CN115400209A - 复合生物酶及含有该复合生物酶的敷料制剂、微囊制剂 - Google Patents

Abstract

本申请涉及酶制剂技术领域，具体公开了一种复合生物酶及含有该复合生物酶的敷料制剂、微囊制剂，所述复合生物酶由重组溶葡萄球菌酶、溶菌酶、凝血酶、稳定剂复合物用无菌去离子水配制得到；所述敷料制剂包括原料：复合生物酶、支撑原料、油剂、硬脂酰乳酸钠、发泡剂、抗氧化剂、去离子水；所述微囊制剂，以所述复合生物酶做囊心混合液，所述微囊制剂还包括囊壁；上述复合生物酶止血速度快，杀菌效果好，杀菌谱广，其制成敷料制剂具有良好的止血效果和缓释性能，可以持续抗菌，促进创面愈合；其制成微囊制剂确保了主药成分顺利通过胃部到达肠道，治疗胃部出血和肠道出血的同时，能够有效修复胃黏膜和肠道黏膜，增强胃和肠道的抗感染能力。

Description

复合生物酶及含有该复合生物酶的敷料制剂、微囊制剂

技术领域

本申请涉及酶制剂技术领域，更具体地说，它涉及一种复合生物酶及含有该复合生物酶的敷料制剂、微囊制剂。

背景技术

凝血酶为止血药，临床上主要适用于结扎止血困难的小血管、毛细血管以及实质性脏器出血的止血；还用于外伤、手术、口腔、耳、鼻、喉、泌尿、烧伤、骨科、神经外科、眼科、妇产科以及消化道等部位出血的止血。凝血酶直接作用于血液凝固过程的最后一步，促使血浆中的可溶性纤维蛋白原转变成不溶的纤维蛋白，从而达到速效止血的目的。

凝血酶用于外伤或消化道等部位止血时，通常只是在局部伤口上形成止血效果，对于外伤创口的愈合，或胃肠道损伤部位的修复效果并不明显。另外，凝血酶用于治疗消化道出血时，直接服用凝血酶后，由于胃的特殊结构，凝血酶基本在胃中被消化，虽能在胃里快速起到凝血效果，但对肠道出血的治疗效果大大减弱。基于上述陈述，本申请提供了一种复合生物酶及含有该复合生物酶的敷料制剂、微囊制剂。

发明内容

为了解决相关技术中凝血酶只是在局部伤口上形成止血效果，并不能从根本上修复损伤部位，不具体缓释效果等问题，本申请提供了一种复合生物酶及含有该复合生物酶的敷料制剂、微囊制剂。

第一方面，本申请提供了一种复合生物酶，采用如下的技术方案：

一种复合生物酶，所述复合生物酶为重组溶葡萄球菌酶、溶菌酶、凝血酶、稳定剂复合物用无菌去离子水配制得到的复合生物酶溶液；

所述复合生物酶溶液中重组溶葡萄球菌酶用量为20-40U/ml，溶菌酶用量为20000-40000U/ml，凝血酶用量为10-100U/ml，稳定剂复合物0.0005-0.01 g/ml；

所述稳定剂复合物由甘氨酸：明胶：甘油按质量比2:1:3混合而成。

通过采用上述技术方案，本申请采用重组溶葡萄球菌酶、溶菌酶和凝血酶复配作为复合生物酶，通过控制三种复配酶的用量，达到三种酶协同增效的效果，凝血酶在水溶液下极容易失活，采用本技术方案中的稳定剂复合物可以很好地维持凝血酶的活性稳定性，实现制剂在阴凉处长期保存的目的，从而保证最终制得的复合生物酶具备快速止血效果的同时，具有高效杀菌、持续修复损伤部位的作用；本申请的复合生物酶作用于外伤或胃肠道，具有止血速度快，杀菌效果好，杀菌谱广的特点，不仅能有效杀灭葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、肺炎双球菌、D群肠球菌、四联球菌、产单核李斯特菌、链球菌、厌氧菌、嗜麦芽窄食单孢菌等常见致病细菌，对淋球菌、胃幽门螺旋杆菌、耐药性金黄色葡萄球菌、耐药性肺炎双球菌等也具有极强的杀菌效果，杀灭率高达99.9％。

第二方面，本申请提供了一种敷料制剂，采用如下的技术方案：

一种敷料制剂，所述敷料制剂以上述的复合生物酶做敷料主药，所述敷料制剂包括以下重量份的原料：复合生物酶10-28份、支撑原料35-55份、油剂3-7份、硬脂酰乳酸钠0.5-2份、发泡剂0.01-0.03份、抗氧化剂0.01-0.03份、去离子水45-70份。

优选的，所述支撑原料包括羧甲基纤维素钠、聚乙烯醇、明胶、海藻多糖、透明质酸钠中的至少一种。

优选的，所述油剂为薄菏精油、紫苏叶油、液体石蜡中的至少一种。

优选的，所述敷料制剂，由以下方法制得：

S1、按比重称取原料复合生物酶、支撑原料、油剂、硬脂酰乳酸钠、发泡剂、抗氧化剂、去离子水备用；

S2、将支撑原料加去离子水升温至65-80℃搅拌溶解，得溶液A；

S3、往溶液A加入油剂和硬脂酰乳酸钠搅拌混合均匀后，降至室温加入复合生物酶和抗氧化剂，继续搅拌混合均匀，得溶液B；

S4、将溶液B加发泡剂发泡后，倒入成型模具中，冷冻成型后灭菌包装，即得所需敷料制剂。

通过采用上述技术方案，本申请将支撑原料加水溶解后加油剂和硬脂酰乳酸钠混合均匀， 冷却至室温后再加复合生物酶和抗氧化剂，混合均匀后，加发泡剂发泡，冷冻成型制得敷料制剂；复合生物酶在敷料制剂的支撑材料下，可以更好的提高凝血酶的稳定性。上述制备方法简单，所得敷料制剂无毒、无害、安全性高，具有良好的透气、透湿、止血、抗菌等性能。

本申请通过控制敷料制剂中各原料的选用，保证制得的敷料制剂具有良好的缓释性能，进而可以达到持续抗菌的效果；敷料在使用时，可以起到快速止血、止痛的效果，通过维持创面的湿度和氧分压适宜，促进上皮细胞的有丝分裂，进而起到促进伤口愈合，促进血管和肉芽组织形成的效果；本申请的敷料制剂还具有较强的自溶清创能力，选择性的清除坏死组织，吸收大量的渗出液和局部炎性物，减轻水肿及疼痛。

第三方面，本申请提供了一种微囊制剂，采用如下的技术方案：

一种微囊制剂，所述微囊制剂以上述的复合生物酶做囊心混合液，所述微囊制剂还包括囊壁，所述囊心混合液和囊壁的质量比为1:1-3.5。

优选的，所述囊壁包括原料：乳化剂、液体石蜡和固化交联剂；

所述乳化剂、液体石蜡和固化交联剂的质量比为12-16:1-3:4-7。

通过采用上述技术方案，本申请将复合生物酶制成微囊制剂，可实现微囊在胃中的缓慢释放，起到止血和持续修复胃黏膜的效果；同时，能够确保微囊进入肠道，起到治疗肠道出血，修复肠道黏膜的效果。上述微囊制剂用于治疗上消化道出血，减少了给药次数，降低了药物浓度波动，减轻了对胃肠道的刺激性，确保了主药成分顺利通过胃部到达肠道，其用于治疗胃部出血和肠道出血的同时，能够有效修复胃黏膜和肠道黏膜，增强胃和肠道的抗感染能力。

本申请控制囊心混合液和囊壁的质量比为1:1-3.5，能够获得稳定性好、分散性好，粒径均匀、载药量高的微囊制剂，并能够有效控制复合生物酶的释放速率；复合生物酶在微囊制剂的囊壁材料支撑下，可以更好的提高凝血酶的稳定性。

通过控制囊壁原料乳化剂、液体石蜡和固化交联剂的质量比，能够有效防止复合生物酶聚结，保证囊心混合液分散成极小的液滴，尤其当乳化剂、液体石蜡和固化交联剂的质量比为12-16:1-3:4-7时，所得微囊制剂包封率高，稳定性好，释药浓度平稳，释药时间长。

