CN115266968A - 一种hplc分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法 - Google Patents
一种hplc分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115266968A CN115266968A CN202210816393.8A CN202210816393A CN115266968A CN 115266968 A CN115266968 A CN 115266968A CN 202210816393 A CN202210816393 A CN 202210816393A CN 115266968 A CN115266968 A CN 115266968A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mobile phase
- impurities
- impurity
- solvent
- volume ratio
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title claims abstract description 78
- 229940041622 sugammadex sodium Drugs 0.000 title claims abstract description 29
- KMGKABOMYQLLDJ-VKHHSAQNSA-F sugammadex sodium Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].O([C@@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2[C@H](O)[C@H]([C@@H](O[C@@H]3[C@@H](CSCCC([O-])=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC([O-])=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC([O-])=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC([O-])=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC([O-])=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)O[C@@H]2CSCCC([O-])=O)O)[C@H](CSCCC([O-])=O)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]3[C@@H](CSCCC([O-])=O)O1 KMGKABOMYQLLDJ-VKHHSAQNSA-F 0.000 title claims abstract description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 46
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229940080345 gamma-cyclodextrin Drugs 0.000 claims abstract description 10
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 9
- OUCSEDFVYPBLLF-KAYWLYCHSA-N 5-(4-fluorophenyl)-1-[2-[(2r,4r)-4-hydroxy-6-oxooxan-2-yl]ethyl]-n,4-diphenyl-2-propan-2-ylpyrrole-3-carboxamide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@H]2OC(=O)C[C@H](O)C2)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 OUCSEDFVYPBLLF-KAYWLYCHSA-N 0.000 claims abstract description 8
- XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N (3s,5r)-7-[2-(4-fluorophenyl)-3-phenyl-4-(phenylcarbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-SXOMAYOGSA-N 0.000 claims abstract description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims abstract description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical group CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 8
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- FVSKHRXBFJPNKK-UHFFFAOYSA-N propionitrile Chemical compound CCC#N FVSKHRXBFJPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000005233 alkylalcohol group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229920002370 Sugammadex Polymers 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 229960002257 sugammadex Drugs 0.000 abstract description 7
