CN115479993A

CN115479993A - 一种中成药质量一致性评价方法

Info

Publication number: CN115479993A
Application number: CN202110600018.5A
Authority: CN
Inventors: 刘艳; 赵桉熠; 刘安; 陈莎; 程锦堂; 邸继鹏; 郭丛; 章军
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date: 2021-05-31
Filing date: 2021-05-31
Publication date: 2022-12-16
Anticipated expiration: 2041-05-31
Also published as: CN115479993B

Abstract

本发明属于中药质量控制领域，具体涉及一种中成药质量一致性评价方法。本发明提供的中成药质量一致性评价方法，以同一厂家同一品种中成药为基本单元，分别从批内和批间两个维度分析样本中化学成分含量的“一致性差异值”，并对该两个维度的一致性评价结果同等重视，从而可考察不同生产环节对中成药质量的影响，补齐目前中成药质量分析的短板；同时以求和的方式处理样本的批内和批间的一致性差异值，建立比较全面的质量评价方法，对实际生产的质量控制有指导意义。

Description

一种中成药质量一致性评价方法

技术领域

本发明属于中药质量控制领域，具体涉及一种中成药质量一致性评价方法。

背景技术

同名同方药是指通用名称、处方、剂型、功能主治、用法及日用饮片量与已上市中药相同，且在安全性、有效性、质量可控性方面不低于该已上市中药的制剂。该类中药制剂具有“一品多家”的特点，如六味地黄丸、复方丹参片等均属于同名同方中成药品种，各厂家均按照《中国药典》处方规定投料生产，但在质量和产品价格等方面的仍存在较大差异，引起了中医药界的广泛关注。

为促使同名同方中成药市场的良性竞争，各研究团队开发并应用多种评价方法，从不同角度评价相应中成药的质量现状。其中，含量分析是中成药质量评价的主要方向，将大量同品种但不同批次产品的含量进行对比，得出了中成药“质量不一致”现象普遍存在的结论。当前，《中国药典》及部颁标准等仅能检测出药品“合格”属性，但无法保证中成药生产质量的均一稳定，即“合格但不一致”现象尤为突出。

已有相关研究结果表明，同名同方中成药的“质量不一致”往往会导致其药效差异明显。Yan B等对收集的26批次六味地黄丸展开质量评价，并开展相关体外活性实验，其结果表明，26批次样本在质量上差异明显，其抗氧化性差异随质量差异而变得显著，提出了质量差异是其药效差异的关键所在(Yan B,Sun GX.Monitoring quality consistency ofLiuwei Dihuang Pill by integrating the ultraviolet spectroscopic fingerprint,a multi-wavelength fusion fingerprint method,and antioxidant activities[J],Journal of separation science,2018,41(06):1182-1190)；Zhang YJ等通过对35批次复方甘草片质量及体外活性实验研究，得出了所收集样本质量存在差异性，其对应抗氧化活性也有明显差异(Zhang YJ,Wang C,Yang FL,Yang Z,Wang FR,Sun GX.UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS analysis,antioxidant activity combined fingerprints for qualityconsistency evaluation of compound liquorice tablets[J],RSC Advances,2018,8(49):27661-27673)。可见，中成药质量“一致性”是其发挥稳定药效的物质基础，建立宜应用的中成药质量一致性评价方法将成为必然趋势。

孙国祥等研究者提出基于中药系统指纹定量方法的中药标准制剂控制模式，采用三固色谱柱(固定色谱柱生产厂家品牌、固定相填料类型和色谱柱规格)，以双标谱法对产品质量进行分级评价(孙国祥,孙万阳,闫慧,张晶,侯志飞,兰丽丽,高倩楠,蒲道俊,陈振鸿,穆磊磊,中药整体质量控制标准体系构建和中药一致性评价步骤[J],中南药学,2019,17(03):321-331；孙国祥,孙万阳,张晶,侯志飞,杨方良,李显林,胡延雷,王述东,吴莎,中药质量一致性评价体系-基于定量指纹图谱检查的中药标准制剂控制模式的解析[J],中南药学,2018,16(01):2-13)。但该评价体系提出的两种实现中药标准制剂控制模式的方式都均有实际难点：(1)双标谱法需要通过大批次样本(如同名同方品种时，需收集全部厂家样本)的平均指纹图谱来产生预评标准指纹图谱，且在不同评价中需要作零误差校正，而实际上，收集众多样本难度较大，小批次建立的标准指纹图谱可靠性不足，对众多中成药品种建立标准指纹图谱难度较大等，都阻碍了该评价方法的应用；(2)标准制剂随行控制法关键在于制备标准制剂，理论上所提出的中药标准制剂必须是一个各化学成分含量、分布比例绝对恒定化、稳定化标准体系，具有药效最佳和毒性最低的显著特点，在实际中较难实现。

而且，当前关于中成药质量“一致性”评价方法主要集中在不同厂家的不同批次样本，未考虑以同一厂家为基本单元来分析厂家内部产品质量“一致性”差异，无法针对具体品种提出提升“质量一致性”的建议。

有鉴于此，有必要开发一种新的中成药质量一致性评价方法。

发明内容

发明要解决的问题

为解决上述存在的技术问题，本发明提供一种中成药质量一致性评价方法，在中成药化学成分含量合格的基础上，以同一厂家生产的中成药为基本单元，从批内和/或批间维度进行样本质量的一致性评价，建立比较全面的质量评价方法；同时，本发明还可以根据一致性评价结果对参评厂家进行等级划分，促进中成药市场良性的发展。

用于解决问题的方案

本发明提供一种中成药质量一致性评价方法，包括以下步骤：

选取同一厂家同一品种同一批次和/或不同批次的至少两个药品个体；

获取所述药品个体中至少一种指标成分的一致性差异值，进行批内一致性评价和/或批间一致性评价；

根据一致性评价结果，评价厂家对药品质量的控制水平。

优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，所述指标成分的一致性差异值：

其中：x为指标成分种类；P_x为单指标成分一致性差异值；X_max为所统计药品个体中x指标成分含量的最大值；X_min为所统计药品个体中x指标成分含量的最小值；

为所统计药品个体中x指标成分含量的均值。

进一步优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，获取所述药品个体中至少两种单指标成分各自的一致性差异值，其均值作为批内一致性评价结果和/或批间一致性评价结果：

其中：

为多指标成分一致性差异值。

更进一步优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，在进行所述批内一致性评价时，获取至少两批次药品个体各自的多指标成分一致性差异值，其均值作为批内一致性评价结果：

其中，m为批次统计数量，且m为大于等于2的自然数，优选m为3；

为第m批次药品个体的多指标成分一致性差异值；

为批内一致性评价结果。

优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，还包括对同一厂家同一品种中成药进行总体质量一致性评价：

其中：P_总为同一厂家同一品种中成药总体质量一致性评价结果；

为依照公式(2)或(3)计算得到的批内一致性评价结果；

为依照公式(2)计算得到的批间一致性评价结果。

进一步优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，在评价厂家对药品质量的控制水平时，通过获取质量一致性分数，对不同厂家中成药产品总体质量一致性评价结果进行评价：

M＝1/P_总 (5)

其中：M为质量一致性分数。

进一步优选地，还包括：通过获取百分质量一致性分数，将不同厂家进行一致性等级划分：

M'＝M/M_max*100％ (6)

其中：M'为百分质量一致性分数；M_max为质量一致性分数的最大值。

进一步优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，所述指标成分含量的计算方法选自外标法、内标法或面积归一化法。

优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，所述中成药包括复方丹参制剂、藿香正气制剂、健胃消食制剂、六味地黄制剂、护肝制剂、银杏叶制剂、双黄连制剂、强力枇杷制剂、清开灵制剂、元胡止痛制剂、板蓝根制剂、复方板蓝根制剂、蒲地蓝消炎制剂、感冒清热制剂、养阴清肺制剂、参苓白术制剂、九味羌活制剂、小儿退热制剂、贞芪扶正制剂和新生化制剂。

进一步优选地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，所述复方丹参制剂的指标成分包括冰片；更进一步优选地，所述复方丹参制剂的指标成分还包括三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮ⅡA；

所述藿香正气制剂的指标成分包括芸香柚皮苷和甘草苷；更进一步优选地，所述藿香正气制剂的指标成分还包括甘草酸铵、欧前胡素、异欧前胡素、厚朴酚、和厚朴酚和苍术素；

所述健胃消食制剂的指标成分包括芸香柚皮苷；更进一步优选地，所述健胃消食制剂的指标成分还包括橙皮苷。

发明的效果

本发明提供的中成药质量一致性评价方法，以同一厂家同一品种中成药为基本单元，分别从同一批次和不同批次选取至少两个药品个体，获取药品个体中至少一种指标成分的一致性差异值，进行批内和批间两个维度的一致性评价，对该两个维度的一致性评价结果同等重视，从而可考察厂家对药品质量的控制水平，补齐目前中成药质量分析的短板；同时，以求和的方式处理批内和批间一致性评价结果，以建立比较全面的质量评价方法，对实际生产中的质量控制有指导意义。

进一步地，本发明提供的中成药质量一致性评价方法，按照上述的质量一致性评价结果对参评厂家进行等级划分，可提示厂家从原料选材和生产工艺方面进行优化，全面提升同名同方中成药质量的一致性。

附图说明

为了更清楚地说明本发明的具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为中成药质量一致性评价方法流程图；

图2为实施例1中复方丹参片多波长融合HPLC图；

图3为实施例1中复方丹参片GC-MS总离子流图；

图4为实施例1中厂家一致性等级分布图。

具体实施方式

以下将详细说明本发明的各种示例性实施例、特征和方面。在这里专用的词“示例性”意为“用作例子、实施例或说明性”。这里作为“示例性”所说明的任何实施例不必解释为优于或好于其它实施例。

另外，为了更好地说明本发明，在下文的具体实施方式中给出了众多的具体细节。本领域技术人员应当理解，没有某些具体细节，本发明同样可以实施。在另外一些实例中，对于本领域技术人员熟知的方法、手段、器材和步骤未作详细描述，以便于凸显本发明的主旨。

如无特殊声明，本说明书中，未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

本说明书中，所使用的单位均为国际标准单位，并且本发明中出现的数值、数值范围，均应当理解为包含了工业生产中所不可避免的系统性误差。

本说明书中，使用“可以”表示的含义包括了进行某种处理以及不进行某种处理两方面的含义。

本说明书中，所提及的“一些具体/优选的实施方案”、“另一些具体/优选的实施方案”、“实施方案”等是指所描述的与该实施方案有关的特定要素(例如，特征、结构、性质和/或特性)包括在此处所述的至少一种实施方案中，并且可存在于其它实施方案中或者可不存在于其它实施方案中。另外，应理解，所述要素可以任何合适的方式组合在各种实施方案中。

本发明提供的中成药质量一致性评价方法，如图1所示，包括以下步骤：

获取药品个体中至少一种指标成分的一致性差异值，进行批内一致性评价和/或批间一致性评价；

根据一致性评价结果，评价厂家对药品质量的控制水平。

同名同方中成药质量不一致往往会导致其药效差异明显，建立以“一致性”为核心的中成药评价方法，可为中成药的质量控制提供参考依据。现有技术对同名同方中成药质量的评价是以市场在售的多厂家生产的中成药制剂为研究对象，并未考虑以同一厂家产品为基本单元来研究其内部质量的“一致性”，因而难以考察是何种具体因素导致中成药质量不一致，无法针对性地为具体厂家提供有关提升质量“一致性”的建议。

在本发明提供的评价方法中，以同一厂家同一品种的中成药为基本单元，分别或同时从批内、批间两个维度分析中成药质量，并对两个维度的一致性评价结果予以同等重视，从而可考察厂家内部不同生产环节对中成药质量的影响，补齐目前中成药质量分析的短板。

其中，上述“批内一致性评价”是对同一厂家同一品种同一批次的药品个体之间的质量一致性进行评价，所反映的是生产工艺等因素对药品质量的影响，如药材的粉碎程度、混合均匀度等；“批间一致性评价”是对同一厂家同一品种不同批次的药品个体之间的质量一致性进行评价，所反映的是生产原料等因素对药品质量的影响，如原料选购标准高低、不同批次的原料来源是否一致等。在本发明一些优选的实施方案中，同时从批内和批间两个维度对同一厂家同一品种中成药进行质量一致性评价，可协助厂家综合考察生产原料和工艺等因素对中成药质量的影响。

为将评价结果采用数学方法量化处理，本发明引入“一致性差异值”概念。所谓“一致性差异值”是指药品个体中指标成分含量的一致性差异值：

当选取的药品个体源自同一批次时，其指标成分含量的一致性差异值反映的是批内质量一致性好坏；当选取的药品个体源自不同批次时，其指标成分含量的一致性差异值反映的是批间质量一致性好坏。

具体地，指标成分的一致性差异值为：

为所统计药品个体中x指标成分含量的均值。

中成药源自中药饮片，其化学成分众多且复杂；而且，从药理药效角度而言，各味药材辩证结合，共同发挥药理作用，因此，难以仅采用药品个体中的一种化学成分(单指标成分)作为其质量控制的指标。随着多种化学成分含量同时测定技术的广泛应用，可通过统计多个单指标成分一致性差异值，并计算其均值，作为批内一致性评价结果和/或批间一致性评价结果。

在本发明一些具体的实施方案中，获取药品个体中至少两种单指标成分各自的一致性差异值，其均值作为批内一致性评价结果和/或批间一致性评价结果：

其中：

为多指标成分一致性差异值。

在进行一致性评价时，先基于公式(1)分别获取不同药品个体中多个单指标成分(1,2,…,x)各自的单指标成分一致性差异值(P₁,P₂,…,P_x)，然后基于公式(2)计算多指标成分一致性差异值

若上述选取的多个药品个体均源自同一批次，则

值即为批内一致性评价结果；若上述选取的多个药品个体源自不同批次，则

值即为批间一致性评价结果。

在进行批内一致性评价时，考虑到各批次的多指标成分一致性差异值可能存在较大差异，若仅选其中一批次样本的多指标成分一致性差异值作为产品的批内一致性评价结果，是无法反映其整体质量真实信息的。因此，在计算中成药批内一致性评价结果时，需将多批次样本的多指标成分一致性差异值进行平均。具体地，设定批次量为m：

为第m批次药品个体的多指标成分一致性差异值；

为批内一致性评价结果。

在本发明一些优选的实施方案中，通过求和的计算方式处理批内一致性评价结果和批间一致性评价结果，可实现对同一厂家同一品种中成药的总体质量一致性评价。具体为：

为依照公式(2)或(3)计算得到的批内一致性评价结果；

为依照公式(2)计算得到的批间一致性评价结果。

上述批内、批间两个维度的一致性评价对产品整体质量一致性评价结果的影响是一致的，将批内一致性评价结果和批间一致性评价结果进行加和计算，能够反映同一厂家同一品种中成药的总体质量一致性评价结果。

在本发明一些具体的实施方案中，在评价厂家对药品质量的控制水平时，通过获取质量一致性分数，对不同厂家中成药总体质量一致性评价结果进行评价：

M＝1/P_总 (5)

其中：M为质量一致性分数。M值越大，则对应厂家产品的一致性评价结果越好。

在本发明一些具体的实施方案中，依据各厂家的质量一致性分数可计算百分质量一致性分数，通过对比不同厂家的百分质量一致性分数，可将参评厂家进行一致性等级划分。具体地，百分质量一致性分数为：

M'＝M/M_max*100％ (6)

基于上述不同厂家的百分质量一致性分数，可将厂家划分为一等、二等、三等等多个等级。在本发明一些具体的实施方案中，规定：M'≥80％的厂家为一等，其总体质量一致性评价结果最好；50％≤M'＜80％的厂家为二等，其总体质量一致性评价结果一般；其余为三等，其总体质量一致性评价结果最差。

在本发明一些具体的实施方案中，中成药中各指标成分含量的计算方法包括外标法、内标法或面积归一化法。

在本发明一些具体的实施方案中，中成药包括(但不限于)复方丹参制剂、藿香正气制剂、健胃消食制剂、六味地黄制剂、护肝制剂、银杏叶制剂、双黄连制剂、强力枇杷制剂、清开灵制剂、元胡止痛制剂、板蓝根制剂、复方板蓝根制剂、蒲地蓝消炎制剂、感冒清热制剂、养阴清肺制剂、参苓白术制剂、九味羌活制剂、小儿退热制剂、贞芪扶正制剂和新生化制剂，上述制剂均可采用本发明提供的评价方法处理。

在本发明一些具体的实施方案中，复方丹参制剂优选复方丹参片，其指标成分的含量测定方法包括采用GC-MS法测定冰片(龙脑和异龙脑)的含量；优选地，还包括测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮ⅡA七种指标成分的含量，实现了对复方丹参片中3味处方药9个指标成分含量的全面测定，以此含量测定结果计算质量一致性差异值将更加准确。

在本发明一些具体的实施方案中，藿香正气制剂优选藿香正气水，其指标成分的含量测定方法包括测定芸香柚皮苷和甘草苷的含量；优选地，还包括测定甘草酸铵、欧前胡素、异欧前胡素、厚朴酚、和厚朴酚和苍术素七种指标成分的含量，开发了多波长同时测定藿香正气水中9个指标成分的测定方法，该方法可以更全面地反映制剂质量，有利于处方多药味品种的质量控制。

在本发明一些具体的实施方案中，健胃消食制剂优选为健胃消食片，其指标成分的含量测定方法包括测定芸香柚皮苷的含量，建立了高于国标的质量控制方法，质量控制更加全面，评价结果更加可靠；优选地，还包括测定橙皮苷的含量。

以下将以复方丹参制剂为例详细说明本发明的评价方法，对于藿香正气制剂、健胃消食制剂等其它制剂，本领域技术人员应当理解，本发明提供的评价方法同样可以实施。

实施例1复方丹参制剂质量一致性评价

1实验仪器、试剂、对照品及样本

1.1仪器

ME204T/02型1/1万电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)；

XSR105/A型1/10万电子分析天平(Mettler-Toledo GmbH(Switzerland))；

KQ-600E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；

1260型系列高效液相色谱仪(美国Agilent公司，包括G1311B四元梯度泵、G1329B自动进样器、G1316A柱温箱、G4212A二极管阵列检测器)；7890B型气相色谱仪(美国Agilent公司，包括7890B GC System、7000C GC/MS Triple Quad、电子轰击离子源检测器)。

1.2试剂

乙酸乙酯(北京化工厂，20180507，分析纯)；无水乙醇(天津市富宇精细化工有限公司，分析春)；乙腈(Thermo Fisher Scientific,USA,148407,色谱纯)；磷酸(MREDATECHNOLOGY INC,USA,02005067,色谱纯)；水(浙江杭州娃哈哈集团有限公司)。

1.3对照品

丹参酮ⅡA(江西佰草源生物科技有限公司，040065-201905，HPLC≥98％)；隐丹参酮(江西佰草源生物科技有限公司，BCY-000272，HPLC≥98％)；丹酚酸B(江西佰草源生物科技有限公司，040016-201811，HPLC≥98％)；三七皂苷R1(江西佰草源生物科技有限公司，BCY-000649，HPLC≥98％)；人参皂苷Rb1(中国食品药品检定研究院，110704-200921，含量92.6％)；人参皂苷Rg1(中国食品药品检定研究院，110703-201027，含量96.3％)；人参皂苷Re(中国食品药品检定研究院，110754-200822，含量88.8％)；异龙脑(中国食品药品检定研究院，111512-201904，含量98.4％)；龙脑(江西佰草源生物科技有限公司，190031-202007，HPLC≥97％)。

