CN115379828A - 用于治疗和预防肺病的组合物和方法 - Google Patents

Abstract

本文提供了用于治疗和预防肺病的组合物和方法。具体而言，本文提供了表面活性剂蛋白‑A(SP‑A)肽类似物(例如，SP‑A肽模拟物)及其在治疗和预防肺病(例如，哮喘或COPD)中的用途。

Description

用于治疗和预防肺病的组合物和方法

相关专利申请的交叉引用

本申请要求于2020年4月8日提交的美国临时申请63/006,831的权益，其通过引用整体并入本文。

技术领域

本文提供了用于治疗和预防肺病的组合物和方法。具体而言，本文提供了表面活性剂蛋白-A(SP-A)肽类似物(例如，SP-A肽模拟物)及其在治疗和预防肺病(例如，哮喘或COPD)中的用途。

发明背景

哮喘是儿童和成人中最常见的呼吸道疾病，并且表现为非特异性气道高反应性、炎症和间歇性呼吸道症状综合征，影响10％的人群(Bousquet等人，Bull World HealthOrgan.2005；83(7):548-54.PubMed PMID:16175830；Mannino等人，Surveillance forasthma--United States,1980-1999.MMWR Surveill Summ.2002；51(1):1-13.PubMedPMID:12420904)。它是由感染、环境过敏原或其他刺激触发的(Bousquet等人，Bull WorldHealth Organ.2005；83(7):548-54.PubMed PMID:16175830；Mannino等人，Surveillancefor asthma--United States,1980-1999.MMWR Surveill Summ.2002；51(1):1-13.PubMedPMID:12420904)。

由于疾病的异质性，在许多情况下对哮喘的了解仍然很少且难以管理。哮喘发病率和死亡率的一个重要原因是急性加重，此可导致气道损伤、重塑、肺功能下降和死亡。(Halwani R等人，Curr Opin Pharmacol.2010；10(3):236-45.PubMed PMID:20591736；Firszt R,Kraft M.Pharmacotherapy of severe asthma.Curr Opin Pharmacol.2010；10(3):266-71.PubMed PMID:20462794)。大部分加重是由呼吸道感染(诸如鼻病毒或肺炎支原体)引起的。对感染的反应很复杂，涉及先天免疫系统和适应性免疫系统(Kim HY等人，The many paths to asthma:phenotype shaped by innate and adaptive immunity.NatImmunol.2010；11(7):577-84.PubMed PMID:20562844)。更严重的哮喘患者的加重尤其值得关注，因为在美国每年用于哮喘相关医疗保健所花费的147亿美元中，急性加重住院占了三分之一。此外，该人群中的加重与肺功能下降加速相关(Peat JK,Woolcock AJ,CullenK.Rate of decline of lung function in subjects with asthma.Eur J RespirDis.1987；70(3):171-9.PubMed PMID:3569449；Peat JK,Woolcock AJ,Cullen K.Rate ofdecline of lung function in subjects with asthma.Eur J Respir Dis.1987；70(3):171-9.PubMed PMID:3569449)。由于肺功能下降是严重加重的危险因素(Osborne ML,Pedula KL,O'Hollaren M,Ettinger KM,Stibolt T,Buist AS等人，Assessing futureneed for acute care in adult asthmatics:the Profile of Asthma Risk Study:aprospective health maintenance organization-based study.Chest.2007；132(4):1151-61.PubMed PMID:17573515；Dougherty RH,Fahy JV.Acute exacerbations ofasthma:epidemiology,biology and the exacerbation-prone phenotype.Clin ExpAllergy.2009；39(2):193-202.PubMed PMID:19187331)，这种恶性循环可促进哮喘的易加重表型。因此，对驱动哮喘恶化的机制的理解已经成为对哮喘病理生物学的理解的进展的关键障碍。

完整的免疫系统和宿主防御功能对于预防哮喘加重至关重要。表面活性剂是降低肺气液界面的表面张力并参与宿主防御的一种脂蛋白复合物(Han S,Mallampalli RK.Therole of surfactant in lung disease and host defense against pulmonaryinfections.Annals of the American Thoracic Society.2015；12(5):765-74.Epub2015/03/06.doi:10.1513/AnnalsATS.201411-507FR.PubMed PMID:25742123)。肺的肺表面活性剂系统是一种细胞外脂质和蛋白质复合物，存在于空气/组织界面，它调节肺泡室的生物物理性质和器官的先天免疫系统。已显示，表面活性剂蛋白A(SP-A)促进关键细胞功能，所述关键细胞功能可减轻疾病的严重程度和加重，包括增强嗜酸性粒细胞(哮喘病理生物学中的一种关键细胞)的凋亡，减少在暴露于白介素(IL)-13(过敏性哮喘表型所必需的细胞因子)的情况下由气道上皮细胞产生的粘蛋白，并减少IL-6的产生，IL-6是在2型或过敏性炎症中重要的另一种细胞因子。

气道炎症是哮喘的标志性特征。嗜酸性粒细胞在具有2型炎性哮喘表型的个体中很突出，并且在循环、痰和气道粘膜中大量积聚(参见，例如，Wenzel,S.E.,Naturemedicine,2012.18(5):第716-25页)。气道中嗜酸性粒细胞的积累和延长的活力与更大的哮喘严重程度密切相关(参见，例如，Green,R.H.等人，Lancet,2002.360(9347):第1715-21页；Duncan,C.J.等人，The European respiratory journal,2003.22(3):第484-90页；Gibson,P.G.等人，Thorax,2003.58(2):第116-21页；Leitch,A.E.,等人，Mucosalimmunology,2008.1(5):第350-63页)，并且它们的存在是由2型细胞因子白介素(IL)-4、5和13驱动的。最近的研究显示，在严重哮喘患者组中，大约50％的肺组织中存在嗜酸性粒细胞(参见，例如，Wenzel,S.E.等人，American journal of respiratory and criticalcare medicine,1999.160(3):第1001-8页；Wenzel,S.E.,Asthma phenotypes:theevolution from clinical to molecular approaches.Nature medicine,2012.18(5):第716-25页)。此外，以减少嗜酸性粒细胞为目标的治疗策略已显示可降低哮喘入院率和加重(参见，例如，Green,R.H.等人，Lancet,2002.360(9347):第1715-21页；Jayaram,L.等人，The European respiratory journal,2006.27(3):第483-94页)。清除和快速去除凋亡细胞是导致炎症消退和哮喘症状缓解的重要过程。凋亡细胞清除效率低下会导致继发性坏死或细胞溶解，细胞内容物的释放会损害组织，并延长炎症和哮喘症状的持续时间。此外，哮喘严重程度与嗜酸性粒细胞活力延长密切相关(参见，例如，Duncan,C.J.等人，TheEuropean respiratory journal,2003.22(3):第484-90页；Fitzpatrick,A.M.等人，TheJournal of allergy and clinical immunology,2008.121(6):第1372-8,1378e1-3页；Leitch,A.E.等人，Relevance of granulocyte apoptosis to resolution ofinflammation at the respiratory mucosa.Mucosal immunology,2008.1(5):第350-63页)。有趣的是，作为全球哮喘治疗的主要药物的吸入性β-2激动剂已显示可延长嗜酸性粒细胞的存活时间(参见，例如，Nielson,C.P.和N.E.Hadjokas,American journal ofrespiratory and critical care medicine,1998.157(1):第184-91页)，并且实际上可能会加剧哮喘或至少促使利用β-2激动剂所见的可变反应(参见，例如，Choudhry,S.等人，Pharmacogenetics and genomics,2010.20(6):第351-8页)。

需要额外的哮喘治疗。

本发明满足了这种需要。

发明内容

表面活性剂蛋白A(SP-A)是脂蛋白复合物(肺表面活性剂)中最丰富的蛋白质组分。在人类中，全长寡聚体SP-A是SP-A1和SP-A2基因的产物。尽管远端气道中的II型肺泡细胞是SP-A的主要生产者，但它是由棒状细胞和粘膜下腺独立于传导气道中的肺表面活性剂合成的(参见Auten,R.L.等人，1990Am J Respir Cell Mol Biol 3:491-496；Goss,K.L.,1998Am J Respir Cell Mol Biol 19:613-621)。在鼻粘膜中，可在纤毛上皮细胞、浆液腺泡和粘膜下腺的细胞质中检测到SP-A(参见Kim,J.K.等人，2007Am J Physiol Lung CellMol Physiol 292:L879-884；Wootten,C.T.等人，2006Arch Otolaryngol Head Neck Surg132:1001-1007；Woodworth,B.A.等人，2006Am J Rhinol 20:461-465)。

SP-A在调节2型相关过敏原诱导的炎症中起重要作用。与野生型小鼠相比，缺乏SP-A的小鼠在用卵清蛋白(OVA)攻击时显著增加了2型相关细胞因子水平、IgE水平，最显著的是嗜酸性粒细胞水平(参见Pastva,A.M.等人，2011J Immunol 186:2842-2849)。SP-A水平降低的肥胖哮喘患者具有更严重的组织嗜酸性粒细胞增多，并且在哮喘小鼠模型中用外源性SP-A治疗已显示显著减轻组织嗜酸性粒细胞增多(参见Lugogo,N.等人，2017JAllergyClin Immunol.；Desai,D.等人，2013Am J Respir Crit Care Med 188:657-663；van derWiel,E.等人，2014Am J Respir Crit Care Med 189:1281-1284)。此外，与从非哮喘患者中分离的SP-A相比，从哮喘患者中分离的SP-A在肺炎支原体(Mp)感染(一种与哮喘加重高度相关的细菌)的情况下不能减弱气道上皮细胞IL-8和Muc5ac的产生(参见Wang,Y.等人，2011Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 301:L598-606)。

已显示，用谷氨酰胺(Q)取代SP-A2内的第223位的赖氨酸(K)的单核苷酸多态性导致过敏性气道炎症中嗜酸性粒细胞调节的改变(参见Dy,A.B.C.等人，2019J Immunol 203:1122-1130)(Gln223Lys)(SEQ ID NO:1所示的SP-A野生型氨基酸序列内的223Q/K)。更具体地说，与在第223位含有Q的SP-A2相比，具有这种Q到K氨基酸取代的SP-A2不能促进嗜酸性粒细胞凋亡。此外，已显示在该位置存在Q可防止呼吸道损伤(参见

J.等人，2002JInfect Dis 185:283-289；Marttila,R.等人，2003Ann Med 35:344-352)。这些发现强调了SP-A内的这个活性区域与实现正常气道功能的相关性。

SP-A的人类野生型氨基酸序列(SEQ ID NO:1)

嗜酸性粒细胞是众所周知的终末期效应细胞，并且是2型高哮喘中所经历的症状的主要促成因素。吸入性皮质类固醇疗法，通过抑制嗜酸性粒细胞特异性趋化因子(参见Stellato,C.等人，1999J Immunol 163:5624-5632)和促进嗜酸性粒细胞存活的细胞因子(参见，Schleimer,R.P.和B.S.Bochner.1994.J Allergy Clin Immunol 94:1202-1213)的产生来帮助降低嗜酸性粒细胞活力，是一种针对哮喘症状和加重的高效治疗策略。因此，可推断出，嗜酸性粒细胞凋亡及其随后的清除是2型相关气道炎症消退的重要步骤。

通过抑制嗜酸性粒细胞存活，皮质类固醇可被视为嗜酸性粒细胞正常化治疗策略。这与使用生物制剂的嗜酸性粒细胞耗竭治疗策略形成对比，所述生物制剂诸如美泊利单抗(Mepolizumab)、瑞利珠单抗(Reslizumab)(抗IL 5抗体)和贝那利珠单抗(Benralizumab)(抗IL5Rα抗体)，其目标是显著减少循环嗜酸性粒细胞及所述嗜酸性粒细胞在骨髓中的成熟(参见Roufosse,F.2018.Front Med(Lausanne)5:49)。尽管吸入性皮质类固醇疗法是治疗哮喘的主要疗法，但类固醇抗性以及与此类长期疗法相关的已知副作用仍然是一个挑战。尽管目前在临床试验和市场上的生物制剂是类固醇节用的，但嗜酸性粒细胞耗竭的长期影响仍然未知。

初步数据表明，从跨越第223位的活性位点衍生的长度为10个和20个氨基酸(10聚体和20聚体)的SP-A天然肽在哮喘的临床前小鼠模型中可降低气道高反应性、气道粘液产生和嗜酸性粒细胞增多(图1)。

在开发本发明实施方案的过程中进行的实验开发了源自SP-A活性位点的具有改进的稳定性和生物利用度的小分子，作为靶向嗜酸性粒细胞正常化的治疗剂。事实上，所述实验筛选了10聚体和20聚体SP-A肽，以及一系列源自全长SP-A的肽模拟物，以确定它们对嗜酸性粒细胞的直接凋亡促进功能。就SP-A对体外嗜酸性粒细胞的细胞毒性作用而言，鉴定了几种与全长SP-A非常相似的潜在肽模拟物。所述结果代表了一个概念验证，即源自SP-A的活性位点的小分子具有抗嗜酸性粒细胞的活性，并为开发用于过敏性气道炎症的一类新的治疗剂铺平了道路。

因此，本文提供了用于治疗和预防肺病的组合物和方法。具体而言，本文提供SP-A肽类似物(例如，SP-A肽模拟物)及其在治疗和预防肺病(例如，哮喘或COPD)中的用途。

例如，在一些实施方案中，提供了一种组合物，所述组合物包含有包含选自以下的氨基酸序列的肽类似物：例如，Ac-KEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:2)、Ac-WGKEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:3)、(Ac-KEQCVEMYTD-NH₂)₂(SEQ ID NO:4)、Ac-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:5)、H-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:6)、Ac-KEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:7)、Ac-KEQSVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:8)、Ac-KEQAVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:9)、Ac-SDGTPVNYTNWYRGEPAGRGKEQ-NH₂(SEQ ID NO:10)、Ac-GDFRYSDGTPVNYTNWYRGE-NH₂(SEQ IDNO:11)、Ac-WGKEQAVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:12)、Ac-WGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ IDNO:13)、Ac-RGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:14)、Ac-wGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ IDNO:15)，或者与所述肽具有至少90％(例如，91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的肽类似物。进一步的实施方案提供了基本上由肽类似物组成的组合物，所述肽类似物选自例如Ac-KEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:2)、Ac-WGKEQCVEMYTD-NH₂(SEQID NO:3)、(Ac-KEQCVEMYTD-NH₂)₂(SEQ ID NO:4)、Ac-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:5)、H-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:6)、Ac-KEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:7)、Ac-KEQSVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:8)、Ac-KEQAVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:9)、Ac-SDGTPVNYTNWYRGEPAGRGKEQ-NH₂(SEQ ID NO:10)、Ac-GDFRYSDGTPVNYTNWYRGE-NH₂(SEQ ID NO:11)、Ac-WGKEQAVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:12)、Ac-WGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:13)、Ac-RGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:14)、Ac-wGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:15)。在一些实施方案中，组合物是药物组合物。在一些实施方案中，组合物包含药学上可接受的载体。在一些实施方案中，组合物被配制用于肺部递送。

进一步的实施方案提供了一种系统，所述系统包括：a)本文所述的任何一种组合物；b)用于组合物的肺部递送的装置。在一些实施例中，装置是定量吸入器(metered doseinhaler)。

另外的实施方案提供了一种增强细胞中SP-A活性的方法，所述方法包括：将本文所述的任何一种组合物递送至细胞。在一些实施方案中，细胞为肺细胞。在一些实施方案中，细胞为体内的。在一些实施方案中，组合物减少肺中的粘蛋白产生和/或减轻肺中的嗜酸性粒细胞增多。在一些实施方案中，细胞在经诊断患有哮喘的受试者中。在一些实施方案中，施用减少或预防受试者的哮喘的症状或标志物。在一些实施方案中，受试者是肥胖或不肥胖的。在一些实施方案中，肽结合选自例如FC(CD16/32)、Sirp-α、TLR-2或EGFR的受体。

其他实施方案提供了一种治疗或预防受试者的肺病(例如哮喘或COPD)的方法，包括：将本文所述的任何一种组合物施用于受试者。

还有其他实施方案提供了本文所述的任何一种组合物增强细胞中的SP-A活性的用途。其他实施方案提供本文所述的任何一种组合物治疗或预防受试者中的肺病(例如哮喘或COPD)的用途。

本文描述另外的实施方案。

附图说明

图1A-C.在体内哮喘小鼠模型中评估SP-A衍生的10聚体天然肽。A)HDM实验性过敏原攻击的示意图。B)终末HDM攻击后6天野生型小鼠乙酰甲胆碱攻击期间的牛顿阻力(Rn)。C)通过PAS评分在BAL(左图)和粘蛋白产生(右图)中的总嗜酸性粒细胞计数。非配对t检验，*p<0.05，**p<0.01。

图2A-F.通过RTCA评估全长SP-A和天然肽对嗜酸性粒细胞的细胞毒性作用。对于SP-A(A-B)、20聚体肽(C-D)和10聚体肽(E-F)，显示了每个剂量的归一化细胞指数和计算的曲线下面积。

图3A-B.通过RTCA使用质量浓度评估候选肽模拟物对嗜酸性粒细胞的细胞毒性作用。对于856、867、868、870、871、882、883和884，显示了每个剂量的归一化细胞指数(A)和计算的曲线下面积(B)。

图4A-B.通过RTCA使用摩尔浓度评估候选肽模拟物对嗜酸性粒细胞的细胞毒性作用。对于888、889、891、892、893和894，显示了每个剂量的归一化细胞指数(A)和计算的曲线下面积(B)。

定义

术语“多肽”和“蛋白质”可互换使用，指氨基酸残基的聚合物，包括天然或非天然氨基酸残基，并且不限于最小长度。因此，肽、寡肽、二聚体、多聚体等包括在定义内。全长蛋白质及其片段都包含在该定义中。所述术语还包括多肽的翻译后修饰，包括例如糖基化、唾液酸化、乙酰化和磷酸化。此外，本文中的“多肽”还指修饰的蛋白质，诸如对天然序列的单个或多个氨基酸残基缺失、添加和取代，只要所述蛋白质维持所需活性即可。例如，可取代丝氨酸残基以消除单个反应性半胱氨酸或去除二硫键，或者可进行保守氨基酸取代以消除切割位点。这些修饰可能是有意的，如通过定点诱变，或可能是偶然的，例如通过宿主的突变，此由于聚合酶链式反应(PCR)扩增而产生蛋白质或错误。

如本文所用，术语“肽”是指通过肽键连接在一起的氨基酸的短聚合物。与其他氨基酸聚合物(例如蛋白质、多肽等)相比，肽的长度为约50个氨基酸或更少。肽可包含天然氨基酸、非天然氨基酸、氨基酸类似物和/或修饰的氨基酸。肽可为天然存在的蛋白质的子序列或非天然(合成)序列。

“野生型”是指基因、等位基因、基因型、多肽或表型或任何这些的片段的非突变形式。它可以天然存在或重组产生。

“变体”是通过单个或多个氨基酸取代、缺失和/或添加而不同于参照核酸分子或多肽并基本上保留参照核酸分子或多肽的至少一种生物活性的核酸分子或多肽。

术语“肽模拟物(peptide mimetic)”或“肽模拟物(peptidomimetic)”是指模拟源自蛋白质或肽的序列的肽样分子。肽模拟物(peptide mimetic)或肽模拟物(peptidomimetic)可含有氨基酸和/或非氨基酸组分。肽模拟物的实例包括化学修饰的肽、类肽(侧链附加到肽主链的氮原子上，而不是附加到α-碳上)、β-肽(氨基与β碳而不是α碳键合)，等等。

如本文所用，“保守”氨基酸取代是指肽或多肽中的氨基酸被具有相似化学性质(例如大小或电荷)的另一种氨基酸取代。出于本公开的目的，以下八组中的每一组含有彼此保守取代的氨基酸：

1)丙氨酸(A)和甘氨酸(G)；

2)天冬氨酸(D)和谷氨酸(E)；

3)天冬酰胺(N)和谷氨酰胺(Q)；

4)精氨酸(R)和赖氨酸(K)；

5)异亮氨酸(I)、亮氨酸(L)、甲硫氨酸(M)和缬氨酸(V)；

6)苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)和色氨酸(W)；

7)丝氨酸(S)和苏氨酸(T)；和

8)半胱氨酸(C)和甲硫氨酸(M)。

天然存在的残基可基于共同的侧链性质分为几类，例如：极性阳性(组氨酸(H)、赖氨酸(K)和精氨酸(R))；极性阴性(天冬氨酸(D)、谷氨酸(E))；极性中性(丝氨酸(S)、苏氨酸(T)、天冬酰胺(N)、谷氨酰胺(Q))；非极性脂肪族(丙氨酸(A)、缬氨酸(V)、亮氨酸(L)、异亮氨酸(I)、甲硫氨酸(M))；非极性芳香族(苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)、色氨酸(W))；脯氨酸和甘氨酸；和半胱氨酸。如本文所用，“半保守”氨基酸取代是指肽或多肽中的氨基酸被同一类内的另一种氨基酸取代。

在一些实施方案中，除非另有说明，否则保守或半保守氨基酸取代还可涵盖具有与天然残基相似的化学性质的非天然存在的氨基酸残基。这些非天然残基通常通过化学肽合成而非通过在生物系统中合成来掺入。这些包括但不限于肽模拟物和其他逆转或倒置形式的氨基酸部分。在一些实施方案中，本文的实施方案可限于天然氨基酸、非天然氨基酸和/或氨基酸类似物。

非保守取代可涉及将一类的成员替换为另一类的成员。

如本文所用，术语“序列同一性”是指两个聚合物序列(例如，肽、多肽、核酸等)具有相同的单体亚基顺序组成的程度。术语“序列相似性”是指两个聚合物序列(例如肽、多肽、核酸等)仅在保守性和/或半保守氨基酸取代上不同的程度。“序列同一性百分比”(或“序列相似性百分比”)通过以下方式计算：(1)在比较窗(例如，较长序列的长度、较短序列的长度、指定的窗等)内比较两个最佳比对的序列，(2)确定含有相同(或相似)单体的位置的数量(例如，相同的氨基酸出现在两个序列中，相似的氨基酸出现在两个序列中)以得到匹配位置的数量，(3)将匹配位置的数量除以比较窗中的位置总数(例如，较长序列的长度、较短序列的长度、指定窗)，以及(4)将结果乘以100以得到序列同一性百分比或序列相似性百分比。例如，如果肽A和肽B的长度均为20个氨基酸，并且除了1个位置外都具有相同的氨基酸，则肽A和肽B具有95％序列同一性。如果不同位置的氨基酸共享相同的生物物理特性(例如，两者都是酸性的)，则肽A和肽B将具有100％序列相似性。再举一个例子，如果肽C的长度为20个氨基酸，并且肽D的长度为15个氨基酸，并且肽D的15个氨基酸中有14个与肽C的一部分的氨基酸相同，那么肽C和肽D具有70％序列同一性，但肽D与肽C的最佳比较窗具有93.3％序列同一性。出于计算本文的“序列同一性百分比”(或“序列相似性百分比”)的目的，比对序列中的任何缺口都被视为该位置的错配。

“受试者”、“个体”、“宿主”、“动物”和“患者”在本文中可互换使用，指哺乳动物，包括但不限于啮齿动物、猿猴、人类、猫科动物、犬科动物、马科动物、牛科动物、猪、绵羊、山羊、哺乳动物实验室动物、哺乳动物农场动物、哺乳动物运动动物和哺乳动物宠物。

如本文所用，术语“施用(administration)”和“施用(administering)”是指将药物、前药或其他剂或治疗性治疗(例如，SP-A肽)给予受试者或体内、体外或离体细胞、组织和器官。向人体施用的示例性途径可通过脑或脊髓的蛛网膜下的空间(鞘内)、眼睛(眼部)、口(口服)、皮肤(局部或经皮)、鼻子(经鼻)、肺(吸入)、口腔粘膜(经颊)、耳朵、直肠、阴道、通过注射(例如，静脉内、皮下、肿瘤内、腹膜内等)等进行。

如本文所用，术语“共施用(co-administration)”和“共施用(co-administering)”是指向受试者施用至少两种剂(例如，多重SP-A肽或SP-A肽和另一种治疗剂)或疗法。在一些实施方案中，两种或更多种剂或疗法的共施用是同时的。在其他实施方案中，第一剂/疗法是在第二剂/疗法之前施用。本领域的技术人员了解所使用的各种剂或疗法的配制剂或施用途径可变化。本领域的技术人员可容易地决定共施用的适当剂量。在一些实施方案中，当共施用剂或疗法时，对应剂或疗法以比适于它们单独施用的剂量低的剂量施用。因此，在剂或疗法的共施用降低潜在有害(例如，毒性)剂的必要剂量的实施方案中，和/或当两种或多种剂的共施用导致受试者通过另一剂的共施用而对其中一种剂的有益效应敏感时，共施用是特别需要的。

如本文所用，“治疗”涵盖针对哺乳动物(包括人类)的疾病的治疗剂的任何施用或应用，并且包括通过引起消退或者恢复或修复丧失、缺失或缺陷功能抑制疾病、阻止其发展，或缓解疾病；或者刺激无效过程。

“药学上可接受的载体”是指与治疗剂一起使用以施用于受试者的本领域常规的无毒固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、包封材料、配制助剂或载体。药学上可接受的载体在所采用的剂量和浓度下对接受者是无毒的并且与配制剂的其他成分相容。药学上可接受的载体适用于所采用的配制剂。例如，如果要口服施用治疗剂，则载体可以是凝胶胶囊。如果要皮下施用治疗剂，则载体理想地对皮肤没有刺激性并且不会引起注射部位反应。

具体实施方式

如所述，在开发本发明实施方案的过程中进行的实验开发了源自SP-A活性位点的具有改进的稳定性和生物利用度的小分子，作为靶向嗜酸性粒细胞正常化的治疗剂。事实上，所述实验筛选了10聚体和20聚体SP-A肽，以及一系列源自全长SP-A的肽模拟物，以确定它们对嗜酸性粒细胞的直接凋亡促进功能。就SP-A对体外嗜酸性粒细胞的细胞毒性作用而言，鉴定了几种与全长SP-A非常相似的潜在肽模拟物。所述结果代表了一个概念验证，即源自SP-A的活性位点的小分子具有抗嗜酸性粒细胞的活性，并为开发用于过敏性气道炎症的一类新的治疗剂铺平了道路。

因此，本文提供了用于治疗和预防肺病的组合物和方法。具体而言，本文提供SP-A肽及其在治疗和预防肺病(例如，哮喘)中的用途。

在某些实施方案中，本发明提供了使用肽类似物治疗哮喘，所述肽类似物的序列源自或改编自内源人类SP-A的活性区域，该活性区域在SP-A2肽的第223位含有主要Q等位基因。例如，在一些实施方案中，提供一种组合物，所述组合物包含有包含选自以下的氨基酸序列、基本上由其组成或由其组成的肽：例如，Ac-KEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:2)、Ac-WGKEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:3)、(Ac-KEQCVEMYTD-NH₂)₂(SEQ ID NO:4)、Ac-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:5)、H-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:6)、Ac-KEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:7)、Ac-KEQSVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:8)、Ac-KEQAVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:9)、Ac-SDGTPVNYTNWYRGEPAGRGKEQ-NH₂(SEQ ID NO:10)、Ac-GDFRYSDGTPVNYTNWYRGE-NH₂(SEQ IDNO:11)、Ac-WGKEQAVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:12)、Ac-WGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ IDNO:13)、Ac-RGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:14)、Ac-wGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ IDNO:15)，或者与所述肽具有至少90％(例如，91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的肽类似物。进一步的实施方案提供了基本上由肽类似物组成的组合物，所述肽类似物选自例如Ac-KEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:2)、Ac-WGKEQCVEMYTD-NH₂(SEQID NO:3)、(Ac-KEQCVEMYTD-NH₂)₂(SEQ ID NO:4)、Ac-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:5)、H-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:6)、Ac-KEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:7)、Ac-KEQSVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:8)、Ac-KEQAVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:9)、Ac-SDGTPVNYTNWYRGEPAGRGKEQ-NH₂(SEQ ID NO:10)、Ac-GDFRYSDGTPVNYTNWYRGE-NH₂(SEQ ID NO:11)、Ac-WGKEQAVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:12)、Ac-WGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:13)、Ac-RGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:14)、Ac-wGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:15)。在一些实施方案中，肽结合选自例如FC(CD16/32)、Sirp-α、TLR-2或EGFR的受体。

本发明进一步提供了本文所述的SP-A肽的变体和模拟物。在一些实施方案中，相对于本文所述的肽，SP-A肽包含保守、半保守和/或非保守取代(例如，在涉及SP-A信号传导的位置或不涉及SP-A信号传导的位置)。

实施方案不限于特定的取代。在一些实施方案中，本文所述的肽被进一步修饰(例如，标准氨基酸的取代、缺失或添加；化学修饰等)。本领域理解的修饰包括N-末端修饰、C-末端修饰(其保护肽免于蛋白水解降解)、酰胺基团的烷基化、烃“装订”(例如，以稳定α-螺旋构象)。在一些实施方案中，本文所述的肽可通过例如带电残基的保守残基取代(K至R、R至K、D至E和E至D)来修饰。在一些实施方案中，所述保守取代提供对例如受体结合位点的细微变化，目标为提高特异性和/或生物活性。末端羧基的修饰包括但不限于酰胺、低级烷基酰胺、受限烷基(例如支链、环状、稠合、金刚烷基)烷基、二烷基酰胺和低级烷基酯修饰。低级烷基是C1-C4烷基。此外，一个或多个侧基或末端基团可由普通熟练的肽化学家已知的保护基团保护。氨基酸的α-碳可以是单甲基化或二甲基化的。

在一些实施方案中，引入一个或多个肽内二硫键(例如，在肽内的两个半胱氨酸之间)。在一些实施方案中，肽内二硫键的存在使肽稳定。

在一些实施方案中，本文所述的任何实施方案可包含对应于本文所述的肽的肽模拟物，其具有本领域理解的各种修饰。在一些实施方案中，本文所述的肽序列中的残基可被具有相似特性(例如，疏水性至疏水性、中性至中性等)或具有其他所需特性(例如，酸性更强、疏水性更强、体积更小、体积更大等)的氨基酸取代。在一些实施方案中，非天然氨基酸(或除了标准的20种氨基酸之外的天然存在的氨基酸)被取代以实现所需的性质。

在一些实施方案中，具有在生理条件下带正电的侧链的残基或需要带正电的侧链的残基被包括但不限于以下的残基取代：赖氨酸、高赖氨酸、δ-羟基赖氨酸、高精氨酸、2,4-二氨基丁酸、3-高精氨酸、D-精氨酸、精氨酸(精氨酸中的-COOH由-CHO置换)、2-氨基-3-胍基丙酸、硝基精氨酸(N(G)-硝基精氨酸)、亚硝基精氨酸(N(G)-亚硝基精氨酸)、甲基精氨酸(N-甲基-精氨酸)、ε-N-甲基赖氨酸、别羟赖氨酸、2,3-二氨基丙酸、2,2'-二氨基庚二酸、鸟氨酸、对称-二甲基精氨酸、不对称-二甲基精氨酸、2,6-二氨基己炔酸、对氨基苯甲酸和3-氨基酪氨酸和组氨酸1-甲基组氨酸和3-甲基组氨酸。中性残基是具有在生理条件下不带电荷的侧链的残基。极性残基优选在侧链中具有至少一个极性基团。在一些实施方案中，极性基团选自羟基、巯基、胺、酰胺和酯基团或允许形成氢桥的其他基团。

在一些实施方案中，具有在生理条件下中性/极性的侧链的残基或需要中性侧链的残基被包括但不限于以下的残基取代：天冬酰胺、半胱氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、瓜氨酸、N-甲基丝氨酸、高丝氨酸、别-苏氨酸和3,5-二硝基-酪氨酸和β-高丝氨酸。

具有非极性疏水侧链的残基是在生理条件下不带电荷的残基，优选具有高于0、特别是高于3的亲水指数。在一些实施方案中，非极性疏水侧链选自具有1至10个、优选2至6个碳原子的烷基、亚烷基、烷氧基、烯氧基、烷基硫烷基和烯基硫烷基残基，或具有5至12个碳原子的芳基残基。在一些实施方案中，具有非极性疏水侧链的残基或需要非极性疏水侧链的残基被包括但不限于以下的残基取代：亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、N-甲基亮氨酸、叔丁基甘氨酸、辛基甘氨酸、环己基丙氨酸、β-丙氨酸、1-氨基环己基羧酸、N-甲基异亮氨酸、正亮氨酸、正缬氨酸和N-甲基缬氨酸。

在一些实施方案中，肽和多肽是分离的和/或纯化的(或基本上分离的和/或基本上纯化的)。因此，在所述实施方案中，肽和/或多肽以基本上分离的形式提供。在一些实施方案中，例如，作为固相肽合成的结果，肽和/或多肽是从其他肽和/或多肽中分离出。或者，在从重组产生的细胞裂解后，肽和/或多肽可基本上从其他蛋白质中分离出。可采用蛋白质纯化的标准方法(例如，HPLC)来基本上纯化肽和/或多肽。在一些实施方案中，本发明提供多种配制剂中的肽和/或多肽的制剂，这取决于所需的用途。例如，在多肽是基本上分离的(或甚至几乎完全与其他蛋白质分离)的情况下，可将其配制在合适的介质溶液中用于储存(例如，在冷藏条件下或在冷冻条件下)。此类制剂可含有保护剂，诸如缓冲剂、防腐剂、冷冻保护剂(例如，糖，诸如海藻糖)等。此类制剂的形式可以是溶液、凝胶等。在一些实施方案中，肽和/或多肽以冻干形式制备。此外，此类制剂可包括其他所需剂，诸如小分子或其他肽、多肽或蛋白质。实际上，可提供包含本文所述的肽和/或多肽的不同实施方案的混合物的所述制剂。

在一些实施方案中，本文提供本文所述肽序列或其变体的肽模拟物形式。在一些实施方案中，肽模拟物的特征在于保留其肽等同物的极性(或非极性、疏水性等)、三维尺寸和功能性(生物活性)、但其中肽键的全部或一部分已被置换(例如，被更稳定的键联置换)的实体。在一些实施方案中，“稳定的”是指对化学降解或由水解酶的酶促降解的抗性更强。在一些实施方案中，置换酰胺键的键(例如，酰胺键替代物)保留了酰胺键的一些性质(例如，构象、空间体积、静电特性、氢键合能力等)。“Drug Design and Development”第14章，Krogsgaard,Larsen,Liljefors and Madsen(Eds)1996,Horwood Acad.Publishers提供了对肽模拟物的设计和合成的技术的一般性讨论，并通过引用将其整体并入本文。合适的酰胺键替代物包括但不限于：N-烷基化(Schmidt,R.等人,Int.J.Peptide Protein Res.,1995,46,47；通过引用整体并入本文)、逆反酰胺(Chorev,M.和Goodman,M.,Acc.Chem.Res,1993,26,266；通过引用整体并入本文)、硫代酰胺(Sherman D.B.和Spatola,A.F.J.Am.Chem.Soc.,1990,112,433；通过引用整体并入本文)、硫酯、膦酸酯、酮亚甲基(Hoffman,R.V.和Kim,H.O.J.Org.Chem.,1995,60,5107；通过引用整体并入本文)、羟基亚甲基、氟乙烯基(Allmendinger,T.等人，Tetrahydron Lett.,1990,31,7297；通过引用整体并入本文)、乙烯基、亚甲基氨基(Sasaki,Y和Abe,J.Chem.Pharm.Bull.1997 45,13；通过引用整体并入本文)、亚甲基硫基(Spatola,A.F.,Methods Neurosci,1993,13,19；通过引用整体并入本文)、烷烃(Lavielle,S.等人,Int.J.Peptide Protein Res.,1993,42,270；通过引用整体并入本文)和磺酰胺基(Luisi,G.等人，Tetrahedron Lett.1993,34,2391；通过引用整体并入本文)。

除了酰胺键的置换，肽模拟物可涉及用二肽模拟物或三肽模拟物结构置换较大的结构部分，并且在这种情况下，涉及肽键的模拟物部分、诸如唑衍生的模拟物可用作二肽置换物。合适的肽模拟物包括还原肽，其中酰胺键通过用还原剂(例如硼烷或氢化物试剂，诸如氢化铝锂)处理被还原为亚甲基胺；所述还原具有增加分子的整体阳离子性的额外优势。

其他肽模拟物包括例如通过酰胺官能化聚甘氨酸的逐步合成形成的类肽。一些肽模拟物主链将易于从它们的肽前体获得，诸如经全甲基化的肽，合适的方法由Ostresh,J.M.等人在Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1994)91,11138-11142中描述；通过引用整体并入本文。

可供应活性肽或多肽的任何载体(例如，不破坏载体内的肽或多肽)是合适的载体，并且此类载体是本领域公知的。在一些实施方案中，组合物被配制用于通过任何合适的途径施用，所述途径包括但不限于口服(例如，诸如以片剂、胶囊、颗粒剂或粉剂的形式)、舌下、经颊、肠胃外(诸如通过皮下、静脉内、肌肉内、皮内或胸骨内注射或输注(例如，作为无菌可注射的水性或非水性溶液或悬浮液等))、经鼻(包括诸如通过吸入喷雾剂向鼻膜施用)、局部(诸如以乳膏或软膏的形式)、经皮(诸如通过透皮贴剂)、经直肠(诸如以栓剂的形式)等。

药物组合物可按照良好的药学实践以与药学上可接受的载体和任选的赋形剂、佐剂等一起配制的形式施用。基于肽的药物组合物可呈固体、半固体或液体剂型的形式：诸如粉末、溶液、酏剂、糖浆、悬浮液、乳膏、滴剂、糊剂和喷雾剂。如本领域技术人员将认识到，取决于所选择的施用途径(例如丸剂、注射剂等)，确定组合物形式。通常，优选使用单位剂型以实现活性药物肽或多肽的简单和准确施用。通常，治疗有效的药物化合物以按总组合物重量计约0.5％至约99％的浓度水平、例如以足以提供所需单位剂量的量存在于这种剂型中。在一些实施方案中，药物组合物可以单个剂量或多个剂量施用。特定施用途径和剂量方案将由技术人员根据待治疗个体的状况和所述个体对治疗的反应来确定。在一些实施方案中，基于肽的药物组合物以单位剂型提供以施用于受试者，其包含肽或多肽和一种或多种无毒的药学上可接受的载体、佐剂或媒介物。可与此类材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将取决于各种因素而变化，如上所指示。多种材料可用作本发明组合物中的载体、佐剂和赋形剂，如制药领域中可获得的。可根据需要使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂，如本领域已知的那样配制可注射制剂，诸如油性溶液、悬浮液或乳液。无菌可注射制剂可采用无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂，诸如无菌无热原水或1,3-丁二醇。可采用的其他可接受的媒介物和溶剂是5％葡萄糖注射液、林格注射液和等渗氯化钠注射液(如USP/NF中所述)。此外，常常可采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。为此，可使用任何温和不挥发性油，包括合成的单甘油酯、二甘油酯或三甘油酯。脂肪酸(诸如油酸)也可用于可注射组合物的制备。本文公开的包含基本上α螺旋肽区域的肽和多肽可通过化学改变(诸如酰胺化、糖基化、酰化、硫酸化、磷酸化、乙酰化和环化)进一步衍生。此类化学改变可通过化学或生物化学方法以及通过体内过程或它们的任何组合来赋予。

本文所述的肽和多肽可制备成与各种无机和有机酸和碱的盐。所述盐包括用有机酸和无机酸例如用HCl、HBr、H₂SO₄、H₃PO₄、三氟乙酸、乙酸、甲酸、甲磺酸、甲苯磺酸、马来酸、富马酸和樟脑磺酸制备的盐。用碱制备的盐包括铵盐、碱金属盐(例如钠盐和钾盐)、碱土盐(例如钙盐和镁盐)，以及锌盐。盐可通过常规方式形成，诸如通过使产物的游离酸或碱形式与一个或多个当量的适当碱或酸在盐不溶于其中的溶剂或介质中、或在然后在真空中或通过冷冻干燥或通过在合适的离子交换树脂上将现有盐的离子交换为另一种离子来去除的溶剂(诸如水)中反应。

本文所述的肽和多肽可配制成药学上可接受的盐和/或其复合物。药学上可接受的盐包括酸加成盐，诸如含有硫酸盐、盐酸盐、磷酸盐、氨基磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、环己基氨基磺酸盐和奎宁酸盐的那些酸加成盐。药学上可接受的盐可从酸获得，所述酸诸如盐酸、硫酸、磷酸、氨基磺酸、乙酸、柠檬酸、乳酸、酒石酸、丙二酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己基氨基磺酸和奎尼酸。所述盐可通过例如使产物的游离酸或碱形式与一个或多个当量的适当碱或酸在盐不溶于其中的溶剂或介质中、或在然后在真空中或通过冷冻干燥或通过在合适的离子交换树脂上将现有盐的离子交换为另一种离子来去除的溶剂(诸如水)中反应来形成。

本文所述的肽和多肽可配制成药物组合物以与本公开的方法结合使用。本文公开的组合物可方便地以适合肠胃外施用药的配制剂形式提供，所述肠胃外施用包括皮下、肌肉内和静脉内施用、经鼻施用、肺部施用或口服施用。每种此类施用途径的肽和多肽的合适配制剂描述于标准配制剂论文，例如E.W.Martin的Remington's PharmaceuticalSciences。还参见Wang,Y.J.和Hanson,M.A.“Parenteral Formulations of Proteins andPeptides:Stability and Stabilizers,”Journal of Parenteral Science andTechnology，技术报告第10号，增刊42:2S(1988)。

本文所述的某些肽和多肽可基本上不溶于水，而微溶于大多数药学上可接受的质子溶剂和植物油中。在某些实施方案中，可添加环糊精作为水性溶解度增强剂。环糊精包括α-、β-和γ-环糊精的甲基、二甲基、羟丙基、羟乙基、葡糖基、麦芽糖基和麦芽三糖基衍生物。示例性环糊精溶解度增强剂是羟丙基-β-环糊精(HPBCD)，其可添加到任何上述组合物中以进一步改善肽或多肽的水性溶解度特性。在一个实施方案中，组合物包含0.1％至20％HPBCD、1％至15％HPBCD或2.5％至10％HPBCD。所采用的溶解度增强剂的量将取决于组合物中本公开的肽或多肽的量。在某些实施方案中，肽可在非水性极性非质子溶剂(诸如DMSO、二甲基甲酰胺(DMF)或N-甲基吡咯烷酮(NMP))中配制。

在一些情况下，将肽或多肽和另一种活性剂提供在单一组合物或溶液中以一起施用将是方便的。在其他情况下，与所述多肽分开施用另外的剂可为更有利的。

为了使用，本文所述的肽和多肽的药物组合物可以单位剂型提供，所述单位剂型含有对单次施用有效的量的肽或多肽。可用于皮下施用的单位剂型包括预装注射筒和注射器。

在某些实施方案中，多肽以每天50微克(“mcg”)、每天60mcg、每天70mcg、每天75mcg、每天100mcg、每天150mcg、每天200mcg或每天250mcg的量(以每日等效剂量表示，与给药频率无关)施用。在一些实施方案中，多肽以每天500mcg、每天750mcg或每天1毫克(“mg”)的量施用。在更进一步的实施方案中，多肽以每天1-10mg(包括每天1mg、每天1.5mg、每天1.75mg、每天2mg、每天2.5mg、每天3mg、每天3.5mg、每天4mg、每天4.5mg、每天5mg、每天5.5mg、每天6mg、每天6.5mg、每天7mg、每天7.5mg、每天8mg、每天8.5mg、每天9mg、每天9.5mg或每天10mg)的量(以每日等效剂量表示，与给药频率无关)施用。

在各种实施方案中，多肽按每月剂量方案施用。在其他实施方案中，多肽每两周施用一次。在又其他实施方案中，多肽每周施用一次。在某些实施方案中，多肽每日施用一次(“QD”)。在选择的实施方案中，多肽每天施用两次(“BID”)。

在典型的实施方案中，多肽施用至少3个月、至少6个月、至少12个月或更长时间。在一些实施方案中，多肽施用至少18个月、2年、3年或更长时间。

在一个实施方案中，本发明的药物组合物适用于吸入施用。用于吸入施用的合适的药物组合物通常呈气溶胶或粉末形式。此类组合物通常使用众所周知的递送装置(诸如雾化吸入器、定量吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)或类似的递送装置)施用。

在本发明的一个具体实施方案中，包含活性剂的药物组合物通过使用雾化吸入器吸入施用。所述雾化器装置通常产生高速空气流，其导致包含活性剂的药物组合物以薄雾形式喷射，所述薄雾携带至患者的呼吸道中。因此，当配制用于雾化吸入器时，活性剂通常溶解在合适的载体中以形成溶液。或者，可将活性剂微粉化并与合适的载体组合以形成可吸入尺寸的微粉化颗粒的悬浮液，其中微粉化通常定义为具有约90％或更多的颗粒具有小于约10μm的直径。合适的雾化器装置例如由PARI GmbH(Starnberg,German)商业提供。其他雾化器装置包括Respimat(Boehringer Ingelheim)和例如在授予Lloyd等人的美国专利号6,123,068和WO 97/12687(Eicher等人)中公开的那些装置。

用于雾化吸入器的代表性药物组合物包含等渗水溶液，所述等渗水溶液包含SP-A肽或其药学上可接受的盐或溶剂合物或立体异构体。

在本发明的另一具体实施方案中，包含活性剂的药物组合物通过使用干粉吸入器吸入施用。所述干粉吸入器通常以自由流动的粉末形式施用活性剂，所述自由流动的粉末在吸气期间分散在患者的气流中。为了获得自由流动的粉末，活性剂通常与合适的赋形剂(诸如乳糖或淀粉)一起配制。

用于干粉吸入器的代表性药物组合物包含粒度介于约1μm与约100μm之间的干乳糖，和SP-A肽或其药学上可接受的盐或溶剂合物或立体异构体的微粉化颗粒。

所述干粉配制剂可例如通过将乳糖与活性剂混合、然后将各组分干混来制备。或者，如果需要，可在没有赋形剂的情况下配制活性剂。然后通常将药物组合物加载至干粉分配器中，或加载至吸入药筒或胶囊中以与干粉输送装置一起使用。

干粉吸入器递送装置的实例包括Diskhaler(GlaxoSmithKline,ResearchTriangle Park,N.C.)(参见，例如，授予Newell等人的美国专利号5,035,237)；Diskus(GlaxoSmithKline)(参见，例如，授予Davies等人的美国专利号6,378,519)；Turbuhaler(AstraZeneca,Wilmington,Del.)(参见，例如，授予Wetterlin的美国专利号4,524,769)；Rotahaler(GlaxoSmithKline)(参见，例如，Hallworth等人的美国专利号4,353,365)和Handihaler(Boehringer Ingelheim)。合适的DPI装置的其他实例描述在授予Casper等人的美国专利号5,415,162、授予Evans的美国专利号5,239,993和授予Armstrong等人的美国专利号5,715,810以及其中引用的参考文献中。

在本发明的又一具体实施方案中，包含活性剂的药物组合物通过使用定量吸入器吸入施用。所述定量吸入器通常使用压缩的推进剂气体排放测量量的活性剂或其药学上可接受的盐或溶剂合物或立体异构体。因此，使用定量吸入器施用的药物组合物通常包含活性剂在液化推进剂中的溶液或悬浮液。可采用任何合适的液化推进剂，包括氯氟烃，诸如CCl.sub.3F，和氢氟烷烃(HFA)，诸如1,1,1,2-四氟乙烷(HFA 134a)和1,1,1,2,3,3,3-七氟正丙烷(HFA 227)。由于担心氯氟烃会影响臭氧层，含有HFA的配制剂通常优选。HFA配制剂的其他任选组分包括助溶剂，诸如乙醇或戊烷；以及表面活性剂，例如脱水山梨糖醇三油酸酯、油酸、卵磷脂和甘油。参见，例如，授予Purewal等人的美国专利号5,225,183、EP0717987 A2(Minnesota Mining and Manufacturing Company)和WO 92/22286(MinnesotaMining and Manufacturing Company)。

用于定量吸入器的代表性药物组合物包含约0.01重量％至约5重量％的SP-A肽或其药学上可接受的盐或溶剂合物或立体异构体的化合物；约0重量％至约20重量％的乙醇；以及约0重量％至约5重量％的表面活性剂；其余是HFA推进剂。

此类组合物通常通过将冷却或加压的氢氟烷烃添加到含有活性剂、乙醇(如果存在)和表面活性剂(如果存在)的合适容器中来制备。为了制备悬浮液，将活性剂微粉化，然后与推进剂组合。然后将配制剂加载至气溶胶罐中，所述气溶胶罐形成定量吸入器装置的一部分。专门为与HFA推进剂一起使用而开发的定量吸入器装置的实例提供于授予Marecki的美国专利号6,006,745和授予Ashurst等人的美国专利号6,143,277中。或者，可通过将表面活性剂涂层喷雾干燥在活性剂的微粉化颗粒上来制备悬浮液配制剂。参见，例如，WO 99/53901(Glaxo Group Ltd.)和WO 00/61108(Glaxo Group Ltd.)。

对于制备可吸入颗粒的方法以及适用于吸入给药的配制剂和装置的额外实例，参见授予Gao等人的美国专利号6,268,533、授予Trofast的美国专利号5,983,956、授予Briggner等人的美国专利号5,874,063和授予Jakupovic等人的美国专利号6,221,398；以及WO 99/55319(Glaxo Group Ltd.)和WO00/30614(AstraZeneca AB)。

在一些实施方案中，肽/多肽在药物组合物中提供，和/或与一种或多种额外治疗剂共施用(同时或串联)。此类额外剂可用于治疗或预防肺部炎症(例如哮喘)。额外剂可包括但不限于：短效β2-肾上腺素受体激动剂(SABA)，诸如沙丁胺醇(salbutamol)(沙丁胺醇(albuterol)USAN)；抗胆碱能药物，诸如异丙托溴铵、吸入性肾上腺素、吸入性或全身性皮质类固醇；白三烯受体拮抗剂(例如孟鲁司特(montelukast)和扎鲁司特(zafirlukast))；以及它们的组合。

在一些实施方案中，本文提供了用于治疗患有(或有风险患有)肺病(例如哮喘)和/或需要治疗(或预防性疗法)的患者的方法。在一些实施方案中，受试者是肥胖或不肥胖的。在一些实施方案中，受试者被鉴定为具有与哮喘或严重哮喘风险增加相关的SP-A基因型(例如，本文所述的那些基因型)。

在一些实施方案中，包含至少一种本文所述的SP-A肽或多肽的药物组合物以足以治疗病患的量和位置递送至此类患者。在一些实施方案中，肽和/或多肽(或包含其的药物组合物)可全身或局部递送至患者，并且确定最合适的递送途径、时间过程和治疗剂量将在治疗此类患者的医学专业人员的普通技能范围内。应当理解，治疗患者的应用方法最优选地基本上减轻或甚至消除了所述症状；然而，与许多医学治疗一样，如果在本发明方法期间、之后或者作为本发明方法的结果，患者的疾病或病症的症状减轻到可确定的程度，则认为本发明方法的应用是成功的。

本公开不限于哮喘的治疗。本领域已知或本文以其他方式考虑的任何炎症状况都可根据目前公开和要求保护的发明概念进行治疗。具有与其相关的炎症的疾病状况的非限制性实例包括肺的感染相关或非感染性炎症状况(例如，哮喘、败血症、慢性阻塞性肺病(COPD)、肺感染、呼吸窘迫综合征、支气管肺发育不良等)；其他器官的感染相关或非感染性炎症状况(例如，结肠炎、炎症性肠病、糖尿病肾病、失血性休克)；炎症诱导的癌症(即，患有结肠炎或炎症性肠病的患者的癌症进展)；等。

实验

实施例I.

本实施例描述了实施例II中所利用的材料和方法。

嗜酸性粒细胞分离

对IL-5转基因小鼠实施安乐死并通过左心室心脏穿刺收集血液。使用红细胞裂解溶液(Miltenyi Biotec,Auburn CA)裂解红细胞(RBC)。如前所述(参见Dy,A.B.C.等人，2019J Immunol 203:1122-1130；Ledford,J.G.等人2012PLoS One 7:e32436)，使用生物素偶联抗体(CD45R、Thy 1.2、F4/80)和磁珠，通过阴性选择分离嗜酸性粒细胞。使用用EasyIII^TM快速差异染色试剂盒(Azer Scientific,Morgantown PA)染色的细胞离心载玻片的标准形态计量分析验证每种制剂的纯度大于95％。

源自全长SP-A的10和20个氨基酸肽的生成

定制合成10聚体和20聚体氨基酸肽(Genscript Biotech Corporation,Piscataway NJ)并验证其纯度分别为98.8％和98.0％。使用无菌过滤的PBS(Gibco,Gaithersburg MD)将每瓶冻干的10聚体肽重构至初始浓度为2mg/ml，同时使用分子生物学级H₂O(Corning,Tewksbury MA)将每瓶冻干的20聚体肽重构至初始浓度为2mg/ml。溶剂的选择是基于由Genscript提供的溶解度报告。

肽模拟物的生成

肽模拟物是在Ligand Discovery Laboratory(The University of Arizona,Tucson AZ)中通过固相方法合成。肽模拟物被设计为模拟成熟SP-A活性位点(KEQCVEMYTD)的小分子衍生物，其具有改进的稳定性和生物利用度。通过高效液相色谱(HPLC)纯化产物，并通过核磁共振(NMR)光谱和液相色谱-质谱(LC-MS)分析其结构。使用分子生物学级H₂O(Corning,Tewksbury MA)和10mM DMSO(Sigma,St.Louis MO)的最大最终浓度将每瓶冻干的肽模拟物重构至初始浓度为1mg/ml。

通过实时阻抗追踪评估嗜酸性粒细胞的细胞毒性

如前所述(参见Dy,A.B.C.等人，2019J Immunol 203:1122-1130；Flynn,A.N.等人，FASEB J 27:1498-1510；Zeng,C.等人，Environ Res 164:452-458)，通过使用xCELLigence实时细胞分析仪(ACEA Biosciences,San Diego CA)测量电阻抗来评估嗜酸性粒细胞死亡的高通量实时监测。使用在37℃和5％CO₂下孵育的96孔镀金电极板(E-plates,ACEA Biosciences)，仅用培养基获得初始背景读数。以100μl的总体积，以1x 10⁶个细胞/孔接种嗜酸性粒细胞，并允许静置～5小时。添加不同浓度(1、3、10和30μg/ml)的测试化合物并随着时间的推移测量电阻抗的变化。计算阻抗测量值并将其呈现为归一化细胞指数(参见Flynn,A.N.等人，FASEB J 27:1498-1510；Zeng,C.等人，Environ Res 164:452-458)，其中细胞指数的减少对应于嗜酸性粒细胞细胞毒性的增加。随时间的阻抗追踪源自3–4次技术重复的平均值。为了量化和比较细胞毒性，使用细胞指数值计算曲线下面积(AUC)。使用每种肽模拟物的等效摩尔浓度和它们对应的剂量-反应曲线产生半数最大有效浓度(EC₅₀)值。

统计学分析

所有统计分析均使用GraphPad Prism软件进行。单向ANOVA用于评估样本之间的全局差异，然后进行多重t检验，并使用邦费罗尼校正进行多重比较。

实施例II.

与全长SP-A相比，SP-A衍生的肽的细胞毒性作用量值较小

我们首先通过RTCA评估了这些10个和20个氨基酸肽(10聚体和20聚体)对嗜酸性粒细胞活力的直接影响。与我们之前的结果相似(参见Dy,A.B.C.等人，2019 J Immunol203:1122-1130)，全长SP-A以剂量依赖性方式诱导嗜酸性粒细胞细胞死亡，其中添加30μg/ml的SP-A导致细胞指数减小，对应于-13.89的平均AUC(图2A、图2B)。如负AUC值所指示，向嗜酸性粒细胞添加SP-A衍生的肽10聚体和20聚体也导致细胞死亡增加。对应于30μg/ml的肽的浓度的最高AUC量值的平均值分别为-2.62和-3.50(图2D、图2F)。归一化细胞指数追踪显示，对于10聚体和20聚体两者，24小时后肽活性都下降，由增加趋势指示(图2C、图2E)。

两种候选肽模拟物在3μg/ml下模拟SP-A的细胞毒性作用

为了改进SP-A衍生肽的稳定性，合成肽模拟物用于测试。最初筛选了14种肽模拟物。肽模拟物856、867、868、870和871通过在C末端添加胺或酸基团以及在N末端乙酰化或添加组氨酸从原始的10聚体天然肽残基进行修饰(表1)。肽模拟物882、883、884、891、892、893和894通过单个氨基酸取代从原始的10聚体天然肽残基进行修饰(表1)。肽模拟物888是对应于SP-A2的181-203位的23个氨基酸序列，而肽模拟物889是对应于SP-A2的175-195位的20个氨基酸序列(表1)。肽模拟物序列和相应的分子量总结在表1中。

表1.肽模拟物序列和摩尔浓度。10聚体、20聚体和候选肽模拟物以1mg/ml的浓度重新悬浮。基于它们对应的分子量计算它们相应的摩尔浓度。w＝D-色氨酸。

使用与图1相同的方法，显示了计算的AUC的归一化细胞指数和平均值(图3、图4)。图3中用于肽模拟物的质量浓度范围是发现全长SP-A和10聚体和20聚体肽均具有活性的范围(参见图2)。然而，为了解释全长SP-A和各种肽序列长度之间的大小差异，在随后的筛选分析中使用了发现全长SP-A具有活性的等效摩尔浓度范围(图4)。如由AUC测量，肽模拟物867和868在3μg/ml下对嗜酸性粒细胞具有最稳健的细胞毒性作用(图3A、图2B)

先导肽模拟物的计算的半数最大有效浓度(EC₅₀)低于天然10聚体和20聚体肽

与肽和肽模拟物两者相比，全长SP-A是一个大得多的分子。由于所测试化合物的大小存在差异，为了能够适当地比较剂量反应曲线，所有化合物的摩尔浓度均根据它们对应的分子量计算(表1)。全长SP-A的EC₅₀为0.158μM(表2)。令人惊讶的是，所有测试的肽模拟物的EC₅₀值均低于10聚体和20聚体肽，其中892和894分别在0.008和0.012μM下具有两个最低值(表2)。

表2.基于剂量反应曲线的半数最大有效浓度(EC₅₀)。EC₅₀的值是使用RTCA软件计算的，并且基于每个剂量的曲线下面积(AUC)。用于全长SP-A、10聚体、20聚体、856、867、868、870、871、882、883和884的浓度范围为1、3、10和30μg/ml。用于888、889、891、892、893和894的浓度范围为0.01、0.10、0.30和1.00μM。

凋亡诱导剂	EC<sub>50</sub>(μM)
		全长SP-A	0.158
20聚体肽	14.71
		10聚体肽	16.01
856	8.207
		867	0.950
868	10.92
		870	10.75
871	2.518
		882	3.000
883	9.412
		884	10.63
888	0.035
		889	1.788
891	1.026
		892	0.008
893	0.038
		894	0.012

讨论

最近已经证明，SP-A具有促进嗜酸性粒细胞凋亡的能力，并且这种机制有助于在实验性过敏攻击后清除肺腔中的嗜酸性粒细胞(参见Dy,A.B.C.等人，2019J Immunol 203:1122-1130)。还证明了SP-A的这种活性通过遗传变异而改变，其中谷氨酰胺取代了SP-A2的第223位的赖氨酸。这表明SP-A内促进嗜酸性粒细胞凋亡的活性位点位于该区域内，这激发了进一步的研究。首先，合成该SP-A区域的肽(10聚体和20聚体)和肽模拟物，目标是在保持生物活性的同时改进稳定性。其次，测试这些合成小分子促进嗜酸性粒细胞死亡的能力，类似于全长SP-A。

本文进行的实验证明，许多合成的小分子能够诱导嗜酸性粒细胞细胞死亡。全长SP-A作为阳性对照，其中观察到如通过RTCA测量的嗜酸性粒细胞活力的预期剂量依赖性降低。此外，归一化细胞指数的追踪显示整体下降趋势，表明在48小时过程内一致和持续的死亡诱导效应。源自SP-A的10聚体和20聚体肽同样能够诱导嗜酸性粒细胞细胞死亡。然而，比较在各浓度下的全长SP-A和这些肽，由肽诱导的细胞死亡程度(由计算的AUC的量值指示)低于全长SP-A。30μg/ml下肽的AUC值与添加3μg/ml全长SP-A时的AUC更相当。此外，10聚体和20聚体的归一化细胞指数的追踪表明，与全长SP-A相比，肽活性不太稳健，这可为体内条件下功能有限的指标。

鉴于这些结果，进行了接下来选择合成肽模拟物以解决这一潜在问题的实验。在迄今为止筛选的14种肽模拟物中，有几种肽模拟物得到有前景的结果，这些结果将被进一步评估。基于各剂量的AUC的量值，867和868与全长SP-A的反应最相当，其在3μg/ml下的AUC与全长SP-A在30μg/ml下的AUC相当(参见表3)。由于全长SP-A与合成分子之间分子大小的巨大差异，作为效力的重要指标的半数最大有效浓度(EC₅₀)的计算是基于等效摩尔浓度。肽模拟物892和894在14种候选分子中分别在0.008μM和0.012μM下具有两个最低EC₅₀(参见表3)。然而，尽管EC₅₀低，但与全长SP-A、10聚体和20聚体肽以及几种肽模拟物相比，这两种肽模拟物的计算的AUC的量值要小得多(参见表3)。这表明，虽然肽模拟物892和894需要低浓度而对嗜酸性粒细胞产生一定程度的细胞毒性，但作用并不那么稳健。

总而言之，因为目标是鉴定将重演全长SP-A对嗜酸性粒细胞的细胞毒性活性的候选肽模拟物，所以不仅得到EC₅₀值作为效力的量度至关重要，而且比较作为有效性指标的细胞指数变化的量值同样是必需的。因此，鉴定了四种先导肽模拟物(表3中的867、868、892和894)。

总之，本文进行的实验提供了证据，即源自SP-A中参与其促凋亡活性的活性区域的小分子可诱导对嗜酸性粒细胞的类似作用。未来的临床前研究包括进一步优化候选肽模拟物、通过流式细胞术使用人类嗜酸性粒细胞的体外实验的验证以及使用哮喘动物模型的体内挽救实验。

表3.先导肽模拟物的特性的总结。报告了最大AUC的平均量值及其相应浓度，以及各先导肽模拟物的EC₅₀。还显示了全长SP-A、10聚体和20聚体用于比较。

以引用的方式并入

出于所有目的，本文引用的每个专利文件和科学文章的全部公开内容通过引用并入本文。

等效方案

在不脱离本发明的精神或基本特征的情况下，本发明能以其它具体形式来实施。因此，前述实施方案在所有方面都应被视为说明性的，而非是对本文中描述的本发明的限制。因此，本发明的范围是由随附权利要求而非由上述描述所指示，并且属于权利要求的等效性含义和范围内的所有变化都意图包括在其中。

序列表

<110> 代表亚利桑那大学的亚利桑那校董会(ARIZONA BOARD OF REGENTS ON BEHALFOF THE UNIVERSITY OF ARIZONA)

<120> 用于治疗和预防肺病的组合物和方法

<130> PPI22171892US

<150> US 63/006,831

<151> 2020-04-08

<160> 17

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 248

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 1

Met Trp Leu Cys Pro Leu Ala Leu Asn Leu Ile Leu Met Ala Ala Ser

1 5 10 15

Gly Ala Ala Cys Glu Val Lys Asp Val Cys Val Gly Ser Pro Gly Ile

20 25 30

Pro Gly Thr Pro Gly Ser His Gly Leu Pro Gly Arg Asp Gly Arg Asp

35 40 45

Gly Val Lys Gly Asp Pro Gly Pro Pro Gly Pro Met Gly Pro Pro Gly

50 55 60

Glu Thr Pro Cys Pro Pro Gly Asn Asn Gly Leu Pro Gly Ala Pro Gly

65 70 75 80

Val Pro Gly Glu Arg Gly Glu Lys Gly Glu Ala Gly Glu Arg Gly Pro

85 90 95

Pro Gly Leu Pro Ala His Leu Asp Glu Glu Leu Gln Ala Thr Leu His

100 105 110

Asp Phe Arg His Gln Ile Leu Gln Thr Arg Gly Ala Leu Ser Leu Gln

115 120 125

Gly Ser Ile Met Thr Val Gly Glu Lys Val Phe Ser Ser Asn Gly Gln

130 135 140

Ser Ile Thr Phe Asp Ala Ile Gln Glu Ala Cys Ala Arg Ala Gly Gly

145 150 155 160

Arg Ile Ala Val Pro Arg Asn Pro Glu Glu Asn Glu Ala Ile Ala Ser

165 170 175

Phe Val Lys Lys Tyr Asn Thr Tyr Ala Tyr Val Gly Leu Thr Glu Gly

180 185 190

Pro Ser Pro Gly Asp Phe Arg Tyr Ser Asp Gly Thr Pro Val Asn Tyr

195 200 205

Thr Asn Trp Tyr Arg Gly Glu Pro Ala Gly Arg Gly Lys Glu Gln Cys

210 215 220

Val Glu Met Tyr Thr Asp Gly Gln Trp Asn Asp Arg Asn Cys Leu Tyr

225 230 235 240

Ser Arg Leu Thr Ile Cys Glu Phe

245

<210> 2

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 2

Lys Glu Gln Cys Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 3

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 3

Trp Gly Lys Glu Gln Cys Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 4

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 4

Lys Glu Gln Cys Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 5

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 5

Lys Glu Gln Cys Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 6

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 6

Lys Glu Gln Cys Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 7

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<220>

<221> X

<222> (7)..(7)

<223> X是Nle

<400> 7

Lys Glu Gln Cys Val Glu Xaa Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 8

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 8

Lys Glu Gln Ser Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 9

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 9

Lys Glu Gln Ala Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 10

<211> 23

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 10

Ser Asp Gly Thr Pro Val Asn Tyr Thr Asn Trp Tyr Arg Gly Glu Pro

1 5 10 15

Ala Gly Arg Gly Lys Glu Gln

20

<210> 11

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 11

Gly Asp Phe Arg Tyr Ser Asp Gly Thr Pro Val Asn Tyr Thr Asn Trp

1 5 10 15

Tyr Arg Gly Glu

20

<210> 12

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<220>

<221> X

<222> (9)..(9)

<223> X是Nle

<400> 12

Trp Gly Lys Glu Gln Ala Val Glu Xaa Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 13

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<220>

<221> X

<222> (9)..(9)

<223> X是Nle

<400> 13

Trp Gly Lys Glu Gln Cys Val Glu Xaa Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 14

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<220>

<221> X

<222> (9)..(9)

<223> X是Nle

<400> 14

Arg Gly Lys Glu Gln Cys Val Glu Xaa Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 15

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<220>

<221> misc_特征

<222> (8)..(8)

<223> Xaa可为任何天然存在的氨基酸

<400> 15

Gly Lys Glu Gln Cys Val Glu Xaa Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 16

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 16

Lys Glu Gln Cys Val Glu Met Tyr Thr Asp

1 5 10

<210> 17

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial sequence)

<220>

<223> 合成的

<400> 17

Pro Ala Gly Arg Gly Lys Glu Gln Cys Val Glu Met Tyr Thr Asp Gly

1 5 10 15

Gln Trp Asn Asp

20

Claims (33)

1.一种组合物，所述组合物包含表面活性剂蛋白A(SP-A)肽类似物，所述肽类似物包含选自由以下组成的组的氨基酸序列：Ac-KEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:2)、Ac-WGKEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:3)、(Ac-KEQCVEMYTD-NH₂)₂(SEQ ID NO:4)、Ac-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:5)、H-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:6)、Ac-KEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:7)、Ac-KEQSVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:8)、Ac-KEQAVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:9)、Ac-SDGTPVNYTNWYRGEPAGRGKEQ-NH₂(SEQ ID NO:10)、Ac-GDFRYSDGTPVNYTNWYRGE-NH₂(SEQ IDNO:11)、Ac-WGKEQAVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:12)、Ac-WGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ IDNO:13)、Ac-RGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:14)、Ac-wGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ IDNO:15)，以及与所述肽具有至少90％同一性的肽。

2.如权利要求1所述的组合物，其中所述肽与所述肽至少95％同一。

3.如权利要求1所述的组合物，其中所述肽与所述肽至少100％同一。

4.一种组合物，所述组合物基本上由选自由以下组成的组的肽组成：Ac-KEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:2)、Ac-WGKEQCVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:3)、(Ac-KEQCVEMYTD-NH₂)₂(SEQ IDNO:4)、Ac-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:5)、H-KEQCVEMYTD-酸(SEQ ID NO:6)、Ac-KEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:7)、Ac-KEQSVEMYTD-NH₂(SEQ ID NO:8)、Ac-KEQAVEMYTD-NH₂(SEQID NO:9)、Ac-SDGTPVNYTNWYRGEPAGRGKEQ-NH₂(SEQ ID NO:10)、Ac-GDFRYSDGTPVNYTNWYRGE-NH₂(SEQ ID NO:11)、Ac-WGKEQAVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:12)、Ac-WGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:13)、Ac-RGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:14)、Ac-wGKEQCVE-Nle-YTD-NH₂(SEQ ID NO:15)。

5.如权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述组合物是药物组合物。

6.如权利要求5所述的组合物，其中所述组合物包含药学上可接受的载体。

7.如权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中所述组合物被配制用于肺部递送。

8.一种系统，所述系统包括：

a)如权利要求1至7中任一项所述的组合物；和

b)用于所述组合物的肺部递送的装置。

9.如权利要求8所述的系统，其中所述装置是定量吸入器。

10.一种增强细胞中的SP-A活性的方法，所述方法包括：将如权利要求1至7中任一项所述的组合物递送至所述细胞。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述细胞是肺细胞。

12.如权利要求10或11所述的方法，其中所述细胞为体内的。

13.如权利要求9至11中任一项所述的方法，其中所述组合物减少所述细胞中的粘蛋白产生和/或减轻所述细胞中的嗜酸性粒细胞增多。

14.如权利要求10至13中任一项所述的方法，其中所述细胞在经诊断患有哮喘或COPD的受试者中。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述施用减少或预防所述受试者中哮喘或COPD的症状或标志物。

16.如权利要求10至15中任一项所述的方法，其中所述受试者是肥胖的。

17.如权利要求10至16中任一项所述的方法，其中所述肽结合选自由FC(CD16/32)、Sirp-α、TLR-2和EGFR组成的组的受体。

18.一种治疗或预防受试者的哮喘或COPD的方法，所述方法包括：将如权利要求1至7中任一项所述的组合物施用于所述受试者。

19.如权利要求18所述的方法，其中所述组合物减少所述受试者的肺中的粘蛋白产生和/或减轻所述受试者的肺中的嗜酸性粒细胞增多。

20.如权利要求18或19所述的方法，其中所述受试者是肥胖的。

21.如权利要求18至20中任一项所述的方法，其中所述肽结合选自由FC(CD16/32)、Sirp-α、TLR-2和EGFR组成的组的受体。

22.如权利要求1至7中任一项的组合物增强细胞中的SP-A活性的用途。

23.如权利要求22所述的用途，其中所述细胞是肺细胞。

24.如权利要求22或23所述的用途，其中所述细胞为体内的。

25.如权利要求22至24中任一项所述的用途，其中所述组合物减少所述细胞中的粘蛋白产生和/或减轻所述细胞中的嗜酸性粒细胞增多。

26.如权利要求22至25中任一项所述的用途，其中所述细胞在经诊断患有哮喘或COPD的受试者中。

27.如权利要求26所述的用途，其中所述施用减少或预防所述受试者中哮喘或COPD的症状或标志物。

28.如权利要求22至27中任一项所述的用途，其中所述受试者是肥胖的。

29.如权利要求22至28中任一项所述的用途，其中所述肽结合选自由FC(CD16/32)、Sirp-α、TLR-2和EGFR组成的组的受体。

30.如权利要求1至7中任一项的组合物治疗或预防受试者的哮喘或COPD的用途。

31.如权利要求30所述的用途，其中所述组合物减少所述受试者的肺中的粘蛋白产生和/或减轻所述受试者的肺中的嗜酸性粒细胞增多。

32.如权利要求30或31所述的用途，其中所述受试者是肥胖的。

33.如权利要求30至32中任一项所述的用途，其中所述肽结合选自由FC(CD16/32)、Sirp-α、TLR-2和EGFR组成的组的受体。

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