CN115746168A - 一种透明质酸钾及其用途 - Google Patents
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Abstract
本申请提供一种透明质酸钾,其分子量为5kDa~2000kDa,特性黏数为0.50dl/g~29.50dl/g。本申请还提供所述透明质酸钾在抗氧化、抗光老化、祛皱中的用途。本申请的透明质酸钾对皮肤具有抗老功效,能够抗氧化,有效改善老化或初老皮肤的状态,维持皮肤年轻态。本申请还发现透明质酸钾对紫外产生的损伤具有明显防护和修复作用,能够有效抵抗紫外线造成皮肤光老化,适用于防晒或晒后修复。本申请提出透明质酸钾具有祛除皮肤皱纹的作用,适用于面部、眼角或其他部位的由于老化导致的皮肤皱纹问题的恢复。
Description
技术领域
本申请属于皮肤护理技术领域,具体地,涉及一种透明质酸钾及其用途。
背景技术
随着社会的发展和人们对于美追求的提升,抗衰老逐渐成为一项新型学科。遏制衰老的进程,并预防和延缓皮肤老化的发生,进而提高人们的生活质量和健康水平。人体衰老是一个逐渐积累的过程,老化会破坏皮肤结构完整性,同时影响皮肤细胞的正常生理功能。老化首先表现为皮肤的水分散失,细胞由于失水进而角质层变薄失去光泽;进一步胶原蛋白、弹性纤维等流失,皮肤失去弹性并产生细纹。
影响衰老的因素有很多,主要分为内因和外因两大类。内因是指基因、遗传等先天因素决定的皮肤发展自然进程;外因指由环境因素或生活方式造成的慢性长期损伤,其中最主要的是紫外线造成的皮肤光老化。
目前市场上存在的抗衰老成分有很多,最常见的视黄醇(A醇)需要达到一定的浓度才能起到效果,而人体需要一定过程建立高浓度耐受,且在此过程中皮肤会出现一定的损伤。多肽类物质由于其合成方法为化学合成法,价格高昂的同时消费者对于化学合成物质接受能力有限,因此影响力一般。
透明质酸钾是透明质酸的钾盐,通过钾离子与透明质酸钠羧基上的钠离子进行离子交换制得,专利CN114133465A一种透明质酸钾的制备方法及所得产品和应用中提供了一种透明质酸钾的制备技术。目前科研领域关于透明质酸钾相关文献报道较少,功效研究不明确,对于透明质酸钾在皮肤抗老方面的作用还未见报道,同时具有抗老功效的透明质酸钾原料在市场上不多见。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本申请提供一种透明质酸钾及其在抗氧化、抗光老化以及皮肤去皱中的用途。
具体来说,本申请涉及如下方面:
1.一种透明质酸钾,其特征在于,所述透明质酸钾的分子量为5kDa~2000kDa,特性黏数为0.50dl/g~29.50dl/g,优选的,所述透明质酸钾的分子量为30kDa~2000kDa,特性黏数为1.12dl/g~29.50dl/g。
2.根据项1所述的透明质酸钾,其特征在于,所述透明质酸钾的分子量为500kDa~2000kDa,特性黏数为10.00dl/g~29.50dl/g。
3.根据项1所述的透明质酸钾,其特征在于,所述透明质酸钾的分子量为1500kDa~1800kDa,特性黏数为23.65dl/g~27.26dl/g。
4.根据项1-3中任一项所述的透明质酸钾,其特征在于,所述透明质酸钾的钾离子含量为3-10wt%。
5.根据项1-4中任一项所述的透明质酸钾在抗氧化中的用途。
6.根据项1-4中任一项所述的透明质酸钾在抗光老化中的用途。
7.根据项1-4中任一项所述的透明质酸钾在祛皱中的用途。
8.一种抗氧化剂产品,其特征在于,所述产品包括项1-4中任一项所述的透明质酸钾。
9.一种抗初老产品,其特征在于,所述产品包括项1-4中任一项所述的透明质酸钾。
10.一种皮肤去皱产品,其特征在于,所述产品包括项1-4中任一项所述的透明质酸钾。
11.一种抗衰产品,其特征在于,所述产品包括项1-4中任一项所述的透明质酸钾。
本申请技术方案取得以下有益效果:
1、本申请的透明质酸钾对皮肤具有抗老功效,能够抗氧化,有效改善老化或初老皮肤的状态,维持皮肤年轻态。
