CN115551483A - 一种有效治疗糖尿病和血脂异常的含有小檗碱和肉桂醛的固体脂质纳米组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种有效治疗糖尿病和血脂异常的组合物，该组合物是利用固体脂质纳米技术从两种天然植物化学活性成分中提取的：肉桂醛提取自越南肉桂，小檗碱是从若干植物中提取的生物活性化合物，包括称为小檗属的一组灌木。经测试，本发明的所有组合物均显示出具有低毒性和生物利用度高，降低胰岛素抗性，使血液中的血糖水平更有效地诱导胰岛素减少，高糖酵解帮助身体细胞分解糖，减少肝脏中糖的产生，减缓肠道中碳水化合物分解，以及增加肠道中有益微生物的数量。该组合物有效降低总胆固醇水平(TC)和非高密度脂蛋白胆固醇(Non‑HDL‑C)，并且具有降低甘油三脂(TG)水平的趋势。

Description

一种有效治疗糖尿病和血脂异常的含有小檗碱和肉桂醛的固 体脂质纳米组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种有效治疗糖尿病和血脂异常的含有小檗碱和肉桂醛的固体脂质纳米组合物及其制备方法。
背景技术
小檗碱及其药理效果
小檗碱是异喹啉生物碱，主要成分可以从几种草药中提取，包括称为小檗属的一组灌木。小檗碱的化学结构如图1所示(参见本发明中使用的附图)。
含有小檗碱的草药已被用于治疗肠道感染，特别是细菌性腹泻。小檗碱已经在数百项不同的研究中进行了测试。它对各种生物系统有很大的影响。口服后，小檗碱进入体内，输送到血液，然后进入体内细胞。在细胞内，它与不同的“分子靶”结合并改变它们的功能。这与药物的作用类似。小檗碱的主要功能之一是激活细胞内一种被称为AMP-活化蛋白激酶(AMPK)。AMPK存在于不同器官的细胞中，包括大脑、肌肉、肾脏、心脏和肝脏。这种酶在代谢调节中起主要作用。小檗碱还影响细胞中的其他分子，甚至会影响开/关基因。小檗碱在分子水平上对身体有影响，在细胞内具有许多功能。
肉桂
肉桂(锡兰肉桂和中国肉桂)是可追溯到古代的热带医学中樟科的一种树。肉桂是全世界广泛使用的最重要的香料之一。肉桂主要含有重要的油和其它衍生物，例如肉桂醛、肉桂酸和肉桂酸酯。肉桂除了具有抗氧化、抗炎、抗凝血、抗生素、抗癌、降脂和降血压的作用之外，还报道了肉桂可以对抗神经系统疾病，例如帕金森病和阿尔茨海默病。这一评价说明了肉桂的潜在药理学及其日常用途。
发明内容
本发明的目的是提供一种低毒性和生物利用度高的组合物，并且增强降低胰岛素抵抗的能力，从而使血液中的血糖水平更有效地诱导胰岛素激素减少。糖酵解帮助身体细胞分解糖。减少肝脏中糖的产生。减缓肠道中碳水化合物分解，增加肠道中有益微生物的数量。
为了实现上述目的，根据固体脂质纳米技术由双组分系统制备组合物，所述双组分体系包含从越南肉桂提取的肉桂醛及小檗碱是从若干植物中提取的生物活性化合物，包括称为小檗属的一组灌木。
所述组合物包含以下组分：
(a)固体脂质纳米小檗碱：5-25％；
(b)固体脂质纳米肉桂醛：1-15％；
(c)单硬脂酸甘油酯：5-15％；
(d)大豆油:60-80％；
(e)卵磷脂:5-10％；
(f)吐温80：0.01-1％。
本发明提供了一种制备所述组合物的方法，包括以下步骤：
i)制备固体脂质纳米小檗碱的溶液；
ii)制备固体脂质纳米小檗碱/肉桂醛的双组分体系；
iii)制备预组合物；和
iv)获得成品组合物。
附图说明
图1示出了小檗碱的化学结构。
图2示出了在脂质转化中小檗碱的主要机制。
图3和图4示出了肉桂中存在的一些重要组分的化学结构。
图5示出了用于制备有效治疗糖尿病和血脂异常的组合物的方法。
具体实施方式
根据本发明的组合物包含以下组分：
(a)固体脂质纳米小檗碱：5-25％；
(b)固体脂质纳米肉桂醛：1-15％；
(c)单硬脂酸甘油酯：5-15％；
(d)大豆油:60-80％；
(e)卵磷脂:5-10％；
(f)吐温80：0.01-1％。
根据本发明制备组合物的方法进行以下步骤：
肉桂醛通过蒸汽蒸馏从越南广南的肉桂中提取出来，所获得的肉桂醛含量超过98％。
盐酸小檗碱购自东北医药集团有限责任公司(中国)。
小檗碱/肉桂醛固体脂质纳米颗粒购自(越南生命纳米生物制造厂)，其参数如下：平均纳米颗粒尺寸为15.8nm。纳米颗粒中的小檗碱含量超过22％，肉桂醛含量为12％。
另外，还包括辅料材料，例如单硬脂酸甘油酯、硬脂酸、硬脂酸镁、吐温80、卵磷脂、粒状活性炭(Gac)油和大豆油。所有这些原材料都是符合用于作为按规定药物配制材料的基本标准。
本发明使用的设备包括加热凝胶装置、温度调节器、真空成型装置、控制搅拌机。
步骤1：制备固体脂质纳米小檗碱的溶液。
在40-50℃的加热条件下，将固体脂质纳米小檗碱添加到含有96％乙醇的反应烧瓶1中，直到固体脂质纳米小檗碱颗粒完全溶解。在70-80℃下煮沸并搅拌混合物，在乙醇溶剂中获得固体脂质纳米小檗碱。将混合物从反应烧瓶1转移到反应烧瓶2。
步骤2：制备固体脂质纳米小檗碱/肉桂醛的双组分体系:
接下来，将肉桂醛添加到所述固体脂质纳米小檗碱溶液中。在60-80℃，优选70℃，均匀搅拌溶液。50-70分钟，优选60分钟后，将温度升高到90-120℃，优选100℃，以除去乙醇溶剂。将混合物在此温度下均匀搅拌100-130分钟，优选120分钟，以产生固体脂质纳米小檗碱/肉桂醛的双组分体系。
步骤3：制备预组合物:
将大豆油、卵磷脂和吐温80加入反应烧瓶中；将混合物加热至90-100℃；高速均匀搅拌反应混合物，直至形成透明凝胶；停止反应；获得预组合物。
步骤4：获得成品组合物:
调节有机溶胶-凝胶组分的含量以达到标准技术参数，包括固体脂质纳米小檗碱的含量和固体脂质纳米肉桂醛的含量。在凝胶分辨率温度下形成智能凝胶包括在常温(室温)或储存温度(低于24℃)下凝胶化。
实施例
实施例1：制备组合物的方法；所述实施例用于公开本发明，而不是限制本发明的范围。
制备含有500mg组合物的一个软胶囊需要以下组分：
(a)固体脂质纳米小檗碱：10mg；
(b)固体脂质纳米肉桂醛：5mg；
(c)单硬脂酸甘油酯：50mg；
(d)大豆油：400mg；
(e)卵磷脂：30mg；
(f)吐温80：5mg。
在50℃加热条件下，将10mg固体脂质纳米小檗碱添加到已经含有96％的乙醇反应烧瓶中，直到固体脂质纳米小檗碱颗粒完全溶解，升高到80℃，同时搅拌以在乙醇中获得固体脂质纳米小檗碱。然后将混合物转移到反应烧瓶2中。接着，向溶液中加入5mg肉桂醛，在70℃下加热并均匀搅拌。在60分钟后，将温度升高至100℃以除去乙醇溶剂。在此温度下，沸腾且搅拌120分钟后，获得固体脂质纳米小檗碱/肉桂醛的双组分体系。向反应烧瓶中加入400mg大豆油、30mg卵磷脂和5mg吐温80，在100℃下高速搅拌，直至获得透明凝胶，然后停止反应。调节有机溶胶-凝胶组分的含量以达到标准技术参数，包括固体脂质纳米小檗碱的含量和固体脂质纳米肉桂醛的含量。在凝胶分辨率温度下形成智能凝胶包括在常温(室温)或储存温度(低于24℃)下凝胶化。
实施例2：组合物在实验内源性模型中对血脂异常调节效果的评价
将测试的白色小鼠分成5批，每批有10只。对每批进行注射和口服施药，如下：
批1(生物对照)：以0.1mL/10g小鼠体重的腹膜内注射0.9％盐水，并且口服0.2mL/10g蒸馏水。
批2(模型)：以200mg/kg(0.1mL/10g)腹膜内注射2％P-407溶液，并且口服0.2mL/10g蒸馏水。
批3(阳性对照)：以200mg/kg(0.1mL/10g)腹膜内注射2％P-407溶液，并且口服100mg/kg(0.2mL/10g)阿托伐他汀。
批4:以200mg/kg(0.1mL/10g)腹膜内注射2％P-407溶液，以0.24g/kg/天剂量(相当于临床预期剂量)口服组合物，0.2mL/10g。
批5:以200mg/kg剂量(0.1mL/10g)腹膜内注射2％P-407溶液，以0.72g/kg/天剂量(是临床预期剂量的3倍)口服组合物，0.2mL/10g。
在腹膜内注射P-407溶液之前，白色小鼠连续7天进行口服蒸馏水和样品药物。注射P-407之后，使小鼠完全处于挨饿状态，但可以自由饮水。注射P-40724小时后，所有小鼠均接受颈动脉血液取样，用于甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)定量测试。基于以下公式计算非高密度脂蛋白胆固醇(Non-HDL-C)含量：
Non-HDL-C＝TC-HDL-C(mmol/L)
测试结果
总胆固醇水平
表1。组合物对白鼠血液中总胆固醇水平的影响
Figure BDA0003938178600000071
表1的结果表明，与模型批次相比，口服100mg/kg阿托伐他汀批次降低了总胆固醇水平(降低5.7％)。然而，差异显示没有统计显著性(p＞0.05)。
以0.24g/kg/天和0.72g/kg/天两个剂量分批口服组合物，与模型批次相比降低了总胆固醇水平(降低17.1％)，差异在统计学上是显著的(p＜0.05)。
甘油三酯水平
表2。组合物对白鼠血液中甘油三酯水平的影响
Figure BDA0003938178600000081
表2的结果表明，与模型批次相比，所有口服的100mg/kg阿托伐他汀批次均不会降低甘油三酯水平，差异在统计学上是显著的(p＜0.01)。
口服低剂量组合物批次(0.24g/kg/天)与模型批次相比明显降低甘油三酯水平(降低35％)，差异在统计学上是显著的(p＜0.05)。
口服高剂量组合物批次(0.72g/kg/天)与模型批次相比有降低甘油三酯水平的趋势。然而，差异没有统计显著性(p＞0.05)。
两种剂量的组合物降低甘油三酯的效果优于阿托伐他汀，差异在统计学上是显著的(p＜0.001)。
HDL-C水平
表3。组合物对白鼠血液中HDL-C浓度的影响
Figure BDA0003938178600000091
表3的结果表明，与模型批次相比，口服100mg/kg/天阿托伐他汀批次，HDL-C水平存在有升高的趋势。然而，差异显示没有统计显著性(p＞0.05)。
与模型批次相比，以0.24g/kg/天和0.72g/kg/天两个剂量口服组合物批次，HDL-C水平没有增加，其中差异在统计学上不显著(p>0.05)。
Non-HDL-C水平
表4。组合物对白鼠血液中的Non-HDL-C水平的影响
Figure BDA0003938178600000101
表4的结果表明，与模型批次相比，口服100mg/kg阿托伐他汀批次有降低Non-HDL-C水平的趋势，其中差异显示没有统计显著性(p＞0.05)。
与模型批次相比，两种剂量的口服组合物批次降低了Non-HDL-C水平(降低17.9％)，在统计学上是显著的(p＜0.05)。
结论
与模型批次相比，0.24g/kg/天组合物(相当于基于系数12计算的临床预期剂量)降低了总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和非高密度脂蛋白胆固醇(Non-HDL-C)水平。在P-407诱导的血脂异常白鼠模型中，低剂量组合物没有增加HDL-C水平。
高剂量Vietlife组合物(0.72g/kg/天)(是人体临床预期剂量的3倍)可有效降低总胆固醇(TC)和非高密度脂蛋白胆固醇(Non-HDL-C)水平，并且有降低甘油三酯(TG)水平的趋势。在P-407诱导的血脂异常白鼠模型中，高剂量组合物没有增加HDL-C水平。

Claims (2)

1.一种有效治疗2型糖尿病和血脂异常的组合物，其特征在于，包含以下组分：
(a)固体脂质纳米小檗碱：5-25％；
(b)固体脂质纳米肉桂醛：1-15％；
(c)单硬脂酸甘油酯：5-15％；
(d)大豆油:60-80％；
(e)卵磷脂:5-10％；和
(f)吐温80：0.01-1％。
2.一种如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
i)制备固体脂质纳米小檗碱的溶液：在40-50℃的加热条件下，将固体脂质纳米小檗碱添加到含有96％乙醇的反应烧瓶1中，直到固体脂质纳米小檗碱颗粒完全溶解；将溶液在70-80℃下煮沸搅拌获得在乙醇溶剂中的固体脂质纳米小檗碱；然后，将混合物从反应烧瓶1转移到反应烧瓶2；
ii)制备固体脂质纳米小檗碱/肉桂醛的双组分体系：将肉桂醛添加到所述固体脂质纳米小檗碱的溶液中，随后在60-80℃，优选70℃下煮沸并搅拌均匀；50-70分钟后，优选60分钟，将温度升高到90-120℃，优选100℃，除去乙醇溶剂，然后在该温度下煮沸并均匀搅拌100-130分钟，优选120分钟，以形成固体脂质纳米小檗碱/肉桂醛的双组分体系；
iii)制备预组合物：在90-100℃的加热条件下，将大豆油、卵磷脂和吐温80加入到反应烧瓶中，高速均匀搅拌反应混合物，直至形成透明凝胶；然后，停止反应以获得预组合物；
iv)获得成品组合物：调节有机溶胶-凝胶组分的含量以达到标准技术参数，包括固体脂质纳米小檗碱的含量和固体脂质纳米肉桂醛的含量，在凝胶分辨率温度下形成智能凝胶，包括在常温(室温)或存储温度(低于24℃)下凝胶化。
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