- WHRODDIHRRDWEW-VTHZAVIASA-N sugammadex Chemical compound O([C@@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2[C@H](O)[C@H]([C@@H](O[C@@H]3[C@@H](CSCCC(O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC(O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC(O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC(O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@@H]3[C@@H](CSCCC(O)=O)O[C@@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)O[C@@H]2CSCCC(O)=O)O)[C@H](CSCCC(O)=O)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]3[C@@H](CSCCC(O)=O)O1 WHRODDIHRRDWEW-VTHZAVIASA-N 0.000 abstract description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 5
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 27
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- AUALQMFGWLZREY-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;methanol Chemical compound OC.CC#N AUALQMFGWLZREY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000005456 alcohol based solvent Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 4
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 206010021118 Hypotonia Diseases 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 230000036640 muscle relaxation Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 206010029315 Neuromuscular blockade Diseases 0.000 description 1
- NDDAQHROMJDMKS-XFYXLWKMSA-N [(2s,3s,5s,8r,9s,10s,13s,14s)-2-hydroxy-10,13-dimethyl-17-oxo-1,2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16-tetradecahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl]azanium;chloride Chemical compound Cl.C1[C@H](N)[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NDDAQHROMJDMKS-XFYXLWKMSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000005893 bromination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N gamma-cyclodextrin Chemical class OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO GDSRMADSINPKSL-HSEONFRVSA-N 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 1
- 239000003156 neuromuscular nondepolarizing agent Substances 0.000 description 1
- 238000010525 oxidative degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003682 rocuronium bromide Drugs 0.000 description 1
- OYTJKRAYGYRUJK-FMCCZJBLSA-M rocuronium bromide Chemical compound [Br-].N1([C@@H]2[C@@H](O)C[C@@H]3CC[C@H]4[C@@H]5C[C@@H]([C@@H]([C@]5(CC[C@@H]4[C@@]3(C)C2)C)OC(=O)C)[N+]2(CC=C)CCCC2)CCOCC1 OYTJKRAYGYRUJK-FMCCZJBLSA-M 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960004298 vecuronium bromide Drugs 0.000 description 1
- VEPSYABRBFXYIB-PWXDFCLTSA-M vecuronium bromide Chemical compound [Br-].N1([C@@H]2[C@@H](OC(C)=O)C[C@@H]3CC[C@H]4[C@@H]5C[C@@H]([C@@H]([C@]5(CC[C@@H]4[C@@]3(C)C2)C)OC(=O)C)[N+]2(C)CCCCC2)CCCCC1 VEPSYABRBFXYIB-PWXDFCLTSA-M 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
本发明公开了一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法，所述舒更葡糖钠中间体为八(6‑溴‑6‑去氧)‑γ‑环糊精，所述杂质选自杂质A、杂质B、杂质C、杂质E和杂质H中的一个或多个；所述HPLC分离条件为：色谱柱为C18键合硅胶色谱柱；采用流动相A与流动相B进行梯度洗脱，所述流动相B为腈类溶剂和醇类溶剂的混合溶剂，所述流动相A为水与流动相B的混合溶剂。本发明还公开了一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的试剂组合和指纹图谱。本发明对于实现舒更葡糖钠中间体和原料药的质量控制具有极其重要的意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法，尤其涉及一种HPLC法分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的试剂组合、指纹图谱及方法，属于制药技术领域。
背景技术
舒更葡糖钠是一种经过修饰的γ-环糊精，为20年来开发成功的首个、唯一的选择性肌肉松弛拮抗剂(结合剂)(SRBA)，其通过全新且唯一的途径包裹氨基甾体类非去极化肌肉松弛药而阻断松弛作用，能快速可预见性的逆转罗库溴铵和维库溴铵导致的任何强度的肌肉松弛，且副作用较小，能让肌松药的使用接近理想状态，其逆转神经肌肉阻断作用比现有药物更快速，更有可预见性。
舒更葡糖钠质量标准还未收录于各国药典中，相关分析方法报道比较少。专利申请CN110554102A公开了一种检测舒更葡糖钠及其有关杂质的方法，但是该分析方法主要用于原料药成品的检测和破坏性试验中如酸降解、碱降解、氧化降解、高温降解和光照降解条件的杂质检测，远不能满足实际生产过程中中间体的质量控制的需求。
根据《化学药物杂质研究的技术指导原则》的相关规定，一种药物杂质总含量应小于1.0％，单个杂质含量应小于0.1％，对于制备舒更葡糖钠过程中产生的杂质或引入的有关物质，不论是在原料药还是制剂中均需要进行严格控制。八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精为舒更葡糖钠制备过程中的关键中间体，该化合物的质量控制对高质量的舒更葡糖钠原料药制备起到重要的作用，由于制备八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精的原料是经过发酵而获得，其基质复杂，有机杂质较多，经过溴代反应制备得到的八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精需要对原料中带入的杂质和反应产生的副产物都进行严格控制，而大环类杂质结构相似，极性十分接近，导致定性和定量困难，所以开发一种高效且精确的分析方法，对舒更葡糖钠关键中间体进行质量分析，对后续制备高纯度的舒更葡糖钠有着重要的意义。
发明内容
本发明的目的是为了提供一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法，该法可以有效的将式I所示化合物(即八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精)及其相关杂质分开，且该方法具有很高的灵敏度及分离度，重复性良好，操作简单，结果稳定可靠。
同时，本发明提供一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的试剂组合，该试剂组合可实现式I所示化合物及其相关杂质的高效分离。
同时，本发明提供一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的指纹图谱，该指纹图谱可实现式I所示化合物及其相关杂质的鉴别。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
本发明公开提供的一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法，其中，所述舒更葡糖钠中间体为八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精，其是合成舒更葡糖钠的关键中间体，在后简称为式I所示化合物，结构式如下：
所述杂质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质E和杂质H中的一个或多个，具体化学名如下所示：
色谱条件为：色谱柱为C18键合硅胶色谱柱；采用流动相A与流动相B进行梯度洗脱，所述流动相B为腈类溶剂和醇类溶剂的混合溶剂，所述流动相A为水与流动相B的混合溶剂，
梯度洗脱程序为：
流动相进行洗脱的流速为0.7-1.3mL/min；柱温选自20-50℃，然后进入检测器中该进行检测。
一些实施方案中，所述腈类溶剂选自乙腈或丙腈，所述醇类溶剂选自C1-C6烷基醇，具体的可选甲醇或乙醇，所述腈类溶剂与醇类溶剂的体积比选自10:1-1:10。
一些实施方案中，所述腈类溶剂选自乙腈，所述醇类溶剂为甲醇。
一些实施方案中，所述腈类溶剂与醇类溶剂的体积比选自5:1-1:5，具体可以是5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4或1:5，或任意两个点值之间的数值。
一些实施方案中，所述流动相A中水与流动相B的体积比选自10:1-1:10，可选地，流动相A中水与流动相B的体积比选自5:1-1:5，具体可以是5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4或1:5，或任意两个点值之间的数值。
一些实施方案中，流动相进行洗脱的流速选自0.8-1.2mL/min，具体可选0.9mL/min、1.0mL/min、1.1mL/min或1.2mL/min，或任意两个点值之间的数值。
一些实施方案中，柱温选自25-35℃，具体可选，25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃或35℃。
可选的实施方案中，梯度洗脱程序为：
一些实施方案中，C18键合硅胶色谱柱为Kromasil 100-5C18。
一些实施方案中，检测器为蒸发光散射检测器(ELSD)。
一些实施方案中，检测器温度选自50-60℃，具体可选50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃或60℃。
一些实施方案中，所述流动相B为腈类溶剂和醇类溶剂的混合溶剂，所述腈类溶剂选自乙腈，所述醇类溶剂为甲醇，所述腈类溶剂和醇类溶剂的体积比为1:4，所述流动相A中水与流动相B的体积比为1:4。
一些实施方案中，流动相A为体积比20:80的水-流动相B的混合溶液，流动相B为体积比20:80的乙腈-甲醇混合溶液。
本发明另一方面公开提供一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的试剂组合，包含以下试剂：
流动相B：为腈类溶剂和醇类溶剂的混合溶剂；
流动相A：为水与流动相B的混合溶剂；所述相关杂质选自杂质A、杂质B、杂质C、杂质E、杂质H中的一个或多个。
可选的实施方案中，所述腈类溶剂选自乙腈或丙腈，所述醇类溶剂选自C1-C6烷基醇，具体的可选甲醇或乙醇，所述腈类溶剂与醇类溶剂的体积比选自10:1-1:10。
可选的实施方案中，所述腈类溶剂选自乙腈，所述醇类溶剂为甲醇。
可选的实施方案中，所述腈类溶剂与醇类溶剂的体积比选自5:1-1:5，具体可以是5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4或1:5，或任意两个点值之间的数值。
可选的实施方案中，所述流动相A中水与流动相B的体积比选自10:1-1:10，可选地，流动相A中水与流动相B的体积比选自5:1-1:5，具体可以是5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4或1:5，或任意两个点值之间的数值。
可选的实施方案中，所述流动相B为腈类溶剂和醇类溶剂的混合溶剂，所述腈类溶剂选自乙腈，所述醇类溶剂为甲醇，所述腈类溶剂和醇类溶剂的体积比为1:4，流动相A中水与流动相B的体积比为1:4。
本发明另一方面公开提供一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的指纹图谱，
| 出峰时间(min) | 杂质名称 |
| 4.239 | 杂质E |
| 11.508 | 杂质A |
| 15.062 | 杂质C |
| 26.804 | 杂质H |
| 28.879 | 八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精 |
| 31.584 | 杂质B |
本发明的有益效果在于：
1)本发明提供了一种HPLC分离测定式I化合物及其杂质的方法，本发明的方法可以有效的将式I所示化合物及其相关杂质分开，且该方法具有很高的灵敏度及分离度，重复性良好，操作简单，结果稳定可靠。
2)本发明中式I化合物的分析研究对合成反应的控制及质量的提高起着至关重要的作用，也直接影响舒更葡糖钠成品的质量，所以该方法对于实现式I化合物及舒更葡糖钠质量控制具有极其重要的意义。
附图说明
图1为本发明的系统适用性溶液的高效液相色谱图；
图2为对比例1的高效液相色谱图；
图3为对比例2的高效液相色谱图。
具体实施方式
以下将结合附图、实施例或实验例更详细地解释本发明，本发明中的实施例或实验例仅用于说明本发明中的技术方案，并非限定本发明中的实质和范围。
实施例1
舒更葡糖钠中间体式I化合物及其相关杂质(杂质A、B、C、E、H)的分离：
1.色谱条件：
色谱柱：Kromasil 100-5C18，250mm×4.6mm，5μm，流动相A为水-流动相B(体积比20:80)，流动相B为乙腈-甲醇(体积比20:80)，进行梯度洗脱，梯度洗脱设置如下表1：
表1.梯度洗脱程序
流速：1mL/min，柱温：30℃，进样体积：100μL，检测器：ELSD；55℃。
2.方法与结果：
2.1.溶液配制：
供试品溶液：取舒更葡糖钠中间体(即式I化合物)约15mg，精密称定，至于10mL量瓶，加四氢呋喃3mL，于40℃水浴中超声10min取出立即加甲醇-水(50:50)溶解并稀释至刻度，摇匀；对照品储备液：取舒更葡糖钠中间体(即式I化合物)对照品约15mg，精密称定，至于100mL量瓶，加四氢呋喃30mL，于40℃水浴中超声10min取出立即加甲醇-水(50:50)溶解并稀释至刻度，摇匀；对照品溶液(1)：精密移取对照品储备液1mL置10mL量瓶，加四氢呋喃2mL，加溶剂稀释置刻度，摇匀；对照品溶液(2)：精密移取对照品储备液2mL置10mL量瓶，加四氢呋喃2mL，加溶剂稀释置刻度，摇匀；对照品溶液(3)：精密移取对照品储备液3mL置10mL量瓶，加四氢呋喃2mL，加溶剂稀释置刻度，摇匀。
2.2.专属性：
取式I化合物与杂质A、杂质B、杂质C杂质E、杂质H各适量，用溶剂配制成每1mL含式I化合物约1.5mg及各杂质均约为45μg的溶液，作为系统适用性溶液。精密量取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图，系统适用性溶液结果见附图1，出峰顺序依次为杂质E(4.239min)、杂质A(11.508min)、杂质C(15.062min)、杂质H(26.804min)、式I化合物(28.879min)、杂质B(31.584min)。系统适用性溶液中，式I化合物与相邻杂质峰的分离度为4.3/9.1，保留时间为28.879。
2.3.线性与范围：
取式I化合物及其杂质对照品适量，加稀释剂溶解并稀释制成浓度均为100μg/mL的溶液，作为线性储备液。分别移取储备液1mL置10mL、2mL置10mL、3mL置10mL、4mL置10mL、6mL置10mL量瓶中，用稀释剂稀释至刻度，作为线性供试液。以峰面积的对数值与浓度的对数值进行线性回归，得线性方程，式I化合物及其杂质在线性范围内具有良好的线性关系。
2.4.定量限与检测限：
取式I化合物及其杂质对照品适量，配制成一系列的溶液，S/N约为10时，作为定量限溶液，S/N约为3时，作为检测限溶液式I化合物及其杂质的定量限和检测限结果见表2。
表2.定量限和检测限结果
| 名称 | 检测限(μg/mL) | 信噪比(S/N) | 定量限(μg/mL) | 信噪比(S/N) |
| 式I化合物 | 3.4603 | 3.1 | 11.5345 | 17.8 |
| 杂质A | 1.5017 | 3.6 | 5.0058 | 17.2 |
| 杂质B | 0.6019 | 3.6 | 2.0063 | 17.9 |
| 杂质C | 1.4596 | 2.8 | 4.865 | 12.7 |
| 杂质E | 2.5637 | 3.8 | 8.5458 | 17.8 |
| 杂质H | 5.5698 | 3.0 | 18.5659 | 16.2 |
在该色谱条件下，式I化合物及其杂质可以完全分离，结果均符合中国药典规定的限度内，所得结果稳定可靠。
