CN115250973A - 一种长臀鮠的人工繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种长臀鮠的人工繁殖方法，所述繁殖方法包括亲鱼驯养池的准备、雌性亲鱼的选择、饵料的选择投喂、催产、孵化等步骤。本发明提供的繁殖方法，受精率高，鱼苗孵化出苗率高。
Description
技术领域
本发明属于长臀鮠繁育技术领域，具体涉及一种长臀鮠的人工繁殖方法。
背景技术
长臀鮠(Cranoglanis bouderius)体长，侧扁，背鳍起点为体最高处。头平扁，略呈三角形，背面骨粗糙裸露。吻突出，钝圆。口近端位，弧形，上颌略突出。上颌齿带横列，中间有裂缝；下颌齿带明显，分为左右两块；齿绒状。两鼻孔相隔较远；前鼻孔近吻端，呈短管状；后鼻孔有1发达的鼻须，鼻须一般伸达眼后缘，个别略超过或仅至眼中心。上颌须1对，一般伸达胸鳍刺的1/2-4/5，较小个体可达胸鳍刺的末端。下颌须2对，下颏外侧须一般达胸鳍起点，下颏内侧须可达峡凹部。鳃孔大，鳃膜游离。匙骨后端尖形。体无鳞。侧线直线形。背鳍很高，尖刀形，位于体背前部，硬刺的后缘和前缘的上部具弱锯齿；脂鳍短，后端游离；臀鳍甚很长，臀鳍条26-34；胸鳍位低，后伸不达腹鳍；腹鳍位于背鳍基后，伸达臀鳍；尾鳍尖叉状，体背侧橄榄色，腹侧乳白色。鳍灰白，基部黄色。
生活习性：为亚热带山麓河溪底层鱼类，喜清澈流水环境。善游，性贪食，以虾类、小鱼、底栖水生昆、小型贝类等为主食。长臀鮠原在珠江水系(尤其在广西各江)很习见，最大个体体重可达1公斤。由于其肉味鲜美，含脂肪量较多，原为珠江深受欢迎的主要食用鱼类之一。近数十年来，由于人口骤增，捕捞过度，致使资源量明显减少。分布于广西的左江、右江、红水河、邑江、郁江、黔江、浔江、西江、桂江，广东的北江，贵州的南盘江。海南岛与云南元江另有一亚种。长臀鮠曾为产区的重要经济鱼类。由于人工繁育技术还不成熟，加上过度捕捞，现数量稀少。
近年来，由于珠江生态环境的变化，其资源量呈下降趋势，为保护此种珠江特有鱼类资源，开展人工养殖是目前我国采取的主要措施之一。批量生产长臀鮠苗种是开展人工养殖的前提条件，长臀鮠的人工繁殖技术是目前开展其人工养殖的关键。长臀鮠的人工繁殖技术尚处于研究阶段，采用的主要方法是野外采集的鱼苗进行养殖，市场上人工繁殖的鱼苗基本没有；在进行人工繁殖时，亲鱼只能进行人工授精，由于雄鱼精巢为放射分枝状，根本无法挤出精液，要靠杀雄鱼将精巢碾碎才能得到精液，但由于人工驯养的成熟亲鱼较少，在野外收集的成熟亲鱼又具偶然性，往往收集到了发育较好的雌鱼又找不到好的雄鱼配对，导致无法催产繁殖。即使有雄鱼，在对雌鱼进行催产繁殖时将雄鱼杀死，也不能保证精子的质量，也可能造成繁殖失败。
现有技术中，期刊文献(张竹青,周路,杨凯,等.长臀鮠的人工繁殖试验[J].贵州农业科学,2012,40(5):3.)报道了长臀鮠的人工繁殖试验，其中受精卵不足70％；专利文献CN107047540B提供了一种一种长臀鮠精液超低温保存方法及其稀释液，但是其使用到的保存液成分较为复杂，使用到了硫酸新霉素和链霉素复合剂。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种长臀鮠的人工繁殖方法，方法简单，受精率高，鱼苗孵化出苗率高。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种长臀鮠的人工繁殖方法，包括如下步骤：
