CN115154515A - 治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药制备技术领域,具体涉及一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物及其制备方法和应用。其包括动物肝脏活性提取物和中药活性提取物,所述中药活性提取物包括茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物及紫苏提取物,所述动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的质量百分比为1:1‑3:1‑4:1‑5:1‑3:1‑3。本发明通过简单的、活性追踪的方法提取中药提取物及动物肝脏活性成分制得组合物,用于治疗、缓解胃溃疡、胃损伤有非常显著的作用,特别是针对乙醇或阿司匹林所致的胃溃疡、胃损伤,组合物的药效作用比单一使用中药提取物或动物肝脏活性提取物更好。
Description
技术领域
本发明属于医药制备技术领域,具体涉及一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物及其制备方法和应用。
背景技术
胃溃疡是全球范围内最常见的慢性胃肠道功能紊乱性疾病之一,发病率高达10%。胃溃疡是一种多因素、多途径参与的多发性疾病,其主要临床表现有长期发作的周期性,节律性上腹部疼痛,并伴有恶心、呕吐、反胃、嗳气、泛酸等一系列胃肠道症状。快速的生活节奏、巨大的生活、工作压力使得饮酒已成为人们日常生活的一部分,但过量饮酒会导致胃粘膜损伤、胃溃疡。酒中的主要成分乙醇可溶于脂质进入胃壁,导致胃粘膜损伤、通透性增加,出现胃粘膜充血、胃粘膜糜烂出血等,严重者会导致胃穿孔、消化道大出血等,严重威胁患者的生命安全。
胃溃疡、胃损伤的治疗以药物为主,包括化学药物和中药,但治疗难度大。化学药物主要有甲硝唑、西咪替丁、硫酸铝、阿莫西林、奥美拉唑等,中药则多为复方制剂。其中,相对于化学药,中药复方治疗胃溃疡有更高的安全性,中药复方中的活性成分还具有协同增效的作用。
对中药天然产物进行提取、分离,用于酒精性胃损伤的治疗,是开发护胃、抗胃溃疡功能食品、药品的重要方法。因此开发一种含中药活性成分,且保护效果较好的治疗胃溃疡、胃损伤组合物具有较好的市场前景。
发明内容
本发明的目的是要提供一种采用中药活性成分、副作用小、疗效独特、安全的治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物及其制备方法和应用。
为了解决上述技术问题,本发明采取的技术方案如下:
一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物,其包括动物肝脏活性提取物和中药活性提取物,所述中药活性提取物包括茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物及紫苏提取物,所述动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的质量百分比为1:1-3:1-4:1-5:1-3:1-3。
上述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物,其所述动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的质量百分比为1:2:2:5:2:2。
上述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物,其所述动物肝脏活性提取物为牛肝脏活性提取物,所述牛肝脏活性提取物的分子量小于等于10kD。
一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其包括:
(1)制备动物肝脏活性提取物;
(2)制备中药活性提取物;
(3)按质量百分比称取上述的动物肝脏活性提取物和中药活性提取物混合均匀,动物肝脏活性提取物和中药活性提取物的质量百分比为1:5-18,即制得所述的治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物。
上述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其所述动物肝脏活性提取物的制备方法如下:将新鲜动物肝脏粉碎、冻干,冻干粉与无水丙酮混合,搅拌1-2h,脱脂,4℃旋蒸,除去丙酮,脱脂肝脏活性提取物与水混合超声提取1-3h,脱脂肝脏活性提取物与水的质量百分比为1:1-10,透析膜透析,冻干透析液得肝脏活性提取物。
上述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其所述动物肝脏活性提取物制备时,所用透析袋的透析膜孔径为小于等于10kD。
上述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其所述中药活性提取物的制备方法如下:将中药粉末在乙醇溶剂中超声提取1-3h,浓缩提取液得中药提取物,将中药提取物经硅胶柱色谱,乙酸乙酯、乙醇洗脱,基于构建的乙醇急性胃损伤小鼠模型,筛选得中药活性提取物乙酸乙酯洗脱组分、乙醇洗脱组分。
上述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其所述中药活性提取物制备时乙醇溶剂的质量分数为50%-75%。
一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的应用,其所述中药粉末和乙醇溶剂的质量体积比为1g:(5-10)mL。
上述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的应用,其适用于乙醇或阿司匹林所致的慢性胃溃疡、胃损伤。
有益效果:
本发明通过简单的、活性追踪的方法提取中药提取物及动物肝脏活性成分,然后将活性成分进行组合得到其组合物。将此组合物用于治疗、缓解胃溃疡、胃损伤有非常显著的作用,特别是针对乙醇或阿司匹林所致的胃溃疡、胃损伤,组合物的药效作用比单一使用中药提取物或动物肝脏活性提取物更好。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明技术方案进行清楚、完整地描述。显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明的组合物包括动物肝脏活性提取物和中药活性提取物,动物肝脏活性提取物为牛肝脏活性提取物,牛肝脏活性提取物的分子量小于等于10kD。中药活性提取物包括茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物及紫苏提取物,所述动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的质量百分比为1:2:2:5:2:2。
本发明的制备方法如下:
(1)制备中药活性提取物:
茯苓提取物的制备
取茯苓粉碎,称取200g放入锥形瓶,加入60%乙醇1L,超声提取2h,收集提取液,过滤,减压回收乙醇,得粘稠状茯苓乙醇提取物59.2g。400g 200-300目硅胶装柱,取茯苓乙醇提取物30g上样,选用乙酸乙酯或乙醇洗脱,得茯苓提取物-乙酸乙酯洗脱组分或茯苓提取物-乙醇洗脱组分待用。构建乙醇急性胃损伤小鼠模型,评价茯苓提取物-乙酸乙酯洗脱组分、茯苓提取物-乙醇洗脱组分保护活性。实验结果显示,茯苓提取物-乙醇洗脱组分保护活性最佳。
陈皮提取物的制备
取陈皮粉碎,称取200g放入锥形瓶,加入60%乙醇1L,超声提取2h,收集提取液,过滤,减压回收乙醇,得粘稠状陈皮乙醇提取物36.2g。400g 200-300目硅胶装柱,陈皮乙醇提取物20g上样,乙酸乙酯或乙醇洗脱,得陈皮提取物-乙酸乙酯洗脱组分或陈皮提取物-乙醇洗脱组分待用。构建乙醇急性胃损伤小鼠模型,评价陈皮提取物-乙酸乙酯洗脱组分、陈皮提取物-乙醇洗脱组分保护活性。实验结果显示,陈皮提取物-乙酸乙酯洗脱组分保护活性最佳。
葛根提取物的制备
取葛根粉碎,称取200g放入锥形瓶,加入50%乙醇1.5L,超声提取2h,收集提取液,过滤,减压回收乙醇,得白色葛根乙醇提取物18.1g。400g 200-300目硅胶装柱,葛根乙醇提取物10g上样,乙酸乙酯或乙醇洗脱,得葛根提取物-乙酸乙酯洗脱组分或葛根提取物-乙醇洗脱组分待用。构建乙醇急性胃损伤小鼠模型,评价葛根提取物-乙酸乙酯洗脱组分、葛根提取物-乙醇洗脱组分。实验结果显示,葛根提取物-水洗脱组分保护活性最佳。
党参提取物的制备
取党参粉碎,称取200g放入锥形瓶,加入50%乙醇1.2L,超声提取1.5h,收集提取液,过滤,减压回收乙醇,得粘稠党参乙醇提取物59.3g。300g 300-400目硅胶装柱,党参乙醇提取物20g上样,乙酸乙酯或乙醇洗脱,得党参提取物-乙酸乙酯洗脱组分或党参提取物-乙醇洗脱组分待用。构建乙醇急性胃损伤小鼠模型,评价党参提取物-乙酸乙酯洗脱组分、党参提取物-乙醇洗脱组分保护活性。实验结果显示,党参提取物-水洗脱组分保护活性最佳。
紫苏提取物的制备
取紫苏粉碎成,称取300g放入锥形瓶,加入50%乙醇1.4L,超声提取2.5h,收集提取液,过滤,减压回收乙醇,得紫黑色糊状紫苏乙醇提取物28.4g。200g 200-300目硅胶装柱,紫苏乙醇提取物15g上样,乙酸乙酯或乙醇洗脱,得紫苏提取物-乙酸乙酯洗脱组分、紫苏提取物-乙醇洗脱组分待用。构建乙醇急性胃损伤小鼠模型,评价紫苏提取物-乙酸乙酯洗脱组分、紫苏提取物-乙醇洗脱组分保护活性。实验结果显示,紫苏提取物-乙酸乙酯脱组分保护活性最佳。
(2)制备动物肝脏活性提取物;
取新鲜动物牛肝脏200g粉碎,冻干,冻干粉与无水丙酮混合,搅拌1-2h,脱脂,4℃旋蒸,除去丙酮。脱脂肝脏活性提取物与水混合超声提取1-3h,脱脂肝脏活性提取物与水的质量百分比1:1-10,优选1:4,孔径小于等于10kD的透析膜透析,冻干透析膜外分子量小于10kD水溶液部分组分,得牛肝脏活性提取物。构建乙醇急性胃损伤小鼠模型,筛选肝脏活性提取物保护活性。实验结果显示,牛肝脏活性提取物分子量<10kD的保护活性最佳。
在接下来的实施例中我们将茯苓提取物-乙醇洗脱组分记为茯苓提取物,陈皮提取物-乙酸乙酯洗脱组分记为茯苓提取物,葛根提取物-水洗脱组分记为葛根提取物,党参提取物-水洗脱组分记为党参提取物,紫苏提取物-乙酸乙酯脱组分记为紫苏提取物,牛肝脏活性提取物记为动物肝脏活性提取物。
(3)组合物的制备
动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物,具体配方如下:
配方:动物肝脏活性提取物1g,茯苓提取物2g,陈皮提取物2g,葛根提取物5g,党参提取物2g,紫苏提取物2g。按照上述的步骤(1)(2)进行动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的制备,将制备好的提取物按照上述配方比进行混合均匀,制得本发明的组合物。
本发明对缓解乙醇胃损伤的应用
