CN115315183A - 减少镰刀菌污染的方法 - Google Patents
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- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
- A01N47/40—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides
- A01N47/46—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides containing —N=C=S groups
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
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- A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
- A01N47/08—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having one or more single bonds to nitrogen atoms
- A01N47/10—Carbamic acid derivatives, i.e. containing the group —O—CO—N<; Thio analogues thereof
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Abstract
本公开描述了减少田地土壤中镰刀菌属物种繁殖体的方法,包括施用组合物,该组合物包括异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物,或其功能等效物或替代物,其中与处理前的土壤相比,施用该组合物使土壤中的镰刀菌属繁殖体计数减少至少15%。镰刀菌属物种是一个例子为尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(FocTR4)(又名,香蕉枯萎病菌)。所提供的方法涉及将组合物施用至土表下方至少40cm的土壤,和/或将组合物施用至土壤并混合/掺合土壤至土表下方至少60cm的深度以分布组合物。
Description
技术领域
本公开涉及土传植物病原体的控制,例如真菌病原体尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.Cubense Tropical Race 4)(foc TR4)(又名,香蕉枯萎病菌(Fusarium odoratissimum))。更具体地说,本发明涉及采用包含异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物,或其功能等效物(例如替代性Foc TR4熏蒸剂)的组合物的组合物、系统和方法。
背景技术
尖孢镰刀菌古巴专化型(Foc)是巴拿马病的致病因子。它对全球香蕉生产造成很大的风险。在20世纪中期,大米七(Gros Michel)香蕉由于Foc热带1号生理小种而绝迹。从那时起,香蕉产业转向卡文迪什香蕉。
近年来,Foc热带4号生理小种(TR4)已经开始感染卡文迪什香蕉。首次报道于东南亚,该真菌已散播全球,并被检测到远至如巴基斯坦、黎巴嫩和莫桑比克。Foc TR4是一种土壤病原体,通过感染根系影响香蕉植株,然后通过维管系统进入植株,真菌菌丝可以穿过植株,到达茎叶。这种病原体的传播主要是由于人类行为,例如被污染的香蕉吸芽、人和设备的移动。
一旦进入土壤,尖孢镰刀菌厚垣孢子可以存活30年以上。据信土壤处理对于控制这种真菌是必要的。然而,目前没有可用的有效治疗或预防措施。
发明内容
提供本概述以便以简化的形式介绍将在以下详细描述中进一步描述的一些概念的选择。本概述不旨在标识所要求保护的主题的所有关键特征或必要特征,也不旨在单独地用于帮助确定所要求保护的主题的范围。
一个提供的实施例为一种减少芭蕉田地土壤中尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(Foc TR4)(又名,香蕉枯萎病菌)繁殖体的方法,包括施用包括异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物(或其功能等效物或替代物),其中与处理前土壤中的FocTR4繁殖体计数相比,施用该组合物使土壤中的Foc TR4繁殖体计数减少至少15%。
还提供了方法实施例,包括与任何提及的实施例组合,进一步包括在施用该组合物后在经处理的土壤中种植至少一种芭蕉属树。例如,在经处理的土壤中种植至少一棵芭蕉属树:在处理后至少3天;在处理后至少5天;在处理后至少7天;在处理后至少10天;在处理后至少12天;在处理后至少14天;或处理后超过14天。在该方法实施例的一个实例中,或与任何提及的实施例组合,芭蕉属树是小果野蕉香蕉植物(Musa acuminata bananaplant)或大蕉植物(plantain plant)。例如,小果野蕉香蕉植物可选地是卡文迪什三倍体(AAA)栽培品种的香蕉植物。类似地,大蕉植物可选地是车前草三倍体(AAB)小果野蕉和野蕉(Musa balbisiana)杂交植物。
附图说明
图1是显示在指定稀释度下,在威百亩处理后Foc TR4菌落生长的图。
图2是显示Foc TR4菌落在暴露于七种稀释度的威百亩钠后在PDA板上生长的照片。上八平板(两行),5分钟温育;下八平板(两行),60分钟温育。每组八平板中的左上平板为对照(无威百亩钠);用以下威百亩钠稀释度(每组中从左到右和从上到下排)处理每组中的七个测试板:1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000、1∶100000、1∶1*106、1∶10*106。示出了代表性的平板;检查每种条件下的两个平板。
图3是示出在1∶100稀释度,5和60分钟(+SD)后,威百亩钠对菌落形成单位的功效的柱状图。
图4是示出在特定的威百亩钠土壤处理水平(L/ha)下,每个香蕉植株的平均叶片数的柱状图。
图5是示出在特定的威百亩钠土壤处理水平(L/ha)下,香蕉植株的平均高度(cm)的柱状图。
图6是示出在特定的威百亩钠土壤处理水平(L/ha)下,香蕉植株的平均围长尺寸(cm)的柱状图。
图7是示出在特定的威百亩钠土壤处理水平(L/ha)下,每次处理中在处理后六个月达到拔节期(shooting stage)的植株百分比的柱状图。
图8是示出在特定的威百亩钠土壤处理水平(L/ha)下,每次处理中在处理后六个月时达到套袋期(bagging stage)的植株百分比的柱状图。
图9是示出在特定的威百亩钠土壤处理水平(L/ha)下,处理后六个月时达到拔节或套袋期的植株百分比的柱状图。
具体实施方式
现在将以额外的细节和选项来描述本公开的各方面以支持本公开的教导,如下:(I)选择缩写;(II)选择定义;(III)减少芭蕉属植物的镰刀菌感染;(IV)靶生物;(V)活性成分;(VI)制剂中的其它可选组分;(VII)制备制剂的方法;(VIII)制剂的用途;(IX)循环处理和种植以提高生产率的方法;(X)另外的公开;(XI)实例;和(XII)结尾段。
(I)选择缩写
Foc:尖孢镰刀菌古巴专化型;FocTR4:尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(又名,香蕉枯萎病菌);L/ha:升每公顷;MITC:异硫氰酸甲酯;RTU:即用;SL:可溶性液体;TR:热带生理小种。
(II)选择定义
在本文件中使用词语“示例性”或“实施方式”或“期望地”不限制使用词语的定义或语言,并且旨在通过使用定义范围内的实例或特定实施方式以非限制性方式进一步示出。
如本文所用的活性剂是指具有特定生物活性的化学品或化合物。活性剂可以包括具有杀蜱螨活性、杀菌活性、杀真菌活性、除草活性、杀虫活性、杀幼虫活性、杀线虫活性、杀螨活性、杀软体动物活性、杀鱼活性、杀啮齿动物活性、杀粘虫活性的化学品或化合物,或者是肥料、激素和/或其它生长调节剂。本文列出了另外的活性成分。此外,活性剂可以包括支持或增强植物生长的化学品或化合物。活性剂也可以称为活性成分。
如本文所用的佐剂是指帮助或改变制剂的生物活性和/或物理性质的成分。
佐剂与农用化学品的使用通常分为四类:(1)通常增强制剂性能的活化剂佐剂,(2)通常影响喷雾溶液施用性能的喷雾改性剂佐剂(例如漂移阻抑剂、粘着剂、蒸发佐剂),(3)通常使操纵最小化并改善施用的效用改性剂(例如消泡剂),和(4)使施用问题最小化的效用产品(例如泡沫标记剂和罐清洗剂)。
如本文所用的农业上可接受的佐剂是指增强用于影响(即,根据情况抑制或增强)植物和/或植物部分的生长或栽培的组合物中活性剂的性能的物质。
如本文所用的农用化学品是指用于帮助管理农业生态系统的任何化学物质,例如激素或其它生长调节剂、杀虫剂(例如除草剂、杀昆虫剂、杀真菌剂、杀线虫剂、杀螨剂、杀幼虫剂、杀软体动物剂等)、肥料、土壤调节剂、浸灰剂、酸化剂或任何其它生长剂。
如本文所用的环境温度是指在某一位置或在室内的温度,或围绕所讨论的物体的温度。该术语等同于“室温”(rt)。通过举例,室温可以在65°F和78°F之间(约18.3℃至25.5℃);或68°F至72°F(约20℃至22.2℃)之间。
本文所用的抗冻剂是指降低制剂冰点的材料。
如本文所用的水性分散液是指其中分散有化合物的水基制剂。在一个实施方式中,或与任何提及的实施方式组合,磺基聚酯的水性分散液是其中磺基聚酯化合物已经分散在水中的制剂。与有机溶剂的连续相不同,水性分散液制剂可具有水的连续相。
如本文所用,着色剂是用于有意改变制剂颜色的任何物质。
本文所用的浓缩制剂(又称配制浓缩物)是指含有至少一种活性农用化学品化合物的制剂,所述活性农用化学品化合物的含量至少是施用态制剂中所用含量的两倍,或者高于活性成分在即用(RTU)制剂中的含量。因此,浓缩制剂预期或意图在使用或施用之前被稀释(例如,用水或另一种可接受的载体或稀释剂)。在一个实施方式中,或与任何提及的实施方式组合,浓缩制剂包含至少一种活性成分,其浓度是在施用态或RTU制剂中使用的成分的至少两倍。本文所用的术语浓缩制剂在25℃和1个大气压下为液体。
本文所用的对照制剂是含有与参比制剂相同的成分,但不含异硫氰酸甲酯(MITC)或产生降解物MITC的化合物(或其功能等效物,如替代性Foc TR4熏蒸剂)的制剂。可选地,对照制剂可以包括替代性杀真菌剂(一种或多种)代替MITC或产生MITC作为降解物的化合物,例如本领域公认的杀真菌剂(一种或多种),据信其执行的功能与MITC或产生MITC作为降解物的化合物被包括在参比制剂的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合的功能相似。
如本文所用的降解物是指由另一种化合物如杀虫剂的降解产生的化学产物。词语“降解物”的同义词包括分解产物。降解物可以看作是由起始化学品的降解或分解产生的化合物;该起始化学品可以被看作“生成”降解物。例如,MITC是威百亩钠的降解物。
如本文所用的稀释剂是指用于降低农用化学组合物的配制或施用中的活性成分浓度的气体、液体或固体。
如本文所用,分散液是指其中一种材料的分布颗粒均匀分散在另一种材料的连续相中的体系。预期分布的颗粒可以是固体或液体颗粒,其可以分散在连续液相中。
如本文所用,分散性是指一种材料均匀分散在另一种材料的连续相中的能力。这里所用的再分散性是指在颗粒沉降或沉积之后颗粒在混合物中分散的能力。
如本文所用的有效量是指足以引起有益和/或期望结果的量。例如,活性成分可以以有效提供与该活性成分有关的期望效果的量存在于制剂中,所述期望效果例如杀真菌效果、肥料效果或任何其他农用化学品效果。任何活性或其它成分的有效用于其所需用途的量通常受所使用的成分、使用它的背景(例如,制剂中的其它组分)、使用含有该成分的组合物的方法或方式等的影响。任何特定成分的有效量和在各种情况下可以使用本领域公认的方法来确定。有效量的一个实例是足以降低例如一定体积土壤中真菌或线虫繁殖体的水平(数量)的量。
本文所用术语“等效物”是指使制备指定水平或量的化合物、产物、降解物或亚化合物所需的制剂、组合物或化合物的量相等的量度。“等效物”的使用使得可以更简单地比较可能具有彼此不同效力的多种制剂、组合物或化合物。例如,一种组合物或制剂可以提供比与其比较的组合物或制剂更高(或更低)有效量的期望的终产物,但是可以比较用于方法中的每种的合适量并通过参考等同物而转化。例如,甲基二硫代氨基甲酸酯等效物是生产所需或设定量的甲基二硫代氨基甲酸酯(methyldithiocarbamate)所必需的一些起始化合物(如威百亩钠)的量。
本文所用的可流动浓缩物是指一种或多种固体活性成分(至少为施用态或RTU制剂中所用水平的两倍的水平)在水中的悬浮液。
如本文所用,功能等效物是指执行相同功能并提供如所指定的相同或改进的效用的实践、方法、技术、程序、材料或组件。因此,MITC或产生MITC的化合物的功能等效物包括具有或表现出与MITC相同效用的任何其它化合物,例如在治疗、减少或控制尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(Foc TR4)(也称为香蕉枯萎病菌)的任何其它化合物。
