CN115884769A - 用于向动物提供健康益处的组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

本公开提供了利用阿魏酸和组氨酸向动物提供健康益处的组合物和方法。例如，组合物可含有用于向所述动物提供健康益处的治疗有效量的阿魏酸和组氨酸。

Description

用于向动物提供健康益处的组合物和方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2020年9月4日提交的美国临时申请序列号63/074,723的优先权，其公开内容全文以引用方式并入本文。
背景技术
糖尿病(diabetes mellitus)是一种常见的与生活方式相关的疾病。糖尿病的症状特征在于连续的高浓度血糖。另外，除糖尿病失明和尿毒症之外，糖尿病还引起多种其他疾病/并发症，诸如糖尿病性神经病变、糖尿病性高血压和糖尿病性动脉硬化。
糖尿病可分为两种类型。一种是1型糖尿病，也称为胰岛素依赖性糖尿病。1型糖尿病是指不能分泌胰岛素的那些个体。II型糖尿病是指胰岛素分泌受损的那些个体。值得注意的是，患有II型糖尿病的那些患者可能另外具有其他健康挑战，诸如肥胖、精神压力或缺乏体力活动。
糖尿病可跨物种存在。例如，美国的研究已经报道了在过去30年中患病率增加，从1970年的1250人中有1人患病(0.08％)到1999年的81人中有1人患病(1.2％)，尽管诊断率增加对患病率增加的影响尚不清楚。在英格兰，猫的糖尿病被认为是相对常见的疾病，并且与高死亡率相关。因此，2型糖尿病不仅给这类群体带来健康问题，而且也给宠物主人带来负担，因为他们必须确保对他们患有糖尿病的猫每日注射胰岛素。
因此，需要解决糖尿病和相关病症的方法和组合物，以使动物具有更好的健康和良好状态。
发明内容
在一个实施方案中，一种用于向动物提供健康益处的组合物可包含阿魏酸和组氨酸，其中该组合物包含用于向动物提供健康益处的治疗有效量的阿魏酸和组氨酸。
在另一个实施方案中，一种用于向动物提供健康益处的方法可包括向动物施用组合物，其中该组合物包含用于向动物提供健康益处的治疗有效量的阿魏酸和组氨酸。
本发明的其他和另外的目的、特征和优点对于本领域的技术人员将是显而易见的。
附图说明
图1是根据实施例1的实验设计的示意图。
图2是三条等效线的等效线图，其示出了组氨酸和阿魏酸的协同效应，对应于预计达到3个效应的混合物(分别为10％、18％和27％的葡萄糖生成)。
具体实施方式
定义
术语“动物”是指在减重期间需要保持瘦体重的任何动物，包括人类、鸟类动物、牛科动物、犬科动物、马科动物、猫科动物、山羊类动物、狼类动物、鼠科动物、绵羊类动物或猪类动物。在一个方面，动物可以是哺乳动物。
术语“伴侣动物”是指驯养动物，诸如猫、狗、兔、豚鼠、雪貂、仓鼠、小鼠、沙鼠、马、牛、山羊、绵羊、驴、猪等。在一个方面，伴侣动物可以是犬科动物。在另一方面，伴侣动物可以是犬科动物和/或猫科动物。
术语“治疗有效量”是指本文所公开的化合物的量，该量能够(i)治疗或预防特定疾病、病症或障碍，(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文所述的特定疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作。
术语“治疗”包括预防治疗(即预防性治疗)和姑息治疗两者。
术语“动物的身心健康”是指动物整个身体、精神和社交的良好状态，而不仅仅是没有疾病或虚弱。
术语“结合”是指通过以下方式向动物施用本文所公开的食物组合物、其组分或其他组合物：(1)以单一食物组合物的形式一起施用，或(2)以相同或不同的频率、使用相同或不同的施用途径、在大约相同时间或定期分别施用。“定期”是指按照特定化合物或组合物可接受的时间表施用食物组合物、其组分或其他组合物。“大约相同时间”通常是指同时施用或相互间隔在约72小时以内施用食物组合物、其组分或其他组合物。
术语“食物”或“食物产品”或“食品组合物”是指旨在供动物(包括人类)摄食并向动物提供营养的产品或组合物。
术语“碳水化合物”是指可消化的碳水化合物，例如糖和淀粉，并且不包括纤维，例如纤维素或可发酵纤维。
术语“规律地”是指至少每月施用，在一个方面，是指至少每周施用。在某些实施方案中，可进行更频繁的施用或食用，诸如每周两次或三次。在一个方面，施用方案可包括每天食用至少一次。
术语“单个包装”是指试剂盒的多个组成部分在一个或多个容器中物理相关联，或与一个或多个容器物理相关联，而且被视作制造、分装、销售或使用的单元。容器包括但不限于袋子、盒子、纸箱、瓶子、包装(诸如收缩包装)、装订或其他方式粘附的部件，或者其组合。单个包装可以是食物组合物的容器或其部件，这些部件物理相关联使得它们被视为制造、分装、销售或使用的单元。
