CN115135659B - 一类吗啉衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一类式(I)表示的吗啉衍生物以及包含所述吗啉衍生物的组合物。所述化合物具有优异的ATR抑制效果和作用，可以用于制备用于治疗和/或预防由ATR介导的相关疾病的药物。所述由ATR介导的相关疾病选自癌症或过度增殖性疾病

Description

一类吗啉衍生物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及药物化学领域，具体涉及一类作为ATR抑制剂的吗啉衍生物及其制备方法和应用。
背景技术
共济失调毛细血管扩张突变基因Rad3相关蛋白(Ataxia TelangiectasiaMutated and Rad3Related Kinase,ATR)是与DNA损伤信号传导和修复相关的磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶(PIKK)家族成员，由2644个氨基酸组成，N端为ATR相互作用蛋白(ATRinteracting protein，ATRIP)结合结构域，是ATR激活的重要结构域，C端为下游蛋白磷酸化的激酶结构域，具有将靶蛋白如细胞周期检测点激酶1(cell cycle checkpoint kinase1，Chk1)等丝氨酸或苏氨酸磷酸化的功能。ATR在DNA修复中起着重要作用，负责启动细胞对基因组不稳定的响应和修复，一旦感应到DNA损伤和复制叉压力会迅速活化，直接磷酸化下游效应蛋白启动调控基因组的稳定(Nat Rev Mol Cell Biol.2008Aug；9(8):616-27)。
DNA损伤或复制压力诱导单链DNA(single-stranded DNA,ssDNA)募集复制相关蛋白A(replication protein A，RPA)形成RPA-ssDNA复合物，RPA-ssDNA可以招募ATR激活所需的调控因子，包括ATRIP复合物、RAD9-RAD1-HUS1(9-1-1)复合物、RPA复合物、拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopoisomeraseⅡBinding Protein 1,TopBP1)等。首先ATR通过与其配体ATRIP结合被招募到RPA-ssDNA上形成ATR-ATRIP复合物，同时ATR发生自磷酸化；随后在RPA-ssDNA调控下dsDNA-ssDNA接合处募集TopBP1等复合物，被募集到dsDNA-ssDNA接合处的TopBP1通过与ATR自磷酸化位点结合使ATR-ATRIP激活；ATR一旦被激活将磷酸化Chk1及其他效应蛋白，活化的Chk1继续磷酸化其下游效应物质(如CDC25A)，最终促使细胞周期停滞，稳定复制叉并促进DNA损伤修复(J Hematol Oncol.2019Apr 24；12(1):43)。
基因组的不稳定性是肿瘤细胞的基本特征之一。许多肿瘤细胞都存在DNA的异常损伤，导致其更依赖于未受损的DNA修复通路，因此ATR被视为肿瘤的潜在治疗靶点。大量功能和临床前实验数据表明，ATR激酶抑制剂能高效杀死肿瘤细胞。此外，化疗和放疗会进一步加剧肿瘤细胞的基因组不稳定性，抑制ATR活性能协同增强抗肿瘤效果。因此，ATR激酶抑制剂在肿瘤治疗上具有重要应用前景(J Neurosci.2017Jan 25；37(4):893-905)。
ATR作为DNA损伤修复的关键蛋白，对细胞的存活起重要作用。对ATR的抑制可以诱导ATR通路依赖型恶性肿瘤细胞凋亡而对正常细胞生长和增殖影响较小，因此ATR可作为低毒且高效靶向抗肿瘤药物的理想靶点。
目前的ATR抑制剂已有VX-970、AZD6738、BAY1895344和VX-803进入临床试验，也有多篇针对ATR通路的专利公开，如：WO2019/014618、WO2019/050889、WO2019/154365、CN111205310A、CN11046761A、WO2015/084384、WO2017/180723、WO2016/061097等等，但尚未有相应的药物上市。基于ATR抑制剂在癌症等所展示的前景，仍需开发新的化合物。
发明内容
发明要解决的问题：
为了解决上述问题，本发明尝试进行了深入研究，经过不断努力，本发明设计具有通式(I)和(II)所示的结构的化合物，并发现具有此类结构的化合物表现出优异的ATR抑制效果和作用，能达到期望的目的，从而完成本发明。
具体而言，本发明的第一个方面涉及以下吗啉衍生物：
一种由式(I)表示的化合物或其立体异构体、药学可接受的盐：
其中：
X和Y各自独立的选自CH或N，以及，条件是，X和Y中至少有一个为N；
Z选自O、S、NH和NMe；
R1选自苯基或杂芳基，所述苯基或杂芳基为未取代的或者选择性被一个或多个选自R4a、氘、卤素、羟基、氨基、氰基、羧基、卤代C1-6烷基、羟基取代的C1-6烷基、-OR4a、-NR4aR4b、-N(CN)R4a、-N(OR4a)R4b、-S(O)0-2R4b、-C(O)OR4a、-C(O)NR4aR4b、-NR4aC(O)R4b、-NR4aC(O)NR4aR4b、-NR4aS(O)2R4b和-OC(O)R4a的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同；
R4a和R4b分别独立地为H、D、T、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环烷基、苯基、5-6元杂芳基、C3-8环烷基C1-6烷基、3-8元杂环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基或5-6元杂芳基C1-6烷基；所述R4a或R4b为未取代，或者选择性地被一个或多个选自氘、氧代基、卤素、羟基、氨基、氰基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷氧基、C1-6烷氨基、3-8元环烷基、3-8元杂环烷基、-NHC(O)-C2-6烯基、-NHC(O)-C1-6烷基、-NHC(O)-NH-C1-6烷基、-NHC(O)-O-C1-6烷基和-NHS(O)2-C1-6烷基的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同；
R2和R3各自独立地选自氢、氘、卤素、氰基、-(CH2)p-NR5R6、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、-(CH2)p-4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、-(C2-4亚烯基)p-杂芳基、-(CH2)p-杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(CH2)p-(SO2)R5、-(C3-6亚环烷基)p-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(CH2)p-(SO2)NR5 R6、-NR5(CO)R6、-NR5(SO2)R6、-(CH2)p-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；其中所述的C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、杂芳基、-(CH2)p-、亚环烷基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：氘、卤素、氰基、羟基、-NR5R6、任选被羟基或C1-6烷氧基或苯基取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基、杂芳基、-C(O)OR5、-C(O)R5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(SO2)NR5 R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同；
R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基或杂芳基；其是取代或未取代的；
或者R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述环胺基团任选地被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代一次或多次，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同；
R7选自C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基或苯基；
其中，p＝0、1、2、3、4；优选的，p＝0、1或2。
在一些实施方案中，X和Y均选自N。
在一些实施方案中，Z选自O、S。
在一些实施方案中，Z选自S。
在一些实施方案中，R1选自苯基或5-10元的单环或双环的杂芳基；所述苯基或5-10元的单环或双环的杂芳基为未取代的或者选择性被一个或多个选自R4a、氘、卤素、羟基、氨基、氰基、羧基、卤代C1-6烷基、羟基取代的C1-6烷基、-OR4a、-NR4aR4b、-N(CN)R4a、-N(OR4a)R4b、-S(O)0-2R4b、-C(O)OR4a、-C(O)NR4aR4b、-NR4aC(O)R4b、-NR4aC(O)NR4aR4b、-NR4aS(O)2R4b和-OC(O)R4a的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R1选自5元或6元单环杂芳基、9元或10元双环杂芳基；所述5元或6元单环杂芳基、9元或10元双环杂芳基为未取代的或者选择性被一个多个选自R4a、氘、卤素、羟基、氨基、氰基、羧基、卤代C1-6烷基、羟基取代的C1-6烷基、-OR4a、-NR4aR4b、-N(CN)R4a、-N(OR4a)R4b、-S(O)0-2R4b、-C(O)OR4a、-C(O)NR4aR4b、-NR4aC(O)R4b、-NR4aC(O)NR4aR4b、-NR4aS(O)2R4b和-OC(O)R4a的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R1选自下述基团：哒嗪基、吲哚基、5-氮杂吲哚基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、苯并[d]咪唑基、咪唑并[4,5-b]吡啶基、6-氮杂吲哚基、7-氮杂吲哚基、吡咯[2,3-d]哒嗪基、吡咯[2,3-c]哒嗪基、吡咯并[2,3-b]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-d]哒嗪基、吡咯并[2,3-c]哒嗪基、吲唑基、吡咯[2,3-d]嘧啶基、吡咯并[3,2-c]吡啶基、嘧啶基、吡啶基；优选选自： 其为未取代的或者被一个或多个选自R4a、氘、卤素、羟基、氨基、氰基、羧基、卤代C1-6烷基、羟基取代的C1-6烷基、-OR4a、-NR4aR4b、-N(CN)R4a、-N(OR4a)R4b、-S(O)0-2R4b、-C(O)OR4a、-C(O)NR4aR4b、-NR4aC(O)R4b、-NR4aC(O)NR4aR4b、-NR4aS(O)2R4b和-OC(O)R4a的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R1选自下述基团：哒嗪基、吲哚基、5-氮杂吲哚基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、苯并[d]咪唑基、咪唑并[4,5-b]吡啶基、6-氮杂吲哚基、7-氮杂吲哚基、吡咯[2,3-d]哒嗪基、吡咯[2,3-c]哒嗪基、吡咯并[2,3-b]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-d]哒嗪基、吡咯并[2,3-c]哒嗪基、吲唑基、吡咯[2,3-d]嘧啶基、吡咯并[3,2-c]吡啶基、嘧啶基、吡啶基；优选选自： 其为未取代的或者被一个或多个选自R4a、氘、卤素、羟基、氨基、氰基、卤代C1-3烷基、羟基取代的C1-3烷基、-OR4a、-NR4aR4b、-N(CN)R4a、-N(OR4a)R4b、-C(O)OR4a和-OC(O)R4a的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R4a和R4b分别独立地为H、D、T、C1-3烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-6环烷基、3-7元杂环烷基、苯基、5-6元杂芳基、C3-6环烷基C1-3烷基、3-7元杂环烷基C1-3烷基、苯基C1-3烷基或5-6元杂芳基C1-3烷基；所述R4a或R4b为未取代，或者选择性地被一个或多个选自氘、氧代基、卤素、羟基、氨基、氰基、卤代C1-3烷基、卤代C1-3烷氧基、C1-3烷氧基、C1-3烷氨基、3-6元环烷基、3-7元杂环烷基、-NHC(O)-C2-4烯基、-NHC(O)-C1-3烷基、-NHC(O)-NH-C1-3烷基、-NHC(O)-O-C1-3烷基和-NHS(O)2-C1-3烷基的取代基取代在任意位置。包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R4a和R4b分别独立地为H、甲基、乙基、羟甲基、羟乙基、甲氧基乙基、-CH2CF3、
在一些实施方案中，R1选自下述基团：吡咯并[2,3-b]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡咯并[2,3-d]哒嗪基、吡咯并[2,3-c]哒嗪基、吲唑基、吡咯[2,3-d]嘧啶基、吡咯并[3,2-c]吡啶基、嘧啶基、吡啶基；优选选自： 其为未取代的或者被一个或多个选自羟甲基、甲基、F、Cl、氰基、的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同；
在一些实施方案中，R1选自下述基团：
在一些实施方案中，R1选自下述基团：
在一些实施方案中，R2选自氢、氘、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C2-6烯基、C2-6炔基、-(CH2)p-NR5R6、3-8元环烷基、-(CH2)p-4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、-(C2-4亚烯基)p-5-10元的单环或双环的杂芳基、-(CH2)p-5-10元的单环或双环的杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(CH2)p-(SO2)R5、-(C3-6亚环烷基)p-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(CH2)p-(SO2)NR5 R6、-NR5(CO)R6、-NR5(SO2)R6、-(CH2)p-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；其中所述的烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、杂环烯基、苯基、杂芳基、-(CH2)p-、亚环烷基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：氘、卤素、氰基、羟基、-NR5R6、任选被羟基或C1-6烷氧基或苯基取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基、杂芳基、-C(O)OR5、-C(O)R5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(SO2)NR5 R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同；其中，-(C2-4亚烯基)p-5-10元的单环或双环的杂芳基优选为-(C2-4亚烯基)p-5元或6元杂芳基；-(CH2)p-5-10元的单环或双环的杂芳基优选为-(CH2)p-5元或6元杂芳基。
在一些实施方案中，R2选自氢、氘、卤素、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、-(CH2)p-NR5R6、3-8元环烷基、-(CH2)p-4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、-(C2H2)p-5元或6元杂芳基、-(CH2)p-5元或6元杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(CH2)p-(SO2)R5、-(亚环丙基)p-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(CH2)p-(SO2)NR5R6、-NR5(CO)R6、-NR5(SO2)R6、-(CH2)p-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；其中所述的烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、杂环烯基、苯基、杂芳基、-(CH2)p-、亚环丙基、彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-3烷氧基取代的C1-3烷基、C1-3卤代烷基、4-6元杂环烷基、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-C(O)R5；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R2选自氢、氘、卤素、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、-(CH2)p-NR5R6、3-8元环烷基、-(CH2)p-4-10元杂环烷基、5元或6元杂环烯基、苯基、-(亚烯基)p-5元或6元杂芳基、-(CH2)p-5元或6元杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(CH2)p-(SO2)R5、-(亚环丙基)p-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(CH2)p-(SO2)NR5 R6、-NR5(CO)R6、-NR5(SO2)R6、-(CH2)p-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；其中所述的烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、杂环烯基、苯基、杂芳基、-(CH2)p-、亚环丙基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：羟基、CN、F、Cl、甲基、乙基、羟基甲基、羟基乙基、异丙基、-CHF2、-CF3、甲氧基甲基-、 包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R2选自 苯基、其中所述的杂环烷基、杂环烯基、苯基、杂芳基、-(CH2)-、亚环丙基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：羟基、CN、F、Cl、甲基、乙基、羟基甲基、羟基乙基、异丙基、-CHF2、-CF3、甲氧基甲基-、 包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基；所述烷基、环烷基、杂环烷基各自独立地任选的被一个或多个相同或不同的D、氰基、卤素、羟基取代；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-3烷基、3-6元环烷基、4-7元杂环烷基；所述烷基、环烷基、杂环烷基各自独立地任选的被一个或多个相同或不同的D、氰基、F、Cl、羟基取代；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、甲基、乙基、异丙基、-CD3、环丙基、
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代一次或多次，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成 其中n＝0，1，2，3；所述环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成 所述环胺基团任选被选自氘、F、羟基、氰基、任选被羟基或C1-3烷氧基取代的C1-3烷基、的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成下述任一基团 所述环胺基团任选被选自氘、F、羟基、羟甲基、甲基、氰基、甲氧基甲基、的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成下述任一基团：
在一些实施方案中，R2选自：
在一些实施方案中，R2选自：
在一些实施方案中，R3选自：氢、氘、卤素、氰基、-(CH2)p-NR5R6、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、-(CH2)p-4-10元杂环烷基、-(CO)NR5R6；其中所述的烷基、-(CH2)p-、环烷基、杂环烷基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：氘、卤素、氰基、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-NR5R6；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R3选自：氢、氘、卤素、氰基、-(CH2)p-NR5R6、C1-3烷基、C1-3烷氧基、3-6元环烷基、-(CH2)p-4-7元杂环烷基、-(CO)NR5R6；其中所述的烷基、-(CH2)p-、环烷基、杂环烷基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：D、F、羟基、甲基、甲氧基、-NR5R6；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R3选自：氢、氘、氰基、-(CH2)p-NR5R6、甲基、乙基、丙基、异丙基、-(CO)NR5R6；其中所述的烷基、-(CH2)p-、杂环烷基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：D、F、羟基、甲基、甲氧基、-NR5R6；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-3烷基。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢或甲基。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代一次或多次，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成所述任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成所述环胺基团任选被选自氘、F、羟基、任选被羟基取代的C1-3烷基的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成：
在一些实施方案中，R3选自：H、氘、甲基、羟甲基、甲氧基甲基、-CHF2、氰基、
根据本发明的一种优选的实施方式，式(I)表示的化合物中，X和Y均选自N；Z选自S；即，其由式(II)表示：
其中R1、R2和R3各自如上述式(I)中所述定义。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基；所述烷基、环烷基、杂环烷基各自独立地任选的被一个或多个相同或不同的D、氰基、卤素、羟基取代；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-3烷基、3-6元环烷基、4-7元杂环烷基；所述烷基、环烷基、杂环烷基各自独立地任选的被一个或多个相同或不同的D、氰基、F、Cl、羟基取代；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、甲基、乙基、异丙基、-CD3、环丙基、
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代一次或多次，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成 其中n＝0，1，2，3；所述环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成 所述环胺基团任选被选自氘、F、羟基、氰基、任选被羟基或C1-3烷氧基取代的C1-3烷基、的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成下述任一基团 所述环胺基团任选被选自氘、F、羟基、羟甲基、甲基、氰基、甲氧基甲基、的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成下述任一基团：
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢、C1-3烷基。
在一些实施方案中，R5和R6分别独立地选自氢或甲基。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代一次或多次，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成所述任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成所述环胺基团任选被选自氘、F、羟基、任选被羟基取代的C1-3烷基的取代基取代一次或多次；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选为1个、2个或3个；且每个取代基可以相同或不同。
在一些实施方案中，R5和R6与其连接的原子一起形成：
或者，本发明的第一个方面涉及以下吗啉衍生物：
一种由式(I)表示的化合物或其药学可接受的盐：
其中：
X和Y各自独立的选自CH和N，其中至少有一个为N；优选地，X和Y均选自N；
Z选自O、S、NH和NMe；优选O或S；
R1选自苯基或杂芳基，所述苯基或杂芳基为未取代或者选择性被一个或多个选自R4a、氘、卤素、羟基、氨基、氰基、羧基、卤代C1-6烷基、羟基取代的C1-6烷基、-OR4a、-NR4aR4b、-N(CN)R4a、-N(OR4a)R4b、-S(O)0-2R4b、-C(O)OR4a、-C(O)NR4aR4b、-NR4aC(O)R4b、-NR4aC(O)NR4aR4b、-NR4aS(O)2R4b和-OC(O)R4a的取代基取代在任意位置；包含取代基时，所述取代基的数量优选为4个以下，更优选1个、2个或3个；
R1中所述杂芳基优选5-10元的单环或双环的基团；所述的杂原子优选为O、N或S；
优选地，R1为：
R4a和R4b分别独立地为H、D、T、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-8环烷基、3-8元杂环烷基、苯基、5-6元杂芳基、C3-8环烷基C1-6烷基、3-8元杂环烷基C1-6烷基、苯基C1-6烷基或5-6元杂芳基C1-6烷基；所述R4a或R4b为未取代，或者选择性地被一个或多个选自氘、氧代基、卤素、羟基、氨基、氰基、卤代C1-6烷基、卤代C1-6烷氧基、C1-6烷氧基、C1-6烷氨基、3-8元环烷基、3-8元杂环烷基、-NHC(O)-C2-6烯基、-NHC(O)-C1-6烷基、-NHC(O)-NH-C1-6烷基、-NHC(O)-O-C1-6烷基和-NHS(O)2-C1-6烷基的取代基取代在任意位置；
R2和R3各自独立地选自氢、氘、卤素、氰基、-NR5R6、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(SO2)NR5 R6、-NR5(CO)R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；其中所述的C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、杂芳基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：氘、卤素、氰基、羟基、-NR5R6、任选被羟基、C1-6烷氧基或苯基取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基、杂芳基、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(SO2)NR5R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；
R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基或杂芳基；
或者R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代多次，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；
R7选自C1-6烷氧基、3-8元环烷基或苯基；
优选地，R3选自氢、氘、卤素、氰基、C1-6烷基或3-6元环烷基；
根据本发明的一种优选的实施方式，R2为-NR5R6、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、5-10元的单环或双环的杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(SO2)NR5 R6、-NR5(CO)R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6；
其中所述的C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、5-10元的单环或双环的杂芳基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：氘、卤素、氰基、羟基、-NR5R6、C1-6卤代烷基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基、杂芳基、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO2)NR5 R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6；
R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基、苯基或5-10元的单环或双环的杂芳基；
或者R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述环胺基团任选被选自氘、卤素、羟基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；
R7选自C1-6烷氧基、3-8元环烷基或苯基。
更优选地，R2为
根据本发明的一种优选的实施方式，式(I)表示的化合物中，X和Y均选自N；Z选自S；即，其由式(II)表示：
作为一种优选的实施方式，式(II)中，R1选自含有吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、5-氮杂吲哚基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、吲唑基、苯并[d]咪唑基、咪唑并[4,5-b]吡啶基、吡咯[2,3-d]哒嗪基、吡咯[2,3-c]哒嗪基、6-氮杂吲哚基或7-氮杂吲哚基；
所述吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、5-氮杂吲哚基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、吲唑基、苯并[d]咪唑基、咪唑并[4,5-b]吡啶基、吡咯[2,3-d]哒嗪基、吡咯[2,3-c]哒嗪基、6-氮杂吲哚基或7-氮杂吲哚基为未取代或者选择性被一个或多个选自氘、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基取代的C1-6烷基、3-6元环烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、羧基、-OR4a烷基或-NR4aR4b的取代基取代在任意可取代的位置；
优选地，R4a和R4b分别独立地为氢、C1-6烷基、3-6元环烷基；
优选地，R1为：
R2选自氢、氘、卤素、氰基、-NR5R6、C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、杂芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(SO2)NR5 R6、-NR5(CO)R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；其中所述的C1-6烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、4-10元杂环烷基、4-8元杂环烯基、苯基、杂芳基彼此独立地任选被以下基团取代一次或多次：氘、卤素、氰基、羟基、-NR5R6、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基、杂芳基、-C(O)OR5、-(CO)NR5R6、-(SO2)R5、-(SO)R5、-SR5、-(SO2)NR5 R6、-NR5(SO2)R6、-((SO)＝NR5)R6、-N＝(SO)R5R6、-(PO)(OR5)2、-(PO)(OR5)R6或-(PO)(R5)2；
R3选自氢、氘、卤素、氰基、C1-6烷基或3-6元环烷基；
R5和R6分别独立地选自氢、C1-6烷基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基、苯基或杂芳基；
或者R5和R6与其连接的原子一起形成4-8元环胺基团，所述的环胺基团任选被选自氘、卤素、氰基、羟基、任选被羟基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、3-8元环烷基、4-10元杂环烷基或-(SO2)R7的取代基取代多次，所述的4-8元环胺基团任选含有一个另外选自O、N和S的杂原子；
R7选自C1-6烷基、3-8元环烷基或苯基；
优选地，R2为：
作为本发明的一种优选的实施方式，其中R2为：
作为本发明的一种更优选的实施方式，其中R2为：
根据本发明的一种优选的实施方式，本发明涉及以下化合物：
本发明的另一个方面涉及一种组合物，其中包括上述根据本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐和药用辅剂。制备各种含有一定量的活性成分的药物组合物的方法是已知的，或根据本发明的公开内容对于本领域技术人员是显而易见的。如REMINGTON’SPHARMACEUTICAL SCIENCES,Martin,E.W.,ed.,Mack Publishing Company,19th ed.(1995)所述，制备所述药物组合物的方法包括掺入适当的药学赋形剂、载体、稀释剂等。
优选地，药用辅剂优选药学可接受的载体、稀释剂、赋形剂或其组合。
本发明的另一个方面涉及上述根据本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、及上述组合物在制备治疗和/或预防ATR介导的疾病的药物中的用途。
本发明的另一个方面涉及上述根据本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、及上述组合物在治疗和/或预防由ATR介导的相关疾病中的用途。
一种治疗和/或预防由ATR介导的相关疾病的方法，包括向有需要的个体施用治疗/预防有效量的上述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐，或上述的组合物。
根据本发明的一种优选的实施方式，所述由ATR介导的相关疾病选自癌症或过度增殖性疾病。
在本发明中，“治疗”一般是指获得需要的药理和/或生理效应。该效应根据完全或部分地预防疾病或其症状，可以是预防性的；和/或根据部分或完全稳定或治愈疾病和/或由于疾病产生的副作用，可以是治疗性的。本文使用的“治疗”涵盖了对患者疾病的任何治疗，包括：(a)预防易感染疾病或症状但还没诊断出患病的患者所发生的疾病或症状；(b)抑制疾病的症状，即阻止其发展；或(c)缓解疾病的症状，即，导致疾病或症状退化。
在本发明中，“受试者”或者“有需要的个体”指脊椎动物。在某些实施方案中，脊椎动物指哺乳动物。哺乳动物包括，但不限于，牲畜(诸如牛)、宠物(诸如猫、犬、和马)、灵长类动物、小鼠和大鼠。在某些实施方案中，哺乳动物指人。
在本发明中，“有效量”指在必需的剂量和时间上有效实现期望的治疗或预防效果的量。本发明的物质/分子的“治疗有效量”可根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重及该物质/分子在个体中引发期望应答的能力等因素而变化。治疗有效量还涵盖该物质/分子的治疗有益效果胜过任何有毒或有害后果的量。“预防有效量”指在必需的剂量和时间上有效实现期望的预防效果的量。通常而非必然，由于预防剂量是在疾病发作之前或在疾病的早期用于受试者的，因此预防有效量会低于治疗有效量。在癌症的情况中，药物的治疗有效量可减少癌细胞数；缩小肿瘤体积；抑制(即一定程度的减缓，优选停止)癌细胞浸润到周围器官中；抑制(即一定程度的减缓，优选停止)肿瘤转移；一定程度的抑制肿瘤生长；和/或一定程度的减轻与癌症有关的一种或多种症状。
制备方法：
本发明还提供制备所述化合物的方法。本发明通式(I)所述化合物的制备可通过以下示例性方法和实施例完成，但这些方法和实施例不应以任何方式被认为是对本发明范围的限制。也可通过本领域技术人员所知的合成技术合成本发明所述的化合物，或者综合使用本领域已知的合成方法和本发明所述方法。每步反应所得的产物用本领域已知的分离技术得到，包括但不限于萃取、过滤、蒸馏、结晶、色谱分离等。合成所需的起始原料和化学试剂可以根据文献常规合成(如Scifinder提供的)或购买。
本发明通式(I)所述化合物可按照以下方法所述路线合成：
合成工艺路线一：1)式I-1所示化合物与R2-B(pin)或R2-B(OH)2发生Suzuki反应，得式I-2所示化合物；2)式I-2所示化合物与R1-B(pin)或R1-B(OH)2发生Suzuki反应，得式I所示化合物。
其中，R1、R2、R3的定义如前所述。
进一步的，本申请还提供I-5、I-8、I-11及I-15所示化合物的合成路线，如下：
合成工艺路线二：1)式I-1所示化合物经甲酰化反应，得式I-3所示化合物；2)式I-3所示化合物经还原胺化反应，得式I-4所示化合物；3)I-4所示化合物与R1-B(pin)或R1-B(OH)2发生Suzuki反应，得式I-5所示化合物。
其中，R1、R3、R5、R6的定义如前所述。
合成工艺路线三：1)式I-1所示化合物经甲酰化反应，得式I-3所示化合物；2)式I-3所示化合物经格式反应、卤代反应，得式I-6所示化合物；3)I-6所示化合物经磺酰化反应、烷基化反应(必要时)得I-7所示化合物；4)I-7所示化合物与R1-B(pin)或R1-B(OH)2发生Suzuki反应，得式I-8所示化合物。
其中，R1、R3、R5、R6、R7的定义如前所述。
合成工艺路线四：1)式I-1所示化合物经甲酰化反应，得式I-3所示化合物；2)式I-3所示化合物经TMSCN氰化后、发生卤代反应，得式I-9所示化合物；3)I-9所示化合物经磺酰化反应、烷基化反应(必要时)得I-10所示化合物；4)I-10所示化合物与R1-B(pin)或R1-B(OH)2发生Suzuki反应，得式I-11所示化合物。
其中，R1、R2、R3、R5、R6的定义如前所述。
合成工艺路线五：1)式I-12所示化合物经硝化反应，得式I-13所示化合物；2)式I-13所示化合物经磺酰化、N-烷基化反应后，得式I-14所示化合物；3)I-14与R1-B(pin)或R1-B(OH)2发生Buchwald反应，得式I-15所示化合物。
其中，R1、R2、R3、R5、R6、R7的定义如前所述。
具体地，通式(II)所述化合物可按照以下方法所述路线合成：
合成工艺路线一：
其中，R1、R2、R3的定义如前所述。
合成工艺路线二
其中，R1、R3、R5、R6、R7的定义如前所述。
合成工艺路线三
其中，R1、R3、R5、R6的定义如前所述。
各术语定义：
应该理解，此处采用的术语目的在于描述具体的实施方案，并非意在限制。此外，尽管类似或者等价于此处描述的任何方法、装置和材料均可用于实施或者测试本发明，但是现在描述的是优选的方法、装置和材料。
根据本领域的惯例，在本文结构式中用于描述该部分或取代基与母核或主结构的连接点的键。
不是出现在两个字母或符号间的破折号“-”用于指示取代基的连接点。例如，-CONH2通过碳原子连接。
本发明使用的术语“烷基”是指包括具有指定碳原子数的支链和直链饱和脂肪族烃基。例如，“C1-6烷基”是指具有1至6个碳原子的烷基，具体是指C1、C2、C3、C4、C5和C6的烷基。烷基可以是未被取代的或被取代的，从而使它的一或多个氢被任一化学基团替代。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如，正丁基、异丁基、叔丁基)、戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)等。本领域技术人员应认识到术语“烷基”可包括“亚烷基”基团。
除非另外说明，本申请中所述“亚烷基”是指具有1至6个碳原子的直链饱和二价烃基或3至6个碳原子的支链饱和二价烃基。示例性的“亚烷基”包括但不限于：亚甲基、亚乙基、亚丙基、1甲基亚丙基、2甲基亚丙基、亚丁基、亚戊基等。
“烯基”是指包括直链或支链构型并具有一或多个可存在于沿该链的任一稳定点处的碳-碳双键的烃链。例如，“C2-6烯基”是指包括C2、C3、C4、C5和C6的烯基。烯基的实例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基、4-甲基-3-戊烯基等。本领域技术人员应认识到术语“烯基”可包括“亚烯基”基团。
除非另外说明，本申请中所述“亚烯基”是指包括直链或支链构型并具有一或多个可存在于沿该链的任一稳定点处的碳-碳双键的二价烃链。示例性的“亚烯基”包括但不限于：亚乙烯基、2-亚丙烯基、3-亚丁烯基、2-亚戊烯基、3-亚戊烯基等。
“炔基”是指包括直链或支链构型并具有一或多个可存在于沿该链的任一稳定点处的碳-碳三键的烃基。例如“C2-6炔基”是指包括C2、C3、C4、C5和C6炔基。炔基的实例包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。
本领域技术人员应该理解，当本文使用“-CO2-”时，这是指基团
本领域技术人员应该理解，当本文使用“-CO-”时，这是指基团
术语“烷氧基”是指羟基中的氢被如本文所定义的烷基取代的基团。例如，术语“C1-6烷氧基”表示基团-O-C1-6烷基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、2-戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基等。术语“低级烷氧基”是指具有1至4个碳的烷氧基。
术语“环烷基”是指环化的烷基，包括单环、双环或多环体系。例如C3-7环烷基是指包括C3、C4、C5、C6和C7的环烷基。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。
本文所用“碳环”或“碳环残基”是指任何稳定的3-元、4-元、5-元、6-元或7-元单环或二环碳环或7-元、8-元、9-元、10-元、11-元、12-元二环或三环碳环，其中任一个可为饱和、部分饱和、不饱和或芳香族。这些碳环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚烯基、环庚基、金刚烷基、环辛基、苯基、萘基等。如上文所显示，桥接环亦包括在碳环的定义内，例如[2,2,2]二环辛烷。除非另有指明，否则优选的碳环是环丙基、环丁基、环戊基和苯基。在一或多个碳原子连接两个非毗邻碳原子时，产生桥接环。优选的桥是一个或两个碳原子。应当注意，桥总是将单环转化为二环。在环桥接时，针对环所述的取代基也可存在于桥上。
术语“杂环”、“杂环烷基”、“杂环的”或“杂环基”可互换使用并且是指被取代的和未被取代的3-元至7-元单环基团、7-元至11-元二环基团和10-元至15-元三环基团，其中至少一个环具有至少一个杂原子(O、S或N)，该含杂原子环优选具有1个、2个或3个选自O、S和N的杂原子。该基团中的每一含有杂原子的环皆可含有1或2个氧或硫原子和/或1至4个氮原子，限制条件为每一环中的杂原子总数是4或更小，并且进一步的限制条件为该环含有至少一个碳原子。氮和硫原子可任选被氧化且氮原子可任选被季铵化。完成二环和三环基团的稠环可仅含有碳原子且可为饱和、部分饱和或完全不饱和。杂环基团可在任何可用的氮或碳原子上连接。本文所有属于“杂环”、“杂环的”和“杂环基”包括如下文所定义的“杂芳基”。
术语“杂环烯基”是指被取代的和未被取代的3-元至7-元单环基团、7-元至11-元二环基团和10-元至15-元三环基团，所述基团中包含至少一个烯基，且其中至少一个环具有至少一个杂原子(O、S或N)，该含杂原子环优选具有1个、2个或3个选自O、S和N的杂原子。该基团中的每一含有杂原子的环皆可含有1或2个氧或硫原子和/或1至4个氮原子，限制条件为每一环中的杂原子总数是4或更小，并且进一步的限制条件为该环含有至少一个碳原子。氮和硫原子可任选被氧化且氮原子可任选被季铵化。所述杂环烯基优选4-8元杂环烯基。
除下文所述的杂芳基以外，示例性单环杂环基包括氮杂环丁基、氧杂环丁基、吡咯烷基、咪唑啉基、噁唑烷基、异噁唑啉基、噻唑烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、2-氧代氮杂环庚三烯基、1-吡啶酮基、4-哌啶酮基、四氢吡喃基、吗啉基、1,3-二氧杂环戊烷基等。示例性二环杂环基团包括奎宁环基。
术语“杂芳基”是指在至少一个环中具有至少一个杂原子(O、N或S)的被取代的和未被取代的芳香族5-元或6-元单环基团、9-元或10-元二环基团和11-元至14-元三环基团，其含杂原子的环优选具有1个、2个或3个选自O、N或S的杂原子。杂芳基的每一含有杂原子的环皆可含有1或2个氧或硫原子和/或1至4个氮原子，限制条件为每一环中的杂原子总数是4或更少并且每一环具有至少一个碳原子。完成二环和三环基团的含有杂原子的环以外的稠环可仅含有碳原子且可为饱和、部分饱和或不饱和。氮和硫原子可任选被氧化且氮原子可任选被季铵化。为二环或三环的杂芳基必须包括至少一个完全芳香族环或部分芳香族环，但其它一或多个稠环可为芳香族或非芳香族。杂芳基可在任一环的任一可用氮或碳原子上连接。当化合价允许时，若该其它环是环烷基或杂环，则另外任选被＝O(氧代)取代。
示例性单环杂芳环包括但不限于：吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基、三氮唑基等。
示例性二环杂芳基包括但不限于：吲哚基、5-氮杂吲哚基、吡咯并[2,3-d]嘧啶基、5,6-二氮杂吲哚基、6-氮杂吲哚基、7-氮杂吲哚基、吡唑并[3,4-b]吡啶基、吡咯并[2,3-c]哒嗪基、噻吩并[2,3-d]咪唑基、噻吩并[2,3-d]咪唑基、7-氧代-6,7-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶基、吡唑并[3,4-c]吡啶基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并呋喃基、吲嗪基、苯并吡喃基、色酮基、香豆素基、苯并吡喃基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并嘧啶基、呋喃并吡啶基、而且异吲哚基、四氢喹啉基等。
本文所用术语“被取代的”是指指定原子或基团上的任一或多个氢被指定基团的选择替代，条件为不超过指定原子的正常价态。
在整个说明书中，基团和其取代基可由本领域技术人员选择以提供稳定部分和化合物和可用作医药上可接受的化合物的化合物和/或可用于制备医药上可接受的化合物的中间体化合物。
术语“药学可接受的盐”是指本发明化合物与药学上可接受的酸进行反应制得的酸加成盐，或者其中具有酸性基团的化合物和碱性化合物反应生成的盐。其中，所述的酸较佳的选自无机酸(如盐酸、硫酸、磷酸或氢溴酸等)，和有机酸(如草酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸或苯甲酸等)；所述的碱性化合物较佳的选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、碳酸钠或碳酸氢钾等。上述药学上可接受的盐容易分离，可采用常规分离方法提纯，如溶剂萃取、稀释、重结晶、柱色谱和制备薄层色谱等。
本发明的某些化合物可以具有不对称碳原子(光学中心)或双键。本领域技术人员可以理解的是，术语“立体异构体”包括外消旋体、対映异构体、非对映异构体、顺反异构体、互变异构体和单个的异构体都包括在本发明的范围之内。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
术语“环胺基团”是指环原子上至少含有一个环N原子的基团，包括含有1-2个环氮原子的4-8元单环、4-8元双环、4-8元桥环、4-8元螺环。示例性的“环胺基团”包括 等。
有益效果
本发明的式(I)和(II)的吗啉类化合物显示具有良好的ATR抑制作用，能够作为与该作用有关的疾病的治疗和/或预防有关的药物。
具体实施方式
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的。NMR的测定是用BrukerASCEND-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基甲硅烷(TMS)，化学位移是以10-6(ppm)作为单位给出。
反应监控及MS的测定使用Thermofisher ESQ(ESI)质谱仪。
HPLC的测定使用赛默飞U3000 DAD高压液相色谱仪(GL Sciences ODS-HL HP 3μm3.0*100mm色谱柱)。
薄层层析硅胶板使用青岛海洋GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.9～1.0mm的高效薄层色谱制备板。柱层析一般使用青岛海洋200～300目硅胶为载体，展开剂所使用的体系有A：二氯甲烷和甲醇体系；B：石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。中压制备液相纯化时使用的是biotage isera one型制备液相。
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对苯发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
中间体int-1
(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉的制备：
步骤1：将2,4-二氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(int-1a,25g,0.122mol)溶于乙腈(200mL)中，依次加入(R)-3-甲基吗啉(13.5g,0.134mol)和三乙胺(33.8mL,.224mmol)，加热到回流反应3小时。LC-MS显示反应完全，反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层，水层用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，减压旋干得(R)-4-(2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1b,34.87g,0.130mol)，不进一步纯化直接用于下一步。MS Calcd:269；MS Found:270([M+H]+)。
步骤2：将(R)-4-(2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1b,34.87g,0.130mol)溶于乙腈(200mL)中，加入N-溴代丁二酰亚胺(27.6g,0.155mol)，加热至回流反应7小时，LC-MS显示原料消失。反应液旋去约100mL乙腈，加水(300mL)，过滤析出的固体，滤饼用石油醚/乙酸乙酯(1:1)混合溶剂洗。滤饼旋干后得(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,16.8g,48.1mmol,收率:37％)，直接用于下一步反应。MSCalcd:347；MS Found:349([M+H]+)。
中间体int-2
(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉的制备：
步骤1：将(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,2.0g,5.74mmol)溶于DMF(30mL)中，依次加入Johnphos(77mg,0.258mmol)，碳酸钠(608mg,5.74mmol)，三乙基硅烷(2.7mL,17.2mmol)，叔丁基异腈(0.9mL,8.61mmol)，氮气置换3次后，加入乙酸钯(39mg,0.172mmol)，氮气保护下加热至90℃反应8小时。LC-MS显示原料已全部消耗掉，反应液倒入pH～3的稀盐酸中，搅拌1小时。用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝4:1to 2:1)，得(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a,430mg,1.45mmol,收率:25％)。MS Calcd:297；MSFound:298([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a,115mg,0.387mmol)溶于甲醇(10mL)中，冰浴冷却下加入硼氢化钠(15mg,0.387mmol)，自然升到室温搅拌3小时，TLC显示反应完全。反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层，水层用乙酸乙酯提取2次，合并乙酸乙酯层并干燥，旋干，得黄色固体(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醇(int-2b,115mg,0.385mmol,收率:99％)，直接用于下一步。MS Calcd:299；MS Found:300([M+H]+)。
步骤3：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醇(490mg,1.64mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，冰浴冷却下加入氯化亚砜(0.5mL)，室温下搅拌1小时。TLC显示反应完全。反应液旋干，得(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉(int-2,520mg,1.64mmol,收率:100％)，直接用于下一步。MS Calcd:317；MSFound:318([M+H]+)。
实施例1
(R)-3-甲基-4-(7-((甲磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉(int-2,122mg,0.385mmol)溶于DMF(5mL)中，加入甲基亚磺酸钠(79mg,0.77mmol)，于60℃下搅拌2小时，TLC显示原料消失。反应液倒入水中，加乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。薄层制备色谱纯化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)，得(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,50mg,0.138mmol,收率:36％)。MSCalcd:361；MS Found:362([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,50mg,0.138mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1-苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(83mg,0.208mmol)，碳酸钠(44mg,0.417mmol)，水(0.5mL)和Pd(dppf)Cl2(10mg,0.0139mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得(R)-3-甲基-4-(7-((甲磺酰基)甲基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(1-b,140mg,0.245mmol)，不进一步纯化直接用于下一步反应。MS Calcd:597；MS Found:598([M+H]+)。
步骤3：将(R)-3-甲基-4-(7-((甲磺酰基)甲基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(1-b,140mg,0.245mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入4M KOH溶液(1mL)，升温至回流反应4小时。LC-MS显示反应完成，反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层，干燥后旋干，中压制备色谱纯化(10g正相柱，石油醚/乙酸乙酯，100％乙酸乙酯时出产品)，得标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-((甲磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(1,25mg,0.056mmol,收率:23％)。MS Calcd:443；MS Found:444([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.41(s,1H),8.36(d,J＝4.8Hz,1H),8.11(d,J＝4.8Hz,1H),7.62(dd,J＝3.2,2.4Hz,1H),7.39(dd,J＝3.2,2.4Hz,1H),4.87(s,3H),4.57(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝12.0Hz,1H),3.78(dd,J＝12.0,3.2Hz,1H),3.66-3.56(m,2H),3.00(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例2
(R)-3甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,300mg,0.861mmol)，1-甲基-1H-吡咯-5-硼酸(108mg,0.861mmol)溶入二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入碳酸钠(274mg,2.58mmol)，水(1mL)和Pd(PPh3)4(99mg,0.0861mmol)，然后升温至90℃反应9小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得(R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(2-a,83mg,0.238mmol,收率:27.6％)。MS Calcd:349；MS Found:350([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(2-a,83mg,0.238mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1-苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(142mg,0.357mmol)，碳酸钠(76mg,0.714mmol)，水(0.5mL)和Pd(dppf)Cl2(18mg,0.0238mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(2-b,266mg,0.455mmol)，不进一步纯化直接用于下一步反应。MS Calcd:585；MS Found:586([M+H]+)。
步骤3：将(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(2-b,266mg,0.455mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入4MKOH溶液(1mL)，升温至回流反应4小时。LC-MS显示反应完成，反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层，干燥后旋干，中压制备色谱纯化(10g正相柱，石油醚/乙酸乙酯，100％乙酸乙酯时出产品)，得标题化合物：(R)-3甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(2,24mg,0.056mmol,收率:12％)。MS Calcd:431；MS Found:432([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),8.51(s,1H),8.34(d,J＝5.0Hz,1H),8.05(d,J＝4.8Hz,1H),7.60(d,J＝2.0Hz,1H),7.54(t,J＝2.8Hz,1H),7.17(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),6.70(d,J＝2.0Hz,1H),4.96–4.86(m,1H),4.60(d,J＝10.8Hz,1H),4.16–4.07(m,1H),3.89(m,4H),3.82(d,J＝2.9Hz,1H),3.65-3.62(m,2H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例3
(R)-4-(7-(4-异丙磺酰基苯基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,500mg,1.43mmol)，4-异丙磺酰基苯硼酸(392mg,1.72mmol)溶入二氧六环(15mL)中，氮气保护下加入碳酸钠(455mg,4.29mmol)，水(2mL)和Pd(PPh3)4(165mg,0.143mmol)，然后升温至90℃反应8小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)得(R)-4-(2-氯-7-(4-异丙磺酰基苯基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(3-a,370mg,0.82mmol,收率:57.4％)。MS Calcd:451；MS Found:452([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(4-异丙磺酰基苯基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(3-a,100mg,0.222mmol)溶于二氧六环(6mL)中，氮气保护下加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1-苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(132mg,0.333mmol)，碳酸钠(71mg,0.666mmol)，水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(16mg,0.022mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得(R)-4-(7-(4-异丙磺酰基苯基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(3-b,216mg,0.314mmol)，直接用于下一步反应。MS Calcd:687；MS Found:688([M+H]+)。
步骤3：将(R)-4-(7-(4-异丙磺酰基苯基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(3-b,216mg,0.314mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入4MKOH溶液(1mL)，升温至回流反应4小时。LC-MS显示反应完成，反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层，干燥后旋干，中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA，50％MeCN时出产品)，得标题化合物：(R)-4-(7-(4-异丙磺酰基苯基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(3,30mg,0.056mmol,收率:17.6％)。MS Calcd:533；MS Found:534([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.68(s,1H),8.39-8.35(m,3H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,2H),7.54(t,J＝2.8Hz,1H),7.23(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.90–4.83(m,1H),4.55(d,J＝10.8Hz,1H),4.07(d,J＝8.0Hz,1H),3.85(d,J＝12.0Hz,1H),3.76(dd,J＝12.0,3.2Hz,1H),3.64–3.55(m,2H),3.52–3.44(m,1H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H),1.22(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例4
(R)-3甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,500mg,1.43mmol)，1-甲基-1H-吡咯-4-硼酸片呐醇酯(328mg,1.58mmol)溶入二氧六环(20mL)中，氮气保护下加入碳酸钠(455mg,2.58mmol)，水(4mL)和Pd(PPh3)4(165mg,0.143mmol)，然后升温至90℃反应9小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)得(R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(4-a,190mg,0.544mmol,收率:38％)。MS Calcd:349；MS Found:350([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(4-a,95mg,0.272mmol)溶于二氧六环(6mL)中，氮气保护下加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1-苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(163mg,0.408mmol)，碳酸钠(86mg,0.816mmol)，水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(20mg,0.027mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干得(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(4-b,200mg,0.342mmol)，不进一步纯化直接用于下一步反应。MS Calcd:585；MS Found:586([M+H]+)。
步骤3：将(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-甲苯磺酰基-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(4-b,200mg,0.342mmol)溶于乙腈(5mL)中，加入4MKOH溶液(1mL)，升温至回流反应4小时。LC-MS显示反应完成，反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层，干燥后旋干，中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA，35％MeCN时出产品)，得标题化合物：(R)-3甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(4,13mg,0.030mmol,收率:8.8％)。MS Calcd:431；MS Found:432([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),8.54(s,1H),8.39(d,J＝4.8Hz,1H),8.29(s,1H),8.24(s,1H),8.08(d,J＝4.8Hz,1H),7.63(t,J＝2.8Hz,1H),7.32–7.26(m,1H),4.89–4.82(m,1H),4.54(d,J＝10.8Hz,1H),4.07(d,J＝8.4Hz,1H),3.95(s,3H),3.85(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.65–3.55(m,2H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例5
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,70mg,0.152mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(78mg,0.228mmol)，碳酸钠(48mg,0.456mmol)，水(0.5mL)和Pd(dppf)Cl2(11mg,0.015mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物溶于二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(1mL)的混合溶剂中，搅拌至Boc完全脱掉。将反应液旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA)，得标题化合物：(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(5,37mg,0.084mmol,收率:55％)。MS Calcd:442；MS Found:443([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.29(s,1H),8.35(s,1H),8.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(d,J＝2.4Hz,2H),7.22(t,J＝8.0Hz,1H),4.85(s,3H),4.56(d,J＝11.2Hz,1H),4.08(d,J＝9.2Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.65–3.54(m,2H),2.99(s,3H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例6
((4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉(int-2,100mg,0.315mmol)溶于DMF(4mL)中，加入甲硫醇钠(20％aq,132mg,0.375mmol)，于室温下搅拌1小时，TLC显示原料消失。反应液倒入水中，加乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得黄色粘稠固体(R)-4-(2-氯-7-((甲硫基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(6-a,100mg,0.303mmol,收率:96％)，直接用于下一步。MS Calcd:329；MSFound:330([M+H]+)。
步骤2：将(R)-4-(2-氯-7-((甲硫基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(6-a,100mg,0.314mmol)溶于甲醇(5mL)中，加入氨基甲酸铵(95mg,1.22mmol)，冰浴下分批加入二乙酰基碘苯(294mg,0.912mmol)，缓慢升至室温反应1小时。LC-MS显示反应完成，将反应液旋干，残余物用薄层制备色谱纯化(DCM/MeOH＝10:1)，得黄色油((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺(6-b,74mg,0.206mmol,收率:65％)。MS Calcd:360；MS Found:361([M+H]+)。
步骤2：称取((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺(6-b,74mg,0.206mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(75mg,0.309mmol)，碳酸钠(66mg,0.618mmol)，水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(15mg,0.021mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA)，得到黄色固体((4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺(6,7mg,0.0158mmol,收率:7.7％)。MS Calcd:442；MS Found:443([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),8.36(d,J＝4.4Hz,2H),8.11(d,J＝5.2Hz,1H),7.63(s,1H),7.40(s,1H),4.94–4.49(m,4H),4.14-4.03(m,1H),3.91–3.72(m,3H),3.65-3.55(m,2H),2.83(s,3H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例7
(R)-3-甲基-4-(7-((4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉(int-2,100mg,0.315mmol)溶于DMF(5mL)中，加入1-甲磺酰基哌嗪(103mg,0.63mmol)，于室温下搅拌过夜，LC-MS显示反应完全。反应液倒入水中，加乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得(R)-4-(2-氯-7-((4-甲磺酰基哌嗪-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(7-a,138mg,0.315mmol,收率:100％)，直接用于下一步。MS Calcd:445；MSFound:446([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-((4-甲磺酰基哌嗪-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(7-a,138mg,0.315mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(154mg,0.63mmol)，碳酸钠(100mg,0.95mmol)，水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(23mg,0.0315mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA，15％MeCN出产品)，得到标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-((4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(7,30mg,0.0468mmol,收率:14.9％)。MS Calcd:527；MS Found:528([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.13(s,1H),8.58(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.26(d,J＝5.2Hz,1H),7.68(t,J＝2.8Hz,1H),7.44–7.38(m,1H),4.87(d,J＝7.6Hz,1H),4.77(s,2H),4.56(d,J＝9.6Hz,1H),4.10(d,J＝8.0Hz,1H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.62(d,J＝8.8Hz,2H),3.49-3.42(m,8H),2.98(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例8
(R)-4-(4-(3-甲基吗啉基)-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-吲哚-6-甲酸甲酯
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,50mg,0.138mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(72mg,0.179mmol)，碳酸钠(44mg,0.414mmol)，水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(10mg,0.0138mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA)，得到标题化合物：(R)-4-(4-(3-甲基吗啉基)-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(8,15mg,0.03mmol,收率:21.7％)。MS Calcd:500；MS Found:501([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(s,1H),8.76(d,J＝1.2Hz,1H),8.39(s,1H),8.21–8.16(m,1H),7.76(t,J＝2.8Hz,1H),7.54(d,J＝2.4Hz,1H),4.86(s,2H),4.55(d,J＝10.8Hz,1H),4.10(d,J＝7.6Hz,1H),3.90(s,3H),3.87(d,J＝6.0Hz,1H),3.85(s,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.65–3.58(m,2H),3.02(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例9
(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,250mg,0.717mmol)，1,4-二甲基-1H-吡咯-5-硼酸片呐醇酯(239mg,1.08mmol)溶入二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入碳酸钾(297mg,2.15mmol)，水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(52mg,0.0717mmol)，然后升温至90℃反应9小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得(R)-4-(2-氯-7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(9-a,100mg,0.275mmol,收率:38.4％)。MS Calcd:363；MS Found:364([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(9-a,50mg,0.137mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(67mg,0.275mmol)，碳酸钠(44mg,0.414mmol)，水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(10mg,0.0138mmol)，氮气保护下90℃反应8小时。LC-MS显示原料消耗完，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA)，得标题化合物：(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(9,35mg,0.0787mmol,收率:57％)。MS Calcd:445；MS Found:446([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.13(s,1H),8.49(s,1H),8.41(d,J＝5.2Hz,1H),8.14(d,J＝5.2Hz,1H),7.63(t,J＝2.8Hz,1H),7.45(s,1H),7.15(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),4.91(dd,J＝15.2,7.6Hz,1H),4.60(d,J＝9.6Hz,1H),4.10(d,J＝8.0Hz,1H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.73(s,3H),3.64(d,J＝8.4Hz,2H),1.99(s,3H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例10
(R)-3-甲基-4-(7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将1-甲基哌嗪(10-a，400mg，4mmol),氯甲基三氟硼酸钾(624mg，4mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到80℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得到目标化合物1-(三氟硼酸基甲基)-4-甲基哌嗪内盐(10-b，656mg，3.62mmol，91％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(10-b,500mg，1.44mmol)，1-(三氟硼酸基甲基)-4-甲基哌嗪内盐(31333-b，391mg，2.16mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，Xphos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(1.36g，4.2mmol)加入到TFA和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(乙酸乙酯：石油醚＝2:1)得到(R)-4-(2-氯-7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(10-c，325mg，0.85mmol，59％收率)。MS Calcd:381；MS Found:382([M+H]+)。
步骤3：将((R)-4-(2-氯-7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(10-c，100mg，0.26mmol)，(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(63mg，0.39mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(108mg，0.78mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(10,35mg，0.075mmol，29％收率)。MS Calcd:463；MS Found:464([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.15–8.04(m,2H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.47(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),4.86(d,J＝8.8,3.2Hz,1H),4.55(d,J＝12.0Hz,1H),4.10-4.06(m,1H),3.92–3.74(m,4H),3.68–3.51(m,2H),2.62–2.52(m,4H)，2.42–2.25(m,4H),2.15(s,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例11
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将((R)-4-(2-氯-7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(10-c，114mg，0.3mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(73mg，0.45mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(124mg，0.9mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(11，43mg，0.093mmol，31％收率)。MSCalcd:462；MS Found:463([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.23(s,1H),8.18(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.01(s,1H),7.59(t,J＝2.4Hz,1H),7.53-7.51(m,1H),7.46(t,J＝2.8Hz,1H),7.21(t,J＝8.0Hz,1H),4.84(d,J＝8.0Hz,1H),4.53(d,J＝8.0Hz,1H),4.09–4.05(m,1H),3.91–3.73(m,4H),3.67–3.47(m,2H),2.52–2.42(m,4H),2.38–2.23(m,4H),2.15(s,3H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例12
(R)-3-甲基-4-(7-(吗啉甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将吗啉(12-a，400mg，4.6mmol),氯甲基三氟硼酸钾(718mg，4.6mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到80℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得到目标化合物4-(三氟硼基甲基)吗啉(12-b，762mg，4.57mmol，98％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,450mg，1.3mmol)，4-(三氟硼基甲基)吗啉(12-b,437mg，2.6mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，XPhos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(1.3g，3.9mmol)加入到THF和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(乙酸乙酯：石油醚＝2:1)得到目标化合物(R)-4-(2-氯-7-(吗啉甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(12-c，363mg，0.98mmol，75％收率).MS Calcd:368；MS Found:369([M+H]+)。
步骤3：将(R)-4-(2-氯-7-(吗啉甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(12-c，100mg，0.27mmol)，(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(73mg，0.41mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(112mg，0.81mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-(吗啉甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(12，23mg，0.05mmol，19％收率)。MS Calcd:450；MSFound:451([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.11(s,1H),8.08(d,J＝4.8Hz,1H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.47(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.92–4.80(m,1H),4.56(d,J＝11.2Hz,1H),4.08(d,J＝11.2Hz,1H),3.98–3.74(m,5H),3.70–3.50(m,6H),3.32-3.22(m,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例13
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(吗啉甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-4-(2-氯-7-(吗啉甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(12-c，112mg，0.30mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(79mg，0.45mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(124mg，0.9mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到目标化合物：(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(吗啉甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(13，35mg，0.078mmol，26％收率)。MS Calcd:449；MS Found:450([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),8.18(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.05(s,1H),7.59(t,J＝2.0Hz,1H),7.53(dt,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.47(t,J＝2.8Hz,1H),7.21(t,J＝8.0Hz,1H),4.85(d,J＝7.6Hz,1H),4.53(d,J＝12.4Hz,1H),4.11–4.02(m,1H),3.89(s,2H),3.86(d,J＝11.2Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.6Hz,1H),3.67–3.49(m,6H),3.35–3.41(m,4H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例14
(R)-3-甲基-4-(7-(吡咯烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将吡咯烷(14-a，420mg，5.9mmol),氯甲基三氟硼酸钾(920mg，5.9mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到85℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得到1-(三氟硼基甲基)吡咯烷(14-b，260mg，1.7mmol，29％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(14-b,350mg，1mmol)，1-(三氟硼基甲基)吡咯烷(300mg，2mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，XPhos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(975mg，3mmol)加入到THF和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(乙酸乙酯：石油醚＝2:1)得到目标化合物(S)-4-(2-氯-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(14-c,198mg，0.56mmol，56％收率)。MS Calcd:352；MS Found:353([M+H]+)。
步骤3：将(S)-4-(2-氯-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(14-c,93mg，0.26mmol)，(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(84mg，0.52mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(108mg，0.78mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到目标化合物(R)-3-甲基-4-(7-(吡咯烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(14，18mg，0.04mmol，14％收率)。MSCalcd:434；MS Found:435([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.10(s,1H),8.08(d,J＝4.8Hz,1H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.44(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.86(d,J＝7.6Hz,1H),4.56(d,J＝12.0Hz,1H),4.09-4.05(m,3H),3.86(d,J＝12.0,3.2Hz,1H),3.66-3.59(m,3H),2.73–2.58(m,4H),1.81–1.67(m,4H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例15
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-4-(2-氯-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(14-c，115mg，0.33mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(106mg，0.66mmol)，Pd(dppf)Cl2(20mg，0.03mmol)，碳酸钾(138mg，0.99mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到标题化合物：(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(15，23mg，0.05mmol，16％收率).MS Calcd:433；MS Found:434([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),8.19(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),8.06–8.04(m,1H),7.55(t,J＝2.8Hz,1H),7.53(t,J＝8.0Hz,1H),7.47(t,J＝2.8Hz,1H),7.21(t,J＝8.0Hz,1H),4.89–4.80(m,1H),4.53(d,J＝12.4Hz,1H),4.08–4.05(m,3H),3.86(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.65–3.51(m,2H),2.74–2.58(m,4H),1.74(br,4H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例16
((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺
步骤1：称取((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺(6-b,50mg,0.139mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入吲哚-4-硼酸片呐醇酯(84mg,0.347mmol)，碳酸钾(58mg,0.417mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(16mg,0.0139mmol)，氮气保护下105度反应12小时。LC-MS显示反应完全，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA，约29％MeCN时出产品)，得到标题化合物：((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺(16，18mg,0.0408mmol,收率:29％)。MS Calcd:441.13；MS Found:442.25([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.34(s,1H),8.52(s,1H),8.20(d,J＝7.6Hz,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(q,J＝3.2Hz,1H),7.42(d,J＝3.2Hz,1H),7.23(t,J＝7.6Hz,1H),5.47(s,2H),4.86(d,J＝7.6Hz,1H),4.56(d,J＝9.6Hz,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.63(t,J＝8.4Hz,1H),3.62–3.58(m,1H),3.56(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例17
(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(9-a,90mg,0.248mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入吲哚-4-硼酸片呐醇酯(150mg,0.620mmol)，碳酸钾(103mg,0.744mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(29mg,0.025mmol)，氮气保护下105度反应12小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％TFA)，得标题化合物：(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(17,30mg,0.0675mmol,收率:27％)。MS Calcd:444；MS Found:445([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(s,1H),8.43(s,1H),8.13(d,J＝7.6Hz,1H),7.67–7.49(m,1H),7.44(s,1H),7.39(t,J＝2.8Hz,1H),7.23–7.14(m,2H),4.92(dt,J＝7.2,4.0Hz,1H),4.63–4.56(m,1H),4.10(dd,J＝7.6,3.2Hz,1H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.74(s,3H),3.70–3.58(m,2H),1.99(s,3H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例18
(3R)-3-甲基-4-(7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,100mg,0.28mmol)溶于DMF(10mL)中，冰浴冷却下加入氢化钠(60％purity,22mg,0.56mmol)，搅拌30分钟后加入磺甲烷(119mg,0.84mmol)，缓慢升至室温，反应2小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得油状物(3R)-4-(2-氯-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(18-a,103mg,0.275mmol,收率:98％)，直接用于下一步。MS Calcd:375；MS Found:376([M+H]+)。
步骤2：称取(3R)-4-(2-氯-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(18-a,119mg,0.319mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(117mg,0.479mmol)，碳酸钾(132mg,0.957mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(37mg,0.032mmol)，氮气保护下100℃反应6小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％TFA，约33％MeCN时出产品)，得黄色固体(3R)-3-甲基-4-(7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(18,10mg,0.0218mmol,收率:6.9％)。MS Calcd:457；MS Found:458([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.97(s,1H),8.47(s,1H),8.39(d,J＝5.2Hz,1H),8.17(d,J＝5.2Hz,1H),7.67(t,J＝3.2Hz,1H),7.41(dt,J＝3.2,1.6Hz,1H),5.18(q,J＝7.2Hz,1H),4.87(t,J＝8.0Hz,1H),4.58(t,J＝9.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.68–3.59(m,1H),3.63–3.54(m,1H),2.88(s,3H),1.79(d,J＝7.2Hz,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例19
(R)-4-(7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，100mg，0.29mmol)，3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)异噁唑(96mg，0.43mmol)，碳酸钠(103mg，0.97mmol)，Pd(dppf)Cl2(22mg，0.03mmol)加入到1,4-二氧六环(3mL)和水(0.5mL)中，氮气置换三次，升温至95℃搅拌6h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥浓缩后，板层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(19-a，100mg，0.27mmol，93％收率)。MS Calcd:364；MS Found:365([M+H]+)。
步骤2：(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(19-a，100mg，0.27mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(98mg，0.4mmol)，碳酸铯(176mg，0.54mmol)，Pd(dppf)Cl2(20mg，0.027mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.4mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥浓缩后，中压制备液相纯化(乙酸乙酯:石油醚＝1:1，Rf＝0.6)可得标题化合物：(R)-4-(7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(19，40mg，0.09mmol，30％收率)。MS Calcd:445；MS Found:446([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),8.33(s,1H),8.17(d,J＝7.2Hz,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.41(t,J＝2.8Hz,1H),7.23(t,J＝2.8Hz,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),4.89(d,J＝8.0Hz,1H),4.58(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),4.03(q,J＝7.2Hz,1H),3.89-3.76(m,2H),3.64-3.58(m,2H),2.42(s,3H),2.25(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例20
(3R)-4-(7-((2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸叔丁酯(20-a，600mg，2.7mmol),氯甲基三氟硼酸钾(421mg，2.7mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到85℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得到7-((三氟硼烷基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸叔丁酯(20-b，760mg，2.6mmol，96％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,450mg，1.3mmol)，7-((三氟硼烷基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸叔丁酯(20-b，750mg，2.6mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，Xphos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(1.3g，3.9mmol)加入到THF和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH:DCM＝1:20)得到7-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸酯叔丁酯(20-c，216mg，0.42mmol，32％收率)。MS Calcd:507；MS Found:508([M+H]+)。
步骤3：将7-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸酯叔丁酯(20-c，100mg，0.2mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(64mg，0.4mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到7-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸叔丁酯(20-d，64mg，0.11mmol，55％收率)。MS Calcd:588；MS Found:589([M+H]+)。