如本文所用的颗粒是指物质的小的、紧密的、可区分的片或颗粒。通常,颗粒是包含规定尺寸的颗粒的固体制剂,例如直径>80μm,用于在没有进一步稀释的情况下施用,例如施用于土壤。颗粒可以含有一种或多种活性成分以及一种或多种惰性成分,例如填充成分。
如本文所用,惰性成分或组分是指有意包括在制剂中的除活性成分(如农用化学品活性成分)以外的任何物质。惰性成分的非限制性实例包括乳化剂、溶剂、载体、粘着剂、表面活性剂、漂移控制剂、干旱控制剂、香料、染料和具有展着剂活性、具有耐雨活性的佐剂等。
如本文所用,惰性包是指提供一种或多种惰性组分以用于农用化学品制剂中的预混合组合物。将惰性包加入到含有至少一种活性农用化学成分的制剂(例如浓缩制剂)中,例如同时将制剂稀释以施用到植物、植物部分或培养基。本领域普通技术人员将认识到,可以配制不同的惰性包以与不同的活性成分制剂配对。
惰性包可以提供至少一种佐剂功能,例如乳化剂、粘着剂、漂移控制剂、展着剂、耐雨剂等。惰性包的其它实例提供两种或更多种这样的佐剂功能。“完全”惰性包提供了与特定农用化学品制剂一起使用所需的所有佐剂功能。
例如,惰性包可包括MITC或产生MITC作为降解物的至少一种化合物(或替代性FocTR4熏蒸剂),如本文所述。在一个实施方式中或与任何所提及的实施方式组合,产生MITC作为降解物的化合物是或包含威百亩钠。
本文所用的载量(loading)是指在给定体积中材料的量。对于农用制剂,载量通常是指制剂中活性成分的量,例如表示为g/升百分比。
本文所用的有害生物(pest)是在使得不希望害虫存在的环境中的任何生物体(包括微生物)。应认识到,在示例性实例中,有害生物是植物(例如,杂草)、微生物(例如真菌、细菌、线虫等)、昆虫(包括昆虫的任何阶段或生命周期,例如卵、幼虫或成虫)、软体动物(例如蛞蝓或蜗牛)或较大动物(例如啮齿动物、鸟、鱼等)。
如本文所用的杀虫剂(pesticide)包括旨在用于预防、破坏、排斥或减轻任何不想要的有害生物的任何物质或物质的混合物,其中有害生物是可能对作物有影响的任何生物体。有许多杀虫剂亚类,包括:杀昆虫剂、除草剂、灭鼠剂、杀细菌剂、杀真菌剂、杀幼虫剂、杀螨剂、杀软体动物剂、杀线虫剂等。
本文所用的植株是指包括任何根结构、维管组织、营养组织和生殖组织的整个植株。“植物部分”包括植物的任何部分。例如,在收获树木时,与其根部分离的树木变成植物部分。植株部分进一步包括花、果实、叶、树皮、蔬菜、茎、根、枝、种子及其组合,其少于植物。
本文所用的粉末是指0.5-5000μM范围内的颗粒。小颗粒的科学和技术被称为“测微学”(对于一般综述,参见Physical Pharmacy and Pharmaceutical Sciences’FifthEdition by Patrick J.Sinko,Lippincott Williams&Wilkins,2006,ISBN:0-7817-5027-X)。通常用于描述粒度的单位是微米(μm)。通常,光学显微镜可用于测量0.2至100μm的粒度;然而,也可以使用其它技术来确定近似的尺寸范围,例如沉降、库尔特颗粒计数仪、透气性、筛分等。
根据美国药典的方法,诸如筛分的技术可用于确定相应粉末和/或粉末混合物的“粉末细度”或其它性质;例如粒度和粒度分布(即平均粒度、粒度分布(频率分布曲线)、数量和重量分布、颗粒数)、颗粒体积、颗粒形状和表面积、孔径、孔隙率、颗粒密度、膨松度、流动性质等。因为许多粉末具有包含非对称粒度分布的趋势,所以通常绘制对数正态分布;通常,该方法导致线性关系。随后,通过将粒径的对数对概率尺度上的累积百分比频率作图,可以获得“几何平均直径”(dg;概率尺度上等于50%的粒径)。因此,如本申请通篇所用,粉末应被分类为不同的粒度范围,例如:“极细粉”(即尘状粉;0.5-50μm)、“细粉”(50-100μm)、“粗粉”(100-1000μm)和“颗粒粉”(1000-5000μm)。
如本文所用的防腐剂是抑制或阻抑产品或制剂如农用化学品制剂分解的任何化学品。
如本文所用的繁殖体是指在繁殖生物体中起作用的任何材料,例如新的单个生物体可以发育的生物单位形式。这包括有性和无性产生的繁殖体,例如孢子、内生孢子、种子、胞囊、卵、菌丝片段、组织片段等。繁殖体可以视为包括有活力的和无活力的繁殖体,其中有活力的繁殖体事实上能够产生或生长为新的个体生物体(给定适当的环境和时间)。
本文所用术语“雾化性”是指液体或凝胶在空气中被驱动或分散为例如颗粒、液滴或小滴的能力。
如本文所用,表面活性剂是指降低两种液体之间、气体与液体之间或液体与固体之间的表面张力(或界面张力)的化合物。表面活性剂可以充当洗涤剂、润湿剂、乳化剂、发泡剂和分散剂。表面活性剂可以是两性的、非离子的和/或阴离子的。在农用化学品制剂中,表面活性剂可以影响以下一种或多种:乳化、活性成分的分散、展着和/或润湿。
如本文所用,悬浮液是指包含分散在液体中的固体颗粒的非均相混合物,其中固体颗粒不完全溶解在液体中。颗粒可以是肉眼可见的,并且可以最终沉降,尽管仅当颗粒没有沉降时,混合物才被分类为悬浮液。
本文所用的悬浮液浓缩物(SC)是指固体活性成分的小颗粒(其中至少一种活性农用化学品化合物/成分的含量是施用状态或RTU制剂中所用含量的至少两倍)在液相(例如水)中的稳定流体悬浮液,其旨在使用前用水稀释。悬浮浓缩制剂(SC)也可以称为可流动浓缩物制剂。SC的液相可以是水不混溶性溶剂(例如油)基,或水基,这取决于具体的活性成分和涉及的应用。浓缩物通常在使用时稀释到更大量的水中,例如农场(对于农用化学品悬浮液浓缩物)。
当悬浮液浓缩物随着时间的推移而储存时,至少一些固体颗粒沉降到容器的底部是常见的。这种沉降会导致容器底部非常硬的块体,这需要显著的搅拌以使其分裂和再悬浮。在许多情况下,这种固体块体的形成导致桶混剂中的粒度,这可能堵塞或阻塞喷嘴和管线,并使制剂不可用。一些SC制剂需要显著搅拌以确保固体颗粒充分分散,从而避免设备堵塞并能够完全加入到罐中。
如本文所用,即用型是指在施用前不需要进一步稀释的制剂。
如本文所用的桶混剂是指在喷雾施用时或即将施用之前在喷雾桶中混合的两种或更多种化学杀虫剂、惰性成分、组分或制剂。
如本文所用,增稠剂是指其主要功能是增加流体粘度的材料。
如本文所用的处理是指用于实现期望效果的方法,例如减少土壤或水样品被害虫(例如真菌或线虫)污染。因此,处理田地可指施用含有足够量/水平的至少一种活性成分的组合物以实现期望的效果,例如来自田间的土壤中所选害虫的繁殖体的可测量数量的减少。
如本文所用,挥发是指蒸发溶解的样品或升华固体残基的过程。
本文所用的水硬度是水中存在的矿物质的量的量度。硬度通常以每升水中溶解的碳酸钙和碳酸镁的毫克数表示;然而,其它二价和三价金属元素可有助于水硬度。
(III)减少芭蕉属植物的镰刀菌感染
香蕉是世界上出口最多的水果,也是最不发达国家产量第五大的水果,是一种有价值的市场商品,也是发展中国家约4亿人的重要主食或收入来源。这种作物由于受尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(FocTR4)的影响而具有严重的土壤病害;这危害了香蕉和其它芭蕉属物种的连续生产和提高的生产力。目前,没有化学品,有机或无机,被有效地用于对抗Foc TR4。本文描述了一种施用方法,其使用威百亩钠以减少Foc TR4侵染,通过在土表下一个或多个选定深度进行注射,其用足够的威百亩钠保护根区以减轻随后引入经处理田地中的芭蕉属植物中的Foc TR4感染,允许持续稳定的作物生产。可选地,可以采用管理计划,其根据需要帮助种植者和分销商具有安全的施用过程。
如实例2所述,在30cm和60cm深度处注射威百亩钠可以用于控制Foc TR4,并且将给予香蕉和大蕉种植者更宽的生产时间范围,并且以这种方式继续生产以获得投资回报(ROI),维持工人的工作,并且支持生产芭蕉属作物的国家的经济。
本文所述的方法和组合物可用于所有芭蕉属(例如,香蕉和大蕉)生产国,尤其包括卡文迪许品种的生产,其中存在Foc TR4巴拿马枯萎病。这些方法和组合物也可应用于疾病尚未到达的国家、地区或田地,例如作为预防性施用。据信其中威百亩钠的施用可能用于控制或减少芭蕉属植物的Foc TR4感染的代表性国家包括:菲律宾、印尼、马来西亚、中国、越南、澳大利亚、新西兰、黎巴嫩、阿曼、以色列、约旦、印度、莫桑比克、肯尼亚、墨西哥、洪都拉斯、危地马拉、哥斯达黎加、伯利兹、哥伦比亚、厄瓜多尔、秘鲁和巴西。
在一个示例中,应用具有以下特性的威百亩钠(510g/L可溶性液体(SL)):
剂量在750-3,000L/Ha(升每公顷)之间;
当土壤在注射威百亩钠产品之前“制备良好”时;在本上下文中,“良好制备”是指将土壤旋耕或以其它方式处理以至少破碎土表下0cm至80cm的土壤结构,以允许注射具有平滑且均匀的机器施用;土壤被平整且基本均匀,因此,施用机器和拖拉机可以在将发生威百亩钠注射的所有土壤中以类似的速度前进。
土壤的温度应最低为10℃,以使所施用的产品可从威百亩钠(液体)转化为MITC(气体),MITC是杀死真菌Foc TR4(包括其厚垣孢子)的活性成分。
释放MITC(例如,含威百亩)的产品最佳地分布在植株根区内或根区(土壤中至少60cm深),因此它将变成气体并向上移动,并杀死基本上所有根区的Foc TR4菌丝和厚垣孢子。
在处理时,如果土壤潮湿,至少50-60%田间持水量,有助于产品降低Foc TR4真菌的生存力是有益的。
(IV)靶生物
本文提供了能够在传染原尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(Foc TR4)存在下管理芭蕉属植物的生产的方法、组合物和系统。这种真菌也被称为香蕉枯萎病菌。见“技术手册,尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(TR4)引起的香蕉枯萎病(巴拿马病)的预防和诊断”,联合国粮食农业组织,2014年5月(74页);可在线获得,fao.org/3/a-br126e.pdf。
尖孢镰刀菌古巴专化型在香蕉或其它芭蕉属植物中的生命周期通常如下进行(Dita et al.,Front Plant Sci.19(9):1468,2019):1)孢子(微分生孢子和大分生孢子和厚垣孢子)停留在土壤中或其他宿主如杂草上。2)根分泌液刺激厚垣孢子萌发,芽管穿透香蕉根部。3)Foc生长通过皮层生长至表皮,并且菌丝体侵入维管系统。4)分生孢子和厚垣孢子在维管组织中持续产生。分生孢子通过植株的蒸腾系统迅速分布于植株中。菌丝体和所得的胶质阻塞维管组织,在较老的叶片中观察到第一症状黄化。(5)Foc定殖并破坏更多的维管组织,引起强烈的萎蔫。(6)被感染的植物死亡,并且通过维管连接被母本植株污染的随行植株(follower plant)(子代)显示出初始症状。7)母本植株最终倒下,疾病周期再次开始。
正是这个生命周期使得难以解决Foc TR4。Foc能够在其原始寄主不存在的情况下通过厚垣孢子存活,厚垣孢子是为存活设计的厚壁孢子。它们耐干燥,适应不利的环境条件,并且这种类型的孢子已经显示在土壤中存活超过20年(Stover,CommonwealthMycological Inst.,Kew,UK,1962;Buddenhagen,Acta Hortic.828:193-204,2009)。一旦宿主被侵入,甚至在外在症状可见之前(Li et al.,Eur J Plant Pathol.131:327-340,2011),而不仅是在香蕉植株死亡之后,就持续产生Foc的厚垣孢子。Foc在碎片中定居和腐生生长的能力增加厚垣孢子的产量,并有助于增加土壤中病原体的持续性(Dita et al.,Front Plant Sci.19(9):1468,2019)。
(V)活性成分
本文发现了异硫氰酸甲酯(MITC)和产生MITC作为降解物的化合物防治镰刀菌属物种如Foc TR4中是特别有用的,通过在怀疑将要或可能被真菌污染的田地中种植芭蕉属植物之前的土壤处理。尽管在此示例了化合物威百亩钠(公认的土壤熏蒸剂,例如用于控制线虫侵染;Runia&Molendijk,Commun Agric.App.BiolSci,72(3):687-691,2007),据信,产生MITC作为降解物的其他化合物以及MITC本身(以TrapexTM销售)也将可用于本文所述的方法和系统。这些化合物包括例如:棉隆(C5H10N2S2;以Dacron销售),一种产生MITC作为降解物的干燥颗粒化合物;威百亩(C2H5NS2;也称为甲基二硫代氨基甲酸,甲基氨基二硫代甲酸);威百亩钠(C2H4NNaS2;以威百亩426、Polefume、Turfcure、HL、Busan 1236、威百亩CLRTM、SistanTM、TrimatronTM、Meter、Soldier等销售),威百亩钾(C2H4NKS2;以Curtin、威百亩KLR、K-PamHL、RaisanK-50、Sectagon K-54等销售),和威百亩铵(C2H8N2S2;N-甲基-二硫代氨基甲酸酯,以安百亩(carbam)、销售)。
以下是示例性活性成分化合物的结构:
MITC在此是指一种活性成分,其作为杀真菌剂起作用以减少Foc TR4。MITC由异硫氰酸酯和甲基组成;据信异硫氰酸酯提供分子的一种或多种抗真菌活性。下面说明威百亩钠和它释放的MITC的结构。
威百亩钠是代表性的二硫代氨基甲酸酯,其转化为(也可以称为释放、降解为、产生为降解物和/或析出)MITC;其它二硫代氨基甲酸酯也可以产生MITC作为降解物。“二硫代氨基甲酸酯杀虫剂”包括棉隆、威百亩钾、威百亩铵、福美铁、福美锌、代森钠、福美双、代森锌、代森锰、代森锰锌、代森联和丙森锌。以下说明二硫代氨基甲酸酯的一般结构:
R和R″可以独立地是直链或支链烷基或链烯基,例如甲基、乙基、丙基、烯丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。R或R″也可以是H。R和R″不能同时为H。
例如,烯丙基-ITC是天然存在的化合物,例如在芸苔属物种中发现的,其负责芥菜味道。它是植物自身防御机制的一部分。据报道,烯丙基二硫代氨基甲酸酯具有抗真菌活性。
由于X-ITC在氮原子上仅有一个取代基,R或R″-N键之一在X-ITC形成过程中需要断裂。这最容易用H实现,因为质子非常易迁移。在棉隆中,这是因为N-CH2-N-CH2-S部分易于水解而实现的。R和R″均为烷基的二硫代氨基甲酸酯可以更慢地转化为MITC;例如福美双(R,R″=Me)。
R或R″的烷基可以含有其它杂原子如N、O或S,因此,R和R″可以含有其它官能团如醇、胺、羧酸/酯和其它二硫代氨基甲酸酯基。实例包括例如代森锰锌、丙森锌和代森联。
R和R″的烷基可以形成环状结构。
R′可以是无机或有机阳离子物质,例如Na、K、Zn、Mn、Fe、铵、烷基铵等。在R′是多价阳离子如Zn2+、Mn2+、Fe3+等的情况下,它可以将两个或多个异硫氰酸酯基团连接在一起。实例包括例如代森锰锌和丙森锌。
R′还可以是烷基或链烯基,例如甲基、乙基、丙基、烯丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。
R′可以与R或R″形成环状结构;这种形式的一个例子是棉隆。
MITC是异硫氰酸酯(ITC)的许多形式之一。作为ITC家族的最轻成员,它是最易挥发的,因此可能在土壤中最易移动。下面说明ITC的结构(其中X可以如本文所述):
X-N=C=S
据信MITC的异硫氰酸酯部分提供了至少一种其抗真菌作用的要素。此外,应当理解,甲基是一个示例性的烷基,并且连接到异硫氰酸酯基团上的其它烷基也可以提供与本文所证明的MITC相似的杀真菌作用。因此,在一个实施方式中,其它官能团如乙基、丙基、烯丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基可以取代MITC(更一般地称为X-ITC)中的甲基,或者与本文提供的任何所述实施方式组合。这些基团可存在于最终组合物或降解物中,或存在于初始化学结构中。例如,形成异硫氰酸酯降解物并含有乙基的乙烯-二-二硫代氨基甲酸酯和丙烯-二-二硫代氨基甲酸酯已经显示出杀真菌性能(Al-Alam et al.,JourChromat Sci.4:429-435,2017)。
在另一个实施方式中,除了释放MITC或产生MITC作为降解物的化合物的土壤熏蒸剂之外的土壤熏蒸剂也可用于本文所述的方法中。当将土壤熏蒸剂施用于土表下至少40cm和/或分布于土表下0cm至至少40cm(或至少60cm)时,此类其它化合物有效降低经处理土壤中镰刀菌生物体(例如Foc TR4)的生存力。这些其它土壤熏蒸剂通常可称为“替代性FocTR4熏蒸剂”。
替代性Foc TR4熏蒸剂的实例包括例如二甲基二硫、氯化苦、1,3-二氯丙烯、1,2-二氯丙烷和甲基澳。下表提供了相应的结构:
本申请中提及的所有实施方式和描述加以必要的变更适用于替代性Foc TR4熏蒸剂。例如,本文所述的浓度、施用率和施用方法适用于替代性Foc TR4熏蒸剂。
(VI)制剂中的任何组分
除了活性组分(即异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物或其功能等效物,如替代性Foc TR4熏蒸剂)之外,本文提供的制剂可以包括一种或多种另外的成分。例如,在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,这些其他成分将包括以下的一种或多种:活性成分(例如其他杀虫剂、肥料、植物生长调节剂和/或阻滞剂、生长刺激剂、开花/结果抑制剂、收获佐剂、脱叶剂、开裂抑制剂)、松香、佐剂(例如乳化剂、展着剂、粘着剂、漂移控制剂、耐雨剂、表面活性剂、防结块剂、防冻剂、调节呼吸(失水或失水)的组分)和其它另外的可选成分(例如降粘剂、增溶剂、分散剂、消泡剂、稳定剂、防腐剂、抗氧化剂、pH调节剂、掩蔽剂/螯合剂、溶剂、另外的聚合物、增味剂和着色剂或其它标记物,例如泡沫标记物)。
普通技术人员将认识到,单独的活性成分和其它可选的组分或多或少地容易被包括在不同类型的制剂中。选择哪种成分或成分的哪种形式用于所选制剂或用于某种用途是在普通技术范围内的。在任何一种制剂中一种或多种成分的选择可例如受目标施用、所用的具体施用形式、制剂中的其它组分、制剂将使用的环境等影响。同样,本领域普通技术人员能够确定,包括通过经验研究,制剂中每种附加组分的合适量。
在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合提供的制剂可以可选地包含一种或多种另外的农业化学活性成分,除了MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)之外。一般而言,这种另外的农业化学活性成分可以是具有选定生物活性的任何化学品或化合物。例如,活性剂包括具有杀螨活性、杀菌活性、杀真菌活性、除草活性、杀昆虫活性、杀幼虫活性、杀线虫活性、杀螨活性、杀软体动物活性、杀鱼活性、杀啮齿动物活性或杀粘虫活性中的一种或多种的化学品、化合物和混合物。还考虑驱虫剂。另外的活性剂可以包括修饰、支持或增强植物生长的化学品、化合物或混合物,例如肥料、激素和/或其它生长调节剂。本文列出了另外的活性成分。以下段落提供了所考虑的农用化学品活性成分的非详尽列表。
本文所述的任何制剂还可以可选地包含一种或多种另外的杀虫剂(除MITC或产生MITC作为降解物的化合物之外,或如上所述的功能等效物或替代物)作为活性成分。通常,杀虫剂是用于消灭、抑制、驱除或减轻任何不想要的有害生物(尤其包括可能对作物具有负面影响的任何生物体)的物质或物质混合物。术语杀虫剂描述了一个宽泛的类别,其包括杀蜱螨剂(以根除蜱和螨)、杀细菌剂、另外的杀真菌剂、除草剂、杀昆虫剂、杀幼虫剂、杀螨剂、杀软体动物剂、杀线虫剂、杀鱼剂、灭鼠剂和杀粘虫剂(抗粘菌剂)。以下段落提供各种杀虫剂的非限制性代表性实例;本领域普通技术人员将认识到另外的实例,包括生物性农药实例。
杀藻剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种杀藻剂作为活性成分,其用于减轻藻类损伤对农业生产的影响。有用的杀藻剂包括贝氯沙嗪、二辛酸铜、硫酸铜、环丁腈、二氯吡啶、双氯酚、恩多索、芬替丁、消石灰、代森钠、奎奴卡明、奎诺酰胺、西玛津、三苯基乙酸锡和三苯基氢氧化锡。
杀菌剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种杀菌剂作为活性成分,其用于减轻细菌损伤或捕食对农业的影响。有用的杀菌剂包括氢氧化铜、辛酸铜、氯氧化硫酸铜、五水硫酸铜、春雷霉素、次氯酸钠、硫酸链霉素。
杀真菌剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种另外的杀真菌剂作为活性成分,其用于减轻真菌损伤或捕食对农业生产的影响。注意到本文所述的第一种活性成分(即MITC或产生MITC作为降解物的化合物,或其功能等效物,如替代性FocTR4熏蒸剂)本身是杀真菌剂。有用的第二杀真菌剂包括嘧菌酯、肟菌酯、醚菌酯、恶唑菌酮、苯氧菌胺和啶氧菌酯、多菌灵、噻苯唑、烯酰吗琳、乙烯菌核利、异菌脲、二硫代氨基甲酸酯、抑霉唑、咪鲜胺、氟喹唑、氟环唑、粉唑醇、戊环唑、联苯三唑醇、糠菌唑、环唑醇、苯醚甲环唑、己唑醇、多效唑、丙环唑、戊唑醇、三唑酮、灭菌唑、丁苯吗啉、十三吗啉、苯锈啶、代森锰锌、百菌清、威百亩、福美双、福美锌、敌菌丹、克菌丹、灭菌丹、氟啶胺、氟酰胺、萎锈灵、甲霜灵、乙嘧酚磺酸酯、乙嘧酚、醚菌胺、氟嘧菌酯、肟醚菌胺、苯氧菌胺、丙硫菌唑、8-(2,6-二乙基-4-甲基-苯基)四氢吡唑并[1,2-d][1,4,5]氧杂二氮杂卓-7,9-二酮、2,2-二甲基-丙酸-8-(2,6-二乙基-4-甲基-苯基)-9-氧代-1,2,4,5-四氢-9H-吡唑并[1,2d][1,4,5]氧杂二氮杂卓-7-基酯和甲霜灵。
除草剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种除草剂作为活性成分,其用于减轻不希望的植物生长对农业生产的影响。有用的除草剂包括氟唑磷(fluzifop)、硝磺草酮、氟磺胺草醚、三甲苯草酮(tralkoxydim)、敌草胺、敌稗、啼菌环胺(cyprodanil)、嘧霉胺,氯硝胺、四氯硝基苯、甲基立枯磷(toclofos methyl)、麦草氟M、2,4-D、MCPA、甲氯丙酸(mecoprop)、炔草酯、氰氟草酯、禾草灵、氟吡甲禾灵、精喹禾灵、吲哚3-基乙酸、1-萘乙酸、异草胺、牧草胺、氯酞酸二甲酯、苯菌灵、呋草黄、麦草畏、敌草腈、草除灵、咪唑嗪、氟佐隆、伏虫隆、苯敌草、乙草胺、甲草胺、异丙甲草胺、丙草胺、噻吩草胺、禾草定、氟草定、丁苯草酮、烯草酮、环草酮、稀禾定、吡喃草酮、二甲戊灵、敌草特、甲羧除草醚、乙氧氟草醚、三氟羧草醚、乙羧氟草醚、澳苯腈、碘苯腈、甲基咪草烟、灭草烟、灭草喹、咪草烟、甲基咪草烟、咪草啶酸、丙炔氟草胺、氟胺草酯、毒莠定、氨多黄隆、绿黄隆、烟嘧磺隆、砜嘧磺隆、醚苯黄隆、野麦畏、草铵膦、莠去津、西玛津、氰草津、莠灭净、扑草净、特丁津、特丁净、磺草酮、异丙隆、利谷隆、非草隆、绿麦隆、甲氧隆、N-膦酰基甲基甘氨酸及其盐(草甘膦)、草铵膦、矮壮素、百草枯、敌草快、三氟啶磺隆、氟磺胺草醚、硝磺草酮、非草隆、2,2-二氯丙酸、氨丁三醇、氯氨吡啶酸、磺草灵、阿维菌素盐酸盐。
杀昆虫剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种杀昆虫剂作为活性成分,其用于减轻昆虫损伤或捕食对农业生产的影响。有用的杀虫剂包括阿维菌素、高灭磷、啶虫脒、氟丙菊酯、棉铃威、涕灭威、丙烯菊酯、α-氯氰菊酯、双甲脒、印楝素、甲基吡啶磷、益棉磷、谷硫磷、苯究卡白、丙硫克百威、杀虫磺、β-氟氯氰菊酯、β-氯氰菊酯、联苯菊酯、生物丙烯菊酯、生物苄呋菊酯、双三氟虫脲、硼砂、扑虱灵、丁酮砜威、硫线磷、西维因、克百威、氯苯胺灵、噻虫胺、氟氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、澳氰菊酯、乙霉威、除虫脲、呋虫胺、埃玛菌素、硫丹、苯氧威、倍硫磷、氰戊菊酯、氟虫腈、苄螨醚、七氯、氟蚁腙、吡虫啉、炔咪菊酯、异丙威、λ氯氟氰菊酯、甲胺磷、灭虫威、灭多威、烯啶虫胺、氧乐果、氯菊酯、抗蚜威、虫螨磷、残杀威、虫酰肼、萜烯、噻虫嗪、硫双灭多威、杀铃脲和灭杀威。
杀螨剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种杀螨剂作为活性成分,其用于减轻螨虫损伤或捕食对农业生产的影响。有用的杀螨剂包括抗生素杀螨剂、氨基甲酸酯杀螨剂、甲脒类杀螨剂、螨虫生长调节剂、有机氯、氯菊酯和有机磷酸酯杀螨剂。
杀软体动物剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种杀软体动物剂作为活性成分,其用于减轻软体动物(例如,蛞蝓或蜗牛)损伤或捕食对农业的影响。可用的杀软体动物剂包括四聚乙醛、甲硫威和灭虫威。
杀线虫剂:本文所述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种杀线虫剂作为活性成分,其用于减轻线虫损伤或捕食对农业的影响。可用的杀线虫剂包括:1,3-二氯丙烯、印楝提取物、氨基甲酸酯、大蒜衍生的多硫化物、万寿菊(Tagetes)提取物等。
可以可选地包含在所提供的农用制剂和组合物的一个实施方式中或与任何所提及的实施方式组合的另一类活性成分是肥料。因此,本文描述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种肥料作为活性成分。肥料是天然或人造物质,其包括一种或多种改善植物生长和生产能力的化学元素。肥料提高培养基(例如土壤)的天然肥力或替代由先前作物从培养基中获取的化学元素。现代化学肥料包括在植物营养中最重要的三种元素(主要常量营养素)中的一种或多种:氮(N;特别用于叶生长)、磷(P;特别用于根、花、种子和果实的发育)和钾(K;有益于植物的强茎生长、水分的移动和促进开花和结果)。第二重要的是元素硫(S)、镁(Mg)和钙(Ca)(称为第二常量营养素)。可选地,肥料可以包括一种或多种微量营养素:铜(Cu)、铁(Fe)、锰(Mn)、钼(Mo)、锌(Zn)、硼(B)。偶尔重要的是硅(Si)、钴(Co)和钒(V)。
氮肥可从合成氨(NH3)获得;该化合物以气体或水溶液形式使用,或者将其转化为盐,例如硫酸铵、硝酸铵和磷酸铵。铵也可由废物流如养殖场废物、经处理的垃圾、污水和粪肥制得。磷肥包括来自磷矿石或骨的磷酸钙。分别用硫酸和磷酸处理磷酸钙得到更易溶的过磷酸钙和三元过磷酸钙制剂。钾肥,即氯化钾和硫酸钾,是从钾碱矿床开采的。混合肥料含有三种主要营养素——氮、磷和钾中的一种以上。混合肥料可以以本领域普通技术人员公知的无数方式配制。
本文特别考虑的是意欲作为液体施用的肥料组合物和制剂。液体肥料的实例包括氨的水溶液、硝酸铵的水溶液或尿素中的一种或多种;这些浓缩的含氮产物可以用水稀释以形成浓缩的液体肥料(例如UAN)。本发明的优点是肥效快,覆盖容易。
在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,包括一种或多种农业上可接受的佐剂以影响制剂的一种或多种特性可能是有益的。普通技术人员将认识到可以与所提供的制剂一起使用的佐剂。以下段落提供了示例性佐剂类别以及具体的示例性佐剂;这些列举不是穷举的。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种乳化剂。本领域普通技术人员将认识到,存在许多农业上可接受的乳化剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。例如,乳化剂可以包括:链烷酸和链烯酸、α-氢-ω-羟基聚(氧乙烯)的单酯和二酯、单硬脂酸甘油酯和/或偏硅酸钠。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种展着剂。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的展着剂/润湿剂化合物,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。作为实例,展着剂可以包括:烷基芳基聚乙氧基醚和其它乙氧基化衍生物、脂肪酸、异丙醇。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种粘着剂(粘着剂)。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的粘着剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。粘着剂的实例包括基于胶乳的产品、松脂二烯/萜烯基产品和长链多糖,如结冷胶、瓜尔胶和黄原胶。或者,粘着剂可以是聚合物或共聚物,其来自诸如聚丙烯酸酯和聚乙烯的聚合物类型,或聚醚酰胺,或酰亚胺。
本文所述的任何制剂还可选地包含一种或多种漂移控制剂,特别是在其中制剂被施用在土表处或附近的实施方式中。本领域普通技术人员将认识到,存在许多农业上可接受的漂移控制剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。漂移控制剂的实例包括:卵磷脂和相关衍生物、分子量为至少20kDa的线型非离子聚合物、瓜尔胶及其衍生物和脂肪醇烷氧基化物。
目前用作漂移控制剂的典型聚合物包括粘弹性聚丙烯酰胺、聚氧乙烯和聚(乙烯基吡咯烷酮),其中聚丙烯酰胺是农业产业喷雾罐添加剂,漂移降低标准。具有至少20kDa分子量的合适线型非离子聚合物可选自聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯或聚乙二醇。还考虑非离子聚合物,例如聚丙烯酰胺和聚丙烯酸酯。在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,这种非离子聚合物的分子量为至少50kDa,例如至少100kDa,且在具体实例中为至少1000kDa。
脂肪醇烷氧基化物的实例包括脂肪醇乙氧基化物。脂肪醇可以包括C8-22,或C14-20,在代表性实例下是C16-18脂肪醇。脂肪醇乙氧基化物可以包含1至15,例如1至8,并且在某些实例中2至6当量的环氧乙烷。合适的脂肪醇乙氧基化物是C14-20脂肪醇,其包括2-6等效物的环氧乙烷。漂移控制剂的亲水亲油平衡(HLB)值可为4.0至11.0,例如6.0至10.0,在某些实例中为8.0至10.0。在另一种特定的形式中,漂移控制剂具有5.0至8.0,例如6.0至7.0的HLB。HLB可根据Griffin法(Griffin,J Soc Cosmet Chem.1(5):311-326,1949)测定。在另一个示例性形式中,该漂移控制剂是脂肪醇烷氧基化物。
还考虑用作漂移控制剂的是羟乙基纤维素(HEC)、乙基羟乙基纤维素(EHEC)、羟丙基纤维素(HPC)、羟丁基甲基纤维素(HBMC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、甲基乙基羟乙基纤维素(MEHEC)和疏水改性的乙基羟乙基纤维素(HMEHEC)。
本文所述的任何制剂还可选地包含一种或多种表面活性剂。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的表面活性剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。表面活性剂可以包括以下一种或多种:a-(壬基苯基)-oo-羟基聚(氧基-1,2-乙二基);聚乙二醇醚;单(壬基苯基)醚;聚乙二醇壬基苯醚;聚氧乙烯(n)-壬基苯基醚;壬基苯基聚乙二醇醚;壬基苯氧基聚乙氧基乙醇;和聚(氧-1,2乙二基)-a-(壬酚)-)-羟基、N-烷基-N,N-二甲基甘氨酸铵,例如椰油烷基二甲基-甘氨酸铵、N-酰基氨基丙基-N,N-二甲基甘氨酸铵、例如椰油酰基氨基丙基二甲基-甘氨酸铵和2-烷基-3-羧基甲基-3-羟乙基-咪唑啉,在每种情况下在烷基或酰基中具有8至18个C原子,和椰油酰基氨基乙基羟乙基羧甲基甘氨酸盐、N-烷基甘氨酸、N-烷基丙酸、N-烷基氨基丁酸、N-烷基亚氨基二丙酸、N-羟乙基-N-烷基酰胺丙基甘氨酸、N-烷基牛磺酸、N-烷基肌氨酸、2-烷基氨基丙酸和烷基氨基乙酸,在每种情况下在烷基中具有约8至18个C原子。示例性的两性表面活性剂包括N-椰油烷基氨基丙酸酯、椰油酰基氨基乙基氨基丙酸酯和C-C-酰基肌氨酸。
非离子表面活性剂包括烷氧基化物,例如烷氧基化醇,烷氧基化脂肪酸,例如乙氧基化物和它们的衍生物,包括乙氧基化C8-C24饱和和不饱和、线性和支化脂肪酸或脂肪醇,烷氧基化嵌段共聚物,烷氧基化芳基烷基酚,尤其是乙氧基化物和它们的衍生物,包括烷基酚乙氧基化物,烷氧基化胺,烷氧基化油,脂肪酯,尤其是C8-C24饱和和不饱和、线性和支化脂肪酸的聚乙二醇单酯和二酯,脱水山梨糖醇衍生物,包括酯和乙氧基化物,烷基多葡糖苷等。
离子型表面活性剂包括烷基芳基磺酸盐、烷基芳基磺酸、羧化醇乙氧基化物和烷基酚乙氧基化物、羧酸/脂肪酸、二苯基磺酸盐衍生物、烯烃磺酸盐、磷酸酯、含磷有机衍生物、季化表面活性剂、油和脂肪酸的硫酸盐和磺酸盐、乙氧基化烷基酚的硫酸盐和磺酸盐、乙氧基化醇的硫酸盐、脂肪酸的硫酸盐、十二烷基和十三烷基苯的磺酸盐、萘和烷基萘的磺酸盐、石油的磺酸盐、磺基琥珀酰胺酸盐、链烷醇酰胺、烷氧基化胺、N-酰基肌氨酸盐等。
本文所述的任何制剂,特别是干燥或粉末基制剂,也可选地包含一种或多种防结块剂。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的防结块剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。防结块剂可以包括碳酸钠、磷酸三钙、碳酸钾、碳酸铵、碳酸镁、盐酸、氯化钾、氯化钙、氯化铵、氯化镁、氯化亚锡、硫酸、硫酸钠、硫酸钾、硫酸钙、硫酸铵、硫酸镁、泻盐、硫酸铜、硫酸铝、硫酸铝钠、硫酸铝钾、硫酸铝铵、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化铵、氢氧化镁、氧化钙、氧化镁、亚铁氰化钠、亚铁氰化钾、亚铁氰化钙、二磷酸二钙、磷酸铝钠、硅酸钠、二氧化硅、硅酸钙、硅酸镁、三硅酸镁、滑石、硅酸铝钠、硅酸铝钾、硅酸铝钙、膨润土、高岭土、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、葡萄糖酸、葡萄糖酸δ-内酯(葡萄糖酸内酯)、葡萄糖酸钠、葡萄糖酸钾、葡萄糖酸钙、葡萄糖酸亚铁、乳酸亚铁、聚二甲基硅氧烷。
可选地,本文所述的制剂和组合物可以包括一种或多种其他农业上可接受的成分。以下提供可选成分的类别的代表性实例;本文提供的列表不是旨在穷举,而是仅提供实例。
本文所述的任何制剂还可选地包含一种或多种降粘剂。降粘剂可以包括:甘油、乙二醇、丙二醇和低分子量的聚乙二醇或聚丙二醇。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种增溶剂。增溶剂可以包括:对甲苯磺酸钠和二甲苯磺酸钠。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种消泡剂。消泡剂可用于防止或减少在配制过程中或稀释时可能产生的泡沫。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的消泡剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。消泡剂可包括:20聚乙二醇8000、聚甲基硅氧烷、二甲基硅油辛醇和硅油以及乳液。
本文所述的任何制剂还可选地包括一种或多种稳定剂(稳定剂)。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的稳定剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。稳定剂包括:黄原胶、琼脂、海藻酸、海藻酸盐、乳糖酸钙、卡拉胶、结冷胶、瓜尔胶、二异丙醇胺、羟基亚乙基二膦酸、硝酸银。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种防腐剂。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的可用的防腐剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。防腐剂可以包括弱酸防腐剂,例如山梨酸、乳酸、苯甲酸、丙酸、柠檬酸、乙酸或其碱金属盐或碱土金属盐;无机酸如盐酸;咪唑,例如抑霉唑。更一般地,“防腐剂组分”如果包括在组合物中,则是可以用于增加制剂的田间或货架寿命的任何分子。
防腐剂组分可以以足以增加货架寿命的任何浓度包含在制剂中。通常,货架寿命是指特定制剂可保持在可销售条件下的时间量。
本领域普通技术人员将能够确定防腐剂组分的适当浓度,例如通过产生具有不同量的防腐剂组分的测试制剂,并测量制剂的货架寿命或田间寿命而期望的浓度。组合物中防腐剂组分的示例性浓度包括0.001%至10.5%、0.01%至10%、0.02%至9%、0.05%至8%、0.07%至7%、0.10%至6%和0.15%至5%。如果防腐剂组分包含在组合物中,则其还可增加制剂在储存、运输、展示销售和处理期间的保质期,所述保质期可在最终用户使用产品之前发生,用于本文对本文档中详述的组合物所概述的用途。
在另外的实例中,抗氧化剂可以包括在本文提供的组合物和制剂中。抗氧化剂可用于保护某些活性成分免于由于与氧接触而降解。示例性的抗氧化剂包括EDTA、谷胱甘肽、α-生育酚、生育酚、维生素E乙酸酯、维生素E棕榈酸酯、甘氨酸锌、抗坏血酸及其钙、钠和钾的盐、抗坏血酸棕榈酸酯、柠檬酸钙、BHA、BHT、愈创木脂提取物、没食子酸和没食子酸的甲酯、乙酯、丙酯、十二烷基酯、磷脂酰胆碱、丙酸、蔗糖、环糊精、迷迭香和盐酸半胱氨酸。另外的抗氧化剂包括氨基酸(例如甘氨酸、组氨酸、酪氨酸、色氨酸)及其衍生物、咪唑(例如尿刊酸)及其衍生物、维生素C及其衍生物(例如棕榈酸抗坏血酸酯和四异棕榈酸抗坏血酸酯、磷酸抗坏血酸镁、磷酸抗坏血酸酯、乙酸抗坏血酸酯)、生育酚及其衍生物(例如维生素E-乙酸酯)、维生素E、维生素A及其衍生物(维生素-A、棕榈酸酯和乙酸酯)的混合物,以及松柏苯甲酸酯、芸香酸及其衍生物、α-糖基芸香苷、阿魏酸、糠基葡萄糖醇、肌肽、15丁基羟基甲苯、丁基羟基茴香醚和三羟基丁酰苯。在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,抗氧化剂可以以0.01至1.0%的浓度被包括。组合物或制剂可以包括两种或更多种不同抗氧化剂的组合。
本文所述的任何制剂也可可选地包括影响或调节pH的一种或多种化合物,例如缓冲剂、酸化剂、碱化剂等。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的pH调节化合物,其可用于本公开的一个实施方式中或与本公开的任何提及的实施方式组合。pH调节剂的实例包括:乙醇胺、磷酸、三乙醇胺、乙酸、二乙胺、单乙胺和单异丙胺。
本文所述的任何制剂可选地包括一种或多种掩蔽剂或螯合剂,例如以便调节悬浮在制剂中的金属的量。术语“掩蔽剂(sequestrant)”是指能够通过螯合作用除去另一种物质或使另一种物质失活的化合物。螯合剂(chelant)(或螯合试剂)因此是比掩蔽剂更通用的术语。掩蔽剂的实例包括用于络合金属离子的那些(例如EDTA或葡萄糖酸盐)。另一方面,螯合剂可以更广泛地使用,例如通过比色测定金属离子浓度(例如新亚铜氨酸)或形成本身非常重要/有用的化合物(例如叶绿素、酞菁铜)。因此,如果存在掩蔽剂,则可以预期掩蔽剂将络合几种离子,而螯合剂的某些应用可能涉及仅与一种类型的离子有意螯合。
本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的螯合剂和掩蔽剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。螯合剂的实例包括多磷酸钠、聚丙烯酸钠、木质素磺酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、葡糖酸钠/葡庚糖酸钠、EDTA、二钠盐和二铵盐。
例如,公认的是井水通常具有高浓度的Ca++离子。这会导致在农用化学品制剂的制备或稀释过程中形成凝胶、沉淀或固体。例如在水特别硬的地方或地区,使用软化水(例如可以由管线内(in-line)水软化剂提供)或加入螯合Ca++离子的螯合剂都是有用的。可选地,这样的螯合剂(一种或多种)可以是桶混试剂,例如被配制以考虑区域特异性水硬度的试剂。
本领域公认的是,水硬度是水中存在的盐的量的量度,并且通常以每升水中溶解的碳酸钙和碳酸镁的毫克数表示。水硬度在农业场所和地区之间变化很大,并且本领域普通技术人员认识到水硬度影响溶液(包括农业中使用的溶液)的生物物理性质(例如比重、蒸发速率)和化学性质(例如pH、离子强度)。例如,在包含MITC或产生MITC作为降解物的化合物(或其功能等效物,如替代性Foc TR4熏蒸剂)的溶液中,水硬度可改变沉淀速率和pH,并影响杀虫剂的溶解度,以及改变溶液的可喷涂性。本领域普通技术人员还认识到,由于水硬度引起的溶液的生物物理和化学性质的变化影响了普通杀虫剂的效力。例如,本领域普通技术人员认识到降低水硬度可以降低草甘膦的植物毒性。水硬度通常通过无数方式解决,包括但不限于在水管线中使用软水剂(例如,用钠代替钙)或在保持桶中添加螯合剂(例如,EDTA、柠檬酸)。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种聚合物。例如,聚合物可以包括:半合成聚合物物质,例如磺基聚合物、二乙基氨基乙基(DEAE)纤维素、硝化纤维素、羧甲基纤维素、季胺取代的纤维素和膦酸和磺酸衍生的纤维素。这样的聚合物可以由普通的和廉价的大规模材料制备,包括:纤维素、葡聚糖、乙二醇、聚乙烯亚胺、乙烯基化合物、乙酸酯、酰胺等。
本文描述的任何制剂也可可选地包括一种或多种增味剂,例如为了掩蔽制剂中其它组分的香味或提供香味标识或标记。本领域普通技术人员将认识到,存在无数可用的农业上可接受的增味剂,其可用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。例如,在美国专利公开2009/0163449中可以找到增味剂的非穷举列表。
本文描述的任何制剂还可以可选地包括一种或多种着色剂,例如以便提供产品识别和防伪,并且为了健康和安全原因识别特定产品。着色剂也可用于显示在何处施用了否则将基本上透明的制剂,例如以确保完全覆盖且重复覆盖最少。本领域普通技术人员将认识到,存在几种农业上可接受的着色剂,其可以用于本公开的一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合。代表性的着色剂实例包括FD&C蓝1号、FD&C红40号,以及可从PylamDyes(坦佩,亚利桑那州),Vipul Organics Ltd(孟买,印度)和其它商业生产者获得的专有着色剂。
(VII)制备制剂的方法
本文所指的制剂,包括浓缩制剂,通常可以以常规方式制备。本文提供了制备制剂,包括浓缩制剂的代表性方法。在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,所需制剂的成分可以简单地混合在一起——通常全部同时,可选地使用中等至高剪切混合。
在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,以基本上纯的形式施用MITC或产生MITC的化合物,或可选地用水混合或稀释至所需的施用浓度。
在一个实施方式中或与任何提及的实施方式的组合中,当产生MITC的化合物以固体、颗粒或粉末形式施用时,其可直接施用或与一种或多种其它固体/颗粒/粉末成分混合施用。这种混合可以使用常规的和本领域公认的方法进行。
(VIII)制剂的用途
本文提供的制剂和方法可用于处理香蕉和/或芭蕉田,以降低活真菌繁殖体,例如活镰刀菌属细胞(包括孢子),如Foc TR4的水平。该制剂和方法能够用包含异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物或其功能等效物,例如替代性Foc TR4熏蒸剂的组合物处理土壤。组合物或化合物可以包括威百亩钠、威百亩钾、威百亩铵、棉隆或产生MITC作为降解物的其它化合物或其功能等效物中的至少一种,例如替代性FocTR4熏蒸剂。该组合物或化合物可以在土表下0-60cm之间的至少两个深度处施用于土壤。在施用期间,至少一个深度为土表下至少40cm,第二深度为表面下0-40cm。
可以将组合物加入溶液中,其中溶液的液体部分是水,并且溶液的浓度理想地是至少100,或至少150,或至少200,或至少250或至少300,或至少350,或至少400,或至少450,或至少500克二硫代氨基甲酸酯等效物/升溶液。上限量不受限制,除非是实际避免浪费活性化合物的量。理想地,上限量是至多1300,或至多1100,或至多1000,或至多900,或至多850,或至多800,或至多750,或至多700,或至多650,或至多600,或至多550,或至多500,或至多450,或至多400克的二硫代氨基甲酸酯等效物/升溶液。甲基二硫代氨基甲酸酯等效物可以是威百亩钠、威百亩钾、威百亩铵、棉隆或产生MITC作为降解物的其它化合物或其功能等效物中的至少一种,例如替代性Foc TR4熏蒸剂。组合物还可以包含表面活性剂、铺展剂、润湿剂、乳化剂、增稠剂、粘着剂、渗透剂、湿润剂、分散剂、消泡剂、相容剂、微量营养素、防腐剂、溶剂、着色剂、香料或其两种或更多种的组合。该组合物还可以包括N-辛基吡咯烷酮(NOP)、Xiameter、Soprophor、甲酸乙酯或其两种或更多种
在任何上述浓度下,组合物在土壤中的施用比例可以是500-5,000升/公顷,或浓度为至少200-1000克,或300-700克二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升溶液。土壤的湿度影响某些组合物向MITC的转化,这是由水浓度依赖性水解反应驱动的。因此,土壤的持水量对施用过程有影响。在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合施用组合物之前,土壤具有40至80%的持水量,尽管更高和更低的水分水平也是适用的。可选地,例如如果需要较高的水分含量,则可在施用之前润湿土壤。
在土壤制备后将组合物施用于土壤。在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,在施用之前制备土壤包括翻耕或以其他方式物理地翻搅土壤,以破碎土表下0至80cm深或0至60cm深的土壤结构。这可以通过挖掘、搅拌、翻转、铲挖、采摘、田野作业、锄地、耙地、旋耕、犁地、碾压、耙地、中耕或其任意组合来实现。然后必须平整破碎的土壤,这可以手动地或通过具有相应设备的机器完成平整。可以用锄或用役用动物和设备如犁和杆或铲运机在较小地块上进行手动平整。诸如拖拉机的机械可以与平土铲、液压操作的轧平机或铲斗结合使用。
组合物向土壤的施用可以通过使用由拖拉机或其它机动机器牵引的犁柱/凿刀的注射施用来进行。注射施用可以使用由拖拉机或其它机动机器牵引的鹅脚铲进行。注射后,土壤可以保持完整,或者可以将其混合以分布组合物。混合可以使用旋转刀片完成,以掺入/分布组合物通过土壤柱。如果掺合土壤,这可以在将组合物施用于土壤后立即发生,或在将组合物施用于土壤后最多3小时发生。
也可在施用后密封土壤。密封可包括用不可渗透的或半渗透的覆盖物/油布覆盖土壤,机械压实土壤(例如,用打床机(bed shaper)、压辊、压轮、线圈封隔器(coilpacker)、环封隔器(ring packer)或类似装置),用一层未处理的土壤(例如,7-15cm的未处理的土壤)覆盖经处理的土壤,和/或灌溉土壤(例如,在处理开始后立即开始用最少0.5cm的水灌溉)。这可以在处理土壤后立即发生,或在处理土壤后一分钟至60分钟之间发生。如果使用覆盖物(例如油布)来密封经处理的土壤,则该覆盖物将在原位保持至少12小时、至少24小时、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天或多于5天的时间。这种覆盖物的移除包括完全移除以及部分移除或穿孔,例如为了穿过覆盖物种植而进行的穿孔。
在一个实施方式中,或与任何提及的实施方式组合,在施用后,组合物和/或其降解物以至少0.5g/m2、或至少1g/m2、或至少3g/m2、或至少10g/m2的量分布在土壤深度中,在每种情况下,克/平方米的经处理的土壤,在土表下60cm至20cm之间的任何深度处使用均匀分布在区域上的六个采样点的平均值测量。对上限量没有特别限制,但足以有效地以100g/m2或更低、或153g/m2或更低、或250g/m2或更低的浓度处理Foc TR4,在每种情况下为克/平方米经处理的土壤,在40cm深度处使用均匀分布在该区域上的六个取样点的平均值测量。最终浓度可基于湿度、土壤类型和温度在该范围内变化。例如,最终浓度可以是大约0.5g/m2至500g/m2、1g/m2至500g/m2、2g/m2至500g/m2、5g/m2至500g/m2、7g/m2至500g/m2、0.5g/m2至200g/m2、1g/m2至200g/m2、2g/m2至200g/m2、5g/m2至200g/m2、7g/m2至200g/m2、0.5g/m2至153g/m2、1g/m2至153g/m2、2g/m2至153g/m2、5g/m2至153g/m2、7g/m2至153g/m2、0.5g/m2至100g/m2、1g/m2至100g/m2、2g/m2至100g/m2、5g/m2至100g/m2、7g/m2至100g/m2。
在一个实施方式中,或与任何提及的实施方式组合,在施用后,组合物和/或其降解物以至少0.5g/m2、或至少1g/m2、或至少3g/m2、或至少10g/m2的量分布在土壤深度中,在每种情况下为克/平方米的经处理的土壤,在表面以下70cm至20cm之间的任何深度处使用均匀分布在区域上的六个采样点的平均值测量,其中六个采样点中的至少一个在60cm处取得,并且至少一个在30cm处取得。对上限量没有特别限制,但足以有效地以100g/m2或更低、或153g/m2或更低、或250g/m2或更低的浓度处理Foc TR4,在每种情况下为克/平方米经处理的土壤,在50cm、或40cm、或30cm深度处测量,或在60-20cm的两个或更多个深度的组合处测量,使用平均六个在区域均匀分布的取样点。最终浓度可基于湿度、土壤类型和温度在该范围内变化。
将所述组合物施用于土壤减少了活的镰刀菌属繁殖体,例如特别地Foc TR4繁殖体技术。土壤中Foc TR4繁殖体计数的减少通常大于5%,并且在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,其至少大于:10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%或更多,当与处理前土壤中的Foc TR4繁殖体计数相比时。与处理前的土壤相比,土壤Foc TR4繁殖体计数的减少可大于75%。
在用所述组合物处理土壤之后,将一种或多种香蕉植物或其它香蕉植物种植在经处理的土壤中。按照以下种植计划中的至少一种将植物种植在土壤中:治疗后三天、治疗后五天、治疗后七天、治疗后10天、治疗后12天、治疗后14天或治疗后14天以上。
更一般地,用于土壤熏蒸剂施用、安全和管理的方法和技术是本领域已知的。例如,参见全国州农业部联合会研究基金2012年出版的NASDARF土壤熏蒸手册(可在线获得,s3.amazonaws.com/nasda2/media/Pages/Fumigation_lo.pdf?mtime=20171025135626)。
稀释浓缩制剂的方法
本发明提供了浓缩物形式的制剂,即含有活性成分(MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物,如另一FocTR4熏蒸剂)的制剂,其含量高于该成分的施用水平,该浓缩物在施用或使用前被稀释。浓缩物被认为是有益的,例如因为它们可以更有效地储存(因为它们比稀释的制剂占据更少的体积),它们在各种情况下对于长期储存或运输更稳定,等等。然而,为了避免浪费,为了避免可能由使用比推荐水平高的活性成分或其它组分导致的毒性,避免由失衡的制剂组分引起的植物毒性其它不利的生物效用,以及避免环境污染和/或使用者健康影响,浓缩制剂在使用前被稀释是重要的。本领域认识到用于稀释浓缩制剂的方法;以下讨论仅用于指导而不是限制。
可以通过将所需量的浓缩制剂(一般地,储备溶液)加入到一定量的稀释剂/溶剂(例如,水)中来稀释浓缩制剂。所得溶液含有最初从浓缩制剂(储备溶液)中获得但分散在更大体积中的各组分的量。因此,溶剂的最终浓度较低;最终溶液(例如,施用态制剂)较不浓且较稀。
有许多表达浓缩物和稀释液的方法。以下描述了表达浓缩物和稀释液的示例性方法,但并不意在穷举。
使用C1V1=C2V2:为了从储备溶液制备固定量的稀溶液,可以使用下式:
C1V1=C2V2
其中:
V1=制备新溶液所需的储备溶液体积
C1=储备溶液的浓度
V2=新溶液的最终体积
C2=新溶液的最终浓度
使用稀释因子:为了制备稀释溶液而不计算浓度,可以使用上述公式的推导(也可以以质量使用):
(最终体积/浓缩物体积)=稀释因子。
稀释因子(DF)可以单独使用或作为分数的分母使用,例如,DF为10表示1∶10稀释,或1份浓缩物+9份稀释剂,总共10份。这不同于“稀释比”,稀释比通常是指溶质的份数与溶剂的份数的比率,例如,使用先前实例的1∶9。稀释因子与稀释比有关,因为DF等于溶剂的份数+1份。
梯级稀释:如果稀释因子大于所需的最终体积,或者浓缩物储备的量太小而不能容易地测量和分布,则可能需要一个或多个中间稀释。可以使用公式最终DF=DF1*DF2*DF3等,直到产物达到适当的最终稀释度。
可以制备各种粘度的浓缩物,从不可流动的粘性浓缩物到较低粘度的可流动浓缩物。此外,可以通过任何上述或其它已知的方法制备这种浓缩物的稀释液,通常通过测量和分布所需量的浓缩物到混合容器或容器中,所述混合容器或容器包含或然后向其中加入所需的稀释剂(例如水)。例如,通过将浓缩物的一部分舀入测量器皿中直到期望量的浓缩物已经被存入到测量器皿中,并且经由舀或抹刀状器具将测量的浓厚冰从测量容器清空到混合器皿或容器中,可以测量更粘的浓缩物。或者,通过将所需量的浓缩物挤压或切割到混合器皿或容器中,所需量的浓缩物可直接存入到混合器皿中。粘度较小的可流动浓缩物可以通过简单地将测量的所需量的浓缩物倾倒或以其它方式存入到混合器皿或容器中来测量。然后可以加入水或其它稀释剂/溶剂,直到达到所需的稀释浓度(例如,施用态浓度)。可选地,浓缩物/溶剂混合物可以例如被搅拌和/或加热以帮助溶解浓缩物,其中对于更粘稠的浓缩物可能需要更多的搅拌或加热。在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,所需的唯一搅拌是通过在将稀释制剂运输至施用部位时推撞容纳稀释制剂的桶或容器来提供的。
还考虑了其中以预先测定量提供浓缩制剂的实施方式,例如以适合于在设定的最终体积中稀释至所需(例如施用态)浓度的量提供。例如,旨在以1∶1000稀释在水中的浓缩制剂可以作为1加仑、预先测量的容器提供,其与水混合到1000加仑容器中。
此外,在所有稀释实施方式中,应理解所用稀释剂的量可以减少待加入最终施用态制剂中的其它混合组分(例如佐剂,例如桶混佐剂)的体积。提供在最终的施用态(稀释)制剂中包含这样的桶混佐剂是在普通技术的范围内的。
土壤制备
为了提供最佳和最有效水平的抗真菌活性,在施用活性化合物之前,土壤被翻耕或以其它方式物理翻搅以破坏0至80cm深,或0至60cm深的土壤结构(例如,消除压实)。旋耕在破碎土壤结构方面是有效的,但是土壤可以通过各种方法来耕种,包括但不限于挖掘、搅拌、翻转、铲挖、采摘、田野作业、锄地、耙地、旋耕、犁地、碾压、耙地、耕作、深松耕、松土或其任何组合。用于破碎压实的底土层的技术在本领域中是已知的;例如,参见“使用深松耕以减少土壤压实”,2008USDA出版0834-2828-MTDC(可在线获得,fs.fed.us/t-d/pubs/pdfpubs/pdf08342828/pdf08342828dpi72.pdf)。
在操作翻耕机或耕作机时,犁柱(shank)倾向于直接在犁柱后面留下犁沟,在其相对侧上具有犁垄。在许多情况下,这些犁沟形成了水的径流通道,并可导致土壤侵蚀严重增加和MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性FocTR4熏蒸剂)的分布不充分。另外,犁沟和犁垄不仅由于引起拖拉机或翻耕机的弹跳,而且由于难以将靴部(shoe)保持在均匀的深度而使得施用极其困难。这样,土壤在施用前被有利地平整和均匀,使得机器和拖拉机可以在将进行制剂注射的所有土壤中以匹配的速度前进。土壤平整可以手动进行或通过具有相应设备的机械进行。可以用锄或用役用动物和设备如犁和杆或铲运机在较小地块上进行手动平整。诸如拖拉机的机械可以与平土铲、液压操作的轧平机或铲斗结合使用。
土壤湿度影响某些活性成分(如威百亩钠)降解为MITC的转化,土壤湿度最好在50%和60%持水量之间。在施用活性制剂之前,可以测量土壤湿度,并且如果需要,可以加入额外的水以达到土壤的50%至60%持水量。可以通过多种灌溉方法将水加入土壤。地表灌溉可用于在地表水平上加水并渗入土壤。微灌也可用于在低压下通过管道网络分布水,并在整个田地中少量地施用。通过微灌的分布可通过使用单独的发射器、地下滴灌、微型喷雾器、微型喷洒器和小型起泡器灌溉来进行。滴灌可以用于在特定位置输送水,并且在特定位置点处理水以达到期望的湿度。喷灌可以用于处理田地的大部分。喷灌包括将水输送到田地中的一个或多个中心位置并通过高架高压喷水器或枪进行分布。喷灌也可利用中心枢轴,其中喷洒器以圆形图案移动,并且从中心处的枢轴点供水,并且向外成弧形。
土壤的制备进一步包括确保土壤的温度处于或高于10℃,特别是在活性成分是产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)的那些实施方式中。温度可能对完整性以及化合物降解以产生MITC的速度有影响。
在施用MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)之前,可选地分析土壤中FocTR4的存在。分析可选地包括在土壤田地中以设定的间隔和在特定深度(例如20cm、40cm、60cm)获得样品,然后测试在设定的土壤量中活的Foc TR4繁殖体的存在和/或定量。
施用于土壤
通过机器将MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)施用于土壤。用于将制剂注射到土壤中(或在一些情况下,注射到土壤上)的机器包括可以达到至少60cm深的犁柱。该机器与拖拉机结合使用,拖拉机通常具有至少150马力,以便在施用期间容易地驱动注射靴通过土壤。
将MITC或产生降解MITC的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性FocTR4熏蒸剂)施用于田地,将机器置于施用起点,和犁柱。将机器的犁柱降低,拖拉机向前移动,将犁柱沉入地面,达到适当的深度。然后机器将制剂注射到土壤中,并继续进行,直到拖拉机到达田地的界限,然后停止注射。然后拖拉机与机器一起转向并重复该过程,直到完成整个农田。整个过程可以再次重复,以在第二个深度施用制剂。
更一般地,将认识到土壤熏蒸剂可使用可在本公开中使用的几种方法施用,只要最终结果是将MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)施用于(1)土表下至少40cm,(2)土表下0cm至60cm之间的两个深度处(其中至少一个深度为至少40cm),或(3)混合或掺合用MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)处理的土壤,使得土表下至少60cm含有足够的活性剂以减少土壤柱中Foc TR4活种群。
棉隆以土壤结合的颗粒制剂施用。其它熏蒸剂是具有高蒸气压的液体,因此它们通常作为液体(在压力下)储存和施用,其在注射到土壤中后不久开始蒸发。
一些土壤熏蒸剂可以通过化学灌溉施用。威百亩钠、1,3-二氯丙烯和威百亩钾可以计量加入灌溉系统中并通过滴灌带或喷洒器施用。然而,应注意,如此处理的土壤然后将有利地耕作或以其它方式混合,以确保活性成分分布在土表下至少60cm处。
被熏蒸的田地的部分是不同的。在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,整个田地被处理。这被称为“平烟(flat fume)”、“广播(broadcast)”或“广亩(broadacre)”。熏蒸剂使用颗粒撒布机(棉隆)施用,或者如本文所述犁柱插或刀切入到土壤中,然后例如使用压辊进行土壤掺入或表面压实。可选地,在施用熏蒸剂之后,可将经处理的土壤用油布覆盖或以其它方式密封一段时间,例如在处理之后至少24小时、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天或多于五天。
在形成种植床时也可以发生熏蒸。压床形成一个凸起的床,熏蒸剂在形成床时被注射床中。整个床或仅床的一部分被熏蒸。这被称为“条”处理。可替代地,整个田地被熏蒸并被用油布覆盖。然后将油布移除,形成凸起的床,然后将这些床用油布覆盖。
对于所有的施用方法,土壤的条件(例如,土壤质地、湿度、温度)对于从熏蒸获得期望的结果是关键的。
通常在熏蒸完成之后,熏蒸区域被用油布覆盖或被水封以减少来自田地的散发。存在一系列用于减少熏蒸剂从土壤施用中散发的油布。种植前土壤施用可以使用低密度聚乙烯(LDPE)或高密度聚乙烯(HDPE)油布以减少散发。
另一种减少威百亩钠、威百亩钾和棉隆的散发的方法是使用水封。该方法包括在熏蒸后施加额外的水。根据施加额外灌溉水的量和频率,这些密封被称为标准的或间歇的。
一旦制备了适当浓度的包含MITC或产生MITC作为降解物的化合物(例如威百亩钠)的制剂(即用(RTU)或“施用态”组合物),该制剂就可以沉积在种植和生长植物或作物的土壤上或土壤中。
在一个实施方式中或与任何提及的实施方式组合,使用广播喷雾或散布或定向施用来分布或施用含有MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)的制剂。广播散布通常在产品需要分布在更大的区域上时使用,例如跨使得产品能够跨田地散布的田地。广播散布可以采取各种形式,例如通过手持式喷雾器、拖拉机(具有适当的防护装置)或其它装置。相反,当希望将产品施用于田地或作物的特定区域时,通常使用定向施用。定向施用可以通过拖拉机或其它喷施装置施加。在包含MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代型Foc TR4熏蒸剂)的制剂的表面分布的情况下,随后在施用后立即或基本上立即将制剂混入土壤中至至少60cm的深度,并如本文所述密封土表以保持MITC与土壤接触。
例如,可将含有MITC或产生MITC作为降解物的化合物(如威百亩钠)或其功能等效物(如替代性Foc TR4熏蒸剂)的制剂置于桶或其它容器中。然后可以密封该桶并可选地加压,在该点可以将该桶连接到任何所需的分布装置(例如喷雾器、拖拉机或专用注射机)并根据需要施用到土壤。有利地,该产品可以在种植田地之前通过注射施用到土壤下。
通过非限制性实例,以下提供了用于实施向土壤施用威百亩钠以减少或控制随后种植在经处理的土壤中的芭蕉属植物中的Foc TR4传递的实施方式的系统:
1)土壤制备:
-使用旋耕机以至少破碎0cm至80cm深的土壤结构,以允许通过机器进行平稳且均匀的注射。
-土壤应当被平整、均匀,使得机器和拖拉机能够在将发生威百亩钠注射的所有土壤中以类似的速度前进。
-土壤应该是潮湿的,至少在50-60%田间持水量之间,以确保产品对真菌的最佳功效
2)机器运输:机器在施用前应当就位
3)威百亩运输:产品在施用前应当就位
4)个人防护设备(PPE):
a.为将从事产品注射的工作人员提供的适当PPE,包括:胶靴、橡胶手套、带过滤器的口罩、连体工作服
5)推荐在注射威百亩钠之前和之后进行土壤分析,以确定Foc TR4的存在
6)待种植在处理后的田地的植株推荐是经鉴定不含Foc TR4的,如体外生产的植物,以避免任何植株已经被污染
7)需要有至少150HP的拖拉机,拖拉机可以是任何品牌
8)将土壤注射机(其能够将抗真菌组合物递送至土壤下方至土表下0cm至60cm或更深的深度)连接至拖拉机
9)配置计算机,其为期望的产品施用规格(速率、深度等)编程注射机
10)工人穿戴PPE
11)产品被装入到机器中
12)一旦产品被装载,拖拉机和机器被移动到待用威百亩钠处理的田地
13)一旦进入田地,在产品已装载的情况下:
a.降低犁柱
b.拖拉机向前移动,使得犁柱进入地面至预定深度
c.开始将威百亩钠注射到土壤中
d.当拖拉机到达田地边界必须转向时,关闭威百亩钠注射
e.拖拉机与机器转向
f.重复上述过程,直至施用完毕
g.可选地,可以对整个田地立即重复施用,例如在第二深度处
h.可选地,在产品注射或施用后,土壤被翻耕,以便更彻底地分布产品通过和/或更深地分布产品进入到土壤柱中
i.在用威百亩钠产品处理之后,土壤被压实或以其他方式密封(例如,用油布或其他封壳覆盖)
14)当完成威百亩o钠注射时,任何剩余的威百亩钠溶液按照标准和安全程序从机器卸载
15)除去威百亩钠后,使用标准程序洗涤机器
16)工人可在清洗机器后移除PPE
(IX)循环处理和种植以提高生产率的方法
本文还提供了在已知或认为被尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(FocTR4)感染的田地中栽培芭蕉属植株的方法,所述方法包括处理和种植循环的至少两次重复,所述循环包括:在田地土表下至少40cm处引入抑制Foc TR4有效量的组合物,所述组合物包含异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物(或其功能等效物,例如替代性Foc TR4熏蒸剂),使MITC减少土壤中的活Foc TR4繁殖体计数,以产生经处理的土壤;将芭蕉属植株种植到经处理的土壤中;芭蕉属植物生长多年;在多年中的每一年从芭蕉属植株中的至少一个植株收获果实;以及从田地移除芭蕉属植株。例如,在这些方法的实例中,在处理和种植周期的至少一个重复中的多年包括2年、3年、4年、5年、6年、7年、8年、9年、10年、或11-15年。
可选地,在这些方法的实例中,将组合物引入至田地中土表下至少40cm处包括将组合物施用于土壤:在土表下0cm至60cm之间的两个深度处,其中第一深度为土表下至少40cm,并且第二深度为土表下0至小于40cm;或以产生经处理的土壤;和混合/掺合经处理的土壤至至少60cm的深度;或土表下0厘米至60cm之间的两个深度处,其中第一深度为土表下至少40cm,并且第二深度为土表下0至小于40cm;和掺合土壤,使得组合物和/或由其衍生的降解物分布在土壤中至大于40cm的深度。
包括以下另外的公开和实施方式以说明本公开的具体实施方式。本领域普通技术人员应当认识到,根据本公开,在不背离本公开的精神和范围的情况下,可以对本文公开的具体实施方式进行许多改变,并且仍然获得相同或类似的结果。
(X)另外的公开
一个提供的实施例为一种减少芭蕉田地土壤中尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(Foc TR4)(又名,香蕉枯萎病菌)繁殖体的方法,包括施用包括异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物(或其功能等效物或替代物),其中与处理前土壤中的FocTR4繁殖体计数相比,施用该组合物使土壤中的Foc TR4繁殖体计数减少至少15%。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,与处理前土壤中的Foc TR4繁殖体计数相比,Foc TR4繁殖体计数减少:超过20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%或超过75%。例如,Foc TR4繁殖体包括能够在芭蕉属植物中产生感染的孢子、菌丝或菌丝片段中的一种或多种。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,在施用组合物后,在芭蕉田地中种植至少一颗芭蕉属树。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,组合物包括:威百亩钠(如N-甲基二硫代氨基甲酸钠;或甲基二硫代氨基甲酸钠盐)、威百亩钾(如N-甲基二硫代氨基甲酸钾;或甲基二硫代氨基甲酸钾盐)、威百亩铵或棉隆。
在任何方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,组合物还可以包括表面活性剂、铺展剂、润湿剂、乳化剂、增稠剂、粘着剂、渗透剂、湿润剂、分散剂、消泡剂、相容剂、微量营养素、防腐剂、溶剂、着色剂、香料或其两种或更多种的组合。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,组合物包括N-辛基吡咯烷酮(NOP)、Xiameter、Soprophor、甲酸乙酯或其两种或更多种。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,当施用于土壤时,组合物形成异硫氰酸甲酯(MITC)。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,该组合物包括:300-700克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;或400-600克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;或425-575克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;或450-550克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;或475-525克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;500-525克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;或505-515克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,土壤具有持水量,并且在处理时,含有以下水平的水:土壤持水量的40%-80%;土壤持水量的45%-75%;土壤持水量的50%-70%;或土壤持水量的55%-65%。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,将组合物以以下比率施用于土壤:500-5,000升/公顷;550-4,500升/公顷;600-4,000升/公顷;650-4,000升/公顷;700-5,000升/公顷;或750-3,000升/公顷。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,土壤在田地中。
还提供了方法实施例,包括与任何提及的实施例组合,进一步包括在施用该组合物后在经处理的土壤中种植至少一种芭蕉属树。例如,在经处理的土壤中种植至少一棵芭蕉属树:在处理后至少3天;在处理后至少5天;在处理后至少7天;在处理后至少10天;在处理后至少12天;在处理后至少14天;或处理后超过14天。在该方法实施例的一个实例中,或与任何提及的实施例组合,芭蕉属树是小果野蕉香蕉植物(Musa acuminata bananaplant)或大蕉植物(plantain plant)。例如,小果野蕉香蕉植物可选地是卡文迪什三倍体(AAA)栽培品种的香蕉植物。类似地,大蕉植物可选地是车前草三倍体(AAB)小果野蕉和野蕉(Musa balbisiana)杂交植物。
在一个方法实施例中,或与任何提及的实施例组合,将组合物施用到土壤中包括以下一种或多种:使用由拖拉机或其它机动机器牵引的犁柱(shank)/凿刀进行注射施用;使用由拖拉机或其它机动机器牵引的鹅脚铲进行注射施用;混合至少一些土壤以分布组合物或其降解物;翻耕土壤;或盘铲(disking)土壤。
具体实施例
实施例1。一种减少芭蕉田地土壤中尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(FocTR4)(又名,香蕉枯萎病菌)繁殖体的方法,所述方法包括施用包含异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物(或其功能等效物或替代物),其中与处理前土壤中的FocTR4繁殖体计数相比,施用所述组合物使土壤中的Foc TR4繁殖体计数减少至少15%。
实施例2。根据实施例1所述的方法,其中与处理前土壤中的FocTR4繁殖体计数相比,Foc TR4繁殖体计数减少:超过20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%或超过75%。
实施例3。根据实施例1或实施例2中任一项所述的方法,其中,Foc TR4繁殖体包括能够在芭蕉属植物中产生感染的孢子、菌丝或菌丝片段中的一种或多种。
实施例4。根据实施例1-3中任一项所述的方法,其中,在施用组合物后,在芭蕉田地中种植至少一颗芭蕉属树。
实施例5。根据实施例1-4中任一项所述的方法,其中,组合物包含:威百亩钠、威百亩钾、威百亩铵或棉隆。
实施例6。根据实施例4所述的方法,其中,威百亩钠包括:N-甲基二硫代氨基甲酸钠或甲基二硫代氨基甲酸钠盐。
实施例7。根据实施例4所述的方法,其中,威百亩钾包括:N-甲基二硫代氨基甲酸钾或甲基二硫代氨基甲酸钾盐。
实施例8。根据实施例1-7中任一项所述的方法,其中,组合物还包含表面活性剂、铺展剂、润湿剂、乳化剂、增稠剂、粘着剂、渗透剂、湿润剂、分散剂、消泡剂、相容剂、微量营养素、防腐剂、溶剂、着色剂、香料或其两种或更多种的组合。
实施例9。根据实施例8所述的方法,其中,组合物包含N-辛基吡咯烷酮(NOP)、Xiameter、Soprophor、甲酸乙酯或其两种或更多种。
实施例10。根据实施例1-9中任一项所述的方法,其中,组合物在施用于土壤时形成异硫氰酸甲酯(MITC)。
实施例11。根据实施例1-10中任一项所述的方法,其中,组合物包含:300-700克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;400-600克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;425-575克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;450-550克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;475-525克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;500-525克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物;或505-515克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物。
实施例12。根据实施例1-11中任一项所述的方法,其中,土壤具有持水量,并且在处理时,含有以下水平的水:土壤持水量的40%-80%;土壤持水量的45%-75%;土壤持水量的50%-70%;或土壤持水量的55%-65%。
实施例13。根据实施例1-12中任一项所述的方法,其中,将组合物以以下比率施用于土壤:500-5,000升/公顷;550-4,500升/公顷;600-4,000升/公顷;650-4,000升/公顷;700-5,000升/公顷;或750-3,000升/公顷。
实施例14。根据实施例1-13中任一项所述的方法,其中,土壤在田地中。
实施例15。根据实施例1-15中任一项所述的方法,还包括在施用组合物之后在经处理的土壤中种植至少一种芭蕉属树。
实施例16。根据实施例15所述的方法,其中,在经处理的土壤中种植至少一棵芭蕉属树:在处理后至少3天;在处理后至少5天;在处理后至少7天;在处理后至少10天;在处理后至少12天;在处理后至少14天;或处理后超过14天。
实施例17。根据实施例15或实施例16中任一项所述的方法,其中,芭蕉属树是小果野蕉香蕉植物或大蕉植物。
实施例18。根据实施例17所述的方法,其中,小果野蕉香蕉植物是卡文迪什三倍体(AAA)栽培品种的香蕉植物。
实施例19。根据实施例17所述的方法,其中,大蕉植物是大蕉三倍体(AAB)小果野蕉和野蕉杂交植物。
实施例20。根据实施例1-19中任一项所述的方法,其中,将所组合物施用于土壤包括以下中的一种或多种:
使用由拖拉机或其它机动机器牵引的犁柱/凿刀的注射施用;
使用由拖拉机或其它机动机器牵引的鹅脚铲进行注射施用;
混合至少一些所述土壤以分布所述组合物或其降解物;
翻耕所述土壤;或
盘铲所述土壤。
(XI)实例
实例1。威百亩钠对尖孢镰刀菌古巴专化型的功效。
尖孢镰刀菌古巴专化型(Foc)是巴拿马病的致病因子,对全球香蕉生产造成很大危险。在20世纪中期,大米七香蕉由于Foc 1号生理小种而绝迹。由于由Foc 1号生理小种对大米七香蕉的灭绝,香蕉工业转向卡文迪什香蕉。近年来,Foc热带4号生理小种(TR4)开始感染卡文迪什香蕉,首先在东南亚,然后在蔓延全球。目前,Foc TR4已经被检测到远至巴基斯坦、黎巴嫩和莫桑比克。
Foc TR4的传播主要是由于人类行为,例如被污染的香蕉吸芽、人和设备的移动。一旦进入土壤,Foc TR4厚垣孢子可以存活30年以上。已发现威百亩钠对各种真菌疾病非常有效(McGovern et al.,Plant Disease,82(8):919-923,1998)。在该实例中描述的是威百亩钠在体外对Foc TR4的厚垣孢子的效力的研究。
方法。
从侵染的土壤中提取Foc TR4厚垣孢子,并与连续稀释的威百亩钠在室温下培养5分钟和60分钟。此后,将样品稀释10倍以减少处理并充分稀释厚垣孢子以避免在平板上生长时缺乏分辨率。将100μl等分试样一式两份铺于PDA平板上,并在25℃下培养3天。对平板照相并评分。
结果。
第一次试验。用从1000倍稀释到10×106倍稀释(60分钟)的威百亩钠进行第一次试验。在这些浓度下没有观察到生存力的显着降低(图1)。第二次试验。
由于在第一次试验中缺乏效力,用10倍稀释开始重复实验。1000倍及以上的稀释不影响存活的厚垣孢子的数量,证实了最初的实验。然而,10倍和100被稀释(部分)有效(图2)。
从图2所示的板中,很明显的是,威百亩钠在10倍稀释时是有效的,培养时间为5分钟。稀释100倍时,化合物在5和60分钟时都不太有效。对100倍稀释的菌落计数,总结于图3。延长培养时间在减少存活的厚垣孢子数量方面更有效,以生长菌落测量。
讨论。
在全世界由卡文迪什香蕉主导的生产中出现Foc TR4突出了可降低或减少巴拿马病发病率的产品的紧迫性。
在此,测试了可以施用到或注射到土壤中的化合物威百亩钠作为减少活Foc TR4厚垣孢子数量的处理。这些数据证明,在体外条件下,威百亩钠有效对抗Foc TR4厚垣孢子。化合物的效力取决于高浓度。
这些数据提供了对威百亩钠在减少土壤Foc TR4侵染的综合方法中有效的建议的支持。
实例2。在多个施用深度用威百亩钠处理芭蕉属田地。
香蕉是世界上出口最多的水果,也是最不发达国家产量第五大的水果,是一种有价值的市场商品,也是发展中国家约4亿人的重要主食或收入来源。这种作物受到严重的土壤疾病的威胁,因为它受到尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(Foc TR4)的影响。FocTR4对香蕉植株的感染危害了它们的连续生产和生产力。
目前,没有化学品,有机或无机,被有效地用于对抗Foc TR4。开发将威百亩钠引入到待种植香蕉或大蕉的田地的土壤中以减少对植株的Foc TR4侵染和/或损害的施用方法将是有益的。该实例检查在土表下选定深度处注射威百亩钠的效果,其中用所需量的威百亩钠有效施用以保护根区,从而减轻问题并促进或继续稳定的作物生产。
在这个实例中描述的分析是在春天(从三月开始),在菲律宾的待种植芭蕉属树(特别是香蕉)的田地中进行的。最后的测定在同一年的九月进行。
方法。
威百亩钠施用。将威百亩钠510SL(相当于42%w/w)以下述剂量施用于土壤:0升/公顷(L/ha),750L/ha,1500L/ha,2250L/ha,3000L/ha。
在注射之前,使用旋耕机破坏0cm到80cm深的土壤结构,从而允许通过注射机平滑且均匀地注射施用。然后将土壤平整并使其均匀,并在两个深度处施用威百亩钠:30cm和60cm,使用注射方法。温度为最小10℃,土壤湿度为50-60%持水量,允许所施用的产品从威百亩钠(液体)转化为MITC(气体)。
使用注射机进行施用,其中该机器降低犁柱并开始向前移动,使得犁柱降低至60cm的深度,并且注射器将威百亩钠施用到土壤中。当在60cm处完成注射时,在30cm处对整个田地重复该过程。在每次施用后,使用填塞辊(pack roller)(其是注射机器的一部分,位于机器的后端)密封田地的经处理的土壤。
土壤分析。在施用前,和施用后48小时开始,每24小时获得20、40和60cm的土壤样品,持续七天。
植物病理学分析。用于巴拿马病和线虫分析的土壤样品在培养基中无菌分离,并在室温下培养七天。如下鉴定生物体:用40mL蒸馏水(dH2O)稀释20g复合土壤样品;加入1滴Tween 20去污剂,混合样品。从溶液中取出1mL等分试样并用9mL dH2O稀释;制备另三个连续稀释。从每个稀释中,将100μL涂布在固体Komada生长培养基上(Sun et al.,Phytopathology 68:1672-1673,1978)。接种7天后可以看到生长。
植株选择与移栽。卡文迪什香蕉植株用于该研究。为了避免植株已经被其它土壤污染,使用本领域公认的方法体外生产所有植株。在获得最后土壤读数后14天(处理后21天)将植物移植到田地。
数据收集。在香蕉植株被移植后的三个月开始,以每月为间隔收集数据。总共进行三次数据收集业务。收集包括叶片数目、植株高度和围长尺寸的数据。
结果。
平均叶片数目。威百亩钠施用增加了平均叶片数目。无论施用的剂量如何,使用威百亩钠时,叶片增加约1.5倍(图4)。
香蕉植株的平均高度。威百亩钠对香蕉植株的平均高度有影响。最低剂量(750L/ha)导致中等增长(~5cm),而中等至高剂量(1500-3000L/ha)导致植物高度的更大增长(~20-23cm)(图5)。
香蕉植株的平均围长尺寸。威百亩钠对香蕉植株的平均围长尺寸有影响。最低剂量(750L/ha)对围长尺寸(~1cm)的影响最小,而中等至高剂量(1500-3000L/ha)导致围长尺寸的更大增长(~4-6cm)(图6)。
拔节期植株的百分比。对于威百亩钠处理和达到拔节期的植株,观察到剂量反应效应。在0L/ha下,处理后六个月仅有5%的植株处于拔节期,而在750、1500、2250和3000L/ha下,9%、10%、17%和22%的植株达到拔节期(图7)。
套袋期植株百分比。低剂量的威百亩钠(750L/ha)对植株在处理后六个月达到套袋期没有有意义的影响。然而,在1500-3000L/ha的剂量下,11-19%的植株达到套袋期(图8)。
拔节或套袋期植株物百分比。对于威百亩钠处理和在处理后六个月内达到拔节或套袋期的植株,观察到剂量反应效应。在0L/ha下,仅5%的植株处于拔节期,而在750、1500、2250和3000L/ha下,11%、28%、27%和35%的植株达到拔节或套袋期(图9)。
土壤污染。在施用后任何一天,在任何处理组中都没有检测到Foc TR4(表1)。在平行分析中,在阳性对照样品中检测到Foc TR4。类似地,在任何测试的土壤样品中都没有发现寄生线虫。在下表中,T1-T5表示如下处理:T1——无威百亩钠(MNa);T2——750L/haMNa;T3——1500L/ha MNa;T4——2250L/ha MNa;T5——3000L/ha MNa。
表1:巴拿马病分析。
类似地,在任何测试的土壤样品中都没有发现寄生线虫;参见表2。
表2:线虫种群分析
*A=穿孔线虫;B=根腐线虫;C=根结线虫;D=螺旋线虫;E=纽带线虫;F=其他(非寄生线虫)
(XII)结尾段
如本领域普通技术人员将理解的,本文公开的每个实施方式可以包括、基本上由或由其特定陈述的要素、步骤、成分或组分组成。因此,术语“包括(include)”或“包含(including)”应被解释为叙述:“包含、由或基本上由以下组成”。过渡术语“包含(comprise)”或“含有(comprising)”是指包括但不限于,并且允许包括未指明的元素、步骤、成分或组分,甚至以主要量。过渡短语“由......组成”排除未指定的任何元件、步骤、成分或组件。过渡短语“基本上由......组成”将实施方式的范围限制到指定的元件、步骤、成分或组件以及那些实质上不影响实施方式的元件、步骤、成分或组件。在此上下文中,物质效应是化合物、系统或方法成功减少或控制真菌病原体或支持Musa植物生长和/或由其产生果实的可测量的改变。例如,物质效应可以是任何显著改变制剂或方法在控制或影响Musa属植物中foc TR4感染率方面的有效性的物质。
在描述本发明的上下文中(尤其是在以下权利要求的上下文中)使用的术语“一(a)”、“一个(an)”、“该(the)”和类似指示物应被解释为覆盖单数和复数,除非本文另有指示或与上下文明显矛盾。在此列举的数值范围仅仅是为了用作单独地涉及落入该范围内的每个单独数值的速记方法。除非本文另有说明,否则每个单独的值都并入说明书中,如同其在本文中单独列举一样。除非本文另有说明或与上下文明显矛盾,否则本文所述的所有方法可以任何合适的顺序进行。本文提供的任何和所有实施方式或示例性语言(例如,“例如”)的使用仅旨在更好地说明本发明,而不是对本发明的范围进行限制。说明书中的语言不应被解释为指示对本发明的实践必要的任何未要求保护的元素。
本文公开的本发明的可选元件或实施方式的分组不应被解释为限制。每个组成员可以单独地或与组的其他成员或本文中发现的其他元素任意组合地被引用和要求保护。可以预期,出于方便和/或专利性的原因,组的一个或多个成员可以被包括在组中或从组中删除。当发生任何这样的包括或删除时,认为本说明书包含经修改的组,从而满足所附权利要求中使用的所有马库什组的书面描述。
本文描述了本发明的某些实施方式,包括发明人已知的用于实施本发明的最佳模式。当然,在阅读了前述说明书之后,这些描述的实施方式的变型对于本领域的普通技术人员将变得显而易见。发明人预期本领域技术人员适当地采用这些变化,并且发明人希望本发明以不同于本文具体描述的方式实施。因此,本发明包括适用法律所允许的所附权利要求中所述主题的所有修改和等同物。此外,本发明包括上述元件在其所有可能变化中的任何组合,除非本文另有说明或与上下文明显矛盾。
此外,在本说明书中,已经对专利、印刷出版物、期刊文章和其它书面文本(本文引用的材料)进行了大量参考。对于所引用的教导,每种引用的材料通过引用整体单独地并入本文,达到其不与本文提供的任何具体教导矛盾的程度。
应该理解,这里公开的本发明的实施方式是对本发明原理的说明。可以采用的其它修改也在本发明的范围内。因此,通过举例而非限制的方式,可以根据本文的教导利用本发明的替代配置。因此,本发明并不限于如所精确示出和描述的那样。
这里所示的细节是作为例子,并且仅仅是为了说明性地讨论本发明的优选实施方式,并且是为了提供被认为是最有用和最容易理解本发明的各种实施方式的原理和概念方面的描述而给出的。在这方面,除了基本理解本发明所必需的细节之外,没有试图更详细地示出本发明的结构细节,结合附图和/或实例进行的描述使得本领域技术人员清楚如何在实践中实施本发明的若干形式。
本公开中使用的定义和解释意味着并且旨在控制任何未来的构造,除非在(一个或多个)实施方式中清楚地和明确地修改或者当含义的应用使得任何构造无意义或基本无意义时。在术语的构建使其无意义或基本上无意义的情况下,该定义应取自Webster′sDictionary,第3版或本领域普通技术人员已知的字典,例如Oxford Dictionary ofBiochemistry and Molecular Biology(Ed.Anthony Smith,Oxford University Press,Oxford,2004)。
Claims (20)
1.一种减少芭蕉田地土壤中尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种(Foc TR4)(又名,香蕉枯萎病菌)繁殖体的方法,所述方法包括施用包含异硫氰酸甲酯(MITC)或产生MITC作为降解物的化合物(或其功能等效物或替代物),其中与处理前土壤中的Foc TR4繁殖体计数相比,施用所述组合物使土壤中的Foc TR4繁殖体计数减少至少15%。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,与处理前土壤中的Foc TR4繁殖体计数相比,所述Foc TR4繁殖体计数减少:超过20%。
3.根据权利要求1或权利要求2中任一项所述的方法,其中,所述Foc TR4繁殖体包括能够在芭蕉属植物中产生感染的孢子、菌丝或菌丝片段中的一种或多种。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其中,在施用所述组合物后,在芭蕉田地中种植至少一颗芭蕉属树。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中,所述组合物包含:
威百亩钠、威百亩钾、威百亩铵或棉隆。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述威百亩钠包括:
N-甲基二硫代氨基甲酸钠;或
甲基二硫代氨基甲酸钠盐。
7.根据权利要求5所述的方法,其中,所述威百亩钾包括:
N-甲基二硫代氨基甲酸钾;或
甲基二硫代氨基甲酸钾盐。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法,其中,所述组合物还包含表面活性剂、铺展剂、润湿剂、乳化剂、增稠剂、粘着剂、渗透剂、湿润剂、分散剂、消泡剂、相容剂、微量营养素、防腐剂、溶剂、着色剂、香料或其两种或更多种的组合。
9.根据权利要求8所述的方法,其中,所述组合物包含N-辛基吡咯烷酮(NOP)、Xiameter、Soprophor、甲酸乙酯或其两种或更多种。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其中,所述组合物在施用于所述土壤时形成异硫氰酸甲酯(MITC)。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法,其中,所述组合物包含:300-700克的二硫代氨基甲酸甲酯等效物/升组合物。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法,其中,所述土壤具有持水量,并且在处理时,含有所述土壤的持水量的,40%-80%水平的水。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法,其中,所述组合物以500-5,000升/公顷的比率施用于所述土壤。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法,其中所述土壤在田地中。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法,还包括在施用所述组合物之后在所述经处理的土壤中种植至少一种芭蕉属树。
16.根据权利要求15所述的方法,其中,在所述经处理的土壤中种植至少一种所述芭蕉属树:在所述处理后至少3天。
17.根据权利要求15或权利要求16所述的方法,其中,所述芭蕉属树是小果野蕉香蕉植物或大蕉植物。
18.根据权利要求17所述的方法,其中,所述小果野蕉香蕉植物是卡文迪什三倍体(AAA)栽培品种的香蕉植物。
19.根据权利要求17所述的方法,其中,所述大蕉植物是大蕉三倍体(AAB)小果野蕉和野蕉杂交植物。
20.根据权利要求1-19中任一项所述的方法,其中,将所述组合物施用于所述土壤包括以下中的一种或多种:
使用由拖拉机或其它机动机器牵引的犁柱/凿刀的注射施用;
使用由拖拉机或其它机动机器牵引的鹅脚铲进行注射施用;
混合至少一些所述土壤以分布所述组合物或其降解物;
翻耕所述土壤;或
盘铲所述土壤。
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