CN115791573A - 一种血细胞分析仪的白细胞检测方法 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了一种血细胞分析仪的白细胞检测方法,本申请通过第一检测模块对白细胞样本进行检测得到白细胞直方图并且通过计算白细胞直方图得到嗜碱性粒细胞的计数值,然后通过第二检测模对白细胞样本进行检测得到四类粒子团的二维分布的散点图,分别得到单核细胞粒子团、中性粒细胞粒子团和嗜酸性粒细胞粒子团数量,最终得出淋巴细胞数量、单核细胞数量、中性粒细胞数量、嗜酸细胞数量和嗜碱性粒细胞数量计算白细胞五分类比值,通过上述方法可以准确检测白细胞内各种细胞分类,并且本申请的计算方法简单,计算成本低,因此在低成本的情况下也可以得到精准的检测结果。
Description
技术领域
本发明属于白细胞检测技术领域,尤其涉及一种血细胞分析仪的白细胞检测方法。
背景技术
血细胞分析仪是细胞生物学检验中应用非常广泛的仪器之一,在临床、科研和教学等领域有重要的应用和科研价值。一些血细胞分析仪可以对白细胞、红细胞和血小板进行分类和计数,具体的,对于白细胞,白细胞包括:淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞这五类细胞,因此还可以被进一步分类和计数,对白细胞进行检测(例如白细胞计数和白细胞分类)作为血细胞分析仪核心功能之一,一直是工程研究的热点和难点。
一般地,高端的血细胞分析仪可以对白细胞进行比较准确的检测,但是低端的血细胞分析仪,由于成本所限,因此相较高端的血细胞分析仪,其对白细胞进行检测的准确性和性能有所下降,以白细胞分类为例,在低端血细胞分析仪上一般只能对白细胞完成三分类,分成:小白细胞群(主要包括淋巴细胞)、中间白细胞群(主要包括单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)和大白细胞群(主要包括中性粒细胞),中间白细胞群内包含的:单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞在低端血细胞分析仪上无法通过检测被进一步有效区分,而高端血细胞分析仪则可以对白细胞进行较准确的四分类或五分类。
如上所述,高端血细胞分析仪可以对白细胞进行比较准确的检测,但由于仪器和检测成本都比较高,因此这并非所有医院和患者都能负担得起。另一方面,低端血细胞分析仪由于仪器和检测成本都比较低,因此比较受到医院和患者的欢迎,但是如上所述,低端血细胞分析仪对白细胞进行检测的性能和准确性相比于高端机型打了一定折扣,并不能满足高端用户的需求或结果要求精确的场合。
一些解决方案中,医院可以同时购置高、低端的血液细胞分析仪来解决此问题,但这显然不是一个比较优的方案。
发明内容
(一)发明目的
为了克服以上不足,本发明的目的在于提供一种血细胞分析仪的白细胞检测方法,以解决现有的低端血细胞分析仪对白细胞进行检测时的性能和准确性不能满足高端用户的需求或结果要求精确的场合的技术问题。
(二)技术方案
为实现上述目的,本申请提供的技术方案如下:
一种血细胞分析仪的白细胞检测方法,包括:
基于第一检测模块对白细胞样本进行检测并且生成白细胞直方图,其中,白细胞直方图的的横坐标为白细胞中各粒子的体积,纵坐标为对应体积的粒子数量,其中白细胞直方图中在横坐标为30处设置了干扰和小细胞碎片阈值线BA1,在横坐标为300处设置了嗜碱性粒细胞阈值线BA2,在白细胞直方图最末端数据对应的横坐标处设置了干扰和大细胞碎片阈值线BA3,将嗜碱性粒细胞阈值线BA2与干扰和大细胞碎片阈值线BA3之间形成的面积值除以干扰和小细胞碎片阈值线BA1和嗜碱性粒细胞阈值线BA2之间的面积值得到嗜碱性粒细胞的计数值;
基于第二检测模块对白细胞样本进行检测得到生成四类粒子团的二维分布的散点图,其中,四类粒子团分别为单核细胞粒子团、中性粒细胞粒子团和嗜酸性粒细胞粒子团;
本申请通过第一检测模块对白细胞样本进行检测得到白细胞直方图并且通过计算白细胞直方图得到嗜碱性粒细胞的计数值,然后通过第二检测模对白细胞样本进行检测得到四类粒子团的二维分布的散点图,分别得到单核细胞粒子团、中性粒细胞粒子团和嗜酸性粒细胞粒子团数量,最终得出淋巴细胞数量、单核细胞数量、中性粒细胞数量、嗜酸细胞数量和嗜碱性粒细胞数量计算白细胞五分类比值,通过上述方法可以准确检测白细胞内各种细胞分类,并且本申请的计算方法简单,计算成本低,因此在低成本的情况下也可以得到精准的检测结果。
在一些实施例中,基于第二检测模块对白细胞进行检测得到生成四类粒子团的二维分布的散点图之前,还包括:
将全血样品与染色剂充分混匀并且在35℃条件下进行孵育;
将染色后的样本引导进入鞘流池;
经过60mm红宝石小孔对鞘流池内的样本进行电阻法分析得到细胞体积大小;
将完成电阻法分析的样本引入到直径为42mm的第二鞘流检测通道中进行光吸收率测定得到细胞形态和细胞中内容物等情况;
根据细胞体积大小、细胞形态以及细胞中内容物等生成二维分布的散点图。
在一些实施例中,第一检测模块上设置有微通孔,基于第一检测模块对白细胞进行检测并且生成白细胞直方图包括:获取白细胞样本中的各粒子经过微通孔时收集到的对应的电脉冲值大小以及各电脉冲值出现的频次,按照脉冲值的大小判断每个粒子的体积,安装各脉冲值出现的频次计算各粒子的粒子数,根据各粒子的体积以及各粒子的粒子数生成白细胞直方图。
附图说明
图1是本发明的血细胞分析仪的白细胞检测方法得出的白细胞直方图;
图2是本发明的血细胞分析仪的白细胞检测方法得出的二维分布的散点图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明了,下面结合具体实施方式并参照附图,对本发明进一步详细说明。应该理解,这些描述只是示例性的,而并非要限制本发明的范围。此外,在以下说明中,省略了对公知结构和技术的描述,以避免不必要地混淆本发明的概念。
本发明提供的一种血细胞分析仪的白细胞检测方法,包括:
基于第一检测模块对白细胞样本进行检测并且生成白细胞直方图,其中,白细胞直方图的的横坐标为白细胞中各粒子的体积,纵坐标为对应体积的粒子数量,其中白细胞直方图中在横坐标为30处设置了干扰和小细胞碎片阈值线BA1,在横坐标为300处设置了嗜碱性粒细胞阈值线BA2,在白细胞直方图最末端数据对应的横坐标处设置了干扰和大细胞碎片阈值线BA3,将嗜碱性粒细胞阈值线BA2与干扰和大细胞碎片阈值线BA3之间形成的面积值除以干扰和小细胞碎片阈值线BA1和嗜碱性粒细胞阈值线BA2之间的面积值得到嗜碱性粒细胞的计数值;
基于第二检测模块对白细胞样本进行检测得到生成四类粒子团的二维分布的散点图,计算四类粒子团对应的细胞数量,其中,四类粒子团分别为单核细胞粒子团、中性粒细胞粒子团和嗜酸性粒细胞粒子团;
基于得出淋巴细胞数量、单核细胞数量、中性粒细胞数量、嗜酸细胞数量和嗜碱性粒细胞数量计算白细胞五分类比值。
具体的,第一检测模块也可以称为BASO通道,上设置有微通孔,基于第一检测模块对白细胞进行检测并且生成白细胞直方图包括:获取白细胞样本中的各粒子经过微通孔时收集到的对应的电脉冲值大小以及各电脉冲值出现的频次,按照脉冲值的大小判断每个粒子的体积,安装各脉冲值出现的频次计算各粒子的粒子数,根据各粒子的体积以及各粒子的粒子数生成白细胞直方图。
具体的,第二检测模块也可以称为DIFF通道,基于第二检测模块对白细胞进行检测得到生成四类粒子团的二维分布的散点图之前,还包括:
将全血样品与染色剂充分混匀并且在35℃条件下进行孵育;
将染色后的样本引导进入鞘流池;
经过60mm红宝石小孔对鞘流池内的样本进行电阻法分析得到细胞体积大小;
将完成电阻法分析的样本引入到直径为42mm的第二鞘流检测通道中进行光吸收率测定得到细胞形态和细胞中内容物等情况;
根据细胞体积大小、细胞形态以及细胞中内容物等生成二维分布的散点图。
具体的,将全血样品与染色剂充分混匀并且在35℃条件下进行孵育的作用是:
①溶解红细胞;
②对单核细胞的初级颗粒、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的特异颗粒进行不同程度的染色,同时对细胞的膜(细胞膜、核膜、颗粒膜)也进行不同程度的着色;
③固定细胞的形态,使其保持自然状态,由于淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞对染色剂的着色程度不同、每种细胞特定的细胞核形态和颗粒的结构造成光散射的强度不同,产生了特定的吸光率。
具体的,染色后的样本被引导进入鞘流池进行双鞘流分析,首先经过60mm红宝石小孔进行电阻法分析,用于判断细胞体积大小,然后样本迅速进入直径为42mm的第二鞘流检测通道进行光吸收率测定,以判断细胞形态和内容物等情况,根据每类细胞在这两个分析参数上所表现出来的特性,形成二维分布的散点图,在此通道内可完成白细胞中淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞群的分类。
优选的,此通道内在分析的同时还能够检测两群异常白细胞亚群:巨大未成熟细胞(LIC)百分比及绝对值,异型淋巴细胞(ALY)百分比及绝对值
优选的,第一检测模块采用恒定负压通过阻抗法,按照电脉冲信号中每个脉冲的大小模拟细胞大小,经过核心算法还可以得出去除干扰后白细胞总数量和体积分布直方图。
具体的,安装有本发明本发明检测方法的血细胞分析仪还可以包括:交互模块、交互模块与第一检测模块和第二检测模块电连接,用户通过交互模块可以选择只启动第一检测模块或同时启动第一检测模块和第二检测模块,启用不同检测模式。
低精度模式:只启用第一检测模块,测量样本的白细胞数量,通过阻抗法对样本的嗜碱性粒细胞进行测量,第一检测模块设置有微通孔,样本中的淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞通过微通孔得到对应的电脉冲信号(第一测量数据),按照电脉冲信号中每个脉冲的大小(粒子的体积)以及其出现的频次(与粒子的体积对应的粒子数)计算白细胞数量。
高精度模式:同时开启第一检测模块,第二检测模块,启用双检测模块数据校验算法;得出白细胞总数、白细胞体积分布直方图和白细胞LMNE散点图。低精度模式:只开启第一检测模块,得出白细胞总数和白细胞体积分布直方图。
应当理解的是,本发明的上述具体实施方式仅仅用于示例性说明或解释本发明的原理,而不构成对本发明的限制。因此,在不偏离本发明的精神和范围的情况下所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。此外,本发明所附权利要求旨在涵盖落入所附权利要求范围和边界、或者这种范围和边界的等同形式内的全部变化和修改例。
Claims (3)
1.一种血细胞分析仪的白细胞检测方法,其特征在于,包括:
基于第一检测模块对白细胞样本进行检测并且生成白细胞直方图,其中,所述白细胞直方图的的横坐标为白细胞中各粒子的体积,纵坐标为对应体积的粒子数量,其中所述白细胞直方图中在横坐标为30处设置了干扰和小细胞碎片阈值线BA1,在横坐标为300处设置了嗜碱性粒细胞阈值线BA2,在白细胞直方图最末端数据对应的横坐标处设置了干扰和大细胞碎片阈值线BA3,将嗜碱性粒细胞阈值线BA2与干扰和大细胞碎片阈值线BA3之间形成的面积值除以干扰和小细胞碎片阈值线BA1和嗜碱性粒细胞阈值线BA2之间的面积值得到嗜碱性粒细胞的计数值;
基于第二检测模块对白细胞样本进行检测得到生成四类粒子团的二维分布的散点图,计算四类粒子团对应的细胞数量,其中,所述四类粒子团分别为单核细胞粒子团、中性粒细胞粒子团和嗜酸性粒细胞粒子团;
基于得出淋巴细胞数量、单核细胞数量、中性粒细胞数量、嗜酸细胞数量和嗜碱性粒细胞数量计算白细胞五分类比值。
2.根据权利要求1所述的血细胞分析仪的白细胞检测方法,其特征在于,所述基于第二检测模块对白细胞进行检测得到生成四类粒子团的二维分布的散点图之前,还包括:
将全血样品与染色剂充分混匀并且在35℃条件下进行孵育;
将染色后的样本引导进入鞘流池;
经过60mm红宝石小孔对鞘流池内的样本进行电阻法分析得到细胞体积大小;
将完成电阻法分析的样本引入到直径为42mm的第二鞘流检测通道中进行光吸收率测定得到细胞形态和细胞中内容物等情况;
根据所述细胞体积大小、所述细胞形态以及细胞中内容物等生成二维分布的散点图。
3.根据权利要求1所述的血细胞分析仪的白细胞检测方法,其特征在于,所述第一检测模块上设置有微通孔,所述基于第一检测模块对白细胞进行检测并且生成白细胞直方图包括:获取白细胞样本中的各粒子经过微通孔时收集到的对应的电脉冲值大小以及各电脉冲值出现的频次,按照脉冲值的大小判断每个粒子的体积,安装各脉冲值出现的频次计算各粒子的粒子数,根据各粒子的体积以及各粒子的粒子数生成白细胞直方图。
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