CN115372088A - 一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法 - Google Patents
一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115372088A CN115372088A CN202210779398.8A CN202210779398A CN115372088A CN 115372088 A CN115372088 A CN 115372088A CN 202210779398 A CN202210779398 A CN 202210779398A CN 115372088 A CN115372088 A CN 115372088A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- chloral hydrate
- cell wall
- medicinal material
- wall structure
- section
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 title claims abstract description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 6
- RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 33
- 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 claims abstract description 33
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 15
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 4
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 4
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 4
- 239000006049 herbal material Substances 0.000 claims 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 abstract description 6
- 239000011148 porous material Substances 0.000 abstract description 3
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 3
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 3
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 3
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 2
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 2
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/2806—Means for preparing replicas of specimens, e.g. for microscopal analysis
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Abstract
本发明属于显微组织切片技术领域，提供了一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法，包括以下步骤：配制水合氯醛溶液，加热透化，吸取溶剂，加盖盖玻片。本发明通过多次的溶液置换，将水合氯醛透化液置换为水，即可在显微镜下看的中药材横切片的细胞壁边缘分明，纹孔结构清晰可见。
Description
技术领域
本发明属于显微组织切片技术领域，具体是一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法。
背景技术
水合氯醛透化制片法是中药显微鉴定中最常使用的一种材料处理方法。原理：水合氯醛是良好的透明剂，能迅速渗入粉末组织细胞，增强透光度，便于观察。水合氛醛透化制片是中药鉴定方法中的常现技术操作，制片的好坏直接影响到鉴定。但是随着教学和科研的发展需要，这种传统的透化方式不足逐渐显现出来。现有的横切片一般采用水合氯醛透化后直接放到显微镜上观察，细胞壁边缘不清晰，纹孔模糊，不宜观察。
发明内容
本发明的目的是针对以上问题，提供了一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法，包括以下步骤：
A、配制水合氯醛溶液：称取水合氯醛25-50g,加蒸馏水15ml与甘油10ml,使溶解，即得1-2g/ml的水合氯醛溶液。
B、加热透化：取药材横切片，置于载玻片上，加3-5滴水合氯醛，加热至微沸，待水合氯醛挥发近干后继续滴加水合氯醛，重复操作至横切片透化完全；
C、吸取溶剂：载玻片一侧滴加蒸馏水，使用吸水纸从另一侧吸取溶剂，反复2-3次至载玻片上的溶剂为蒸馏水；
D、加盖盖玻片。
优选的，所述药材横切片的厚度为1-100μm。
优选的，所述水合氯醛溶液的浓度为2g/ml。
优选的，所述步骤B中，采用酒精灯外焰加热。
优选扥，所述步骤C中，吸取溶剂时药材横切片始终保留在载玻片上。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
本发明申请的专利方法，在通过水合氯醛加热将药材横切片透化之后，通过多次的溶液置换，将水合氯醛透化液置换为水，即可在显微镜下看的中药材横切片的细胞壁边缘分明，纹孔结构清晰可见。
附图说明
图1为400倍视野下采用现有方法得到的苦杏仁横切片显微图；
图2为400倍视野下实施例1得到的苦杏仁横切片显微图；
图3为400倍视野下采用现有方法得到的莲子横切片显微图；
图4为400倍视野下实施例2得到的莲子横切片显微图；
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
A、配制水合氯醛溶液：称取水合氯醛50g,加蒸馏水15ml与甘油10ml,使溶解，即得2g/ml的水合氯醛溶液；
B、加热透化：使用刀片，徒手切制苦杏仁横切片，置于载玻片上，加5滴水合氯醛，采用酒精灯外焰加热至微沸，待水合氯醛挥发近干后继续滴加水合氯醛，重复操作4次至横切片透化完全；
C、吸取溶剂：载玻片一侧滴加蒸馏水，使用吸水纸从另一侧吸取溶剂，重复3次至载玻片上的溶剂为蒸馏水；吸取溶剂时药材横切片始终保留在载玻片上
D、加盖盖玻片，在显微镜下观察。
对比图1和图2，很明显图2中的细胞壁边缘更分明，纹孔结构更清晰可见。
实施例2：
A、配制水合氯醛溶液称取水合氯醛50g,加蒸馏水15ml与甘油10ml,使溶解，即得2g/ml的水合氯醛溶液；
B、加热透化：使用刀片，徒手切制莲子横切片，置于载玻片上，加5滴水合氯醛，采用酒精灯外焰加热至微沸，待水合氯醛挥发近干后继续滴加水合氯醛，重复操作4次至横切片透化完全；
C、吸取溶剂：载玻片一侧滴加蒸馏水，使用吸水纸从另一侧吸取溶剂，重复3次至载玻片上的溶剂为蒸馏水；吸取溶剂时药材横切片始终保留在载玻片上
D、加盖盖玻片，在显微镜下观察。
对比图3和图4，很明显图4中的细胞壁边缘更分明，纹孔结构更清晰可见。
需要说明的是，在本申请中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (5)
1.一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、配制水合氯醛溶液：称取水合氯醛25-50g,加蒸馏水15ml与甘油10ml,使溶解，即得1-2g/ml的水合氯醛溶液；
B、加热透化：取药材横切片，置于载玻片上，加3-5滴水合氯醛，加热至微沸，待水合氯醛挥发近干后继续滴加水合氯醛，重复操作至横切片透化完全；
C、吸取溶剂：载玻片一侧滴加蒸馏水，使用吸水纸从另一侧吸取溶剂，反复2-3次至载玻片上的溶剂为蒸馏水；
D、加盖盖玻片。
2.根据权利要求1所述的一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法，其特征在于，所述药材横切片的厚度为1-100μm。
3.根据权利要求1所述的一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法，其特征在于，所述水合氯醛溶液的浓度为2g/ml。
4.根据权利要求1所述的一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法，其特征在于，所述步骤B中，采用酒精灯外焰加热。
5.根据权利要求1所述的一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法，其特征在于，所述步骤C中，吸取溶剂时药材横切片始终保留在载玻片上。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210779398.8A CN115372088A (zh) | 2022-07-04 | 2022-07-04 | 一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210779398.8A CN115372088A (zh) | 2022-07-04 | 2022-07-04 | 一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115372088A true CN115372088A (zh) | 2022-11-22 |
Family
ID=84061828
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210779398.8A Pending CN115372088A (zh) | 2022-07-04 | 2022-07-04 | 一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115372088A (zh) |
Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101766655A (zh) * | 2010-01-29 | 2010-07-07 | 药都制药集团股份有限公司 | 利用显微图谱分析中药材、饮片、中成药质量的方法 |
| CN101943665A (zh) * | 2009-07-10 | 2011-01-12 | 华北制药集团制剂有限公司 | 一种酸枣树皮的质量检测方法 |
| CN102095730A (zh) * | 2010-11-18 | 2011-06-15 | 河南中医学院 | 利用透明叶片观察叶表皮和叶内部的显微结构的方法 |
| CN102768209A (zh) * | 2012-08-06 | 2012-11-07 | 河南中医学院 | 一种观察植物根内部显微结构的方法 |
| US20150147779A1 (en) * | 2012-04-10 | 2015-05-28 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Clearing Agent and Mounting Medium for Microscopy |
| CN106769306A (zh) * | 2016-12-19 | 2017-05-31 | 山东天博食品配料有限公司 | 一种改进的香辛料显微特征观察方法 |
| CN107907540A (zh) * | 2017-12-26 | 2018-04-13 | 安徽省食品药品检验研究院 | 发酵中药六神曲真伪的鉴别方法 |
| CN109682657A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-04-26 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种天麻粉末的显微观察制片方法及其应用 |
-
2022
- 2022-07-04 CN CN202210779398.8A patent/CN115372088A/zh active Pending
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101943665A (zh) * | 2009-07-10 | 2011-01-12 | 华北制药集团制剂有限公司 | 一种酸枣树皮的质量检测方法 |
| CN101766655A (zh) * | 2010-01-29 | 2010-07-07 | 药都制药集团股份有限公司 | 利用显微图谱分析中药材、饮片、中成药质量的方法 |
| CN102095730A (zh) * | 2010-11-18 | 2011-06-15 | 河南中医学院 | 利用透明叶片观察叶表皮和叶内部的显微结构的方法 |
| US20150147779A1 (en) * | 2012-04-10 | 2015-05-28 | Rutgers, The State University Of New Jersey | Clearing Agent and Mounting Medium for Microscopy |
| CN102768209A (zh) * | 2012-08-06 | 2012-11-07 | 河南中医学院 | 一种观察植物根内部显微结构的方法 |
| CN106769306A (zh) * | 2016-12-19 | 2017-05-31 | 山东天博食品配料有限公司 | 一种改进的香辛料显微特征观察方法 |
| CN107907540A (zh) * | 2017-12-26 | 2018-04-13 | 安徽省食品药品检验研究院 | 发酵中药六神曲真伪的鉴别方法 |
| CN109682657A (zh) * | 2018-12-25 | 2019-04-26 | 广州白云山汉方现代药业有限公司 | 一种天麻粉末的显微观察制片方法及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 国家药典委员会: "中国药典2020年版四部", vol. 1, 31 May 2020, 中国医药科技出版社, pages: 230 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Löfgren et al. | Sphinctrina in Europe | |
| Fazal et al. | Identification, characterization, and palynology of high-valued medicinal plants | |
| Marshall et al. | The function of the cuticle in relation to the porosity of eggs | |
| CN113729009A (zh) | 一种宫颈细胞保存液及其制备方法和保存方法 | |
| CN115372088A (zh) | 一种可清晰观察细胞壁结构的药材横切片制作方法 | |
| CN106501043B (zh) | 一种有效观察油棕雌蕊解剖结构的石蜡切片方法 | |
| CN105954083A (zh) | 肿柄菊叶片上表皮离析制片的方法 | |
| Drouet et al. | The morphology of Gonyostomum semen from woods hole, Massachusetts | |
| CN110596297B (zh) | 一种王瓜子药材的质量标准检测方法 | |
| CN106769306B (zh) | 一种改进的香辛料显微特征观察方法 | |
| CN106053178B (zh) | 一种胖大海扫描电镜样品的制备方法 | |
| Ghildiyal et al. | Pharmacognostical studies on Solanum surrattence Burm f. Root. | |
| CN111281831B (zh) | 一种以百香果皮为主要原料的全植物性干面膜及其制备方法 | |
| Pawar et al. | Pharmacognostic, phytochemical, physico-chemical standardization of Casuarina equisetifolia Stem-Inner bark | |
| Kumudhaveni et al. | Pharmacognostical and phytochemical standardization of seeds of Strychnos potatorum Linn.(Loganiaceae) | |
| CN111122803A (zh) | 一种买麻藤药材的质量控制方法 | |
| Great Britain. Medicines Commission et al. | British pharmacopoeia | |
| Bora et al. | Pharmacognostic standardization and physicochemical analysis of clerodendrum wallichii (merr.) leaves | |
| Yen et al. | Optimization of ultrasound-assisted extraction of bioactive compounds from Gomphrena celosioides Mart. using response surface methodology | |
| Sharma et al. | Pharmacognostic characterization and antibacterial activity of Brugmansia suaveolens (Humb. & Bonpl. ex Willd.) Bercht. & J. Presl leaves: A traditional Himalayan medicinal plant | |
| CN113616716B (zh) | 一种姜汁浆水制半夏饮片及其制备方法 | |
| Sakostschikoff et al. | Determination of Pentosans in Vegetable Materials Containing Tannins | |
| Bharti et al. | A report on pharmacognostical and quality control parameters of root of Caesalpinia digyna (Rottler) | |
| Zanetti et al. | Pseudocyphellae ontogeny and thallus anatomy in species of Punctelia Krog (Parmeliaceae, lichenized Ascomycota) | |
| Yadav et al. | Phytochemical and Physiochemical Properties of Sapindus mukorossi Gaertn.(Soapnut) of Far Western of Nepal |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |