CN115120731A - 一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用 - Google Patents
一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115120731A CN115120731A CN202210822404.3A CN202210822404A CN115120731A CN 115120731 A CN115120731 A CN 115120731A CN 202210822404 A CN202210822404 A CN 202210822404A CN 115120731 A CN115120731 A CN 115120731A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- proteasome
- cells
- tnbc
- inhibitor
- azd6244
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 47
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 title claims abstract description 28
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 title claims abstract description 28
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 22
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 22
- 230000008685 targeting Effects 0.000 title claims description 7
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 77
- 229940124647 MEK inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 50
- 101001104570 Homo sapiens Proteasome assembly chaperone 2 Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 102100041008 Proteasome assembly chaperone 2 Human genes 0.000 claims abstract description 38
- 229940079156 Proteasome inhibitor Drugs 0.000 claims abstract description 38
- 239000003207 proteasome inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 38
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 22
- TZYWCYJVHRLUCT-VABKMULXSA-N N-benzyloxycarbonyl-L-leucyl-L-leucyl-L-leucinal Chemical compound CC(C)C[C@@H](C=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 TZYWCYJVHRLUCT-VABKMULXSA-N 0.000 claims description 69
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 19
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 9
- 229960004066 trametinib Drugs 0.000 claims description 9
- LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N trametinib Chemical compound CC(=O)NC1=CC=CC(N2C(N(C3CC3)C(=O)C3=C(NC=4C(=CC(I)=CC=4)F)N(C)C(=O)C(C)=C32)=O)=C1 LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229960001467 bortezomib Drugs 0.000 claims description 8
- GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N bortezomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)B(O)O)NC(=O)C=1N=CC=NC=1)C1=CC=CC=C1 GXJABQQUPOEUTA-RDJZCZTQSA-N 0.000 claims description 8
- 208000003721 Triple Negative Breast Neoplasms Diseases 0.000 claims description 4
- 208000022679 triple-negative breast carcinoma Diseases 0.000 claims description 4
- 229960002438 carfilzomib Drugs 0.000 claims description 3
- BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N carfilzomib Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)[C@]1(C)OC1)NC(=O)CN1CCOCC1)CC1=CC=CC=C1 BLMPQMFVWMYDKT-NZTKNTHTSA-N 0.000 claims description 3
- 108010021331 carfilzomib Proteins 0.000 claims description 3
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 44
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 38
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 38
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 32
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 28
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 abstract description 24
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 abstract description 13
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract description 11
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 11
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 7
- CYOHGALHFOKKQC-UHFFFAOYSA-N selumetinib Chemical compound OCCONC(=O)C=1C=C2N(C)C=NC2=C(F)C=1NC1=CC=C(Br)C=C1Cl CYOHGALHFOKKQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 77
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 19
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 10
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 10
- 108091027544 Subgenomic mRNA Proteins 0.000 description 9
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 9
- 108091033409 CRISPR Proteins 0.000 description 8
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 5
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 5
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 5
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 5
- 230000034512 ubiquitination Effects 0.000 description 5
- 238000010798 ubiquitination Methods 0.000 description 5
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 5
- 108010005705 Ubiquitinated Proteins Proteins 0.000 description 4
- 238000007877 drug screening Methods 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000010354 CRISPR gene editing Methods 0.000 description 2
- 102100028500 DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC10 Human genes 0.000 description 2
- 102100031480 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1 Human genes 0.000 description 2
- 101710146526 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1 Proteins 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- 101000723883 Homo sapiens DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC10 Proteins 0.000 description 2
- 101000687968 Homo sapiens Membrane-associated tyrosine- and threonine-specific cdc2-inhibitory kinase Proteins 0.000 description 2
- 101000935151 Homo sapiens Uncharacterized protein C1orf131 Proteins 0.000 description 2
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 2
- 102100024262 Membrane-associated tyrosine- and threonine-specific cdc2-inhibitory kinase Human genes 0.000 description 2
- 102100025340 Uncharacterized protein C1orf131 Human genes 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 2
- 230000004904 long-term response Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 230000007111 proteostasis Effects 0.000 description 2
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 2
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000708381 Homo sapiens U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 230000005723 MEK inhibition Effects 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 206010027480 Metastatic malignant melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 102000019244 Proteasome assembly chaperone 2 Human genes 0.000 description 1
- 108050006554 Proteasome assembly chaperone 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100031474 U11/U12 small nuclear ribonucleoprotein 25 kDa protein Human genes 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229950003054 binimetinib Drugs 0.000 description 1