取小鼠54只,雌雄各27只,随机分为9组,每组6只,分别为空白组、模型组、动物肝脏活性提取物组、茯苓提取物组、陈皮提取物组、葛根提取物组、党参提取物组、紫苏提取物组和本发明的含动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物组。空白组、模型组给予等体积的0.75%NaCl溶液,动物肝脏活性提取物组给予本发明的动物肝脏活性提取物5mg/kg、茯苓提取物组给予本发明的茯苓提取物5mg/kg、陈皮提取物组给予本发明的陈皮提取物5mg/kg、葛根提取物组给予本发明的葛根提取物5mg/kg、党参提取物组给予本发明的党参提取物5mg/kg、紫苏提取物组给予本发明的紫苏提取物5mg/kg和本发明的含动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物组给予本发明的动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物5mg/kg;提取物均混悬于0.75%NaCl溶液中,每天灌胃给药一次,连续7天。末次给药1h后,各组大鼠灌胃给予50%乙醇300μL。乙醇损伤1h后,处死小鼠,进行胃损伤的检查。
大鼠解剖后,取出全胃,生理盐水冲洗,浸入2%福尔马林溶液中固定10min,然后在显微镜下测定胃溃疡面积,损伤面积总和为面积损伤指数(mm2)。损伤抑制百分率按以下公式计算:损伤抑制率(%)=100%×(模型组损伤指数平均值-实验组损伤指数平均值)/模型组损伤指数平均值,得到如表1所示的抑制效果:
表1动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物对乙醇所致急性胃损伤的抑制效果
由表1可看出,通过将动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合,然后用于治疗乙醇所致急性胃损伤,其抑制率达到了86.2%,其比单独使用动物肝脏活性提取物或中药活性提取物效果显著很多。
表2动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物对乙醇所致胃损伤模型血清SOD、MDA、GSH-PX及NO的影响
酒精灌胃1h后对小鼠进行眼球取血,参考使用说明,ELISA试剂盒检测各组小鼠血清MDA、NO、GSH-PX和SOD含量。
由表2可看出,与空白对照组相比,模型组SOD、GSH-PX含量显著下降,而MDA、NO含量显著升高,说明饮酒导致小鼠受到严重的氧化应激、氧化损伤及一定的炎性损伤。而通过将动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗,与模型组相比,SOD、GSH-PX含量显著增加,MDA、NO含量显著降低。且动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗比单独使用动物肝脏活性提取物或中药活性提取物效果显著。
表3动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物对乙醇所致胃损伤模型胃组织SOD、MDA及NO的影响
酒精灌胃1h后对小鼠进行脱颈处死,取胃。参考使用说明,ELISA试剂盒检测各组小鼠胃组织中MDA、NO和SOD含量。
由表3可看出,与空白对照组相比,模型组SOD含量显著下降,而MDA、NO含量显著升高,说明饮酒导致小鼠受到严重的氧化应激、氧化损伤及一定的炎性损伤。而通过将动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗,与模型组相比,SOD含量显著增加,MDA、NO含量显著降低;动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗比单独使用动物肝脏活性提取物或中药活性提取物效果显著。
本发明对缓解阿司匹林胃损伤的应用
取小鼠54只,雌雄各27只,随机分为9组,每组6只,分别为空白组、模型组、动物肝脏活性提取物组、茯苓提取物组、陈皮提取物组、葛根提取物组、党参提取物组、紫苏提取物组和动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物组。空白组、模型组给予等体积的0.75%NaCl溶液,动物肝脏活性提取物组给予本发明的动物肝脏活性提取物5mg/kg、茯苓提取物组给予本发明的茯苓提取物5mg/kg、陈皮提取物组给予本发明的陈皮提取物5mg/kg、葛根提取物组给予本发明的葛根提取物5mg/kg、党参提取物组给予本发明的党参提取物5mg/kg、紫苏提取物组给予本发明的紫苏提取物5mg/kg和动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物组给予本发明的动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物5mg/kg;提取物均混悬于0.75%NaCl溶液中,每天灌胃给药一次,连续7天。末次给药1h后,各组大鼠灌胃给予阿司匹林10mg/kg。阿司匹林损伤4h后,处死小鼠,进行胃损伤的检查。得到如表2所示的抑制效果:
表4动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物对阿司匹林所致胃损伤的抑制效果
由表4可看出,通过将动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合,然后用于治疗阿司匹林所致急性胃损伤,其抑制率达到了77.1%,其比单独使用动物肝脏活性提取物或中药活性提取物效果显著很多。
表5动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物对阿司匹林所致胃损伤模型血清SOD、MDA、NO及GSH-PX的影响
阿司匹林灌胃4h后对小鼠进行眼球取血,参考使用说明,ELISA试剂盒检测各组小鼠血清MDA、NO、GSH-PX和SOD含量。
由表5可看出,与空白对照组相比,模型组SOD、GSH-PX含量显著下降,而MDA、NO含量显著升高,说明阿司匹林导致小鼠受到严重的氧化应激、氧化损伤以及一定的炎性损伤。而通过将动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗,与模型组相比,SOD、GSH-PX含量显著增加,MDA、NO含量显著降低。且动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗比单独使用动物肝脏活性提取物或中药活性提取物效果显著。
表6动物肝脏活性提取物、中药活性提取物组合物对阿司匹林所致胃损伤模型胃组织SOD、MDA及NO的影响
阿司匹林灌胃4h后对小鼠进行脱颈处死,取胃。参考使用说明,ELISA试剂盒检测各组小鼠胃组织中MDA、NO和SOD含量。
由表6可看出,与空白对照组相比,模型组SOD含量显著下降,而MDA、NO含量显著升高,说明阿司匹林导致小鼠受到严重的氧化应激、氧化损伤及一定的炎性损伤。而通过将动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗,与模型组相比,SOD含量显著增加,MDA、NO含量显著降低。且动物肝脏活性提取物与中药活性提取物进行组合用于治疗比单独使用动物肝脏活性提取物或中药活性提取物效果显著。
进一步地,本发明的组合物,动物肝脏活性提取物可以是新鲜动物牛、羊或猪的肝脏粉碎,冻干制得。
进一步地,动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的质量百分比为1:1-3:1-4:1-5:1-3:1-3。
最后说明的是,以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述,但本领域技术人员应当理解,可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变,而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。
Claims (10)
1.一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物,其特征在于,包括动物肝脏活性提取物和中药活性提取物,所述中药活性提取物包括茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物及紫苏提取物,所述动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的质量百分比为1:1-3:1-4:1-5:1-3:1-3。
2.根据权利要求1所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物,其特征在于,所述动物肝脏活性提取物、茯苓提取物、陈皮提取物、葛根提取物、党参提取物、紫苏提取物的质量百分比为1:2:2:5:2:2。
3.根据权利要求1所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物,其特征在于,所述动物肝脏活性提取物为牛肝脏活性提取物,所述牛肝脏活性提取物的分子量小于等于10kD。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其特征在于,包括:
(1)制备动物肝脏活性提取物;
(2)制备中药活性提取物;
(3)按质量百分比称取上述的动物肝脏活性提取物和中药活性提取物混合均匀,动物肝脏活性提取物和中药活性提取物的质量百分比为1:5-18,即制得所述的治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物。
5.根据权利要求4所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其特征在于,所述动物肝脏活性提取物的制备方法如下:将新鲜动物肝脏粉碎、冻干,冻干粉与无水丙酮混合,搅拌1-2h,脱脂,4℃旋蒸,除去丙酮,脱脂肝脏活性提取物与水混合超声提取1-3h,脱脂肝脏活性提取物与水的质量百分比为1:1-10,透析膜透析,冻干透析液得肝脏活性提取物。
6.根据权利要求5所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其特征在于,所述动物肝脏活性提取物制备时,所用透析袋的透析膜孔径为小于等于10kD。
7.根据权利要求4所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其特征在于,所述中药活性提取物的制备方法如下:将中药粉末在乙醇溶剂中超声提取1-3h,浓缩提取液得中药提取物,将中药提取物经硅胶柱色谱,乙酸乙酯、乙醇洗脱,基于构建的乙醇急性胃损伤小鼠模型,筛选得中药活性提取物乙酸乙酯洗脱组分、乙醇洗脱组分。
8.根据权利要求7所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的制备方法,其特征在于,所述中药活性提取物制备时乙醇溶剂的质量分数为50%-75%。
9.根据权利要求7所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的应用,其特征在于,所述中药粉末和乙醇溶剂的质量体积比为1g:(5-10)mL。
10.根据权利要求1-9任意一项所述的一种治疗胃溃疡、胃损伤的活性提取物组合物的应用,其特征在于,适用于乙醇或阿司匹林所致的慢性胃溃疡、胃损伤。
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