术语“虚拟包装”是指套盒的部件通过一个或多个物理或虚拟套盒部件上的指示相关联，所述指示指导用户如何(例如，在装有一个部件的袋子或其他容器中)获取其他部件；以及通过具有以下作用的指示相关联：指示用户访问网站、联系记录消息或回传服务、观看视觉消息或者联系护理员或指导员以获取关于如何使用套盒的说明或者关于套盒的一个或多个部件的安全或技术信息。
术语“约”是指±20％的数值；在一个方面，±10％；在另一个方面，±5％；并且在一个特定的方面，±2％。例如，在一个方面(其中“约”为±20％的数值)，短语“约10％至约20％”可包括8％至24％或者12％至16％的范围，包括其中的任何子范围。
如本文所用，使用“包括”语言或其他开放式语言的实施方案、方面和实施例可用“基本上由…组成”和“由…组成”实施方案代替。
当提及食物组合物时，术语“完善且均衡”是指基于动物营养领域中公认的权威机构的推荐，含有适量和适当比例的所有已知必需营养物质，并且因此能够用作单独的膳食摄入来源以维持生命或促进生产，而不需添加补充营养来源的食物组合物。营养均衡的宠物食物和动物食物组合物在本领域内是广为人知且已得到了广泛的应用，例如，根据美国饲料管制协会(AAFCO)建立的标准配制的完善且均衡的食物组合物。
除非另外特别规定，否则本文表述的所有百分比都以组合物的干物质基础按重量计算。本领域的技术人员将认识到，术语“干物质基础”是指移除组合物中的任何游离水分后，再测量或确定组合物中成分的浓度或百分比。
如本文使用，本文使用的范围都是缩略范围，以免必须列出和描述范围内的每个数值。可选择范围内的任何适当的值，适当时，可选择上限值、下限值或该范围的端值。
除非上下文另有说明，否则本文所用的所有剂量是指每个时间段、每单位动物体重的成分或组分或活性成分的量。例如，在一个实施方案中，组氨酸或阿魏酸的剂量可以表示为mg/kgBW/天或g/kgBW/天。
如本文所用，词语的单数形式包括复数，反之亦然，除非上下文明确另外规定。因此，提及“一个”、“一种”和“所述”通常包括相应术语的复数形式。例如，提及“补充剂”、“方法”或“食物”包括多个此类“补充剂”、“方法”或“食物”。与此类似，词语“包括”、“包含”和“含有”都作包含性而非排他性地解释。同样地，术语“包括”、“包含”和“或”都应当视为包含性的，除非上下文明确禁止这一解释。类似地，术语“示例”(尤其当其后跟着术语名单时)仅为示例性和说明性的，并且不应视为排他的或详尽的。
在此公开的方法、组合物和其它进展不限于本文所述的具体方法、方案及试剂，因为正如本领域的技术人员将认识到的，这些具体方法、方案及试剂可改变。此外，本文所用的术语只出于描述具体实施方案的目的，并非旨在限制、也不会限制本文公开或受权利要求书保护的范围。
除非另外定义，否则本文使用的全部科技术语、专门术语及首字母缩略词都具有本发明所属领域或使用这些术语的领域的普通技术人员所通常理解的含义。虽然在本发明的实施中可使用任何与本文所述那些组合物、方法、制品或者其它手段或材料类似或等效的组合物、方法、制品或者其它手段或材料，但本文描述的是某些组合物、方法、制品或者其它手段或材料。
本文中引述或提及的所有专利、专利申请、出版物、技术和/或学术论文以及其它参考文献都在法律允许的范围内全文以引用方式并入本文。对这些参考文献的论述仅旨在总结其中作出的论断。我们并不承认任何这些专利、专利申请、出版物或参考文献或其任何一部分是相关的、实质性的或为现有技术。特别保留质疑这些专利、专利申请、出版物及其它参考文献是相关的、实质性的或为现有技术的任何断言的准确性和相关性的权利。
具体实施方式
本发明的方法和组合物基于以下发现：组氨酸和阿魏酸提供抑制葡萄糖生成的协同效应。具体地讲，本发明的方法和组合物利用组氨酸和阿魏酸向动物提供健康益处。
在一个实施方案中，一种用于向动物提供健康益处的组合物可包含阿魏酸和组氨酸，其中该组合物包含用于向动物提供健康益处的治疗有效量的阿魏酸和组氨酸。
在另一个实施方案中，一种用于向动物提供健康益处的方法可包括向动物施用组合物，其中该组合物包含用于向动物提供健康益处的治疗有效量的阿魏酸和组氨酸。
在一个实施方案中，健康益处可选自预防糖尿病、治疗糖尿病、延迟糖尿病发作、预防前驱糖尿病、延迟前驱糖尿病发作、治疗前驱糖尿病、预防胰岛素抵抗、治疗胰岛素抵抗、延迟胰岛素抵抗发作。
一般来讲，阿魏酸以治疗有效量存在，与组氨酸组合以提供健康益处。在一个实施方案中，阿魏酸可以以约2mg至约2g的量存在于组合物中。在其他方面，阿魏酸可以以约5mg至约1g，或甚至约10mg至约500mg范围内的量存在。在另一个实施方案中，阿魏酸可以以此类量存在用于补充剂。
一般来讲，组氨酸以治疗有效量存在，与阿魏酸组合以提供健康益处。在一个实施方案中，组氨酸可以以约0.5g至约21g的量存在于组合物中。在其他方面，组氨酸可以以约1g至约10g，或甚至约1g至约5g范围内的量存在。在另一个实施方案中，组氨酸可以以此类量或甚至约1g至约16g的量存在于补充剂中。
本发明的组合物可以是适用于动物的任何组合物，包括食物组合物、补充剂、犒赏食物、药物组合物等。在一个实施方案中，组合物可为食物组合物。在一个方面，组合物可为主食组合物。在另一方面，组合物可为补充剂。在一个实施方案中，动物可为人类或伴侣动物。在一个方面，动物可以是伴侣动物。在另一方面，动物可为猫科动物。在一个方面，动物可为犬科动物。在另一方面，动物可为人类。因此，本发明的方法和组合物可针对和/或配制用于此类动物，例如配制用于伴侣动物或猫科动物。
在一个实施方案中，组合物可为食物组合物。在一个方面，组合物还可包含蛋白质、脂肪、碳水化合物和纤维。在另一个实施方案中，组合物还可包含对葡萄糖控制或糖尿病管理有效的添加剂。此类添加剂可包括任何药理学治疗剂(胰岛素、二甲双胍等)或用于葡萄糖控制和糖尿病管理的营养成分(葡糖苷酶抑制剂、淀粉酶抑制剂等)。
通常，本发明的食物组合物包含蛋白质。蛋白质可以是粗蛋白材料，并且可包括植物蛋白质(诸如大豆粉、大豆浓缩蛋白质、玉米蛋白粉、小麦谷蛋白、棉籽和花生粕)或者动物蛋白质(诸如酪蛋白、白蛋白和肉蛋白质)。可用于本发明的肉蛋白质的示例包括牛肉、猪肉、羊羔肉、马肉、家禽肉、鱼肉及其混合物。在一个实施方案中，食物组合物可包含约15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％或甚至60％至约25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％或甚至65％的量的蛋白质，包括在这些量内的各种子范围。在一个方面，蛋白质可为食物组合物的约20％至约50％。
通常，任何类型的碳水化合物均可用于食物组合物中。合适的碳水化合物的示例包括谷粒或谷物，诸如大米、玉米、小米、高粱、苜蓿、大麦、大豆、芥花、燕麦、小麦、黑麦、黑小麦及其混合物。组合物还可任选地包含其他材料，诸如干乳清和其他乳制品副产物。在一个实施方案中，碳水化合物占食物组合物的约5％至约70％。在另一个实施方案中，碳水化合物占食物组合物的约20％至约50％。在其他方面，碳水化合物可以以约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％或甚至40％至约20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60、65％、或70％的量存在。
通常，食物组合物包含脂肪。合适的脂肪的示例包括动物脂肪和植物脂肪。在一个方面，脂肪源可以是动物脂肪源，诸如牛脂或家禽脂肪。也可使用植物油，诸如玉米油、葵花油、红花油、葡萄籽油、大豆油、橄榄油和其他富含单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的油。在一个实施方案中，食物组合物可包含约10％、15％、20％、25％、30％或甚至35％至约15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、或甚至50％的量的脂肪，包括在这些量内的各种子范围。在一个方面，脂肪占食物组合物的约20％至约40％。
可根据需要、按照期望、规律地或间歇地进行施用。在一个方面，可规律地向动物施用该食物组合物。在一个方面，可至少每周进行施用。在另一方面，施用方案可包括每天食用至少一次。一般来讲，组合物可在实现至少一种本文所公开的健康益处的基础被施用于动物。在另一个实施方案中，可长期施用组合物，即，至少6个月。在其他方面，长期可以是至少1年、2年、3年或动物的生命期。以下剂量是基于每个时间段、每单位动物体重的活性成分的量；例如，mg组氨酸/kg动物体重/天(mg/kgBW/天)。尽管通常施用足以实现如本文所述的健康益处的组合物，但在一个实施方案中，该施用提供约1mg/kgBW/天至约2g/kgBW/天的组氨酸剂量和/或约0.5mg/kgBW/天至约500mg/kgBW/天的阿魏酸剂量。在其他方面，施用可提供约10mg/kgBW/天至约500mg/kgBW/天，或甚至约60mg/kgBW/天至约330mg/kgBW/天的组氨酸剂量。在其他方面，施用可提供约0.5mg/kgBW/天至约50mg/kgBW/天，或甚至约10mg/kgBW/天至约50mg/kgBW/天的阿魏酸剂量。
根据目前描述的方法，施用(包括作为膳食方案的一部分施用)可从动物的分娩一直延续到成年。在多种实施方案中，动物可以是人类或伴侣动物(诸如狗或猫)。在某些实施方案中，动物可以是年轻的或正在生长的动物。在其他实施方案中，当动物已经达到其预计或预期寿命的约10％、20％、30％、40％或50％以上时，可开始例如规律地或长期规律地进行施用。在一些实施方案中，动物可已经达到其预期寿命的40％、45％或50％。在其它实施方案中，动物可以更老，达到其可能寿命的60％、66％、70％、75％或80％。寿命的确定可以基于死亡率统计表、计算、估计等，并且可以考虑已知过去、现在和未来的会对寿命造成正面影响或负面影响的影响或因素。在确定寿命时，物种、性别、体型大小、遗传因素、环境因素和应激物，当前和过去的健康状态、过去和现在的营养状况、应激物等的考虑也可以影响或纳入考虑中。
需要能够实施此类施用一段时间以实现如本文所述的一个或多个目标，例如预防糖尿病、治疗糖尿病、延迟糖尿病发作、预防前驱糖尿病、延迟前驱糖尿病发作、治疗前驱糖尿病、预防胰岛素抵抗、治疗胰岛素抵抗、延迟胰岛素抵抗发作。其他施用量可能是合适的，并且可根据动物的初始重量以及其他变量(诸如物种、性别、品种、年龄、期望的健康益处等)来确定。
这种食物组合物的水分含量通常根据食物组合物的性质不同而变化。该食物组合物可以是干组合物(例如粗磨食物)、半湿组合物、湿组合物或其任何混合物。在一个实施方案中，该组合物可以是宠物食物组合物，在一个方面，可以是完善且营养均衡的宠物食物。在该实施方案中，宠物食物可以是“湿食物”、“干食物”或“中等水分”含量的食物。“湿食物”描述的是通常以罐或箔袋形式销售的宠物食物，并且其水分含量通常在约70％至约90％的范围内。“干食物”描述的是组成与湿食物相似的宠物食物，但其含有的水分含量有限，通常在约5％至约15％或20％的范围内(通常为小饼干类粗磨食物的形式)。在一个实施方案中，组合物可具有约5％至约20％的水分含量。干燥食品包括各种含水量的各种食品，使得它们相对耐贮存并且抗微生物或真菌导致的变质或污染。而且，在一个方面，干食物组合物可以是人类或伴侣动物的挤出食物产品。
该食物组合物还可包含一种或多种纤维源。此类纤维源包括可溶的、不溶的、可发酵的和不可发酵的纤维。这种纤维可来自植物源(诸如海洋植物)，但也可使用微生物纤维源。可利用多种可溶的或不溶的纤维，这将是本领域普通技术人员已知的。纤维源可以是甜菜浆(来源于甜菜)、阿拉伯树胶、塔尔哈型树胶、车前子、米糠、角豆胶、柑橘渣、果胶、低聚果糖、短链低聚果糖、甘露低聚果糖、大豆纤维、阿拉伯半乳聚糖、低聚半乳糖、阿拉伯糖基木聚糖或者它们的混合物。
或者，纤维源可以是可发酵纤维。可发酵纤维先前曾被描述为有益于伴侣动物的免疫系统。技术人员已知的提供益生元促进肠内益生菌生长的可发酵纤维或其他组合物也可掺入到组合物中，以有助于增强本文所述的有益效果或增强动物的免疫系统。
在一些实施方案中，该食物组合物的灰分含量在小于1％至约15％的范围内。在一个方面，灰分含量可为约5％至约10％。
通常，该食物组合物可适合动物(包括人类和伴侣动物，诸如狗和猫)作为膳食、膳食组分、零食或犒赏物食用。这类组合物可包括旨在为动物提供必要的膳食需求的完善食物。这类食物组合物的示例包括但不限于干食物、湿食物、饮料、棒条、冷冻预制食物、货架预制食物和冷藏预制食物。
食物组合物还可还包含一种或多种物质，诸如维生素、矿物质、抗氧化剂、益生菌、益生元、盐和功能添加剂(诸如增味剂、着色剂、乳化剂和抗菌剂或其他防腐剂)。可用于这类组合物的矿物质包括例如钙、磷、钾、钠、铁、氯、硼、铜、锌、镁、锰、碘、硒等。可用于本发明的另外的维生素的示例包括脂溶性维生素如A、D、E和K。在各种实施方案中，包括菊粉、氨基酸、酶、辅酶等可能是有用的。
在各种实施方案中，该食物组合物含有以下组分中的至少一种：(1)一种或多种益生菌；(2)一种或多种灭活益生菌；(3)一种或多种灭活益生菌组分，这些组分与益生菌相似或相同地促进健康益处，例如蛋白质、脂质、糖蛋白等；(4)一种或多种益生元；以及(5)其组合。可将益生菌或其组分整合到食物组合物中(例如，均匀或不均匀地分布在组合物中)或施加到食物组合物中(例如，利用或不利用载体局部施用)。这类方法是本领域技术人员已知的，例如US5968569和相关专利中所描述的。
典型的益生菌包括但不限于选自以下的益生菌菌株：乳杆菌(Lactobacilli)、双歧杆菌(Bifidobacteria)或肠球菌(Enterococci)，例如罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteii)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、动物乳杆菌Lactobacillusanimalis)、瘤胃乳杆菌(Lactobacillus ruminis)、约氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、副干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)和双歧杆菌物种(Bifidobacterium sp.)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)和肠球菌物种(Enterococcus sp.)。