- ACWZRVQXLIRSDF-UHFFFAOYSA-N binimetinib Chemical compound OCCONC(=O)C=1C=C2N(C)C=NC2=C(F)C=1NC1=CC=C(Br)C=C1F ACWZRVQXLIRSDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003766 bioinformatics method Methods 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 230000005773 cancer-related death Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000003021 clonogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002271 cobimetinib Drugs 0.000 description 1
- RESIMIUSNACMNW-BXRWSSRYSA-N cobimetinib fumarate Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.C1C(O)([C@H]2NCCCC2)CN1C(=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1NC1=CC=C(I)C=C1F.C1C(O)([C@H]2NCCCC2)CN1C(=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1NC1=CC=C(I)C=C1F RESIMIUSNACMNW-BXRWSSRYSA-N 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 238000011393 cytotoxic chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 230000017188 evasion or tolerance of host immune response Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 231100000226 haematotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012165 high-throughput sequencing Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 229960003648 ixazomib Drugs 0.000 description 1
- MXAYKZJJDUDWDS-LBPRGKRZSA-N ixazomib Chemical compound CC(C)C[C@@H](B(O)O)NC(=O)CNC(=O)C1=CC(Cl)=CC=C1Cl MXAYKZJJDUDWDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 208000021039 metastatic melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000011227 neoadjuvant chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000004905 short-term response Effects 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/4164—1,3-Diazoles
- A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/69—Boron compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/06—Tripeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，属于生物医药和分子生物学技术领域；本发明中靶向蛋白酶体为抑制蛋白酶体组装伴侣2(PSMG2)靶点或蛋白酶体抑制剂；PSMG2作为MEK抑制剂的协同治疗靶点，其沉默联合MEK抑制剂能够抑制TNBC细胞的增殖；蛋白酶体抑制剂联合MEK抑制剂能够在体内外协同抑制TNBC细胞增殖，且其体内肿瘤抑制率能够达到66.25％，抗肿瘤疗效显著优于任一单药组，为TNBC的临床治疗提供了新的协同治疗靶点以及联合治疗方案。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药和分子生物学技术领域，具体涉及一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用。
背景技术
据2020年全球癌症统计数据显示女性乳腺癌新发病例数高达226万例，力压肺癌，成为全球第一大癌，同时也是女性癌症相关死亡的主要原因。在乳腺癌分子分型中，三阴性乳腺癌(TNBC,ER-/PR-/HER2-)约占所有乳腺癌的15-20％，具有侵袭性强、复发转移风险高、对可用疗法的反应持续时间短以及总生存率低等特征。同时TNBC缺乏公认有效的治疗靶点，难以从传统靶向治疗中获益，是目前预后最差的乳腺癌亚型，也是乳腺癌临床治疗中最棘手的难题之一。
目前，传统化疗、放疗以及手术切除是三阴性乳腺癌的标准治疗手段。虽然一些早期患者受益于这些常规的治疗，但其总体临床预后仍然很差。全身性的细胞毒性化疗最初抑制了肿瘤体积，但大多数患者仍会复发、转移并最终死于这种疾病。基于铂类药物的新辅助化疗将TNBC患者的病理完全缓解率提高了10-15％，但却伴随着较高的血液学毒性和治疗中断率。因此，迫切的需要为TNBC患者开发更有效的治疗方案。
近年来，对于TNBC新治疗靶点的筛选以及开发有效的联合治疗方案依然是乳腺癌领域的研究热点。MAPK通路作为人类癌症中最常见的信号通路之一，其异常激活会直接导致癌细胞增殖失控，进而促进肿瘤发生。在未经治疗的TNBC中，编码MAPK通路成分的基因改变虽然不像其他类型的癌症那样频繁，但其上游表皮生长因子受体(EGFR)约在89％基底样TNBC中的表达可导致MAPK信号通路的激活。同时，MAPK信号通路的异常激活也被证明与TNBC的不良预后高度相关，如促进化疗耐药性、免疫逃避，降低总生存期和提高复发风险等。因此，靶向MAPK信号通路治疗TNBC是有前景的策略之一。
在这个线性激酶信号级联中，针对MEK1/2的小分子药物是众多科学家和制药公司研究和开发的热点。目前，已有四种靶向MEK1/2的小分子抑制剂(曲美替尼(trametinib)、司美替尼(selumetinib)、考比替尼(cobimetinib)和比美替尼(binimetinib))被美国食品和药物管理局(FDA)批准用于治疗转移性黑色素瘤，其抗肿瘤疗效同时也在结直肠癌、非小细胞肺癌和甲状腺癌等癌症中被进一步证实。然而，多项临床试验结果显示，这些MEK抑制剂无论是单药还是与化疗联合治疗TNBC均显示出微弱的抗肿瘤效果。因此，寻找MEK抑制剂的协同治疗新靶点和开发有效的联合治疗方案对改善TNBC患者的长期疗效是非常迫切的。
发明内容
本发明针对MEK抑制剂单药治疗TNBC患者疗效不佳的问题提供一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用。
本发明通过研究发现，在TNBC细胞中，PSMG2可作为MEK抑制剂协同治疗的靶点。PSMG2沉默通过抑制蛋白酶体增强TNBC细胞对MEK抑制剂的敏感性，靶向蛋白酶体联合MEK抑制剂能在体内外协同抑制TNBC细胞增殖，基于上述研究成果，从而完成本发明。
本发明采用的技术方案是：
一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，药物包括靶向蛋白酶体和MEK抑制剂，靶向蛋白酶体也称为抑制蛋白酶体。
进一步的，所述靶向蛋白酶体为抑制蛋白酶体组装伴侣2(Proteasome AssemblyChaperone2，PSMG2)靶点或蛋白酶体抑制剂。
进一步的，所述靶向蛋白酶体的蛋白酶体抑制剂为MG132、硼替佐米(Bortezomib)、卡非佐米(Carfilzomib)、伊沙佐米(Ixazomib)中的一种。
进一步的，所述MEK抑制剂为司美替尼(AZD6244)、曲美替尼(Trametinib)、比美替尼(Binimetinib)、考比替尼(Cobimetinib)中的一种。
进一步的，所述乳腺癌肿瘤为三阴性乳腺癌肿瘤。
进一步的，所述药物时包括靶向蛋白酶体、MEK抑制剂及药物上可接受的辅料。
本发明的有益效果是：
本发明提供一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，将靶向蛋白酶体用于制备治疗乳腺癌药物，属于生物医药和分子生物学技术领域。靶向蛋白酶体为蛋白酶体组装伴侣2(PSMG2)沉默或蛋白酶体抑制剂；PSMG2作为MEK抑制剂的协同治疗靶点，其沉默联合MEK抑制剂能够抑制TNBC细胞的增殖；蛋白酶体抑制剂联合MEK抑制剂能够在体内外协同抑制TNBC细胞增殖，且其体内肿瘤抑制率能够达到66.25％，抗肿瘤疗效显著优于任一单药组，为TNBC的临床治疗提供了新的协同治疗靶点以及联合治疗方案。
附图说明
图1为本发明实施例中TNBC细胞对AZD6244的响应效果图。A图为BT549，MB468，MB231细胞对AZD6244的短期响应效果图，B图为BT549，MB468，MB231细胞对AZD6244的长期响应效果图，C图为AZD6244对MAPK通路的抑制效果图。
图2抑制PSMG2联合MEK抑制剂AZD6244同时抑制BT549和MB468细胞增殖的效果图。
图3为本发明实施例中抑制PSMG2与蛋白酶体抑制剂MG132抑制蛋白酶体，促进泛素化蛋白积累的效果图，A为BT549细胞结果，B为MB468细胞结果。
图4为本发明实施例中蛋白酶体抑制剂联合MEK抑制剂同时抑制TNBC细胞增殖的效果图。A图为蛋白酶体抑制剂MG132联合MEK抑制剂AZD6244同时抑制四株TNBC细胞增殖的效果图。B图为蛋白酶体抑制剂MG132联合MEK抑制剂AZD6244同时抑制两株MEK抑制剂敏感的TNBC细胞增殖的效果图。C图为蛋白酶体抑制剂Bortezomib联合MEK抑制剂Trametinib同时抑制BT549和MB468细胞增殖的效果图。
图5为本实施例中蛋白酶体抑制剂MG132联合不同浓度MEK抑制剂抑制TNBC细胞的增殖，A为BT549细胞结果，B为MB468细胞结果。
图6为本发明实施例中蛋白酶体抑制剂MG132联合不同浓度MEK抑制剂抑制TNBC细胞增殖的协同效应统计图。
图7为本发明实施例中以cPPT为对照，过表达PSMG2部分缓解AZD6244+MG132对细胞的生长抑制作用效果图，A为BT549细胞结果，B为MB468细胞结果。
图8为本发明实施例中蛋白酶体抑制剂协同MEK抑制剂抑制小鼠TNBC细胞4T1的增殖效果图。
图9为本发明实施例中蛋白酶体抑制剂协同MEK抑制剂抑制小鼠TNBC细胞4T1的增殖的协同效应统计图。
图10为本发明实施例中蛋白酶体抑制剂MG132联合MEK抑制剂AZD6244在体内抑制TNBC肿瘤生长的效果图，A为肿瘤生长曲线图，B为瘤重曲线图。
图11为本发明实施例中蛋白酶体抑制剂联合MEK抑制剂对TNBC肿瘤生长的抑制效应统计图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。有必要指出，以下实施例只用于对本发明作进一步说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员根据上述发明内容，对本发明做出一些非本质的改进和调整进行具体实施，仍属于发明保护的范围。
本发明通过在MEK抑制剂抗性的BT549细胞中进行全基因组CRISPR/Cas9文库筛选鉴定MEK抑制剂的协同治疗靶点PSMG2，PSMG2沉默与蛋白酶体抑制剂MG132均能抑制导致泛素化蛋白积累，同时MG132协同MEK抑制剂同样能够抑制TNBC细胞的增殖，外源表达PSMG2则可缓解该组合对TNBC细胞的抑制作用，说明PSMG2是通过蛋白酶体调控TNBC对MEK抑制剂的响应。进一步的功能实验证明无论是抑制PSMG2或使用蛋白酶体抑制剂靶向蛋白酶体(即抑制蛋白酶体)均能联合MEK抑制剂在体内外抑制TNBC细胞的增殖，进而提供一种靶向蛋白酶体在治疗乳腺癌药物中的应用。制备药物过程中，药物中靶向蛋白酶体和MEK抑制剂在药物中的剂量比，及治疗时具体使用的剂量可以根据TNBC细胞浓度进行调整。
下面结合具体的体内外实验进行进一步说明。
实施例1
本实施例中，筛选MEK抑制剂协同治疗靶点的模型细胞系BT549和MEK抑制剂的药物筛选浓度1μM的确定。
首先通过短期细胞活力实验评估三株TNBC细胞系(BT549，MB468和MB231细胞)对AZD6244的药物敏感性。
分别使用梯度浓度(0、0.001、0.01、0.1、1、10μM)的AZD6244处理BT549，MB468和MB231细胞，72小时后，用MTS试剂检测其药物对细胞增殖的影响。如图1A结果显示，1μMAZD6244对MB231细胞增殖的抑制率大约为40-50％，10μM AZD6244的抑制率约为80％。然而BT549和MB468细胞即使使用高达10μM AZD6244处理，细胞增殖也并未受到明显的影响。该结果表明MB231对AZD6244短期处理较为敏感，而BT549和MB468细胞则对10μM以内的AZD6244短期处理几乎没有反应，因此BT549和MB468可以作为筛选MEK抑制剂协同治疗靶点的模型细胞系。
随后，通过克隆形成实验评估三株TNBC细胞对AZD6244的长期反应。