(1)亲鱼驯养池的准备：驯养池的池壁和池底贴上防滑瓷砖，进水口、排水口开设在驯养池长方形方向的两端，进水口为顶进，排水口为底排；驯养池底部横向方向上放置两个陶瓷坛，用PVC管与两个陶瓷坛底部一侧相连接，使水流经陶瓷坛；陶瓷坛内铺上一层鹅卵石，陶瓷坛大小能使2～3尾鱼在坛中自由活动，陶瓷坛肚大口小，陶瓷坛的口大小不影响亲鱼自由进出即可；培育过程中，全程开启进水阀，进水大小使陶瓷坛内有流水即可；
(2)雌性亲鱼的选择：选择长臀鮠亲鱼作为催产繁殖的亲本，保证雌鱼个体1.5kg以上，且体表光滑无外伤、体型较好；
(3)饵料的选择投喂：每天两次投喂饵料，饵料以沉性鲟鱼料或鳗鱼料为主，搅碎的肉糜为辅，拌少量红球藻提取物；投喂时间为早上七点前、晚上六点后；
(4)亲鱼催熟：在每年的2月份开始，对雌性亲鱼进行催熟，每月注射一次LRH-A3；在催产繁殖前一个月，隔半个月注射一次LRH-A3和PG的混合物；
(5)催产：到每年六月中旬，水温达到26℃以上时，开始检查亲鱼发育情况，挑选发育较好的雌性亲鱼进行催产，催产后单独放入催产池中，催产池按照步骤(1)中驯养池的方式进行设置；每个催产池放亲鱼4～8条，注射LRH-A3、PG和HCG的混合物进行催产；注射催产剂后，于白天每6～12h检查一下，发现鱼卵后捞出雌鱼，擦干，挤出鱼卵至塑料盆中；同时，将保存好的雄性亲鱼精液解冻后快速加入塑料盆中，用羽毛轻轻搅拌，加入少许清水激活，静置后完成受精，统计受精卵卵粒数量；
(6)孵化：将步骤(5)中得到的受精卵用羽毛均匀平铺在孵化框中，随后放进孵化槽内进行流水或淋水孵化；孵化时受精卵脱膜前孵化槽内水体交换率为8～12次/d，脱膜后交换率为3～8次/d，脱膜后在孵化槽发育至仔鱼鳔充气后即可进行苗种培育。
优选的，步骤(1)中，驯养池为长方形水泥池，池水深1.5米以上。
优选的，步骤(3)中，肉糜由小杂鱼经清洗沥干后粉碎得到。
优选的，步骤(3)中，每次饵料投喂量为鱼体重的1.5～2.5％；饵料中，肉糜的质量占比为1～5％，红球藻提取物的质量占比为0.1～0.6％，余量为鲟鱼料或鳗鱼料。
优选的，步骤(3)中，红球藻提取物添加至肉糜中，搅拌均匀进行投喂。
优选的，步骤(4)中，每月注射时，注射剂量为0.5ug/kg亲鱼；隔半个月注射时，注射剂量为：LRH-A3 1ug+PG 1mg/kg亲鱼。
优选的，步骤(5)中，催产药物的剂量为LRH-A3 8～10ug+PG 5～8mg+HCG 1000～1200IU/kg。
优选的，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻前的保存方法为：取个体1.2kg以上的长臀鮠雄鱼，宰杀后取出精巢，将精巢剪碎后得到的精液磨成浆状；接着，将精子活力大于90％的精液留存，加入8～15倍精液质量的保存液；随后，先于4℃下平衡0.5～1h，后于液氮上方熏蒸5～20min，最后放入液氮中进行冷冻保存；其中，保存液的组成为：0.25mol/L葡萄糖、7％甘油、13％蛋黄和KCl 1.5g/L。
优选的，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻的方法为：向冷冻保存的雄性亲鱼精液中加入3～5倍精液质量的PBS缓冲液，于30℃下快速解冻；其中，PBS缓冲液的体积分数为0.7％。
优选的，步骤(1)～步骤(6)中均在循环水养殖系统下进行。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
(1)本发明提供的一种长臀鮠的人工繁殖方法，受精率高，鱼苗孵化出苗率高。
(2)本发明提供的一种长臀鮠的人工繁殖方法，所使用到的驯化池和催产池通过设置瓷砖、陶瓷坛并铺设鹅卵石，最大程度地营造仿野外环境，降低亲鱼的应激性。
(3)本发明在亲鱼喂养阶段，饲料以鲟鱼料或鳗鱼料为主，辅助添加了肉糜和极少量的红球藻提取物，能够在一定程度上促进雌性亲鱼的性腺发育，最终提高了产卵量，提高了受精率和鱼苗存活率；其中，肉糜所带有的鱼腥味可以提高亲鱼的吃食欲望，降低饵料浪费，而小杂鱼肉糜所含蛋白质含量高，能够提供亲鱼生长发育所需的营养成分。
(4)本发明亲鱼的精液首先进行冷冻保藏，解冻方法简单，及时地满足了雌性亲鱼排卵时受精的需要，提高了受精的质量；其中，保存液的组成为：0.25mol/L葡萄糖、7％甘油、13％蛋黄和KCl 1.5g/L，其各组分的用量是经过了发明人反复试验确认得到的；上述组分中，甘油是能够渗透到细胞水中使细胞脱水，弱化水的结晶作用，达到冷冻保存的效果；葡萄糖所起到的作用是提供足够的渗透压；KCl所起到的作用是抑制精子的激活；蛋黄所起到的作用是降低冷冻环境对精子的损伤。上述各物质作用明确，共同作用，起到了较好的冷冻保存效果。
具体实施方式
为了使本发明的发明目的、技术方案和发明优势更加清楚阐述，以下将结合说明书实施例对本发明做进一步详细讲解。
需要特别强调的是，本发明中使用的循环水系统是武汉中科瑞华生态科技股份有限公司开发的专利产品(专利号：201720983333X)，该系统包括潜水泵，转盘过滤器，湿式生物球过滤器，雨淋式曝气式生物过滤器，紫外线消毒器，热泵型冷热机组等，所述循环水养殖系统原理为：养殖用水经过养殖缸使用后依次经过滚筒式微孔过滤器和转盘式微孔过滤器，过滤水中残饵粪便；然后流经湿式生物球过滤器和雨淋式曝气式生物过滤器，通过微生物分解作用，将水体中有机物分解；最后经过紫外线消毒器杀菌处理回到养殖缸使用。该系统可实现养殖用水反复的使用，节约用水；同时可以增加养殖密度，同时减少鱼类疾病爆发。本申请不再对这部分进行具体描述。
本发明中的鲟鱼料、鳗鱼料、红球藻提取物以及其他使用到的化合物均购买自市场。
其中，红球藻提取物购买自西安天一生物技术股份有限公司。
实施例1
一种长臀鮠的人工繁殖方法，包括如下步骤：
(1)亲鱼驯养池的准备：选择长3.2m、宽2.4m、深2m的水泥池作为驯养池，驯养池的池壁和池底贴上防滑瓷砖，进水口、排水口开设在驯养池长方形方向的两端，进水口为顶进，排水口为底排；驯养池底部横向方向上放置两个陶瓷坛(陶瓷坛高70cm、坛口直径30cm、容量45kg)，用PVC管与两个陶瓷坛底部一侧相连接，使水流经陶瓷坛；陶瓷坛内铺上一层鹅卵石，陶瓷坛大小能使2～3尾鱼在坛中自由活动，陶瓷坛肚大口小，陶瓷坛的口大小不影响亲鱼自由进出即可；培育过程中，全程开启进水阀，进水大小使陶瓷坛内有流水即可；
(2)雌性亲鱼的选择：2020年年底，在市场上购买8条长臀鮠雌鱼作为催产繁殖的亲本，平均重量2.4kg，且体表光滑无外伤、体型较好；
(3)饵料的选择投喂：每天两次投喂饵料，饵料以沉性鲟鱼料为主，搅碎的肉糜为辅；同时，将红球藻提取物添加至肉糜中，搅拌均匀进行投喂；投喂时间为早上七点、晚上八点；其中，每次饵料投喂量为鱼体重的2％；饵料中，肉糜的质量占比为3％，红球藻提取物的质量占比为0.2％，余量为鲟鱼料；所述肉糜由小杂鱼经清洗沥干后粉碎得到；
(4)亲鱼催熟：2021年2月份开始，对雌性亲鱼进行催熟，每月注射一次LRH-A3，注射剂量为0.5ug/kg亲鱼；在催产繁殖前一个月，隔半个月注射一次LRH-A3和PG的混合物；注射剂量为：LRH-A3 1ug+PG 1mg/kg亲鱼；
(5)催产：2021年6月18日，水温达到26℃以上，开始检查亲鱼发育情况，挑选发育较好的雌性亲鱼进行催产，催产后单独放入催产池中，催产池为长350cm、宽120cm、深120cm的水泥池，其余按照步骤(1)中驯养池的方式进行设置(如设置陶瓷坛等)；每个催产池放亲鱼4条，注射LRH-A3、PG和HCG的混合物进行催产，剂量为LRH-A3 9ug+PG 6mg+HCG 1000IU/kg；注射催产剂后，于白天每6h检查一下，发现鱼卵后捞出雌鱼，擦干，挤出鱼卵至塑料盆中；同时，将保存好的雄性亲鱼精液解冻后快速加入塑料盆中，用羽毛轻轻搅拌，精液加入量为雌性亲鱼产卵数的2倍；随后加入少许清水激活，静置后完成受精，并统计受精卵卵粒数量；8条雌性亲鱼均产卵，产卵率100％，8条亲鱼共产卵3.4万粒左右，受精卵卵粒数量为2.84万粒左右，受精卵为83.5％；
(6)孵化：将步骤(5)中得到的受精卵用羽毛均匀平铺在孵化框中，随后放进孵化槽内进行流水或淋水孵化；孵化时受精卵脱膜前孵化槽内水体交换率为9次/d，脱膜后交换率为4次/d，脱膜后在孵化槽发育至仔鱼鳔充气后即可进行苗种培育；共孵化出小鱼苗2.45万尾，孵化率86.3％。
其中，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻前的保存方法为：于2021年年初，取16条平均质量在2.6kg左右的长臀鮠雄鱼，宰杀后取出精巢，将精巢剪碎后得到的精液磨成浆状；接着，将精子活力大于90％的精液留存，加入8倍精液质量的保存液；随后，先于4℃下平衡0.5h，后于液氮上方熏蒸6min，最后放入液氮中进行冷冻保存；其中，保存液的组成为：0.25mol/L葡萄糖、7％甘油、13％蛋黄和KCl 1.5g/L。
其中，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻的方法为：向冷冻保存的雄性亲鱼精液中加入4倍精液质量的PBS缓冲液，于30℃下快速解冻；其中，PBS缓冲液的体积分数为0.7％。
其中，步骤(1)～步骤(6)中均在循环水养殖系统下进行。
实施例2
一种长臀鮠的人工繁殖方法，包括如下步骤：
(1)亲鱼驯养池的准备：选择长3.2m、宽2.4m、深2m的水泥池作为驯养池，驯养池的池壁和池底贴上防滑瓷砖，进水口、排水口开设在驯养池长方形方向的两端，进水口为顶进，排水口为底排；驯养池底部横向方向上放置两个陶瓷坛(陶瓷坛高70cm、坛口直径30cm、容量45kg)，用PVC管与两个陶瓷坛底部一侧相连接，使水流经陶瓷坛；陶瓷坛内铺上一层鹅卵石，陶瓷坛大小能使2～3尾鱼在坛中自由活动，陶瓷坛肚大口小，陶瓷坛的口大小不影响亲鱼自由进出即可；培育过程中，全程开启进水阀，进水大小使陶瓷坛内有流水即可；
(2)雌性亲鱼的选择：2020年年底，在市场上购买8条长臀鮠雌鱼作为催产繁殖的亲本，平均重量2.4kg，且体表光滑无外伤、体型较好；
(3)饵料的选择投喂：每天两次投喂饵料，饵料以沉性鲟鱼料为主，搅碎的肉糜为辅；同时，将红球藻提取物添加至肉糜中，搅拌均匀进行投喂；投喂时间为早上七点、晚上八点；其中，每次饵料投喂量为鱼体重的2.1％；饵料中，肉糜的质量占比为3.4％，红球藻提取物的质量占比为0.3％，余量为鲟鱼料；所述肉糜由小杂鱼经清洗沥干后粉碎得到；
(4)亲鱼催熟：2021年2月份开始，对雌性亲鱼进行催熟，每月注射一次LRH-A3，注射剂量为0.5ug/kg亲鱼；在催产繁殖前一个月，隔半个月注射一次LRH-A3和PG的混合物；注射剂量为：LRH-A3 1ug+PG 1mg/kg亲鱼；
(5)催产：2021年6月16日，水温达到26℃以上，开始检查亲鱼发育情况，挑选发育较好的雌性亲鱼进行催产，催产后单独放入催产池中，催产池为长350cm、宽120cm、深120cm的水泥池，其余按照步骤(1)中驯养池的方式进行设置(如设置陶瓷坛等)；每个催产池放亲鱼4条，注射LRH-A3、PG和HCG的混合物进行催产，剂量为LRH-A3 8ug+PG 7mg+HCG 1100IU/kg；注射催产剂后，于白天每6h检查一下，发现鱼卵后捞出雌鱼，擦干，挤出鱼卵至塑料盆中；同时，将保存好的雄性亲鱼精液解冻后快速加入塑料盆中，用羽毛轻轻搅拌，精液加入量为雌性亲鱼产卵数的1.8倍；随后加入少许清水激活，静置后完成受精，并统计受精卵卵粒数量；8条雌性亲鱼均产卵，产卵率100％，8条亲鱼共产卵3.41万粒左右，受精卵卵粒数量为2.86万粒左右，受精卵为83.9％；
(6)孵化：将步骤(5)中得到的受精卵用羽毛均匀平铺在孵化框中，随后放进孵化槽内进行流水或淋水孵化；孵化时受精卵脱膜前孵化槽内水体交换率为10次/d，脱膜后交换率为5次/d，脱膜后在孵化槽发育至仔鱼鳔充气后即可进行苗种培育；共孵化出小鱼苗2.49万尾，孵化率87％。
其中，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻前的保存方法和解冻方法同实施例1。
其中，步骤(1)～步骤(6)中均在循环水养殖系统下进行。
对比例1
一种长臀鮠的人工繁殖方法，包括如下步骤：
(1)亲鱼驯养池的准备：选择长3.2m、宽2.4m、深2m的水泥池作为驯养池，驯养池的池壁和池底贴上防滑瓷砖，进水口、排水口开设在驯养池长方形方向的两端，进水口为顶进，排水口为底排；驯养池底部横向方向上放置两个陶瓷坛(陶瓷坛高70cm、坛口直径30cm、容量45kg)，用PVC管与两个陶瓷坛底部一侧相连接，使水流经陶瓷坛；陶瓷坛内铺上一层鹅卵石，陶瓷坛大小能使2～3尾鱼在坛中自由活动，陶瓷坛肚大口小，陶瓷坛的口大小不影响亲鱼自由进出即可；培育过程中，全程开启进水阀，进水大小使陶瓷坛内有流水即可；
(2)雌性亲鱼的选择：2020年年底，在市场上购买8条长臀鮠雌鱼作为催产繁殖的亲本，平均重量2.4kg，且体表光滑无外伤、体型较好；
(3)饵料的选择投喂：每天两次投喂饵料，饵料以沉性鲟鱼料为主，搅碎的肉糜为辅；投喂时间为早上七点、晚上八点；其中，每次饵料投喂量为鱼体重的2％；饵料中，肉糜的质量占比为3％，余量为鲟鱼料；所述肉糜由小杂鱼经清洗沥干后粉碎得到；
(4)亲鱼催熟：2021年2月份开始，对雌性亲鱼进行催熟，每月注射一次LRH-A3，注射剂量为0.5ug/kg亲鱼；在催产繁殖前一个月，隔半个月注射一次LRH-A3和PG的混合物；注射剂量为：LRH-A3 1ug+PG 1mg/kg亲鱼；
(5)催产：2021年6月21日，水温达到26℃以上，开始检查亲鱼发育情况，挑选发育较好的雌性亲鱼进行催产，催产后单独放入催产池中，催产池为长350cm、宽120cm、深120cm的水泥池，其余按照步骤(1)中驯养池的方式进行设置(如设置陶瓷坛等)；每个催产池放亲鱼4条，注射LRH-A3、PG和HCG的混合物进行催产，剂量为LRH-A3 9ug+PG 6mg+HCG 1000IU/kg；注射催产剂后，于白天每6h检查一下，发现鱼卵后捞出雌鱼，擦干，挤出鱼卵至塑料盆中；同时，将保存好的雄性亲鱼精液解冻后快速加入塑料盆中，用羽毛轻轻搅拌，精液加入量为雌性亲鱼产卵数的2倍；随后加入少许清水激活，静置后完成受精，并统计受精卵卵粒数量；7条雌性亲鱼产卵，产卵率87.5％，8条亲鱼共产卵2.9万粒左右，受精卵卵粒数量为2.28万粒左右，受精卵为78.6％；
(6)孵化：将步骤(5)中得到的受精卵用羽毛均匀平铺在孵化框中，随后放进孵化槽内进行流水或淋水孵化；孵化时受精卵脱膜前孵化槽内水体交换率为9次/d，脱膜后交换率为4次/d，脱膜后在孵化槽发育至仔鱼鳔充气后即可进行苗种培育；共孵化出小鱼苗1.83万尾，孵化率80.3％。
其中，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻前的保存方法为：于2021年年初，取个体1.2kg以上的15条长臀鮠雄鱼，宰杀后取出精巢，将精巢剪碎后得到的精液磨成浆状；接着，将精子活力大于90％的精液留存，加入8倍精液质量的保存液；随后，先于4℃下平衡0.5h，后于液氮上方熏蒸6min，最后放入液氮中进行冷冻保存；其中，保存液的组成为：0.25mol/L葡萄糖、7％甘油、13％蛋黄和KCl 1.5g/L。
其中，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻的方法为：向冷冻保存的雄性亲鱼精液中加入4倍精液质量的PBS缓冲液，于30℃下快速解冻；其中，PBS缓冲液的体积分数为0.7％。
其中，步骤(1)～步骤(6)中均在循环水养殖系统下进行。
以上说明描述本发明中较佳的实施方式，不应将其看作为是对本发明权利要求保护范围的限制。在不脱离本发明原理和思想的情况下，任何修改、等效替换及改进，都应视为在本发明权利要求保护范围之内。
Claims (10)
1.一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)亲鱼驯养池的准备：驯养池的池壁和池底贴上防滑瓷砖，进水口、排水口开设在驯养池长方形方向的两端，进水口为顶进，排水口为底排；驯养池底部横向方向上放置两个陶瓷坛，用PVC管与两个陶瓷坛底部一侧相连接，使水流经陶瓷坛；陶瓷坛内铺上一层鹅卵石，陶瓷坛大小能使2～3尾鱼在坛中自由活动，陶瓷坛肚大口小，陶瓷坛的口大小不影响亲鱼自由进出即可；培育过程中，全程开启进水阀，进水大小使陶瓷坛内有流水即可；
(2)雌性亲鱼的选择：选择长臀鮠亲鱼作为催产繁殖的亲本，保证雌鱼个体1.5kg以上，且体表光滑无外伤、体型较好；
(3)饵料的选择投喂：每天两次投喂饵料，饵料以沉性鲟鱼料或鳗鱼料为主，搅碎的肉糜为辅，拌少量红球藻提取物；投喂时间为早上七点前、晚上六点后；
(4)亲鱼催熟：在每年的2月份开始，对雌性亲鱼进行催熟，每月注射一次LRH-A3；在催产繁殖前一个月，隔半个月注射一次LRH-A3和PG的混合物；
(5)催产：到每年六月中旬，水温达到26℃以上时，开始检查亲鱼发育情况，挑选发育较好的雌性亲鱼进行催产，催产后单独放入催产池中，催产池按照步骤(1)中驯养池的方式进行设置；每个催产池放亲鱼4～8条，注射LRH-A3、PG和HCG的混合物进行催产；注射催产剂后，于白天每6～12h检查一下，发现鱼卵后捞出雌鱼，擦干，挤出鱼卵至塑料盆中；同时，将保存好的雄性亲鱼精液解冻后快速加入塑料盆中，用羽毛轻轻搅拌，加入少许清水激活，静置后完成受精，统计受精卵卵粒数量；
(6)孵化：将步骤(5)中得到的受精卵用羽毛均匀平铺在孵化框中，随后放进孵化槽内进行流水或淋水孵化；孵化时受精卵脱膜前孵化槽内水体交换率为8～12次/d，脱膜后交换率为3～8次/d，脱膜后在孵化槽发育至仔鱼鳔充气后即可进行苗种培育。
2.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中，驯养池为长方形水泥池，池水深1.5米以上。
3.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中，肉糜由小杂鱼经清洗沥干后粉碎得到。
4.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中，每次饵料投喂量为鱼体重的1.5～2.5％；饵料中，肉糜的质量占比为1～5％，红球藻提取物的质量占比为0.1～0.6％，余量为鲟鱼料或鳗鱼料。
5.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(3)中，红球藻提取物添加至肉糜中，搅拌均匀进行投喂。
6.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(4)中，每月注射时，注射剂量为0.5ug/kg亲鱼；隔半个月注射时，注射剂量为：LRH-A3 1ug+PG 1mg/kg亲鱼。
7.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(5)中，催产药物的剂量为LRH-A3 8～10ug+PG 5～8mg+HCG 1000～1200IU/kg。
8.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻前的保存方法为：取个体1.2kg以上的长臀鮠雄鱼，宰杀后取出精巢，将精巢剪碎后得到的精液磨成浆状；接着，将精子活力大于90％的精液留存，加入8～15倍精液质量的保存液；随后，先于4℃下平衡0.5～1h，后于液氮上方熏蒸5～20min，最后放入液氮中进行冷冻保存；其中，保存液的组成为：0.25mol/L葡萄糖、7％甘油、13％蛋黄和KCl 1.5g/L。
9.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(5)中，雄性亲鱼精液解冻的方法为：向冷冻保存的雄性亲鱼精液中加入3～5倍精液质量的PBS缓冲液，于30℃下快速解冻；其中，PBS缓冲液的体积分数为0.7％。
10.根据权利要求1所述的一种长臀鮠的人工繁殖方法，其特征在于，步骤(1)～步骤(6)中均在循环水养殖系统下进行。
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