对比例1
舒更葡糖钠中间体式I化合物及其相关杂质(杂质A、B、C、E、H)的分离：
1.色谱条件：
色谱柱：Kromasil 100-5C18，250mm×4.6mm，5μm，流动相A为水，流动相B为乙腈-甲醇(10:90)，进行梯度洗脱，梯度洗脱设置如下表3：
表3.梯度洗脱程序
其他条件同实施例1。
2.结果：
取供试品溶液进样，色谱图见附图2。
3.结论：
各有关物质整体保留靠后，且式I化合物(RT21.354min)与其相邻杂质H(RT21.058min)不能满足分离度大于1.5的要求，分离效果不好。
对比例2
舒更葡糖钠中间体式I化合物及其相关杂质(杂质A、B、C、E、H)的分离：
1.色谱条件：
色谱柱：Kromasil 100-5C18，250mm×4.6mm，5μm，流动相A为水，流动相B为乙腈-甲醇(20:80)，进行梯度洗脱，梯度洗脱设置如下表4：
表4.梯度洗脱程序
流速：1mL/min，柱温：30℃，进样体积：100μL，检测器：ELSD；55℃。
其他条件同实施例1。
2.结果：
取供试品溶液进样，色谱图见附图3。
3.结论：
式I化合物(RT16.758min)保留时间比较靠前，与其相邻杂质H(RT16.198min)分离较差，未达到基线分离，不适用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法，其特征在于，所述舒更葡糖钠中间体为八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精，所述杂质选自杂质A、杂质B、杂质C、杂质E和杂质H中的一个或多个，杂质具体化学名如下所示：
所述HPLC分离条件为：
色谱柱为C18键合硅胶色谱柱；
采用流动相A与流动相B进行梯度洗脱，所述流动相B为腈类溶剂和醇类溶剂的混合溶剂，所述流动相A为水与流动相B的混合溶剂；
梯度洗脱程序为：
流动相进行洗脱的流速选自0.7-1.3mL/min；柱温选自20-50℃，然后进入检测器进行检测。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述腈类溶剂选自乙腈或丙腈，所述醇类溶剂选自C1-C6烷基醇；所述流动相B中，所述腈类溶剂与所述醇类溶剂的体积比选自10：1-1：10；所述流动相A中，水与所述流动相B的体积比选自10：1-1：10。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述腈类溶剂为乙腈，所述醇类溶剂为甲醇；所述流动相B中，乙腈与甲醇的体积比为1：4；所述流动相A中，水与所述流动相B的体积比为1：4。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述C18键合硅胶色谱柱为Kromasil 100-5C18柱；所述检测器为蒸发光散射检测器ELSD；所述检测器温度选自50-60℃。
6.一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的试剂组合，其特征在于，包含以下试剂：
流动相B：为腈类溶剂和醇类溶剂的混合溶剂；
流动相A：为水与流动相B的混合溶剂；
所述舒更葡糖钠中间体为八(6-溴-6-去氧)-γ-环糊精，所述杂质选自杂质A、杂质B、杂质C，杂质E和杂质H中的一个或多个，所述杂质具体化学名如下所示：
7.根据权利要求6所述的试剂组合，其特征在于，所述腈类溶剂选自乙腈或丙腈，所述醇类溶剂选自C1-C6烷基醇；所述流动相B中，所述腈类溶剂与所述醇类溶剂的体积比选自10：1-1：10；所述流动相A中，水与所述流动相B的体积比选自10：1-1：10。
8.根据权利要求7所述的试剂组合，其特征在于，所述腈类溶剂为乙腈，所述醇类溶剂为甲醇；所述流动相B中，乙腈与甲醇的体积比为1：4；所述流动相A中，水与所述流动相B的体积比为1：4。
9.一种HPLC分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的指纹图谱，其特征在于，
。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2022103318186 | 2022-03-30 | ||
| CN202210331818 | 2022-03-30 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115266968A true CN115266968A (zh) | 2022-11-01 |
Family
ID=83766251
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210816393.8A Pending CN115266968A (zh) | 2022-03-30 | 2022-07-12 | 一种hplc分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115266968A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101716149A (zh) * | 2009-11-30 | 2010-06-02 | 宜昌人福药业有限责任公司 | 一种新的前体药物制剂 |
| US20190284308A1 (en) * | 2016-03-22 | 2019-09-19 | Fresenius Kabi Ipsum S.R.L. | An improved process for the preparation of sugammadex |
| US20190328886A1 (en) * | 2016-10-13 | 2019-10-31 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Compositions comprising a metal source, dithiocarbamate and cyclodextrin |
| CN110554102A (zh) * | 2018-05-30 | 2019-12-10 | 天津科伦药物研究有限公司 | 舒更葡糖钠的检测方法 |
| WO2021233125A1 (zh) * | 2020-05-22 | 2021-11-25 | 合肥博思科创医药科技有限公司 | 一种除去舒更葡糖钠精制品中元素杂质和色素的方法 |