优选的，所述微囊制剂，由以下方法制得：

将囊心混合液与乳化剂乳化搅拌混匀后，加入液体石蜡继续搅拌乳化，调节pH后，加固化交联剂进行微囊固化，过滤洗脱后，获得复合生物酶微囊制剂。

优选的，所述乳化剂为2%（质量分数）的海藻酸钠水溶液和/或5%（质量分数）的酪蛋白酸钠水溶液。

优选的，所述乳化剂为2%（质量分数）的海藻酸钠水溶液。

优选的，所述乳化剂为2%（质量分数）的海藻酸钠水溶液和5%（质量分数）的酪蛋白酸钠水溶液的混合液；所述海藻酸钠水溶液和酪蛋白酸钠水溶液的质量比为3:1。

优选的，所述液体石蜡为含有0.5-1.8%（质量分数）司盘-80的液体石蜡。

优选的，所述液体石蜡为含有1%（质量分数）司盘-80的液体石蜡。

优选的，所述固化交联剂为含有0-0.5%（质量分数）壳聚糖的0.1M CaCl₂溶液。

优选的，所述固化交联剂为含有0.2%（质量分数）壳聚糖的0.1M CaCl₂溶液。

通过采用上述技术方案，具体优选乳化剂、液体石蜡和固化交联剂的种类，能够进一步提高微囊制剂的稳定性、载药量和包封率，控制微囊释药速率，延长释药时间，进而实现微囊在胃中的缓慢释放，起到止血和持续修复胃黏膜的效果；同时，能够确保微囊进入肠道，起到治疗肠道出血，修复肠道黏膜的效果。

优选的，所述微囊制剂，具体由以下方法制得：

步骤1、按配方比，将囊心混合液加入到乳化剂中，搅拌至完全溶解得混悬液；

步骤2、边搅拌边向步骤1的混悬液中加入液体石蜡，调节pH值至5.8-6.4后，继续搅拌引发凝胶化反应；

步骤3、向步骤2中加入固化交联剂，搅拌混合20-40min进行微囊固化，过滤得到微囊；

步骤4、将步骤3中获得的微囊用溶液清洗，即得所需的微囊制剂。

优选的，所述微囊制剂制备方法中的搅拌速度为200-320r/min。

优选的，所述步骤2中pH调节剂为磷酸缓冲液。

优选的，所述步骤4中清洗溶液为0-3%（质量分数）的吐温-80水溶液。

通过采用上述技术方案，先将囊心混合液加乳化剂搅拌溶解，加入液体石蜡继续搅拌，调节pH值引发凝胶化反应后，加固化交联剂进行微囊固化，过滤洗脱即得微囊制剂，上述方法操作简单，过程便于控制，制得的微囊制剂产率高，稳定性好；通过控制制备过程中的搅拌速度、清洗溶液选用，能够有效避免制备过程中出现微囊溶解或微囊黏连的问题，所得微囊制剂分散性好，粒径均匀、稳定性好、载药量高、包封率高、释药浓度平稳，释药时间长。

综上所述，本申请具有以下有益效果：

1、本申请配方科学，配比严谨，选用重组溶葡萄球菌酶、溶菌酶和凝血酶复配作为复合生物酶，通过控制三种复配酶的用量，达到三种酶协同增效的效果，能够保证最终制得的复合生物酶具备快速止血效果的同时，具有高效杀菌，修复损伤部位的作用。

2、本申请将支撑原料加水溶解后加油剂和硬脂酰乳酸钠混合均匀， 冷却至室温后再加复合生物酶和抗氧化剂，混合均匀后，加发泡剂发泡，冷冻成型制得敷料制剂；所得敷料制剂无毒、无害、安全性高，具有良好的透气、透湿、止血、抗菌等性能，用于外伤可以起到快速止血、止痛的效果，并且能够持续抗菌，促进伤口愈合。

3、本申请采用微囊化包裹技术，利用复合生物酶制得囊心混合液，利用囊壁包裹囊心混合液制得微囊制剂，所得微囊制剂用于治疗上消化道出血，减少了给药次数，降低了药物浓度波动，减轻了对胃肠道的刺激性，确保了主药成分顺利通过胃部到达肠道，治疗胃部出血和肠道出血的同时，能够有效修复胃黏膜和肠道黏膜，增强胃和肠道的抗感染能力。

4、本申请通过优选乳化剂、液体石蜡和固化交联剂的种类，能够进一步提高微囊制剂的稳定性、载药量和包封率，控制微囊释药速率，延长释药时间，进而实现微囊在胃中的缓慢释放，起到止血和持续修复胃黏膜的效果；同时，能够确保微囊进入肠道，起到治疗肠道出血，修复肠道黏膜的效果。

5、本申请先将囊心混合液加乳化剂搅拌溶解，加入液体石蜡继续搅拌，调节pH值引发凝胶化反应后，加固化交联剂进行微囊固化，过滤洗脱即得复合生物酶微囊制剂，上述方法操作简单，过程便于控制，制得的微囊制剂产率高，稳定性好；通过控制制备过程中的搅拌速度、 清洗溶液选用，能够有效避免制备过程中出现微囊溶解或微囊黏连的问题，所得微囊制剂分散性好，粒径均匀、稳定性好、载药量高、包封率高、释药浓度平稳，释药时间长。

具体实施方式

以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。

实施例1-5和对比例1-6提供了复合生物酶，以下以实施例1为例进行说明。

实施例1

复合生物酶为重组溶葡萄球菌酶、溶菌酶、凝血酶、稳定剂复合物用无菌去离子水配制得到的复合生物酶溶液，其中囊心混合液中重组溶葡萄球菌酶用量为20U/ml，溶菌酶用量为20000U/ml，凝血酶用量为10U/ml，稳定剂复合物0.0005 g/ml；稳定剂复合物由甘氨酸：明胶：甘油按质量比2:1:3混合而成。

实施例2-5和对比例1-,4，同实施例1，区别仅在于，各种酶的用量不同，具体见下表1。

表1：

对比例5，同实施例3，区别仅在于，稳定剂复合物由甘氨酸：明胶按质量比2:1混合而成。

对比例6，同实施例3，区别仅在于，稳定剂复合物由甘氨酸：甘油按质量比2:3混合而成。

实施例6-18和对比例7-12提供了敷料制剂，以下以实施例6为例进行说明。

实施例6

一种敷料制剂，包括以下原料：实施例1中复合生物酶10kg、支撑原料35kg、油剂3kg、硬脂酰乳酸钠0.5kg、发泡剂0.013kg、抗氧化剂0.01kg、去离子水45kg；

其中，支撑原料包括质量比8:5:15的聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠和明胶；

油剂为液体石蜡；

发泡剂为碳酸氢钠；

抗氧剂为枸橼酸。

一种敷料制剂，由以下方法制得：

S1、按比重称取原料复合生物酶、支撑原料、油剂、硬脂酰乳酸钠、发泡剂、抗氧化剂、去离子水备用；

S2、将支撑原料加去离子水升温至72℃搅拌溶解，得溶液A；

S3、往溶液A加入油剂和硬脂酰乳酸钠搅拌混合均匀后，降至室温加入复合生物酶和抗氧化剂，继续搅拌混合均匀，得溶液B；

S4、将溶液B加发泡剂发泡完全后，倒入成型模具中，-20℃冷冻成型后灭菌包装，即得所需敷料制剂。

实施例7-10，同实施例6，区别仅在于，敷料制剂选用原料重量不同，具体见下表2。

表2：

实施例11-14和对比例7-12，同实施例8，区别仅在于，复合生物酶选用不同，具体如下：

实施例11选用实施例2中复合生物酶。

实施例12选用实施例3中复合生物酶。

实施例13选用实施例4中复合生物酶。

实施例14选用实施例5中复合生物酶。

对比例7选用对比例1中复合生物酶。

对比例8选用对比例2中复合生物酶。

对比例9选用对比例3中复合生物酶。

对比例10选用对比例4中复合生物酶。

对比例11选用对比例5中复合生物酶。

对比例12选用对比例6中复合生物酶。

实施例15-16，同实施例12，区别仅在于支撑原料的选用成分不同，具体如下所示：

实施例15支撑原料包括质量比8:5:15的聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠和海藻多糖。

实施例16支撑原料包括质量比8:5:15的聚乙烯醇、透明质酸钠和海藻多糖。

实施例17-18，同实施例16，区别仅在于油剂的选用成分不同，具体如下所示：

实施例17油剂包括质量比1:3的薄菏精油和紫苏叶油。

实施例18油剂包括质量比1:3:1的薄菏精油、紫苏叶油和液体石蜡。

为了检测实施例6-18和对比例7-12提供的敷料制剂的有效性，申请人进行了体表创伤止血促愈实验和抑菌圈指示实验。

体表创伤止血促愈实验，步骤如下：

实验材料：实施例6-18和对比例7-12提供的敷料制剂。

实验对象：体重2.2±0.5Kg，年龄相仿且将康状况良好的家兔57只，随机分成19组，每组3只。

实验方法：以脱毛剂脱除19组家兔背部毛发后，以1％戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉。无菌条件下，采用7号注射器针头在家兔脱毛区皮肤表面划“#”型创面，将实施例6-18和对比例7-12提供的敷料制剂置于创伤部位，采用滤纸条轻轻蘸吸直至血液不再渗出，记录所需时间即止血时间。12小时后去掉敷料制剂，记录创面情况，每日更换敷料制剂，连续3天，3天后去掉敷料制剂，使创面自然恢复，观察创面的红肿、结痂和脱痂情况，具体情况如下表3所示。

表3：

结合表3实验结果可知，本申请实施例6-10提供的敷料制剂，均选用实施例1中的复合生物酶做敷料主药，区别仅在于敷料制剂选用原料重量不同，最终获得的敷料制剂止血、促愈综合效果优良，其中实施例8止血效果最短仅12s，无炎症反应，伤口愈合快，即在敷料制剂选用原料种类相同时，优选本申请保护范围内的原料用量，可获得性能优良的敷料制剂。

对比本申请实施例11-14、对比例7-12和实施例8可知，仅改变复合生物酶的选用，可显著改变制得敷料制剂的止血时间，以及抗炎促愈效果，其中实施例11止血时间最短仅4s，无炎症反应，伤口愈合快。

对比本申请实施例15-16和实施例12可知，在其他因素不变的情况下，支撑原料选用质量比8:5:15的聚乙烯醇、透明质酸钠和海藻多糖，可进一步增强敷料制剂的止血、抗炎、促愈等功效。

抑菌圈指示实验，步骤如下：

(1)菌种活化：无菌条件下，在试管中装入灭菌的培养基并形成斜面，用划线法移接金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌，放入培养箱中，细菌于37℃下培养24h，真菌于28℃下培养3天；

(2)指示菌悬浮液的制备：无菌条件下，用接种环挑取2环活化好的菌体，用生理盐水稀释，震荡混匀，各菌种的浓度控制为10⁶ cfu/mL；

(3)牛津杯法抑菌圈指示实验：无菌条件下，吸取200μL指示菌悬浮液均匀涂布于平板培养基上，每个培养基中等距离平稳放置19个无菌牛津杯；向牛津杯分别滴加0.25mL由实施例6-18和对比例7-12提供的敷料制剂配置的浓度为0.1g/mL的样品溶液，其中，指示菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌的培养基于37℃培养24h，指示菌为白色念珠菌的培养基于28℃培养3天；移去牛津杯，用游标卡尺精确量取各抑菌圈的直径，比较抑菌效果，实验结果如下表4所示。

表4：

结合表4实验结果可知，实施例18制得的敷料制剂具有强的抑菌效果，即除敷料制剂主药复合生物酶中的三种酶，在本申请优选用量范围内具有协效抗菌的效果外，支撑原料的具体选用或油剂的具体选用，会进一步增强敷料制剂的抗菌效果。

实施例19-33和对比例13-17提供了微囊制剂，以下以实施例19为例进行说明。

实施例19

一种微囊制剂，包括质量比为1:1的囊心混合液和囊壁；

其中囊心混合液选用实施例3中复合生物酶；

囊壁包括原料质量比为12:1:4的乳化剂、液体石蜡和固化交联剂；

乳化剂为2%（质量分数）的海藻酸钠水溶液；

液体石蜡为含有1%（质量分数）司盘-80的液体石蜡；

固化交联剂为含有0.2%（质量分数）壳聚糖的0.1M CaCl₂溶液；

一种微囊制剂，具体由以下方法制得：

步骤1、按配方比，将囊心混合液加入到乳化剂中，以搅拌速度为260r/min，搅拌至完全溶解得混悬液；

步骤2、边搅拌边向步骤1的混悬液中加入液体石蜡，加磷酸缓冲液调节pH值至6.1后，继续搅拌引发凝胶化反应；

步骤3、向步骤2中加入固化交联剂，搅拌混合30min进行微囊固化，过滤得到微囊；

步骤4、将步骤3中获得的微囊用1%（质量分数）的吐温-80水溶液清洗，即得所需的微囊制剂。

实施例20-22和对比例13-14，同实施例19，区别仅在于，囊心混合液和囊壁的质量不同，具体如下：

实施例20中囊心混合液和囊壁质量比为1:3.5。

实施例21中囊心混合液和囊壁质量比为1:2。

实施例22中囊心混合液和囊壁质量比为1:2.7。

对比例13中囊心混合液和囊壁质量比为1:0.8。

对比例14中囊心混合液和囊壁质量比为1:3.8。

实施例23-24和对比例15-16，同实施例22，区别仅在于，囊壁选用成分配比不同，具体如下：

实施例23中囊壁包括原料质量比为16:3:7的乳化剂、液体石蜡和固化交联剂。

实施例24中囊壁包括原料质量比为7:1:3的乳化剂、液体石蜡和固化交联剂。

对比例15中囊壁包括原料质量比为10:1:4的乳化剂、液体石蜡和固化交联剂。

对比例16中囊壁包括原料质量比为4:1:2的乳化剂、液体石蜡和固化交联剂。

实施例25-26，同实施例24，区别仅在于，乳化剂选用不同，具体如下：

实施例25中乳化剂为5%（质量分数）的酪蛋白酸钠水溶液。

实施例26中乳化剂为2%（质量分数）的海藻酸钠水溶液和5%（质量分数）的酪蛋白酸钠水溶液的混合液；且海藻酸钠水溶液和酪蛋白酸钠水溶液的质量比为1:1。

实施例27中乳化剂为2%（质量分数）的海藻酸钠水溶液和5%（质量分数）的酪蛋白酸钠水溶液的混合液；且海藻酸钠水溶液和酪蛋白酸钠水溶液的质量比为3:1。

实施例28-29和对比例17，同实施例26，区别仅在于，液体石蜡选用不同，具体如下：

实施例28中液体石蜡为含有0.5%（质量分数）司盘-80的液体石蜡。

实施例29中液体石蜡为含有1.8%（质量分数）司盘-80的液体石蜡。

对比例17中液体石蜡中不含有司盘-80。

实施例30-31，同实施例26，区别仅在于，固化交联剂选用不同，具体如下：

实施例30中固化交联剂为0.1M CaCl₂溶液。

实施例31中固化交联剂为含有0.5%（质量分数）壳聚糖的0.1M CaCl₂溶液。

实施例32-33，同实施例26，区别仅在于，步骤4中清洗溶液选用不同，具体如下：

实施例32步骤4中，将步骤3中获得的微囊用去离子水清洗。

实施例33步骤4中，将步骤3中获得的微囊用3%（质量分数）的吐温-80水溶液清洗。

为了检测实施例19-33和对比例13-17提供的微囊制剂的有效性，申请人进行了体外缓释实验。

体外释放试验，具体操作如下：

分别称量实施例19-33和对比例13-17提供的微囊制剂10mg，添加至加有100ml介质溶液的锥形瓶中，置于摇床中，并设置恒温摇床的温度37℃，转速100rpm/min，其中，前4h为pH＝1.5的模拟胃酸溶液，后6h为pH=6.8的模拟肠道溶液，每间隔1h取样1ml，同时补加同温同体积释放介质，记录实验结果如下表5所示。