通常，该食物组合物可含有如下量的益生菌，该量足以提供约104至约1012cfu/动物/天，在一个方面，105至约1011cfu/动物/天，并且在一个特定的方面，107至1010cfu/动物/天。当益生菌被杀死或灭活时，杀死或灭活的益生菌或其组分的量应产生与活的微生物相似的有益效果。许多这类益生菌及其益处是本领域技术人员已知的，例如EP1213970B1、EP1143806B1、US7189390、EP1482811B1、EP1296565B1和US6929793中所描述的。在另一个实施方案中，可使用本领域技术人员已知的方法和材料将益生菌包封在载体中。
如上所述，该食物组合物可含有一种或多种益生元，例如低聚果糖、低聚葡萄糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚木糖、低聚大豆糖、乳糖蔗糖、低聚乳果糖、乳果糖和异麦芽酮糖。在一个实施方案中，益生元可以是菊苣根、菊苣根提取物、菊粉或其组合。通常，益生元可以如下量施用，该量足以积极刺激肠道中的健康微生物群并且使这些“有益”细菌繁殖。典型的量在每份约1克至约10克的范围内，或者在推荐的动物每日膳食纤维的约5％至约40％的范围内。益生菌和益生元可通过任何合适的手段成为组合物的一部分。通常，试剂可与组合物混合，或者例如通过喷洒或喷雾施加于组合物的表面。当试剂是套件的一部分时，试剂可与其他物质混合，也可在其自己的包装中。通常，基于干物质计，该食物组合物含有约0.1％至约10％的益生元，在一个方面，含有约0.3％至约7％的益生元，并且在一个特定的方面，含有约0.5％至5％的益生元。可使用本领域技术人员已知的方法将益生元整合到组合物中，例如US5952033中所述的方法。
可使用的阿魏酸的来源包括糖用甜菜浆、爆米花、竹笋、全粒黑麦、全粒燕麦、玉米、红甜菜、茄子、水芹、长粒糙米、牛蒡、咖啡豆、意大利面、大豆和柚子。
本领域技术人员可确定合适量的食物成分、维生素、矿物质、益生菌、益生元、抗氧化剂或用于制备将施用给特定动物的特定组合物的其他成分。这些技术人员可在确定如何最好地配制包含这类成分的特定组合物时考虑动物的物种、年龄、体型、重量、健康等。可能考虑的其他因素包括每种组分的期望剂量、不同动物对特定类型的组合物的平均食用(例如，根据物种、体重、活动/能量需求等)和组合物的制造要求。
在另一方面，本公开提供了适合向动物施用食物组合物的套盒。根据套盒组分，在单个包装中的独立容器中或在虚拟包装中的独立容器中，套盒包括以下组分中的一者或多者：(1)一种或多种适合动物食用的成分；(2)关于如何组合成分和其他套盒组分以产生可用于提供如本文所述的健康益处的组合物的说明书；(3)关于如何使用食物组合物以获得此类益处的说明书；(4)一种或多种益生菌；(5)一种或多种灭活益生菌；(6)一种或多种灭活益生菌组分，这些组分与益生菌相似或相同地促进健康益处，例如蛋白质、脂质、糖蛋白等；(7)一种或多种益生元；(8)用于制备或组合套盒组分以产生适合向动物施用的组合物的装置；以及(9)用于将组合的或制备的套盒组分施用于动物的装置。在一个实施方案中，该套盒包含一种或多种适合动物食用的成分。在另一个实施方案中，该套盒包括关于如何组合成分以产生可用于获得如本文所述的健康益处的组合物的说明书。
当该套盒包括虚拟包装时，该套盒受限于在虚拟环境中结合一种或多种物理套盒部件提供说明书。该套盒含有足量的组分以获得如本文所述的健康益处。通常，可在动物食用之前混合该套盒组分。该套盒可含有多种组合和/或混合物形式中的任意形式的套盒组分。在一个实施方案中，该套盒包括供动物食用的食物的容器。该套盒可包括另外的物品，诸如用于混合成分的设备或用于容纳混合物的设备，例如食物碗。在另一个实施方案中，可将食物组合物与提升动物身体健康的其他营养补充剂(诸如维生素和矿物质)混合。各个组分可分别在单个包装中的独立容器中提供，或在不同包装中以各个组分的混合物形式提供。在一个实施方案中，该套盒包含一种或多种适合动物食用的其他成分。在一个方面，这类套盒可包括描述如何组合成分以形成供动物食用的食物组合物的说明书，通常通过混合成分或通过将任选的添加剂施加到其他成分中来形成食物组合物，例如通过将营养补充剂喷洒在食物组合物上。
在另一方面，本发明可提供一种用于传达关于下述中一者或多者的信息或说明的装置：(1)使用食物组合物以获得如本文所述的健康益处之一；(2)消费者在对本文所述的方法和组合物有疑问时要使用的联系信息；以及(3)关于食物组合物的营养信息。通信装置可用于对使用本发明的方法和组合物的益处进行指导，并传达用于将食物组合物施用于动物的批准方法。所述装置包括包含信息或说明的物理或电子文档、数字存储介质、光学存储介质、音频演示、视听显示或视觉显示中的一者或多者。在一个方面，该装置可选自展示的网站、可视显示亭、宣传册、产品标签、包装说明书、广告、传单、公告、录音带、录像带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、USB设备、FireWire设备、计算机存储器及其任意组合。
在另一个方面，用于制造食物组合物的方法可包括将适合动物食用的一种或多种成分混合，该食物组合物包含一种或多种适合动物食用的其他成分，例如蛋白质、脂肪、碳水化合物、纤维、维生素、矿物质、益生菌、益生元等中的一种或多种。可按照本领域任何合适的方法制备该组合物。
在另一个方面，可用于容纳如本文所述的组合物的包装可包括至少一种适合容纳食物组合物的材料和粘附到包装上的标签，该标签包含一个或多个字、图片、设计、首字母缩略词、标语、短语或其他图样、或其组合，用于指示包装的内容物包含食物组合物。在一些实施方案中，粘附到包装上的标签包含一个或多个字、图片、设计、首字母缩略词、标语、短语或其他图样、或其组合，用于指示包装的内容物含有食物组合物，该食物组合物具有与如本文所述的健康益处相关的有益特性。在一个方面，此类装置可包括打印在包装上的词语“用于糖尿病”、“治疗糖尿病”、“延迟糖尿病发作”或等同或相似的表达。任何适合容纳该组合物的包装构型和包装材料均可用于本文，例如由纸、塑料、箔、金属等制造的袋子、盒子、瓶子、罐子、小袋等。在一个实施方案中，根据标签，该包装包含适于特定动物(诸如人类、犬科动物或猫科动物)的食物组合物，在一个方面，包含狗或猫的伴侣动物食物组合物。在一个实施方案中，该包装可以是包含本文所述的食物组合物的罐子或小袋。在各种实施方案中，该包装还包括至少一个窗口，其允许在不打开包装的情况下观察包装内容物。在一些实施方案中，该窗口可以是包装材料的透明部分。在其他实施方案中，该窗口可以是包装材料的缺失部分。
实施例
本发明可通过以下实施例进一步阐释，但应当理解，这些实施例仅出于阐释目的而包含在本文中，并非意在限制本发明的范围，除非另有特别说明。
实施例1–体外研究
根据Okamoto等人描述的方法进行细胞生物测定(Establishment andcharacterization of a novel method for evaluating gluconeogenesis usinghepatic cell lines,H4IIE and HepG2,Archives of Biochemistry and Biophysics，第491卷，第1-2期，2009年11月，第46-52页；Takashi Okamoto,Naohide Kanemoto,TakashiBan,Toshiki Sudo,Keisuke Nagano,Ichiro Niki。)(图1)。简而言之，将以高密度预培养的H4IIE细胞以5.714x105个细胞/cm2的密度接种到12孔板中，并在补充有10％FCS的EMEM中培养24小时。此后，用PBS洗涤细胞两次，然后在补充有1g/L葡萄糖的不含苯酚红-葡萄糖-丙酮酸的DMEM中再次预培养16小时。在糖异生诱导底物(1mM丙酮酸钠和10mM乳酸)的存在下，通过将培养基换成KHH缓冲液来启动测定。加入不同浓度的化合物并重复测试。包括10mM二甲双胍作为抑制糖异生的阳性对照。培养6小时后收集条件培养基(储存于-80℃)。将孔中剩余的细胞用PBS洗涤一次，然后在-20℃下干燥储存)。使用荧光葡萄糖检测试剂盒将培养基用于测定葡萄糖含量。首先提取冷冻细胞的蛋白质，然后定量以标准化葡萄糖结果。在不同的细胞传代进行的至少两个独立实验中测试组分。
使用由先前的内部知识和文献确定的一系列浓度，单独测试所选择的化合物(组氨酸和阿魏酸)以评估它们对肝葡萄糖生成的抑制作用(表1)。对单个化合物进行另外的实验：氨基酸精氨酸和亮氨酸，以测试组氨酸对其他氨基酸的特异性作用。此外，使用组合制剂进一步探索化合物之间的相互作用和协同效应，它们的详细信息在表1中提供。
表1
Figure BDA0004083497480000131
Figure BDA0004083497480000141
对于如本文所述的数据分析，将结果表示为与使用SLP处理产生的葡萄糖相比，每种处理产生的相对葡萄糖。每种条件在每个实验中重复两次，并且在每个测量中重复两次，导致每个实验产生4个值。在每种条件下使用不同的细胞传代进行独立实验。在所选择的情况下，使用来自评价药物协同效应的定量方法(Quantitative Methods for AssessingDrug Synergism)的修改方法进一步评价协同效应，其中对累加效应、协同效应或拮抗效应的评估可使用等效线图进行描述((Tallarida,R.J.(2011)，Quantitative methods forassessing drug synergism.Genes Cancer 2,1003-1008.doi:10.1177/1947601912440575；Tallarida,R.J.(2012)，Revisiting the isobole and relatedquantitative methods for assessing drug synergism.J Pharmacol Exp Ther 342,2-8.doi:10.1124/jpet.112.193474))。丙酮酸钠(1mM)和乳酸钠(10mM)用于诱导H4IIE细胞中的糖异生。与基础处理相比，丙酮酸钠和乳酸钠(SLP)处理诱导显著的肝葡萄糖生成，并且被认为是测定的参考组。在基础条件下观察到8.18％±4.2的低葡萄糖生成。SLP条件诱导高葡萄糖生成，并用作所有结果的100％葡萄糖生成参考。
二甲双胍是众所周知的肝葡萄糖生成的负调节剂。在细胞培养实验中使用10mM剂量的二甲双胍作为阳性对照。诱导对肝葡萄糖生成的强抑制作用，如低葡萄糖生成所指出的：9.71％±4.2。考虑到对照提供了预期的结果并具有低可变性，该模型得到验证并进一步与包括感兴趣的化合物的处理一起使用。
在这些实验条件下，与SLP条件相比，0.2mM和0.5mM的组氨酸剂量没有显著抑制葡萄糖生成(93.70％±10.85和87.00％±17.20％的葡萄糖生成)。较高剂量的组氨酸(例如1mM、2mM和20mM)分别将葡萄糖生成抑制到低至52.67％±4.16、39.19％±7.44、8.39％±2.49。组氨酸剂量递增的作用也是显著的，从而描述了对H4IIE细胞体系中糖异生抑制的显著剂量效应。
为了测试组氨酸对其他氨基酸的特异性作用，选择两种氨基酸，一种是生糖氨基酸，一种是非生糖氨基酸，用于测试它们的作用。这些氨基酸的剂量由组氨酸实验调整，使用0.2mM、2mM和20mM的浓度。与SLP条件相比，精氨酸在抑制葡萄糖生成方面表现出统计学显著的剂量依赖性效应(0.2mM：81.44％±2.72，2mM：65.01％±11.52％以及20mM：45.40％±3.57的葡萄糖生成)。然而，与相同浓度的组氨酸相比，效应更弱。与SLP条件相比，亮氨酸显示出对葡萄糖生成的轻微抑制，没有明显的剂量效应(0.2mM：84.69％±1.05，2mM：75.37％±0.36，以及20mM：83.76％±7.30的葡萄糖生成)。由于组氨酸对抑制葡萄糖生成具有比精氨酸更强的剂量效应反应(93.7％±10.85、39.19％±7.44和8.39％±2.49)，并且亮氨酸具有最小的效应，因此该实验进一步增强了在此体外模型中观察到的特异性作用。
在0.5μM、0.8μM、1μM、2μM和4μM下，阿魏酸分别显著抑制葡萄糖生成至85.67％±3.81、81.51％±11.70、61.38％±15.82、36.57％±6.02和25.08％±5.03，这显著低于SLP条件，与剂量无关。因此，阿魏酸展示了在H4IIE细胞体系中对糖异生的强剂量依赖性抑制。
对于单个化合物，观察到以下情况。对于组氨酸，0.5mM、1mM和2mM的组氨酸分别将糖异生抑制到低至87.00％±17.2、52.67％±4.16和39.19％±7.44。将组氨酸剂量从0.5mM加倍至1mM导致52％的抑制作用，从1mM加倍至2mM导致25％的抑制作用。对于阿魏酸，1μM和2μM阿魏酸分别将糖异生抑制到低至61.38％±15.82和36.57％±6.02。阿魏酸剂量从0.5μM加倍至1μM导致30％的抑制作用，从1μM加倍至2μM导致40％的抑制作用，并且从2μM再加倍至4μM导致32％的抑制作用。最佳剂量效应似乎在1μM-2μM内。
对于组合，1mM组氨酸+1μM阿魏酸将葡萄糖生成降低至27.69％±3.54。葡萄糖降低显著低于SLP对照，显著低于在相同剂量下单独使用的化合物，并且通常低于当使单个化合物的剂量加倍时获得的效应。1mM组氨酸+2μM阿魏酸将葡萄糖生成降低至23.67％±11.03。该效应显著低于SLP对照，显著低于当加倍组氨酸剂量时获得的效应，并且通常低于单独使用2μM阿魏酸获得的效应。2mM组氨酸+2μM阿魏酸将葡萄糖生成显著降低至13.05％±8.75。该效应显著低于SLP对照，并且显著低于由相同剂量的单个化合物获得的效应。值得注意的是，当组合两种化合物时所观察到的效应大于使用单个化合物时、或使单个化合物剂量加倍时的效应。此发现指示潜在的协同效应。
当剂量和效应以对数标度表示时，对于组氨酸(A)和阿魏酸(B)，剂量效应(葡萄糖生成相对于REF＝SLP＝100％)可以被建模为线性。在假定组氨酸和阿魏酸的混合物保持这种线性的情况下，可以预测将达到某个效应的所有混合物。预计实现相等效应的这些混合物可被可视化为代表所有可能混合物的图上的线，并且称为等效线(图2)。表示许多此类等效线的图称为等效线图。
图2示出了对应于预计达到三个效应(分别为10％、18％和27％的葡萄糖生成)的混合物的三条等效线。表示这三条等效线是因为这三个效应对应于由组氨酸和阿魏酸的三个测试混合物所获得的效应。简而言之，等效线表示这样的线：如果生物活性物质的混合物仅具有累加效应，则它们将保持沿着该线。等效线与轴的交点对应于沿着等效线诱导与化合物的组合具有相同效果的单个化合物的剂量。如果实验数据不落在等效线上，则该模型在该值高于等效线的情况下指示拮抗效应，或者在该值低于等效线的情况下指示协同效应。
所有三种测试混合物低于它们的相应等效线的事实表明存在协同效应(即，实现给定效应所需的组氨酸和阿魏酸的剂量低于由等效线表示的仅累加的模型所预期的剂量)。
当评估较低剂量(0.2mM组氨酸+0.5μM阿魏酸、0.2mM组氨酸+0.8μM阿魏酸、0.5mM组氨酸+0.5μM阿魏酸)的效应时，当组合两种化合物时观察到的效应可能低于使用单个化合物时的效应，但似乎不低于将单个化合物剂量加倍时的效应。当使用较低剂量时，应用等效线方法未指示化合物之间的协同效应。
本说明书已公开了本发明的某些实施方案。虽然采用了特定术语，但这些术语仅以一般性和描述性意义使用，而非出于限制目的。本发明的范围在权利要求书中陈述。显然，按照以上教导内容，本发明的许多修改形式和变型形式皆是可能的。因此，应当理解，在所附权利要求书的范围内可以不同于具体描述的其他形式实施本发明。

Claims (20)

1.用于向动物提供健康益处的组合物，所述组合物包含阿魏酸和组氨酸，其中所述组合物包含用于向所述动物提供所述健康益处的治疗有效量的阿魏酸和组氨酸。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述健康益处选自预防糖尿病、治疗糖尿病、延迟糖尿病发作、预防前驱糖尿病、延迟前驱糖尿病发作、治疗前驱糖尿病、预防胰岛素抵抗、治疗胰岛素抵抗、延迟胰岛素抵抗发作。
3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述阿魏酸以约2mg至约2g的量存在于所述组合物中。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组氨酸以约0.5g至约21g的量存在于所述组合物中。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物为主食组合物。
6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物为补充剂。
7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物被配制用于伴侣动物。
8.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物被配制用于猫科动物。
9.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含蛋白质、脂肪、碳水化合物和纤维。
10.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物还包含对葡萄糖控制或糖尿病管理有效的添加剂。
11.用于向动物提供健康益处的方法，所述方法包括向所述动物施用组合物，其中所述组合物包含用于向所述动物提供所述健康益处的治疗有效量的阿魏酸和组氨酸。
12.根据权利要求11所述的方法，其中规律地向所述动物施用所述组合物。
13.根据权利要求11所述的方法，其中所述施用提供约1mg/kgBW/天至约2g/kgBW/天的组氨酸剂量和约0.5mg/kgBW/天至约500mg/kgBW/天的阿魏酸剂量。
14.根据权利要求11所述的方法，其中所述健康益处选自预防糖尿病、治疗糖尿病、延迟糖尿病发作、预防前驱糖尿病、延迟前驱糖尿病发作、治疗前驱糖尿病、预防胰岛素抵抗、治疗胰岛素抵抗、延迟胰岛素抵抗发作。
15.根据权利要求11所述的方法，其中所述阿魏酸以约2mg至约2g的量存在于所述组合物中，并且所述组氨酸以约0.5g至约21g的量存在于所述组合物中。
16.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物为主食组合物。
17.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物为补充剂。
18.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物被配制用于伴侣动物。
19.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物被配制用于猫科动物。
20.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物还包含对葡萄糖控制或糖尿病管理有效的添加剂。
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