CN115287231A - 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用 - Google Patents

多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN115287231A
CN115287231A CN202210954218.5A CN202210954218A CN115287231A CN 115287231 A CN115287231 A CN 115287231A CN 202210954218 A CN202210954218 A CN 202210954218A CN 115287231 A CN115287231 A CN 115287231A
Authority
CN
China
Prior art keywords
zlp
bacillus polymyxa
parts
bacillus
insecticide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210954218.5A
Other languages
English (en)
Inventor
张丽萍
张飞燕
王雅娜
刘洪伟
王江平
刘秋玥
赵雯雅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Biology of Hebei Academy of Sciences
Original Assignee
Institute of Biology of Hebei Academy of Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Biology of Hebei Academy of Sciences filed Critical Institute of Biology of Hebei Academy of Sciences
Priority to CN202210954218.5A priority Critical patent/CN115287231A/zh
Publication of CN115287231A publication Critical patent/CN115287231A/zh
Priority to CN202310964648.XA priority patent/CN117511760B/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/22—Bacillus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P1/00—Disinfectants; Antimicrobial compounds or mixtures thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P21/00—Plant growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P3/00—Fungicides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01P—BIOCIDAL, PEST REPELLANT, PEST ATTRACTANT OR PLANT GROWTH REGULATORY ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR PREPARATIONS
    • A01P7/00—Arthropodicides
    • A01P7/04—Insecticides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C05F11/08—Organic fertilisers containing added bacterial cultures, mycelia or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K17/00—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials
    • C09K17/14—Soil-conditioning materials or soil-stabilising materials containing organic compounds only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2101/00—Agricultural use
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07—Bacillus
    • C12R2001/12—Bacillus polymyxa ; Paenibacillus polymyxa

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)

Abstract

本发明涉及一种多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa）ZLP‑61，保藏编号为CGMCC No.25029，该菌株同时具有防病、杀虫和促进植物生长的功能。本发明同时公开了该菌株在制备生防制剂、生物农药、土壤修复剂或生物肥料中的应用。

Description