分别使用不同浓度AZD6244(0、0.01、0.1、1、10μM)处理三株TNBC细胞，按两天一次频率换液加药，10-14天后，检测不同药物浓度对细胞增殖的影响。如图1B所示，低至0.1μMAZD6244长期处理就能显著抑制MB231细胞的增殖(约60％细胞增殖被抑制)；1μMAZD6244对MB468细胞增殖的抑制效果甚微(约5％细胞增殖被抑制)；而BT549细胞则可长期耐受1μMAZD6244。结合图1A结果表明，MB231细胞无论是短期或长期内均对1μMAZD6244敏感，因此MB231细胞不能作为筛选MEK抑制剂协同治疗靶点的模型细胞系。MB468短期内对1μMAZD6244无明显的反应，但其长期内对1μM AZD6244有轻微的响应，约5％细胞增殖被抑制，因此MB468细胞可作为后续验证的模型细胞系。而BT549细胞则可在短期和长期内耐受1μMAZD6244，因此BT549细胞可作为筛选MEK抑制剂协同治疗靶点的模型细胞系。
最后，通过western blot检测不同浓度AZD6244对MAPK通路的抑制效果以确定MEK抑制剂的药物筛选浓度。
分别使用不同浓度AZD6244(0、0.1、1、2、3、4、5μM)处理BT549和MB468细胞，2h后western blot(蛋白质印迹)检测MAPK信号级联中相关激酶的磷酸化变化。结果如图1C所示，在BT549和MB468细胞中，MAPK信号级联中的关键激酶磷酸化ERK(p-ERK)均随着AZD6244的加入而减少，且在AZD6244浓度低至1μM时，p-ERK被下调至极低水平，这一结果表明在两株TNBC细胞中，MAPK信号级联能够被1μM AZD6244有效且充分的阻断，因此1μM AZD6244可作为后续药物筛选浓度。
实施例2
本实施例中，利用CRISPR/Cas9技术在MEK抑制剂抗性的BT549细胞中进行全基因组范围内筛选MEK抑制剂的协同治疗靶点PSMG2，即抑制PSMG2联合MEK抑制剂能够抑制TNBC细胞的增殖。
利用慢病毒系统对Cas9和sgRNA文库质粒进行包装，得到Cas9和sgRNA文库的慢病毒颗粒。使用Cas9慢病毒颗粒感染BT549细胞，经过5μg/ml blasticidin处理7天后，得到稳定表达Cas9蛋白的BT549细胞，即BT549-Cas9细胞。随后，将BT549-Cas9细胞扩增培养至指定数目，并以低至0.3的病毒感染复数(MOI＝0.3)对其进行sgRNA文库的慢病毒感染，以此确保每个BT549-Cas9细胞有且仅感染一个sgRNA，即每个细胞仅敲除一个基因。同时使用0.5μg/ml puromycin对感染后的细胞进行筛选，以去除没有被sgRNA成功感染的细胞。随后，将经过puromycin筛选后存活的细胞扩大培养后均分为三组，一组直接收集细胞并标记为DMSO-Day0，另外两组分别用DMSO和1μM AZD6244处理7天，并标记为DMSO-Day7和AZD-Day7。通过DNA提取、sgRNA扩增以及高通量测序等一系列操作，最终获得DMSO-Day0、DMSO-Day7、AZD-Day7三个测序数据集。理论上，在GeCKO敲除模型中，驱动MEK抑制剂耐药的基因被sgRNA靶向敲除后，会使细胞对MEK抑制剂重新敏感，导致细胞在药物筛选过程中被抑制。因此，本研究主要关注在MEK抑制剂处理组中下调的基因。借助生物信息学分析比较DMSO-Day7和AZD-Day7的sgRNA数据，筛选出在AZD6244药物处理组中下调的1649个基因；接着通过与BT549细胞系的转录组数据(GEO数据库中GSE112365数据集)进行比对，筛选出在模型细胞中高效表达的684个基因；然后结合TNBC患者临床样本的群体转录组数据(NCBI网站中的PRJNA553096数据集和TCGA数据库中的TNBC数据集)以及单细胞转录组数据(GEO数据库中GSE11838和GSE75688数据集)分析，筛选出在肿瘤组织(或细胞)中反复上调的57个基因；最后通过比较DMSO-Day0和DMSO-Day7的sgRNA数据，剔除5个管家基因，最终得到52个可能作为MEK抑制剂治疗靶点的候选基因。
随后，根据基因的差异显著性(P)以及差异倍数(log2(Fold Chang))挑选在52个候选基因中排名靠前的5个基因进行后续验证，依次为C1orf131、POLR3K、PSMG2、PKMYT1、SNRNP25。针对每个基因，我们均设计shRNA进行功能缺失，并通过长期的克隆形成实验中评估这些基因单独沉默或其沉默联合MEK抑制剂对两株TNBC细胞增殖的影响。首先使用shRNA在BT549和MB468细胞中沉默相应的基因后，每隔一天分别使用0μM或1μMAZD6244处理对照组(pLKO.1)和功能缺失组(shRNA)的细胞。
结果如图2结果显示，单独沉默C1orf131和PKMYT1均会抑制BT549和MB468细胞的增殖，且其抑制效果根据细胞的不同而有所差异，表明这些基因可能间接参与细胞生长、凋亡、分化等一系列生理活动，并且在不同细胞中，这些基因间接调控的生理活动的所占比重不同。然而，POLR3K和SNRNP25无论是单独沉默或其沉默联合1μM AZD6244对BT549和MB468细胞的增殖均无明显影响。因此，可以直接排除上述4个候选基因作为MEK抑制剂协同治疗靶点。PSMG2单独沉默导致BT549细胞增殖受到一定程度的抑制，其原因可能是PSMG2作为蛋白酶体伴侣蛋白2可促进20s蛋白酶体组装，并在维持细胞内蛋白稳态中起着重要作用，因此沉默PSMG2可能会引起细胞内蛋白降解的紊乱，而BT549细胞对细胞内蛋白稳态较为敏感，导致细胞增殖被影响。同时，PSMG2单独沉默对MB468细胞的增殖无明显影响。然而，PSMG2沉默联合1μM AZD6244能够同时抑制两株TNBC细胞的增殖，表明PSMG2可能是MEK抑制剂的协同治疗靶点。
实施例3
本实施例中，抑制PSMG2可促进泛素化蛋白积累。
分别利用shRNA和蛋白酶体抑制剂MG132处理两株TNBC细胞，然后通过westernblot检测细胞中的整体泛素化蛋白水平的变化。
如图3结果显示，使用shRNA抑制PSMG2促进了BT549和MB468细胞中的整体泛素化水平的积累。MG132是一种蛋白酶体抑制剂，在泛素-蛋白酶体系统中，MG132通过抑制蛋白酶体，进而导致泛素化蛋白在蛋白酶体中的降解被抑制而积累。使用MG132处理两株TNBC细胞24h后，通过western blot检测细胞中的整体泛素化蛋白水平的变化。结果显示，MG132药物处理组中的整体泛素化水平显著增加，这与PSMG2抑制的结果一致，表明抑制PSMG2可能会抑制蛋白酶体，促进泛素化蛋白积累。
实施例4
本实施例中，蛋白酶体抑制剂联合MEK抑制剂能够抑制TNBC细胞的增殖。
通过体外克隆实验检测MEK抑制剂AZD6244，蛋白酶体抑制剂MG132及其组合对TNBC细胞增殖的影响，结果如图4所示，其中图A为对四株TNBC细胞增殖的影响，B为对其余两株MEK抑制剂敏感的TNBC细胞增殖的影响。图中“-”表示不含该抑制剂，“+”表示含该抑制剂。
图4A可以看出，分别使用1μM AZD6244、0.4μM MG132及其组合按两天一次的频率处理四株TNBC细胞，10-14天后，使用0.5％的结晶紫进行染色。结果显示单独使用1μMAZD6244对TNBC细胞的增殖均无明显的影响；单独使用0.4μM MG132能部分抑制TNBC细胞的增殖；1μM AZD6244与0.4μM MG132联合使用能够有效的抑制四株TNBC细胞的增殖，且抑制效果显著优于任一单药组，表明MG132联合AZD6244能够显著抑制TNBC细胞的增殖。
图4B可以看出，分别使用0.05μM AZD6244、0.2μM MG132及其组合按两天一次的频率处理四株TNBC细胞，10-14天后，使用0.5％的结晶紫进行染色。结果显示单独使用0.05μMAZD6244能部分抑制AZD6244敏感的TNBC细胞的增殖；单独使用0.2μM MG132同样能部分抑制其增殖；但0.05μM AZD6244与0.2μM MG132联合使用能够有效的抑制两株AZD6244敏感TNBC细胞的增殖，且抑制效果显著优于任一单药组，表明MG132联合AZD6244能够显著抑制MEK抑制剂敏感TNBC细胞的增殖。
进一步通过体外克隆实验检测使用FDA批准的MEK抑制剂trametinib，蛋白酶体抑制剂bortezomib及其组合对TNBC细胞增殖的影响。按两天一次的频率分别使用20mMtrametinib、2nM bortezomib及其组合按两天一次的频率处理两株TNBC细胞，10-14天后，使用0.5％的结晶紫进行染色，图中“-”表示不含该抑制剂，“+”表示含该抑制剂。
图4C可以看出，与AZD6244联合MG132的结果一致，20mM trametinib与2nMbortezomib联合使用能够有效的抑制BT549和MB468细胞的增殖，且抑制效果显著优于任一单药组，表明trametinib联合bortezomib能够显著抑制TNBC细胞的增殖，即MEK抑制剂联合蛋白酶体抑制剂能够抑制TNBC细胞的增殖。
实施例5
本实施例中，蛋白酶体抑制剂与MEK抑制剂的协同抑制效应。
为了进一步评估蛋白酶体抑制剂与MEK抑制对细胞的协同抑制效应，分别用不同浓度的AZD6244、0.4μM MG132及其组合处理两株TNBC细胞，结果如图5A和图5B所示。
从图5A和图5B中可以看出，0.5μM、1μM、3μM AZD6244单药能够部分抑制TNBC细胞增殖，抑制效果呈AZD6244的剂量依赖性；0.4μM MG132同样能部分抑制TNBC细胞的增殖；0.5μM、1μM、3μM AZD6244分别联合0.4μM MG132均能抑制两株TNBC细胞的增殖，呈AZD6244的剂量依赖性，且抑制效果显著优于任一单药组，表明MG132联合MEK抑制剂可以抑制TNBC细胞的增殖，不同剂量的药物浓度其抑制效果不同。
采用CalcuSyn V2.0软件中的Chou和Taladay方法计算的上述不同浓度的AZD6244与MG132组合(图5A和图5B)的相对协同作用，以评估TNBC细胞中MG132与MEK抑制剂的协同效应，结果如表1所示。
从表中可以看出，在BT549细胞中，0.5μM、1μM、3μM AZD6244与0.4μM MG132的联合指数(CI)分别为0.011，0.007，0.005，均小于0.1，表明0.5μM、1μM、3μM AZD6244分别联合0.4μM MG132对BT549细胞的增殖具有极强的协同抑制效应；针对MB468细胞，0.5μMAZD6244、1μM AZD6244与0.4μM MG132的CI值分别为0.113，0.137，均位于0.1-0.3区间，表明0.5μM、1μM AZD6244分别联合0.4μM MG132对MB468细胞的增殖具有强协同抑制效应；3μMAZD6244与0.4μM MG132的CI值为0.323，位于0.3-0.7区间，表明3μMAZD6244联合0.4μMMG132对MB468细胞的增殖具有协同抑制效应。这些结果表明，在一定的药物浓度范围内，MG132能够协同MEK抑制剂显著抑制TNBC细胞的增殖。
表1.MG132与MEK抑制剂在TNBC细胞中的抑制效应(Fa)和联合指数(CI)的完整值
注释：CI<0.1，非常强的协同效应；0.1<CI<0.3，强协同效应；0.3<CI<0.7，协同效应；0.7<CI<0.85，适度的协同效应；0.85<CI<0.90，轻微的协同效应；0.90<CI<1.10，叠加效应；CI>1，拮抗效应。
根据表1中的CI值以log10(CI)进行表示，采用GraphPad进行作图，结果如图6所示。
实施例6
本实施例中，过表达PSMG2能够缓解蛋白酶体抑制剂与MEK抑制剂的协同抑制作用。
采用克隆实验检测PSMG2外源表达的TNBC细胞对AZD6244、MG132及其组合的响应情况，如图7所示。图中“-”表示不含该抑制剂，“+”表示含该抑制剂。
分别按两天一次的频率用1μM AZD6244和0.4μM MG132对cPPT和外源表达PSMG2的BT549或MB468细胞进行单独或联合处理10-14天，然后用0.5％的结晶紫对其进行染色。结果显示单药AZD6244对cPPT组和PSMG2组的细胞增殖无明显影响。单药MG132能够部分抑制细胞的增殖，但对cPPT组的抑制作用强于PSMG2组，表明外源表达PSMG2能够缓解MG132对细胞的抑制作用。AZD6244联合MG132对cPPT组和PSMG2表达的细胞增殖的抑制效果优于任一单药，这与之前的结果一致，并且该组合对cPPT组细胞的抑制作用显著强于PSMG2组。这些结果表明外源表达PSMG2能够部分缓解AZD6244与MG132对TNBC细胞的协同抑制作用。
实施例7
本实施例中，蛋白酶体抑制剂与MEK抑制剂协同抑制小鼠TNBC细胞系4T1的增殖。
分别用不同浓度的AZD6244、0.6μM MG132及其组合按两天一次的频率处理4T1细胞，10-14天后，用0.5％的结晶紫染色，结果如图8所示。
结果显示，0.5μM、1μM、3μM AZD6244单药不影响4T1细胞的增殖；0.6μM MG132能部分抑制4T1细胞的增殖，0.5μM、1μM、3μM AZD6244分别与0.6μM MG132组合都能抑制4T1细胞的增殖，呈AZD6244的剂量依赖性，且抑制效果显著优于任一单药组，表明MG132联合MEK抑制剂可以抑制小鼠4T1细胞的增殖，不同剂量的药物浓度其抑制效果不同。
用CalcuSyn V2.0软件中的Chou和Taladay方法计算的上述不同浓度的AZD6244与MG132组合(图7)的相对协同作用，以评估TNBC细胞中MG132与MEK抑制剂的协同效应，结果如表2所示。
表2.MG132与MEK抑制剂在4T1细胞中的抑制效应(Fa)和联合指数(CI)的完整值
注释：CI<0.1，非常强的协同效应；0.1<CI<0.3，强协同效应；0.3<CI<0.7，协同效应；0.7<CI<0.85，适度的协同效应；0.85<CI<0.90，轻微的协同效应；0.90<CI<1.10，叠加效应；CI>1，拮抗效应。
从表2可以看出，在4T1细胞中，0.5μM与0.6μM MG132的CI值为0.333，位于0.3-0.7区间，表明0.5μM AZD6244与0.6μM MG132对4T1细胞的抑制具有协同效应；1μM与0.6μMMG132的CI值为0.108，位于0.1-0.3区间，表明1μM AZD6244与0.6μM MG132对4T1细胞的抑制具有强协同效应；3μM与0.6μM MG132的CI值为0.034，小于0.1，表明1μMAZD6244与0.6μMMG132对4T1细胞的抑制具有非常强的协同效应，表明MG132与AZD6244同样能够协同抑制4T1细胞的增殖。
根据表2中的CI值以log10(CI)进行表示，采用GraphPad进行作图，如图9所示。
实施例8
本实施例中，蛋白酶体抑制剂与MEK抑制剂协同抑制TNBC肿瘤的生长。