| CN114075301A (zh) * | 2020-08-17 | 2022-02-22 | 四川科伦药物研究院有限公司 | 舒更葡糖钠有关物质及其制备方法和用途 |
-
2022
- 2022-07-12 CN CN202210816393.8A patent/CN115266968A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101716149A (zh) * | 2009-11-30 | 2010-06-02 | 宜昌人福药业有限责任公司 | 一种新的前体药物制剂 |
| US20190284308A1 (en) * | 2016-03-22 | 2019-09-19 | Fresenius Kabi Ipsum S.R.L. | An improved process for the preparation of sugammadex |
| US20190328886A1 (en) * | 2016-10-13 | 2019-10-31 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Compositions comprising a metal source, dithiocarbamate and cyclodextrin |
| CN110554102A (zh) * | 2018-05-30 | 2019-12-10 | 天津科伦药物研究有限公司 | 舒更葡糖钠的检测方法 |
| WO2021233125A1 (zh) * | 2020-05-22 | 2021-11-25 | 合肥博思科创医药科技有限公司 | 一种除去舒更葡糖钠精制品中元素杂质和色素的方法 |
| CN114075301A (zh) * | 2020-08-17 | 2022-02-22 | 四川科伦药物研究院有限公司 | 舒更葡糖钠有关物质及其制备方法和用途 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| TAO ZHUANG等: "Isolation，structural characterization and quality control strategy of an unknown process-related impurity in sugammadex sodium", 《JOURNAL PHARMACEUTICAL BIOMEDICAL ANALYSIS》, 15 April 2021 (2021-04-15) * |
| 刘瑞宁等: "基于全-6-脱氧-6-(4-甲酰苯基)-β-环糊精的一维自组装通道结构构筑的有机框架结构", 《内蒙古大学学报(自然科学版)》, 15 January 2020 (2020-01-15) * |
| 曾垂宇: "盐酸头孢替安的产业化工艺研究", 《上海医药》, 10 August 2018 (2018-08-10) * |
| 杨家亮等: "舒更葡糖钠的合成工艺研究", 《化学工程与装备》, 15 June 2016 (2016-06-15) * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110057932B (zh) | 高效液相色谱分析硫酸特布他林有关物质的方法 | |
| CN110726788A (zh) | 一种高效液相色谱法分离和测定盐酸左西替利嗪及其有关物质的方法 | |
| CN110305106B (zh) | 一种琥珀酸曲格列汀有关物质及其制备方法、分析方法和应用 | |
| CN108061767B (zh) | Hplc法分离测定利伐沙班中间体及其相关杂质的方法 | |
| Jiang et al. | Rapid and sensitive liquid chromatography–tandem mass spectrometry method for the quantitation of colchicine in human plasma | |
| CN109307716B (zh) | 一种依匹哌唑有关物质的检测方法 | |
| CN110865130B (zh) | 一种盐酸奥洛他定及其有关物质的检测方法 | |
| CN115266968A (zh) | 一种hplc分离测定舒更葡糖钠中间体及其杂质的方法 | |
| CN113759048B (zh) | 一种十八烷二酸单叔丁酯检验方法 | |
| CN113820417B (zh) | 一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法 | |
| CN110412164B (zh) | 一种盐酸美西律的有关物质的检测方法 | |
| CN110095554B (zh) | 高效液相色谱分析米力农有关物质的方法 | |
| CN107656005B (zh) | 盐酸厄洛替尼与潜在杂质的分离与测定方法 | |
| CN112362791B (zh) | 一种曲氟尿苷与其异构体的hplc分离方法 | |
| CN110873761A (zh) | 草酸艾司西酞普兰中间体有关物质的气相色谱检测方法 | |
| CN110208397A (zh) | 一种同时测定土霉素氟尼辛注射液中两种主药含量的高效液相色谱法 | |
| CN115541755B (zh) | 一种硝呋太尔片的质量控制方法 | |
| CN115598267B (zh) | 一种格列齐特中潜在遗传毒性杂质的分析方法 | |
| CN112345668B (zh) | 一种分离维格列汀中间体与r型异构体的高效液相色谱方法 | |
| CN111579653B (zh) | 氟康唑有关物质检测方法 | |
| CN114487237B (zh) | 一种3,5-二甲氧基苯甲酸甲酯的检测方法 | |
| CN117269402B (zh) | 一种定量检测人脑脊液中诺西那生的液相质谱联用方法 | |
| CN102565203B (zh) | 一种用液相色谱法分离测定溴甲纳曲酮及其杂质的方法 | |
| CN109655540B (zh) | 一种鲑鱼降钙素喷鼻剂有关物质的分析方法 | |
| CN114689778A (zh) | 高效液相色谱法测定酒石酸伐尼克兰有关物质的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |