CN115521874A - 一种类器官自动化培养系统及其切样工作站 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种类器官自动化培养系统及其切样工作站,包括样品处理模块、自动培养模块和药敏试验模块,所述样品处理模块用于制备出肿瘤细胞的细胞基液,并对细胞及细胞来源进行备份存储保存。类器官培养的关键步骤由设备自动化进行,操作中只需掌握基础的实验室知识,通过自动化设备就可以完成类器官的培养,从而大大降低了类器官培养技术的前期学习培养成本,实现类器官的自动化培养,使得类器官培养在医院系统中大规模使用成为现实,一方面能够为更多病人的药理护理提供指导并预测治疗结果,在减少病人痛苦的同时降低治疗费用,另一方面能够提升治疗效果,得到更好的治疗期望。
Description
技术领域
本发明涉及类器官培养领域,尤其涉及一种类器官自动化培养系统及其切样工作站。
背景技术
类器官属于三维(3D)细胞培养物,包含其代表器官的一些关键特性。此类体外培养系统包括一个自我更新干细胞群,可分化为多个器官器官特异性的细胞类型,与对应的器官拥有类似的空间组织并能够重现对应器官的部分功能,从而提供一个高度生理相关系统。精准医学应用中,患者衍生的类器官被证明为有价值的诊断工具。在进行治疗之前,采用从患者样本来源的类器官筛查患者体外药物反应,可为癌症和囊胞性纤维症患者的护理提供指导并预测治疗结果。
类器官技术在医疗领域上的应用越来越广泛,在专利号CN201910445410.X的发明中就提出了一种胸腹水类器官的培养基、培养方法合药敏测试方法,但是,实际医学操作中,类器官培养的学习成本比较高,需要专业的实验培养人员经过系统化学习后才能进行操作,一方面会使得前期人员培养耗时耗力,另一方面很难满足医院系统中批量培养操作的要求,同时,类器官培养实验人工操作标准化的难度较大,不同实验者或不同的操作细节可能导致数据结果完全不同,这就使得医院系统中利用类器官培养做数据指导的门槛极高,无法发挥出类器官培养技术在医学领域的价值。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点,而提出的一种类器官自动化培养系统及其切样工作站。
为了实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:包括样品处理模块、自动培养模块和药敏试验模块,所述样品处理模块用于制备出肿瘤细胞的细胞基液,并对细胞及细胞来源进行备份存储保存,所述自动培养模块用于对所述细胞基液内的肿瘤细胞进行自动传代培养,以形成类器官系统,并对传代培养过程进行监控,所述药敏试验模块用于对所述类器官系统进行药敏试验,以获取所述类器官系统对特定药物的药敏试验结果。
优选的,所述样品处理模块内进行肿瘤细胞分切分离、肿瘤细胞与基质胶混合以及出样环节,所述肿瘤细胞分切分离环节依次包括样品采集、样品切割、组织细切、组织消化和细胞过滤分离五个步骤,所述肿瘤细胞与基质胶混合环节于低温混合工作站内进行。
所述样品采集步骤获取肿瘤样品,所述样品切割步骤对所述肿瘤样品进行初分切,其中一部分所述初分切后的肿瘤样品参与所述组织细切步骤,另外一部分所述初分切后的肿瘤样品经过福尔马林处理进入所述出样环节,形成T2组织切片,最后一部分所述初分切后的肿瘤样品装入无菌EP管进入所述出样环节,形成测序样品低温冻存,所述组织细切步骤用于切除所述初分切后的肿瘤样品上的脂肪和坏死细胞,并通过过滤筛选出肿瘤细胞,所述组织消化步骤为可选步骤,所述细胞过滤分离步骤通过离心机进行,获取分散状态的肿瘤单细胞。
优选的,其中一部分所述分散状态的肿瘤单细胞进入所述肿瘤细胞与基质胶混合环节,形成所述细胞基液,另外一部分所述分散状态的肿瘤单细胞加入冻存管送入所述出样环节,以单细胞状态冻存。
优选的,所述细胞基液送入细胞液移液工作站,所述细胞液移液工作站将所述细胞基液滴入孔板内,获得接种完成的孔板,所述孔板选用48孔板、96孔板和384孔板三种规格。
优选的,其中一部分所述接种完成的孔板加入培养基送入所述自动培养模块进行所述自动传代培养,另外一部分所述接种完成的孔板直接送入所述药敏试验模块参与所述药敏试验。
优选的,所述自动传代培养在自动培养箱内进行,所述自用培养模块内设置有培养监测模块和自动传代系统。
优选的,所述自动培养箱由标准细胞培养箱和全自动活细胞成像仪组合而成。
优选的,所述药敏试验于CelliMager Duos2系统中进行。
包括设备主机、组织分离器和细胞筛,所述组织分离器上安装有分切装置,所述分切装置上设置有六角形筛孔,所述六角形筛孔上设置有切割刀片。
本发明具有如下有益效果:
1、类器官培养的关键步骤由设备自动化进行,操作中只需掌握基础的实验室知识,通过自动化设备就可以完成类器官的培养,从而大大降低了类器官培养技术的前期学习培养成本,大大降低了类器官培养技术在医院、实验室的使用成本;
2、实现类器官的自动化培养,使得类器官培养在医院系统中大规模使用成为现实,一方面能够为更多病人的药理护理提供指导并预测治疗结果,在减少病人痛苦的同时降低治疗费用,另一方面能够提升治疗效果,得到更好的治疗期望;
3、用仪器设备规范类器官培养的操作,有利于降低试验人员对试验结果的影响,使得最终得到的药敏结果更准确,数据的指导意义更好;
4、类器官培养过程中进行了多次样品备份,在试验操作失误时能够通过备份样品重启试验进程,同时细胞样品和类器官培养后的细胞均参与药敏测试,使得药敏测试结果更准确。
附图说明
图1为本发明的主体流程图;
图2为本发明的切样工作站结构图;
图3为本发明的分切装置结构图;
图4为本发明的六角形筛孔内部结构图。
图例说明:
1、设备主机;2、组织分离器;3、细胞筛;4、分切装置;5、六角形筛孔;6、切割刀片。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
在本发明的描述中,需要说明的是,术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,仅是为了便于描述本发明和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本发明的限制;术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性,此外,除非另有明确的规定和限定,术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或一体地连接;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言,可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
参照图1-4,本发明提供的一种实施例:包括样品处理模块、自动培养模块和药敏试验模块,样品处理模块用于制备出肿瘤细胞的细胞基液,并对细胞及细胞来源进行备份存储保存,自动培养模块用于对细胞基液内的肿瘤细胞进行自动传代培养,以形成类器官系统,并对传代培养过程进行监控,药敏试验模块用于对类器官系统进行药敏试验,以获取类器官系统对特定药物的药敏试验结果。
进一步的,样品处理模块内进行肿瘤细胞分切分离、肿瘤细胞与基质胶混合以及出样环节,肿瘤细胞分切分离环节依次包括样品采集、样品切割、组织细切、组织消化和细胞过滤分离五个步骤,肿瘤细胞与基质胶混合环节于低温混合工作站内进行。
肿瘤细胞分切分离环节是将采样的肿瘤细胞进行处理的环节,将细胞组织上脂肪和坏死细胞切除,得到分散状态的肿瘤细胞,该环节的样品切割和组织细切在切样工作站上进行,肿瘤细胞与基质胶混合环节在低温混合工作站中进行。
进一步的,样品采集步骤获取肿瘤样品,样品切割步骤对肿瘤样品进行初分切,其中一部分初分切后的肿瘤样品参与组织细切步骤,另外一部分初分切后的肿瘤样品经过福尔马林处理进入出样环节,形成T2组织切片,最后一部分初分切后的肿瘤样品装入无菌EP管进入出样环节,形成测序样品低温冻存,组织细切步骤用于切除初分切后的肿瘤样品上的脂肪和坏死细胞,并通过过滤筛选出肿瘤细胞,组织消化步骤为可选步骤,细胞过滤分离步骤通过离心机进行,获取分散状态的肿瘤单细胞。
组织消化步骤为可选步骤,根据样品来源选择添加与不添加。
进一步的,其中一部分分散状态的肿瘤单细胞进入肿瘤细胞与基质胶混合环节,形成细胞基液,另外一部分分散状态的肿瘤单细胞加入冻存管送入出样环节,以单细胞状态冻存。
细胞基液用于类器官培养,同时将单细胞冻存进行备份,当细胞基液培养误操作失败时,可以启用冻存的单细胞,保障类器官培养正常进行。
进一步的,细胞基液送入细胞液移液工作站,细胞液移液工作站将细胞基液滴入孔板内,获得接种完成的孔板,孔板选用48孔板、96孔板和384孔板三种规格。
细胞移液工作站选用dragonfly discovery移液工作站,其量程为200nL-4mL,能做到精度在12.5nL的准确移液。
进一步的,其中一部分接种完成的孔板加入培养基送入自动培养模块进行自动传代培养,另外一部分接种完成的孔板直接送入药敏试验模块参与药敏试验。
进一步的,自动传代培养在自动培养箱内进行,自动培养模块内设置有培养监测模块和自动传代系统。
进一步的,自动培养箱由标准细胞培养箱和全自动活细胞成像仪组合而成。
全自动活细胞成像仪内搭载Omni高内涵活细胞智能成像系统,可以在数分钟内进行一次明场扫描,同时只需进行简单培训就可以上手操作。
进一步的,药敏试验于CelliMager Duos2系统中进行。
CelliMager Duos2系统搭配高画质模式(分辨率0.8微米),高速模式(4微米)两种镜头,可以进行从单个细胞到细胞集落,细胞球和类器官增殖,以及其他样品的定量化分析,同时CelliMager Duos2可以和孔板堆叠器,培养箱,条形码读码器等外部孔板搬运机械配件连接,使大量的自动化图像扫描成为可能,也可以和现有的机械装置进行连接,最多一天可以进行200块孔板的自动拍摄,将复杂繁琐的工作流程自动化。
一种类器官自动化培养系统的切样工作站,包括设备主机1、组织分离器2和细胞筛3,组织分离器2上安装有分切装置4,分切装置4上设置有六角形筛孔5,六角形筛孔5上设置有切割刀片6。
组织分离器2和分切装置4是一次性使用的耗品,分切装置4内嵌约100个六角形筛孔5,每个六角形筛孔5的周边为六把切割刀片6,可对各种硬度的组织进行有效切割,通过切样工作站对样品组织进行处理,一方面是简化了操作流程,降低了操作难度,便于实验室人员操作使用,另一方面规范了操作步骤和标准,使得类器官培养试验得出的试验结果更准确,指导效果更好。
工作原理:类器官自动化培养系统由样品处理模块、自动培养模块和药敏试验模块组成,其中样品处理模块内的组织分切由切样工作站进行,肿瘤细胞与基质胶混合环节于低温混合工作站内进行,细胞移液由dragonfly discovery移液工作站进行,细胞培养过程在Omni高内涵活细胞智能成像系统的监控下进行,药敏试验于CelliMager Duos2系统中进行,从而使得类器官培养的关键步骤由设备自动化进行,操作中只需掌握基础的实验室知识,通过自动化设备就可以完成类器官的培养,大大降低了类器官培养的技术门槛,使得类器官培养在医院系统中大规模使用成为现实。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种类器官自动化培养系统,其特征在于:包括样品处理模块、自动培养模块和药敏试验模块,所述样品处理模块用于制备出肿瘤细胞的细胞基液,并对细胞及细胞来源进行备份存储保存,所述自动培养模块用于对所述细胞基液内的肿瘤细胞进行自动传代培养,以形成类器官系统,并对传代培养过程进行监控,所述药敏试验模块用于对所述类器官系统进行药敏试验,以获取所述类器官系统对特定药物的药敏试验结果。
2.根据权利要求1所述的一种类器官自动化培养系统,其特征在于:所述样品处理模块内进行肿瘤细胞分切分离、肿瘤细胞与基质胶混合以及出样环节,所述肿瘤细胞分切分离环节依次包括样品采集、样品切割、组织细切、组织消化和细胞过滤分离五个步骤,所述肿瘤细胞与基质胶混合环节于低温混合工作站内进行。
3.根据权利要求2所述的一种类器官自动化培养系统,其特征在于:所述样品采集步骤获取肿瘤样品,所述样品切割步骤对所述肿瘤样品进行初分切,其中一部分所述初分切后的肿瘤样品参与所述组织细切步骤,另外一部分所述初分切后的肿瘤样品经过福尔马林处理进入所述出样环节,形成T2组织切片,最后一部分所述初分切后的肿瘤样品装入无菌EP管进入所述出样环节,形成测序样品低温冻存,所述组织细切步骤用于切除所述初分切后的肿瘤样品上的脂肪和坏死细胞,并通过过滤筛选出肿瘤细胞,所述组织消化步骤为可选步骤,所述细胞过滤分离步骤通过离心机进行,获取分散状态的肿瘤单细胞。
4.根据权利要求3所述的一种类器官自动化培养系统,其特征在于:其中一部分所述分散状态的肿瘤单细胞进入所述肿瘤细胞与基质胶混合环节,形成所述细胞基液,另外一部分所述分散状态的肿瘤单细胞加入冻存管送入所述出样环节,以单细胞状态冻存。
5.根据权利要求4所述的一种类器官自动化培养系统,其特征在于:所述细胞基液送入细胞液移液工作站,所述细胞液移液工作站将所述细胞基液滴入孔板内,获得接种完成的孔板,所述孔板选用48孔板、96孔板和384孔板三种规格。
6.根据权利要求5所述的一种类器官自动化培养系统,其特征在于:其中一部分所述接种完成的孔板加入培养基送入所述自动培养模块进行所述自动传代培养,另外一部分所述接种完成的孔板直接送入所述药敏试验模块参与所述药敏试验。
7.根据权利要求1所述的一种类器官自动化培养系统,其特征在于:所述自动传代培养在自动培养箱内进行,所述自用培养模块内设置有培养监测模块和自动传代系统。
8.根据权利要求1所述的一种类器官自动化培养系统,其特征在于:所述自动培养箱由标准细胞培养箱和全自动活细胞成像仪组合而成。
9.根据权利要求1所述的一种类器官自动化培养系统及其切样工作站,其特征在于:所述药敏试验于CelliMager Duos2系统中进行。
10.一种类器官自动化培养系统的切样工作站,其特征在于:包括设备主机(1)、组织分离器(2)和细胞筛(3),所述组织分离器(2)上安装有分切装置(4),所述分切装置(4)上设置有六角形筛孔(5),所述六角形筛孔(5)上设置有切割刀片(6)。
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2021
- 2021-11-03 CN CN202111292440.5A patent/CN115521874A/zh active Pending
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