为了进一步研究蛋白酶体抑制剂与MEK抑制剂的体内抗肿瘤效果，通过使用TNBC小鼠模型中评估MG132，AZD6244及其组合对肿瘤生长的影响。首先，将小鼠TNBC 4T1细胞接种于BALB/c小鼠后背皮下，待肿瘤生长至约100mm3时(第7天，图10A黑色箭头)，将小鼠随机成4组，并通过腹腔注射，按两天一次的给药时间分别给予PBS、10mg/kg AZD6244、2mg/kgMG132、10mg/kg AZD6244+2mg/kg MG132治疗，结果如图9所示。在治疗过程中，每两天记录一次肿瘤体积，并绘制肿瘤生长曲线(图10A)。治疗结束后(第24天)，测量并记录肿瘤的体积，随后处死小鼠并解剖、分离肿瘤组织，对其进行称重，绘制瘤重曲线(图10B)。肿瘤抑制率如表3所示。
从表3中可以看出无论是AZD6244或MG132单药治疗组均显示出轻微的抗肿瘤疗效((MEK抑制剂单药组的抑制率：22.95％；蛋白酶体抑制剂MG132单药组的抑制率：14.14％)，而AZD6244+MG132联合治疗组的抗肿瘤疗效显著优于任一单药组(抑制率约66.25％)，表明MEK抑制剂联合蛋白酶体抑制剂能够在体内抑制TNBC肿瘤的生长。
表3.MG132与AZD6244的体内抗肿瘤疗效
根据表3中的抑制率采用GraphPad进行作图，如图11所示。
本发明中靶向蛋白酶体为抑制蛋白酶体组装伴侣2(PSMG2)靶点和蛋白酶体抑制剂；PSMG2作为MEK抑制剂的协同治疗靶点，其沉默联合MEK抑制剂能够抑制TNBC细胞的增殖；蛋白酶体抑制剂联合MEK抑制剂能够在体内外协同抑制TNBC细胞增殖，且其体内肿瘤抑制率能够达到66.25％，抗肿瘤疗效显著优于任一单药组(MEK抑制剂AZD6244单药组的抑制率：22.95％；蛋白酶体抑制剂MG132单药组的抑制率：14.14％)，为TNBC的临床治疗提供了新的协同治疗靶点以及联合治疗方案。
Claims (6)
1.一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，其特征在于，药物包括靶向蛋白酶体和MEK抑制剂。
2.根据权利要求1所述的一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，其特征在于，所述靶向蛋白酶体为抑制PSMG2靶点或蛋白酶体抑制剂。
3.根据权利要求1所述的一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，其特征在于，所述靶向蛋白酶体的蛋白酶体抑制剂为MG132、硼替佐米、卡非佐米、伊沙佐米中的一种。
4.根据权利要求1所述的一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，其特征在于，所述MEK抑制剂为司美替尼、曲美替尼、比美替尼、考比替尼中的一种。
5.根据权利要求1所述的一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，其特征在于，所述乳腺癌肿瘤为三阴性乳腺癌肿瘤。
6.根据权利要求1所述的一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用，其特征在于，所述药物包括靶向蛋白酶体、MEK抑制剂及药物上可接受的辅料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210822404.3A CN115120731A (zh) | 2022-07-12 | 2022-07-12 | 一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210822404.3A CN115120731A (zh) | 2022-07-12 | 2022-07-12 | 一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115120731A true CN115120731A (zh) | 2022-09-30 |
Family
ID=83382966
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210822404.3A Pending CN115120731A (zh) | 2022-07-12 | 2022-07-12 | 一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115120731A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20180369203A1 (en) * | 2015-07-09 | 2018-12-27 | The Jackson Laboratory | Methods of treating cancer by administering a mek inhibitor in combination with a proteasome inhibitor |
| CN109310768A (zh) * | 2015-12-29 | 2019-02-05 | 得克萨斯大学体系董事会 | 用于治疗癌症的p38 mapk的抑制 |
| CN110730663A (zh) * | 2017-09-22 | 2020-01-24 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | 阿帕替尼和c-Met抑制剂联合在制备治疗肿瘤的药物中的用途 |
| CN111840291A (zh) * | 2020-07-14 | 2020-10-30 | 深圳海王医药科技研究院有限公司 | 一种在肿瘤治疗中具有增效作用的化合物的应用 |
| CN113101269A (zh) * | 2021-04-15 | 2021-07-13 | 四川大学华西医院 | 一种基于纳米脂质体的递送系统、制备方法及应用 |
-
2022
- 2022-07-12 CN CN202210822404.3A patent/CN115120731A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20180369203A1 (en) * | 2015-07-09 | 2018-12-27 | The Jackson Laboratory | Methods of treating cancer by administering a mek inhibitor in combination with a proteasome inhibitor |
| CN109310768A (zh) * | 2015-12-29 | 2019-02-05 | 得克萨斯大学体系董事会 | 用于治疗癌症的p38 mapk的抑制 |
| CN110730663A (zh) * | 2017-09-22 | 2020-01-24 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | 阿帕替尼和c-Met抑制剂联合在制备治疗肿瘤的药物中的用途 |
| CN111840291A (zh) * | 2020-07-14 | 2020-10-30 | 深圳海王医药科技研究院有限公司 | 一种在肿瘤治疗中具有增效作用的化合物的应用 |