2、本申请的透明质酸钾对紫外产生的损伤具有明显防护和修复作用,能够有效抵抗紫外线造成皮肤光老化,适用于防晒或晒后修复。
3、本申请提出透明质酸钾具有祛除皮肤皱纹作用,适用于面部、眼角或其他部位的由于老化导致的皮肤皱纹问题的恢复。
附图说明
图1显示不同浓度样品的自由基清除率;
图2显示不同样品的自由基清除率;
图3显示不同样品处理后细胞的相对增殖率;
图4显示不同样品处理后细胞的凋亡比例;
图5显示不同样品的眼角皱纹面积相对值。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本申请,应当理解,实施例仅用于进一步说明和阐释本申请,并非用于限制本申请。
除非另外定义,本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料,本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下,以本说明书包括其中定义为准,另外,材料、方法和例子仅供说明,而不具限制性。以下结合具体实施例对本申请作进一步的说明,但不用来限制本申请的范围。
针对现有技术存在的问题,本申请提供一种透明质酸钾及其在抗氧化中的用途。
其中,透明质酸钾是透明质酸的钾盐,通过钾离子与透明质酸钠羧基上的钠离子进行离子交换制得。
抗氧化是指抗氧化自由基的简称。人体因为与外界的持续接触,包括呼吸(氧化反应)、外界污染、放射线照射等因素不断的在人体体内产生自由基。科学研究表明,癌症、衰老或其它疾病大都与过量自由基的产生有关联,所以抗氧化被保健品、化妆品企业列为主要的研发方向之一,也是市场最重要的功能性诉求之一。
抗氧化就是任何以低浓度存在就能有效抑制自由基的氧化反应的物质,其作用机理可以是直接作用在自由基,或是间接消耗掉容易生成自由基的物质,防止发生进一步反应。人体在不可避免地产生自由基的同时,也在自然产生着抵抗自由基的抗氧化物质,以抵消自由基对人体细胞的氧化攻击。研究证明,人体的抗氧化系统是一个可与免疫系统相比拟的、具有完善和复杂功能的系统,机体抗氧化的能力越强,就越健康,生命也越长。
本申请发现透明质酸钾具有抗氧化作用,特别是羟自由基清除能力比较强。
基于透明质酸钾的抗氧化作用,本申请提供透明质酸钾在抗氧化中的用途。
在一个具体的实施方式中,透明质酸钾分子量为5kDa~2000kDa,例如可以为5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、60kDa、70kDa、80kDa、90kDa、100kDa、150kDa、200kDa、250kDa、300kDa、350kDa、400kDa、450kDa、500kDa、550kDa、600kDa、650kDa、700kDa、750kDa、800kDa、850kDa、900kDa、950kDa、1000kDa、1050kDa、1100kDa、1150kDa、1200kDa、1250kDa、1300kDa、1350kDa、1400kDa、1450kDa、1500kDa、1550kDa、1600kDa、1650kDa、1700kDa、1750kDa、1800kDa、1850kDa、1900kDa、1950kDa、2000kDa,优选为30kDa~2000kDa,进一步优选为500kDa~2000kDa,再进一步优选为1500kDa~1800kDa。
在一个具体的实施方式中,透明质酸钾的特性黏数为0.50dl/g~29.50dl/g,例如可以为0.50dl/g、1.00dl/g、2.00dl/g、3.00dl/g、4.00dl/g、5.00dl/g、6.00dl/g、7.00dl/g、8.00dl/g、9.00dl/g、10.00dl/g、11.00dl/g、12.00dl/g、13.00dl/g、14.00dl/g、15.00dl/g、16.00dl/g、17.00dl/g、18.00dl/g、19.00dl/g、20.00dl/g、21.00dl/g、22.00dl/g、23.00dl/g、24.00dl/g、25.00dl/g、26.00dl/g、27.00dl/g、28.00dl/g、29.50dl/g,优选为1.12dl/g~29.50dl/g,进一步优选为10.00dl/g~29.50dl/g,再进一步优选为23.65dl/g~27.26dl/g。
