CN115611920B - 一类螺环吲哚生物碱及其药物组合物与其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了8个具有6/5/5/6/5/5螺环系统新颖骨架的吲哚生物碱1−8及其药物组合物与其在制药中的应用，属于药物技术领域。本发明的化合物是效果显著的Kv1.5钾离子通道抑制剂，它们可用于制备治疗或预防心房颤动、心律失常、高血压、帕金森病、肿瘤、癫痫等心血管、中枢或外周神经性疾病的药物，可用于制备钾离子通道Kv1.5抑制剂。
Description
技术领域：
本发明属于药物技术领域，具体的涉及一类新颖骨架的吲哚生物碱1-8及其类似物，其药学上可接受的盐，其制备方法，含有该类化合物的药物组合物，以及该类化合物及其药物组合物和提取物在制备KV1.5型钾离子通道抑制剂药物中、在制备治疗或预防心房颤动、心律失常、高血压、帕金森病、肿瘤、癫痫等心血管、中枢或外周神经性疾病药物中的应用。
背景技术：
心房颤动是临床上最常见的心律失常之一，年龄越大发病率越高，在所有老年脑卒中患者中超过20％，是心源性脑卒中的主要病因，一直困扰着患者和心脑血管医生。心房颤动发生发展的一个重要机制是心房电重构，以心房有效不应期(ERP)及动作电位时程(APD)显著缩短为特征，伴房间传导延长。心房选择性药物是治疗心房颤动的理想药物。
Kv1.5钾离子通道，是电压门控钾离子通道的一个亚型，在心房颤动电重构中发挥关键作用。与Kv1.5密切关联的主要辅助亚基是Kvβ亚基，如Kvβ1.2、Kvβ1.3、Kvβ2.1等。Kvβ亚基通过其保守区的C末端与Kv1.5α亚单位保守区的N末端相互作用而连接在一起，进而改变延迟整流钾通道的功能，导致IKur较早激活，而失活速度变慢。
目前，常用的心房颤动治疗药物有Ⅰ类抗心律失常药，如普罗帕酮、氟卡尼和Ⅲ类抗心律失常药，如胺碘酮。这些药物在延长APD和心房复极的同时也会影响心室的兴奋和复极。研究发现，Kv1.5通道蛋白在人类心房肌细胞特异性表达，它是心房肌细胞超速延迟整流钾电流(ultra-rapid delayed rectifier potassium current，IKur)的分子基础，此电流参与APD复极化过程，而未发现在心室肌复极过程发挥作用。Kv1.5通道蛋白的特异性表达使其成为研究新心房颤动治疗药物的热点。心房颤动发生时，Kv1.5通道蛋白表达明显代偿性下调，因此抑制Kv1.5通道能使ERP和ADP有效延长，从而缓解和治疗心房颤动，其抑制剂可作为一种备选的治疗心房颤动的新型药物。
迄今，现有技术中未见有本发明的具有6/5/5/6/5/5螺环系统新颖骨架的吲哚生物碱1-8的报道，也没有其药理作用的报道。
发明内容：
本发明的目的在于：提供8个具有6/5/5/6/5/5螺环系统新颖骨架的吲哚生物碱1-8，其药学上可接受的盐，其制备方法，含有该类化合物的药物组合物，以及该类化合物及其药物组合物和提取物在制备KV1.5型钙离子通道抑制剂药物中、在制备治疗或预防心房颤动、心律失常、高血压、帕金森病、肿瘤、癫痫等心血管，中枢或外周神经性疾病药物中的应用。
本发明的上述目的是通过如下的技术方案得以实现的：
下述结构式所示的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8及其药用盐，
如上所述化合物1-8的药用盐，是指药学上可接受的盐，包括与有机酸或无机酸形成的盐，所述的有机酸为柠檬酸、马来酸、富马酸，所述的无机酸为盐酸、硫酸、磷酸。
螺环吲哚生物碱是一类以色氨酸和裂环马钱素为生源前体的一大类活性天然产物，具有相同生源的途径且变化多样的天然生物碱。本发明对茜草科钩藤属植物钩藤中的螺环吲哚生物碱类成分进行系统的研究，利用多种分离纯化手段，包括正相硅胶柱层析，反相中压或者高压液相色谱等方法，从中获得了四个具有6/5/5/6/5/5环系的螺环吲哚生物碱。并通过2-3步反应将化合物1-4及其异构体5-8合成了出来，解决了其来源的问题。对分离得到的生物碱进行了离子通道抑制活性筛选，发现化合物3对钾离子通道Kv1.5具有很好的抑制活性，而且具有非常好的选择性，为新的植物来源的钾离子通道抑制化合物，可用于制备Kv1.5型钾离子通道抑制剂。
本发明另外还提供了所述的吲哚生物碱类化合物及其类似物或其药学上可接受的盐在制备治疗或预防心房颤动、心律失常、高血压、帕金森病、肿瘤、癫痫等心血管、中枢或外周神经性疾病药物中的应用，以及在制备钾离子通道Kv1.5抑制剂中的应用。
本发明提供了如下结构式所示的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱3在制备治疗或预防心房颤动、心律失常、高血压、帕金森病、阿尔茨海默病、肿瘤、癫痫的药物中的应用，以及，在制备钾离子通道Kv1.5抑制剂中的应用，
本发明提供了所述的吲哚生物碱类化合物的方法，取干燥钩藤带钩部位，粉碎后用50％工业乙醇/水回流提取三次，合并提取液，减压浓缩得到总提取物。将总提取物用pH＝1的硫酸溶液混悬，再用乙酸乙酯萃取三次，除掉大部分非碱成分。萃取后剩下的酸水溶液用10％NaOH溶液调节pH为9-10，然后用氯仿充分萃取三次，得到总生物碱浸膏100g。将总生物碱浸膏用硅拌样，石油醚︰乙酸乙酯︰二乙胺＝800︰200︰1上硅胶柱层析，得到异钩藤碱+异柯诺辛因碱部位和钩藤碱+柯诺辛因碱部位。将异钩藤碱+异柯诺辛因碱部位用石油醚︰乙酸乙酯︰二乙胺＝1000︰50︰25纯化得到仅含异钩藤碱+异柯诺辛因碱两个化合物的粗纯品A。钩藤碱+柯诺辛因碱部位用甲醇重结晶得到仅含钩藤碱+柯诺辛因碱两个化合物的粗纯品B。上述粗纯品A或B使用HPLC以60％甲醇-水洗脱分离得到纯的柯诺辛因碱和纯的异柯诺辛因碱。取30毫克纯的柯诺辛因碱或者异柯诺辛因碱，置于烘箱干燥过的密封管中，加入35毫克碘化钠，23微升三甲基碘硅烷，2毫升无水乙腈，室温搅拌2个小时，使用TLC检测反应完全，然后用饱和碳酸氢钠淬火反应，用乙酸乙酯萃取混合物，用无水硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到油状混合物C。将上述油状混合物C使用3毫升无水乙腈转移到烘箱干燥的密封管中，立即加入21毫克碳酸氢钠，16毫克氮-乙基羟胺盐酸盐，在80度的条件下搅拌三个小时后，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液浓缩后使用HPLC分离得到化合物3，4，7，8。使用3毫升二甲基亚砜将前述油状混合物C转移至封管中，然后加入300微升水和9毫克氯化锂，在150度的条件下加热2个小时。冷却后，在真空下蒸发反应混合物直到干燥。随后，使用3毫升无水乙腈将样品转移到烘箱干燥的密封管中，立即加入21毫克碳酸氢钠，16毫克氮-乙基羟胺盐酸盐，在80度的条件下搅拌三个小时后，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液浓缩后使用HPLC分离得到化合物1，2，5，6。
本发明还提供了包含6/5/5/6/5/5环系的吲哚生物碱类化合物1-8任一种或其任意组合，和至少一种药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明此外还提供了包含6/5/5/6/5/5环系的吲哚生物碱类化合物3和至少一种药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明另外还提供了所述的药物组合物在制备治疗或预防心房颤动、心律失常药物中，或降低血压药物中的应用。以及，所述的药物组合物在制备治疗癫痫药物中的应用，在制备钾离子通道Kv1.5抑制剂中的应用。
本发明的6/5/5/6/5/5环系的螺环吲哚生物碱类化合物及其药物组合物可以是任何合适形式，例如固体，半固体，液体或气溶胶形式。一般情况下，药物含有本发明的化合物或提取物作为活性成分，与适合外部，肠道，或肠胃外给药的有机或无机载体或赋形剂混合。活性成分可以是复方的，例如，与常规无毒药学可接受载体和/或赋形剂制成片剂、丸剂、胶囊等和其他适合的使用形式。在组合物中使用的药学可接受载体包括，例如，水、葡萄糖、乳糖、阿拉伯胶等和适合在制备固体、半固体、液体或气溶胶形式的制剂中使用的其他载体。组合物可以另外含有稳定剂，增稠剂，和/或着色剂和香料。
本发明的6/5/5/6/5/5环系的吲哚生物碱类化合物及其药学上可接受的盐及配糖体可经口或不经过口给药，给药量因药物不同而各有不同，对成人来说，每天1-100mg较合适。
经口服给药时，首先使化合物与常规的药用辅剂如赋形剂、解剂、黏合剂、润滑剂、抗氧化剂、包衣剂、着色剂、芳香剂、表面活性剂等混合，将其制成颗粒剂、胶囊、片剂等形式给药：非经口给药时可以注射液、输液剂或栓剂等形式给药。制备上述制剂时，可使用常规的制剂技术。
与现有技术相比，本发明具备如下的优益性：
1.本发明提供了一类新的6/5/5/6/5/5环系的吲哚生物碱类化合物1-8，填补了现有技术的空白。
2.本发明提供的新的6/5/5/6/5/5环系的吲哚生物碱类化合物1-8的制备方法以钩藤带钩部位主要化学成分科诺辛因碱或异科诺辛因碱为原料，经2-3步反应制得，路线简单，操作容易，易于放大，收率高，成本较低。
3.本发明的化合物1-8与阳性对照药DPO-1针对Kv1.5钾离子通道的抑制活性实验对比，同时化合物1-8以25μM作用于心肌表达的部分离子通道，结果显示，化合物3选择性抑制Kv1.5钾离子通道。进一步研究表明化合物3以浓度依赖的方式抑制Kv1.5，其IC50值和希尔系数分别是9.1±0.69μM和2.388±0.77。通过全细胞记录作出通道的电流-电压关系曲线，更明显的反映出化合物3的抑制作用。因此，化合物3作为Kv1.5的有效抑制剂，且对于心肌表达的部分离子通道具有一定的选择性，能成为治疗Kv1.5相关疾病如心房颤动的先导化合物。
4.本发明还提供了所述新的6/5/5/6/5/5环系的吲哚生物碱类化合物1-8或其药学上可接受的盐或其药物组合物在制备治疗或预防心房颤动、心律失常、高血压、帕金森病、阿尔茨海默病、肿瘤、癫痫的药物中的应用，以及在制备钾离子通道Kv1.5抑制剂中的应用。
附图说明：
图1为本发明的吲哚生物碱化合物1-8的结构示意图；
图2为本发明的吲哚生物碱化合物1的单晶X衍射结构示意图；
图3为本发明的吲哚生物碱化合物3的单晶X衍射结构示意图；
图4为本发明的提取分离流程图；
图5为本发明的吲哚生物碱化合物1，2，5，6半合成流程图；
图6为本发明的吲哚生物碱化合物3，4，7，8半合成流程图；
图7为本发明的吲哚生物碱化合物1-8对KV1.5型钾离子通道的抑制活性初步筛选结果。图中，A为化合物1-8以25μM作用于Kv1.5所得抑制率；B为化合物3以25μM作用于心肌表达的部分离子通道所得抑制率；C为化合物1-8以25μM浓度作用于心肌表达的部分离子通道所得抑制率；
图8为本发明的吲哚生物碱化合物3对Kv1.5钾离子通道的抑制活性。图中，A为单电压刺激下，不同浓度的化合物3对Kv1.5电流的抑制情况，电流是由钳制电位(-80mV)去极化到+50mV刺激引发；B为化合物3作用于Kv1.5的剂量效应曲线，通过Hill方程的拟合得到化合物3的IC50值和希尔系数分别是9.1±0.69μM和2.388±0.77；C为记录IV曲线的电流印迹，黑色为未加药的Kv1.5电流，红色为灌流12.5μM化合物3之后的Kv1.5电流；D为加药前后和洗脱时记录的Kv1.5通道的电流-电压关系图。
具体实施方式：
下面结合附图，用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。根据本发明的实质对本发明进行的改进都属于本发明的范围。
实施例1：
吲哚生物碱类化合物1-8的制备及结构鉴定：
分离流程：取干燥钩藤带钩部位100公斤，粉碎后用50％工业乙醇/水回流提取三次，合并提取液，减压浓缩得到总提取物。将总提取物用pH＝1的硫酸溶液混悬，再用乙酸乙酯萃取三次，除掉大部分非碱成分。萃取后剩下的酸水溶液用10％NaOH溶液调节pH为9-10，然后用氯仿充分萃取三次，得到总生物碱浸膏100g。将总生物碱浸膏用硅拌样，石油醚︰乙酸乙酯︰二乙胺＝800︰200︰1上硅胶柱层析，得到异钩藤碱+异柯诺辛因碱部位和钩藤碱+柯诺辛因碱部位。将异钩藤碱+异柯诺辛因碱部位用石油醚︰乙酸乙酯︰二乙胺＝1000︰50︰25纯化得到仅含异钩藤碱+异柯诺辛因碱两个化合物的粗纯品A。钩藤碱+柯诺辛因碱部位用甲醇重结晶得到仅含钩藤碱+柯诺辛因碱两个化合物的粗纯品B。上述粗纯品A或B使用HPLC以60％甲醇-水洗脱分离得到纯的柯诺辛因碱和纯的异柯诺辛因碱。取30毫克纯的柯诺辛因碱或者异柯诺辛因碱，置于烘箱干燥过的密封管中，加入35毫克碘化钠，23微升三甲基碘硅烷，2毫升无水乙腈，室温搅拌2个小时，使用TLC检测反应完全，然后用饱和碳酸氢钠淬火反应，用乙酸乙酯萃取混合物，用无水硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到油状混合物C。将上述油状混合物C使用3毫升无水乙腈转移到烘箱干燥的密封管中，立即加入21毫克碳酸氢钠，16毫克氮-乙基羟胺盐酸盐，在80度的条件下搅拌三个小时后，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液浓缩后使用HPLC分离得到化合物3(5毫克)，4(15毫克)，7(1.5毫克)，8(3.5毫克)。使用3毫升二甲基亚砜将前述油状混合物C转移至封管中，然后加入300微升水和9毫克氯化锂，在150度的条件下加热2个小时。冷却后，在真空下蒸发反应混合物直到干燥。随后，使用3毫升无水乙腈将样品转移到烘箱干燥的密封管中，立即加入21毫克碳酸氢钠，16毫克氮-乙基羟胺盐酸盐，在80度的条件下搅拌三个小时后，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液浓缩后使用HPLC分离得到化合物1(3毫克)，2(9.5毫克)，5(4毫克)，6(11毫克)。
通过NMR(表-1到表-4)，HRESIMS,ECD,UV,IR等波谱数据，化合物1-8的结构得到确定。最后，通过单晶X-ray衍射分析验证了化合物1，3的绝对构型(图2，图3)。
结构鉴定：本发明所述化合物分子结构式(1)到(8)分别对应化合物1到8：
化合物1:白色针状晶体；mp 258–260℃；–26.45(c 0.10,MeOH)；UV(MeOH)λmax(logε):207(2.81),252(2.18),283(1.58)nm；ECD(MeOH)λ(Δε):213(–16.33),239(+4.48),261(–2.51),288(+1.49)nm；IR(KBr)νmax 3384,3226,2931,2870,2798,1713,1620,1471,1383,1326,1174,749cm-1；1H and 13C NMR data,见表-1；positive HRESIMS m/z354.2174[M+H]+(calcd for C21H28O2N3,354.2182).
化合物2:无色油状化合物:–10.44(c 0.13,MeOH)；UV(MeOH)λmax(logε):207(2.68),251(2.07),284(1.44)nm；ECD(MeOH)λ(Δε):212(+1.91),233(+10.04),257(–7.37),285(–3.23)nm；IR(KBr)νmax 3250,2925,2873,2812,1714,1676,1619,1471,1339,1214,1183,759,680,628cm-1；1H and 13C NMR data,见表-1；positive HRESIMS m/z354.2170[M+H]+(calcd for C21H28O2N3,354.2182).