| CN113101269A (zh) * | 2021-04-15 | 2021-07-13 | 四川大学华西医院 | 一种基于纳米脂质体的递送系统、制备方法及应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| XUEYAN WANG，等: "PSMG2-controlled proteasome-autophagy balance mediates the tolerance for MEK-targeted therapy in triple-negative breast cancer", 《CELL REPORTS MEDICINE》 * |
| YUKO HIRANO，等: "A heterodimeric complex that promotes the assembly of mammalian 20S proteasomes", 《NATURE》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Moro et al. | Metformin enhances cisplatin-induced apoptosis and prevents resistance to cisplatin in co-mutated KRAS/LKB1 NSCLC | |
| Sainz Jr et al. | ISG15 is a critical microenvironmental factor for pancreatic cancer stem cells | |
| Hsu et al. | Fucoidan inhibition of lung cancer in vivo and in vitro: Role of the Smurf2-dependent ubiquitin proteasome pathway in TGFβ receptor degradation | |
| Herzog et al. | PI3K/mTOR inhibitor PF-04691502 antitumor activity is enhanced with induction of wild-type TP53 in human xenograft and murine knockout models of head and neck cancer | |
| JP2010532385A (ja) | 複合的癌治療の方法、組成物および標的 | |
| Hou et al. | Mechanisms controlling the anti-neoplastic functions of FoxO proteins | |
| Cho et al. | Therapeutic implications of the genetic landscape of head and neck cancer | |
| Huang et al. | Uridine‐cytidine kinase 2 upregulation predicts poor prognosis of hepatocellular carcinoma and is associated with cancer aggressiveness | |
| CN111956804B (zh) | Otub1的抑制剂的新应用 | |
| Liu et al. | Niclosamide inhibits epithelial-mesenchymal transition and tumor growth in lapatinib-resistant human epidermal growth factor receptor 2-positive breast cancer | |
| Hu et al. | Reversal effects of local anesthetics on P-glycoprotein-mediated cancer multidrug resistance | |
| Cheon et al. | Macrophage migration inhibitory factor promotes resistance to MEK blockade in KRAS mutant colorectal cancer cells | |
| Liang et al. | RASSF6-mediated inhibition of Mcl-1 through JNK activation improves the anti-tumor effects of sorafenib in renal cell carcinoma | |
| Hao et al. | Downregulation of MCM8 expression restrains the malignant progression of cholangiocarcinoma | |
| Shi et al. | Huaier inhibits gastric cancer growth and hepatic metastasis by reducing syntenin expression and STAT3 phosphorylation | |
| Yang et al. | Inhibition MNK‐eIF4E‐β‐catenin preferentially sensitizes gastric cancer to chemotherapy | |
| CN115054605B (zh) | G9a抑制剂在制备治疗葡萄膜黑色素瘤的药物中的应用 | |
| CN115120731A (zh) | 一种靶向蛋白酶体治疗乳腺癌的药物应用 | |
| CN112843038B (zh) | 一种药物在制备治疗弥漫大b细胞淋巴瘤药物中的应用 | |
| Xiong et al. | Insight into the molecular mechanisms of gastric cancer stem cell in drug resistance of gastric cancer | |
| Liu et al. | Mechanism and clinical application of thymosin in the treatment of lung cancer | |
| Lee et al. | Molecular mechanisms underlying the regulation of tumour suppressor genes in lung cancer | |
| US11994511B2 (en) | Biomarkers indicative of prostate cancer and treatment thereof | |
| US20230365673A1 (en) | Means for reducing radio- and chemotherapy resistance and adverse effects | |
| US20210322417A1 (en) | Gastric cancer treatments |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220930 |