在一个具体的实施方式中,透明质酸钾的钾离子含量为3-10wt%,例如可以为3.0wt%、4.0wt%、5.0wt%、6.0wt%、7.0wt%、8.0wt%、9.0wt%、10.0wt%。
在一个具体的实施方式中,羟自由基清除能力为通过实验反应评价待测物质清除-OH的能力。羟自由基氧化水杨酸得到2,3-二羟基苯甲酸,其在510nm处有吸收峰,样品加入后,与水杨酸竞争羟自由基,导致2,3-二羟基苯甲酸的生成量减少,因此可用该产物生成的多少来描述待测物质清除-OH的能力。
本申请发现透明质酸钾具有抗光老化的作用。具体地,抗光老化的作用可以通过对紫外修复、对紫外防护的作用体现。
基于该作用,本申请提供透明质酸钾在抗光老化中的用途。
在一个具体的实施方式中,透明质酸钾分子量为5kDa~2000kDa,例如可以为5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、60kDa、70kDa、80kDa、90kDa、100kDa、150kDa、200kDa、250kDa、300kDa、350kDa、400kDa、450kDa、500kDa、550kDa、600kDa、650kDa、700kDa、750kDa、800kDa、850kDa、900kDa、950kDa、1000kDa、1050kDa、1100kDa、1150kDa、1200kDa、1250kDa、1300kDa、1350kDa、1400kDa、1450kDa、1500kDa、1550kDa、1600kDa、1650kDa、1700kDa、1750kDa、1800kDa、1850kDa、1900kDa、1950kDa、2000kDa,优选为30kDa~2000kDa,进一步优选为500kDa~2000kDa,再进一步优选为1500kDa~1800kDa。
在一个具体的实施方式中,透明质酸钾的特性黏数为0.50dl/g~29.50dl/g,例如可以为0.50dl/g、1.00dl/g、2.00dl/g、3.00dl/g、4.00dl/g、5.00dl/g、6.00dl/g、7.00dl/g、8.00dl/g、9.00dl/g、10.00dl/g、11.00dl/g、12.00dl/g、13.00dl/g、14.00dl/g、15.00dl/g、16.00dl/g、17.00dl/g、18.00dl/g、19.00dl/g、20.00dl/g、21.00dl/g、22.00dl/g、23.00dl/g、24.00dl/g、25.00dl/g、26.00dl/g、27.00dl/g、28.00dl/g、29.50dl/g,优选为1.12dl/g~29.50dl/g,进一步优选为10.00dl/g~29.50dl/g,再进一步优选为23.65dl/g~27.26dl/g。
本发明表明透明质酸钾具有祛除皮肤皱纹的用途,所述祛皱是指恢复皮肤平滑度,减少皮肤纹理面积。
基于该作用,本申请提供透明质酸钾在祛除皮肤皱纹中的用途。
在一个具体的实施方式中,透明质酸钾分子量为5kDa~2000kDa,例如可以为5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、60kDa、70kDa、80kDa、90kDa、100kDa、150kDa、200kDa、250kDa、300kDa、350kDa、400kDa、450kDa、500kDa、550kDa、600kDa、650kDa、700kDa、750kDa、800kDa、850kDa、900kDa、950kDa、1000kDa、1050kDa、1100kDa、1150kDa、1200kDa、1250kDa、1300kDa、1350kDa、1400kDa、1450kDa、1500kDa、1550kDa、1600kDa、1650kDa、1700kDa、1750kDa、1800kDa、1850kDa、1900kDa、1950kDa、2000kDa,优选为30kDa~2000kDa,进一步优选为500kDa~2000kDa,再进一步优选为1500kDa~1800kDa。
在一个具体的实施方式中,透明质酸钾的特性黏数为0.50dl/g~29.50dl/g,例如可以为0.50dl/g、1.00dl/g、2.00dl/g、3.00dl/g、4.00dl/g、5.00dl/g、6.00dl/g、7.00dl/g、8.00dl/g、9.00dl/g、10.00dl/g、11.00dl/g、12.00dl/g、13.00dl/g、14.00dl/g、15.00dl/g、16.00dl/g、17.00dl/g、18.00dl/g、19.00dl/g、20.00dl/g、21.00dl/g、22.00dl/g、23.00dl/g、24.00dl/g、25.00dl/g、26.00dl/g、27.00dl/g、28.00dl/g、29.50dl/g,优选为1.12dl/g~29.50dl/g,进一步优选为10.00dl/g~29.50dl/g,再进一步优选为23.65dl/g~27.26dl/g。
透明质酸钾在抗氧化或抗光老化或增强皮肤弹性的用途中,透明质酸钾或包含透明质酸钾的产品可以直接或间接地施用于皮肤,例如可以通过外敷、注射或口服等方式施用。包含透明质酸钾的产品可以为化妆品、医疗器械、药品等。
本申请提供一种包含透明质酸钾的抗氧化剂产品。
本申请提供一种包含透明质酸钾的抗初老产品。
本申请还提供一种包含透明质酸钾的皮肤去皱产品。
在一个具体的实施方式中,包含透明质酸钾的产品中透明质酸钾的含量为0.01wt%以上,例如可以为0.01wt%、0.02wt%、0.05wt%、0.1wt%、0.5wt%、1wt%、1.5wt%、2wt%、2.5wt%、3wt%、3.5wt%、4wt%、4.5wt%、5wt%,优选为0.05wt%~5wt%。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊要求,均为常规方法。
下述实施例中所使用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
实验例1透明质酸钾在抗氧化方面的用途
1、溶液的配制
分别配制含0.1wt%、0.3wt%的分子量为1140kDa的透明质酸钾(HA-K)溶液(特性黏数为19.10dl/g,K含量8.0wt%)。
分别配制含0.5wt%的分子量为40kDa(特性黏数为1.40dl/g,K含量7.5%)、520kDa(特性黏数为10.35dl/g,K含量7.9%)、960kDa(特性黏数为16.7dl/g,K含量7.4%)、1140kDa、1710kDa(特性黏数为26.19dl/g,K含量8.1%)的透明质酸钾(HA-K)溶液。
分别配制含0.5wt%的分子量为1180kDa的透明质酸钠(HA-Na)溶液(特性黏数为19.61dl/g)。
配制HA-Na(1180kDa)与KCl复配溶液:配制0.5wt%HA-Na溶液,加入0.0764g的KCl,混合均匀后,用纯化水定容至100mL。
同HA-K(1140kDa)中K含量(8.0wt%)相同的KCl溶液(称取0.0764g KCl用纯化水定容至100mL),作为阴性对照。
8.8mM的过氧化氢溶液:精确称取0.0997g过氧化氢用纯化水定溶于到100mL棕色容量瓶。
9mM的硫酸亚铁溶液:精确称取0.2502g硫酸亚铁用纯化水定溶于到100mL棕色容量瓶。
9mM的水杨酸-乙醇溶液:精确称取0.1243g水杨酸用无水乙醇定溶于到100mL棕色容量瓶。
2、试验方法
取试管若干只,首先用移液管加入9mM硫酸亚铁溶液0.2mL,9mM水杨酸-乙醇溶液0.2mL,HA溶液3.0mL,最后加8.8mM的过氧化氢溶液0.25mL启动反应。37℃反应30分钟,以纯化水作为参比,在510nm处测定光吸收值。考虑到样品本身的吸光值,以硫酸亚铁溶液、水杨酸-乙醇溶液,不同浓度的样品溶液和蒸馏水作为样品的本底吸收值。按下式计算-OH清除率。每个样品做两个对照,本底吸收值做两个对照,相当于每个样品需要4根试管。
其中,A0为空白对照液的吸光度,Ax为加入样品溶液后的吸光度,Ax0为不加显色剂过氧化氢样品溶液本底的吸光度。
3、实验结果
对相同分子量下,不同浓度透明质酸钾的自由基清除率进行检测,实验结果与透明质酸钠自由基清除率进行对比,检测结果见图1。
结果显示,随着HA-K(1140kDa)的浓度升高,清除羟自由基的能力不断升高,0.5%浓度自由基清除率可达74%,但0.3%浓度之后上升趋势减缓,与同浓度的HA-Na(1180kDa)相比较,HA-K(1140kDa)的清除能力更强,比HA-Na(1180kDa)同比增加16.8%。
对不同分子量的透明质酸钾的自由基清除率进行检测,实验结果与透明质酸钠、氯化钾自由基清除率进行对比,检测结果见图2。(对比HA-K(1140kDa)与HA-Na(1180kDa)数据,*p<0.05,判定为有显著性差异)
图2的检测结果显示,所有透明质酸钾组和透明质酸钠组都具有一定的自由基清除能力,随着分子量增大,清除能力也相应增加。对比于同分子量的透明质酸钠,透明质酸钾自由基清除能力更高。透明质酸钾具有明显的自由基清除能力,且高分子量效果更好,由此可以反映出透明质酸钾具备一定的抗氧化能力。
实验例2透明质酸钾在抗光老化中的用途
1.紫外损伤修复实验
分别配制含0.2wt%的分子量为40kDa(特性黏数为1.40dl/g,K含量7.5%)、520kDa(特性黏数为10.35dl/g,K含量7.9%)、960kDa(特性黏数为16.7dl/g,K含量7.4%)、1140kDa、1710kDa(特性黏数为26.19dl/g,K含量8.1%)的透明质酸钾(HA-K)溶液。
分别配制含0.2wt%的分子量为1180kDa的透明质酸钠(HA-Na)溶液。
以一定剂量的UVA与UVB照射人表皮角质形成细胞HaCaT,并在照射后以不同分子量的透明质酸钾和透明质酸钠溶液样品处理细胞,通过对细胞增殖水平的考察,探讨其对紫外线照射损伤是否具有修复作用。其中,正常组为不照射,使用100μL无血清培养基处理细胞。模型组为紫外照射,使用100μL无血清培养基处理细胞。其中细胞相对增殖率(RGR)越高,紫外损伤修复效果越好,反之越差。
检测结果如图3所示,由图3可以看出细胞经UVA/UVB联合照射后,模型组增殖率比阴性对照增殖率下降,证明损伤模型造模成功。
分子量为520kDa、960kDa、1140kDa、1710kDa的透明质酸钾溶液处理组的细胞存活率比模型组高,显示受试样品具有紫外损伤修复功效。
此外,透明质酸钾在此功效中趋势与透明质酸钠相同,高分子量的功效优于低分子量。因此,高分子透明质酸钾具有修复紫外照射损伤的作用,可用于皮肤的晒后修复。
2.紫外防护实验
采用UVB照射损伤人表皮角质形成细胞HaCaT,模拟日光对表皮形成的损伤,刺激细胞发生凋亡,并通过照射前后细胞与1mL不同分子量的透明质酸钾和透明质酸钠溶液样品接触,用荧光探针Annexin V-FITC标记早期凋亡细胞,PI标记中晚期凋亡细胞,以流式细胞仪检测细胞凋亡率,考察样品对于细胞凋亡是否具有防护作用。其中,正常组为加100mL无血清培养基处理细胞,不照射。模型组为加100mL无血清培养基处理细胞,UVB照射。凋亡比例越低,紫外防护效果越好,反之越差。检测结果如图4所示。(对比HA-K(1140kDa)与HA-Na(1180kDa),*p<0.05判定为有显著性差异)
图4的检测结果显示,细胞经UVB照射后,模型组的凋亡比例比正常组的凋亡比例上升,证明损伤模型造模成功。
对于透明质酸钾,分子量为40kDa、520kDa、960kDa、1140kDa、1710kDa处理组的细胞凋亡比例低于模型组,因此有紫外防护功能。且分子量为1140kDa、1710kDa的透明质酸钾的紫外防护效果,优于分子量为40kDa和960kDa的透明质酸钾的紫外防护效果。
对于透明质酸钠,分子量为1180kDa处理组的细胞凋亡比例低于模型组,因此有紫外防护功能。
相同分子量下透明质酸钾的紫外防护效果优于透明质酸钠。由此证明,透明质酸钾具有显著的紫外防护效果,可用于皮肤的防晒。
实验例3透明质酸钾在皮肤祛皱中的用途
1、溶液的配制
取一定质量的溶解物溶解于乳液基质中达一定浓度,配置用于检测皮肤抗老的组合物。乳液基质配方:PEG-100甘油硬脂酸酯3%,GTCC 20%,黄原胶0.3%,苯氧乙醇0.8%,甘油5%,水补至100%。组分详见表1。
表1组分
注:HA-Na(35kDa)的特性黏数为1.26dl/g。
2、实验步骤:
①建立人体实验方法
本研究通过半脸对照实验,共60名受试者分4组,每组15人。受试者于早晚洁面后在左、右半边脸分别使用等量D1和S1(或S2、S3、S4),使用皮肤弹性测定仪MPA580(Courage+Khazaka公司,德国)、人体皮肤快速光学成像系统PRIMOS(GFM,德国)检测分析。
②施用、采集方式
组别设置:实验组为左右半脸分别施用上述S1~4之一,和D1制备的组合物;
数据采集:受试者洁面后15分钟,检测左、右半脸苹果肌区域的弹性、纹理面积、鱼尾纹面积的初始值,并于初次使用后1周、2周、4周再次检测所有指标。
样品使用:早晚洁面后在左、右半边脸分别使用约0.5mL的D1和S1(或S2、S3、S4),连续涂抹30天;
使用人体皮肤快速光学成像系统PRIMOS(GFM,德国),检测眼角皱纹相对面积。
皱纹相对减少率Sa(%)=×100%
皱纹面积相对值(%)=Sa实施例-Sa对比例
皱纹面积相对值越低高,样品祛皱能力越好,检测结果见图5。(图表中正值代表无明显祛皱效果)
图5的检测结果显示,受访者接触样品眼角纹面积相对初始值为0%。分子量40kDa的透明质酸钾溶液在使用1周之后开始有淡化鱼尾纹的趋势,而分子量1140kDa的透明质酸钾从开始使用就表现出淡化鱼尾纹的作用,其改善鱼尾纹的作用起效更快,且效果优于分子量40kDa的透明质酸钾。而透明质酸钠不具有淡化鱼尾纹的功效。因此,透明质酸钾具有改善鱼尾纹的作用,高分子量透明质酸钾效果更优。
Claims (10)
1.一种透明质酸钾,其特征在于,所述透明质酸钾的分子量为5kDa~2000kDa,特性黏数为0.50dl/g~29.50dl/g,优选的,所述透明质酸钾的分子量为30kDa~2000kDa,特性黏数为1.12dl/g~29.50dl/g。
2.根据权利要求1所述的透明质酸钾,其特征在于,所述透明质酸钾的分子量为500kDa~2000kDa,特性黏数为10.00dl/g~29.50dl/g。
3.根据权利要求1所述的透明质酸钾,其特征在于,所述透明质酸钾的分子量为1500kDa~1800kDa,特性黏数为23.65dl/g~27.26dl/g。
4.权利要求1-3中任一项所述的透明质酸钾在抗氧化中的用途。
5.权利要求1-3中任一项所述的透明质酸钾在抗光老化中的用途。
6.权利要求1-3中任一项所述的透明质酸钾在祛皱中的用途。
7.一种抗氧化剂产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1-3中任一项所述的透明质酸钾。
8.一种抗初老产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1-3中任一项所述的透明质酸钾。
9.一种皮肤去皱产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1-3中任一项所述的透明质酸钾。
10.一种抗衰产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1-3中任一项所述的透明质酸钾。
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