化合物3:白色针状晶体；mp 224–226℃；–42.86(c 0.14,MeOH)；UV(MeOH)λmax(logε):207(2.76),253(2.11),281(1.45)nm；ECD(MeOH)λ(Δε):212(–23.53),239(+5.06),260(–3.29),289(+2.26)nm；IR(KBr)νmax 2925,2854,2800,1720,1620,1471,1340,1260,1167,750cm-1；1H and 13C NMR data,见表-2；positive HRESIMS m/z 412.2230[M+H]+(calcd for C23H30O4N3,412.2236).
化合物4:无色油状化合物；+51.67(c 0.1,MeOH)；UV(MeOH)λmax(logε):208(2.94),252(2.39),279(1.83)nm；ECD(MeOH)λ(Δε):209(+12.39),232(+12.81),257(–9.69),285(–4.26)nm；IR(KBr)νmax 3244,2925,2853,2804,1724,1618,1470,1341,1258,1166,753,679,631cm-1；1H and 13C NMR data,见表-2；positive HRESIMS m/z 412.2235[M+H]+(calcd for C23H30O4N3,412.2236).
化合物5:白色固体；–69.05,1H and 13C NMR data,见表-3；positiveHRESIMS m/z 354.2182[M+H]+(calcd for C21H28O2N3,354.2182).
化合物6:无色油状化合物；–66.83,1H and 13C NMR data,见表-3；positiveHRESIMS m/z 354.2182[M+H]+(calcd for C21H28O2N3,354.2182).
化合物7:白色固体；–17.00,1H and 13C NMR data,见表-4；positiveHRESIMS m/z 412.2234[M+H]+(calcd for C23H30O4N3,412.2236).
化合物8:无色油状化合物；–5.53,1H and 13C NMR data,见表-4；positiveHRESIMS m/z 412.2236[M+H]+(calcd for C23H30O4N3,412.2236).
表1.化合物1和2在氯仿中的核磁数据
记录核磁的频率为：氢谱600兆赫兹，碳谱150兆赫兹。“m”表示多重峰或者重叠峰形。
表2.化合物3和4在氯仿中的核磁数据
记录核磁的频率为：氢谱600兆赫兹，碳谱150兆赫兹。
“m”表示多重峰或者重叠峰形。
表3.化合物5和6在氯仿中的核磁数据
记录核磁的频率为：氢谱600兆赫兹，碳谱150兆赫兹。“m”表示多重峰或者重叠峰形。
表4.化合物7和8在氯仿中的核磁数据
记录核磁的频率为：氢谱600兆赫兹，碳谱150兆赫兹。
“m”表示多重峰或者重叠峰形。
实施例2：
本发明吲哚生物碱类化合物1-8对KV1.5型钾离子通道的抑制活性实验方法和结果如下：
1、细胞制备与表达。
人胚肾(HEK)293T细胞培养在添加了10％小牛血清(VivaCell)和1％青霉素-链霉素双抗(VivaCell)的DMEM(Gbico)培养基中。培养好的HEK293T细胞用Lipofectamine 3000(invitrogen)转染试剂处理过的pCDNA3.1-Kv1.5和pCDNA3.1-EGFP质粒进行瞬时转染。成功转染的人胚胎肾(HEK)293T细胞需在48小时内使用。
2、电生理学实验。
所有电生理记录实验均在室温(约24℃)下进行。硼硅酸盐玻璃制备微电极(Sutter Instruments)，用微电极拉制仪(P-1000,Sutter Instrument)拉制，经过加热抛光，制备阻抗为2～4MΩ的微电极，用膜片钳放大器进行全细胞电流记录。在7秒的时间间隔内，-80mV的钳制电位(HP)经1.25s+50mV去极化，记录这个过程中的电流。电流通过放大器(美国SUTTER IPA-2)进行放大和数据转化。电流以5kHz通过低能滤波器，然后在50kHz进行采样。用SutterPatch软件完成数据采集和分析。细胞外溶液成分(in mM)：140NaCl,5KCl,1MgCl2,2CaCl2,10Glucose和10HEPES(pH＝7.4，用NaOH来调节)。电极内溶液成分(in mM)：130KCl,1MgCl2,5Na2ATP,10HEPES和5EGTA(pH＝7.4，用KOH来调节)。
3、数据分析与统计
数据的收集和统计分析均采用Graphpad 8.0完成。IC50值和希尔系数根据希尔方程Y＝IMin+(IMax-IMin)/[1+10(LogIC50-C)×Hillslope]用收集得到的数据计算得出。这里IC50是在半最大电流抑制时的浓度，C是化合物的浓度，IMin是最小抑制率，IMax是最大抑制率，Hillslope是希尔系数。所有数据均为平均值±标准误差。数据的收集和统计分析均采用Graphpad 8.0完成。IC50值和希尔系数根据希尔方程Y＝IMin+(IMaxIMin)/[1+10(LogIC50-C)×Hillslope]用收集得到的数据计算得出。这里IC50是在半最大电流抑制时的浓度，C是化合物的浓度，IMin是最小抑制率，IMax是最大抑制率，Hillslope是希尔系数。所有数据均为平均值±标准误差。
4、化合物1-8与阳性对照药DPO-1针对Kv1.5钾离子通道的抑制活性实验对比(表5)，同时化合物1-8以25μM作用于心肌表达的部分离子通道，结果显示，化合物3选择性抑制Kv1.5钾离子通道(图7)。进一步研究表明化合物3以浓度依赖的方式抑制Kv1.5，其IC50值和希尔系数分别是9.1±0.69μM和2.388±0.77。通过全细胞记录作出通道的电流-电压关系曲线，更明显的反映出化合物3的抑制作用(图8)。
5、Kv1.5钾离子通道是超快延迟整流钾电流Ikur的分子基础，特异地在心房肌细胞表达，几乎不表达于心室肌细胞，在心房颤动电重构中发挥关键作用。心房颤动发生时，Kv1.5通道蛋白表达明显代偿性下调，抑制Kv1.5通道能使心房有效不应期(ERP)和动作电位时程(APD)有效延长，从而缓解和治疗心房颤动。因此，化合物3作为Kv1.5的有效抑制剂，且对于心肌表达的部分离子通道具有一定的选择性，有望成为治疗Kv1.5相关疾病如心房颤动的先导化合物。
表5.化合物和DPO-1对Kv1.5的量效数据
化合物1-8及阳性对照DPO-1分别以不同浓度作用于Kv1.5，记录化合物对其峰值电流的影响，化合物3和阳性对照均表现出不同程度的抑制作用，其余化合物对Kv1.5电流影响不大。其中，DPO-1的IC50值是203.3±7.67nM，化合物3的IC50值是9.1±0.69μM。
制剂实施例
在以下制剂实施例中，选择常规试剂，并按照现有常规方法进行制剂制备，本应用例仅体现本发明所述化合物1-8中的至少一种能够制备成不同的制剂，对具体试剂和操作不作具体限定：
1.将本发明化合物3，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，用少量的DMSO溶解后，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液，所述注射液的浓度为0.5～5mg/mL。
2.将本发明化合物3，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，用少量的DMSO溶解后，将其溶于无菌注射用水中，搅拌使溶解，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于安瓿中，低温冷冻干燥后无菌熔封，得粉针剂。
3.将本发明化合物3，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按其与赋形剂重量比为9:1的比例加入赋形剂，制成粉剂。
4.将本发明化合物3，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制粒压片。
5.将本发明化合物3，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按常规口服液制法制成口服液。
6.将本发明化合物3，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成胶囊。
7.将本发明化合物3，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成颗粒剂。
8、取化合物1-8其中任意一种，或其任意组合，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。
9、取化合物1-8其中任意一种，或其任意组合，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，将其溶于无菌注射用水中，搅拌使溶，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于2安瓿中，低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。
10、取化合物1-8其中任意一种，或其任意组合，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，与赋形剂重量比为9:1的比例加入赋形剂，制成粉剂。
11、取化合物1-8其中任意一种，或其任意组合，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按其与赋形剂重量比为1:5–1:10的比例加入赋形剂，制粒压片。
12、取化合物1-8其中任意一种，或其任意组合，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按常规口服液制法制成口服液。
13、取化合物1-8其中任意一种，或其任意组合，或利用有机酸(柠檬酸、马来酸、富马酸)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸)制成的盐，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成胶囊或颗粒剂或冲剂。
Claims (14)
1.下述结构式所示的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8或其药用盐，
2.根据权利要求1所述的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8或其药用盐，其特征在于所述的药用盐是指药学上可接受的盐，包括与有机酸或无机酸形成的盐，所述的有机酸为柠檬酸、马来酸、富马酸，所述的无机酸为盐酸、硫酸、磷酸。
3.权利要求1所述的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8或其药用盐在制备治疗或预防心律失常的药物中的应用。
4.权利要求1所述的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8或其药用盐在制备钾离子通道Kv1.5抑制剂中的应用。
5.如下结构式所示的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱3在制备治疗或预防心律失常的药物中的应用，
6.如下结构式所示的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱3在制备钾离子通道Kv1.5抑制剂中的应用，
7.权利要求1所述的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8的制备方法，取干燥钩藤带钩部位，粉碎后用50％工业乙醇/水回流提取三次，合并提取液，减压浓缩得到总提取物，将总提取物用pH＝1的硫酸溶液混悬，再用乙酸乙酯萃取三次，除掉大部分非碱成分，萃取后剩下的酸水溶液用10％NaOH溶液调节pH为9-10，然后用氯仿充分萃取三次，得到总生物碱浸膏，将总生物碱浸膏用硅胶拌样，石油醚︰乙酸乙酯︰二乙胺＝800︰200︰1上硅胶柱层析，得到异钩藤碱+异柯诺辛因碱部位和钩藤碱+柯诺辛因碱部位；将异钩藤碱+异柯诺辛因碱部位用石油醚︰乙酸乙酯︰二乙胺＝1000︰50︰25纯化得到仅含异钩藤碱+异柯诺辛因碱两个化合物的粗纯品A；钩藤碱+柯诺辛因碱部位用甲醇重结晶得到仅含钩藤碱+柯诺辛因碱两个化合物的粗纯品B，上述粗纯品A或B使用HPLC以60％甲醇-水洗脱分离得到柯诺辛因碱和异柯诺辛因碱；取柯诺辛因碱或者异柯诺辛因碱，置于烘箱干燥过的密封管中，加入碘化钠，三甲基碘硅烷，无水乙腈，室温搅拌2个小时，使用TLC检测反应完全，然后用饱和碳酸氢钠淬火反应，用乙酸乙酯萃取混合物，用无水硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到油状混合物C；将上述油状混合物C使用无水乙腈转移到烘箱干燥的密封管中，立即加入碳酸氢钠，氮-乙基羟胺盐酸盐，在80度的条件下搅拌三个小时后，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩后使用HPLC分离得到6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱化合物3，4，7，8；使用3毫升二甲基亚砜将前述油状混合物C转移至封管中，然后加入300微升水和9毫克氯化锂，在150度的条件下加热2个小时，冷却后，在真空下蒸发反应混合物直到干燥，随后，使用无水乙腈将样品转移到烘箱干燥的密封管中，立即加入碳酸氢钠，氮-乙基羟胺盐酸盐，在80度的条件下搅拌三个小时后，加水淬灭，用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩后使用HPLC分离得到吲哚生物碱化合物6/5/5/6/5/5骨架的1，2，5，6。
8.包含权利要求1所述的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8任其一种或其任意组合，以及其药用盐，和至少一种药学上可接受的载体的药物组合物。
9.包含如下结构式所示的吲哚生物碱3，以及其药用盐，和至少一种药学上可接受的载体的药物组合物，
10.权利要求8或9所述的药物组合物在制备治疗或预防心律失常的药物中的应用。
11.权利要求8或9所述的药物组合物在制备钾离子通道Kv1.5抑制剂中的应用。
12.权利要求1所述的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱1-8或其药用盐在制备治疗或预防心房颤动的药物中的应用。
13.如下结构式所示的6/5/5/6/5/5骨架的吲哚生物碱3在制备治疗或预防心房颤动的药物中的应用，
14.权利要求8或9所述的药物组合物在制备治疗或预防心房颤动的药物中的应用。
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| Chun-Hsiao Chou, et al..Rhynchophylline from Uncaria rhynchophylla Functionally Turns Delayed Rectifiers into A-Type K+ Channels.Journal of Natural Products.2009,第72卷(第5期),830-834. * |
| Hirotaka Matsuo, et al..New vasorelaxant indole alkaloids, villocarines A-D from Uncaria villosa.Bioorganic & Medicinal Chemistry.2011,第19卷(第13期),4075-4079. * |
| 童静、李鹏飞.Kv1.5钾离子通道阻滞剂的研究进展.中国药物化学杂志.2020,第30卷(第01期),52-57. * |
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