步骤4：将7-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸叔丁酯(20-d，64mg，0.11mmol)，加入到氯化氢的二氧六环溶液中(4N，2mL)，室温搅拌2小时，减压浓缩。剩余物加入碳酸氢钠水溶液调pH到8，减压浓缩，用甲醇，二氯甲烷的混合溶剂(1:10,2mL)洗涤，抽滤，滤液经减压浓缩，得到标题化合物：(3R)-4-(7-((2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(20，21mg，0.04mmol，39％收率)。MS Calcd:488；MSFound:489([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),8.00(d,J＝6.4Hz,1H),7.58-7.46(m,5H),4.85(d,J＝8.0Hz,1H),4.53(d,J＝12.0Hz,1H),4.07(d,J＝10.8Hz,1H),3.98(s,2H),3.87–3.75(m,2H),3.61–3.53(m,2H),2.87–2.62(m,12H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例21
(3R)-4-(7-((2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)-2-(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将7-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸酯叔丁酯(20-c，95mg，0.19mmol)，(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(62mg，0.38mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到目标化合物叔丁基7-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸盐(21-a，59mg，0.1mmol，52％收率)。MS Calcd:589；MS Found:590([M+H]+)。
步骤2：将叔丁基7-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷-2-羧酸盐(21-a，59mg，0.1mmol)加入到氯化氢的二氧六环溶液中(4N，2mL)，室温搅拌2小时，减压浓缩。剩余物加入碳酸氢钠水溶液调pH到8，减压浓缩，用甲醇，二氯甲烷的混合溶剂(1:10,2mL)洗涤，抽滤，滤液经减压浓缩，得到棕色目标化合物(3R)-4-(7-((2,7-二氮杂螺[4.4]壬-2-基)甲基)-2-(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(21，18mg，0.036mmol，36％收率)。MS Calcd:489；MS Found:490([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.84(s,1H),9.19(s,1H),8.83(s,1H),8.02(s,1H),7.74(s,1H),7.52(s,1H),4.85(d,J＝8.0Hz,1H),4.53(d,J＝12.0Hz,1H),4.07(d,J＝10.4Hz,1H),3.98(s,2H),3.92–3.69(m,2H),3.66–3.52(m,2H),2.75–2.33(m,12H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例22
(R)-1-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁基-3-醇
步骤1：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，113mg，0.38mmol)，3-(苄氧基)氮杂环丁烷(62mg，0.38mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3mL)，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(242mg，1.14mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(EA：PE＝1:1)得到目标化合物(R)-4-(7-(((3-(苄氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(22-a，85mg，0.19mmol，50％收率)。MS Calcd:444；MS Found:445([M+H]+)。
步骤2：将(R)-4-(7-(((3-(苄氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(22-a，85mg，0.19mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(62mg，0.38mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到目标化合物(R)-4-(7-(((3-(苄氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(22-b，56mg，0.11mmol，56％收率)。MS Calcd:525；MS Found:526([M+H]+)。
步骤3：将(R)-4-(7-(((3-(苄氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(22-b，56mg，0.11mmol)加入到氯仿中(2mL)，滴加甲磺酸(0.3mL)，室温搅拌2小时，倒入冰水(5mL)，用碳酸铵溶液调pH到8，用二氯甲烷萃取(3mLx2)，有机相经合并，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，剩余物经高效薄层色谱制备板纯化(甲醇：二氯甲烷＝1:10)得到目标化合物(R)-1-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁基-3-醇(22，21mg，0.05mmol，44％收率)。MSCalcd:435；MS Found:436([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),8.32(s,1H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.95(s,1H),7.54–7.47(m,3H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),5.37(d,J＝6.4Hz,1H),4.84(brs,1H),4.53(d,J＝12.4Hz,1H),4.27–4.22(m,1H),4.07(d,J＝10.4Hz,1H),3.99(s,2H),3.87–3.75(m,2H),3.71–3.50(m,5H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例23
(R)-1-(((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇
步骤1：将(R)-吡咯烷丁-3-醇(23-a，310mg，3.6mmol),氯甲基三氟硼酸钾(555mg，3.6mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到85℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得到目标化合物(R)-1-((三氟硼烷基)甲基)吡咯烷-3-醇(23-b，530mg，3.15mmol，88％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,522mg，1.5mmol)，(R)-1-((三氟硼烷基)甲基)吡咯烷-3-醇(23-b，530mg，3.15mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，Xphos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(1.5g，4.5mmol)加入到THF和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH:DCM＝1:20)得到(R)-1-(((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(23-c，158mg，0.43mmol，29％收率)。MS Calcd:368；MS Found:369([M+H]+)。
步骤3：将(R)-1-(((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(23-c，75mg，0.2mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(64mg，0.4mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-1-(((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(23，21mg，0.05mmol，25％收率)。MS Calcd:449；MS Found:450([M+H]+)。1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),8.19(d,J＝7.6Hz,1H),8.00(s,1H),7.56(s,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(s,1H),7.21(t,J＝8.0Hz,1H),4.87(brs,1H),4.69(brs,1H),4.55(d,J＝12.0Hz,1H),4.21(brs,1H),4.08-3.95(m,3H),3.89–3.74(m,2H),3.65-3.50(m,3H),2.84(dd,J＝9.6,6.0Hz,1H),2.76-2.70(m,1H),2.47-2.44(m,1H),2.05–1.98(m,1H),1.56(brs,1H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例24
(R)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇
步骤1：将(R)-1-(((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(23-c，80mg，0.22mmol)，(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(70mg，0.44mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到目标化合物(R)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(24，32mg，0.07mmol，32％收率)。MS Calcd:450；MS Found:451([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.76(s,1H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.19–8.03(m,2H),7.60(brs,1H),7.45(brs,1H),4.87(brs,1H),4.69(d,J＝4.8Hz,1H),4.55(d,J＝12.0Hz,1H),4.21(brs,1H),4.08(d,J＝9.6Hz,1H),4.00(d,J＝4.8Hz,2H),3.89–3.74(m,2H),3.65-3.56(m,2H),2.86-2.67(m,2H),2.61-2.56(m,1H),2.01(dd,J＝13.6,7.2Hz,1H)1.56(brs,1H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例25
(R)-4-(7-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉(int-2,83mg,0.261mmol)溶于DMF(5mL)中，加入氮杂环丁烷(45mg,0.784mmol)，于室温下搅拌过夜，LC-MS显示反应完成。反应液倒入水中，加乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得(R)-4-(7-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(25-a,84mg,0.249mmol,收率:95％)，直接用于下一步。MS Calcd:338；MS Found:339([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(7-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(25-a,84mg,0.249mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(90mg,0.373mmol)，碳酸钾(103mg,0.747mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(28mg,0.025mmol)，氮气保护下100℃反应8小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/纯水)，得标题化合物：(R)-4-(7-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(25,10mg,0.0238mmol,收率:9.6％)。MSCalcd:420；MS Found:421([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),7.98(s,1H),7.65–7.59(m,1H),7.42(t,J＝2.8Hz,1H),4.84(d,J＝7.6Hz,1H),4.54(d,J＝12.0Hz,1H),4.10–4.03(m,1H),3.90(s,2H),3.85(d,J＝11.6Hz,1H),3.76(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.64–3.52(m,2H),3.27(d,J＝13.8Hz,4H),2.01(t,J＝6.8Hz,2H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例26
(R)-4-(7-(1H-吡唑-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取吡唑(53mg,0.783mmol)溶于DMF(5mL)中，氮气保护下加入氢化钠(60％purity,31mg,0.783mmol)，室温下搅拌30分钟后加入(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉(int-2,83mg,0.261mmol)，于室温下继续搅拌2小时，LC-MS显示反应完成。反应液倒入水中，加乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(10g硅胶柱，PE/EA，约32％EA时出产物)，得无色油(R)-4-(7-(1H-吡唑-1-基甲基)-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(26-a,92mg,0.261mmol,收率:100％)，直接用于下一步。MS Calcd:349；MS Found:350([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(7-(1H-吡唑-1-基甲基)-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(26-a,92mg,0.261mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(94mg,0.392mmol)，碳酸钾(108mg,0.783mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(30mg,0.026mmol)，氮气保护下100℃反应8小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05％TFA)，得到黄色固体(R)-4-(7-(1H-吡唑-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(26,10mg,0.0232mmol,收率:8.9％)。MSCalcd:431；MS Found:432([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.96(s,1H),8.40(d,J＝5.2Hz,1H),8.15(d,J＝5.2Hz,1H),8.03(s,1H),7.92(s,1H),7.64(s,1H),7.48(s,1H),7.44(s,1H),6.26(s,1H),5.70(s,2H),4.84(d,J＝7.6Hz,1H),4.54(d,J＝11.2Hz,1H),4.07(d,J＝9.2Hz,1H),3.86(d,J＝11.6Hz,1H),3.81–3.73(m,1H),3.65-3.53(m,2H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例27
(R)-(4-(4-(3-甲基吗啉代)-7)((甲基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-吲哚-6-基)甲醇
步骤1：称取4-溴-1H-吲哚-6-甲酸甲酯(27-a,500mg,1.97mmol)，溶于四氢呋喃(20mL)中，冰浴冷却下滴入二异丁基氢化铝(1M in tolune,5.9mL,5.9mmol)，自然升至室温下搅拌1小时，TLC显示反应完成。反应液倒入1M HCl(aq)中淬灭，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得4-溴-1H-吲哚-6-甲醇(27-b,449mg,1.9mmol,收率:96.6％)，直接用于下一步。
步骤2：称取4-溴-1H-吲哚-6-甲醇(27-b,449mg,1.9mmol)溶于乙腈(10mL)中，加入二碳酸二叔丁酯(828mg,3.8mmol)和4-二甲胺基吡啶(46mg,0.38mmol)，室温下搅拌1小时，TLC显示反应完成。反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层后，水层再用乙酸乙酯萃取2次。合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得4-溴-6-((叔丁氧羰基)氧甲基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(27-c,826mg,1.94mmol)，直接用于下一步。
步骤3：称取4-溴-6-((叔丁氧羰基)氧甲基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(27-c,826mg,1.94mmol)溶于二氧六环(20mL)中，氮气保护下加入偶联硼酸片呐醇酯(885mg,3.88mmol)，乙酸钾(570mg,5.82mmol)和Pd(dppf)Cl2(142mg,0.194mmol)，加热至100度下反应12小时。反应液倒入水中，水层用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得6-((叔丁氧羰基)氧甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(27-d,300mg,0.634mmol,收率:32.7％)。
步骤4：称取(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,50mg,0.14mmol)溶于二氧六环(5mL)中，在氮气保护下加入叔丁基6-((((叔丁氧基羰基)氧基)甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吲哚-1-羧酸酯(27-d,131mg,0.28mmol)，碳酸钾(57mg,0.42mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(16mg,0.014mmol)，在100℃反应6h。LC-MS显示反应完成，加入3mL水淬灭反应，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，向残余物加入DCM:TFA＝6:1溶液2mL，在室温下搅拌30分钟，LC-MS显示反应完成，旋干溶液，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％TFA)，得标题化合物：(R)-(4-(4-(3-甲基吗啉代)-7)((甲基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-吲哚-6-基)甲醇(27,10mg,0.0212mmol,收率:15％)。MS Calcd:472；MS Found:473([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.21(s,1H),8.35(s,1H),8.13(d,J＝1.6Hz,1H),7.50(s,1H),7.45-7.42(m,2H),5.19(t,J＝5.6Hz,1H),4.85(s,3H),4.66(d,J＝5.6Hz,2H),4.57(d,J＝11.6Hz,1H),4.13–4.03(m,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.66-3.54(m,2H),2.99(s,3H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例28
(R)-4-(7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(19-a，80mg，0.22mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(80mg，0.33mmol)，碳酸铯(143mg，0.44mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.4mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥浓缩后，经正相中压制备液相和反相中压制备液相纯化可得标题化合物：(R)-4-(7-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(28，20mg，0.045mmol，20％收率)。MS Calcd:446；MS Found:447([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.38(s,1H),8.33(d,J＝5.2Hz,1H),8.04(d,J＝5.2Hz,1H),7.56(s,1H),7.12(s,1H),4.90(d,J＝8.4Hz,1H),4.58(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝7.6Hz,1H),3.89-3.85(m,2H),3.80-3.76(m,2H),2.41(s,3H),2.24(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例29
(R)-4-(7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，250mg，0.72mmol)，1-异丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(220mg，0.93mmol)，碳酸钠(229mg，2.16mmol)，Pd(dppf)Cl2(51mg，0.07mmol)加入到1,4-二氧六环(5mL)和水(1mL)中，氮气置换三次，升温至100℃搅拌6h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥浓缩后，高效薄层色谱制备板纯化(乙酸乙酯：石油醚＝1:2)得((R)-4-(2-氯-7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(29-a，200mg，0.53mmol，73％收率)。MSCalcd:377；MS Found:378([M+H]+)。
步骤2：称取((R)-4-(2-氯-7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(29-a，50mg，0.15mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(47mg，0.19mmol)，碳酸铯(85mg，0.26mmol)，Pd(dppf)Cl2(19mg，0.026mmol)加入到1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(乙酸乙酯:石油醚＝3:2，Rf＝0.3)、反相中压制备液相纯化得标题化合物：(R)-4-(7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉(29，10mg，0.022mmol，17％收率)。MS Calcd:458；MS Found:459([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.21(s,1H),8.37(s,1H),8.13(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.64(d,J＝1.6Hz,1H),7.50(dt,J＝8.0,1.2Hz,1H),7.37(t,J＝2.8Hz,1H),7.22–7.12(m,2H),6.49(d,J＝1.8Hz,1H),4.93–4.85(m,1H),4.57(d,J＝10.6Hz,1H),4.5-4.45(m,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.91–3.75(m,2H),3.69–3.54(m,2H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H),1.33(d,J＝2.0Hz,3H),1.31(d,J＝2.0Hz,3H)。
实施例30
(R)-4-(7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取((R)-4-(2-氯-7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(29-a，50mg，0.13mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(46mg，0.19mmol)，碳酸铯(85mg，0.26mmol)，Pd(dppf)Cl2(19mg，0.026mmol)加入到1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(乙酸乙酯:石油醚＝3:1，Rf＝0.2)、反相中压制备液相纯化可得标题化合物：(R)-4-(7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(30，40mg，0.087mmol，67％收率)。MS Calcd:459；MS Found:460([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),8.43(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),8.00(d,J＝5.2Hz,1H),7.65(d,J＝1.6Hz,1H),7.52(t,J＝2.8Hz,1H),7.08(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),6.50(d,J＝2.0Hz,1H),4.95–4.84(m,1H),4.59(d,J＝10.8Hz,1H),4.50-4.40(m,1H),4.14-4.06(m,1H),3.92–3.75(m,2H),3.70–3.55(m,2H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H),1.33(d,J＝2.0Hz,3H),1.31(d,J＝2.0Hz,3H)。
实施例31
(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，250mg，0.72mmol)，1,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(206mg，0.93mmol)，碳酸钠(229mg，2.16mmol)，Pd(dppf)Cl2(51mg，0.07mmol)加入到1,4-二氧六环(5mL)和水(1mL)中，氮气置换三次，升温至100℃搅拌6h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥浓缩后，中压制备液相纯化得((R)-4-(2-氯-7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(31-a，100mg，0.27mmol，38％收率)。MS Calcd:363；MS Found:364([M+H]+)。
步骤2：称取((R)-4-(2-氯-7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(31-a，50mg，0.14mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(51mg，0.21mmol)，碳酸铯(91mg，0.28mmol)，Pd(dppf)Cl2(21mg，0.029mmol)加入到1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(乙酸乙酯：石油醚＝2:1，Rf＝0.3)、反相中压制备液相纯化可得标题化合物：(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉(31，20mg，0.045mmol，32％收率)。MS Calcd:444；MS Found:445([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.27(s,1H),8.52(s,1H),8.15(d,J＝7.6Hz,1H),8.10(s,1H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(t,J＝2.8Hz,1H),7.37(t,J＝2.8Hz,1H),7.23(t,J＝7.6Hz,1H),4.93–4.84(m,1H),4.56(d,J＝11.2Hz,1H),4.12–4.06(m,1H),3.89–3.84(m,4H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.67–3.53(m,2H),2.39(s,3H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例32
(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取((R)-4-(2-氯-7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(31-a，50mg，0.14mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(51mg，0.21mmol)，碳酸铯(91mg，0.28mmol)，Pd(dppf)Cl2(21mg，0.029mmol)加入到1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(甲醇:二氯甲烷＝1:10，Rf＝0.3)纯化可得标题化合物：(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(32，20mg，0.045mmol，32％收率)。MS Calcd:445；MS Found:446([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.47(s,1H),8.37(d,J＝4.8Hz,1H),8.15(s,1H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),7.61(t,J＝3.2Hz,1H),7.28-7.26(m,1H),4.93–4.85(m,1H),4.57(d,J＝10.8Hz,1H),4.12–4.06(m,1H),3.95–3.85(m,4H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.67–3.58(m,2H),2.38(s,3H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例33
(R)-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，200mg，0.57mmol)，1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(100mg，0.48mmol)，碳酸钠(153mg，1.44mmol)，Pd(dppf)Cl2(37mg，0.05mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，氮气置换三次，升温至95℃搅拌5h。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，加入乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(乙酸乙酯：石油醚＝1:1，Rf＝0.3)纯化得((R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(33-a，100mg，0.286mmol，59％收率)。MS Calcd:349；MS Found:350([M+H]+)。
步骤2：称取((R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(33-a，50mg，0.14mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(42mg，0.17mmol)，碳酸铯(91mg，0.28mmol)，Pd(dppf)Cl2(21mg，0.029mmol)加入到1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(乙酸乙酯：石油醚＝3:1，Rf＝0.2)可得标题化合物：(R)-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉(33，50mg，0.116mmol，83％收率)。MSCalcd:430；MS Found:431([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.27(s,1H),8.41(s,1H),8.16(dd,J＝7.6,0.8Hz,1H),7.83(d,J＝2.0Hz,1H),7.55(d,J＝8.0Hz,1H),7.49-7.46(m,2H),7.40(d,J＝2.0Hz,1H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),4.95–4.80(m,1H),4.56(d,J＝11.6Hz,1H),4.12–4.06(m,1H),3.95(s,3H),3.90–3.74(m,2H),3.67-3.54(m,2H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例34
(R)-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取((R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(33-a，50mg，0.14mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(51mg，0.21mmol)，碳酸铯(91mg，0.28mmol)，Pd(dppf)Cl2(21mg，0.029mmol)加入到1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(乙酸乙酯：石油醚＝3:1，Rf＝0.2)可得标题化合物：(R)-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(34，20mg，0.046mmol，33％收率)。MS Calcd:431；MS Found:432([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.46(s,1H),8.38(d,J＝5.2Hz,1H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),7.85(d,J＝2.0Hz,1H),7.61(t,J＝3.2Hz,1H),7.40(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),7.35(d,J＝2.0Hz,1H),4.89(d,J＝7.8Hz,1H),4.57(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.4Hz,1H),3.96(s,3H),3.89–3.73(m,2H),3.70–3.55(m,2H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例35
(R)-N-甲基-1-(4-(3-甲基吗啉代)-7((甲基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺
步骤1：在氮气保护下，称取(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,60mg,0.165mmol)溶于二氧六环(5mL)中，再加入N-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(29mg,0.199mmol)，XPhos(16mg,0.033mmol)，Cs2CO3(107mg,0.33mmol)，Pd2(dba)3(15mg,0.0165mmol)和H2O(0.5mL)，加完后在微波140℃下反应40min，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％TFA)，得标题化合物：(R)-N-甲基-1-(4-(3-甲基吗啉代)-7((甲基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(35,30mg,0.0635mmol,收率:38.5％)。MS Calcd:472；MS Found:473([M+H]+)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),8.54(s,1H),8.28–8.20(m,1H),7.56–7.48(m,1H),7.46–7.33(m,2H),4.89(s,2H),4.42(d,J＝11.2Hz,1H),4.09(d,J＝8.4Hz,1H),3.94–3.82(m,2H),3.77(dd,J＝12.0,3.2Hz,1H),3.68-3.57(m,2H),3.27–3.16(m,3H),3.13(s,3H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例36
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(2-a,100mg,0.287mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(84mg,0.344mmol)，K2CO3(119mg,0.861mmol)，Pd(PPh3)4(33mg,0.0287mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％TFA)，得标题化合物：(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(36,24mg,0.0558mmol,收率:20％)。MS Calcd:430；MS Found:431([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(s,1H),8.46(s,1H),8.17(d,J＝7.6Hz,1H),7.59(d,J＝1.6Hz,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(t,J＝2.8Hz,1H),7.27(s,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),6.69(d,J＝2.0Hz,1H),4.89(d,J＝6.8Hz,1H),4.60(d,J＝10.8Hz,1H),4.10(d,J＝8.4Hz,1H),3.89(s,3H),3.88–3.76(m,2H),3.69–3.55(m,2H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例37
(R)-3-甲基-4-(7-((甲基磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将(R)-4-(2-氯-7-((甲基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,50mg，0.14mmol)，(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)硼酸(45mg，0.28mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(70mg，0.5mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-((甲基磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(37，21mg，0.05mmol，36％收率)。MS Calcd:443；MSFound:444([M+H]+)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),9.22(s,1H),8.84(s,1H),8.37(s,1H),7.75(d,J＝2.8Hz,1H),7.45(d,J＝2.8Hz,1H),4.87(s,2H),4.85(d,J＝10.8Hz,1H),4.56(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.4Hz,1H),3.87(d,J＝11.8Hz,1H),3.78(dd,J＝11.8,3.2Hz,1H),3.69–3.53(m,2H),3.00(s,3H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例38
(R)-4-(7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将3,3-二氟吡咯烷(38-a，360mg，3.4mmol),氯甲基三氟硼酸钾(530mg，3.4mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到85℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得1-(三氟硼烷基甲基)-3,3-二氟吡咯烷(38-b，410mg，2.2mmol，64％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,383mg，1.1mmol)，1-(三氟硼烷基甲基)-3,3-二氟吡咯烷(38-b，410mg，2.2mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，Xphos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(1.1g，3.3mmol)加入到THF和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH:DCM＝1:20)得(R)-4-(2-氯-7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(38-c，109mg，0.28mmol，25％收率)。MS Calcd:388；MS Found:389([M+H]+)。
步骤3：将(R)-4-(2-氯-7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(38-c，50mg，0.13mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(42mg，0.26mmol)，Pd(dppf)Cl2(8mg，0.01mmol)，碳酸钾(70mg，0.5mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得标题化合物：(R)-4-(7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(38，18mg，0.04mmol，30％收率)。MS Calcd:469；MS Found:470([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(s,1H),8.22–8.15(m,1H),8.08(s,1H),7.57–7.50(m,2H),7.47(t,J＝2.8Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),4.85(d,J＝8.0Hz,1H),4.54(d,J＝12.0Hz,1H),4.09-4.02(m,3H),3.86(d,J＝10.8Hz,1H),3.77(dd,J＝10.8,3.2Hz,1H),3.67–3.49(m,2H),3.02(t,J＝13.2Hz,2H),2.84(t,J＝6.8Hz,2H),2.33-2.20(m,2H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例39
(R)-4-(7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-4-(2-氯-7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(38-c,56mg,0.15mmol),(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(42mg,0.26mmol)，Pd(dppf)Cl2(8mg，0.01mmol)，碳酸钾(70mg，0.5mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得标题化合物：(R)-4-(7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(39，13mg，0.03mmol，18％收率)。MS Calcd:470；MS Found:471([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.14(s,1H),8.08(d,J＝4.8Hz,1H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.43(dd,J＝3.2,1.6Hz,1H),4.86(d,J＝7.6Hz,1H),4.56(d,J＝11.2Hz,1H),4.09-4.03(m,3H),3.86(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.68–3.52(m,2H),3.02(t,J＝13.2Hz,2H),2.84(t,J＝6.8Hz,2H),2.33-2.22(m,2H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例40
(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,1.23g,3.53mmol)溶于二氧六环溶液(15mL)中，再加入1,3,5-三甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(1g,4.24mmol)，K2CO3(1.46g,10.59mmol)，Pd(dppf)Cl2(258mg,0.353mmol)和H2O(1.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LC-MS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA＝2:1)，得(R)-4-(2-氯-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(40-a,711mg,1.88mmol,收率:53.4％)。MS Calcd:377；MS Found:378([M+H]+)。
步骤2：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(40-a,100mg,0.265mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(78mg,0.318mmol)，K2CO3(110mg,0.795mmol)，Pd(PPh3)4(31mg,0.0265mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)，得标题化合物：(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(40,70mg,0.152mmol,收率:57％)。MSCalcd:459；MS Found:460([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),8.08(s,1H),8.04(d,J＝4.8Hz,1H),7.55(t,J＝2.8Hz,1H),7.17(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.93-4.88(m,1H),4.63–4.54(m,1H),4.09(d,J＝7.8Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.80-3.77(s,4H),3.64–3.60(m,2H),2.21(s,3H),2.14(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例41
(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(40-a,100mg,0.265mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶(78mg,0.318mmol)，K2CO3(110mg,0.795mmol)，Pd(PPh3)4(31mg,0.0265mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)，得标题化合物：(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(41,21mg,0.045mmol,收率:17％)。MSCalcd:459；MS Found:460([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),9.18(s,1H),8.81(s,1H),8.06(s,1H),7.68(t,J＝2.8Hz,1H),7.22(d,J＝2.4Hz,1H),4.95–4.85(m,1H),4.58(d,J＝10.8Hz,1H),4.10(d,J＝7.8Hz,1H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.81-3.77(m,4H),3.67-3.56(m,2H),2.21(s,3H),2.14(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例42
4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：4-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(2-a，175mg，0.5mmol)溶于2mL CCl4中，加入N-氯代丁二酰亚胺(133mg，1.0mmol)升温至90℃反应4小时，加入20mL水淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，正相得到4-(2-氯-7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(42-a，134mg，0.35mmol，70％yiled)。MS Calcd:383；MS Found:384([M+H]+)。
步骤2：4-(2-氯-7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(42-a，134mg，0.35mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(85.4mg，0.35mmol)，四三苯基磷羓(35.52mg，0.035mmol)，碳酸铯(228.2mg，0.7mmol)溶于2mL二氧六环和0.5mL水中，真空置换氮气三次，升温至100℃，反应4小时，10mL水淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高效薄层色谱制备板得到4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(42，10mg，0.021mmol，6.14％收率)。MS Calcd:465；MSFound:466([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),8.62(s,1H),8.33(s,1H),8.03(s,1H),7.79(s,1H),7.54(s,1H),7.05(s,1H),4.92(brs,1H),4.61(brs,1H),4.10(brs,1H),3.87-3.78(m,5H),3.64(brs,2H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H)).
实施例43
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，150mg，0.43mmol)，3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(124mg，0.56mmol)，碳酸铯(280mg，0.86mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(28mg，0.04mmol)加入到1,4-二氧六环(3mL)和水(0.5mL)中，氮气置换三次，升温至120℃搅拌6h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥浓缩后，板层析(乙酸乙酯：石油醚＝2:1)纯化得((R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(43-a，50mg，0.14mmol，32％收率)。MS Calcd:363；MS Found:364([M+H]+)。
步骤2：称取((R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(43-a，50mg，0.14mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(51mg，0.21mmol)，碳酸铯(91mg，0.28mmol)，Pd(dppf)Cl2(21mg，0.029mmol)加入到1,4-二氧六环(1.5mL)和水(0.3mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100℃反应1h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(乙酸乙酯：石油醚＝2:1，Rf＝0.3)和反相中压制备液相分离纯化可得标题化合物：(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(43，30mg，0.067mmol，48％收率)。MS Calcd:445；MSFound:446([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.94(s,1H),8.49(s,1H),8.38(d,J＝2.8Hz,1H),8.09(d,J＝4.8Hz,1H),7.58(t,J＝2.8Hz,1H),7.45(s,1H),7.12(dd,J＝3.2,1.6Hz,1H),4.96–4.88(m,1H),4.61(d,J＝10.0Hz,1H),4.10(d,J＝7.6Hz,1H),3.89–3.80(m,3H),3.73(s,3H),3.65–3.62(m,1H),1.99(s,3H),1.45(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例44
(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(四氢-2H-吡喃-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，200mg，0.57mmol)，2-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(145mg，0.69mmol)，碳酸钠(181mg，1.7mmol)，Pd(dppf)Cl2(44mg，0.06mmol)加入到1,4-二氧六环(3mL)和水(0.5mL)中，氮气置换三次，升温至95℃搅拌5h。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩后，正相中压制备液相分离纯化得(R)-4-(2-氯-7-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(44-a，200mg，0.57mmol，75％收率)。MS Calcd:351；MS Found:352([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(44-a，100mg，0.28mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(90mg，0.369mmol)，碳酸铯(185mg，0.567mmol)，Pd(dppf)Cl2(22mg,0.03mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.4mL)中，置换氮气三次，升温至100℃反应4h。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，正相中压制备液相分离纯化得可得(R)-4-(7-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(44-b，50mg，0.115mmol，40％收率)。MS Calcd:433；MS Found:434([M+H]+)。
步骤3：称取(R)-4-(7-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(44-b，40mg，0.092mmol)溶于乙醇(3mL)中，加入Pd/C(10％wt，100mg)，置换氢气，氢气气氛下室温反应1小时。LC-MS监控反应完全，反应液用硅藻土过滤、浓缩，经反相中压制备液相分离纯化得标题化合物：(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(四氢-2H-吡喃-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(44，20mg，0.046mmol，50％收率)。MS Calcd:435；MS Found:436([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.08(d,J＝4.8Hz,1H),7.94(s,1H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.39(t,J＝2.8Hz,1H),4.89–4.80(m,1H),4.54(d,J＝11.6Hz,1H),4.10–3.98(m,3H),3.85(d,J＝11.2Hz,1H),3.76(dd,J＝11.2,3.2Hz,1H),3.64–3.51(m,5H),2.07–1.97(m,2H),1.89–1.72(m,2H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例45
((R)-3-甲基-4-(7-(1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取哌啶-4-醇(45-a,10g,99mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中，加入二碳酸二叔丁酯(23.7g,109mmol)和三乙胺(20.5mL,148.5mmol)，室温下搅拌过夜。反应液旋干，得粗品4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(45-b,19.9g,99mmol,收率:100％)，直接用于下一步。MSCalcd:201；MS Found:202([M+H]+)。
步骤2：将4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(45-b,19.9g,99mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中，加入三乙胺(20.5mL,198.5mmol)，冰浴冷却下滴入甲烷磺酰氯(8.4mL,109mmol)，室温下搅拌1小时。反应液倒入水中，二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层，干燥后旋干，得粗品4-(甲烷磺酰氧基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(45-c,30.24g,108mmol)。MS Calcd:279；MS Found:280([M+H]+)。
步骤3：称取吡唑-4-硼酸片呐醇酯(194mg,1mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入氢化钠(60％purity,48mg,1.2mmol)，室温下搅拌10分钟后，加入4-(甲磺酰氧基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(45-c,558mg,2mmol)，60℃下反应3小时。LCMS显示有产物，反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得4-(4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(45-d,260mg,0.688mmol,收率:69％)。MS Calcd:377；MS Found:378([M+H]+)。
步骤4：在氮气保护下称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,200mg,0.574mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(45-d,433mg,1.15mmol)，K2CO3(237mg,1.72mmol)，Pd(dppf)Cl2(42mg,0.0574mmol)和H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(5mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1:1)，得(R)-4-(4-(2-氯-4-(3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(45-e,93mg,0.179mmol,收率:31.3％)。MS Calcd:518；MSFound:519([M+H]+)。
步骤5：在氮气保护下称取(R)-4-(4-(2-氯-4-(3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(45-e,80mg,0.154mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(45mg,0.185mmol)，K2CO3(64mg,0.462mmol)，Pd(PPh3)4(18mg,0.0154mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，再向残余物中加入DMC/TFA＝6/1溶液5mL，在室温下搅拌1h，LCMS监测反应完成，减压除去溶液，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％TFA)得到标题化合物：((R)-3-甲基-4-(7-(1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(45,47mg,0.094mmol,收率:61％)。MS Calcd:500；MS Found:501([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.96(s,1H),8.81(s,1H),8.67(s,1H),8.42-8.38(m,2H),8.32(s,1H),8.10(d,J＝5.2Hz,1H),7.68(s,1H),7.30(s,1H),4.92–4.88(m,1H),4.64-4.56(m,2H),4.09(d,J＝8.8Hz,1H),3.92–3.73(m,2H),3.66-3.61(m,2H),3.50–3.46(m,2H),3.20-3.10(m,2H),2.32(d,J＝11.2Hz,2H),2.25–2.10(m,2H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例46
((R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲酮
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a,300mg,1.01mmol)溶于四氢呋喃溶液(3mL)中，再加入2-Me-2-butene(855μL,8.07mmol)，最后将NaClO2(270mg,3.03mmol)，NaH2PO4(360mg,3.03mmol)溶于叔丁醇(3mL)和水(1mL)后缓慢滴加到上述溶液中，再在室温下搅拌1h，LC-MS监测反应完成，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得粗品(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-羧酸(46-a,466mg,1.18mmol)。MS Calcd:313；MS Found:314([M+H]+)。不进一步纯化直接用于下一步。
步骤2：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-羧酸(46-a,200mg,0.638mmol)溶于二氯甲烷溶液(5mL)中，再加入D-脯氨醇(126μL,1.27mmol)，然后加入HATU(364mg,0.957mmol)和DIPEA(332μL,1.91mmol)，在室温下搅拌过夜，LCMS监测反应完成，，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)得到(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)((R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(46-b,53mg,0.133mmol,21％)。MS Calcd:396；MS Found:397([M+H]+)。
步骤3：在氮气保护下称取(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)((R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(46-b,53mg,0.133mmol)溶于二氧六环溶液(3mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(49mg,0.2mmol)，K2CO3(55mg,0.4mmol)，Pd(PPh3)4(15mg,0.0133mmol)，H2O(0.3mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)得到标题化合物：((R)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲酮(46,9mg,0.018mmol,收率:14％)。MS Calcd:478；MSFound:479([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.76(s,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),8.28(s,1H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),7.54(t,J＝3.2Hz,1H),7.45(s,1H),4.87(brs,1H),4.58(d,J＝11.2Hz,1H),4.09(d,J＝8.8Hz,1H),3.91–3.74(m,2H),3.66-3.55(m,5H),1.60-1.55(m,6H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例47
((S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲酮
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-羧酸(46-a,200mg,0.638mmol)溶于二氯甲烷溶液(5mL)中，再加入L-脯氨醇(126μL,1.27mmol)，然后加入HATU(364mg,0.957mmol)和DIPEA(332μL,1.91mmol)，在室温下搅拌过夜，LC-MS监测反应完成，，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)得到(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)((S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(47-a,125mg,0.315mmol,50％)。MS Calcd:396；MS Found:397([M+H]+)。
步骤2：在氮气保护下称取(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)((S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)甲酮(47-a,125mg,0.315mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(115mg,0.472mmol)，K2CO3(130mg,0.944mmol)，Pd(PPh3)4(36mg,0.0315mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)得到标题化合物：((S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-基)(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲酮(47,53mg,0.11mmol,收率:35.3％)。MSCalcd:478；MS Found:479([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),8.43(s,1H),8.35(dd,J＝5.2,1.6Hz,1H),8.07(dd,J＝6.8,5.2Hz,1H),7.62-7.57(m,1H),7.40-7.31(m,1H),4.98–4.87(m,2H),4.66–4.51(m,1H),4.28(d,J＝8.4Hz,1H),4.08(d,J＝8.8Hz,1H),3.97–3.68(m,3H),3.68–3.46(m,3H),3.27-3.21(m,1H),3.07-3.04(m,1H),2.00-1.96(m,2H),1.92–1.63(m,2H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例48
(2S,4S)-4-氟-N-(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-2-甲酰胺
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,1.5g,4.3mmol)溶于甲苯(100mL)中，氮气保护下加入二苯甲酮亚胺(817mg,4.52mmol)，乙酸钯(96mg,0.43mmol)，BINAP(536mg,0.86mmol)和碳酸铯(2.79g,8.6mmol)，加热至110℃下反应12小时。反应液倒入2M盐酸中搅拌2小时，分出有机层，水层加入碳酸钠调至碱性，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(48-a,298mg,1.05mmol,收率:24％)。MS Calcd:284；MS Found:285([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(48-a,62mg,0.219mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入(2S,4S)-1-叔丁氧羰基-4-氟吡咯烷-2-羧酸(102mg,0.438mmol)，HATU(100mg,0.263mmol)和N,N-二异丙基乙胺(85mg,0.607mmol)，室温下搅拌过夜。LCMS显示反应完成，反应液用水洗，分出二氯甲烷层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得(2S,4S)-2-(((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)氨基甲酰基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(48-b,55mg,0.11mmol,收率:50％)。MS Calcd:499；MS Found:500([M+H]+)。
步骤3：在氮气保护下称取(2S,4S)-2-(((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)氨基甲酰基)-4-氟吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(48-b,55mg,0.11mmol)溶于二氧六环溶液(2mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(40mg,0.165mmol)，K2CO3(46mg,0.33mmol)，Pd(PPh3)4(13mg,0.011mmol)，H2O(0.2mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(2mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，再向残余物中加入DMC/TFA＝6/1溶液2mL，在室温下搅拌1h，LCMS监测反应完成，减压除去溶液，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)得到标题化合物：(2S,4S)-4-氟-N-(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-2-羧酰胺(48,32mg,收率:60.4％)。MSCalcd:481；MS Found:482([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.90(s,1H),10.77(s,1H),8.52–8.19(m,3H),7.63(s,1H),7.35(s,1H),5.48(d,J＝52.2Hz,1H),4.87(brs,2H),3.87-3.56(m,10H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例49
(3R)-3-甲基-4-(7-(1-(哌嗪-1-基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-醛(int-2a,1.5g,5.05mmol)溶于四氢呋喃(40mL)中，冰浴下滴入甲基溴化镁(3M in 2-MeTHF,1.73mL,5.18mmol)，搅拌30分钟后LCMS显示反应完成。加入0.5M盐酸溶液淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，得到1-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基-1-醇(49-a,1.59g,5.05mmol)，直接用于下一步。MS Calcd:313；MSFound:314([M+H]+).
步骤2：将1-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基-1-醇(49-a,1.59g,5.05mmol)溶于二氯甲烷(30mL)中，冰浴下滴入三溴化磷(0.96mL,10.1mmol)，缓慢升至室温下反应2小时。LCMS显示反应完成，反应液倒入碳酸氢钠饱和溶液中淬灭剩余三溴化磷，用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层，干燥后旋干，得(3R)-4-(7-(1-溴乙基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(49-b,1.9g,5.05mmol)，直接用于下一步。MS Calcd:375；MS Found:376([M+H]+)。
步骤3：称取(3R)-4-(7-(1-溴乙基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(49-b,240mg,0.637mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，加入1-叔丁氧羰基哌嗪(355mg,1.91mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.56mL,3.19mmol)，升到60℃下反应3小时，LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得4-(1-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]噻吩-7-基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(49-c,156mg,0.324mmol,收率:51％)。MS Calcd:481；MS Found:482([M+H]+)。
步骤4：将4-(1-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]噻吩-7-基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(49-c,156mg,0.324mmol)溶于二氧六环(5mL)，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(117mg,0.486mmol)，碳酸钾(134mg,0.972mmol)，四(三苯基磷)钯(37mg,0.0324mmol)和水(0.5mL)，升温至100℃下反应8小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(DCM/MeOH)，得4-(1-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(49-d,170mg,0.302mmol,收率:93％)。MSCalcd:563；MS Found:564([M+H]+)。
步骤5：将4-(1-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(49-d,170mg,0.302mmol)加入二氯甲烷/三氟乙酸(5:1)混合溶液(5mL)中，室温下搅拌1小时。LC-MS显示反应完成，反应液旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)，得标题化合物：(3R)-3-甲基-4-(7-(1-(哌嗪-1-基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(49,11mg,0.023mmol,6％收率)。MS Calcd:463；MS Found:464([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.08(s,2H),7.62(s,1H),7.44(s,1H),4.88(brs,1H),4.55-4.45(m,2H),4.08(d,J＝9.2Hz,1H),3.91–3.72(m,2H),3.62-3.56(m,2H),2.70-2.32(m,8H),1.53–1.44(m,3H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例50
(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取4-溴-6-氟-1H-吲哚(50-a,1g,4.67mmol)溶于DMF溶液(15mL)中，再加入联硼酸频那醇酯(2.37g,9.34mmol)，醋酸钾(1.37g,14mmol)和Pd(dppf)Cl2(341mg,0.467mmol)，加完后在100℃下反应8h，LC-MS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(15mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得6-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(50-b,1.3g,4.98mmol,收率:106％)。MS Calcd:261；MS Found:262([M+H]+)。步骤2：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(9-a,100mg,0.275mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入6-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(50-b,144mg,0.55mmol)，K2CO3(114mg,0.825mmol)，Pd(PPh3)4(32mg,0.0275mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)得到标题化合物：(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(50,24mg,0.052mmol,收率:19％)。MS Calcd:462；MS Found:463([M+H]+)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.68(s,1H),8.09(d,J＝11.6Hz,1H),7.76(s,1H),7.53(s,1H),7.35(s,1H),7.21(s,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),5.00–4.87(m,1H),4.67(d,J＝12.8Hz,1H),4.16(d,J＝10.8Hz,1H),3.91(brs,2H),3.84(s,3H),3.78-3.64(m,2H),2.07(s,3H),1.53(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例51
(3R)-4-(2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)-7-(1-(甲基磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(3R)-4-(2-氯-7-(1-(甲基磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(18-a,100mg,0.266mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入6-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(139mg,0.533mmol)，K2CO3(110mg,0.8mmol)，Pd(PPh3)4(31mg,0.027mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(2mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％NH4HCO3)得到白色(3R)-4-(2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)-7-(1-(甲基磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(51,82mg,0.172mmol,收率:65％)。MS Calcd:474；MS Found:475([M+H]+)。1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.80(s,1H),8.10–7.97(m,2H),7.55(s,1H),7.32(s,1H),7.18(d,J＝8.8Hz,1H),4.98–4.81(m,1H),4.65(d,J＝12.4Hz,1H),4.21–4.08(m,2H),3.99–3.82(m,2H),3.75-3.61(m,2H),2.73(s,3H),1.90(d,J＝6.8Hz,3H),1.51(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例52
((R)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇
步骤1：将(S)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，90mg，0.30mmol)，(R)-吡咯烷-2-基甲醇(60mg，0.60mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3mL)，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(191mg，0.90mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到((R)-1-((2-氯-4-((S)-3-甲基吗啉)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇(52-a，85mg，0.22mmol，74％收率)。MSCalcd:382；MS Found:383([M+H]+)。
步骤2：将((R)-1-((2-氯-4-((S)-3-甲基吗啉)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇(52-a，85mg，0.22mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(53mg，0.33mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(91mg，0.66mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：((R)-1-((4-((S)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇(52，24mg，0.051mmol，24％收率)。MS Calcd:464；MS Found:465([M+H]+)。1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),8.08(s,1H),8.06(s,1H),7.60(t,J＝3.2Hz,1H),7.42(s,1H),4.87(brs,1H),4.56(d,J＝11.6Hz,1H),4.48–4.31(m,2H),4.08(d,J＝10.2Hz,1H),3.96–3.74(m,3H),3.63-3.52(m,3H),2.65–2.32(m,5H),1.62(brs,2H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例53
((S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇
步骤1：将(S)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，95mg，0.32mmol)，(S)-吡咯烷-2-基甲醇(64mg，0.64mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3mL)，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(212mg，1.0mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到目标化合物((S)-1-((2-氯-4-((S)-3-甲基吗啉)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇(53-a，75mg，0.20mmol，63％收率)。MS Calcd:382；MS Found:383([M+H]+)。
步骤2：将((S)-1-((2-氯-4-((S)-3-甲基吗啉)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇(53-a，75mg，0.20mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(49mg，0.3mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到目标化合物((S)-1-((4-((S)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇(53，21mg，0.045mmol，23％收率)。MS Calcd:464；MS Found:465([M+H]+)。1H NMR(401MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.08(s,1H),8.06(s,1H),7.60(t,J＝3.2Hz,1H),7.42(s,1H),4.87(brs,1H),4.55(d,J＝11.6Hz,1H),4.49–4.30(m,2H),4.08(d,J＝9.8Hz,1H),3.99–3.74(m,3H),3.68–3.49(m,3H),3.01(brs,1H),2.63–2.30(m,3H),1.63(brs,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例54
(R)-1-((4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁-3-醇
步骤1：将(R)-1-((2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-醇(22-a，83mg，0.23mmol，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(56mg，0.34mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(95mg，0.69mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2次，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-1-((4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁-3-醇(54，17mg，0.039mmol，17％收率)。MS Calcd:436；MS Found:437([M+H]+)。
实施例55
(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇
步骤1：将(S)-吡咯烷丁-3-醇(55-a，454mg，5.2mmol)，氯甲基三氟硼酸钾(811mg，5.2mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到85℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得到目标化合物(S)-1-((三氟硼烷基)甲基)吡咯烷-3-醇(55-b，735mg，4.4mmol，85％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,467mg，1.34mmol)，(S)-1-((三氟硼烷基)甲基)吡咯烷-3-醇(55-b，437mg，2.6mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，Xphos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(1.3g，3.9mmol)加入到THF和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH:DCM＝1:20)得到目标化合物(S)-1-(((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(55-c，136mg，0.37mmol，27％收率)。MS Calcd:368；MSFound:369([M+H]+)。
步骤3：将(S)-1-(((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(55-c，70mg，0.19mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(50mg，0.3mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(55，15mg，0.03mmol，16％收率)。MS Calcd:450；MS Found:451([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.36(d,J＝5.2Hz,1H),8.17(s,1H),8.09(d,J＝5.2Hz,1H),7.62-7.59(m,1H),7.43(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.93–4.79(m,2H),4.56(d,J＝11.4Hz,1H),4.30–4.05(m,4H),3.88-3.76(m,2H),3.69–3.54(m,2H),2.87-2.94(m,3H),2.06-1.99(m,2H),1.64-1.62(m,1H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例56
(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇
步骤1：将(S)-1-(((2-氯-4-((S)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(55-c，65mg，0.18mmol)，(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(50mg，0.3mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到目标化合物：(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇(56，12mg，0.03mmol，17％收率)。MS Calcd:450；MS Found:451([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),9.22(s,1H),8.84(s,1H),8.30(s,1H),7.75(t,J＝2.8Hz,1H),7.49(s,1H),4.93–4.79(m,2H),4.56(d,J＝11.6Hz,1H),4.30–4.05(m,4H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.69–3.54(m,2H),2.87-2.94(m,3H),2.06-1.99(m,2H),1.64-1.62(m,1H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例57
(R)-3-甲基-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-醇
步骤1：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，260mg，0.88mmol)，3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(77mg，0.88mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3mL)，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(560mg，2.64mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到(R)-1-((2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(57-a，210mg，0.57mmol，65％收率)。MS Calcd:368；MS Found:369([M+H]+)。
步骤2：将(R)-1-((2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(57-a，70mg，0.19mmol)，(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(62mg，0.38mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-3-甲基-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-醇(57，16mg，0.036mmol，19％收率)。MS Calcd:450；MS Found:451([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.36(d,J＝5.2Hz,1H),8.09(d,J＝5.2Hz,1H),8.02(s,1H),7.62(t,J＝2.8Hz,1H),7.42(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),5.26(s,1H),4.92–4.81(m,1H),4.55(d,J＝11.6Hz,1H),4.13–3.99(m,3H),3.37–3.39(m,1H),3.86(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.67–3.51(m,3H),3.12(s,2H),1.40(s,3H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例58
(R)-3-甲基-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-醇
步骤1：将(R)-1-((2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(57-a，75mg，0.20mmol)，(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)硼酸(65mg，0.4mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-3-甲基-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-醇(58，11mg，0.024mmol，12％收率)。MS Calcd:450；MS Found:451([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),9.21(s,1H),8.85(s,1H),8.32(s,1H),7.76(d,J＝2.8Hz,1H),7.50(d,J＝2.8Hz,1H),5.26(s,1H),4.92–4.81(m,1H),4.55(d,J＝11.6Hz,1H),4.13–3.99(m,3H),3.37–3.39(m,1H),3.86(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.67–3.51(m,3H),3.12(s,2H),1.40(s,3H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例59
(R)-1-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇
步骤1：将R)-1-((2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(57-a，71mg，0.19mmol)，(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)硼酸(62mg，0.38mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-1-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇(59，15mg，0.033mmol，18％收率)。MSCalcd:449；MS Found:450([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.26(s,1H),8.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.57–7.50(m,2H),7.48(t,J＝2.8Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),5.28(s,1H),4.89–4.78(m,1H),4.53(d,J＝12.0Hz,1H),4.14–3.99(m,3H),3.87-3.74(m,2H),3.68–3.49(m,3H),3.43(s,1H),3.20–3.05(m,2H),1.40(s,3H),1.37(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例60
(R)-4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：4-(2-氯-7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(42-a，134mg，0.35mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧戊环-2-基)-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶(85.4mg，0.35mmol)，四(三苯基磷)钯(35.52mg，0.035mmol)，碳酸铯(228.2mg，0.7mmol)溶于2mL二氧六环和0.5mL水中，真空置换氮气3次，升温至100℃，反应4小时，10mL水淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高效薄层色谱制备板得到标题化合物：(R)-4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(60，20mg，0.042mmol，12.3％yiled)。MS Calcd:465；MS Found:466([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.32(s,1H),8.58(s,1H),7.92(d,J＝11.6Hz,1H),7.78(s,1H),7.40(s,1H),7.31(d,J＝9.2Hz,1H),7.14(s,1H),4.89(brs,1H),4.58(d,J＝10.0Hz,1H),4.10(d,J＝7.8Hz,1H),3.93–3.54(m,7H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例61
(R)-4-(7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷(61-a，300mg，2.6mmol),氯甲基三氟硼酸钾(405mg，2.6mmol)加入到四氢呋喃和叔丁醇的混合溶剂中(6mL：2mL)，升温到85℃，搅拌4小时，减压浓缩，剩余物加入2mL丙酮，再慢慢滴加10mL乙醚，抽滤，固体经干燥得到(S)-1-((三氟硼烷基)甲基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷(61-b，415mg，2.12mmol，81％收率)。
步骤2：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,480mg，1.38mmol)，(S)-1-((三氟硼烷基)甲基)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷(61-b，406mg，2.07mmol)，醋酸钯(23mg，0.1mmol)，Xphos(115mg，0.2mmol)，碳酸铯(1.3g，4.1mmol)加入到THF和水的混合溶剂中(8mL：2mL)，氮气置换2分钟，90℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH:DCM＝1:20)得到目标化合物(S)-4-(2-氯-7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(61-c，285mg，0.72mmol，52％收率)。MSCalcd:396；MS Found:397([M+H]+)。
步骤3：将(S)-4-(2-氯-7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(61-c，90mg，0.23mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(56mg，0.35mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(97mg，0.7mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到目标化合物：(R)-4-(7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(61，26mg，0.05mmol，24％收率)。MS Calcd:478；MS Found:479([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.36(s,1H),8.10(s,1H),8.09(s,1H),7.61(brs,1H),7.43(s,1H),4.85(brs,1H),4.54(d,J＝12.0Hz,1H),4.36(brs,1H),4.07(d,J＝10.0Hz,1H),3.96-3.76(m,3H),3.65-3.56(m,3H),3.24(s,3H),3.00(brs,1H),2.81(brs,1H),2.35-2.30(m,2H),1.86(brs,1H),1.63-1.52(m,3H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例62
(R)-4-(7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(S)-4-(2-氯-7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(61-c，85mg，0.21mmol)，(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)硼酸(52mg，0.32mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(83mg，0.6mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-4-(7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(62，18mg，0.04mmol，18％收率)。MS Calcd:478；MS Found:479([M+H]+)。
实施例63
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(S)-4-(2-氯-7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(61-c,93mg，0.23mmol)，(1H-吲哚-4-基)硼酸(57mg，0.35mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(97mg，0.7mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃微波反应3小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(63，26mg，0.05mmol，24％收率)。MS Calcd:477；MS Found:478([M+H]+)。
实施例64
(R)-4-(7-(环丙砜基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-氯甲基-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl)-3-甲基吗啉(int-2,110mg,0.346mmol)溶于DMF(5mL)中，加入环丙基亚磺酸钠(133mg,1.04mmol)，于60℃下反应2小时，LC-MS显示反应完成。反应液倒入水中，加乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，得(R)-4-(2-氯-7-(环丙砜基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(64-a,134mg,0.346mmol)，直接用于下一步。MS Calcd:387；MS Found:388([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(环丙砜基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(64-a,134mg,0.346mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入6-氮杂吲哚-4-硼酸(83mg,0.519mmol)，碳酸钾(144mg,1.04mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(40mg,0.0346mmol)，氮气保护下100℃反应8小时。LC-MS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05TFA)，得到标题化合物：(R)-4-(7-(环丙砜基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(64,15mg,0.0319mmol,收率:9.2％)。MS Calcd:469；MS Found:470([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.17(s,1H),9.27(s,1H),9.25(s,1H),8.46(s,1H),8.44(s,1H),7.87(s,1H),4.93-3.86(m,3H),4.57(brs,1H),4.10(brs,1H),3.97–3.46(m,5H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H),0.94-0.89(m,4H)。
实施例65
(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉(int-1，0.35g，1mmol)、1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(65-a，0.26g,1.2mmol)、PdCl2(dppf)(73mg,0.1mmol)和碳酸钠(0.32g,3.0mmol)依次加入二氧六环/水(6:1)混合溶剂7mL中，反应液升温至100℃，搅拌8小时。TLC监测反应完成，将反应液冷却至室温，减压浓缩，向反应液中加入水(30mL),乙酸乙酯(50mL)萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩,残余物经硅胶柱层析纯化(DCM：MeOH＝10：1)得(R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(65-b,260mg,0.71mmol,71％收率)。MS Calcd:364.89；MS Found:365.13([M+H]+)。
步骤2：将(R)-4-(2-氯-7-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(65-b,260mg,0.71mmol)、7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(207mg,0.85mmol)、碳酸钾(294mg,2.13mmol)和四(三苯基膦)钯(82mg,0.071mmol)依次加入二氧六环/水(6:1)混合溶剂10mL中，抽真空，氮气置换3次，于110℃条件下搅拌8h。TLC监测反应完成，将反应液完全浓缩，残余物经硅胶柱层析分离(DCM：MeOH＝10：1)纯化得标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(65,160mg,0.35mmol,50％收率)。MS Calcd:446.57；MS Found:447.21([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.08(s,1H),8.02(d,J＝4.8Hz,1H),7.61(s,1H),7.35(s,1H),7.29(s,1H),4.98–4.74(m,1H),4.54(d,J＝11.6Hz,1H),4.07(d,J＝9.2Hz,1H),3.89–3.75(m,2H),3.66-3.53(m,2H),3.14(s,2H),2.65(brs,4H),2.32(s,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例66
(R)-4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：4-(2-氯-7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(42-a，134mg，0.35mmol)，6-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(91.35mg，0.35mmol)，Pd(PPh3)4(35.52mg，0.035mmol)，碳酸铯(228.2mg，0.7mmol)溶于2mL 1,4-dioxane和0.5mL水中，真空置换氮气3次，升温至100℃，反应4h，10mL水淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，高效薄层色谱制备板纯化得标题化合物：(R)-4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(35220，15mg，0.031mmol，8.85％yiled。MS Calcd:482；MS Found:483([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.31(s,1H),8.58(s,1H),7.92(dd,J＝11.6,2.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.40(t,J＝2.8Hz,1H),7.32–7.28(m,1H),7.17–7.09(m,1H),4.89(d,J＝7.6Hz,1H),4.58(d,J＝10.8Hz,1H),4.11(dd,J＝7.6,3.2Hz,1H),3.89(d,J＝11.6Hz,1H),3.81-3.77(m,4H),3.65–3.58(m,2H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例67
(R)-4-(7-(4-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲醇(67-a，1g，8.9mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)，加入氢化钠(534mg，13.4mmol)，室温下搅拌1小时后，冷却到0℃，加入碘甲烷(5g,36mmol)室温下搅拌过夜，加入饱和食盐水(20mL)，用乙酸乙酯萃取(20mLx2)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩，得到4-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑(67-b，950mg，7.5mmol，85％yield)。MS Calcd:126；MS Found:127([M+H]+)。
步骤2：将4-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑(67-b，950mg，7.5mmol)的四氢呋喃溶液(10mL)，0℃下加入丁基锂(3.6mL，9mmol)，室温下搅拌1个小时后，冷却到-70℃，加入异丙醇频哪醇硼酸酯(1.4g，7.5mmol)，-70℃搅拌30分钟后，升温到0℃搅拌1小时，并用饱和食盐水淬灭，用盐酸(1N)调pH到6，乙酸乙酯萃取(20mL x2)，有机相经干燥，浓缩硅胶柱纯化(乙酸乙酯：石油醚＝1:2)得到4-(甲氧基甲基)-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H吡唑(67-c，516mg，2.05mmol，27％yield)。MS Calcd:252；MS Found:253([M+H]+)。
步骤3：将4-(甲氧基甲基)-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H吡唑(67-c，163mg，0.65mmol)，(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(150mg，0.43mmol)，Pd(PPh3)4(50mg，0.043mmol)，碳酸钾(178mg，1.29mmol)，加入到二氧六环和水的混合溶剂中(3mL：1mL)并氮气置换3分钟，升温到100℃，搅拌6小时，减压浓缩，剩余物经硅胶柱纯化(甲醇：二氯甲烷＝1:50)得到(R)-4-(2-氯-7-(4-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(67-d，64mg，0.16mmol，37％yield)。MS Calcd:393；MS Found:394([M+H]+)。
步骤4：将(R)-4-(2-氯-7-(4-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(67-d，64mg，0.16mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(49mg，0.3mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(66mg，0.48mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-4-(7-(4-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(67，16mg，0.033mmol，21％yield)。MS Calcd:475；MS Found:476([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.44(s,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),8.04(d,J＝5.2Hz,1H),7.64(s,1H),7.49(s,1H),7.04(s,1H),4.91(s,1H),4.74–4.40(m,2H),4.21(s,2H),4.10(d,J＝8.8Hz,1H),3.90-3.76(m,4H),3.63(d,J＝8.4Hz,2H),3.10(s,3H),1.45(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例68
(R)-4-(7-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，75mg，0.25mmol)，(R)-3-氟吡咯烷(45mg，0.5mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3mL，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(212mg，1.0mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到(R)-4-(2-氯-7-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(68-a，55mg，0.15mmol，59％yield)。MSCalcd:370；MS Found:371([M+H]+)。
步骤2：将(R)-4-(2-氯-7-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(68-a，55mg，0.15mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(49mg，0.3mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(62mg，0.45mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-4-(7-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(68，15mg，0.033mmol，22％yield)。MS Calcd:452；MS Found:453([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.435(s,1H),8.09(s,1H),8.08(s,1H),7.61(s,1H),7.44(s,1H),5.20(d,J＝56.0Hz,1H),4.86(brs,1H),4.55(d,J＝12.0Hz,1H),4.12–3.94(m,4H),3.93–3.71(m,2H),3.64-3.52(m,2H),3.02–2.65(m,3H),2.22–1.78(m,2H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例69
(R)-4-(7-((3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，80mg，0.27mmol)，3-氟氮杂环丁烷(41mg，0.54mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3mL)，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(233mg，1.1mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:20)得到(R)-4-(2-氯-7-((3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(69-a，63mg，0.18mmol，66％yield)。MSCalcd:356；MS Found:357([M+H]+)。
步骤2：将(R)-4-(2-氯-7-((3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(69-a，63mg，0.18mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(60mg，0.36mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(75mg，0.54mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2mL：0.5mL)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-4-(7-((3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(69，13mg，0.029mmol，16％yield)。MS Calcd:438；MS Found:439([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.36(s,1H),8.10–7.99(m,2H),7.61(s,1H),7.41(s,1H),5.20(d,J＝58.2Hz,1H),4.85(brs,1H),4.55(d,J＝12.0Hz,1H),4.09-4.01(m,4H),3.89–3.73(m,2H),3.70-3.55(m,5H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例70
(R,E)3-甲基-4-(7-(2-(吡啶-2-基)乙烯基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉(int-1，0.2g，0.57mmol)、2-乙烯基吡啶(70-a,0.18g,1.71mmol)、醋酸钯(12mg,0.057mmol)、三(邻甲基苯基)磷(35mg,0.114mmol)和三乙胺(4.75mL)依次加入封管中，用氮气吹扫5分钟，反应液升温至120℃，搅拌5小时。TLC监测反应完成，将反应液冷却至室温，减压浓缩，向反应液中加入水(30mL),乙酸乙酯(50mL)萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩,残余物经硅胶柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)得(R,E)-4-(2-氯-7-(2-(吡啶-2-基)乙烯基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(70-b,80mg,0.21mmol,37％yield)。MS Calcd:372.08；MS Found:373.11([M+H]+)。
步骤2：将(R,E)-4-(2-氯-7-(2-(吡啶-2-基)乙烯基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(70-b,80mg,0.21mmol)、7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(63mg,0.26mmol)、碳酸钾(91mg,0.66mmol)和四(三苯基膦)钯(26mg,0.022mmol)依次加入二氧六环/水(6:1)混合溶剂5mL中，抽真空，氮气置换3次，于110℃条件下搅拌8h。TLC监测反应完成，将反应液完全浓缩，残余物经硅胶柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化得标题化合物：(R,E)3-甲基-4-(7-(2-(吡啶-2-基)乙烯基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(70，40mg,0.08mmol,40％yield)。MS Calcd:454.16；MS Found:455.18([M+H]+).1HNMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.97(s,1H),8.66(s,1H),8.48(s,1H),8.26–8.15(m,3H),8.08(d,J＝16.0Hz,1H),7.89(s,1H),7.72(t,J＝8.4Hz,1H),7.59–7.48(m,3H),7.23–7.15(m,1H),4.96(brs,1H),4.66(d,J＝12.6Hz,1H),4.16-4.11(m,2H),3.80–3.62(m,3H),1.52(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例71
((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基酮
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-羧酸(46-a,150mg,0.479mmol)溶于二氯甲烷溶液(5mL)中，再加入(R)-吡咯烷-3-醇(83mg,0.958mmol)，然后加入HATU(273mg,0.718mmol)和DIPEA(237μL,1.43mmol)，在室温下搅拌过夜，LC-MS监测反应完成，，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)得到(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮(71-a,148mg,0.386mmol,yield:81％)。MSCalcd:382；MS Found:383([M+H]+)。
步骤2：在氮气保护下称取(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)甲酮(71-a,148mg,0.386mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(142mg,0.581mmol)，K2CO3(160mg,1.16mmol)，Pd(PPh3)4(45mg,0.0386mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％FA)得到标题化合物：((R)-3-羟基吡咯烷-1-基)(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲酮(71,15mg,0.032mmol,yield:9％)。MS Calcd:464；MS Found:465([M+H]+).1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.46(s,1H),8.34(s,1H),8.07(s,1H),7.57(d,J＝14.0Hz,1H),7.35(s,1H),5.12–4.81(m,2H),4.57(brs,1H),4.40(brs,1H),4.19(brs,1H),4.08(brs,1H),3.89–3.55(m,7H),2.00-1.75(m,2H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例72
(R)-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基酮
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-羧酸(46-a,150mg,0.479mmol)溶于二氯甲烷溶液(5mL)中，再加入3,3-二氟吡咯烷(137mg,0.958mmol)，然后加入HATU(273mg,0.718mmol)和DIPEA(237μL,1.43mmol)，在室温下搅拌过夜，LCMS监测反应完成，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(石油醚/乙酸乙酯)得到(R)–(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)(3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲酮(72-a,155mg,0.385mmol,yield:81％)。MS Calcd:402；MS Found:403([M+H]+)。
步骤2：在氮气保护下称取(R)–(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)(3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲酮(72-a,155mg,0.385mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(141mg,0.578mmol)，K2CO3(159mg,1.15mmol)，Pd(PPh3)4(44mg,0.0385mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％FA)得到标题化合物：(R)–(3,3-二氟吡咯烷-1-基)(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲酮(72,12mg,0.024mmol,yield:7％)。MS Calcd:484；MS Found:485([M+H]+).1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),8.57(s,1H),8.35(s,1H),8.08(s,1H),7.55(s,1H),7.33(s,1H),4.87(brs,1H),4.58(brs,1H),4.09-4.05(m,2H),3.90–3.79(m,5H),3.65–3.60(m,4H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例73
(R)-4-(2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(40-a,100mg,0.265mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入6-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(104mg,0.397mmol)，K2CO3(110mg,0.795mmol)，Pd(PPh3)4(31mg,0.0265mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％FA)得到标题化合物：(R)-4-(2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(73,85mg,0.178mmol,yield:67％)。MS Calcd:476；MS Found:477([M+H]+)。1H NMR(4001MHz,DMSO-d6)δ11.29(s,1H),8.05(d,J＝3.6Hz,1H),7.98–7.87(dd,J＝8.0,2.4Hz,1H),7.47–7.36(m,1H),7.31-7.27(m,2H),4.88(brs,1H),4.55(d,J＝10.4Hz,1H),4.09(d,J＝8.4Hz,1H),3.94–3.72(m,5H),3.64-3.59(m,1H),3.17(d,J＝4.8Hz,1H),2.20(s,3H),2.13(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例74
((R)-1-((7-((R)-3-甲基吗啉)-5-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-3-基)甲醇
步骤1：在50mL单口瓶中加入(R)-5-氯-7-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-b]吡啶-3-甲醛(int-2a,60mg，0.21mmol)，(R)-吡咯烷-3-基甲醇(100mg，0.99mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(132mg，0.62mmol)，加入四氢呋喃2mL/二氯乙烷1mL混合溶剂，氮气置换三次后室温下搅拌反应3h。TLC检测反应完全(DCM/MEOH/氨水＝20/1/0.1)。冷却反应液至室温，减压浓缩，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝20/1，洗脱得到N((R)-1-((5-氯-7-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-b]吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-3-基)甲醇(74-a，58mg，0.15mmol，71％yield)。MS Calcd:382；MS Found:383([M+H]+)。
步骤2：在微波管中加入N((R)-1-((5-氯-7-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-b]吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-3-基)甲醇(74-a，58mg，0.15mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(56mg，0.23mmol)，Pd(dppf)Cl2(11.1mg，0.015mmol)，碳酸钾(63mg，0.46mmol)，乙醇/水＝2mL/0.5mL混合溶剂，氮气保护后升温至100℃下微波下搅拌反应2h，TLC检测反应完全(DCM/MEOH/氨水＝10/1/0.2)。将体系冷却至室温后，减压浓缩，用DCM/MEOH＝10/1(2mL)溶解后，高效薄层色谱制备板纯化DCM/MEOH/氨水＝10/1/0.2，浓缩得到标题化合物：((R)-1-((7-((R)-3-甲基吗啉)-5-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-3-基)甲醇(74，8mg，0.017mmol，11％yield)。MS Calcd:464；MS Found:465([M+H]+)。
实施例75
(R)-4-(7-((3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在50ml单口瓶中加入(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-氨基甲醛(int-2a,80mg，0.28mmol)，3,3-二氟乙酰胆碱(500mg，0.85mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(302mg，1.42mmol)，加入四氢呋喃2ml，室温下搅拌反应3h。TLC检测反应完全(DCM/MEOH/＝20/1)。冷却反应液至室温，减压浓缩，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝60/1，洗脱得到(R)-4-(2-氯-7-((3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(75-a，85mg，0.22mmol，79％yield)。
步骤2：在微波管中加入(R)-4-(2-氯-7-((3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(75-a，85mg，0.22mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(81mg，0.33mmol)，Pd(dppf)Cl2(16.2mg，0.022mmol)，碳酸钾(91.6mg，0.66mmol)，乙醇/水＝2ml/0.5ml混合溶剂，氮气保护后升温至100℃下微波下搅拌反应2h，TLC检测反应完全(DCM/MEOH＝20/1)。将体系冷却至室温后，减压浓缩，用DCM/MEOH＝10/1(2ml)溶解后，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝50/1，浓缩得到标题化合物：(R)-4-(7-((3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(75，43mg，0.09mmol，43％yield)。MS Calcd:456.15；MS Found:457.17([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.36(d,J＝5.2Hz,1H),8.15–8.02(m,2H),7.61(s,1H),7.41(s,1H),4.85(brs,1H),4.55(d,J＝11.6Hz,1H),4.11-3.56(m,9H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例76
(3R)-4-(7-((3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在50ml单口瓶中加入(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-氨基甲醛(int-2a,80mg，0.28mmol)，3-氮杂双环[3.1.0]己烷(500mg，4.18mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(302mg，2.0mmol)，加入四氢呋喃/二氯乙烷1ml/1ml，室温下搅拌反应3h。TLC检测反应完全(DCM/MEOH/＝20/1)。冷却反应液至室温，减压浓缩，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝60/1，洗脱得到(3R)-4-(7-((3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)甲基)-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(76-a，60mg，0.16mmol，57％yield)。
步骤2：在微波管中加入((3R)-4-(7-((3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)甲基)-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(76-a,60mg，0.16mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(60mg，0.25mmol)，Pd(dppf)Cl2(12mg，0.016mmol)，碳酸钾(68mg，0.49mmol)，乙醇/水＝2ml/0.5ml混合溶剂，氮气保护后升温至100℃下微波下搅拌反应2h，TLC检测反应完全(DCM/MEOH＝20/1)。将体系冷却至室温后，减压浓缩，用DCM/MEOH＝10/1(2ml)溶解后，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝50/1，浓缩得到标题化合物：(3R)-4-(7-((3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(76，32mg，0.07mmol，45％yield)。MS Calcd:446.19；MS Found:447.24([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.08(d,J＝5.2Hz,2H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.43(s,1H),4.86(d,J＝7.6Hz,1H),4.55(d,J＝11.2Hz,1H),4.13–4.07(m,2H),4.01–3.97(m,1H),3.90–3.69(m,2H),3.66–3.47(m,2H),3.16(d,J＝5.2Hz,2H),3.08–2.93(m,1H),2.05–1.92(m,1H),1.45–1.35(m,7H)。
实施例77
(R)-3-甲基-4-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吗啉
步骤1：在50ml单口瓶中加入(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-氨基甲醛(int-2a,80mg，0.28mmol)，(S)-3-甲基吗啉(200mg，1.4mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(302mg，1.4mmol)，二氯乙烷2ml，室温下搅拌反应3h。TLC检测反应完全(DCM/MEOH/＝20/1)。冷却至室温，减压浓缩，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝60/1，洗脱得(S)-4-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基吗啉(77-a，42mg，0.11mmol，39％yield)。
步骤2：在微波管中加入(S)-4-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基吗啉(77-a,42mg，0.11mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(40mg，0.16mmol)，Pd(dppf)Cl2(8mg，0.011mmol)，碳酸钾(46mg，0.33mmol)，乙醇/水＝2ml/0.5ml混合溶剂，氮气保护后升温至100℃下微波下搅拌反应2h，TLC检测反应完全(DCM/MEOH＝20/1)。将体系冷却至室温后，减压浓缩，用DCM/MEOH＝10/1(2ml)溶解后，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝50/1，浓缩得到(S)-3-甲基-4-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吗啉(77，35mg，0.075mmol，68％yield)。MS Calcd:464.20；MS Found:465.24([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.10(s,1H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.47–7.41(m,1H),4.86(d,J＝7.6Hz,1H),4.55(d,J＝11.6Hz,1H),4.25(d,J＝14.0Hz,1H),4.08(d,J＝9.2Hz,1H),3.90–3.72(m,3H),3.67–3.52(m,5H),3.49-3.42(m,1H),3.18-3.12(m,1H),2.77–2.64(m,1H),2.35–2.20(m,1H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H),1.11(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例78
(R)-4-(7-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，247mg，0.683mmol)，1-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H吡唑(200mg，0.819mmol)，碳酸钾(281.70mg，2.041mmol)，Pd(dppf)Cl2(50mg，0.068mmol)到25ml圆底烧瓶中，加入1,4-二氧六环(4mL)和水(0.5mL)，氮气置换三次，升温至100℃反应4小时。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加入100-200目硅胶拌样，柱层析分离纯化(乙酸乙酯:石油醚＝3:1)得到(R)-4-(2-氯-7-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(78-a，221mg，0.574mmol，84.67％yeild)。MS Calcd:385.06；MSFound:386.12([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(78-a，50mg，0.129mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(47.53mg，0.194mmol)，Pd(pph3)4(15.01mg，0.013mmol)，碳酸钾(53.41mg，0.387mmol)至25ml单口瓶中，加入1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)，氮气置换三次，110℃反应8小时。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，将反应液减压浓缩至干，反相柱分离纯化(0.05％TFAA/水:乙腈，30％乙腈出峰)，得标题化合物(R)-4-(7-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(78，31mg，0.066mmol，48.38％yeild)。MSCalcd:467.13；MS Found:468.18([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.86(s,1H),9.10(s,1H),8.60(d,J＝11.6Hz,2H),8.39(d,J＝5.2Hz,1H),8.20–7.77(m,2H),7.61(d,J＝3.6Hz,1H),7.24(s,1H),4.88(brs,1H),4.57(d,J＝10.6Hz,1H),4.09(d,J＝8.4Hz,1H),3.92–3.74(m,2H),3.67-3.62(m,2H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例79
(R)-4-(7-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，200mg，0.573mmol)，1-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡唑(127mg，0.573mmol)，碳酸钾(237.52mg，1.721mmol)，Pd(dppf)Cl2(41mg，0.057mmol)到25ml圆底烧瓶中，加入1,4-二氧六环(4mL)和水(0.5mL)，氮气置换三次，升温至100℃反应4小时。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加入100-200目硅胶拌样，板层析分离纯化(二氯甲烷:甲醇＝15:1)得到(R)-4-(2-氯-7-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(79-a，112mg，0.308mmol，53.84％yeild)。MS Calcd:363.09；MS Found:364.08([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(79-a，50mg，0.147mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(50.41mg，0.206mmol)，Pd(pph3)4(17.32mg，0.015mmol)，碳酸钾(60.85mg，0.441mmol)至25ml单口瓶中，加入1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)，氮气置换三次，110℃反应8小时。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，将反应液减压浓缩至干，反相柱分离纯化(0.05％TFAA/水:乙腈，30％乙腈出峰)，得标题化合物(R)-4-(7-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(79，29mg，0.066mmol，48.38％yeild)。MS Calcd:445.17；MS Found:446.25([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.47(s,1H),8.33(d,J＝5.2Hz,1H),8.03(d,J＝5.2Hz,1H),7.63(d,J＝1.8Hz,1H),7.53(t,J＝3.2Hz,1H),7.13(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),6.60(d,J＝2.0Hz,1H),4.90(d,J＝7.2Hz,1H),4.60(d,J＝11.2Hz,1H),4.21–4.06(m,3H),3.93–3.75(m,2H),3.71–3.54(m,2H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例80
(R)-N-甲基-2-(4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-yl)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酰胺
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，392mg，1.125mmol)，2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)苯甲酸甲酯(295mg，1.125mmol)，碳酸钾(465.95mg，3.376mmol)，Pd(dppf)Cl2(82.69mg，0.113mmol)到25ml圆底烧瓶中，加入1,4-二氧六环(5mL)和水(1mL)，氮气置换三次，升温至100℃反应3小时。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，加入100-200目硅胶拌样，柱层析分离纯化(二氯甲烷)得到(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酸甲酯(80-a，367mg，0.910mmol，81.01％yeild)。MS Calcd:403.08；MS Found:404.07([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酸甲酯(80-a，367mg，0.910mmol)，氢氧化钠(72.86mg，1.821mmol)至25ml单口瓶中，加入甲醇(5mL)和水(1mL)，80℃反应8小时。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，将反应液用稀盐酸调pH至4-5，再用乙酸乙酯萃取，有机相减压浓缩至干，得中间体(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酸(80-b，423mg，1.062mmol，90％yeild)。MSCalcd:398.06；MS Found:390.08([M+H]+)。
步骤3：称取(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酸(80-b，100mg，0.257mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(94.08mg，0.385mmol)，Pd(pph3)4(30mg，0.026mmol)，碳酸钾(106.39mg，0.771mmol)至25ml单口瓶中，加入1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)，氮气置换三次，110℃反应8小时。TLC监控反应完全，冷却反应液至室温，将反应液减压浓缩至干，反相柱分离纯化(0.05％TFAA/水:乙腈，40％乙腈出峰)，得中间体(R)-2-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酸(80-c，91mg，0.193mmol，75.20％yeild)。MS Calcd:471.14；MS Found:472.15([M+H]+)。
步骤4：称取中间体(R)-2-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酸(80-c，50mg，0.106mmol)，HATU(44.106mg，0.116mmol)至20ml单口瓶中，加入二氯甲烷(3ml)，在搅拌下加入DIEA(27.39mg，0.212mmol)，搅拌10分钟后加入甲胺盐酸盐(14.31mg，0.212mmol)反应1小时。TLC监测反应结束，将反应液减压浓缩至干，反相柱层析纯化(0.05％TFAA/水:乙腈，20％乙腈出峰P1，35％乙腈出峰P2)，得标题化合物：((R)-N-甲基-2-(4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-yl)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酰胺(80，7mg，0.014mmol)。MS Calcd:484.17；MS Found:485.20([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.72(s,1H),8.29(d,J＝5.2Hz,1H),8.23(dd,J＝9.2,4.4Hz,1H),8.16(s,1H),8.05(d,J＝5.2Hz,1H),7.76–7.67(m,1H),7.62–7.48(m,4H),7.20(dd,J＝3.2,1.6Hz,1H),4.91(d,J＝7.6Hz,1H),4.64–4.53(m,1H),4.16–4.05(m,1H),3.89(d,J＝11.5Hz,1H),3.80(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.70–3.57(m,2H),2.46(d,J＝4.4Hz,3H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例81
(R)-3-甲基-4-(6-甲基-7-(1-甲-1H-吡唑5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取2.4-二氯-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶(81-a,500mg,2.28mmol)溶于乙腈(8mL)中，加入(R)-3-甲基吗啉(345mg,3.42mmol)后，升温至80度下反应2小时，LCMS显示反应完成。将反应液浓缩，用中压制备色谱纯化(PE/EA，约17％EA时出产品)，得到(R)-4-(2-氯-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(81-b,500mg,1.8mmol,yield:79％)。MS Calcd:283；MS Found:284([M+H]+).
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(81-b,500mg,1.77mmol)溶于三氟乙酸(5mL)中，加入NIS(795mg,3.53mmol)后，升至60度下反应3小时，LCMS显示反应完成。将反应液旋干，残余物加水和乙酸乙酯溶解，分出乙酸乙酯层后，水层再用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA，约27％EA时出产品)，得到(R)-4-(2-氯-7-碘-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(81-c,542mg,1.33mmol,yield:75％)。MS Calcd:409；MS Found:410([M+H]+).
步骤3：称取(R)-4-(2-氯-7-碘-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(81-c,440mg,1.08mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入1-甲基吡唑-5-硼酸片呐醇酯(449mg,2.16mmol)，碳酸钠(343mg,3.24mmol)，水(0.5mL)和Pd(dppf)Cl2(79mg,0.108mmol)，氮气保护下100度反应48小时。LCMS显示大部分原料反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得到(R)-4-(2-氯-6-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(81-d,188mg,0.518mmol,yield:48％)。MS Calcd:363；MS Found:364([M+H]+).
步骤4：称取(R)-4-(2-氯-6-甲基-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(81-d,94mg,0.269mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(82mg,0.337mmol)，碳酸钾(107mg,0.777mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(30mg,0.0269mmol)，氮气保护下100度反应8小时。LCMS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05NH4HCO3)，得到标题化合物：(R)-3-甲基-4-(6-甲基-7-(1-甲-1H-吡唑5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(81,52mg,0.117mmol,yield:43％)。MS Calcd:445；MS Found:446([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),8.00(d,J＝5.2Hz,1H),7.63(d,J＝2.0Hz,1H),7.51(t,J＝3.2Hz,1H),7.00(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),6.47(d,J＝2.0Hz,1H),4.85–4.78(m,1H),4.55(d,J＝11.6Hz,1H),4.12–4.05(m,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,2.8Hz,1H),3.71(s,3H),3.66-3.53(m,2H),2.56(s,3H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例82
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将浓硫酸(10mL)加入50mL茄形瓶中，冰浴冷却下缓慢滴入硝酸(4mL)，滴完后冰浴下搅拌10分钟，加入(R)-4-(2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1b,2g,7.43mmol)，室温下搅拌1小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入冰中，乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，得(R)-4-(2-氯-7-硝基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(82-a,2.363g,7.53mmol)，不进一步纯化直接用于下一步反应。MS Calcd:314；MSFound:315([M+H]+).
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-硝基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(82-a,1g,3.18mmol)，悬浮于乙酸水溶液(80％,30mL)中，加入铁粉(1.78g,31.8mmol)，加热回流反应1小时，LCMS显示原料反应完全。将反应液倒入水中，乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物经中压制备色谱纯化(PE/EA,约25％EA时出产品)，得(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(82-b,437mg,1.54mmol,yield:48.4％)。MSCalcd:284；MS Found:285([M+H]+).
步骤3：称取1,1-二甲氧基-N,N-二甲基乙胺(651mg,4.4mmol)和乙酰肼(326mg,4.4mmol)加入25mL茄形瓶中，加入乙腈(2mL)，升温至50度下搅拌30分钟，然后加入乙腈(1mL)，(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(82-b,250mg,0.88mmol)和乙酸(3mL)，升到120度下搅拌3小时，LCMS显示原料反应完全。将反应液倒入水中，乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物经中压制备色谱纯化(DCM/MeOH,约20％MeOH时出产品)，得(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(82-c,102mg,0.28mmol,yield:31.8％)。MS Calcd:364；MS Found:365([M+H]+).
步骤4：称取(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(82-c,102mg,0.28mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(89mg,0.364mmol)，碳酸钾(116mg,0.84mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(32mg,0.028mmol)，氮气保护下100度反应8小时。LCMS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05NH4HCO3)，得到标题化合物：(R)-4-(7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(82,10mg,0.0224mmol,yield:8％)。MS Calcd:446；MS Found:447([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.77(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),7.99(d,J＝5.2Hz,1H),7.57–7.51(m,1H),6.92(dd,J＝3.2,1.6Hz,1H),4.90(brs,1H),4.61(d,J＝9.6Hz,1H),4.10(d,J＝7.6Hz,1H),3.89(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.64(d,J＝8.4Hz,2H),2.22(s,6H),1.46(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例83
(R)-N-(4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-2-甲酰胺
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(82-b,100mg,0.352mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，依次加入D-脯氨酸(91mg,0.423mmol)，N,N-二异丙基乙胺(136mg,1.06mmol)和HATU(161mg,0.423mmol)，室温下搅拌过夜。LCMS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA，约35％EA时出产物)，得无色油(R)-2-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(83-a,130mg,0.27mmol,yield:81％)。MS Calcd:481；MS Found:482([M+H]+).
步骤2：称取(R)-2-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(83-a,130mg,0.27mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(86mg,0.35mmol)，碳酸钾(112mg,0.81mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(31mg,0.027mmol)，氮气保护下100度反应8小时。LCMS显示反应完成，反应液倒入水中，用乙酸乙酯提取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05HCOOH)，得到白色固体(R)-2-((4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(83-b,124mg,0.22mmol,yield:81％)。MS Calcd:563；MS Found:564([M+H]+).
步骤3：将(R)-2-((4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(83-b,124mg,0.22mmol)溶于甲醇(5mL)，加入氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M,5mL)，室温下搅拌1小时，LCMS显示反应完全。将反应液旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g反相柱，MeCN/0.05NH4HCO3)，得标题化合物：(R)-N-(4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-2-甲酰胺(83,10mg,0.0215mmol,yield:9.8％)。MS Calcd:463；MS Found:464([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),11.11(s,1H),8.37(d,J＝5.2Hz,1H),8.31(s,1H),8.12(d,J＝5.2Hz,1H),7.66–7.58(m,2H),4.83(brs,1H),4.57(d,J＝12.6Hz,1H),4.12–4.04(m,1H),3.94–3.82(m,2H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.68–3.50(m,2H),3.18-3.12(m,1H),3.04–2.97(m,1H),2.21–2.11(m,1H),1.91-1.83(m,1H),1.76–1.68(m,2H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例84
(R)-2-(3,5-二甲基-4-(4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇
步骤1：在100mL单口瓶中加入3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(84-a,1g，4.5mmol)，加40mLMeCN做溶剂，后依次加入(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(1.4g，5.8mmol)，碳酸铯(2.9g，9mmol)，85℃搅拌4h。TLC检测反应完全后，用乙酸乙酯萃取反应液，有机相浓缩后用正向柱层析纯化得1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(84-b，1.5g，3.96mmol，88％yield)。MS Calcd:380.41；MS Found:381.52([M+H]+)。
步骤2：取1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(84-b，326mg，0.85mmol)加入到50mL反应瓶中，并加入(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(300mg，0.85mmol)，碳酸钠(267mg，2.5mmol)，Pd(dppf)Cl2(62mg，0.085mmol),用二氧六环和水作为溶剂，并用氮气保护，反应在110℃搅拌8h，TLC检测反应完全后，反应液直接浓缩后，用正向柱层析法纯化得(R)-4-(7-(1-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(84-c，300mg，0.57mmol，68％yield)。MSCalcd:522.18；MS Found:523.24([M+H]+)。
步骤3：取(R)-4-(7-(1-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(84-c，300mg，0.57mmol)加入到50mL反应瓶中，并加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(210mg，0.86mmol)，碳酸铯(555mg，1.71mmol)，Pd(dppf)Cl2(42mg，0.057mmol),用二氧六环和水作为溶剂，并用氮气保护，反应在110℃搅拌8h，TLC检测反应完全后，反应液直接浓缩后，用正向柱层析法纯化得(R)-4-(7-(1-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(84-d，250mg，0.41mmol，72％yield)。MS Calcd:603.86；MS Found:604.99([M+H]+)。
步骤4：取(R)-4-(7-(1-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉80mg于50mL瓶中，加入10mL乙醇和0.5mL浓盐酸，反应在室温下反应1h，反应完成后，用碳酸氢钠调节PH为中性，用乙酸乙酯萃取反应液，浓缩有机相后用高效薄层色谱制备板纯化(MeOH:DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-2-(3,5-二甲基-4-(4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(84，40mg，0.081mmol，62％yield)。MS Calcd:489.60；MS Found:490.73([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.74(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),8.09(s,1H),8.05(d,J＝5.2Hz,1H),7.51(dd,J＝3.2,2.4Hz,1H),7.18(dd,J＝3.2,2.4Hz,1H),4.98–4.89(m,2H),4.63–4.52(m,1H),4.13-4.08(m,3H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.83–3.75(m,3H),3.69–3.55(m,2H),2.23(s,3H),2.15(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例85
(R)-4-(7-(1,5-二甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在100mL单口瓶中加入4-溴-5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑(85-a,2g，8.7mmol)，加40mL丙酮做溶剂，后依次加入碳酸钾(2.4g，17.4mmol)，碘甲烷(2.4g，17.4mmol)，60℃搅拌4h。TLC检测反应完全后，用乙酸乙酯萃取反应液，有机相浓缩后得4-溴-1,5-二甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑(85-b，1.82g，7.39mmol，85％yield)。MS Calcd:241.97；MS Found:242.88([M+H]+)
步骤2：取4-溴-1,5-二甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑(85-b，1.5mg，6.1mmol)加入到50mL三口瓶中，并加入THF作为溶剂，在氮气保护，-78℃条件下，加入正丁基锂(5mL，12.3mmol)，低温下搅拌30min，最后加入2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(2.2g，12.3mmol)，反应在低温下搅拌4h，TLC检测反应完全后，用饱和氯化铵溶液淬灭反应并调节PH为中性，用乙酸乙酯萃取反应液，浓缩有机相后用正向柱层析法纯化得1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑(85-c，688mg，2.44mmol，40％yield)。
MS Calcd:290.14；MS Found:291.21([M+H]+)
步骤3：取(1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑85-c，500mg，1.7mmol)加入到50mL反应瓶中，并加入(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(300mg，0.85mmol)，碳酸钠(267mg，2.55mmol)，Pd(dppf)Cl2(62mg，0.085mmol),用二氧六环和水作为溶剂，并用氮气保护，反应在110℃搅拌8h，TLC检测反应完全后，反应液直接浓缩后，用正向柱层析法纯化得(R)-4-(2-氯-7-(1,5-二甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(85-d，270mg，0.62mmol，73％yield)。MS Calcd:431.08；MS Found:432.12([M+H]+)
步骤4：取(R)-4-(2-氯-7-(1,5-二甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(85-d，100mg，0.23mmol)于25mL瓶中，加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(84mg，0.34mmol)，碳酸铯(224mg，0.69mmol)，和Pd(dppf)Cl2(16.8mg，0.023mmol)，并加入二氧六环/水(5：1)3ml做溶剂，氮气置换三次，升温至110度搅拌8h，待反应完成后，用高效薄层色谱制备板纯化得到标题化合物：(R)-4-(7-(1,5-二甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(85，阻转异构体混合物，63mg，0.11mmol，53％yield)。MS Calcd:513.16；MS Found:514.23([M+H]+)。
85-peak 1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.04(d,J＝5.2Hz,1H),7.99(s,1H),7.59(t,J＝3.2Hz,1H),7.35(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),6.56(s,1H),5.70(s,2H),4.85(d,J＝7.6Hz,1H),4.54(d,J＝10.8Hz,1H),4.14–4.03(m,1H),3.90–3.71(m,2H),3.65-3.54(m,2H),2.43(s,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
85-peak 2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.74(s,1H),8.31(d,J＝5.2Hz,1H),8.22(s,1H),7.99(d,J＝5.2Hz,1H),7.54(t,J＝3.2Hz,1H),7.05(dt,J＝3.2,1.6Hz,1H),4.91(d,J＝7.6Hz,1H),4.64–4.52(m,1H),4.13–4.05(m,1H),3.97(s,3H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.69–3.53(m,2H),2.19(s,3H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例86
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1,200mg,0.547mmol)溶于四氢呋喃溶液(5mL)中，再加入3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(192mg,0.862mmol)，K2CO3(226mg,1.64mmol)，Pd(dppf)Cl2(40mg,0.0547mmol)和H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应16h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％FA)，得(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(86-a,170mg,0.468mmol,yield:85％)。MS Calcd:363.09；MS Found:364.15([M+H]+)。
步骤2：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(86-a,100mg,0.275mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入6-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(144mg,0.55mmol)，K2CO3(114mg,0.825mmol)，Pd(PPh3)4(32mg,0.0275mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％TFA)，得标题化合物：(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(86,20mg,0.0432mmol,yield:15.7％)。MS Calcd:462.16；MSFound:463.21([M+H]+)。
实施例87
(R)-4-(7-(1-(二氟甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(87-a,400mg,1.8mmol)，再加入二氟氯乙酸钠(548mg,3.6mmol)，最后加入乙腈溶液(10mL)，加完在85℃下回流8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得1-(二氟甲基)-3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-4,5-二氢-1H-吡唑(87-b,395mg,1.44mmol,yield:80％)。MS Calcd:272.15；MSFound:273.15([M+H]+).
步骤2：在氮气保护下称取(R)-4-(7-溴-2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(200mg,0.547mmol)溶于四氢呋喃溶液(5mL)中，再加入1-(二氟甲基)-3,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-4,5-二氢-1H-吡唑(87-b,224mg,0.82mmol)，K2CO3(226mg,1.64mmol)，Pd(dppf)Cl2(40mg,0.0547mmol)和H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应16h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(10mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得(R)-4-(2-氯-7-(1-(二氟甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(87-c,73mg,0.176mmol,yield:32％)。MS Calcd:413.09；MS Found:414.13([M+H]+).
步骤3：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(1-(二氟甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(87-c,73mg,0.176mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(65mg,0.265mmol)，K2CO3(73mg,0.528mmol)，Pd(PPh3)4(20mg,0.0176mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％FA)，得标题化合物：(R)-4-(7-(1-(二氟甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(87,5mg,0.01mmol,yield:6％)。MS Calcd:495.17；MS Found:496.22([M+H]+)。
实施例88
(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，100mg，0.29mmol)，1,3-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(95mg，0.43mmol)，碳酸钠(92mg，0.87mmol)，Pd(dppf)Cl2(22mg，0.03mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.4mL)中，氮气置换三次，升温至100度搅拌5h。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，浓缩板层析(乙酸乙酯：石油醚＝2:1，Rf＝0.3)纯化得(R)-4-(2-氯-7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(88-a，60mg，0.16mmol，55％yield)。MS Calcd:363.09；MS Found:364.07([M+H]+)
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(88-a，60mg，0.16mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(51mg，0.21mmol)，碳酸铯(104mg，0.32mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)加入到1,4-二氧六环(1mL)和水(0.3mL)中，吹氮气，微波100度反应1小时。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，板层析(乙酸乙酯，Rf＝0.3)纯化得可得标题化合物：(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(88，20mg，0.045mmol，28％yield)。MS Calcd:445.17；MS Found:446.21([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.45(s,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),8.05(d,J＝4.8Hz,1H),7.57(s,1H),7.22(s,1H),6.47(s,1H),4.90(brs,1H),4.59(d,J＝10.4Hz,1H),4.13–4.10(m,1H),3.90–3.80(m,5H),3.65–3.60(m,2H),2.26(s,3H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例89
(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，200mg，0.57mmol)，1,3-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(95mg，0.43mmol)，碳酸钠(92mg，0.87mmol)，Pd(dppf)Cl2(22mg，0.03mmol)加入到1,4-二氧六环(3mL)和水(0.6mL)中，吹氮气，微波100度反应1小时。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，板层析(乙酸乙酯：石油醚＝1:1，Rf＝0.4)纯化得(3R)-4-(2-氯-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(89-a，100mg，0.24mmol，42％yield)。MS Calcd:419.12；MSFound:420.10([M+H]+)。
步骤2：称取(3R)-4-(2-氯-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(89-b，100mg，0.25mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(91mg，0.37mmol)，碳酸铯(163mg，0.5mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.4mL)中，吹氮气，微波100度反应1小时。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，板层析(乙酸乙酯：石油醚＝4:1，Rf＝0.3)纯化得可得化合物(3R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(89-c，100mg，0.2mmol，80％yield)。MS Calcd:501.19；MS Found:502.22([M+H]+)。
步骤3：称取((3R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(89-c，50mg，0.1mmol)溶于甲醇(2mL)和水(0.5mL)中，加入4-(甲磺酰基)苯酚(86mg，0.5mmol)，升温至70度反应1小时。LC-MS监控反应完全，反应液冷却至室温、浓缩，经反相中压制备液相分离纯化得标题化合物：(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(89，30mg，0.072mmol，72％yield)。MS Calcd:417.14；MS Found:418.17([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.08(s,1H),11.82(s,1H),8.50(s,1H),8.39(s,1H),8.09(d,J＝5.2Hz,1H),7.92(s,1H),7.61(s,1H),7.43–7.26(m,2H),4.88(brs,1H),4.56(d,J＝10.4Hz,1H),4.08(d,J＝8.0Hz,1H),3.90–3.75(m,2H),3.69–3.55(m,2H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例90
(R)-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-腈
步骤1：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，65mg，0.22mmol)，氮杂环丁烷-3-腈(36mg，0.44mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3ml)，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(233mg，1.1mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:30)得到((R)-1-(((2-氯-4-(3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-腈(90-a，54mg，0.15mmol，67％yield)。MSCalcd:363.09；MS Found:364.15([M+H]+)。
步骤2：将((R)-1-(((2-氯-4-(3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-腈(90-a，54mg，0.15mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(48mg，0.3mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(62mg，0.45mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2ml：0.5ml)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到标题化合物：(R)-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-腈(90，17mg，0.038mmol，25％yield)。MS Calcd:445.17；MS Found:436.25([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.46–8.32(m,1H),8.15–7.98(m,2H),7.62(s,1H),7.42(s,1H),4.83(brs,1H),4.53(d,J＝12.0Hz,1H),4.01-3.95(m,4H),3.89–3.71(m,2H),3.67–3.42(m,6H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例91
(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-甲酰胺
步骤1：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，76mg，0.22mmol)，(S)-吡咯烷-2-甲酰胺(50mg，0.44mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3ml)，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(233mg，1.1mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:30)得到目标化合物(S)-1-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-甲酰胺(91-a，62mg，0.16mmol，72％yield)。MS Calcd:395.12；MS Found:396.24([M+H]+).
步骤2：将(S)-1-((2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-甲酰胺(91-a，62mg，0.16mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(52mg，0.32mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(67mg，0.48mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2ml：0.5ml)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到目标化合物(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-甲酰胺(91，12mg，0.025mmol，16％yield).MS Calcd:477.19；MS Found:478.23([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.37(s,1H),8.23(s,1H),7.99(s,1H),7.61-7.48(m,2H),7.36(s,1H),7.07(s,1H),4.93–4.78(m,1H),4.65–4.42(m,1H),4.24–4.02(m,3H),4.00–3.71(m,3H),3.59(m,2H),3.06(m,2H),2.07(d,J＝8.6Hz,1H),1.70(m,3H),1.38(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例92
(R)-4-(7-(((cis)-2,6-二甲基哌啶-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-甲醛(int-2a，100mg，0.29mmol)，(cis)-2,6-二甲基哌啶(66mg，0.58mmol)，加入到1,2二氯乙烷中(3ml)，升温到50℃，搅拌20分钟，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(246mg，1.16mmol)室温搅拌1个小时，加水淬灭，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:30)得到目标化合物(R)-4-(2-氯-7-(((cis)-2,6-二甲基哌啶-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(92-a，46mg，0.13mmol，45％yield)。MS Calcd:394.16；MS Found:395.21([M+H]+).
步骤2：将(R)-4-(2-氯-7-(((cis)-2,6-二甲基哌啶-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(92-a，46mg，0.13mmol)，(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)硼酸(42mg，0.26mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)，碳酸钾(54mg，0.39mmol)加入到乙醇和水的混合溶剂中(2ml：0.5ml)，氮气置换2分钟，100℃反应2小时，减压浓缩，剩余物经柱层析纯化(MeOH：DCM＝1:10)得到目标化合物(R)-4-(7-(((cis)-2,6-二甲基哌啶-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(92，17mg，0.035mmol，27％yield)。MS Calcd:476.24；MS Found:477.32([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.11–8.00(m,2H),7.62(t,J＝3.2Hz,1H),7.38(d,J＝3.2Hz,1H),4.86(d,J＝7.6Hz,1H),4.55(d,J＝11.2Hz,1H),4.13(s,1H),4.07(d,J＝8.8Hz,1H),3.95(s,2H),3.89–3.71(m,2H),3.67–3.51(m,2H),1.60(m,3H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H),1.29-1.21(m,4H),1.06(s,6H)。
实施例93
(R)-4-(7-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-4-(2-氯-7-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(79-a,70mg,0.19mmol)和N-氯代丁二酰亚胺(38mg,0.29mmol)依次加入四氯化碳溶液中，升温至85℃搅拌4小时。TLC监测反应完成，将反应液完全浓缩，向残余物中加入5mL水，乙酸乙酯(10mL)萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得产物(R)-4-(2-氯-7-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(93-a,60mg,0.15mmol,80％yield)。MS Calcd:397.05；MS Found:398.12([M+H]+)。
步骤2：(R)-4-(2-氯-7-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(93-a,60mg,0.15mmol)、7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(40mg,0.17mmol)、碳酸钾(62mg,0.45mmol)和四(三苯基膦)钯(18mg,0.015mmol)依次加入二氧六环/水(6:1)混合溶剂3mL中，抽真空，氮气置换3次，于110℃条件下搅拌8h。TLC监测反应完成，将反应液完全浓缩，残余物经硅胶柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯＝1：3)纯化得产物(R)-4-(7-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(93，20mg,0.04mmol,55％yield)。MS Calcd:479.13；MS Found:480.17([M+H]+)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),8.61(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),8.01(d,J＝5.2Hz,1H),7.81(s,1H),7.64(s,1H),7.03(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.91(d,J＝7.6Hz,1H),4.61(d,J＝9.6Hz,1H),4.11–4.04(m,3H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,2.8Hz,1H),3.68-3.59(m,2H),1.45(d,J＝6.8Hz,3H),1.19(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例94
(R)-4-(7-(4-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：将(R)-4-(2-氯-7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(31-a,40mg,0.11mmol和N-氯代丁二酰亚胺(22mg,0.17mmol)依次加入四氯化碳溶液中，升温至85℃搅拌4小时。TLC监测反应完成，将反应液完全浓缩，向残余物中加入5mL水，乙酸乙酯(10mL)萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析纯化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得产物(R)-4-(2-氯-7-(4-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(94-a,30mg,0.075mmol,69％yield)。MS Calcd:397.05；MS Found:398.03([M+H]+).
步骤2：(R)-4-(2-氯-7-(4-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(94-a,30mg,0.075mmol)、7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(20mg,0.08mmol)、碳酸钾(32mg,0.23mmol)和四(三苯基膦)钯(8mg,0.007mmol)依次加入二氧六环/水(6:1)混合溶剂2mL中，抽真空，氮气置换3次，于110℃条件下搅拌8h。TLC监测反应完成，将反应液完全浓缩，残余物经硅胶柱层析分离(石油醚:乙酸乙酯＝1：2)纯化得产物(R)-4-(7-(4-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(94，20mg,0.04mmol,55％yield)。MS Calcd:479.13；MS Found:480.18([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.57(s,1H),8.34(d,J＝5.2Hz,1H),8.02(d,J＝5.2Hz,1H),7.64(d,J＝1.6Hz,1H),7.09(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),4.95–4.86(m,1H),4.60(d,J＝9.6Hz,1H),4.10(d,J＝7.7Hz,1H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,2.8Hz,1H),3.73(s,3H),3.64-3.60(m,2H),2.26(s,3H),1.45(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例95
(R)-3-甲基-4-(7-(吡咯烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：在50ml单口瓶中加入(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-氨基甲醛(int-2a,100mg，0.36mmol)，吡咯烷(126mg，1.78mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(375mg，1.78mmol)，加入二氯乙烷5ml，氮气置换三次后室温下搅拌反应3h。TLC检测反应完全(DCM/MEOH＝20/1)。冷却反应液至室温，减压浓缩，硅胶拌样柱层析纯化DCM/MEOH/＝20/1，洗脱得到(R)4-(2-氯-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(95-a，50mg，0.26mmol，72％yield)。
步骤2：在微波管中加入(R)4-(2-氯-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(95-a,50mg，0.26mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(95mg，0.39mmol)，Pd(dppf)Cl2(19mg，0.026mmol)，碳酸钾(107mg，0.78mmol)，乙醇/水＝2ml/0.5ml混合溶剂，氮气保护后升温至100℃下微波下搅拌反应2h，TLC检测反应完全(DCM/MEOH/氨水＝10/1/0.2)。将体系冷却至室温后，减压浓缩，用DCM/MEOH＝10/1(2ml)溶解后，板层析纯化DCM/MEOH/氨水＝10/1/0.2，浓缩得到(R)-3-甲基-4-(7-(吡咯烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(95，8mg，0.017mmol，11％yield)。MSCalcd:434.19；MS Found:435.20([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.17–7.92(m,2H),7.61(d,J＝3.6Hz,1H),7.45(d,J＝3.6Hz,1H),5.00–4.77(m,1H),4.55(d,J＝11.6Hz,1H),4.14–4.05(m,1H),4.00(s,2H),3.86(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.71–3.52(m,2H),2.88(d,J＝6.4Hz,1H),2.59(s,3H),1.71(m,4H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例96
(R)-3-甲基-4-(7-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉(int-1,0.22g，0.62mmol)、叔丁基3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(96-a,0.23g,0.74mmol)、PdCl2(dppf)(45mg,0.062mmol)和碳酸钾(0.26g,1.86mmol)依次加入5mL乙醇/水(10:1)混合溶剂中，抽真空氮气置换三次，反应液升温至80度，搅拌10小时。TLC监测反应完成，将反应液冷却至室温，减压浓缩，向反应液中加入水(10mL),乙酸乙酯(30mL)萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩,残余物经硅胶柱层析纯化(PE：EA＝1：2)得产物(R)-4-(2-氯-7-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(96-b,52mg,0.15mmol,24％yield)。MS Calcd:349.08；MSFound:350.04([M+H]+).
步骤2：将(R)-4-(2-氯-7-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(96-b,52mg,0.15mmol)、7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(41mg,0.16mmol)、碳酸钾(62mg,0.45mmol)和四(三苯基膦)钯(17mg,0.015mmol)依次加入二氧六环/水(6:1)混合溶剂4mL中，抽真空氮气置换3次，于110度条件下搅拌8h。TLC监测反应完成，将反应液完全浓缩，残余物经硅胶柱层析分离(DCM：MeOH＝10：1)纯化得产物(R)-3-甲基-4-(7-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(96，20mg,0.046mmol,31％yield)。MS Calcd:431.15；MS Found:432.21([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.77(d,J＝26.7Hz,1H),11.79(s,1H),8.57(d,J＝35.2Hz,1H),8.37(s,1H),8.17(d,J＝28.2Hz,1H),8.06(s,1H),7.57(s,1H),7.28(s,1H),4.90(d,J＝6.5Hz,1H),4.57(d,J＝10.5Hz,1H),4.10(d,J＝7.9Hz,1H),3.88(d,J＝11.5Hz,1H),3.80(dd,J＝11.6,2.9Hz,1H),3.71–3.51(m,2H),2.44(s,3H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例97
(R)-2-羟基-1-(3-(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙-1-酮
步骤1：称取(R)-2-羟基丙酸乙酯(97-a，354mg，3mmol)溶于乙醇(5mL)和水(1mL)中，加入氢氧化钠(360mg，9mmol)，室温反应4小时。TLC监控反应完全。浓缩反应液并加水稀释，用盐酸(2mol/L)调PH＝1左右。浓缩，再加甲醇稀释过滤可得(R)-2-羟基丙酸粗品(97-b，200mg)。MS Calcd:90.03；MS Found:89.06([M-H]-)
步骤2：称取(R)-2-羟基丙酸(97-b，54mg，0.6mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，冰水浴加入HATU(410mg，1.08mmol)反应0.5小时，再加入(R)-4-(2-氯-7-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(150mg，0.4mmol)和N,N-二异丙基乙胺(155mg，1.2mmol)。冰水浴反应1小时。LCMS监控反应完全，反应液加水稀释，乙酸乙酯萃取，有机相合并，用饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干燥浓缩，中压制备液相纯化可得目标产物：(R)-1-(3-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-2-羟基丙烷-1-酮(97-c，100mg，0.24mmol，60％yield)。MS Calcd:408.10；MSFound:409.16([M+H]+)
步骤3：(R)-1-(3-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉代))噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)-2-羟基丙烷-1-酮(97-c，80mg，0.2mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(73mg，0.3mmol)，碳酸铯(130mg，0.4mmol)，Pd(dppf)Cl2(15mg，0.02mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.4mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100度反应1.5小时。LCMS监控反应完全，冷却反应液至室温，加乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(二氯甲烷：甲醇＝15:1，Rf＝0.2)和反相中压制备液相分离纯化可得标题化合物：(R)-2-羟基-1-(3-(4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙-1-酮(97，10mg，0.02mmol，10％yield)。MS Calcd:490.18；MS Found:491.24([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),8.37(d,J＝4.8Hz,1H),8.26(d,J＝22.0Hz,1H),8.03(d,J＝4.8Hz,1H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.45–7.35(m,1H),7.26–7.21(m,1H),5.04(s,1H),4.89–4.83(m,1H),4.75–4.52(m,4H),4.46–4.33(m,2H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,2.8Hz,1H),3.65–3.58(m,2H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H),1.27(dd,J＝11.6,6.4Hz,3H).
实施例98
(R)-4-(7-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，500mg，1.43mmol)，3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(600mg，2.03mmol)，碳酸钠(455mg，4.3mmol)，Pd(dppf)Cl2(102mg，0.14mmol)加入到1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)中，吹氮气，微波100度反应1小时。LCMS监控反应完全，冷却反应液至室温，加入乙酸乙酯稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经中压制备液相(石油醚/乙酸乙酯，20％)分离纯化得(R)-3-(2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(98-a，600mg，1.37mmol，95％yield)。MS Calcd:436.13；MS Found:437.21([M+H]+)
步骤2：称取(R)-3-(2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(98-a，600mg，0.14mmol)溶于乙酸乙酯(2mL)中，加入氯化氢乙酸乙酯溶液(2mol/L，4mL，8mmol)，室温反应16小时。LC-MS显示反应完全。浓缩反应液可得目标产物：(R)-4-(2-氯-7-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉盐酸盐粗品(98-b，600mg)。MS Calcd:336.08；MS Found:337.10([M+H]+)
步骤3：称取((R)-4-(2-氯-7-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉盐酸盐粗品(98-b，200mg，0.54mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(197mg，0.81mmol)，碳酸铯(528mg，1.62mmol)，Pd(dppf)Cl2(37mg，0.05mmol)加入到1,4-二氧六环(2mL)和水(0.5mL)中，鼓吹氮气，微波加热至100度反应1h。LC-MS监控反应完全，冷却反应液至室温，加甲醇和二氯甲烷稀释，无水硫酸钠干燥过滤浓缩，经板层析(二氯甲烷：甲醇＝10:1，Rf＝0.1)和反相中压制备液相分离纯化可得标题化合物：(R)-4-(7-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(98，25mg，0.06mmol，11％yield)。MSCalcd:418.16；MS Found:419.19([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.84(s,1H),8.38–8.31(m,2H),8.23(s,1H),8.02(d,J＝4.8Hz,1H),7.64–7.59(m,1H),7.36(s,1H),7.23(d,J＝3.2Hz,1H),4.88–4.84(m,1H),4.56–4.51(m,1H),4.35(s,1H),4.09–4.06(m,2H),3.88–3.84(m,2H),3.80–3.75(m,2H),3.64–3.58(m,2H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例99
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(82-c,105mg,0.288mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(105mg,0.432mmol)，K2CO3(119mg,0.864mmol)，Pd(PPh3)4(33mg,0.0288mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用水(3mL)和乙酸乙酯(3mL)洗涤，得(R)-4-(7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(99,20mg,0.045mmol,yield:15％)。MS Calcd:445.17；MS Found:446.27([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(s,1H),8.71(s,1H),8.11(d,J＝7.5Hz,1H),7.52(d,J＝7.9Hz,1H),7.38(t,J＝2.8Hz,1H),7.18(t,J＝7.8Hz,1H),7.03(t,J＝2.5Hz,1H),4.89(d,J＝7.9Hz,1H),4.65–4.50(m,1H),4.15–4.04(m,1H),3.88(d,J＝11.5Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.71–3.56(m,2H),2.22(d,J＝1.9Hz,6H),1.45(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例100
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(43-a,100mg,0.275mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吲哚(100mg,0.41mmol)，K2CO3(114mg,0.825mmol)，Pd(PPh3)4(32mg,0.0275mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％FA)，得(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(100,20mg,0.045mmol,yield:16.4％)。MS Calcd:444.17；MS Found:445.19([M+H]+)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(s,1H),8.15(s,1H),8.11(d,J＝7.5Hz,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.39(t,J＝2.8Hz,1H),7.23(s,1H),7.19(t,J＝7.8Hz,1H),4.91(d,J＝5.6Hz,1H),4.58(d,J＝11.1Hz,1H),4.09(d,J＝7.9Hz,1H),3.88(d,J＝11.4Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.1Hz,1H),3.72–3.52(m,2H),2.24(s,6H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例101
(R)-4-(7-(((环丙基磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：在氮气保护下称取(R)-4-(2-氯-7-((环丙基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(64-a,200mg,0.515mmol)溶于二氧六环溶液(5mL)中，再加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(189mg,0.773mmol)，K2CO3(213mg,1.55mmol)，Pd(PPh3)4(60mg,0.0515mmol)，H2O(0.5mL)，加完后在100℃下反应8h，LCMS监测反应完成，将反应液冷却至室温，加入水(3mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％FA)，得(R)-4-(7-(((环丙基磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(101,90mg,0.192mmol,yield:37.5％)。MS Calcd:469.12；MSFound:470.16([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.39(s,1H),8.36(d,J＝5.0Hz,1H),8.10(d,J＝4.9Hz,1H),7.62(t,J＝3.0Hz,1H),7.42(dd,J＝3.4,1.9Hz,1H),4.91(s,2H),4.87(d,J＝7.1Hz,1H),4.57(d,J＝10.7Hz,1H),4.09(d,J＝8.3Hz,1H),3.87(d,J＝11.5Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.69–3.54(m,2H),2.61(tt,J＝7.2,5.3Hz,1H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H),0.94–0.85(m,4H)。
实施例102
(R)-4-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)四氢-2H-吡喃-4-醇
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1b,5g,18.6mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中，加入三氟甲磺酸(20mL)，冰浴冷却下分批加入NIS(4.6g,20.5mmol)，加完后升至室温下搅拌1小时。反应液加水洗，分出二氯甲烷层后，水层用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层，干燥后旋干。残余物用中压制备色谱纯化(PE/DCM，约60％DCM时出产品)，得到(R)-4-(2-氯-7-碘噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(102-a,5.36g,13.6mmol,yield:73％)。MS Calcd:394.94；MS Found:395.94([M+H]+).
步骤2：将(R)-4-(2-氯-7-碘噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(102-a,400mg,1mmol)溶于四氢呋喃(15mL)，冷至-70℃，滴入正丁基锂(2.5M in hexane,0.52mL,1.3mmol)，滴完后在-70℃下搅拌15分钟，滴入4-四氢吡喃酮(200mg,2mmol)，升至室温下搅拌30分钟后用1M HCl淬灭。加乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA，约35％EA时出产品)，得(R)-4-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)四氢-2H-吡喃-4-醇(102-b,240mg,0.65mmol,yield:65％)。MS Calcd:369.09；MS Found:370.12([M+H]+).
步骤3：称取(R)-4-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)四氢-2H-吡喃-4-醇(102-b,120mg,0.325mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(95mg,0.39mmol)，碳酸钾(134mg,0.975mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(37mg,0.0325mmol)，氮气保护下100度反应8小时。。LCMS显示反应完成，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到(R)-4-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)四氢-2H-吡喃-4-醇(102,35mg,0.0776mmol,yield:24％)。MS Calcd:451.17；MS Found:452.16([M+H]+)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.76(s,1H),8.33(d,J＝5.0Hz,1H),8.02(d,J＝5.0Hz,1H),7.58(t,J＝3.0Hz,1H),7.48(s,1H),7.34(t,J＝2.6Hz,1H),4.89–4.82(m,1H),4.53(d,J＝11.4Hz,1H),4.07(d,J＝9.0Hz,1H),3.86(d,J＝11.5Hz,1H),3.77(d,J＝9.3Hz,5H),3.60(td,J＝14.1,7.5Hz,2H),2.19–2.08(m,2H),1.85–1.75(m,2H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例103
(R)-1,5-二甲基-4-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-腈
步骤1：称取1,5-二甲基-1H-吡唑-3-羧酸(103-a,10g,71.4mmol)悬浮于二氯甲烷(100mL)中，加入草酰氯(7.26mL,85.7mmol)，室温下搅拌过夜。将反应液旋干，残余物加入二氯甲烷溶解，将此溶液滴入冰浴冷却下的氨水(30mL)中，搅拌半小时后过滤，滤饼用水洗后，减压旋干，得1,5-二甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(103-b,9.72g,69.9mmol,yield:98％)，直接用于下一步。MS Calcd:139.07；MS Found:140.12([M+H]+).
步骤2：称取1,5-二甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(103-b,9.72g,69.9mmol)和吡啶(17mL,210mmol)溶于二氯甲烷(150mL)中，冰浴下滴入三氟乙酸酐(11.8mL,84mmol)，缓慢升到室温下，搅拌1小时。LCMS显示反应完成，反应液加水洗，分出二氯甲烷层，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(DCM/MeOH)，得1,5-二甲基-1H-吡唑-3-腈(103-c,3.71g,30.7mmol,yield:43.9％).MS Calcd:121.06；MS Found:122.10([M+H]+).
步骤3:称取1,5-二甲基-1H-吡唑-3-腈(103-c,500mg,4.1mmol)、联硼酸频那醇酯(1.26g,4.9mmol)、甲氧基(环辛二烯)合铱二聚体(81.5mg,0.123mmol)和4,4'-二叔丁基-2,2'-联吡啶(67mg,0.246mmol)加入到50mL圆底烧瓶中，最后加入正庚烷(15mL)，加完用N2置换并回填三次，然后在85℃下反应过夜。LCMS显示反应完成，加水淬灭反应，以EA提取三次，干燥后旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑-3-腈(103-d,980mg,3.96mmol,yield:96.8％)
MS Calcd:247.15；MS Found:248.17([M+H]+).
步骤4:称取4-(7-溴-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(200mg，0.57mmol)、1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑-3-腈(103-d,211mg，0.855mmol)、Pd(dppf)Cl2(42mg，0.057mmol)和K2CO3(236mg，1.71mmol)加入30mL的微波管中，最后加入THF(10mL)和H2O(1mL)，加完用N2置换并回填3次，在140℃下反应2h。LCMS显示反应完成，直接旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得(R)-4-(2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1,5-二甲基-1H-吡唑-3-腈(103-e,100mg,0.25mmol,yield:45％).MS Calcd:388.09；MS Found:389.10([M+H]+).
步骤5：称取(R)-4-(2-氯-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1,5-二甲基-1H-吡唑-3-腈(103-e,100mg,0.257mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(107mg,0.437mmol)，碳酸钾(106mg,0.77mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(30mg,0.0257mmol)，氮气保护下100度反应8小时。LCMS显示反应完成，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得到标题化合物：(R)-1,5-二甲基-4-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-3-腈(103,20mg,0.0426mmol,yield:16％)。
MS Calcd:470.16；MS Found:471.15([M+H]+).
实施例104
(R)-N-甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)环丙基磺酰胺
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(82-b,450mg,1.58mmol)，溶于二氯甲烷(10mL)，加入三乙胺(0.87mL,6.22mmol)，冰浴冷却下滴入环丙基磺酰氯(267mg,1.90mmol)，升到室温下搅拌30分钟。LCMS显示原料反应完，将反应液倒入水中，分出二氯甲烷层，水层用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层后干燥，旋干，得(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)环丙基磺酰胺(104-a,614mg,1.58mmol,yield:100％)，直接用于下一步。MS Calcd:388.04；MS Found:389.10([M+H]+).
步骤2：将(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)环丙基磺酰胺(104-a,614mg,1.58mmol)溶于DMF(10mL)，加入碳酸钾(654mg,4.74mmol)和碘甲烷(0.2mL,3.16mmol)，室温下搅拌过夜。LCMS显示原料消耗完，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g正相柱，PE/EA)，得黄色油(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-甲基-环丙基磺酰胺(104-b,290mg,0.721mmol,yield:46％)。MS Calcd:402.06；MS Found:403.04([M+H]+).
步骤3：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-甲基-环丙基磺酰胺(104-b,290mg,0.721mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(264mg,1.08mmol)，碳酸钾(298mg,2.16mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(83mg,0.0721mmol)，氮气保护下100度反应8小时。LCMS显示反应完成，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到(R)-N-甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)环丙基磺酰胺(104,50mg,0.103mmol,yield:14.3％)。MSCalcd:484.14；MS Found:485.11([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(t,J＝2.4Hz,1H),8.43–8.30(m,2H),8.06(d,J＝5.2Hz,1H),7.63(t,J＝3.2Hz,1H),7.38(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),4.86(d,J＝6.8Hz,1H),4.56(d,J＝10.8Hz,1H),4.08(d,J＝7.6Hz,1H),3.87(d,J＝11.5Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.61(ddd,J＝9.1,5.7,1.9Hz,2H),3.51(s,3H),2.91(ddd,J＝7.2,4.8,2.0Hz,1H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H),0.96(dd,J＝6.4,4.4Hz,4H).
实施例105
(R)-N-甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(82-b,300mg,1.06mmol)，溶于二氯甲烷(10mL)，加入三乙胺(0.44mL,3.18mmol)，冰浴冷却下滴入甲基磺酰氯(0.1mL,1.27mmol)，升到室温下搅拌30分钟。LCMS显示原料反应完，将反应液倒入水中，分出二氯甲烷层，水层用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层后干燥，旋干，得(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(105-a,516mg,1.43mmol,yield:134％)，直接用于下一步。MS Calcd:362.03；MS Found:363.15([M+H]+).
步骤2：将(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(105-a,516mg,1.43mmol)溶于DMF(5mL)，加入碳酸钾(592mg,4.29mmol)和碘甲烷(0.27mL,4.29mmol)，室温下搅拌过夜。LCMS显示原料消耗完，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g正相柱，PE/EA)，得(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-甲基-甲基磺酰胺(105-b,257mg,0.684mmol,yield:48％)。MS Calcd:376.04；MS Found:377.24([M+H]+).
步骤3：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-甲基-甲基磺酰胺(105-b,127mg,0.338mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(107mg,0.439mmol)，碳酸钾(140mg,1.01mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(39mg,0.0338mmol)，氮气保护下100度反应8小时。LCMS显示反应完成，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到白色固体(R)-N-甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(105,10mg,0.0218mmol,yield:6.5％)。MSCalcd:458.12；MS Found:459.22([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),8.36(d,J＝4.6Hz,2H),8.04(d,J＝5.0Hz,1H),7.62(t,J＝3.0Hz,1H),7.32(dd,J＝3.4,1.9Hz,1H),4.89–4.82(m,1H),4.58–4.51(m,1H),4.07(d,J＝8.2Hz,1H),3.85(d,J＝11.5Hz,1H),3.76(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.64–3.56(m,2H),3.48(s,3H),3.22(s,3H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例106
(R)-N-异丙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺
步骤1：将(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(105-a,300mg,0.83mmol)溶于DMF(10mL)，加入碳酸钾(343mg,2.49mmol)和2-碘丙烷(423mg,2.49mmol)，室温下搅拌过夜。LCMS显示原料消耗完，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(10g正相柱，PE/EA)，得黄色油(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-异丙基-甲基磺酰胺(106-a,180mg,0.445mmol,yield:54％)。MS Calcd:404.07；MS Found:405.10([M+H]+).
步骤3：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-异丙基-甲基磺酰胺(106-a,180mg,0.445mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(185mg,0.758mmol)，碳酸钾(185mg,1.34mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(51mg,0.0446mmol)，氮气保护下100度反应8小时。。LCMS显示反应完成，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCO2H)，得到(R)-N-异丙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(106,110mg,0.276mmol,yield:51％)。MSCalcd:486.15；MS Found:487.18([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(t,J＝2.3Hz,1H),8.42(s,1H),8.34(d,J＝5.0Hz,1H),7.98(d,J＝5.0Hz,1H),7.60(t,J＝2.9Hz,1H),7.34(dd,J＝3.4,1.9Hz,1H),4.92–4.85(m,1H),4.57(d,J＝9.5Hz,1H),4.46–4.38(m,1H),4.12–3.98(m,2H),3.86(d,J＝11.5Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.62(d,J＝8.9Hz,2H),1.99(s,1H),1.44(d,J＝6.8Hz,3H),1.23–1.13(m,7H).
实施例107
(R)-4-(7-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，300mg，0.867mmol)，1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯并呋喃-2-基)-1H吡唑(192.55mg，0.867mmol)，Pd(dppf)Cl2(63.60mg，0.087mmol)，碳酸钾(358.94mg，2.601mmol)至25ml单口瓶中，加入1.4-二氧六环(5ml)与水(1ml)，氮气置换三次，100℃反应3小时。TLC监测反应结束，将反应液减压浓缩至干，柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1)，得(R)-4-(2-氯-7-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(107-a，179mg，0.493mmol，57.00％yeild)。
MS Calcd:363.09；MS Found:364.13([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(107-a，50mg，0.137mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(50.40mg，0.206mmol)，四三苯基磷钯(15.01mg，0.013mmol)，碳酸钾(56.72mg，0.411mmol)至25ml单口瓶中，加入1.4-二氧六环(2ml)与水(0.5ml)，氮气置换三次，110℃反应8小时。TLC监测反应结束，将反应液减压浓缩至干，板层析纯化(DCM:MeOH＝20:1)，得标题化合物(R)-4-(7-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(107，28mg，0.062mmol，47.54％yeild)。MS Calcd:445.17；MS Found:346.19([M+H]+).1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.12(s,1H),8.07(d,J＝5.2Hz,1H),8.04(s,1H),7.58(t,J＝3.2Hz,1H),7.30(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),5.15–4.83(m,1H),4.57(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.3Hz,1H),3.93-3.86(m,4H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.75–3.51(m,2H),2.43(s,3H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例108
(R)-4-(7-(4-氯-1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(7-溴-2-氯噻吩[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1，300mg，0.867mmol)，1-异丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)-1H-吡唑(204.61mg，0.867mmol)，Pd(dppf)Cl2(63.60mg，0.087mmol)，碳酸钾(358.94mg，2.601mmol)至25ml单口瓶中，加入1.4-二氧六环(5ml)与水(1ml)，氮气置换三次，100℃反应3小时。TLC监测反应结束，将反应液拌样减压浓缩至干，柱层析分离纯化(PE:EA＝1:1)，得目标中间体(R)-4-(2-氯-7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(108-a，165mg，0.437mmol，50.61％yeild)。MS Calcd:377.11；MS Found:378.19([M+H]+)。
步骤2：称取(R)-4-(2-氯-7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(108-a，80mg，0.212mmol)，NCS(33.917mmol，0.254mmol)至25ml单口瓶中，加入四氯化碳(2ml)，80℃反应8小时。TLC监测反应结束，将反应液加水与乙酸乙酯，水洗有机相，无水硫酸钠除水，板层析纯化(PE:EA＝2:1)，得目标中间体(R)-4-(2-氯-7-(4-氯-1-异丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(108-b，75mg，0.182mmol，86.20％yeild)。MS Calcd:411.07；MS Found:412.12([M+H]+)。
步骤3：称取(R)-4-(2-氯-7-(4-氯-1-异丙基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(108-b，30mg，0.072mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(26.64mg，0.109mmol)，四三苯基磷钯(8.08mg，0.007mmol)，碳酸钾(29.81mg，0.216mmol)至25ml单口瓶中，加入1.4-二氧六环(2ml)与水(0.5ml)，氮气置换三次，110℃反应8小时。TLC监测反应结束，将反应液减压浓缩至干，板层析纯化(DCM:MeOH＝20:1)，得标题化合物(R)-4-(7-(4-氯-1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(108，17mg，0.034mmol，48.57％yeild)。MS Calcd:493.15；MS Found:494.13([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.75(s,1H),8.60(s,1H),8.32(d,J＝5.0Hz,1H),7.99(d,J＝5.0Hz,1H),7.82(s,1H),7.52(t,J＝3.2Hz,1H),7.01(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),4.92(d,J＝7.6Hz,1H),4.61(d,J＝9.6Hz,1H),4.31(m,1H),4.10(d,J＝7.6Hz,1H),3.89(d,J＝11.6Hz,1H),3.80(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.74–3.52(m,2H),1.46(d,J＝6.8Hz,3H),1.40–1.03(m,6H).
实施例109
1-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(82-b,400mg,1.41mmol)，溶于NMP(6mL)，加入1,4-二溴-2-丁醇(358mg,1.69mmol)和DIPEA(0.75mL,4.23mmol)，氮气保护下，加热至90℃反应过夜。LCMS显示约35％原料和65％产物，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(20g正相柱，PE/EA，约40％EA时出产品)，得1-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇(109-a,200mg,0.565mmol,yield:40％)。MS Calcd:354.09；MSFound:355.32([M+H]+).
步骤2：称取1-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇(109-a,200mg,0.565mmol)溶于二氧六环(5mL)中，氮气保护下加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(179mg,0.734mmol)，碳酸钾(234mg,1.7mmol)，水(0.5mL)和Pd(PPh3)4(65mg,0.0565mmol)，氮气保护下100度反应8小时。。LCMS显示反应完成，将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到标题化合物：1-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇(109,45mg,0.103mmol,yield:18.3％)。MS Calcd:436.17；MS Found:437.22([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.02(d,J＝5.2Hz,1H),7.60(t,J＝2.8Hz,1H),7.27(t,J＝2.4Hz,1H),6.58(s,1H),4.86–4.79(m,1H),4.49(dd,J＝11.6,5.2Hz,1H),4.43(dq,J＝5.2,2.4Hz,1H),4.10–3.99(m,1H),3.92–3.80(m,2H),3.76(dt,J＝11.6,3.3Hz,1H),3.71–3.50(m,5H),2.12–2.03(m,1H),1.88(td,J＝8.0,7.6,3.2Hz,1H),1.37(t,J＝6.8Hz,3H).
实施例110
(R)-N-氘代甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺
步骤1：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(105-a,150mg,0.413mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入碳酸钾(171mg,1.24mmol)和氘代碘甲烷(180mg,1.24mmol)，于室温下搅拌过夜，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得到(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-氘代甲基-甲基磺酰胺(110-a,80mg,0.211mmol,yield:51％)。MS Calcd:379.06；MS Found:380.10([M+H]+).
步骤2：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-氘代甲基-甲基磺酰胺(110-a,80mg,0.211mmol)溶于二氧六环-水(10:1,5mL)中，加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(87mg,0.358mmol)，碳酸钾(87mg,0.632mmol)，氮气置换两次，加入Pd(PPh3)4(24mg,0.021mmol)，氮气保护下加热至100度反应8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到标题化合物：(R)-N-氘代甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(110,51mg,0.111mmol,yield:52％)。MS Calcd:461.14；MS Found:462.16([M+H]+).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),8.38–8.34(m,2H),8.04(d,J＝5.2Hz,1H),7.62(dd,J＝3.6,2.4Hz,1H),7.35–7.30(m,1H),4.89–4.85(m,1H),4.58–4.53(m,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(dt,J＝11.6,1.2Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.67–3.59(m,2H),3.22(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例111
(R)-N-乙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺
步骤1：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(105-a,300mg,0.826mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入碳酸钾(342mg,2.48mmol)和碘乙烷(387mg,2.48mmol)，于室温下搅拌过夜，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA)，得到(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-乙基-甲基磺酰胺(111-a,170mg,0.435mmol,yield:53％)。MS Calcd:390.06；MS Found:391.10([M+H]+).
步骤2：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-乙基-甲基磺酰胺(111-a,170mg,0.435mmol)溶于二氧六环-水(10:1,10mL)中，加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(180mg,0.739mmol)，碳酸钾(180mg,1.30mmol)，氮气置换两次，加入Pd(PPh3)4(50mg,0.044mmol)，氮气保护下加热至100度反应8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到标题化合物：(R)-N-乙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(111,123mg,0.260mmol,yield:60％)。MS Calcd:472.14；MS Found:473.13([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),8.40–8.32(m,2H),8.03(d,J＝5.0Hz,1H),7.64–7.58(m,1H),7.32(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.91–4.84(m,1H),4.56(d,J＝9.8Hz,1H),4.08(d,J＝7.6Hz,1H),3.95(q,J＝7.2Hz,2H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.7,3.2Hz,1H),3.65–3.58(m,2H),3.21(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H),1.09(t,J＝7.2Hz,3H).
实施例112
2-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-甲磺酰基-乙腈
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-醛(int-2a,100mg,0.336mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入二碘化锌(54mg,0.169mmol)和三甲基氰硅烷(67mg,0.677mmol)，于室温下搅拌过夜，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层后干燥，旋干，得到2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-羟基乙腈(112-a,134mg,0.413mmol,yield:123％)。MS Calcd:324.04；MS Found:325.08([M+H]+).
步骤2：称取2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-羟基乙腈(112-a,90mg,0.277mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，滴入二氯亚砜(0.2mL)，室温下搅拌2小时，LCMS显示反应完成。将反应液旋干，得到2-氯-2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙腈(112-b,95mg,0.277mmol,yield:100％)。MS Calcd:342.01；MSFound:343.11([M+H]+).
步骤3：称取2-氯-2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙腈(112-b,95mg,0.277mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入甲基亚磺酸钠(141mg,1.38mmol)，加热到60度下搅拌2小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA,约50％EA时出产品)，得到2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-甲磺酰基-乙腈(112-c,68mg,0.176mmol,yield:63％)。MS Calcd:386.03；MS Found:387.12([M+H]+).
步骤4：称取2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-甲磺酰基-乙腈(112-c,68mg,0.176mmol)溶于二氧六环-水(10:1,5mL)中，加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(73mg,0.299mmol)，碳酸钾(73mg,0.529mmol)，氮气置换两次，加入Pd(PPh3)4(20mg,0.018mmol)，氮气保护下加热至100度反应8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH，约33％MeCN出产品)，得到标题化合物：2-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-甲磺酰基-乙腈(112,6mg,0.013mmol,yield:7.3％)。MS Calcd:468.10；MS Found:468.91([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),8.69(s,1H),8.36(d,J＝5.2Hz,1H),8.16(d,J＝5.2Hz,1H),7.62(t,J＝2.8Hz,1H),7.43(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),6.93(s,1H),4.87(s,1H),4.57(d,J＝9.8Hz,1H),4.10(d,J＝7.8Hz,1H),3.88(d,J＝11.6Hz,1H),3.79(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.63(d,J＝8.8Hz,2H),3.32(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例113
(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(9-a,145mg,0.398mmol)溶于二氧六环(4mL)中，加入2甲基-1H-苯并[d]咪唑(79mg,0.598mmol)，XPhos(38mg,0.080mmol)，碳酸铯(260mg,0.80mmol)，氮气置换两次，加入Pd2(dba)3(37mg,0.040mmol)，微波加热至140度反应1小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH，约40％MeCN时出产品)，得到白色固体(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(2-甲基-1H-苯并[d]咪唑-1-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(113,88mg,0.191mmol,yield:48％)。MS Calcd:459.18；MS Found:460.20([M+H]+).1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(s,1H),8.04–7.97(m,1H),7.62–7.56(m,1H),7.42(s,1H),7.27–7.16(m,2H),4.84(d,J＝8.0Hz,1H),4.49(d,J＝11.2Hz,1H),4.08(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.68(s,5H),2.79(s,3H),1.95(s,3H),1.47(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例114
(R)-2-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1,1-二氧代异噻唑烷
步骤1：称取(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-胺(82-b,460mg,1.62mmol)和三乙胺(1.12mL,8.10mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，滴入3-氯丙磺酰氯(315mg,1.78mmol)并于室温下搅拌8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层后干燥，旋干，得到黄色油(R)-3-氯-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙烷-1-磺酰胺(114-a,687mg,1.6mmol,yield:100％)MSCalcd:424.02；MS Found:425.16([M+H]+).
步骤2：称取(R)-3-氯-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙烷-1-磺酰胺(114-a,687mg,1.6mmol)和碳酸铯(526mg,1.6mmol)加入N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中，加热至60度下搅拌8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用MPLC纯化(PE/EA,约45％EA时出产品)，得到黄色油(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)嘧吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1,1-二氧代异噻唑(114-b,600mg,1.54mmol,95.5％)MS Calcd:388.04；MS Found:389.09([M+H]+).
步骤3：称取(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)嘧吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1,1-二氧代异噻唑(114-b,600mg,1.54mmol)溶于二氧六环-水(10:1,10mL)中，加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(564mg,2.31mmol)，碳酸钾(640mg,4.60mmol)，氮气置换两次，加入Pd(PPh3)4(178mg,0.15mmol)，氮气保护下加热至100度反应8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用EA/PE(1:1)混合溶剂打浆，得到标题化合物：(R)-2-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1,1-二氧代异噻唑烷(114,390mg,0.829mmol,yield:54％)。MSCalcd:470.12；MS Found:471.30([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.81(t,J＝2.4Hz,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.13(s,1H),8.04(d,J＝5.2Hz,1H),7.61(dd,J＝3.6,2.4Hz,1H),7.30(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),4.85(d,J＝7.6Hz,1H),4.54(d,J＝10.8Hz,1H),4.16(t,J＝6.8Hz,2H),4.06(dd,J＝22.3,7.4Hz,1H),3.87(d,J＝11.5Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,3.1Hz,1H),3.66–3.50(m,4H),2.56(q,J＝7.2Hz,2H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例115
(R)-N,N-二甲基-1-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲烷磺酰胺
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-(氯甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-2,100mg,0.314mmol)和硫脲(24mg,0.314mmol)溶于乙醇(5mL)中，加热至回流反应1小时，LCMS显示反应完成。将反应液旋干，得到(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基氨基甲酰亚胺基硫酯(115-a,124mg,0.314mmol,yield:100％)。MSCalcd:357.05；MS Found:358.21([M+H]+).
步骤2：称取(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基氨基甲酰亚胺基硫酯(115-a,124mg,0.314mmol)溶于乙腈(5mL)和水(0.2mL)中，冰浴冷却下滴入次氯酸叔丁酯(239mg,2.19mmol)，并于冰浴下搅拌1小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，得到(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7基)甲烷磺酰氯(115-b,91mg,0.238mmol,yield:76％)。MSCalcd:380.98；MS Found:382.14([M+H]+).
步骤3：称取(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7基)甲烷磺酰氯(115-b,91mg,0.238mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(120mg,1.08mmol)和二甲胺盐酸盐(97mg,1.08mmol)，于室温下搅拌2小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层后干燥，旋干，残余物用MPLC纯化(PE/EA,约45％EA时出产品)，得到(R)-1-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N,N-二甲基-甲烷磺酰胺(115-c,51mg,0.130mmol,yield:55％)。MS Calcd:390.06；MS Found:391.11([M+H]+).
步骤4：称取(R)-1-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N,N-二甲基-甲烷磺酰胺(115-c,51mg,0.130mmol)溶于二氧六环-水(10:1,5mL)中，加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(54mg,0.221mmol)，碳酸钾(54mg,0.390mmol)，氮气置换两次，加入Pd(PPh3)4(15mg,0.013mmol)，氮气保护下加热至100度反应8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到标题化合物：(R)-N,N-二甲基-1-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲烷磺酰胺(115,5mg,0.010mmol,yield:8％)。
MS Calcd:472.14；MS Found:473.20([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.36(d,J＝5.7Hz,2H),8.11(d,J＝5.0Hz,1H),7.62(t,J＝2.9Hz,1H),7.44(dd,J＝3.4,1.9Hz,1H),4.90–4.83(m,1H),4.81(s,2H),4.57(d,J＝10.9Hz,1H),4.09(d,J＝8.5Hz,1H),3.87(d,J＝11.5Hz,1H),3.79(dd,J＝11.7,3.1Hz,1H),3.69–3.56(m,2H),2.68(s,6H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例116
2-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-(甲磺酰基)丙腈
步骤1：称取2-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-甲磺酰基-乙腈(112，60mg,0.128mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中，加入N,N-二异丙基乙胺(163mg,1.28mmol)和碘甲烷(181mg,1.28mmol)，于室温下搅拌3小时，LCMS显示反应完成，并有上两个甲基的产物出现。将反应液倒入水中，用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷层后干燥，旋干，残余物用N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)打浆，过滤，滤饼用DCM洗，得到标题化合物：2-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-(甲磺酰基)丙腈(116，4mg,0.008mmol,yield:6％)。MS Calcd:482.12；MS Found:483.30([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82(s,1H),8.75(d,J＝0.8Hz,1H),8.36(d,J＝5.0Hz,1H),8.16(d,J＝5.0Hz,1H),7.65–7.59(m,1H),7.42–7.36(m,1H),4.88(d,J＝7.6Hz,1H),4.56(d,J＝9.8Hz,1H),4.11(d,J＝6.7Hz,1H),3.83(d,J＝6.8Hz,2H),3.67–3.60(m,2H),3.25(s,3H),2.39(s,3H),1.43(dd,J＝6.8,2.4Hz,3H).
实施例117
(R)-N-环丙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲烷磺酰胺
步骤1：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺(105-a，165mg,0.455mmol)，乙酸铜(41mg,0.225mmol)，环丙基氟硼酸钾(202mg,1.36mmol)，碳酸钾(126mg,0.913mmol)和1,10-菲罗啉(20mg,0.111mmol)加入甲苯(4mL)和水(1mL)的混合溶剂中，用氧气置换3次后加热到70度下搅拌6小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(PE/EA，约40％EA时出产品)，得到(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-环丙基-甲烷磺酰胺(117-a,170mg,0.442mmol,yield:93％)。MS Calcd:402.06；MS Found:403.20([M+H]+).
步骤2：称取(R)-N-(2-氯-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-N-环丙基-甲烷磺酰胺(117-a,85mg,0.211mmol)溶于二氧六环-水(10:1,5mL)中，加入7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(87mg,0.358mmol)，碳酸钾(87mg,0.632mmol)，氮气置换两次，加入Pd(PPh3)4(24mg,0.021mmol)，氮气保护下加热至100度反应8小时，LCMS显示反应完成。将反应液倒入水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备色谱纯化(MeCN/0.05％HCOOH)，得到(R)-N-环丙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲烷磺酰胺(117,70mg,0.144mmol,yield:68％)。MSCalcd:484.14；MS Found:485.20([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.35(d,J＝5.0Hz,1H),8.30(s,1H),8.01(d,J＝5.0Hz,1H),7.61(t,J＝3.0Hz,1H),7.29(dd,J＝3.5,1.9Hz,1H),4.91–4.84(m,1H),4.56(d,J＝9.5Hz,1H),4.05(dd,J＝22.2,7.4Hz,2H),3.86(d,J＝11.5Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.62(d,J＝8.7Hz,2H),3.54(d,J＝5.2Hz,1H),1.99(s,1H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H),1.17(t,J＝7.2Hz,1H),0.79(t,J＝7.2Hz,4H).
实施例118
(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲磺酰基)环丙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：将(R)-4-(2-氯-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(1-a,340mg,0.94mmol)和1,2-二溴乙烷(1.8g,9.4mmol)溶于甲苯(15mL)中，室温下加入氢氧化钾(525mg,9.4mmol)，四丁基溴化铵(606mg,1.88mmol)，完后微波加热到60度。6小时后，LCMS监测到原料剩余约1/3，然后停止反应。加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝3/1)得(R)-4-(2-氯-7-(1-(甲磺酰基)环丙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(118-a,60mg,17％)。MS Calcd:387；MS Found:388([M+H]+).
步骤2：(R)-4-(2-氯-7-(1-(甲磺酰基)环丙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉((118-a,60mg,0.15mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(76mg,0.3mmol),四三苯基磷钯(20mg,0.015mmol)，无水碳酸钾(62mg,0.45mmol)加入到二氧六环(3mL)和水(0.6mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后升温到110℃，保持搅拌3小时，TLC监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25:1)得标题化合物：(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲磺酰基)环丙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(118,42mg,70％)。MS Calcd:469；MS Found:470([M+H]+).1H NMR(600MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),8.54(s,1H),8.36(d,J＝4.8Hz,1H),8.11(d,J＝4.8Hz,1H),7.63(t,J＝3.0Hz,1H),7.48(dd,J＝3.0,1.8Hz,1H),4.88(s,1H),4.58(d,J＝12.0Hz,1H),4.09(d,J＝8.4Hz,1H),,3.87(d,J＝12.0Hz,1H),3.77(dd,J＝12.6,2.4Hz,1H),3.67–3.54(m,2H),2.97(s,3H),1.87(q,J＝4.8Hz,2H),1.55–1.48(m,2H),1.41(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例119
(R)-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇
步骤1：(R)-4-(2-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(int-1b,1g,3.7mmol)溶于THF(25mL)中，N2置换3次，然后冷却到-78℃，缓慢加入正丁基锂(2.2mL,5.6mmol)。保持在-78度下搅拌1小时，然后加入无水DMF(540mg,7.4mmol)。缓慢升温到-10度，TLC监测反应完全，加入稀盐酸淬灭反应。乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得粗品：(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(119-a,1.2g)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:297；MS Found:298([M+H]+).
步骤2：(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(119-a,0.6g,2.02mmol)溶于甲醇(10mL)，冰水浴下加入硼氢化钠(154mg,4.04mmol)。然后升温到室温反应1小时，TLC监测到反应完全，加入饱和氯化铵淬灭反应，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得粗品：(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-b，0.6g)。MS Calcd:299；MS Found:300([M+H]+).
步骤3：(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-b，0.6g，2mmol)溶于乙腈(10mL)，然后加入NBS(429mg，2.4mmol)，然后50度反应1小时。TLC监测到原料反应完毕，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得粗品：(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-c，0.65g)。MS Calcd:377/379；MSFound:378/380([M+H]+).
步骤4：(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-c，100mg,0.27mmol)，1-甲基-5-吡唑硼酸酯(55mg,0.27mmol)，Pd(dppf)Cl2(22mg,0.027mmol)，碳酸钾(112mg,0.81mmol)溶于二氧六环(3mL)和水(0.6mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后升温到110℃，保持搅拌3小时，TLC监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25:1)得:(R)-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-d,10mg,13％)。MS Calcd:379；MS Found:380([M+H]+).
步骤5：(R)-(2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-d,10mg,0.03mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(13mg,0.06mmol),四三苯基磷钯(4mg,0.003mmol)，无水碳酸钾(13mg,0.09mmol)加入到二氧六环(1mL)和水(0.2mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后升温到110℃，保持搅拌3小时，TLC监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25:1)得标题化合物：(R)-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119,3mg,30％)。MS Calcd:461；MS Found:462([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.76(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),8.01(d,J＝5.2Hz,1H),7.61(d,J＝2.0Hz,1H),7.54–7.50(m,1H),7.00(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),6.48(d,J＝1.6Hz,1H),6.08(t,J＝5.6Hz,1H),4.87-4.81(m,3H),4.60(d,J＝11.2Hz,1H),4.10(d,J＝9.2Hz,1H),3.89(d,J＝11.2Hz,1H),3.80(dd,J＝12.0,3.2Hz,1H),3.73(s,3H),3.69–3.54(m,2H),1.43(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例120
(R)-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基胺
步骤1：(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-c，0.5g,1.32mmol)溶于DCM(6mL)，冰水浴下加入甲基磺酰氯(0.2mL,2.64mmol)，随后加入三乙胺(0.5mL,3.3mmol)。撤去冰水浴，室温搅拌2小时，TLC监测到反应完全。加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基甲磺酸酯(120-a，0.75g，粗品)，粗品直接用于下一步。
步骤2：(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基甲磺酸酯(120-a，0.35g,粗品)溶于氨的甲醇溶液(10mL,7M)，然后室温搅拌3小时。TLC监测到原料反应完毕，减压浓缩后得(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲胺(120-b,1.2g，粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:376/378；MS Found:377/379([M+H]+).
步骤3：(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲胺(120-b,1.2g，粗品)溶于甲醇(10mL)，室温下加入Boc酸酐(1.4g,6.36mmol)，然后室温搅拌1小时。LCMS监测到原料反应完全，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝3/1)得叔丁基(R)-((7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)甲酸酯(120-c,200mg，63％)。MS Calcd:476/478；MS Found:477/479([M+H]+).
步骤4：叔丁基(R)-((7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)甲酸酯(120-c,200mg，0.21mmol)，1-甲基-5-吡唑硼酸酯(48mg,0.23mmol)，Pd(PPh3)4(25mg,0.042mmol)，碳酸钾(90mg,0.63mmol)溶于二氧六环(2mL)和水(0.5mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后升温到110℃，保持搅拌3小时，TLC监测反应完全，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后pre-TLC纯化(PE/EA＝1/1)得叔丁基(R)-((2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)甲酸酯(120-d,20mg，10％)。MS Calcd:478/480；MS Found:479/481([M+H]+).
步骤5：叔丁基(R)-((2-氯-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)甲酸酯(120-d,20mg，0.042mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(20mg,0.084mmol),四三苯基磷钯(5mg,0.004mmol)，无水碳酸钾(17mg,0.12mmol)加入到二氧六环(1mL)和水(0.2mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后升温到110℃，保持搅拌1小时，TLC监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25:1)得叔丁基(R)-((7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)甲酸酯(120-e,10mg，50％)。MS Calcd:560；MS Found:561([M+H]+).
步骤6：叔丁基(R)-((7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)甲酸酯(120-e,10mg)溶于DCM(1mL)，室温下加入三氟乙酸(0.3mL)，保持室温搅拌1小时。LCMS监测到原料反应完全，减压浓缩后反相柱纯化(TFA/MeCN/H2O,20％)得产品(R)-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基胺(120，6mg,60％,三氟乙酸盐)。MS Calcd:460；MS Found:461([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.84(s,1H),8.55(brs,3H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.04(d,J＝4.8Hz,1H),7.67(d,J＝2.0Hz,1H),7.57–7.49(m,1H),6.96(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),6.61(d,J＝1.6Hz,1H),4.85(brs,1H),4.59(brs,1H),4.37(d,J＝25.2Hz,2H),4.12(d,J＝7.6Hz,1H),3.91(d,J＝11.6Hz,2H),3.73(s,3H),3.66(d,J＝8.8Hz,2H),1.46(s,3H).
实施例121
(4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇
步骤1：(R)-(7-溴-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(119-c，1.7g,4.6mmol)溶于DCM(25mL)，室温下加入TBSCl(1g,6.9mmol)，咪唑(626mg,9.2mmol)。然后室温搅拌2小时，LCMS监测到原料反应完毕，目标峰为主峰。加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝8/1)得(R)-4-(7-溴-6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-a,1.5g)。MS Calcd:491/493；MS Found:492/494([M+H]+).
步骤2：(R)-4-(7-溴-6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-a,1.7g,3.05mmol)，三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(1.44g,3.9mmol)，Pd(dppf)Cl2(245mg,0.3mmol)溶于二氧六环(10mL)，N2置换3次，然后加热到100度反应16小时。LCMS监测到原料有少量剩余，产物为主峰。停止反应，加入0.1M的稀盐酸(2mL)搅拌10分钟，然后加水,乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝10/1)得(R)-1-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基-1-酮(121-b,1.5g，粗品)。MS Calcd:455/457；MS Found:456/458([M+H]+).
步骤3：(R)-1-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基-1-酮(121-b,1.5g，3.3mmol)溶于甲醇(10mL)，冰水浴下分批加入硼氢化钠(300mg，7.8mmol)，加完后升温到室温。室温搅拌3小时，LCMS监测到原料反应完毕，目标峰为主峰。加入饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝5/1)得1-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基-1-醇(121-c,0.7g)。MS Calcd:457/459MS Found:458/460([M+H]+).
步骤4：1-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基-1-醇(121-c,140mg，0.31mmol)溶于DCM(5mL)，冰水浴下加入吡啶(0.3mL，3.1mmol)，氯化亚砜(34uL，0.47mmol)。加毕后撤去冰水浴保持室温搅拌3小时。TLC(PE/EA＝5/1)监测到原料反应完毕，LCMS监测到目标峰生成。然后加水,乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(3R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(1-氯乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-d,160mg，粗品)，直接用于下一步。MS Calcd:475/477；MS Found:476/478([M+H]+).
步骤5：(3R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(1-氯乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-d,160mg，粗品)溶于DMF(3mL)，室温下加入甲基亚磺酸钠(127mg，1.24mmol)。随后升温到65度，保持65度反应4小时，LCMS监测到原料反应完毕，目标产物生成。然后加水,乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化得(3R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-e,120mg，粗品)。MS Calcd:519/521；MS Found:520/522([M+H]+).
步骤6：(3R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-e,50mg，0.1mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(47mg,0.2mmol),四三苯基磷钯(12mg,0.01mmol)，无水碳酸钾(42mg,0.3mmol)加入到二氧六环(2mL)和水(0.5mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后升温到110℃，保持搅拌3小时，TLC监测反应完全。减压浓缩后得(3R)-4-(6-(((t叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-f,80mg，粗品)粗品直接用于下一步。MS Calcd:601；MS Found:602([M+H]+).
步骤7：(3R)-4-(6-(((t叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(121-f,80mg，粗品)溶于THF(3mL)，加入TBAF(78mg，0.3mmol)，然后保持室温搅拌1小时。LCMS监测到原料反应完毕，减压浓缩后反相柱纯化(FA/MeCN/H2O,35％)得标题化合物：(4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(121,17mg)。MS Calcd:487；MS Found:488([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),8.35(d,J＝4.8Hz,1H),8.08(s,1H),7.62(s,1H),7.32(d,J＝4.8Hz,1H),6.22(s,1H),5.38(s,1H),5.25–5.06(m,1H),5.02(s,1H),4.87(s,1H),4.65–4.46(m,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(d,J＝11.2Hz,1H),3.68–3.48(m,2H),2.85(s,3H),1.80(s,3H),1.41(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例122
(R)-3-甲基-4-(7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：(3R)-4-(2-氯-7-(1-(甲基磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(18-a,400mg，1.28mmol)溶于无水THF(7mL),N2置换3次，然后用冰水浴冷却，缓慢滴加甲基溴化镁的THF溶液(3M)(0.86mL,2.56mmol)。滴加完毕后，撤去冰水浴，然后室温搅拌3小时。LCMS监测到原料反应完毕和目标产物生成，加入饱和氯化铵淬灭反应。加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-醇(122-a,420mg，粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:327/329；MSFound:328/330([M+H]+).
步骤2：(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-醇(122-a,420mg，1.28mmol)溶于甲苯(10mL)，加入水(0.1mL)，然后加入劳森试剂(363mg，0.90mmol)。加热到50度，反应2小时，TLC(PE/EA＝5/1)监测到原料反应完毕和LCMS监测到目标产物生成。停止反应，加水，乙酸乙酯萃取，碳酸氢钠溶液洗涤，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-硫醇(122-b,370mg，粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:343/345；MS Found:344/346([M+H]+).
步骤3：(R)-2-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-硫醇(122-b,370mg，1.08mmol)溶于无水乙醇(10mL)，然后加入硫酸二甲酯(133uL，1.40mmol)，随后加入粉末状的氢氧化钠(65mg，1.62mmol)。保持室温搅拌2小时，TLC(PE/EA＝5/1)监测到原料反应完毕，停止反应，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(R)-4-(2-氯-7-(2-(甲硫基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(122-c,400mg，粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:357/359；MS Found:358/360([M+H]+).
步骤4：(R)-4-(2-氯-7-(2-(甲硫基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(122-c,400mg，1.11mmol)溶于DCM(10mL)，冰水浴下加入m-CPBA(453mg，2.22mmol)，然后撤去冰水浴。室温搅拌1小时后，TLC监测到原料反应完毕(PE/EA＝5/1)，加水，乙酸乙酯萃取，饱和碳酸钠溶液洗涤，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝3/1)得(R)-4-(2-氯-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(122-d,150mg)。MS Calcd:389/391；MS Found:390/392([M+H]+).