表5：

结合表5实验结果可知，本申请将复合生物酶制成微囊制剂，可实现微囊在胃中的缓慢释放，起到止血和持续修复胃黏膜的效果；同时，能够确保微囊进入肠道，起到治疗肠道出血，修复肠道黏膜的效果；本申请实施例26中，微囊制剂在模拟胃酸溶液中作用4小时后，累计释放率达44.12%，在模拟肠道溶液中作用6小时后，累计释放率达到91.41%，且不管是在模拟胃酸溶液中，还是模拟肠道溶液中，其释放速度缓慢，释放速度平稳，药物浓度波动小，累计释放时间基本可持续到12小时。

本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (10)

1.一种复合生物酶，其特征在于，所述复合生物酶为重组溶葡萄球菌酶、溶菌酶、凝血酶、稳定剂复合物用无菌去离子水配制得到的复合生物酶溶液；

所述复合生物酶溶液中重组溶葡萄球菌酶用量为20-40U/ml，溶菌酶用量为20000-40000U/ml，凝血酶用量为10-100U/ml，稳定剂复合物0.0005-0.01 g/ml；

所述稳定剂复合物由甘氨酸：明胶：甘油按质量比2:1:3混合而成。

2.一种敷料制剂，其特征在于，所述敷料制剂以权利要求1所述的复合生物酶做敷料主药，所述敷料制剂包括以下重量份的原料：权利要求1所述的复合生物酶10-28份、支撑原料35-55份、油剂3-7份、硬脂酰乳酸钠0.5-2份、发泡剂0.01-0.03份、抗氧化剂0.01-0.03份、去离子水45-70份。

3.根据权利要求2所述的敷料制剂，其特征在于，所述敷料制剂，由以下方法制得：

S1、按比重称取原料复合生物酶、支撑原料、油剂、硬脂酰乳酸钠、发泡剂、抗氧化剂、去离子水备用；

S2、将支撑原料加去离子水升温至65-80℃搅拌溶解，得溶液A；

S3、往溶液A加入油剂和硬脂酰乳酸钠搅拌混合均匀后，降至室温加入复合生物酶和抗氧化剂，继续搅拌混合均匀，得溶液B；

S4、将溶液B加发泡剂发泡后，倒入成型模具中，冷冻成型后灭菌包装，即得所需敷料制剂。

4.一种微囊制剂，其特征在于，所述微囊制剂以权利要求1所述的复合生物酶做囊心混合液，所述微囊制剂还包括囊壁，所述囊心混合液和囊壁的质量比为1:1-3.5。

5.根据权利要求4所述的微囊制剂，其特征在于，所述囊壁包括原料：乳化剂、液体石蜡和固化交联剂；

所述乳化剂、液体石蜡和固化交联剂的质量比为12-16:1-3:4-7。

6.根据权利要求4所述的微囊制剂，其特征在于，所述微囊制剂由以下方法制得：

将囊心混合液与乳化剂乳化搅拌混匀后，加入液体石蜡继续搅拌乳化，调节pH后，加固化交联剂进行微囊固化，过滤后利用洗脱溶液进行洗脱，获得复合生物酶微囊制剂。

7.根据权利要求5所述的微囊制剂，其特征在于，所述乳化剂为2%质量分数的海藻酸钠水溶液和/或5%质量分数的酪蛋白酸钠水溶液。

8.根据权利要求5所述的微囊制剂，其特征在于，所述液体石蜡为含有0.5-1.8%质量分数司盘-80的液体石蜡。

9.根据权利要求5所述的微囊制剂，其特征在于，所述固化交联剂为含有0-0.5%质量分数壳聚糖的0.1M CaCl₂溶液。

10.根据权利要求6所述的微囊制剂，其特征在于，所述洗脱溶液为0-3%质量分数的吐温-80水溶液。