多粘芽孢杆菌ZLP-61及其应用
技术领域
本发明涉及一种多粘芽孢杆菌ZLP-61及其应用。
背景技术
植物病虫害给农业生产带来严重的损失，常规化学农药防治不仅杀伤了大量天敌和有益微生物、破坏了生态平衡，还使害虫耐药性急剧上升，对环境和人类健康造成了极大的危害。为此，研究开发安全、高效、环境友好的产品及化肥农药替代技术已成为保障粮食安全、食品安全和环境安全的战略需求。
多粘芽孢杆菌是一类好氧、产芽孢的杆状细菌，该菌具有对人畜无毒无害、环境友好、抗逆性强、繁殖速度快等特点，并能分泌多种活性物质。研究表明该类微生物对立枯丝核菌、灰霉病菌、镰刀病菌、枯萎病菌、早疫病菌、叶霉病菌、黑斑病菌、炭疽病菌、霜霉病菌、黑星病菌、轮纹菌、小斑病等具有较强的抑制作用，并能促进作物生长。
但是，有关同时具有防病、杀虫和促进植物生长功能的菌株未见相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有高效杀虫、杀菌活性且可促进植物生长的多粘芽孢杆菌ZLP-61及其应用。
本发明采用如下技术方案：
一种多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)ZLP-61，保藏号为CGMCC No.25029。保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2022年6月9日。
一种上述多粘芽孢杆菌ZLP-61在防治鳞翅目害虫、蜚蠊目害虫、膜翅目害虫、蜈蚣目害虫、半翅目害虫、鞘翅目害虫或直翅目害虫中的应用。
进一步的，所述鳞翅目害虫包括小菜蛾、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾和菜青虫。
进一步的，所述半翅目害虫包括蚜虫、白粉虱、斑衣蜡蝉。
进一步的，所述鞘翅目害虫包括豆蚜、金针虫或拟地甲。
进一步的，所述直翅目害虫包括蝗虫、蟋蟀、蝼蛄。
一种上述多粘芽孢杆菌ZLP-61在防治植物病原菌、水产病原菌以及金黄色葡萄球菌中的应用。
进一步的，所述植物病原菌包括番茄叶霉病菌、番茄灰霉病菌、梨黑斑病菌、镰刀病菌、棉花枯萎病菌、黄瓜灰霉病菌、葡萄灰霉病菌、黄瓜炭疽病菌、黄瓜霜霉病菌、黄瓜黑星病菌、苹果轮纹菌、立枯丝核菌、玉米小斑病菌和番茄早疫病菌。
进一步的，所述水产病原菌包括嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌或维氏气单胞菌。
一种上述多粘芽孢杆菌ZLP-61在制备生防制剂、生物农药、土壤修复剂或生物肥料中的应用。
进一步的，生物杀虫剂、生物农药、生物肥料、生物种衣剂或土壤修复剂中包含多粘芽孢杆菌ZLP-81菌体和/或发酵液；或是从发酵液中分离出的表面活性素、伊枯草菌素、芬荠素或精子素。
一种杀虫剂，其包括如下重量份的组分：多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉23.75～76.6份、粘结剂14.1～19.1份、分散剂1.4～1.9份、崩解剂2.1～2.6份、润湿剂0.9～1.4份以及增效剂1.05～2.65份。
进一步的，所述多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉通过如下方法制备：向多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵液中添加发酵液质量7～13％的β-环糊精、5～13％的CaCO3以及1.5～5.5％的MgSO4后进行喷雾干燥。
进一步的，其还包括辅料0～52重量份。
其中，所述粘结剂选自可溶性淀粉、羧甲基纤维素、糊精。
其中，所述分散剂选自木质素磺酸钠、三聚磷酸钠、焦磷酸钠。
其中，所述崩解剂选自硫酸钠、十二烷基硫酸钠、聚山梨酯80。
其中，所述润湿剂选自大豆卵磷脂、磺化油、炔二醇。
其中，所用增效剂为：硅氧烷共聚物及多元醇混合物、聚醚改性三硅氧烷、乙氧基改性聚三硅氧烷等有机硅类，增效醚、顺丁烯二酸二乙酯、磷酸三苯酯等解毒酶抑制剂类、松节油、茶皂素、天然陈皮精油、玉米胚芽油、油菜籽油、大豆油、青皮桔油、松油、苦楝油、蓖麻油、薄荷油、百里香油、桉叶油、芝麻油、橄榄油等植物油类、大豆软磷脂非离子表面活性混合剂、聚天冬氨酸、烷基多糖苷、d－柠檬烯、蜂蜜、丙酮、肉桂醛、松油烯-4-醇、川楝素、弹指间、倍创、渗展宝、一可佳中的任意的1种以上。
进一步的，所述杀虫剂中其还包括1.10～1.70重量份的化学杀虫剂、生物杀虫剂或植物杀虫剂。
化学杀虫剂包括：丙氨酸甲酯、苯醚甲环性、速克灵、进口甲托、苯并咪唑44号、密霉胺、福美霜、进口蓝粉、氯虫苯甲酰胺、高效氯氟氰菊酯、乙基多杀菌素、灭幼脲氯氰菊酯、吡虫啉、溴氰菊酯、赤霉酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸、烯腺嘌呤、羟烯腺嘌呤、苄氨基嘌呤、24-表芸苔素内酯、22,23,24-表芸苔素内酯、28-表高芸苔素内酯、28-高芸苔素内酯、14-羟基芸苔素甾醇、三十烷醇、S-诱抗素、抗坏血酸、糠氨基嘌呤、二氢卟吩铁、尿囊素、超敏蛋白、极细链格孢激活蛋白、氨基寡糖素、香菇多糖、几丁聚糖、葡聚烯糖、低聚糖素、β-羽扇豆球蛋白多肽、胆钙化醇、米尔贝霉素、二化螟性诱剂、斜纹夜蛾诱集性信息素、绿盲蝽性信息素、梨小性迷向素、苹果蠹蛾性信息素中的任意1种以上。
生物杀虫剂包括：多粘芽孢杆菌、短稳杆菌、多粘类芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、甲基营养型芽孢杆菌、海洋芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌、侧孢短芽孢杆菌、短稳杆菌、多粘芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、嗜硫小红卵菌、白僵菌、球孢白僵菌、金龟子绿僵菌、哈茨木霉菌、木霉菌、淡紫拟青霉、厚孢轮枝菌、耳霉菌、盾壳霉、小盾壳霉、寡雄腐霉菌、蟑螂病毒、多角体病毒、颗粒体病毒、多杀霉素、阿维菌素、蝗虫微孢子虫中的任意1种以上。
植物杀虫剂包括：印楝素、苦参碱、藜芦碱、烟碱、鱼藤酮、除虫菊素、苦皮藤素、桉油精、八角茴香油、狼毒素、雷公藤甲素、莪术醇、蛇床子素、丁子香酚、大黄素甲醚、香芹酚、小檗碱、甾烯醇、茶皂素、螺威、大蒜素、d-柠檬烯、萜烯醇、异硫氰酸烯丙酯、十五烯苯酚酸、十三烷苯酚酸、苯丙烯菌酮中的任意1种以上。
一种杀菌剂，其包括多粘芽孢杆菌ZLP-61菌体或发酵液。
进一步的，所述杀菌剂包括体积比为500∶1的多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵液和多菌灵溶液；所述多菌灵溶液为1g多菌灵与600～1000mL的水混合而成。
一种杀菌剂，包括或是从多粘芽孢杆菌ZLP-61发酵液中分离出的表面活性素、伊枯草菌素，芬荠素或精子素。
本发明的有益效果在于：
本发明的多粘芽孢杆菌ZLP-61是一类好氧、产芽孢的杆状微生物，具有环境友好、抗逆性强、繁殖速度快等特点，并能分泌多种活性物质促进植物生长。
本发明的多粘芽孢杆菌ZLP-61具有较强的杀虫活性，可以有效杀灭小菜蛾、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、菜青虫等鳞翅目害虫，蚜虫、白粉虱、斑衣蜡蝉等半翅目害虫，豆蚜、金针虫、拟地甲等鞘翅目害虫，蝗虫、蟋蟀、蝼蛄等直翅目害虫及蜚蠊目的蟑螂、膜翅目蚂蚁和蜈蚣目的蜈蚣。
本发明的多粘芽孢杆菌ZLP-61具有广谱抗菌性，对灰霉病、镰刀病、枯萎病、早疫病、叶霉病、黑斑病、炭疽病、霜霉病、黑星病、轮纹病、小斑病等多种植物病原菌均具有明显的抑制效果。
本发明的多粘芽孢杆菌ZLP-61在开发为杀虫或防病等功能微生物制剂等方面具有良好的应用前景。
附图说明
图1多粘芽孢杆菌ZLP-61的菌落图。
图2多粘芽孢杆菌ZLP-61的菌株图。
具体实施方式
以下结合优选实施例对本发明的技术方案进行详细地阐述。以下实施例仅仅用于说明和解释本发明，而不构成对本发明技术方案的限制。
实施例1多粘芽孢杆菌ZLP-61的分离与筛选
(1)取土样：从中国江西萍乡采集土壤样品，每份50～100g；装入已灭过菌的牛皮纸袋内，封好袋口，并记录取样地点、环境及日期。
(2)芽孢杆菌分离和纯化：在PB培养基上用平板稀释法对土壤样品进行分离。具体操作如下：准确称取10g土壤样品，加入到装有玻璃珠的90mL 0.9％生理盐水锥形瓶中，180r/min摇床振荡30min，使土样分布均匀制成土壤悬液，浓度为10-1；依次稀释到浓度为10-5、10-6、10-7。分别在80℃恒温水浴30min，各取100μL稀释液涂布PB平板，平板于30℃恒温培养箱倒置培养48h。挑取不同形态的单菌落，用芽孢染色进行鉴定，芽孢杆菌用划线法纯化后转接至PB培养基试管斜面，30℃培养48h后，4℃冰箱保存备用。
(3)杀虫防病作用菌株的筛选
杀虫作用菌株的筛选：以蚜虫为靶标生物，将纯化后的微生物进行液体摇瓶发酵培养后，发酵液以转速12000r/min离心10min去菌体，上清液用0.22μm无菌滤膜过滤制备无菌发酵滤液，发酵滤液进行适当稀释。取适量长度的蚕豆茎叶放入锥形瓶中。对活蚜虫及所在茎叶喷施适量稀释液后放入锥形瓶内，瓶口用薄纱布覆盖并用橡皮筋固定。2d后，对蚜虫进行数量统计，筛选出杀虫效果较好的菌株。
具有防病作用菌株的筛选：以黄瓜灰霉病为指示菌，采用平板对峙法进行初筛。在无菌操作室将PDA培养基上长好的灰霉病原菌用打孔器制成d＝5mm菌饼，然后将菌饼转接至PDA培养基平板中央，再将初筛得到的各拮抗菌的无菌滤液分别接至距病原菌2.5cm处，设3个重复，同时以只放病原菌菌饼的平板为对照，26℃恒温培养，待培养至CK长满培养基时，开始测量菌落直径并计算平均抑制率。筛选出对病原菌拮抗作用强的菌株。将杀虫防病效果较强的菌株进行了-80℃冷冻保藏。
(4)杀虫防病作用菌株的鉴定
依据《常见细菌系统鉴定手册》中的实验方法，对筛选得到的杀虫防病效果较强的菌株进行形态学及生理生化鉴定。将菌株在PB培养基平板上于32±1℃培养14～16h，观察到编号为ZLP-61的菌落呈圆形，颜色呈半透明白色，表面光滑有光泽，该菌体呈杆状(如图1～图2所示)。其生理生化鉴定指标如表1所示。
表1菌株ZLP-61的生理生化特性
Figure BDA0003790507590000051
Figure BDA0003790507590000061
注：“+”为阳性；“－”为阴性。
通过形态学观察及生理生化实验，确定编号为ZLP-61的菌株为芽孢杆菌属。接着进行分子生物学分类鉴定，采用16S rDNA序列分析，提取菌株的总基因组DNA为模板扩增其16S rDNA序列。采用通用引物27F/1492R扩增目的片段，扩增产物经1％的琼脂糖凝胶电泳检测，采用双向测序方法进行基因测序。测序结果通过GenBank数据库进行BLAST序列同源性比对后将编号为ZLP-61的菌株鉴定为多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)，命名为多粘芽孢杆菌ZLP-61。
将多粘芽孢杆菌ZLP-61送至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCC No.25029，保藏日期为2022年6月9日。
实施例2多粘芽孢杆菌ZLP-61对鳞翅目害虫、蜚蠊目蟑螂、膜翅目蚂蚁及蜈蚣目蜈蚣幼虫的杀灭效果
将多粘芽孢杆菌ZLP-61进行发酵培养。使用NB液体培养基，配方为：牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、NaCl 5g/L、葡萄糖10g/L，pH7.0。按照5％的接种量接种于培养基后置于180r/min、32℃的震荡培养箱中培养48h。
将多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵液稀释成10倍、50倍、100倍，以清水处理作对照。配置药土，以清水配制药土作为对照。并加入适量等量的食料拌匀。采用药土法，选取虫体大小一致的鳞翅目的小菜蛾、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾及菜青虫、蜚蠊目的蟑螂、膜翅目的蚂蚁及蜈蚣目的蜈蚣幼虫，在温度为25℃～28℃的环境中保持24h后。每处理试虫数量为45头，每个处理3个平行。接虫后置于室内常温培养，56h后统计死亡率，如表2所示。
表2多粘芽孢杆菌ZLP-61对鳞翅目害虫及蜚蠊目蟑螂的灭杀作用
Figure BDA0003790507590000062
Figure BDA0003790507590000071
实施例3多粘芽孢杆菌ZLP-61对蚜虫等半翅目害虫的杀虫效果
将多粘芽孢杆菌ZLP-61进行发酵培养(同实施例2)。
将发酵液稀释成10倍、50倍、100倍，以清水处理作对照。豆蚜杀虫实验使用的食物为蚕豆幼茎、棉蚜杀虫实验使用的食物为棉花幼茎、甘蓝蚜杀虫实验使用的食物为甘蓝嫩叶、白粉虱杀虫实验使用的食物为番茄叶片，斑衣蜡蝉杀虫实验使用的食物为槐花，这五种食物均浸泡在上述药液10min后用滤纸吸干水分，取出放在垫有滤纸的广口瓶后，加入2mL去离子水保湿，再将广口瓶用保鲜膜覆盖，扎孔，每12h加1mL水。每个浓度下供试害虫50头，3次重复，挑50头年龄大小相近的害虫放在准备好的培养皿上饥饿4h，再分别加入上述药液处理过的蚕豆幼茎、棉花幼茎、甘蓝嫩叶、番茄嫩叶及槐花，每12h更换一次，于25℃培养箱培养过夜，记录害虫的死亡头数，计算不同稀释倍数下蚜虫的死亡率。
死亡率＝(死亡虫数÷供试虫数)×100％。
死亡率测定：害虫处理过夜后，用毛笔头触碰害虫，若虫不动则视为死亡，统计并记录死亡的害虫头数。由表3实施数据结果可以看出，多粘芽孢杆菌ZLP-61对半翅目昆虫有良好的防治作用。
表3多粘芽孢杆菌ZLP-61对蚜虫等半翅目昆虫的杀虫效果
Figure BDA0003790507590000072
实施例4多粘芽孢杆菌ZLP-61对鞘翅目幼虫的杀灭效果
将多粘芽孢杆菌ZLP-61进行发酵培养(同实施例2)。
将多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵液稀释成10倍、50倍、100倍，以清水处理作对照。配置药土，以清水配制药土作为对照。并加入适量等量的食料拌匀。采用药土法，选取虫体大小一致的白星花金龟、金针虫、拟地甲、桑天牛的三龄幼虫，在温度为25℃～28℃的环境中保持24h后。每处理试虫数量为15头，每个处理3个平行，重复3次。接虫后置于室内常温培养，56h后统计死亡率，如表4所示。
表4多粘芽孢杆菌ZLP-61对豆蚜等鞘翅目幼虫的杀灭效果
Figure BDA0003790507590000081
实施例5多粘芽孢杆菌ZLP-61对蝗虫、蟋蟀、蝼蛄等直翅目害虫的杀虫效果
将多粘芽孢杆菌ZLP-61进行发酵培养(同实施例2)。
将发酵液稀释成10倍、50倍、100倍，以清水处理作对照。蝗虫杀虫实验使用的食物为小麦、蟋蟀杀虫实验使用的食物为毛豆、蝼蛄杀虫实验使用的食物为白菜叶子，这三种食物均浸泡在上述药液10min后用滤纸吸干水分，取出放在垫有滤纸的广口瓶后，加入2mL去离子水保湿，再将广口瓶用保鲜膜覆盖，扎孔，每12h加1mL水。每个浓度下供试害虫30头，3次重复，挑30头体重大小相近的害虫放在准备好的培养皿上饥饿4h，再分别加入上述药液处理过的小麦、毛豆和白菜叶子，每12h更换一次，于25℃培养箱培养过夜，记录害虫的死亡头数，计算不同稀释倍数下害虫的死亡率。
死亡率＝(死亡虫数÷供试虫数)×100％。
由表5实施数据结果可以看出，多粘芽孢杆菌ZLP-61对蝗虫、蟋蟀及蝼蛄等直翅目昆虫有良好的防治作用。
表5多粘芽孢杆菌ZLP-61对蝗虫等直翅目昆虫的防治效果
Figure BDA0003790507590000082
Figure BDA0003790507590000091
实施例6多粘芽孢杆菌ZLP-61的抑菌谱测定
选取常见病原菌如：番茄叶霉病菌、番茄灰霉病菌、梨黑斑病菌、镰刀病菌、棉花枯萎病菌、黄瓜灰霉病菌、葡萄灰霉病菌、黄瓜炭疽病菌、黄瓜霜霉病菌、黄瓜黑星病菌、苹果轮纹菌、立枯丝核菌、玉米小斑病菌、番茄早疫病菌等多种植物病原菌；嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌、维氏气单胞菌等水产病原菌及金黄色葡萄球菌为靶标，采用平板对峙法测定菌株ZLP-61的抑菌谱，确定ZLP-61菌株对病原菌生长的抑制能力。
根据表6的实施结果可见，菌株ZLP-61对所试18种病原菌均有较强的拮抗作用，其中对立枯丝核菌的抑制作用最强，抑菌圈直径可达26.12mm。说明以多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵液为活性成分的杀菌剂在农业生产上有良好的应用价值。
表6多粘芽孢杆菌ZLP-61对不同植物病原菌的抑制效果
Figure BDA0003790507590000092