步骤5：(R)-4-(2-氯-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(122-d,110mg，0.28mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(138mg,0.56mmol),四三苯基磷钯(33mg,0.03mmol)，七水合磷酸钾(190mg,0.56mmol)加入到二氧六环(4mL)和水(0.8mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后微波80℃反应1小时，LCMS监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25/1)得(R)-3-甲基-4-(7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(122，115mg，87％)。MSCalcd:471；MS Found:472([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),8.49(s,1H),8.36(d,J＝4.8Hz,1H),7.97(d,J＝4.8Hz,1H),7.61(t,J＝2.8Hz,1H),7.28(t,J＝2.4Hz,1H),4.91-4.86(m,1H),4.55(d,J＝10.4Hz,1H),4.08(d,J＝6.8Hz,1H),3.86(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,2.8Hz,1H),3.68–3.53(m,2H),2.92(s,3H),2.09(d,J＝4.8Hz,6H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例123
(R)-3-甲基-4-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：(R)-1-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙基-1-酮(121-b,3g，6.6mmol)溶于无水THF(20mL)，冰水浴下缓慢滴加甲基甲基溴化镁的THF溶液(3M)(4.4mL,13.1mmol)，滴加完毕后，撤去冰水浴。保持室温搅拌3小时，LCMS监测到原料剩余约5％，加入饱和氯化铵淬灭反应。乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝5/1)得(R)-2-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-醇(123-a,2g，70％)。MS Calcd:471/473；MS Found:472/474([M+H]+).
步骤2：(R)-2-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-醇(123-a,1.2g，2.5mmol)溶于甲苯(10mL)，水(0.1mL)，室温下加入劳森试剂(617mg，1.5mmol)。然后升温到65度反应5小时。TLC(PE/EA＝5/1)监测到原料反应完毕，加入饱和碳酸钠溶液，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(R)-2-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-硫醇(123-b,1.4g，粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:487/489；MS Found:488/490([M+H]+).
步骤3：(R)-2-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙基-2-硫醇(123-b,1.4g，粗品)溶于无水乙醇(15mL)，然后加入硫酸二甲酯(354uL，3.7mmol)，冰水浴下加入粉末状的氢氧化钠(172mg，4.3mmol)。保持室温搅拌2小时，TLC(PE/EA＝5/1)监测到原料反应完毕，停止反应，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(2-(甲硫基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(123-c,1.0g，粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:501/503；MS Found:502/504([M+H]+).
步骤4：(R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(2-(甲硫基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(123-c,1.0g，粗品)溶于DCM(15mL)，冰水浴下加入m-CPBA(1g，5mmol)，然后撤去冰水浴。室温搅拌1小时后，TLC监测到原料反应完毕(PE/EA＝5/1)，加水，乙酸乙酯萃取，饱和碳酸钠溶液洗涤，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝3/1)得(R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(123-d,0.45g).MS Calcd:533/535；MS Found:534/536([M+H]+).
步骤5：(R)-4-(6-(((叔丁基二甲基硅基)氧代)甲基)-2-氯-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(123-d,0.45g,0.64mmol)溶于THF(5mL)，加入TBAF(335mg，1.28mmol)，然后保持室温搅拌1小时。LCMS监测到原料反应完毕，减压浓缩硅胶柱纯化(PE/EA＝2/1)得(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(123-e,0.26g)。MS Calcd:419/421；MS Found:420/422([M+H]+).
步骤6：(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(123-e,80mg,0.19mmol)溶于DCM(2mL)，冰水浴下加入DMP(97mg,0.23mmol)。撤去冰水浴，然后保持室温搅拌2小时。LCMS监测到原料反应完毕，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝3/1)得(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(123-f,80mg)。MS Calcd:417/419；MS Found:418/420([M+H]+).
步骤7：(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(123-f,80mg,0.2mmol)溶于DCE(2mL)，加入甲基哌嗪(60mg,0.6mmol)，三乙酰氧硼氢化钠(80mg，0.4mmol)，冰醋酸(12mg，0.2mmol)，室温搅拌过夜。LCMS监测到产物生成，原料剩余约5％。停止反应，减压浓缩后，反相柱纯化(TFA/MeCN/H2O,30％)得(R)-4-(2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(123-g,70mg,80％)。MS Calcd:501/503；MS Found:502/504([M+H]+).
步骤8：(R)-4-(2-氯-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(123-g,70mg,0.14mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(68mg,0.28mmol),四三苯基磷钯(16mg,0.014mmol)，七水合磷酸钾(118mg,0.35mmol)加入到二氧六环(2mL)和水(0.5mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后微波80℃反应1小时，LCMS监测反应完全。减压浓缩后反相柱纯化(TFA/MeCN/H2O,25％)得(R)-3-甲基-4-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(123,36mg，三氟乙酸盐)。MS Calcd:583；MS Found:584([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.00(s,1H),9.85(s,1H),8.39(d,J＝4.2Hz,1H),7.96(d,J＝4.8Hz,1H),7.68–7.57(m,1H),7.26(d,J＝1.2Hz,1H),4.86(d,J＝6.0Hz,1H),4.46(d,J＝10.4Hz,1H),4.31(d,J＝3.2Hz,2H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.80--3.76(m,1H),3.69–3.55(m,2H),3.44-3.41(m,2H),3.21–3.02(m,4H),2.89(s,3H),2.85(s,3H),2.61(q,J＝12.0Hz,2H),2.20(d,J＝20.4Hz,6H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例124
(R)-(4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇
步骤1：(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(123-e,42mg,0.10mmol),7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(48mg,0.20mmol),四三苯基磷钯(11mg,0.010mmol)，七水合磷酸钾(101mg,0.35mmol)加入到二氧六环(2mL)和水(0.5mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后微波80℃反应1小时，LCMS监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化得(R)-(4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(124,13mg,45％)。MS Calcd:501；MS Found:502([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),8.36(d,J＝4.2Hz,1H),7.92(d,J＝5.0Hz,1H),7.63–7.59(m,1H),7.23(dd,J＝3.6,2.0Hz,1H),6.49(t,J＝5.6Hz,1H),5.17(d,J＝5.6Hz,2H),4.88(d,J＝6.8Hz,1H),4.52(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝10.4Hz,1H),3.78(dd,J＝11.6,2.8Hz,1H),3.69–3.54(m,2H),2.87(s,3H),2.16(d,J＝9.6Hz,6H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例125
(R)-4-(6-(甲氧甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：(R)-(2-氯-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(123-e,60mg,0.14mmol)溶于二氧六环(2mL)，加入粉末状的氢氧化钠(57mg,1.4mmol)，硫酸二甲酯(66uL,0.7mmol)，然后保持室温搅拌4小时。LCMS监测到原料反应完毕，加入饱和氯化铵，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(R)-4-(2-氯-6-(甲氧甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(125-a,80mg,粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:433/435；MS Found:434/436([M+H]+).
步骤2：(R)-4-(2-氯-6-(甲氧甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(125-a,40mg,0.1mmol),7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(45mg,0.2mmol),四三苯基磷钯(11mg,0.01mmol)，七水合磷酸钾(76mg,0.3mmol)加入到二氧六环(1mL)和水(0.2mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后80℃反应7小时，LCMS监测反应完全，减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25/1)得(R)-4-(6-(甲氧甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(125，10mg,25％)。MS Calcd:515；MS Found:516([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.79(s,1H),8.36(d,J＝4.2Hz,1H),7.91(d,J＝4.2Hz,1H),7.62–7.57(m,1H),7.22(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),5.12(s,2H),4.86(d,J＝6.4Hz,1H),4.50(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.77(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.65–3.57(m,2H),3.51(s,3H),2.88(s,3H),2.17(d,J＝12.0Hz,6H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例126
(3R)-4-(6-(二氟甲基)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉
步骤1：叔丁基(R)-((7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)甲酸酯(121-e,280mg,0.54mmol)溶于THF(5mL)，室温下加入TBAF(212mg,0.81mmol)，保持室温搅拌2小时。LCMS监测到原料反应完毕，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝2/1)得(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(126-a,150mg,68％)。MS Calcd:405/407；MSFound:406/408([M+H]+).
步骤2：(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇(126-a,150mg,0.37mmol)溶于DCM(3mL)，冰水浴下加入DMP(188mg,0.23mmol)。撤去冰水浴，然后保持室温搅拌2小时。LCMS监测到原料反应完毕，减压浓缩后硅胶柱纯化(PE/EA＝3/1)得2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(126-b,130mg,87％)。MS Calcd:403/405；MS Found:404/406([M+H]+).
步骤3：2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(126-b,40mg,0.1mmol)溶于于DCM(2mL)，N2置换3次，于-78度下加入DAST(16uL,0.12mmol)。加毕后自然升温到室温，搅拌1小时。LCMS监测到原料反应完毕，加水，乙酸乙酯萃取，饱和碳酸钠溶液洗涤，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得(3R)-4-(2-氯-6-(二氟甲基)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(126-c,40mg,粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:425/427；MS Found:426/428([M+H]+).
步骤4：(3R)-4-(2-氯-6-(二氟甲基)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(126-c,40mg,0.1mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(48mg,0.2mmol),四三苯基磷钯(12mg,0.01mmol)，七水合磷酸钾(98mg,0.3mmol)加入到二氧六环(1mL)和水(0.2mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后90℃反应3小时，LCMS监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25/1)得(3R)-4-(6-(二氟甲基)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(126,13mg,0.34％)。MS Calcd:507；MS Found:508([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.86(s,1H),8.38(d,J＝4.8Hz,1H),8.12(s,1H),7.79(t,J＝52Hz,1H),7.66-7.64(m,1H),7.31(s,1H),5.63(s,1H),4.88(s,1H),4.58(d,J＝9.6Hz,1H),4.16–4.05(m,1H),3.87(d,J＝11.2Hz,1H),3.78(d,J＝10.8Hz,1H),3.72–3.53(m,2H),2.98(s,3H),1.91(s,3fH),1.49–1.38(m,3H).
实施例127
2-(4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-6-基)丙基-2-醇
步骤1：2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲醛(126-b,90mg,0.22mmol)溶于叔丁醇(4mL)，加入磷酸二氢钠水溶液(215mg,1.76mmol,用3mL水溶解)，2-甲基-2-丁烯(110mg,1.54mmol)，冰水浴冷却，随后分批加入亚氯酸钠(202mg,2.2mmol)，加完后撤去冰水浴。保持室温搅拌2小时。LCMS监测到原料反应完毕，调pH到3-4,乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酸(127-a,100mg,粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:419/421；MS Found:420/422([M+H]+).
步骤2：2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酸(127-a,70mg,0.17mmol)溶于DMF(2mL)，室温下加入碳酸钾(29mg,0.20mmol)，随后加入碘甲烷(20uL,0.34mmol)，保持室温搅拌3小时。LCMS监测到原料反应完毕，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后pre-TLC纯化(PE/EA＝3/1)得2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(127-b,40mg,0.56％)。MSCalcd:433/435；MS Found:434/436([M+H]+).
步骤3：2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酸甲酯(127-b,40mg,0.1mmol)溶于无水THF(1.5mL)，冰水浴冷却，随后加入甲基溴化镁的THF溶液(3M)(123uL,0.4mmol)，撤去冰水浴，保持室温搅拌4小时。TLC(PE/EA＝5/1)监测到原料反应完毕，加入饱和氯化铵淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后得2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙基-2-醇(127-c,40mg,粗品)，粗品直接用于下一步。MS Calcd:433/435；MS Found:434/436([M+H]+).
步骤4：2-(2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙基-2-醇(127-c,40mg,0.1mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(45mg,0.2mmol),四三苯基磷钯(11mg,0.01mmol)，七水合磷酸钾(92mg,0.3mmol)加入到二氧六环(1mL)和水(0.2mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后90℃反应3小时，LCMS监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25/1)得2-(4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-6-基)丙基-2-醇(127，11mg,26％).MS Calcd:515；MS Found:516([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.80(s,1H),8.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.98(dd,J＝4.8,2.0Hz,1H),7.60(d,J＝2.0Hz,1H),7.29-7.24(m,1H),6.17(d,J＝1.6Hz,1H),5.41(dd,J＝7.2,3.2Hz,1H),4.89(d,J＝6.0Hz,1H),4.52(dd,J＝10.4,4.0Hz,1H),4.08(d,J＝3.2Hz,1H),3.87(dd,J＝11.6,3.2Hz,1H),3.81–3.72(m,1H),3.69–3.52(m,2H),3.20(s,3H),2.13-2.10(m,3H),1.68(d,J＝18.4Hz,6H),1.44-1.35(m,3H).
实施例128
N,N-二甲基-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酰胺
步骤1：2-氯-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酸(127-a,30mg,0.07mmol)溶于DMF(1mL)，室温下加入二甲胺盐酸盐(17mg,0.21mmol)，HATU(32mg,0.08mmol),DIPEA(35uL,0.21mmol)，室温搅拌过夜。LCMS监测到原料有少量剩余，加水，乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，减压浓缩后pre-TLC纯化(PE/EA＝1/1)得2-氯-N,N-二甲基-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酰胺(128-a,20mg,70％).MS Calcd:446/448；MS Found:447/450([M+H]+).
步骤2：2-氯-N,N-二甲基-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酰胺(128-a,20mg,0.05mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸频哪醇酯(23mg,0.1mmol),四三苯基磷钯(6mg,0.005mmol)，七水合磷酸钾(51mg,0.15mmol)加入到二氧六环(1mL)和水(0.2mL)的混合溶剂中，室温下N2置换3次。然后90℃反应3小时，LCMS监测反应完全。减压浓缩后pre-TLC纯化(DCM/MeOH＝25/1)得N,N-二甲基-4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酰胺(128,7mg,30％).MS Calcd:528；MS Found:529([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.83(s,1H),8.37(d,J＝4.8Hz,1H),8.07(t,J＝4.8Hz,1H),7.63(t,J＝3.2Hz,1H),7.33-7.32(m,1H),5.11(s,1H),4.83(s,1H),4.53(d,J＝8.8Hz,1H),4.08(d,J＝7.6Hz,1H),3.86(d,J＝11.2Hz,1H),3.77(d,J＝8.8Hz,1H),3.69–3.52(m,2H),3.09–2.99(m,6H),2.94(s,3H),1.91(d,J＝7.6Hz,3H),1.43(dd,J＝6.8,1.6Hz,3H).
实施例129
(R)-3-甲基-4-(6-甲基-7-(2-(甲磺酰基)丙-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉
步骤1：称取(R)-4-(2-氯-7-碘-6-甲基噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(81-c,1300mg,3.17mmol)，三正丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(1490mg 4.1mmol)和碳酸钾(877mg,6.3mmol)加入二氧六环(30mL)中，加入Pd(dppf)Cl2(232mg,0.3mmol)后用氮气置换3次，氮气保护下加热回流反应8小时。LCMS显示反应完成，将反应液倒入1M HCl(aq)中，室温下搅拌2小时。用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层后干燥，旋干，残余物用中压制备液相色谱纯化(PE/EA，约25％EA时出产物)，得(R)-1-(2-氯-6-甲基-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙-1-酮(129-a,420mg,1.3mmol,yield:40.6％)MS Calcd:325.07；MS Found:326.13([M+H]+).
步骤2：称取(R)-1-(2-氯-6-甲基-4-(3-甲基吗啉)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)乙-1-酮(129-a,420mg,1.29mmol)溶于THF(10mL)中，冰浴冷却下滴入甲基溴化镁(3M in THF,0.56mL,1.7mmol)，并于冰浴下搅拌1小时。LCMS显示反应完成，反应液倒入水中，用EA提取3次，合并EA层后干燥，旋干。残余物用MPLC纯化(PE/EA，约28％EA时出产品)，得(R)-2-(2-氯-6-甲基-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙-2-醇(129-b,365mg,1.1mmol,yiled:82.6％)。MS Calcd:341.10；MS Found:342.10([M+H]+).
步骤3：称取(R)-2-(2-氯-6-甲基-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙-2-醇(129-b,180mg,0.53mmol)溶于甲苯(6mL)中，加入劳森试剂(128mg,0.3mmol)和水(0.5mL)，加热到50度下反应3小时。LCMS显示有产物生成。反应液倒入水中，用EA提取3次，合并EA层后干燥，旋干，得(R)-2-(2-氯-6-甲基-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙-2-硫醇(129-c,188mg,0.5mmol,yield:100％)。MS Calcd:357.07；MS Found:358.10([M+H]+).
步骤4：称取(R)-2-(2-氯-6-甲基-4-(3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)丙-2-硫醇(129-c,188mg,0.53mmol)溶于乙醇(10mL)中，加入硫酸二甲酯(86mg,0.7mmol)，氢氧化钠(27mg,0.7mmol)，室温下搅拌3小时。LCMS显示原料消耗完。反应液倒入水中，用EA提取3次，合并EA层后干燥，旋干。得(R)-4-(2-氯-6-甲基-7-(2-(甲硫基)丙-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(129-d,195mg,0.5mmol,yield:100％)。MS Calcd:371.09；MS Found:372.20([M+H]+).
步骤5：称取得(R)-4-(2-氯-6-甲基-7-(2-(甲硫基)丙-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(129-d,195mg,0.52mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中，加入间氯过氧苯甲酸(226mg,1.3mmol)，室温下搅拌2小时。LCMS显示有产物生成。反应液倒入饱和Na2CO3溶液中，用DCM提取3次，合并DCM层后干燥，旋干。残余物用MPLC纯化(PE/EA,约30％EA时出产品)。得(R)-4-(2-氯-6-甲基-7-(2-(甲磺酰基)丙-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(129-e,63mg,0.2mmol,yile:29.7％)。MS Calcd:403.08；MS Found:404.20([M+H]+).
步骤6：称取(R)-4-(2-氯-6-甲基-7-(2-(甲磺酰基)丙-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉(129-e,63mg,0.16mmol)，7-氮杂吲哚-4-硼酸片呐醇酯(65mg,0.27mmol)，和磷酸钾(66mg,0.3mmol)加入微波管中，加入二氧六环-水(10:1,3mL)，氮气鼓泡下加入Pd(PPh3)4(18mg,0.016mmol)，封好微波管，微波加热到80度下反应1小时。LCMS显示反应完成。反应液倒入水中，用EA提取3次，合并EA层后干燥，旋干。残余物用MPLC纯化(MeCN/0.05％HCOOH，40％MeCN时出产品)，得(R)-3-甲基-4-(6-甲基-7-(2-(甲磺酰基)丙-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉(129,21mg,0.043mmol,yield:27.7％)。MS Calcd:485.16；MS Found:486.30([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),7.91(d,J＝5.2Hz,1H),7.60(d,J＝3.2Hz,1H),7.22(d,J＝3.2Hz,1H),4.83–4.76(m,1H),4.47(d,J＝10.8Hz,1H),4.07(d,J＝7.8Hz,1H),3.85(d,J＝11.6Hz,1H),3.76(dd,J＝11.6,3.1Hz,1H),3.63–3.55(m,2H),2.86(s,3H),2.83(s,3H),2.21(d,J＝6.4Hz,6H),1.39(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例130
(R)-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲基磺酰基)丙-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-腈
步骤1：在25ml单口瓶中依次加入(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)-7-(2-(甲基磺酰基)丙烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-碳醛(123-f，150mg，0.36mmol)，盐酸羟胺(37mg，0.6mmol)，三乙胺(108mg，1.2mmol)和溶剂乙醇(5ml)，70℃搅拌回流2hr。LCMS监控，主峰为目标化合物。反应液减压旋干，加入20ml二氯甲烷，10ml饱和食盐水分液。有机相2*10ml饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压旋干得(R，E)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)-7-(2-(甲基磺酰基)丙烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-碳醛肟(130-a，130mg，0.3mmol，83％yield)MS Calcd:432.07；MS Found:433.05([M+H]+).
步骤2：在50ml单口瓶中加入(R，E)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)-7-(2-(甲基磺酰基)丙烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-碳醛肟(130-a,150mg，0.35mmol)，二氯亚砜(206mg，1.7mmol)和溶剂二氯甲烷5ml，室温搅拌2hr。LCMS监控主峰为目标化合物。反应液加入饱和碳酸氢钠水溶液至无气泡产生，分液。3*10ml DCM萃取水相，合并有机相，无水硫酸钠干燥，减压旋干，粗品快速柱层析纯化(EA:PE＝0to 50％in 20min)得(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)-7-(2-(甲基磺酰基)丙烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-碳腈(130-b，80mg，0.2mmol，55％yield)MS Calcd:414.06；MS Found:415.05([M+H]+).
步骤3：在50ml单口瓶中加入(R)-2-氯-4-(3-甲基吗啉基)-7-(2-(甲基磺酰基)丙烷-2-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-碳腈(130-b,70mg,0.17mmol),7-氮杂吲哚-4-硼酸酯(82.4mg,0.34mmol),四三苯基磷钯(19.5mg,0.017mmol),七水磷酸钾(142mg，0.4mmol)，水(0.2ml)和1,4-二氧六环(1ml)，氮气置换3次，并在氮气保护下100℃搅拌过夜，LCMS监控，主峰为目标化合物。反应液过滤，减压旋干，粗品Prep-TLC纯化(DCM:MeOH＝25:1)得标题化合物(R)-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲基磺酰基)丙-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-腈(130,30mg，35％yield)，MS Calcd:496.14；MS Found:497.33([M+H]+).1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.86(s,1H),8.38(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(d,J＝5.2Hz,1H),7.64-7.63(m,1H),7.201-7.19(m,1H),4.84(d,J＝7.6Hz,1H),4.53(d,J＝10.8Hz,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.87(d,J＝11.6Hz,1H),3.79-3.75(m,1H),3.67-3.62(m,2H),3.01(s,3H),2.32(d,J＝1.6Hz,6H),1.45(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例131
(R)-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲基磺酰基)丙-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酰胺
步骤1：在50ml得单口瓶中依次加入(130，20mg，0.04mmol)，氢氧化钠(8.1mg，0.2mmol)，溶剂水(1ml)和甲醇(1ml)，室温搅拌2hr。LCMS监控，主峰为目标化合物。反应液减压旋干，粗品Prep-TLC纯化(DCM:MeOH＝20:1)得(R)-4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲基磺酰基)丙-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-甲酰胺(131，11mg，0.02mmol，53％yield)。MS Calcd:414.62；MS Found:515.08([M+H]).1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.37(d,J＝5.6Hz,1H),8.29(d,J＝2.0Hz,1H),8.21(d,J＝2.0Hz,1H),7.97(d,J＝5.4Hz,1H),7.63–7.59(m,1H),7.35-7.34(m,1H),4.87–4.80(m,1H),4.53-4.48(m,1H),4.09(d,J＝8.0Hz,1H),3.86(d,J＝12.0Hz,1H),3.77(dd,J＝12.0,3.2Hz,1H),3.65-3.59(m,2H),3.02(s,3H),2.19(d,J＝8.4Hz,6H),1.42(d,J＝6.8Hz,3H).
实施例132
体外酶学活性评价
通过测定IC50值来评价化合物对人的ATR激酶的抑制活性。
主要试剂及耗材：
实验方案：将终浓度为0.25ng/μL的重组人ATR/ATRIP在含有终浓度为20nM GST-cMyc-p53和4μM ATP的测定缓冲液中培育，反应通过添加ATP来引发。在室温下培育30分钟后，加入EDTA终止溶液终止反应。最后，加入含有d2标记的抗GST的单克隆抗体和铕标记的抗磷酸化p53(ser15)的抗体，在恒温培养箱(25℃)过夜培育，然后通过Envision用时间分辨荧光模式读取反应体系在665nm和615nm下的荧光信号,以均相时间分辨荧光法并根据公式HTRF＝(Em665nm/Em615nm)确定荧光(HTRF)信号。
使用数据分析软件GraphPad Prism 8，采用方程“log(inhibitor)vs.normalizedresponse--variable slope”(公式Y＝100/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope)进行数据分析，得到化合物的IC50值。公式中，“X”表示化合物的摩尔浓度；“Y”表示对酶活性的百分比抑制率；“HillSlope”是指曲线最大斜率的绝对值。
实验结果：
如表1所示：
表1.本发明化合物对ATR的半数抑制浓度IC50
结论：本发明化合物对ATR有良好的抑制活性。
实施例133
体外细胞学靶点活性评价
通过测定IC50值来评价化合物对ATR-induced p-CHK1的抑制活性
采用人结肠癌细胞株HT-29(ATCC，HTB-38)并使用完全培养基(McCoy's 5A(Modified)Medium/10％fetal bovine serum)进行培养。将处于对数生长期的HT29细胞接种20μl到384细胞培养板(Corning,#356663),12,000个细胞/孔，于37℃二氧化碳培养箱培养过夜；24hr后，加待测化合物于细胞培养板，并于37℃二氧化碳培养箱培养2hr；然后加终浓度为10μM吉西他滨(MCE,HY-B0003)于细胞培养板，于37℃二氧化碳培养箱培养4hr后，加入等体积的8％福尔马林溶液到384培养板，室温固定20min；之后用含0.1％Triton X-100的PBS清洗细胞，室温30min后，加Odyssey Blocking Buffer(LI-COR,#927-70001)50μl/孔于384细胞板，室温封闭1.5hr；然后加Chk1(2G1D5)鼠源单抗(1:1000；CST,#2360)和磷酸化Chk1(Ser345)(133D3)兔源单抗(1:1000；CST,#2348S)于384细胞板，4℃过夜孵育；加IRDye800CW Goat anti-Rabbit IgG(H+L)(1:1000；LI-COR,#926-32211)和680RDGoat anti-Mouse IgG(1:1000)二抗于384细胞板，室温1hr；洗板(PBS+0.1％Tween20)后，使用LI-COR读取反应体系在800nm和700nm下的光信号,并根据如下公式确定p-CHK1/CHK1信号水平：
Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope)))
使用GraphPad Prism 8.0分析IC50数据并通过非线性回归分析(Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope)))来拟合S形反应(可变斜率)曲线，其中“Top”是指最大响应值；“Bottom”是指基线信号值；“LogIC50”是指半抑制浓度的对数；“Y”表示对细胞活性的百分比抑制率；“X”表示化合物的摩尔浓度；“HillSlope”是指曲线最大斜率的绝对值。实验结果如表2所示：
表2.本发明化合物对ATR-induced p-CHK1的半数抑制浓度IC50
化合物 pCHK1 IC50(nM) 化合物 pCHK1 IC50(nM)
5 * 9 *
18 ** 37 **
40 * 51 *
67 * 99 *
104 ** 105 **
106 * 110 **
111 * 112 **
114 * 116 **
117 ** 118 **
119 * 120 *
121 ** 122 **
123 ** 124 **
注：**表示IC50<100nM；*表示100≤IC50＜300nM
结论：本发明化合物对ATR-induced_p-CHK1有良好的抑制活性。

Claims (5)

1.一种由式(II)表示的化合物或其立体异构体、药学可接受的盐：
其中：
R1选自下述基团：
R2选自：
R3选自：H、甲基、羟甲基、
2.化合物，其选自：
(R)-3-甲基-4-(7-((甲磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-3甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-3甲基-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-((甲磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
((4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺；
(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-3-甲基-4-(7-(吡咯烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(吡咯烷-1-基甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-l6-甲基磺酰亚胺；
(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(3R)-3-甲基-4-(7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-4-(7-(3,5-二甲基异恶唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-1-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁基-3-醇；
(R)-1-(((2-(1H-吲哚-4-基)-4-((R)-3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇；
(R)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇；
(R)-4-(7-(氮杂环丁烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1H-吡唑-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-(4-(4-(3-甲基吗啉代)-7)((甲基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-吲哚-6-基)甲醇；
(R)-4-(7-(3,5-二甲基异恶唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-N-甲基-1-(4-(3-甲基吗啉代)-7((甲基磺酰基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-胺；
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-3-甲基-4-(7-((甲基磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-4-(7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-((3,3-二氟吡咯-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1,4-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(3R)-4-(2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)-7-(1-(甲基磺酰基)乙基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
((R)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇；
((S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-2-基)甲醇；
(R)-1-((4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁-3-醇；
(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇；
(S)-1-((4-((R)-3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)吡咯烷-3-醇；
(R)-3-甲基-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-醇；
(R)-3-甲基-1-((4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)氮杂环丁烷-3-醇；
(R)-1-((2-(1H-吲哚-4-基)-4-(3-甲基吗啉代)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基)-3-甲基氮杂环丁烷-3-醇；
(R)-4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(2-(1H-吲哚-4-基)-7-(((S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基)甲基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(环丙砜基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(4-氯-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(4-(甲氧基甲基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-((3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)-7-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
((R)-1-((7-((R)-3-甲基吗啉)-5-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-3-基)甲醇；
(R)-4-(7-((3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(3R)-4-(7-((3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-N-甲基-2-(4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-yl)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)苯甲酰胺；
(R)-3-甲基-4-(6-甲基-7-(1-甲-1H-吡唑5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-2-(3,5-二甲基-4-(4-(3-甲基吗啉代)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇；
(R)-4-(7-(1,5-二甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(6-氟-1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1-(二氟甲基)-3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)-7-(1H-吡唑-5-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(4-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-3-甲基-4-(7-(吡咯烷-1-基甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-3-甲基-4-(7-(3-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3，2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-4H-1,2,4-三唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吲哚-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(((环丙基磺酰基)甲基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-N-甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)环丙基磺酰胺；
(R)-N-甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺；
(R)-N-异丙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺；
(R)-4-(7-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
(R)-4-(7-(4-氯-1-异丙基-1H-吡唑-5-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)-3-甲基吗啉；
1-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)吡咯烷-3-醇；
(R)-N-氘代甲基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺；
(R)-N-乙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲基磺酰胺；
2-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-甲磺酰基-乙腈；
(R)-2-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-1,1-二氧代异噻唑烷；
2-(4-((R)-3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)-2-(甲磺酰基)丙腈；
(R)-N-环丙基-N-(4-(3-甲基吗啉基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-7-基)甲烷磺酰胺；
(R)-3-甲基-4-(7-(1-甲磺酰基)环丙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇；
(R)-(7-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(3-甲基吗啉)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基胺；
(4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇；
(R)-3-甲基-4-(7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-3-甲基-4-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉；
(R)-(4-(3-甲基吗啉)-7-(2-(甲磺酰基)丙基-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩[3,2-d]嘧啶-6-基)甲醇；
2-(4-((R)-3-甲基吗啉)-7-(1-(甲磺酰基)乙基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-6-基)丙基-2-醇；
(R)-3-甲基-4-(6-甲基-7-(2-(甲磺酰基)丙-2-基)-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-4-基)噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基)吗啉。
3.一种组合物，其特征在于，其包括权利要求1或2所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐，和药用辅剂，所述药用辅剂选自药学可接受的载体、稀释剂、赋形剂或其组合。
4.权利要求1或2所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐，或权利要求3所述的组合物在制备用于治疗和/或预防人结肠癌的药物中的用途。
5.式(II)所示化合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)式II-1所示化合物与R2-B(pin)或R2-B(OH)2发生Suzuki反应，得式II-2所示化合物；2)式II-2所示化合物与R1-B(pin)或R1-B(OH)2发生Suzuki反应，得式II所示化合物。
R1、R2、R3，各自定义如权利要求1中所述定义。
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