1.4样本

所有样本均购自全国多地零售药店，共收集复方丹参片样本涉及15个不同厂家。

2样本含量测定

2.1三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、丹酚酸B等7种指标成分的HPLC测定

2.1.1色谱条件

色谱柱：安捷伦Poroshell 120EC-C₁₈(4.6×50mm，2.7μm)；进样量：3μL；柱温箱：25℃；检测波长：203nm、270nm、286nm；流动相：0.1％(v/v)磷酸水溶液(A)、乙腈(B)；梯度洗脱，具体见下表：

2.1.2溶液制备

对照品溶液制备：取三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品、丹酚酸B对照品、隐丹参酮对照品和丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，至棕色容量瓶内，加甲醇制成每1mL含三七皂苷R1 0.428mg、人参皂苷Rg1 0.136mg、人参皂苷Re 0.013mg、人参皂苷Rb1 0.125mg、丹酚酸B 0.279mg、隐丹参酮0.013mg和丹参酮ⅡA0.017mg的混合溶液，即得。

供试品溶液的制备：取复方丹参制剂10片，精密称定，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇50mL，密塞，称定重量，超声处理(功率600W，频率40kHz)20min，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，置棕色瓶中，即得。

2.1.3进样检测

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各3μL，注入液相色谱仪，测定，即得。色谱图如图2所示，其中，A为对照品，B为供试品；保留时间所对应的检测波长为：1-6min为203nm，6-13min为286nm，13-18min为203nm，18-25min为270nm；色谱峰所对应的成分为：峰1,1'-三七皂苷R1，峰2,2'-人参皂苷Rg1、峰3,3'-人参皂苷Re、峰4,4'-丹酚酸B、峰5,5'-人参皂苷Rb1、峰6,6'-隐丹参酮、峰7,7-丹参酮ⅡA。

2.2龙脑和异龙脑2种指标成分的GC-MS测定

2.2.1色谱-质谱条件

色谱条件：毛细石英管柱HP-5(30m×0.25mm，0.25μm)；进样口温度250℃，柱温80℃，保持15min，载气为高纯氦气，流速1.5mL/min，进样量1μL，分流比5:1。

质谱条件：电子轰击离子源，轰击电压70eV，离子源温度250℃，四级杆温度150℃，辅助接口温度200℃，全扫描模式，选择离子检测定量，龙脑及异龙脑检测离子均为m/z 95。

2.2.2溶液制备

对照品溶液的制备：取龙脑对照品和异龙脑对照品适量，精密称定，置具塞容量瓶内，加乙酸乙酯制成每1mL含龙脑0.331mg和异龙脑0.213mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取复方丹参制剂10片，精密称定，研细，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯20mL，密塞，称定重量，超声处理(功率600W，频率40kHz)20min，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3进样检测

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液1μL，注入气相-质谱联用仪器，测定，即得。复方丹参制剂总离子流图如图3所示，其中，A为对照品；B为样品；色谱峰所对应的成分为：峰1,1'-异龙脑、峰2,2'-龙脑。

3一致性评价

3.1批内一致性评价

测定45批次样本各指标成分含量。样本量包括15个不同厂家，每个厂家3个不同批次，各批次随机选取3个不同药品个体。其编号规则为：将15个厂家依次为编号S1～S15，将3个批次依次编号为-1～-3，将3个不同药品个体依次编号为’1～’3，如S1厂家的3个不同批次依次编号为S1-1～S1-3，如S1厂家S1-1批次的3个不同药品个体依次编号为S1-1’1、S1-1’2、S1-1’3；其余类同。

通过HPLC法和GC-MS法对复方丹参片中指标成分进行含量测定，均经前处理考察和方法学验证，所建立的含量测定方法科学合理，含量测定结果准确。对收集的样本按一致性评价要求过程测定指标成分含量。经HPLC与GC-MS方法测定后，采用外标法计算得到了所测定样本的各指标成分含量结果，如表1所示。其中，以三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re四种皂苷合计量，记作总皂苷含量；龙脑和异龙脑为同分异构体，合计量记作冰片含量。

表1复方制剂丹参片样本含量测定结果

复方丹参片包括丹参、三七和冰片三味药，《中国药典》复方丹参片含量测定规定，三七含量以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1合计量计，不得低于6.00mg/片；丹参以丹酚酸B和丹参酮ⅡA计，含量分别不得低于5.00mg/片、0.20mg/片，同标准相比，各测定样本各组分含量均满足要求，所收集样本均为合格样本。本发明中增加了对冰片的含量测定，从而实现了对复方丹参片中3味处方药9个指标成分含量的全面测定，以此含量测定结果计算质量一致性差异值更加全面准确。

其计算过程为(以S1厂家S1-1批次为例，取S1批次的3个药品个体：S1-1’1，S1-1’2和S1-1’3)：

(1)S1厂家的参评样本涉及m批次中成药，x种指标成分。按公式(1)计算第m批次中第x指标成分的单指标成分一致性差异值。

具体地，本实施例中，m＝3，x＝5。

S1-1批：第1种指标成分总皂苷的一致性差异值P₁＝(30.932-30.231)/AVERAGE(30.406，30.932，30.231)*100％＝2.3％。

类似地，第2种指标成分丹酚酸B的一致性差异值P₂＝0.9％；第3种指标成分隐丹参酮的一致性差异值P₃＝3.9％；第4种指标成分丹参酮ⅡA的一致性差异值P₄＝4.3％；第5种指标成分冰片的一致性差异值P₅＝15.4％。

(2)按公式(2)，计算多指标成分一致性差异值，得到第m批次的多指标成分一致性差异值，该值可作为批内一致性评价结果。

具体地，本实施例中，S1-1批次涉及到5中指标成分，则该批次的多指标成分一致性差异值P_内＝AVERAGE(2.3％，0.9％，3.9％，4.3％，15.4％)＝5.3％。

(3)类似地，按过程(1)和(2)，分别计算得到S1-2与S1-3批次的多指标成分一致性差异值，分别为6.2％、4.5％。

(4)按公式(3)，取上述各批次的多指标成分一致性差异值的均值，可更准确作为代表本厂家的批内一致性评价结果。

具体地，S1-1、S1-2、S1-3三个批次的多指标成分一致性差异值分别为：

(5)以x指标成分为基准，计算m批次第x种指标成分(以第1种指标成分总皂苷为例)之间的一致性差异值的均值，即

类似地，计算15个厂家45批样品的批内一致性评价结果，如表2所示。

表2 15个厂家45批样本批内一致性评价结果

由表2可知，在所测定的15个厂家样本中，

数值从1.9％～9.6％不等，但均低于10％，这说明，当前复方丹参片的批内一致性评价结果整体较佳，反映了厂家相关生产工艺较佳，自动化等创新性工艺对产品的实际质量控制起到了促进作用。

不同厂家的

数值存在差别，如S15、S8厂家的

数值(分别为1.9％、3.3％)较低，该两个厂家的批内一致性评价结果较好；而S3厂家的

数值为9.6％，该厂家的批内一致性评价结果较差。由此可见，批内一致性评价结果好的厂家采用更先进的工艺控制，对产品质量的控制有更积极的作用。

同一厂家不同批次的

数值也有所差别，由此可判断同一厂家对不同批次药品的质量控制水平。如S1、S7厂家，3个批次的

数值(如S1中3个批次的

数值分别为5.3％、6.3％、4.5％)较为接近，而且x指标成分的P_x数值(如S1中3个批次总皂苷的P₁数值分别为2.3％、4.6％、3.5％)也较为接近，这说明该两个厂家相关生产工艺稳定，在生产不同批次的药品时能有效保证生产工艺对产品质量的影响一致。又如S11厂家，S11-2、S11-3批次的

P_x数值(如S11-2的

为1.5％，S11-3的

为1.8％)差异均较小，若仅从这二者对比看，可认为S11厂家产品批内控制良好；但S11-1样本的

P_x数值与S11-2、S11-3样本的P_内m、P_x数值差异较大(如S11-1的P_内m为12.6％，S11-2的P_内m为1.5％)，这提示该厂家相关生产工艺尚存问题。基于此，考虑到样本对全部药品应具有充分的代表性，在进行批内一致性评价时，选择多个样本(如本发明选择3个批次的样本)各自测定一致性差异值，并以均值表示该厂家批内一致性是十分必要和正确的。

考察不同指标成分的一致性差异时，冰片的一致性差异值很大。在实际生产中，冰片一般在药品基本成型后以喷洒等方式加入，此环节的相关生产工艺将对药品的一致性评价结果产生影响。另外，复方丹参片中冰片处方量少，而且目前对冰片无含量规定，此类因素放大了冰片测定的差异性。复方丹参片中所包含三个药味共同发挥疗效，但依以上分析结果可以看出，仅从一批次药品看，冰片的一致性差异值最大为45.3％(S7-1)，物质基础差异明显，无法对稳定疗效做出保证，在此提示各厂家均应严格把控产品质量，尤其对于冰片质量的控制，也应不断提升标准，保证产品质量一致性。

综上所述，从数据可整体反映当前复方丹参片批内质量控制效果较好，产品批内质量稳定。所有评价样本中，S15厂家的批内一致性评价结果最优，这说明本厂家在相关生产环节质量控制严格可靠，样本批内稳定性优，也对比反映出其相关生产工艺优于S3厂家等批内一致性评价结果较差的厂家。对进行批内一致性评价时，指标成分种类全面丰富，评价结果客观可靠，其评价结果可很大程度上直接反映样本实际生产工艺的优劣性及稳定性。

3.2批间一致性评价

测定75批次样本各指标成分含量。样本含量包括15个不同厂家，每个厂家5个不同批次，各批次各自独立地随机选取不限数量(至少为一个)的药品个体。其编号规则为：将15个厂家依次为编号S1～S15，将5个批次依次编号为-1～-5，如S1厂家的5个不同批次依次编号为S1-1～S1-5；其余类同。

通过HPLC法和GC-MS法对复方丹参片中指标成分进行含量测定，均经前处理考察和方法学验证，所建立的含量测定方法科学合理，含量测定结果准确。对收集的样本按一致性评价要求过程测定指标成分含量。经HPLC与GC-MS方法测定后，采用外标法计算得到了所测定样本的各指标成分含量结果，如表3所示。其中，以三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re四种皂苷合计量，记作总皂苷含量；龙脑和异龙脑为同分异构体，合计量记作冰片含量。

由于批间一致性评价考察的是批间药品个体之间的关系，故其一致性评价所基于的数据应是批间指标成分的含量。若某批次选取了一个药品个体，则该药品个体的指标成分含量作为该批次的指标成分含量；若某批次选取了多个药品个体，则多个药品个体的指标成分含量均值作为该批次的指标成分含量。

表3复方制剂丹参片样本含量测定结果

其计算过程为(以S1厂家S1-1批次为例)：

(1)S1厂家的参评样本涉及m批次中成药，x种指标成分。按公式(1)该厂家计算第x指标成分的单指标成分一致性差异值。

具体地，本实施例中，m＝5，x＝5。

S1-1批：第1种指标成分总皂苷的一致性差异值P₁＝(36.008-26.735)/AVERAGE(30.523，30.196，34.949，26.735，36.008)*100％＝29.3％。

类似地，第2种指标成分丹酚酸B的一致性差异值P₂＝22.1％；第3种指标成分隐丹参酮的一致性差异值P₃＝27.4％；第4种指标成分丹参酮ⅡA的一致性差异值P₄＝8.7％；第5种指标成分冰片的一致性差异值P₅＝43.8％。

(2)按公式(2)，计算多指标成分一致性差异值，得到该厂家的多指标成分一致性差异值，该值可作为批间一致性评价结果。即，

类似地，计算15个厂家75批样品的批间一致性评价结果，如表4所示。

表4 15个厂家75批样品批间一致性评价结果

由表4可知，批间一致性评价结果的最大值(53.4％)与最小值(13.5％)相差近4倍，这表明，不同厂家的批间一致性结果差异显著。S6厂家的

数值最小，其批间一致性控制最佳，可反映出该厂家在原料药材选择方面进行了严格控制，从而保证终产品在批次间的质量稳定性。S9和S13厂家等

数值较大，其批间一致性评价结果较差，提示相关企业在原料选材控制时应提高相关控制要求，要为批次间产品质量稳定性负责。

S9厂家的隐丹参酮一致性差异值(95.7％)近100％，差异极其明显，说明该指标成分必将对相关药效产生影响，且该长厂家的其余指标成分的一致性差异值也较大，该评价结果有效反映出该厂家的批间一致性有待提升，提示该厂家应关注自身产品批次间质量不稳定的问题，可采取控制原料药材相对一致性的措施来改善产品质量问题。另外，分析不同指标成分差异结果，冰片成分的批间差异性普遍较大，这与前文提及的冰片投料量问题相关；冰片测定结果较差的厂家，其冰片投料量是否符合处方规定量，还有待验证确定。

综上所述，批间一致性评价结果反映出不同厂家对原料选材要求与产品质量控制要求的差异性，对于批间一致性评价结果较差的厂家，应提升生产线各环节质量控制要求，尤其在原料药材选择控制环节。

3.3总体质量一致性评价

批内、批间一致性评价均是基于从样本质量控制结果来反映其生产环节，厂家通过优化各生产环节，可实现终产品质量一致性提升。其中，批内一致性评价结果主要反映生产工艺对产品质量的影响，如药材的粉碎程度、混合均匀度等；批间一致性评价结果则更多地体现了原料选择对产品质量的影响，如原料选购要求低、不同批次原料采购来源不一致等因素均会造成产品有效成分含量差异较大的问题。因此，在质量一致性评价体系中，批内、批间两个维度的一致性评价是从不同角度共同反映相关影响因素，但对提升产品质量一致性意义相当。因此，为方便考察各厂家产品的整体质量一致性，将批内一致性评价结果和批间一致性评价结果相加得到总体一致性评价结果，以P_总表示。

按公式(4)，具体计算过程为(以S1厂家为例)：

类似地，15个厂家的总体质量一致性评价结果如表5所示：

表5 15个厂家样本总体质量一致性评价结果

由表5中数据清晰客观地反映了所测定的15个厂家样本的总体质量一致性评价结果。其中，S6和S4厂家的总体质量一致性评价结果(分别为18.5％、28.7％)在测定范围内居于优势，说明该类厂家产品质量稳定，疗效一致性有所保证，对全程生产环节的控制水平高；而S9和S13等厂家的总体质量一致性评价结果差，这说明该类厂家的产品质量差异性明显，该类厂家应不断优化自身生产工艺，严格要求各个生产环节的质量控制。

在测定的15个厂家样本中，对比分析批内一致性评价结果和批间一致性评价结果，可直观看出批间一致性评价结果明显比批内一致性评价结果差，批内一致性评价结果最大值仅为9.6％，而批间一致性评价结果最大值为53.4％，这说明，关于复方丹参制剂的质量控制，各厂家的生产工艺整体相对稳定，批内质量控制也基本相当，但应重视批间质量一致性控制，通过加强相关控制手段，严格要求相关程序等，改善产品批间质量不稳定的现象。

3.4一致性等级划分

将各厂家的总体质量一致性评价结果代入公式(5)，得到算对应厂家的质量一致性分数，再代入公式(6)，计算15个厂家的百分质量一致性分数，具体计算过程为(以S1厂家为例)：

M＝1/P_总＝1/31.7％＝3.2；

M'＝M/M_max*100％＝3.2/5.5*100％＝58％。

依此对不同厂家进行一致性分级划分。结果如表6所示。

表6 15个厂家一致性等级划分

通过以上等级评价方法，15个厂家的样本质量一致性分数在1.7～5.4范围内，按其百分质量一致性分数将15个厂家划分为三大等级，并绘制一致性等级分布图，如图4所示，具体为：

S6，M'≥80％，其总体质量一致性评价结果最佳，且批内、批间两个维度的一致性控制水平均比较高，产品质量稳定可靠，为一等厂家；

S4、S1、S2、S5、S10、S11、S15和S8，50％≤M'＜80％，其总体质量一致性评价结果一般，为二等厂家；

S14、S7、S12、S3、S13和S9，M'≤50％，该类厂家的产品质量一致性评价结果较差，批内或批间质量一致性控制水平均较低。其中，S9厂家的总体质量一致性结果最差，批间一致性评价结果也最差，批内一致性评价结果也居劣势；S3厂家的批内一致性评价结果最差，批间一致性结果也较差。

以上已经描述了本公开的各实施例，上述说明是示例性的，并非穷尽性的，并且也不限于所披露的各实施例。在不偏离所说明的各实施例的范围和精神的情况下，对于本技术领域的普通技术人员来说许多修改和变更都是显而易见的。本文中所用术语的选择，旨在最好地解释各实施例的原理、实际应用或对市场中的技术的改进，或者使本技术领域的其它普通技术人员能理解本文披露的各实施例。

Claims

1.一种中成药质量一致性评价方法，其特征在于，包括以下步骤：

根据一致性评价结果，评价厂家对药品质量的控制水平。

2.根据权利要求1所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，所述指标成分的一致性差异值：

为所统计药品个体中x指标成分含量的均值。

3.根据权利要求2所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，获取所述药品个体中至少两种单指标成分各自的一致性差异值，其均值作为批内一致性评价结果和/或批间一致性评价结果：

其中：

为多指标成分一致性差异值。

4.根据权利要求3所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，在进行所述批内一致性评价时，获取至少两批次药品个体各自的多指标成分一致性差异值，其均值作为批内一致性评价结果：

为第m批次药品个体的多指标成分一致性差异值；

为批内一致性评价结果。

5.根据权利要求1-4任一项所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，还包括对同一厂家同一品种中成药进行总体质量一致性评价：

为依照公式(2)或(3)计算得到的批内一致性评价结果；

为依照公式(2)计算得到的批间一致性评价结果。

6.根据权利要求5所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，在评价厂家对药品质量的控制水平时，通过获取质量一致性分数，对不同厂家中成药总体质量一致性评价结果进行评价：

M＝1/P_总 (5)

其中：M为质量一致性分数。

7.根据权利要求6所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，还包括：通过获取百分质量一致性分数，将不同厂家进行一致性等级划分：

M'＝M/M_max*100％ (6)

8.根据权利要求2-7任一项所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，所述指标成分含量的计算方法选自外标法、内标法或面积归一化法。

9.根据权利要求1-8任一项所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，所述中成药包括复方丹参制剂、藿香正气制剂、健胃消食制剂、六味地黄制剂、护肝制剂、银杏叶制剂、双黄连制剂、强力枇杷制剂、清开灵制剂、元胡止痛制剂、板蓝根制剂、复方板蓝根制剂、蒲地蓝消炎制剂、感冒清热制剂、养阴清肺制剂、参苓白术制剂、九味羌活制剂、小儿退热制剂、贞芪扶正制剂和新生化制剂。

10.根据权利要求9所述的中成药质量一致性评价方法，其特征在于，

所述复方丹参制剂的指标成分包括冰片，优选地，还包括三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、丹酚酸B、隐丹参酮和丹参酮ⅡA；

所述藿香正气制剂的指标成分包括芸香柚皮苷和甘草苷，优选地，还包括甘草酸铵、欧前胡素、异欧前胡素、厚朴酚、和厚朴酚和苍术素；

所述健胃消食制剂的指标成分包括芸香柚皮苷，优选地，还包括橙皮苷。