CN111549076B - 一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用 - Google Patents

一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111549076B
CN111549076B CN202010409619.3A CN202010409619A CN111549076B CN 111549076 B CN111549076 B CN 111549076B CN 202010409619 A CN202010409619 A CN 202010409619A CN 111549076 B CN111549076 B CN 111549076B
Authority
CN
China
Prior art keywords
fluorescent
silver
silver nanocluster
nanocluster probe
fluorescent silver
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010409619.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111549076A (zh
Inventor
张国财
张�杰
田野
王滨松
董欣欣
姬彦飞
韩丹宇
赵曦明
张子辉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Northeast Forestry University
Original Assignee
Northeast Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Northeast Forestry University filed Critical Northeast Forestry University
Priority to CN202010409619.3A priority Critical patent/CN111549076B/zh
Publication of CN111549076A publication Critical patent/CN111549076A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111549076B publication Critical patent/CN111549076B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P3/00—Preparation of elements or inorganic compounds except carbon dioxide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/36—Adaptation or attenuation of cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N21/643—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" non-biological material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N2021/6417—Spectrofluorimetric devices
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6432—Quenching
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)

Abstract

本发明提供了一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用，属于荧光纳米材料制备技术领域。步骤为：将筛选的耐银酵母菌菌株于加入硝酸银的YPD培养基中培养2‑5天，菌液经超声破碎处理后离心，收集的上清液经过滤、烘干，得到粒径较小、稳定性及水溶性较好的发绿色荧光的银纳米团簇，同时发现Cr6+可使本发明制备的探针发生荧光猝灭。本发明制备银纳米团簇的方法相比较传统的物理及化学等方法在原料的选取、反应条件的调控及后期处理等方面更加简单易行，环保健康，避免了化学还原剂的使用，同时省去了传统模板法中模板的制备。本探针可应用于高灵敏、高选择性的识别检测Cr6+，且检测过程简便快速，检测结果准确，为构建Cr6+检测的传感体系提供新的思路。

Description

一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种荧光银纳米团簇探针制备方法与应用，属于荧光纳米材料领域。
背景技术
铬是一种银白色的坚硬金属，主要以金属铬、Cr3+和Cr6+三种形式出现。铬通常以三价和六价形式存在于自然界，在水中则以六价的形式存在。Cr6+对生物和人体的毒害作用最大，Cr6+不但会污染土壤、水源，而且对人类健康导致不可逆的危害。人们一旦食用受污染的土地生产的农作物或是喝了受污染的水，这些有毒的重金属就会进入人的体内，慢慢沉积下来，对人类健康造成极大的威胁。长期食用受铬污染的水和食物，可引起骨质软化骨骼变形，可导致骨痛病，严重时形成自然骨折以致死亡。因此，Cr6+的检测对环境和人类社会的健康发展至关重要。
通常Cr6+的检测方法有：二苯碳酰二肼分光光度法、比色法、电化学法等。这几种方法由于实验室检测，因取样分析、分析时间长、分析步骤复杂不易操作、仪器昂贵导致该技术难以得到普遍应用。而荧光探针检测Cr6+技术操作简便，快速，成本较低，灵敏度较高，具有极好的应用前景，将会大量应用于医药、生物和环境分析中。荧光探针拥有庞大的家族，近年来银纳米团簇备受瞩目。目前主要采用化学合成法制备荧光银纳米团簇，但存在反应条件苛刻，费时费力，产率低，耗费高，不适于大批量生产且反应过程依赖于化学试剂，会污染环境的问题。本发明采用生物法合成荧光银纳米团簇，反应无需添加化学还原剂，降低了环境污染，具有生物相容性，对环境和细胞无毒无害的优点，同时对Cr6+具有灵敏性，准确性，高选择性，可实现环境中Cr6+的痕量检测。
本发明一种基于荧光猝灭作用的新型荧光银纳米团簇快速探测Cr6+的方法，比传统的依靠荧光峰强度变化或峰值偏移等探测的方法可以实现更精确，更快速，更直观的Cr6+检测且检测过程简便、快速，检测结果准确。本发明利用酵母菌制备的银纳米团簇大小均匀、稳定性好、水溶性好，由于制备过程不添加化学还原剂，因此合成步骤简单、制备方便、成本低。
发明内容
本发明的第一个目的是提供一种绿色荧光银纳米团簇探针。
本发明的第二个目的是提供一种绿色荧光银纳米团簇探针的制备方法。
本发明的第三个目的是提供一种基于所述的具有荧光的银纳米团簇探针在痕量Cr6+的定量检测中的应用方法，该方法的选择性专一，灵敏度高，成本低。
为实现本发明的第一个目的，本发明提供的一种绿色荧光银纳米团簇探针，是以酵母菌作为模板和保护剂，利用酵母菌分泌的酶代替常用的还原剂比如NaBH4，通过生物法制备得到。
为实现本发明的第二个目的，本发明提供的一种绿色荧光银纳米团簇探针的制备方 法，包括如下步骤：
(1)耐银酵母菌的筛选：刮取保存在4℃YPD固体培养基上的酵母菌接种到含有0.2mmol/L硝酸银的YPD液体培养基中，于28-30℃下培养24-30h，然后取1-5mL菌液接种 到含有0.4mmol/L硝酸银的YPD液体培养基中，于28-30℃下培养24-30h，依次提高硝酸银 的浓度至1.0mmol/L。最终得到耐银的酵母菌活化菌株；
(2)取1mL活化的菌株，接种到300mL硝酸银浓度为0.5-1.0mmol/L YPD液体培养基中，于28-30℃、130-180rpm恒温振荡培养2-5天；
(3)用超声波细胞破碎仪对步骤(2)的混合培养液超声破碎处理；
(4)将步骤(3)得到的混合溶液置于4度离心机中，5000-6000r/min，离心5min，收集上清液；
(5)将步骤(4)得到的混合溶液经0.22或0.45μm的滤膜过滤，70℃烘箱中静置8-12h， 最终得到荧光银纳米团簇探针。
值得说明的是：本发明提到的酵母菌为季也蒙毕赤酵母Meyerozymaguilliermondii ZJC-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北 辰路1号院3号，保藏日期为2018年12月17日，保藏编号为CGMCC No：16956。
条件优选：步骤(1)中的酵母菌于28℃下培养24h，每次取2mL菌液接种到含有硝酸银的YPD液体培养基中；步骤(2)中硝酸银浓度为1.0mmol/L，混合培养液于28℃、150rpm 恒温振荡培养3天；步骤(3)中超声波细胞破碎仪工作参数为超声15s，间隔5s，温度0℃，功率80％，总时间30min；步骤(4)中离心是以5000r/min转速离心5min；步骤(5)中混合溶液经0.45μm的滤膜过滤，于70℃烘箱中静置12h。
为实现本发明的第三个目的，将荧光银纳米团簇探针用于Cr6+的定量检测中，检测方法为：荧光银纳米团簇溶液和不同浓度的Cr6+标准溶液以体积为1：10的比例加入到荧光比色皿中，以370nm为激发波长，测定其荧光光谱，获得荧光强度与Cr6+浓度的线性关系。然后向荧光银纳米团簇溶液加入待检测样品，通过荧光强度的变化定量检测待测样品中Cr6+的浓度。
本发明的创新机理是：
(1)设计发绿光的银纳米团簇
本发明不采用传统的化学合成法，而是利用操作简单且环保的微生物(酵母菌)合成绿色荧光银纳米团簇。以酵母菌作为模板和保护剂，利用酵母菌含有的活性成分代替常用的还原剂比如NaBH4，通过生物法制备得到。在加入银离子的液体培养基中，酵母菌为适应恶劣的生存条件产生应激反应分泌活性物质将银离子还原。当激发波长为370nm时，在388nm和 474nm处各有一个荧光吸收峰。
(2)银纳米团簇的制备方法
取1mL活化的耐银菌株，接种到300mL硝酸银浓度为1.0mmol/L YPD液体培养基中，于28℃、150rpm恒温振荡培养3～5天，用超声波细胞破碎仪对混合培养液超声破碎后，置于4度离心机中，5000r，离心5min，收集上清液并经0.45μm滤膜过滤，70℃烘箱中静置8-12h，即得荧光银纳米团簇。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
(1)以酵母菌作为模板和保护剂，利用酵母菌含有的活性成分代替常用的还原剂比如 NaBH4，通过生物法制备得到银纳米团簇。绿色环保，制备方法简单，省时省力，且酵母菌容易培养，成本低廉。
(2)采用生物法制得的荧光银纳米团簇探针尺寸小、光稳定性强、荧光强度高、毒副作用小，具有良好的生物相容性，在生物成像、生物标记、化学传感、环境保护等领域有广阔的应用前景。
(3)本发明制备的荧光银纳米团簇探针，可实现痕量Cr6+的定量检测。荧光银纳米团簇探针具有良好的绿色发光性能，对Cr6+具有高灵敏度和专一性，可以避免其它金属离子的干扰，可将其用于构建检测Cr6+的传感体系。
附图说明
图1为实施例1制备绿色荧光银纳米团簇探针的透射电镜图；
图2为实施例1制备绿色荧光银纳米团簇探针溶液的荧光-紫外图，图中a为紫外可见吸收光谱图，b为荧光光谱图；
图3为实施例2荧光银纳米团簇探针溶液加入不同金属离子时荧光峰强度的变化(F0-F)/F0图；
图4为实施例3荧光银纳米团簇探针溶液随Cr6+浓度的变化其荧光峰强度的变化；
图5为实施例3荧光银纳米团簇探针溶液与浓度范围为0-100μmol/LCr6+之间的线性关系；
图6为实施例4荧光银纳米团簇探针溶液在不同pH值下荧光峰强度的变化曲线；
图7为实施例5其他金属离子对荧光银纳米团簇探针溶液检测Cr6+的干扰实验的荧光峰强度的变化(F0-F)/F0图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合附图对本发明作进一步地详细描述。本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。
实施例1：
绿色荧光银纳米团簇探针的制备：
(1)耐银酵母菌的筛选：刮取保存在4℃YPD固体培养基上的酵母菌接种到含有0.2mmol/L硝酸银的YPD液体培养基中，于28℃下培养24h，然后取2mL菌液接种到含有0.4mmol/L硝酸银的YPD液体培养基中，于28℃下培养24h，依次提高硝酸银的浓度至1.0mmol/L。最终得到耐银的酵母菌活化菌株；
(2)取1mL活化的菌株，接种到300mL硝酸银浓度为1.0mmol/L YPD液体培养基中，于28℃、150rpm恒温振荡培养3天；
(3)用超声波细胞破碎仪对步骤(2)的混合培养液超声破碎处理；
(4)将步骤(3)得到的混合溶液置于4度离心机中，5000r/min，离心5min，收集上清液；
(5)将步骤(4)得到的混合溶液经0.45μm的滤膜过滤，70℃烘箱中静置12h，最终得到荧光银纳米团簇探针。
步骤(1)所述YPD斜面培养基为由YPD固体培养基制成的斜面培养基。
YPD液体培养基(100mL)：称量2g葡萄糖、1g Yeast Extract、2g蛋白胨并补充蒸馏水至100mL；YPD固体培养基(100mL)：称量2g葡萄糖、1g Yeast Extract、2g蛋白胨、2g 琼脂粉并补充蒸馏水至100mL；
制备的荧光银纳米团簇探针的透射电镜图见图1，表明制备的荧光银纳米团簇被酵母菌分泌的活性物质包裹，分布较为均匀。制备的荧光银纳米团簇探针溶液的紫外-荧光图见图2，其中荧光图b表明制备的荧光银纳米团簇探针在固定激发波长为370nm时，在388nm 和474nm处各有一个发射峰。
实施例2：
金属离子对实施例1制备的荧光银纳米团簇探针溶液的荧光峰强度的影响实验：取9mL 实施例1制备的荧光银纳米团簇探针溶液(0.2mg/mL)，分别加入1mL10种不同的金属离子(Hg2+，Cu2+，Cr6+，Mg2+，K+，Na+，Ca2+，Fe3+，Cd2+，Pb2+)，所有金属离子的浓度均为 500μmol/L，在室温下进行荧光光谱检测。根据荧光强度，检测不同金属离子对荧光银纳米团簇探针溶液的荧光强度的影响。
金属离子对荧光银纳米团簇探针溶液的荧光峰强度的影响见图3：在370nm激发波长下，根据1-F/F0得出：Cr6+使荧光猝灭，其他金属离子对荧光强度影响较小，说明本发明制备的荧光银纳米团簇探针溶液能够特异性检测Cr6+(其中F：含不同金属离子的荧光银纳米团簇探针溶液的荧光强度，F0：荧光银纳米团簇探针溶液的荧光强度)。
实施例3
实施例1制备的荧光银纳米团簇探针对Cr6+检测的实验：将实施例1制备的荧光银纳米团簇探针加入到10mL水溶液中，得到浓度为0.2mg/mL的荧光银纳米团簇探针溶液，滴加不同浓度的Cr6+到该溶液中，固定激发波长为370nm，在室温下进行荧光光谱检测，根据474nm 左右的荧光强度，检测Cr6+对银纳米团簇探针溶液的荧光强度的影响。
Cr6+对荧光银纳米团簇探针溶液的荧光强度的影响见图4：在370nm激发下，荧光银纳米团簇探针溶液在加入不同浓度的Cr6+后，荧光强度逐渐减小，最后荧光峰基本趋于平滑；其中0-100μmol/L分别是0，1，5，10，20，30，40，60，80，100μmol/L。Cr6+对荧光银纳米团簇探针溶液荧光强度影响的荧光光谱图，说明本发明制备的荧光银纳米团簇探针溶液能够实现对痕量Cr6+的检测。
此外，本发明制备的荧光银纳米团簇探针溶液在474nm的荧光强度的变化与Cr6+的浓度呈线性关系，如图5所示，Cr6+线性方程为(F0-F)/F0＝0.0078[Cr6+]+0.119，线性范围为0-100μmol/L，检出限为184nmol/L(信噪比为S/N＝3)。说明本发明制备的荧光银纳米团簇探针溶液能够实现对Cr6+的定量检测。
实施例4
pH值对实施例1制备的荧光银纳米团簇探针的荧光强度的影响实验：实施例1制备的荧光银纳米团簇探针配制成不同pH值的溶液，浓度为0.2mg/mL，分别向不同pH值的混合液中加入500μmol/LCr6+。固定激发波长为370nm，在室温下进行荧光光谱检测，根据474nm左右的荧光峰强度，判断pH值对荧光银纳米团簇探针溶液检测Cr6+的荧光强度的影响。
pH值对荧光银纳米团簇探针溶液检测Cr6+的荧光强度的影响曲线见图6：在370nm激发下，以F/F0为纵坐标，发现pH值对荧光银纳米团簇探针溶液检测Cr6+的结果并未产生影响，pH值在6-11范围内，荧光强度变化差别不大。因而，本发明制备的荧光银纳米团簇探针溶液可在6-11范围内任意pH值条件下应用于Cr6+的检测。
实施例5
其他金属离子对实施例1制备的荧光银纳米团簇探针对Cr6+检测的干扰实验：将实施例 1制备的荧光银纳米团簇探针配制为浓度为0.2mg/mL的荧光银纳米团簇探针溶液，滴加 1mL500μmol/L的Cr6+到该溶液中。在此基础上，分别加入1mL5mmol/L的其他金属离子(Hg2+， Cu2+，Mg2+，K+，Na+，Ca2+，Fe3+，Cd2+，Pb2+)。固定激发波长为370nm，在室温下进行荧光光谱检测，根据474nm左右的荧光强度，检测其他金属离子对银纳米团簇探针溶液检测 Cr6+的荧光强度的影响。
其他金属离子对银纳米团簇探针溶液检测Cr6+的荧光强度的影响见图7：在370nm激发波长下，根据1-F/F0得出：其他几种金属离子与Cr6+同时存在时，不干扰荧光银纳米团簇对Cr6+的检测(其中F：含不同金属离子的荧光银纳米团簇探针溶液的荧光强度，F0：荧光银纳米团簇探针溶液的荧光强度)。说明本发明制备的荧光银纳米团簇探针溶液能够实现对痕量Cr6+的特异性检测。

Claims (10)

1.一种荧光银纳米团簇探针的制备方法，其特征在于：将筛选的耐银酵母菌菌株于加入硝酸银的YPD培养基中培养2-5天，菌液经超声破碎处理后离心，收集的上清液经过滤、烘干，得到荧光银纳米团簇；所述的酵母菌筛选自季也蒙毕赤酵母Meyerozymaguilliermondii ZJC-1，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰路1号院3号，保藏日期为2018年12月17日，保藏编号为CGMCC No：16956；所述的硝酸银浓度为1.0mmol/L。
2.根据权利要求1所述的荧光银纳米团簇探针的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)耐银酵母菌的筛选：刮取保存在4℃YPD固体培养基上的酵母菌接种到含有0.2mmol/L硝酸银的YPD液体培养基中，于28-30℃下培养24-30h，然后取1-5mL菌液接种到含有0.4mmol/L硝酸银的YPD液体培养基中，于28-30℃下培养24-30h，依次提高硝酸银的浓度至1.0mmol/L，最终得到耐银的酵母菌活化菌株；
(2)取1mL活化的菌株，接种到300mL硝酸银浓度为1.0mmol/L YPD液体培养基中，于28-30℃、130-180rpm恒温振荡培养2-5天；
(3)用超声波细胞破碎仪对步骤(2)的混合培养液超声破碎处理；
(4)将步骤(3)得到的混合溶液置于4℃离心机中，5000-6000r/min，离心5min，收集上清液；
(5)将步骤(4)得到的上清液经0.22或0.45μm的滤膜过滤，70℃烘箱中静置8-12h，最终得到荧光银纳米团簇探针。
3.根据权利要求2所述的荧光银纳米团簇探针的制备方法，其特征在于：步骤(1)中的酵母菌于28℃下培养24h，每次取2mL菌液接种到含有硝酸银的YPD液体培养基中。
4.根据权利要求2所述的荧光银纳米团簇探针的制备方法，其特征在于：步骤(2)中硝酸银浓度为1.0mmol/L，混合培养液于28℃、150rpm恒温振荡培养3天。
5.根据权利要求2所述的荧光银纳米团簇探针的制备方法，其特征在于：步骤(3)中超声波细胞破碎仪工作参数为超声15s，间隔5s，温度0℃，功率80％，总时间30min。
6.根据权利要求2所述的荧光银纳米团簇探针的制备方法，其特征在于：步骤(4)中离心是以5000r/min转速离心5min。
7.根据权利要求2所述的荧光银纳米团簇探针的制备方法，其特征在于：步骤(5)中上清液经0.45μm的滤膜过滤，于70℃烘箱中静置12h。
8.一种采用权利要求1-7任一项所述的制备方法制得的荧光银纳米团簇探针。
9.一种权利要求8所述的荧光银纳米团簇探针在制备Cr6+检测试剂中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于将荧光银纳米团簇探针制备的试剂用于Cr6+的检测中，检测方法为：荧光银纳米团簇溶液和浓度为0-100μmol/L的Cr6+标准溶液以体积为1：10的比例加入到荧光比色皿中，以370nm为激发波长，测定其荧光光谱，获得荧光强度与Cr6+浓度的线性关系，然后向荧光银纳米团簇溶液加入待检测样品，通过荧光强度的变化定量检测待测样品中Cr6+的浓度。
CN202010409619.3A 2020-05-14 2020-05-14 一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用 Active CN111549076B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010409619.3A CN111549076B (zh) 2020-05-14 2020-05-14 一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010409619.3A CN111549076B (zh) 2020-05-14 2020-05-14 一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111549076A CN111549076A (zh) 2020-08-18
CN111549076B true CN111549076B (zh) 2023-04-28

Family

ID=72006383

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010409619.3A Active CN111549076B (zh) 2020-05-14 2020-05-14 一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111549076B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115780823B (zh) * 2022-12-16 2024-03-15 琼台师范学院 一种荧光银纳米簇的制备方法及应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050121301A (ko) * 2004-06-22 2005-12-27 경북대학교 산학협력단 실버할라이드 나노클러스터 및 그 제조 방법
WO2012009433A1 (en) * 2010-07-13 2012-01-19 Brown University Antipathogenic surfaces having selenium nanoclusters
CN103642844A (zh) * 2013-12-13 2014-03-19 东北林业大学 一种利用芽孢杆菌体内还原制备纳米银颗粒的方法
CN105345025A (zh) * 2015-11-04 2016-02-24 山西大学 一种绿色荧光银纳米团簇探针及其制备方法和应用
CN108372312A (zh) * 2018-03-23 2018-08-07 山西大学 一种绿色荧光银纳米团簇及其制备方法与应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050121301A (ko) * 2004-06-22 2005-12-27 경북대학교 산학협력단 실버할라이드 나노클러스터 및 그 제조 방법
WO2012009433A1 (en) * 2010-07-13 2012-01-19 Brown University Antipathogenic surfaces having selenium nanoclusters
CN103642844A (zh) * 2013-12-13 2014-03-19 东北林业大学 一种利用芽孢杆菌体内还原制备纳米银颗粒的方法
CN105345025A (zh) * 2015-11-04 2016-02-24 山西大学 一种绿色荧光银纳米团簇探针及其制备方法和应用
CN108372312A (zh) * 2018-03-23 2018-08-07 山西大学 一种绿色荧光银纳米团簇及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Fungal silver nanoparticles: synthesis, application and challenges;Xixi Zhao等;《Critical Reviews in Biotechnology》;20171218;第817-835页 *
人工构建类生物体系可控合成金属纳米粒子;张明曦;《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）工程科技I辑》;20101015;B020-69 *
荧光银纳米团簇的生物合成及其在痕量六价铬检测中的应用;田野 等;《微生物学报》;20210128;第740-749页 *
蜡螟肠道降解聚乙烯微生物的分离及其效果的研究;池明眼;《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊）基础科学辑》;20200115;A006-808 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111549076A (zh) 2020-08-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Tuzen et al. Biosorption of copper (II), lead (II), iron (III) and cobalt (II) on Bacillus sphaericus-loaded Diaion SP-850 resin
Haraguchi Multielement profiling analyses of biological, geochemical, and environmental samples as studied by analytical atomic spectrometry
Garnier et al. Iron isotope fingerprints of redox and biogeochemical cycling in the soil-water-rice plant system of a paddy field
AU2005217026B2 (en) Measuring contamination
CN107238599A (zh) 一种基于发光细菌法的土壤综合毒性检测方法
CN103822886A (zh) 生物腐植酸的分析检测及其碳系数的测定方法
CN111549076B (zh) 一种荧光银纳米团簇探针的制备方法与应用
CN101724697A (zh) 一种荧光定量pcr技术筛选低富集镉花生品种的方法
CN110438115A (zh) 一种提高铅DNAzyme稳定性的固定化酶方法及应用
McKay et al. Consideration of the bioavailability of iron in the North American Great Lakes: development of novel approaches toward understanding iron biogeochemistry
Shrestha et al. Edaphic factors and elevation gradient influence arbuscular mycorrhizal colonization and spore density in the rhizosphere of Shorea robusta Gaertn
CN111607391B (zh) 一种荧光Ag/AgCl纳米复合材料的制备方法与应用
CN107653190B (zh) 一种能在培养基上简单高效筛选产绿原酸菌株的方法
CN109745652A (zh) 固定化微生物降解有机磷的方法及其微型化装置和应用
CN107356567B (zh) 一种从厌氧氨氧化污泥中提取和测定亚铁血红素的方法
Silva et al. Assessment of fatty acid as a differentiator of usages of urban soils
CN108642125A (zh) 一种基于微孔板的肌醇定量检测方法
CN112358485B (zh) 一种用于植物根系中铜离子可视化检测的荧光探针及其制备方法
CN113426828A (zh) 一种锶污染土壤的修复方法
CN111024670B (zh) 一种基于pea荧光曲线测定水体初级生产力的方法
CN114216894B (zh) 基于表面增强拉曼光谱技术快速鉴定土壤中木霉菌的方法
CN115181678B (zh) 一种桦褐孔菌发酵溶胞物的制备方法及其应用
US20220244232A1 (en) Method for detecting and quantifying labile zinc
CN102061331B (zh) 一种快速筛选泌酸菌的方法
CN110261267B (zh) 一种渔用光合细菌制剂产品的检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant