和化妆品。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，所述组合物被配制为个人皮肤护理产品或被配制为皮肤病学制剂，其中所述皮肤病学制剂是药物制剂或化妆品制剂。

10.一种浆液、洗剂、软膏、凝胶、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底或化妆品，所述浆液、洗剂、软膏、凝胶、洗发剂、保湿剂、防晒剂、乳膏、棒状物、喷雾剂、气雾剂、泡沫、糊剂、摩丝、固体、半固体或液体化妆品、粉底或化妆品包含根据权利要求1至9中任一项所述的组合物。

11.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述组合物还保护皮肤抵抗至少一种另外的二次污染物，其中所述至少一种另外的二次污染物选自由过氧乙酰硝酸酯、烟雾及其组合组成的组。

12.根据权利要求11所述的组合物，其中所述组合物还保护皮肤抵抗至少一种原生污染物，所述原生污染物选自由以下组成的组：颗粒物、重金属、碳颗粒、烟气、污物、灰尘、有机化合物、多环芳烃、气体及其任何组合。

13.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述组合物用于在预防和/或治疗受试者的至少一种皮肤疾病或紊乱中使用，所述疾病或紊乱与臭氧污染相关和/或由臭氧污染诱发。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述皮肤疾病或紊乱选自由以下组成的组：干燥皮肤、敏感皮肤、受刺激的皮肤、糖尿病性皮肤、光损伤的皮肤、银屑病皮肤、特应性皮肤、接触性皮炎皮肤、过早老化的皮肤、加速皮肤老化、皮肤异常色素沉着、痤疮、癌症及其任何组合。

Images