CN115855893A - 一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用、植物中草甘膦的检测方法及动态监测方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于有机磷农药检测分析技术领域，提供了一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用、植物中草甘膦的检测方法及动态监测方法。本发明将银纳米簇用于草甘膦检测，不需要额外添加检测试剂，操作简单；且对草甘膦选择性好、响应快速、灵敏度高，避免了检测假阳性，提高草甘膦的检测结果准确度。本发明提供的检测方法，采用醇溶剂对待测植物进行醇提，得到醇提液；在所述醇提液中加入银纳米簇，得到待检测上机样品；对所述待检测上机样品进行荧光检测，得到待测植物的荧光值；将所述待测植物的荧光值代入预定的标准曲线，得到所述待测植物中草甘膦的浓度。本发明提供的检测方法不需要额外添加检测试剂，操作简单，避免了检测假阳性，提高了检测准确度。

Description

一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用、植物中草甘膦的检测 方法及动态监测方法

技术领域

本发明涉及有机磷农药检测分析技术领域，尤其涉及一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用、植物中草甘膦的检测方法及动态监测方法。

背景技术

近年来，随着现代农业中农药的广泛使用，农药残留及农药对环境污染、食品安全和人体健康的影响引起了人们越来越多的关注。草甘膦(Glyphosate)是美国孟山都公司在1971年开发的一种广谱、灭生性、有机磷类除草剂，是目前世界上使用最广泛、用量最大的除草剂之一。草甘膦能够非选择性的有效抑制一年生杂草、多年生植物和草本植物的生长，具有成本低、对哺乳动物低毒性等性质。然而，草甘膦的过量、长期使用会造成其在环境和生物体内的不断富集，并通过食物链进入人体，对人体健康造成潜在威胁。近年来的研究表明，草甘膦能够引起多种疾病，包括引发肺癌、淋巴腺癌和胰腺癌等，并被世界卫生组织(WHO)列为2A类致癌物，全世界已有超过30个国家或地区开始禁止或限制使用草甘膦，并将草甘膦的残留限量列入相关法规与标准中。因此，对环境及生物样品中草甘膦的分析检测具有十分重要的意义。

针对草甘膦农药残留的检测方法主要包括气相色谱法、高效液相色谱法、色谱-质谱联用法，电化学分析法以及酶联免疫法等。这些传统方法虽然对草甘膦农残检测取得了良好效果，但通常对实验设备以及操作人员的专业性要求高，需要大型昂贵的设备，且具有检测耗时长，需要复杂的样品前处理，难以进行高通量分析等限制。

与上述方法相比，荧光传感检测法具有操作简便、设备易得、灵敏度高、特异性强、响应时间短、可实时高通量识别检测等优点，因此将荧光传感技术应用于草甘膦农残检测具有广阔的应用前景。目前，已有一些报导的荧光探针用于有机磷农药及草甘膦的检测与传感研究。例如，国家纳米科学中心蒋兴宇等(Liu,D.；Chen,W.；Wei,J.；Li,X.；Wang,Z.；Jiang,X.Anal.Chem.2012,84,4185-4191.)报导了一种基于金纳米粒子和罗丹明B染料的复合探针，该探针通过抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的机理实现了对有机磷农药的检测。山东农业大学艾仕云等(Hou,J.；Dong,J.；Zhu,H.；Teng,X.；Ai,S.；Mang,M.Biosens.Bioelectron.2015,15,20-26.)研发了一种基于L-酪氨酸功能化的碳点，该探针通过抑制酪氨酸酶活性的机理实现了对甲基对硫磷农药的选择性检测。吉林大学丁兰等(Wang,L.；Bi,Y.；Gao,J.；Li,Y.；Ding,H.；Ding,L.RSCAdv.2016,6,85820-85828.)利用碳点-铜离子复合荧光探针实现了对草甘膦的间接检测。西北农林科技大学袁茂森等(Guan,J.；Yang,J.；Zhang,Y.；Zhang,X.；Deng,H.；Xu,J.；Wang,J.；Yuan,M.S.Talanta 2021,224,121834-121839.)利用罗丹明衍生物-铜离子复合荧光探针也实现了对草甘膦的间接检测。这些探针虽然已用于有机磷及草甘膦农药检测，但仍具有明显局限性，比如：已报导的探针需要添加两种或两种以上的检测试剂，这种间接检测模式会存在假阳性的问题，导致测定结果不准确。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用、植物中草甘膦的检测方法及动态监测方法。本发明将银纳米簇用于草甘膦检测时，能够避免假阳性问题，提高测定准确性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用。