Figure BDA0003790507590000101
实施例7多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂(水分散粒剂)的制备
(1)制备多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉
培养多粘芽孢杆菌ZLP-61使用NB液体培养基，配方为：牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、NaCl 5g/L、葡萄糖10g/L，pH7.0。按照5％的接种量接种于NB培养基后置于180r/min、32℃的震荡培养箱中培养48h。
将培养好的多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵菌液，进行喷雾干燥，填料选11％的β-环糊精，9％的CaCO3，3％的MgSO4，进口温度180℃，设置料液温度为常温22℃，风速为30m3/h，入料流量是15mL/min，喷雾干燥后获得多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉。
(2)杀虫剂的制作流程
配方1的制备方法：将27.5％的多粘芽孢杆菌ZLP-61菌粉与52％的辅料(碳酸钙)、14.2％的粘结剂可溶性淀粉、1.5％的分散剂木质素磺酸钠、2.6％的崩解剂硫酸钠、0.9％的润湿剂大豆卵磷脂及1.3％的增效剂大豆油充分混合，通过气流粉碎机粉碎再混匀，然后加入蒸馏水捏合成块，再通过造粒机进行挤压造粒，得到的样品放置烘箱中进行45～50℃烘干，过40目振动筛得到多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂。
配方2的制备方法：将24.1％的多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉与51.5％的辅料(碳酸钙)、16.2％的粘结剂羧甲基纤维素、1.9％的分散剂三聚磷酸钠、2.2％的崩解剂十二烷基硫酸钠、1.7％的润湿剂磺化油及2.4％的增效剂聚醚改性三硅氧烷充分混合，通过气流粉碎机粉碎再混匀，然后加入蒸馏水捏合成块，再通过造粒机进行挤压造粒，得到的样品放置烘箱中进行45～50℃烘干，过40目振动筛得到多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂。
配方3的制备方法：将26.15％的多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉与50％的辅料(碳酸钙)、17.2％的粘结剂糊精、1.5％的分散剂焦磷酸钠、2.4％的崩解剂聚山梨酯80、1.3％的润湿剂炔二醇及1.45％的增效剂乙氧基改性聚三硅氧烷充分混合，通过气流粉碎机粉碎再混匀，然后加入蒸馏水捏合成块，再通过造粒机进行挤压造粒，得到的样品放置烘箱中进行45～50℃烘干，过40目振动筛得到多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂。
配方1、配方2和配方3对棉蚜的矫正杀虫率为69％、69％和70％；对蛴螬的矫正杀虫率为70％、69％和71％；对蝗虫的矫正杀虫率为68％、68％和69％。
实施例8多粘芽孢杆菌ZLP-61杀菌剂(粉剂)的制备方法
将多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵菌液(同实施例2)和多菌灵溶液(1g多菌灵溶于800mL水)按照500∶1的体积比均匀混合，然后进行喷雾干燥，喷雾干燥后获得多粘芽孢杆菌ZLP-61杀菌剂的粉剂。
实施例9多粘芽孢杆菌ZLP-61杀菌剂的促生效果
选用黄瓜为试验作物，室内盆栽黄瓜种苗20株/盆，设3个平行，处理组施用多粘芽孢杆菌ZLP-61杀菌剂(实施例8)，对照组不施用任何促生产品。而后随机选10株28日龄黄瓜幼苗，用直尺测量幼苗的株高，游标卡尺测量茎粗。105℃杀青15min，75℃烘干至恒重，测定地上部和地下部干质量，采用乙醇丙酮浸提法测定叶绿素含量，用便携式光合测定系统进行光合参数的测定。
从表7可知，多粘芽孢杆菌ZLP-61杀菌剂在对黄瓜幼苗的株高、茎粗、单株地上部鲜质量、单株地上部干质量、叶面积、单株根鲜质量、单株根干质量、单株总根体积、叶绿素总量和净光合速率方面较CK提高了2.80％、9.09％、18.62％、15.36％、0.42％、76.32％、8.57％、118.28％、60.71％和88.71％，且除株高、叶面积和单株根干质量外，都达到了差异显著的水平。表明，本发明多粘芽孢杆菌ZLP-61杀菌剂对黄瓜幼苗有显著的促生效果。
表7多粘芽孢杆菌ZLP-61杀菌剂对黄瓜幼苗的促生效果
Figure BDA0003790507590000111
Figure BDA0003790507590000121
注：同行相同字母代表P＞0.05，差异不显著，不同字母代表P＜0.05，差异显著。
实施例10多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂(包含杀虫剂)的制备
按照质量比(见表8)，制作包含化学杀虫剂、生物杀虫剂、植物杀虫剂的多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂配方。其中菌粉为实施例7的步骤(1)所得到的多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉。
制备方法：将多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉与辅料混合后，再与粘结剂、分散剂、崩解剂、润湿剂、杀虫剂及增效剂充分混合，通过气流粉碎机粉碎再混匀，然后加入蒸馏水捏合成块，再通过造粒机进行挤压造粒，得到的样品放置烘箱中进行45～50℃烘干，过40目振动筛得到多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂。
所用辅料为碳酸钙。
所用粘结剂为：(1)可溶性淀粉、(2)羧甲基纤维素钠、(3)糊精。
所用分散剂为：(A)木质素磺酸钠、(B)三聚磷酸钠、(C)焦磷酸钠。
所用崩解剂为：(a)硫酸钠、(b)十二烷基硫酸钠、(e)聚山梨酯80。
所用润湿剂为：(α)大豆卵磷脂、(β)磺化油、(γ)炔二醇。
所用增效剂为：(1)硅氧烷共聚物、(2)聚醚改性三硅氧烷、(3)乙氧基改性聚三硅氧烷等有机硅类，(4)增效醚、(5)顺丁烯二酸二乙酯、(6)磷酸三苯酯等解毒酶抑制剂类，(7)松节油、(8)茶皂素、(9)天然陈皮精油、(10)玉米胚芽油、(11)油菜籽油、(12)大豆油、(13)青皮桔油、(14)松油、(15)苦楝油、(16)蓖麻油、(17)薄荷油、(18)百里香油、(19)桉叶油、(20)芝麻油、(21)橄榄油等植物油类，(22)大豆软磷脂非离子表面活性混合剂、(23)聚天冬氨酸、(24)烷基多糖苷、(25)d－柠檬烯、(26)蜂蜜、(27)丙酮、(28)肉桂醛、(29)松油烯-4-醇、(30)川楝素、(31)弹指间、(32)倍创、(33)渗展宝、(34)一可佳中任意的1种或2种以上。
化学杀虫剂包括：(1)丙氨酸甲酯、(2)苯醚甲环性、(3)速克灵、(4)进口甲托、(5)苯并咪唑44号、(6)密霉胺、(7)福美霜、(8)进口蓝粉、(9)氯虫苯甲酰胺、(10)高效氯氟氰菊酯、(11)乙基多杀菌素、(12)灭幼脲氯氰菊酯、(13)吡虫啉、(14)溴氰菊酯、(15)赤霉酸、(16)吲哚乙酸、(17)吲哚丁酸、(18)烯腺嘌呤、(19)羟烯腺嘌呤、(20)苄氨基嘌呤、(21)24-表芸苔素内酯、(22)22,23,24-表芸苔素内酯、(23)28-表高芸苔素内酯、(24)28-高芸苔素内酯、(25)14-羟基芸苔素甾醇、(26)三十烷醇、(27)S-诱抗素、(28)抗坏血酸、(29)糠氨基嘌呤、(30)二氢卟吩铁、(31)尿囊素、(32)超敏蛋白、(33)极细链格孢激活蛋白、(34)氨基寡糖素、(35)香菇多糖、(36)几丁聚糖、(37)葡聚烯糖、(38)低聚糖素、(39)β-羽扇豆球蛋白多肽、(40)胆钙化醇、(41)米尔贝霉素、(42)括二化螟性诱剂、(43)斜纹夜蛾诱集性信息素、(44)绿盲蝽性信息素、(45)梨小性迷向素、(46)苹果蠹蛾性信息素中的任意1种或2种以上。
生物杀虫剂包括：(1)枯草芽孢杆菌、(2)短稳杆菌、(3)多粘类芽孢杆菌、(4)苏云金芽孢杆菌、(5)甲基营养型芽孢杆菌、(6)海洋芽孢杆菌、(7)坚强芽孢杆菌、(8)球形芽孢杆菌、(9)蜡质芽孢杆菌、(10)荧光假单胞杆菌、(11)侧孢短芽孢杆菌、(12)短稳杆菌、(13)地衣芽孢杆菌、(14)解淀粉芽孢杆菌、(15)沼泽红假单胞菌、(16)嗜硫小红卵菌、(17)白僵菌、(18)球孢白僵菌、(19)金龟子绿僵菌、(20)哈茨木霉菌、(21)木霉菌、(22)淡紫拟青霉、(23)厚孢轮枝菌、(24)耳霉菌、(25)盾壳霉、(26)小盾壳霉、(27)寡雄腐霉菌、(28)蟑螂病毒、(29)多角体病毒、(30)颗粒体病毒、(31)多杀霉素、(32)阿维菌素、(33)蝗虫微孢子虫中的任意1种或2种以上。
植物杀虫剂包括：(1)印楝素、(2)苦参碱、(3)藜芦碱、(4)烟碱、(5)鱼藤酮、(6)除虫菊素、(7)苦皮藤素、(8)桉油精、(9)八角茴香油、(10)狼毒素、(11)雷公藤甲素、(12)莪术醇、(13)蛇床子素、(14)丁子香酚、(15)大黄素甲醚、(16)香芹酚、(17)小檗碱、(18)甾烯醇、(19)茶皂素、(20)螺威、(21)大蒜素、(22)d-柠檬烯、(23)萜烯醇、(24)异硫氰酸烯丙酯、(25)十五烯苯酚酸、(26)十三烷苯酚酸、(27)苯丙烯菌酮中的任意1种或2种以上。
表8多粘芽孢杆菌ZLP-61杀虫剂配方
Figure BDA0003790507590000141
Figure BDA0003790507590000151
Figure BDA0003790507590000161
Figure BDA0003790507590000171
Figure BDA0003790507590000181
以上所述的实施例和方法是本发明的最佳实施方案，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出部分改变、修饰、替代、组合，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa）ZLP-61，其特征在于，保藏号为CGMCCNo.25029。
2.一种如权利要求1所述的多粘芽孢杆菌ZLP-61在防治鳞翅目害虫、蜚蠊目害虫、膜翅目害虫、蜈蚣目害虫、半翅目害虫、鞘翅目害虫或直翅目害虫中的应用。
3.一种如权利要求1所述的多粘芽孢杆菌ZLP-61在防治植物病原菌、水产病原菌以及金黄色葡萄球菌中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述植物病原菌包括番茄叶霉病菌、番茄灰霉病菌、梨黑斑病菌、镰刀病菌、棉花枯萎病菌、黄瓜灰霉病菌、葡萄灰霉病菌、黄瓜炭疽病菌、黄瓜霜霉病菌、黄瓜黑星病菌、苹果轮纹菌、立枯丝核菌、玉米小斑病菌和番茄早疫病菌。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述水产病原菌包括嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌或维氏气单胞菌。
6.一种如权利要求1所述的多粘芽孢杆菌ZLP-61在制备生防制剂、生物农药、土壤修复剂或生物肥料中的应用。
7.一种杀虫剂，其特征在于，其包括如下重量份的组分：多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉23.75~76.6份、粘结剂14.1~19.1份、分散剂1.4~1.9份、崩解剂2.1~2.6份、润湿剂0.9~1.4份以及增效剂1.05~2.65份。
8.根据权利要求7所述的杀虫剂，其特征在于，所述多粘芽孢杆菌ZLP-61菌株原粉通过如下方法制备：向多粘芽孢杆菌ZLP-61的发酵液中添加发酵液质量7~13%的β-环糊精、5~13%的CaCO3以及1.5~5.5%的MgSO4后进行喷雾干燥。
9.根据权利要求7所述的杀虫剂，其特征在于，其还包括1.10~1.70重量份的化学杀虫剂、生物杀虫剂或植物杀虫剂。
10.一种杀菌剂，其特征在于，其包括多粘芽孢杆菌ZLP-61菌体、发酵液、或是从发酵液中分离出的表面活性素、伊枯草菌素，芬荠素或精子素。
CN202210954218.5A 2022-08-10 2022-08-10 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用 Pending CN115287231A (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210954218.5A CN115287231A (zh) 2022-08-10 2022-08-10 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用
CN202310964648.XA CN117511760B (zh) 2022-08-10 2023-08-02 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210954218.5A CN115287231A (zh) 2022-08-10 2022-08-10 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115287231A true CN115287231A (zh) 2022-11-04

Family

ID=83828916

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210954218.5A Pending CN115287231A (zh) 2022-08-10 2022-08-10 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用
CN202310964648.XA Active CN117511760B (zh) 2022-08-10 2023-08-02 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310964648.XA Active CN117511760B (zh) 2022-08-10 2023-08-02 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (2) CN115287231A (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017210166A1 (en) * 2016-05-31 2017-12-07 Novozymes Bioag A/S Stable liquid inoculant compositions and coated plant propagation materials comprising same
CN108513988A (zh) * 2018-03-27 2018-09-11 湖南省蓝正微生物科技开发有限公司 微生物复合农药
CN109329317A (zh) * 2018-11-24 2019-02-15 衡阳市富农科技有机农产品供销专业合作社 一种水分散粒剂型的植物源杀虫剂及其制备方法
CN114736825A (zh) * 2022-04-12 2022-07-12 慕恩（广州）生物科技有限公司 一种多粘类芽孢杆菌、生化制剂及其应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4663162A (en) * 1984-03-14 1987-05-05 The Regents Of The University Of California Method of using Bacillus polymyxa 9A to protect plants against verticillium wilt

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017210166A1 (en) * 2016-05-31 2017-12-07 Novozymes Bioag A/S Stable liquid inoculant compositions and coated plant propagation materials comprising same
CN108513988A (zh) * 2018-03-27 2018-09-11 湖南省蓝正微生物科技开发有限公司 微生物复合农药
CN109329317A (zh) * 2018-11-24 2019-02-15 衡阳市富农科技有机农产品供销专业合作社 一种水分散粒剂型的植物源杀虫剂及其制备方法
CN114736825A (zh) * 2022-04-12 2022-07-12 慕恩（广州）生物科技有限公司 一种多粘类芽孢杆菌、生化制剂及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
崔晓等: "芽孢杆菌在农业生产中的应用" *

Also Published As

Publication number Publication date
CN117511760B (zh) 2024-07-05
CN117511760A (zh) 2024-02-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114717164B (zh) 一种贝莱斯芽孢杆菌zlp-101及其应用
Barari Biocontrol of tomato Fusarium wilt by Trichoderma species under in vitro and in vivo conditions
CN115418333A (zh) 一种枯草芽孢杆菌zlp-121及其应用
CN115369058A (zh) 地衣芽孢杆菌zlp-81及其应用
Sabbour The toxicity effect of nano fungi Isaria fumosorosea and Metarhizium flavoviride against the potato tuber moth, Phthorimaea operculella (Zeller)
CN116669555A (zh) 孢子组合物、其生产和用途
CN117004524B (zh) 解淀粉芽孢杆菌zlp-01及其应用
KR102532223B1 (ko) 해충 및 식물병원균에 대한 방제 활성을 동시에 갖는 신규한 메타리지움 아니소플리애 ＳＤＴｕ１ 균주 및 이의 용도
Ali et al. Control of Earias vittella (Lepidoptera: Noctuidae) by Beauveria bassiana along with Bacillus thuringiensis
KR102237327B1 (ko) 다양한 식물에 저항성을 유도하는 바실러스 서브틸리스 jck-1398 균주, 이를 이용한 소나무재선충병 방제용 조성물 및 방제방법
US9468215B2 (en) Bionematicide composition and method for controlling phytopathogenic nematodes using the same
CN115287231A (zh) 多粘芽孢杆菌zlp-61及其应用
Santos et al. Entomopathogenic fungi: Current status and prospects
CN115287230A (zh) 巨大芽孢杆菌zlp-21及其应用
KR100314323B1 (ko) 작물의 병해 방제용 균주, 이를 함유하는 미생물제제 및 그 용도
Sabbour et al. Evaluations of some terpenes and entomopathogenic fungi on three sugar beet insect pests
CN109337822B (zh) 布氏白僵菌brns50206及其应用
Mostakim et al. Biocontrol potential of a Bacillus subtilis strain against Bactrocera oleae
CN115281216A (zh) 短短芽孢杆菌zlp-151在生物防治中的应用
CN114703078A (zh) 产吲哚金黄杆菌及其应用
Kalane et al. Larvicidal effect of Staphylococcus vitulinus bacteria against Spodoptera litura fab
Khyami-Horani et al. Efficacy of Jordanian isolates of Bacillus thuringiensis against the citrus leafminer, Phyllocnistis citrella Stainton (Lepidoptera: Gracillariidae)
Ibrahim et al. Susceptibility of the peach fruit fly, Bactrocera zonata (Saunders) and the Mediterranean fruit fly, Ceratitis capitata (Wiedemann) adults to the entomopathogenic fungi; Metarhizium anisopliae (Met.) and Beauveria bassiana (Bals.).
CN112940978B (zh) 一种甲基营养型芽孢杆菌bam-6及其应用
Roxana Microbial inoculants used to control Tuta absoluta (Meyrick, 1917)(Lepidoptera: Gelechiidae).

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20221104