优选地，所述银纳米簇以银纳米簇水溶液的形式使用；所述银纳米簇水溶液的浓度为10～30g/L。

优选地，所述银纳米簇的制备方法包括以下步骤：

将聚合物、可溶性银盐和水混合，依次进行孵育和紫外灯照射，得到前驱体；

将所述前驱体依次进行透析和去除溶剂，得到所述银纳米簇；

所述聚合物包括聚甲基丙烯酸和/或聚丙烯酸。

优选地，所述聚合物和可溶性银盐的用量比为0.6g：0.001～0.003mol。

优选地，所述孵育在恒温水浴的条件下进行，所述恒温水浴的温度为25～30℃，时间为10～20min；所述紫外灯照射的紫外灯波长为365nm；所述紫外灯照射的方式为每照射1h，停20～30min；所述紫外灯照射的总时间为3～4.5h。

优选地，所述透析的透析袋的截留分子量为8000～14000Da。

本发明还提供了一种植物中草甘膦的检测方法，包括以下步骤：

采用醇溶剂对待测植物进行醇提，得到醇提液；

在所述醇提液中加入银纳米簇，得到待检测上机样品；

对所述待检测上机样品进行荧光检测，得到待测植物的荧光值；

将所述待测植物的荧光值代入预定的标准曲线，得到所述待测植物中草甘膦的浓度；

所述预定的标准曲线的纵坐标为F₀-F/F₀，横坐标为草甘膦的浓度。

优选地，所述醇溶剂包括甲醇；所述醇溶剂和待测植物的用量比为10～25mL：5.0g；所述醇提的方式为超声提取，所述超声提取的次数为2次，每次超声提取的时间为20min。

优选地，所述荧光检测的激发光波长为515nm；所述待测植物的荧光值为605nm处的荧光值。

本发明还提供了一种植物中草甘膦的动态监测方法，包括以下步骤：

将活体植物依次在银纳米簇水溶液和草甘膦水溶液中分别进行第一孵育和第二孵育，得到孵育植物；

对所述孵育植物进行动态监测。

本发明提供了一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用。本发明将银纳米簇用于草甘膦检测时，不需要额外添加检测试剂，操作简单；且对草甘膦选择性好、响应快速、灵敏度高，避免了检测假阳性，提高草甘膦的检测结果准确度。

本发明提供了一种植物中草甘膦的检测方法，包括以下步骤：采用醇溶剂对待测植物进行醇提，得到醇提液；在所述醇提液中加入银纳米簇，得到待检测上机样品；对所述待检测上机样品进行荧光检测，得到待测植物的荧光值；将所述待测植物的荧光值代入预定的标准曲线，得到所述待测植物中草甘膦的浓度；所述预定的标准曲线的纵坐标为F₀-F/F₀，横坐标为草甘膦的浓度。本发明提供的检测方法不需要额外添加检测试剂，操作简单，避免了检测假阳性，提高了检测准确度。

本发明还提供了一种植物中草甘膦的动态监测方法，包括以下步骤：将活体植物依次在银纳米簇水溶液和草甘膦水溶液中分别进行第一孵育和第二孵育，得到孵育植物；对所述孵育植物进行动态监测。本发明提供的动态监测方法以银纳米簇为探针，首次实现了活体植物细胞中草甘膦的实时、原位成像。

附图说明

图1为银纳米簇与草甘膦作用前后的紫外吸收图；

图2为银纳米簇与草甘膦作用前后的荧光发射图；

图3为银纳米簇水溶液加入不同浓度草甘膦(0～3μM)后，荧光发射强度的变化图；

图4为荧光强度-草甘膦浓度的拟合线性标准曲线图；

图5为银纳米簇与草甘膦作用体系荧光强度随时间变化图；

图6为银纳米簇水溶液分别加入10μM不同干扰物(钾离子、钠离子、钙离子、银离子、硫酸根、硝酸根和抗坏血酸)，以及有机磷类农药(草甘膦、马拉硫磷、草铵膦、对硫磷、甲胺磷、敌敌畏、毒死蜱和莠去津)后，605nm处荧光发射强度的变化图；

图7为银纳米簇用于莴苣幼苗根尖细胞草甘膦检测的荧光染色图；其中，A和E为莴苣幼苗加入1.2mg/mL探针培养30min后的成像图；B和F为高倍镜下银纳米簇染色后莴苣幼苗根尖组织的局部放大图；C和G为银纳米簇孵育的莴苣幼苗根尖组织继续加入3μM草甘膦培养30min后的成像图；D和H为银纳米簇孵育的莴苣幼苗根尖组织继续加入5μM草甘膦培养30min后的成像图；其中E、F、G、H为共聚焦激光显微镜下红色通道和相应明场叠加的成像图。

具体实施方式

本发明提供了一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用。

在本发明中，所述银纳米簇以银纳米簇水溶液的形式使用；所述银纳米簇水溶液的浓度优选为10～30g/L，进一步优选为24.64g/L。

在本发明中，所述银纳米簇的制备方法包括以下步骤：

将聚合物、可溶性银盐和水混合，依次进行孵育和紫外灯照射，得到前驱体；

将所述前驱体依次进行透析和去除溶剂，得到所述银纳米簇；

所述聚合物包括聚甲基丙烯酸和/或聚丙烯酸。

本发明将聚合物、可溶性银盐和水混合，依次进行孵育和紫外灯照射，得到前驱体。在本发明中，所述聚合物包括聚甲基丙烯酸和/或聚丙烯酸，优选为聚甲基丙烯酸(PMAA)。在本发明中，所述聚合物的分子量优选为4000～6000，进一步优选为5000。在本发明中，所述可溶性银盐优选包括硝酸银。在本发明中，所述可溶性银盐优选以可溶性银盐水溶液的形式使用，所述可溶性银盐水溶液的浓度优选为0.05～0.15mol/L。在本发明中，所述聚合物和可溶性银盐的用量比优选为0.6g：0.001～0.003mol，进一步优选为0.6g：0.001mol。

在本发明中，所述孵育优选在恒温水浴的条件下进行，所述恒温水浴的温度优选为25～30℃，时间优选为10～20min；所述孵育优选在氮气保护下进行。

在本发明中，所述紫外灯照射的紫外灯波长优选为365nm；所述紫外灯照射的方式优选为每照射1h，停20～30min；所述紫外灯照射的总时间优选为3～4.5h。

在本发明中，所述紫外灯辐射主要作用是：第一光照还原，将正一价的银离子还原为零价的银原子；第二、若干个银原子聚合形成银纳米簇。

得到前驱体后，本发明将所述前驱体依次进行透析和去除溶剂，得到所述银纳米簇。在本发明中，所述透析的透析袋的截留分子量优选为8000～14000Da，进一步优选为12000Da。在本发明中，所述透析的时间优选为24～48h。在本发明中，所述透析的溶剂优选包括蒸馏水。在本发明中，所述透析能够除去未反应的银离子。

在本发明中，所述去除溶剂的方式优选为旋蒸；本发明对所述旋蒸的参数不做具体限定，只要能够将所述透析得到的透析液中的溶剂去除即可。

所述去除溶剂后，本发明优选还包括将所述去除溶剂得到的粘稠物溶解，所述溶解的试剂优选包括蒸馏水。

本发明的银纳米簇的制备方法操作简单。

本发明还提供了一种植物中草甘膦的检测方法，包括以下步骤：

采用醇溶剂对待测植物进行醇提，得到醇提液；

在所述醇提液中加入银纳米簇，得到待检测上机样品；

对所述待检测上机样品进行荧光检测，得到待测植物的荧光值；

将所述待测植物的荧光值代入预定的标准曲线，得到所述待测植物中草甘膦的浓度；

所述预定的标准曲线的纵坐标为F₀-F/F₀，横坐标为草甘膦的浓度。

本发明采用醇溶剂对待测植物进行醇提，得到醇提液。在本发明中，所述待测植物优选包括蔬菜，所述蔬菜优选包括莴苣。在本发明中，所述醇溶剂优选包括甲醇；所述醇溶剂和待测植物的用量比优选为10～25mL：5.0g。在本发明中，所述醇提的方式优选为超声提取，所述超声提取的次数优选为2次，每次超声提取的时间优选为20min。在本发明中，所述超声的功率优选为80～200W。进一步优选为100W。

所述醇提后，本发明还包括将得到的提取液离心，所得上清液过滤。在本发明中，所述离心的转速优选为8000～10000rpm，时间优选为10～30min。在本发明中，所述过滤的滤膜的孔径优选为0.22μm。

得到醇提液后，本发明在所述醇提液中加入银纳米簇，得到待检测上机样品。在本发明中，所述银纳米簇优选以银纳米簇水溶液的形式使用；所述银纳米簇水溶液的浓度优选为10～30g/L。在本发明中，所述待检测上机样品中银纳米簇的浓度优选为0.5～1.5g/L，进一步优选为1.0～1.2g/L。

得到待检测上机样品后，本发明对所述待检测上机样品进行荧光检测，得到待测植物的荧光值。在本发明中，所述荧光检测的激发光波长优选为515nm；所述待测植物的荧光值优选为605nm处的荧光值。

得到待测植物的荧光值后，本发明将所述待测植物的荧光值代入预定的标准曲线，得到所述待测植物中草甘膦的浓度。

在本发明中，所述预定的标准曲线的纵坐标为F₀-F/F₀，横坐标为草甘膦的浓度。

在本发明中，所述预定的标准曲线的获取方式优选包括以下步骤：

在定量的银纳米簇水溶液中加入不同浓度的草甘膦，得到系列上机样品；

对所述系列上机样品进行荧光检测，得到系列上机样品的荧光值；

以F₀-F/F₀为纵坐标，以草甘膦的浓度为横坐标，线性拟合得到所述预定的标准曲线；

F₀为草甘膦浓度为0时，所得上机样品的荧光值；

F为草甘膦浓度不为0时，所得上机样品的荧光值。

本发明在定量的银纳米簇水溶液中加入不同浓度的草甘膦，得到系列上机样品。在本发明中，所述系列上机样品中银纳米簇的浓度均优选为0.5～15g/L，进一步优选为1.2～10g/L。在本发明中，所述系列上机样品中草甘膦的浓度范围优选为0～3μM。

得到系列上机样品后，本发明对所述系列上机样品进行荧光检测，得到系列上机样品的荧光值。在本发明中，所述荧光检测的参数优选与上述技术方案一致，在此不再赘述。

得到系列上机样品的荧光值后，本发明以F₀-F/F₀为纵坐标，以草甘膦的浓度为横坐标，线性拟合线性拟合得到所述预定的标准曲线。本发明对所述线性拟合的操作不做具体限定，采用本领域技术人员熟知的操作即可。

在本发明中，F₀为草甘膦浓度为0时，所得上机样品的荧光值；F为草甘膦浓度不为0时，所得上机样品的荧光值。

本发明还提供了一种植物中草甘膦的动态监测方法，包括以下步骤：

将活体植物依次在银纳米簇水溶液和草甘膦水溶液中分别进行第一孵育和第二孵育，得到孵育植物；

对所述孵育植物进行动态监测。

本发明将活体植物依次在银纳米簇水溶液和草甘膦水溶液中分别进行第一孵育和第二孵育，得到孵育植物。在本发明中，所述活体植物优选包括蔬菜，所述蔬菜优选包括莴苣。在本发明中，所述银纳米簇水溶液的浓度优选为0.5～15g/L，进一步优选为1.2g/L。在本发明中，所述草甘膦水溶液的浓度优选为0～30μM。在本发明中，所述第一孵育的温度优选为室温，即既不需要额外加热也不需要额外降温；所述第一孵育的时间优选为30min。在本发明中，所述第二孵育的温度优选为室温，即既不需要额外加热也不需要额外降温；所述第二孵育的时间优选为30min。

在本发明中，所述动态监测优选包括共聚焦激光扫描显微镜成像分析。本发明对所述共聚焦激光扫描显微镜成像分析的参数不做具体限定，采用本领域技术人员熟知的操作即可。

下面结合实施例对本发明提供的银纳米簇在草甘膦检测中的应用、植物中草甘膦的检测方法及动态监测方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1用于检测草甘膦的银纳米簇的制备

包括以下步骤：

(1)在磁力搅拌下，将0.6g聚甲基丙烯酸(PMAA，M＝5000)引入新制备的20mL0.05mol/L硝酸银溶液中。

(2)在黑暗中，氮气保护下水浴恒温27℃孵育10min后，在365nm波长紫外灯下进行照射，间隔照射反应4.5h，每照射1h，停30min，得到前驱体。

(3)将前驱体在蒸馏水中透析(透析袋的截留分子量为12000Da)24h，以除去未反应的银离子，最终银纳米簇溶液在室温下避光保存。

(4)透析后的溶液置于圆底烧瓶中旋蒸至粘稠，真空泵抽至干，得0.4926g；用20mL蒸馏水溶解，得到浓度为24.64mg/mL的银纳米簇水溶液。

实施例2银纳米簇检测草甘膦农药的线性和灵敏度应用

取3mL浓度为1.2mg/mL的银纳米簇水溶液为检测主体溶液，银纳米簇自身的紫外吸收峰在515nm，相应的溶液颜色为红褐色；当银纳米簇与3μM草甘膦农药在室温下作用1min后，515nm处的吸收峰下降并消失，溶液颜色变为淡黄色，结果如图1所示。因此，本发明可通过比色法和肉眼观测的方法实现对草甘膦的检测，检测方法简单易行，灵敏度高。

图2为银纳米簇与草甘膦作用前后的荧光发射图，从图2可以看出：3mL浓度为1.2mg/mL的银纳米簇水溶液在与草甘膦反应前荧光发射峰在605nm，在365nm紫外灯照射下，呈现明显的深红色荧光；当与3μM草甘膦作用后605nm处荧光强度显著减弱并淬灭。

取3mL浓度为1.2mg/mL的银纳米簇水溶液，分别加入浓度为0～3μM的草甘膦，形成系列上机样品，对所得系列上机样品进行荧光检测，所得荧光谱图如图3所示。从图3可以看出：银纳米簇对草甘膦的检测时，线性范围较宽(0～3μM)，检测限较低达到21nM。

以F₀-F/F₀为纵坐标，以系列上机样品中草甘膦的浓度为横坐标，进行线性拟合，得到标准曲线，具体为Y＝0.334X-0.013；其中：X为草甘膦的浓度，Y为F₀-F/F₀，结果如图4所示。从图4可以看出：银纳米簇对草甘膦的检测具有较高的灵敏度，适用于草甘膦的痕量定性、定量检测。

实施例3银纳米簇检测草甘膦的时间响应和选择性

取1.2mg/mL的银纳米簇水溶液于比色皿中，加入3μM草甘膦，观察银纳米簇与草甘膦作用体系荧光强度随时间变化情况，结果如图5所示。从图5可以看出：银纳米簇对草甘膦的检测，反应时间较短，在30s内反应达到平衡，有利于实现对复杂样品体系中草甘膦的快速、超灵敏检测。

取1.2mg/mL的银纳米簇水溶液于比色皿中，依次加入10μM的常见生物体干扰物(钾离子、钠离子、钙离子、银离子、硫酸根、硝酸根和抗坏血酸)，以及各种有机磷类农药(草甘膦、马拉硫磷、草铵膦、对硫磷、甲胺磷、敌敌畏、毒死蜱和莠去津)室温反应1min，得到干扰溶液；在515nm激发光作用下，测量干扰溶液的荧光发射光谱，其结果如图6所示。从图6可以看出：银纳米簇水溶液加入草甘膦后，荧光明显减弱，而加入其他干扰物质及有机磷农药未引起明显的荧光变化，说明银纳米簇对草甘膦呈现优异的选择性识别能力。

实施例4蔬菜莴苣根尖组织中草甘膦的检测与成像应用

将定性滤纸置于直径9cm的培养皿中，加入2mL蒸馏水浸泡，将莴苣种子移入培养皿，在培养箱中25℃下孵育培养。48h后，取大小相近的莴苣幼苗做下一步实验。

在放有莴苣幼苗的培养皿中，加入1mL浓度为1.2g/L的银纳米簇水溶液室温下孵育30min，用PBS缓冲液清洗莴苣幼苗以除去残留在莴苣幼苗表面的银纳米簇，然后分别加入0～5μM草甘膦溶液并孵育30min，将莴苣幼苗置于共聚焦激光扫描显微镜(奥林巴斯Fluoview1000)下观察。当莴苣幼苗单独用银纳米簇水溶液处理时，莴苣幼苗根部可以观察到明显的亮红色荧光(图7中的A和E)。用高倍物镜观察莴苣幼苗根尖组织细胞(图7中的B和F)，根尖细胞包括细胞核能够被银纳米簇均匀染色，说明银纳米簇首先通过莴苣幼苗根尖细胞内吞作用被吸收，然后进一步被运输到莴苣幼苗根部的其他部分。随着加入草甘膦浓度的增加(0、3μM、5μM)，莴苣幼苗根尖组织的荧光逐渐减弱(图7中的B、C和D)。说明进入植物体中的银纳米簇能够与草甘膦相互作用生成无荧光物质，银纳米簇可在活体植物组织细胞水平实现对草甘膦残留的实时、原位、动态检测与成像。同时如图7中的E、F、G和H所示，细胞明场实验表明植物细胞在用探针孵育和对草甘膦检测的过程中始终保持良好的细胞形态，说明该银纳米簇具有较好的生物相容性和较低的细胞毒性。

实施例5莴苣幼苗中草甘膦的定量检测

为了考察银纳米簇在实际蔬菜样品中农残检测的潜在应用，选取实验室培育的莴苣幼苗(无土培育48h)样品，进行预处理：将5.0g培育的莴苣幼苗样品加入25mL甲醇，对莴苣幼苗进行两次超声提取(超声的功率为100W)，每次20min。合并提取溶液并在10000rpm下离心10min，收集上清液。随后，将上清液用0.22μm膜过滤以出去杂质，随后将滤液旋蒸至干，用10mL草甘膦溶液溶解，配制浓度分别为：0.5μM、1.0μM、1.5μM、2.0μM、3.0μM的草甘膦溶液。

采用实施例1制备的银纳米簇水溶液，向1.2g/L银纳米簇水溶液中加入上述不同浓度的草甘膦溶液，在515nm激发光作用下，测量检测体系在605nm处荧光发射峰强度值，并将其带入如下方程式：

Y＝0.334X-0.013；

其中：X为草甘膦的浓度，Y为F₀-F/F₀。

计算得到待测草甘膦溶液的浓度，结果如表1所示。

表1银纳米簇在实际莴苣幼苗样品中检测草甘膦

从表1可以看出：用加标检测实际莴苣幼苗样品中的草甘膦，回收率为90.1％～103.8％，相对标准偏差为0.56％～3.93％，测得的草甘膦浓度与相应的加标浓度误差很小，此结果表明本发明提供的银纳米簇检测实际蔬菜样品中的草甘膦具有较好的准确性，能够在0～3μM范围内定量检测草甘膦，具有良好的实用性能。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种银纳米簇在草甘膦检测中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述银纳米簇以银纳米簇水溶液的形式使用；所述银纳米簇水溶液的浓度为10～30g/L。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述银纳米簇的制备方法包括以下步骤：

将聚合物、可溶性银盐和水混合，依次进行孵育和紫外灯照射，得到前驱体；

将所述前驱体依次进行透析和去除溶剂，得到所述银纳米簇；

所述聚合物包括聚甲基丙烯酸和/或聚丙烯酸。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述聚合物和可溶性银盐的用量比为0.6g：0.001～0.003mol。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述孵育在恒温水浴的条件下进行，所述恒温水浴的温度为25～30℃，时间为10～20min；所述紫外灯照射的紫外灯波长为365nm；所述紫外灯照射的方式为每照射1h，停20～30min；所述紫外灯照射的总时间为3～4.5h。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述透析的透析袋的截留分子量为8000～14000Da。

7.一种植物中草甘膦的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

采用醇溶剂对待测植物进行醇提，得到醇提液；

在所述醇提液中加入银纳米簇，得到待检测上机样品；

对所述待检测上机样品进行荧光检测，得到待测植物的荧光值；

将所述待测植物的荧光值代入预定的标准曲线，得到所述待测植物中草甘膦的浓度；

所述预定的标准曲线的纵坐标为F₀-F/F₀，横坐标为草甘膦的浓度。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述醇溶剂包括甲醇；所述醇溶剂和待测植物的用量比为10～25mL：5.0g；所述醇提的方式为超声提取，所述超声提取的次数为2次，每次超声提取的时间为20min。

9.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述荧光检测的激发光波长为515nm；所述待测植物的荧光值为605nm处的荧光值。

10.一种植物中草甘膦的动态监测方法，其特征在于，包括以下步骤：

将活体植物依次在银纳米簇水溶液和草甘膦水溶液中分别进行第一孵育和第二孵育，得到孵育植物；

对所述孵育植物进行动态监测。

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