CN115058448A - OsLecRK-S.7基因及其编码蛋白和在降低植物根长上的应用 - Google Patents

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CN115058448A CN202210694598.3A CN202210694598A CN115058448A CN 115058448 A CN115058448 A CN 115058448A CN 202210694598 A CN202210694598 A CN 202210694598A CN 115058448 A CN115058448 A CN 115058448A
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骆素微
许泽芬
谭诗茹
黄文斌
吴远雄
翁灵灵
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    • C12N15/63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
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Abstract

本发明涉及生物技术领域,具体涉及OsLecRK‑S.7基因及其编码蛋白和在降低植物根长上应用;本发明通过对OsLecRK‑S.7基因的生物学功能的研究,发现OsLecRK‑S.7基因在控制植物根生长上具有调控作用,通过超量表达该基因可缩短植物根长,对研究植物根的生长调节具有重要意义。

Description

OsLecRK-S.7基因及其编码蛋白和在降低植物根长上的应用
技术领域
本申请涉及生物技术领域,具体涉及水稻OsLecRK-S.7基因及其编码蛋白和应用。
背景技术
根是高等植物的重要器官,不仅对植物体具有机械支撑作用,而且在植物体从土壤中吸收正常生命活动所需水份和矿物质营养的过程中起到关键作用。根系的发育状况直接影响着植物体的生长状况,在农业生产实践中十分关键,因此对根系发生和发育的研究既具有理论价值,也具有实践意义。
类受体激酶(Receptor-like kinases,RLKs)是一种普遍存在于植物体内的蛋白,能够感知和传递各种胞外信号。大部分类受体激酶属于细胞质膜蛋白,主要功能是通过其细胞外配体识别结构域和细胞内激酶结构域分别识别和传递各种信号,最终产生一系列细胞应答。凝集素类受体激酶(Lectin receptor-like kinases,LecRLKs)是类受体激酶家族中的一个亚族,主要包含凝集素结构域、跨膜结构域和激酶结构域。根据细胞外凝集素结构域的不同,LecRLKs可分为L、 G和C三种不同类型。在植物中,迄今为止尚未发现该类激酶参与调控植物根长发育。
发明内容
本申请目的在于提供OsLecRK-S.7基因及其编码蛋白在植物生长调控上的用途,通过对OsLecRK-S.7基因的生物学功能的研究,发现OsLecRK-S.7基因在控制植物根生长上具有调控作用,通过超量表达该基因可缩短植物根长,对研究植物根的生长调节具有重要意义。
第一方面,本发明提供OsLecRK-S.7蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在降低植物根长上的应用。
第二方面,OsLecRK-S.7蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在降低植物根长的遗传育种中的应用,其特征在于:所述OsLecRK-S.7蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.3所示。
优选的,本发明中,所述OsLecRK-S.7蛋白的氨基酸序列可为以下任意一种:
(1)如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列;
(2)如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸的替换、插入或缺失得到的具有相同功能蛋白的氨基酸序列;
(3)与如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列具有至少80%同源性的氨基酸序列;优选地,所述同源性为至少90%;更优选为95%。
如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列为OsLecRK-S.7蛋白的氨基酸序列,本领域技术人员可根据如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列以及氨基酸的保守性替换等本领域常规技术手段,在不影响其活性的前提下,通过取代、缺失和/或增加一个或几个氨基酸,得到与如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列具有相同功能的 OsLecRK-S.7蛋白突变体。
优选的,本发明中,所述OsLecRK-S.7蛋白的编码基因具有如下任一种核苷酸序列:
(1)如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列;
(2)如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经过一个或多个核苷酸的替换、缺失或插入获得的具有相同功能蛋白的编码核苷酸序列;
(3)在严格条件下可以与如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列进行杂交的核苷酸序列。
优选的,所述OsLecRK-S.7蛋白编码基因的编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
优选的,上述生物材料为表达盒、载体、宿主细胞、重组菌或转基因植物细胞。
优选的,上述应用中所述的植物优选为单子叶植物或双子叶植物。
优选的,上述应用中所述的根长指的的植物的主根长。
第三方面,本发明提供一种培育根长降低植物的方法,通过转基因、杂交、回交、自交或无性繁殖的方法,提高水稻中OsLecRK-S.7蛋白的表达量;所述水稻OsLecRK-S.7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
优选的,所述转基因为将包含所述OsLecRK-S.7蛋白的编码基因的互补表达载体导入目的植物中,获得转基因植物体。
作为本发明的一种优选方案,所述培育根长降低植物的方法包括如下步骤:
S1、将OsLecRK-S.7基因克隆到pUbi载体,构建pUbi-OsLecRK-S.7载体;
S2、用所述pUbi-OsLecRK-S.7载体导入目的植物,筛选鉴定得到超量表达OsLecRK-S.7基因的转基因植物体。
进一步的,用所述pUbi-OsLecRK-S.7载体导入目的植物的方法为通过农杆菌转化法侵染植物体的愈伤组织;
与现有技术相比,本申请的有益效果在于:本发明通过对OsLecRK-S.7基因的生物学功能的研究,发现OsLecRK-S.7基因在控制植物根生长上具有调控作用,通过超量表达该基因可缩短植物根长,对研究植物根的生长调节具有重要意义。
附图说明
图1是本发明鉴定和分离克隆水稻根长相关基因OsLecRK-S.7以及验证 OsLecRK-S.7基因功能的技术流程图。
图2是pUbi-OsLecRK-S.7重组表达载体的构建流程图。
图3是OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系中OsLecRK-S.7基因表达量检测;其中,OE-1至OE-13表示获得的OsLecRK-S.7基因超量表达不同转基因株系,WT 表示野生型对照,UBQ作为内参基因。
图4是OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系根长表型分析;
其中,A:生长3周龄的OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系根长表型;(标尺:2cm);
B:生长3周龄的OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系根长长度统计;
OE-LecRK-S.7-8、OE-LecRK-S.7-12和OE-LecRK-S.7-13表示获得的 OsLecRK-S.7基因超量表达不同转基因株系,WT表示野生型对照。
具体实施方式
对序列表的说明:
序列表SEQ ID NO:1是OsLecRK-S.7的全长基因组序列,序列长度为3953 bp。其中1-116bp为5'非翻译区(5'UTR),117-2204bp为翻译区(CDS序列), 2205-3953bp为3'非翻译区(3'UTR)。
序列表SEQ ID NO:2是OsLecRK-S.7的CDS序列,序列长度为2088bp。
序列表SEQ ID NO:3是OsLecRK-S.7基因编码的蛋白质序列,序列长度为 695个氨基酸。
需要说明的是,这些实施例仅仅是为了说明本发明,而不能以任何方式构成对本发明权利要求范围的限制。
下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法,所用引物均由北京六合华大基因科技股份有限公司合成;测序由生工生物工程(上海)股份有限公司完成;KOD FX Neo高保真酶购自东洋纺(上海)生物科技有限公司(TOYOBO);载体构建过程中的核酸内切酶、rTaq酶、重组连接酶In-Fusion和实时荧光定量PCR试剂盒均购自宝生物工程(北京)有限公司(TaKaRa);大肠杆菌感受态Trans1-T1购自北京全式金生物技术有限公司(TransGenBiotech);用于基因克隆和qRT-PCR的反转录试剂盒分别购自宝生物工程(北京)有限公司(TaKaRa)和北京全式金生物技术有限公司(TransGen Biotech);农杆菌感受态AGL0由本实验室自行制备;实验中所用的载体pUbi由本实验室早期保留。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市场采购的常规产品。
实施例1、OsLecRK-S.7基因的克隆
根据北京全式金生物技术有限公司TransZol使用说明书提取水稻野生型武运粳7(WYG7)植株叶片RNA,按照TaKaRa公司PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time)反转录试剂盒说明书操作将其反转录为cDNA,以cDNA为模板克隆OsLecRK-S.7基因。
扩增OsLecRK-S.7基因所需引物:
引物1:5'-CACGTGGACCACTAGTATGCCTCCACGCTGTAGGCGCCT-3'(SEQ ID NO:4);
引物2:5'-GTCGACTGGAGGATCCTCAGCGACAACTGAAGAATGCAG-3'(SEQ ID NO:5)。
其中,引物1中下划线序列为SpeI的酶切位点,引物2中下划线序列为BamHI 的酶切位点。引物1和2酶切位点左侧的10个碱基为骨架载体重组片段,用于连接载体时进行同源重组连接。
扩增OsLecRK-S.7基因PCR体系:
Figure RE-GDA0003799789250000051
加ddH2O补齐至30μL。
PCR扩增条件是:94℃预变性3min;98℃变性30s,61℃退火30s,68℃延伸2min,30个循环;68℃延伸5min。扩增产物长度为2120bp,为带有骨架载体重组片段、限制性内切酶位点及OsLecRK-S.7基因。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测回收。
实施例2、表达载体pUbi-OsLecRK-S.7的构建
如图2所示,将实施例1中PCR胶回收的OsLecRK-S.7基因片段在同源重组酶In-fusion的作用下连入用SpeI和BamHI双酶切的胶回收载体pUbi中,挑取菌落进行PCR检测,选取PCR结果为阳性的菌落进行测序,测序验证正确后,提取相应阳性克隆质粒,命名为pUbi-OsLecRK-S.7。其中,菌落PCR检测所需引物为pUbi载体上引物(SEQ ID NO:6和7),位于插入的OsLecRK-S.7 基因两侧。
菌落PCR的检测引物如下所示:
引物3:5'-TTTAGCCCTGCCTTCATACG-3'(SEQ ID NO:6);
引物4:5'-AAGACCGGCAACAGGATTC-3'(SEQ ID NO:7)。
PCR检测体系为:
Figure RE-GDA0003799789250000061
加ddH2O补齐至20μL。
PCR反应条件为:94℃预变性3min;94℃变性30s,61℃退火30s,72℃延伸3min,30个循环;72℃延伸7min。
实施例3、OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系的获得及其鉴定
申请人将含有强启动子pUbi驱动OsLecRK-S.7基因全长CDS的 pUbi-OsLecRK-S.7载体通过农杆菌介导的遗传转化方法导入水稻粳稻品种武运粳7中,获得了多个独立的转基因水稻株系,利用qRT-PCR技术检测不同株系中OsLecRK-S.7基因的表达水平。
取不同转基因株系,根据北京全式金生物技术有限公司TransZol使用说明书抽提RNA。根据北京全式金生物技术有限公司
Figure RE-GDA0003799789250000071
All-in-One First-Strand cDNASynthesis SuperMix for qPCR(One-Step gDNA Removal) 反转录试剂盒说明书反转录cDNA。采用TaKaRa公司TB GreenTM Premix Ex Taq TM II(Tli RNaseH Plus)荧光定量PCR试剂盒,并根据试剂盒使用说明书,在 ABI 7500Real Time PCR system(美国AppliedBiosystems公司)仪器上进行实时定量PCR反应。用水稻泛素化蛋白基因UBQ作为内参基因。
OsLecRK-S.7基因qRT-PCR检测引物为:
引物5:5'-AGGCCATGCTTAATTGCCCT-3'(SEQ ID NO:8);
引物6:5'-ATTCCCGTTGGGCATGAACT-3'(SEQ ID NO:9)。
UBQ内参基因qRT-PCR检测引物为:
引物7:5'-CAACCAGCTGAGGCCCAAGAA-3'(SEQ ID NO:10);
引物8:5'-CCAGGGAGATAACAACGGAAGC-3'(SEQ ID NO:11)。
qRT-PCR结果显示,转基因不同株系中OsLecRK-S.7基因的表达水平显著高于野生型对照中的表达水平,结果见图3。
实施例4、OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系抗病表型检测分析
对OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系及野生型对照进行根长分析。结果显示,本发明的OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系与野生型(非转基因的水稻品种武运粳7号,下同)相比,OsLecRK-S.7基因超量表达水稻株系8、12和 13阳性植株发病长度均显著性短于野生型对照(图4)。该结果表明,OsLecRK-S.7 基因超量表达水稻株系可以减短根长。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 惠州学院
<120> OsLecRK-S.7基因及其编码蛋白和在降低植物根长上的应用
<130> HZ220317
<160> 11
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 3953
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 1
aaatccccca tccccaccgc cattctcgac ggtttctcga gctccacctc ctcgcgtgcc 60
cacgccatcc atggcttctt ccgcacacaa tgtgaccacc tagcagcgcc atcgccatgc 120
ctccacgctg taggcgcctc cccctcctct tcatcctcct ccttgccgtc cgcccactct 180
ccgccgccgc cgcgtcgagc atcgctgcgg cccccgcctc ctcctaccgc cgcatctcgt 240
gggcgagcaa cctcacgctc ctcggctcag cctcgctcct cccgggcgcg gccggcgtcg 300
cgctcaccac cccttcccgc gacggcgtcg gcgccggccg cgctctcttc tcggagcccg 360
tgcgcctcct cctgccccag gacgcggccg cctccgcctc cgcctcgcgt gccgctaccc 420
cggcctcctt ctccacccgc ttcaccttcc gcatcacgcc ctcccccacc tacggcgacg 480
gcctcgcgtt cctcctcacc tcctcccgca ctttcctcgg cgcttccaac gggttccttg 540
gcctgttccc ctcctcatcc gcctccgacg agggggagct ccgcgacgtc tccaccgtcg 600
ccgtcgagat cgacacccac ctcgacgtgg cgctgcatga cccggacggc aaccacgtcg 660
cgctcgacgc ggggtccatc ttctccgtcg cgtccgcgca accaggcgtc gacctcaagg 720
ccggcgtgcc catcaccgcc tgggttgagt accgcgcgcc gcgccgccgc ctcaacgtat 780
ggctgtccta ctcgccgtcc cgccgccccg agaagcccgc cctctcggcc gatgtcgacc 840
tctccggcct cctgcgcacc tacatgtacg cggggttttc ggcctccaat ggcaacggcg 900
ctgcgcttca cgtcgtcgag cgctggacct tccgcacctt cggcttcccc aactcttcat 960
acgccccgcc gccgaccaag tacataggcc caatgccacc caataaccag cctctccctc 1020
cccctccctc tccctctccc tctccccctc ccccttcccc tccccctccc cctcacccta 1080
accaccgccg ccgccatctg ttctacaagg tgcttggcgg agtcctcggt ggtatggtat 1140
tgctgggcct tgtcgtcgtt ggttctgctg tcttgcttgg ccggtcagtg cgccgcaaaa 1200
atcaagaaca tgcagtggca agcgaggaca tgggggaagc gacactctct atggaggtgg 1260
cacgggcagc aacaaagggc tttgacagtg gcaatgtgat cggcgttggt ggctctggtg 1320
ctactgtgta tgagggggtg ctcccctctg ggtcgagggt tgctgtcaaa cggtttcagg 1380
ctattggatc gtgcaccaag gcatttgaca gtgagctcaa ggccatgctt aattgccctc 1440
atcacccaaa tctcgtgccg cttgctgggt ggtgcagaag taaggatgag cttgtgcttg 1500
tttatgagtt catgcccaac gggaatctag actctgcatt gcacacactg ggtggggcaa 1560
cacttccctg ggaggcacgg ttcagggctg tatatggtgt tgcatcagcg ctagcatatc 1620
tgcatgatga gtgtgagaac cggattatac atcgtgatgt caagtcatca aatgttatgc 1680
ttgatgcaga gttcaatgct cggctaggtg attttggcct tgctcgcact gtgagccatg 1740
gtgggttgcc acttacaaca cagccagcag gcacactggg gtaccttgca ccagaatatg 1800
ttcatacagg ggtggctaca gagcggtctg atgtgtacag ctttggggtg cttgctctgg 1860
aagtggccac tggacgaagg cctgctgaga ggggaatctc tgttgttaat tgggtgtgga 1920
ctctatgggg tcgtcgaagg ctggttgatg cagcagaccg gcggctccag ggacgatttg 1980
ttgcagatga gatgcgacgg gtgctgcttg tgggtctgtg ttgtgtacat ccagactgcc 2040
ggaagcggcc tggtatgcga agggtagtca gtatgcttga tggtactgca ccgttgatat 2100
tggtaccaga taagatgcca ccagttcttc tacagccagt accaaatgct tcatcaatga 2160
actctgcaga tactgccaat actgcattct tcagttgtcg ctgagcatac aagttatagg 2220
ttagcgaata caaatttctt attcatatca tctatagtca tgttaatgtt ttgaaccatc 2280
ttctgttctt tcctgctaaa gacaaaaaag gtcaaatgta aataggagac tgttctgatt 2340
gttacaaaaa tgttgcttga tcttaactgt taagcgtagc gaatgactgc tttttgaggg 2400
aacctgtaga gagttttatt ttctgactca aaaccacagt taaacatgtc atacttttta 2460
ctgctcagat ctggtgtcag tcgtttgaag atagttttga tggtatctgt aatgcatgtc 2520
ttatggtctg tgcagtttgt cctgacaaaa tttgacatta ccatcatgtt ttataataga 2580
aagttcaatc ctaattctgg catttaactg cctggaaatt gctgtaatgt gtatcatgaa 2640
aaatgtagca ctgcctccaa tgttgatgca aatgcaacaa atgtctgctg atgtagagca 2700
aataaaattt gtcattgctt gtgctttgta agtttgctga aacattaata aagcatgaca 2760
agaatgaaga tattgtatgc tgctgaatag ttacttcgaa agttttagta gcaaccaaac 2820
ctttactaat tgttgtgact gttgaattga ttgttaataa cgtttatgtg aagcaggtta 2880
gatgtgaact ctggattaac agacaatttg attgttgtac aacttgtaga agttcagaat 2940
tagacaagca cttgaacata ttttcttttg cttcacttta tgagtagcaa attgaagcta 3000
ctctgttggg cgaattgtca gaaagagctt actgttagac agcatattgg gagctatgtt 3060
aagaaggaaa aactgttagc tgcatctagt tgtatcgaga atatttcatc cagtaattat 3120
ttgaatttga ttaagtttca tttgtcccat attctagcta tatctcccat gaccattcaa 3180
atgctttgaa agtacacata gttgatcaat gaaataattc tgttgtagtg ttgttgccat 3240
ggtttttttt atcttcatta tatgcggatc aattgacttt accttttttt tttcaagatg 3300
tatacaatgc ttaaggtact aaggtatatc cacttggaac acatcaattg ctagtcactt 3360
taatgtgact aataccttcc tgtcaatatt tctaaaaagt aaaggtactt ctagtactta 3420
caatttcagg caccacaaaa tgtcccctag ttttcatcat atcattgtga gtatggacaa 3480
ggctgtacaa ttatgagtag tttccctgac atataatagg ttggtctaac acatctgtaa 3540
tctgtgtaga atgctctata tgtactgaaa tctttcaaat tattcagggt tcatttgcct 3600
catgtttgct tctttggata atttgatcgc ttctgcagca caagcatatg atcaacttgg 3660
gaaattttgt tctacagcct atatggcact gataagatga cctggatatg tagaatggat 3720
caaccagcgt tgccctttgt gttgttttaa agctaaggca ttgacctttg taccgaacaa 3780
gaattttttg atgcgggctc tgctcactct gcttcacctg ctgggtggta tgaaaatcct 3840
gatagttttc tttaccaaga atcgtaacta gattcgggaa tttctcttat gctatcttta 3900
tttgtcccaa tcattgtaca tactttgttc tgcaagtaat ctattctgga agg 3953
<210> 2
<211> 2088
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 2
atgcctccac gctgtaggcg cctccccctc ctcttcatcc tcctccttgc cgtccgccca 60
ctctccgccg ccgccgcgtc gagcatcgct gcggcccccg cctcctccta ccgccgcatc 120
tcgtgggcga gcaacctcac gctcctcggc tcagcctcgc tcctcccggg cgcggccggc 180
gtcgcgctca ccaccccttc ccgcgacggc gtcggcgccg gccgcgctct cttctcggag 240
cccgtgcgcc tcctcctgcc ccaggacgcg gccgcctccg cctccgcctc gcgtgccgct 300
accccggcct ccttctccac ccgcttcacc ttccgcatca cgccctcccc cacctacggc 360
gacggcctcg cgttcctcct cacctcctcc cgcactttcc tcggcgcttc caacgggttc 420
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gtcgccgtcg agatcgacac ccacctcgac gtggcgctgc atgacccgga cggcaaccac 540
gtcgcgctcg acgcggggtc catcttctcc gtcgcgtccg cgcaaccagg cgtcgacctc 600
aaggccggcg tgcccatcac cgcctgggtt gagtaccgcg cgccgcgccg ccgcctcaac 660
gtatggctgt cctactcgcc gtcccgccgc cccgagaagc ccgccctctc ggccgatgtc 720
gacctctccg gcctcctgcg cacctacatg tacgcggggt tttcggcctc caatggcaac 780
ggcgctgcgc ttcacgtcgt cgagcgctgg accttccgca ccttcggctt ccccaactct 840
tcatacgccc cgccgccgac caagtacata ggcccaatgc cacccaataa ccagcctctc 900
cctccccctc cctctccctc tccctctccc cctccccctt cccctccccc tccccctcac 960
cctaaccacc gccgccgcca tctgttctac aaggtgcttg gcggagtcct cggtggtatg 1020
gtattgctgg gccttgtcgt cgttggttct gctgtcttgc ttggccggtc agtgcgccgc 1080
aaaaatcaag aacatgcagt ggcaagcgag gacatggggg aagcgacact ctctatggag 1140
gtggcacggg cagcaacaaa gggctttgac agtggcaatg tgatcggcgt tggtggctct 1200
ggtgctactg tgtatgaggg ggtgctcccc tctgggtcga gggttgctgt caaacggttt 1260
caggctattg gatcgtgcac caaggcattt gacagtgagc tcaaggccat gcttaattgc 1320
cctcatcacc caaatctcgt gccgcttgct gggtggtgca gaagtaagga tgagcttgtg 1380
cttgtttatg agttcatgcc caacgggaat ctagactctg cattgcacac actgggtggg 1440
gcaacacttc cctgggaggc acggttcagg gctgtatatg gtgttgcatc agcgctagca 1500
tatctgcatg atgagtgtga gaaccggatt atacatcgtg atgtcaagtc atcaaatgtt 1560
atgcttgatg cagagttcaa tgctcggcta ggtgattttg gccttgctcg cactgtgagc 1620
catggtgggt tgccacttac aacacagcca gcaggcacac tggggtacct tgcaccagaa 1680
tatgttcata caggggtggc tacagagcgg tctgatgtgt acagctttgg ggtgcttgct 1740
ctggaagtgg ccactggacg aaggcctgct gagaggggaa tctctgttgt taattgggtg 1800
tggactctat ggggtcgtcg aaggctggtt gatgcagcag accggcggct ccagggacga 1860
tttgttgcag atgagatgcg acgggtgctg cttgtgggtc tgtgttgtgt acatccagac 1920
tgccggaagc ggcctggtat gcgaagggta gtcagtatgc ttgatggtac tgcaccgttg 1980
atattggtac cagataagat gccaccagtt cttctacagc cagtaccaaa tgcttcatca 2040
atgaactctg cagatactgc caatactgca ttcttcagtt gtcgctga 2088
<210> 3
<211> 695
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 3
Met Pro Pro Arg Cys Arg Arg Leu Pro Leu Leu Phe Ile Leu Leu 15
Leu Ala Val Arg Pro Leu Ser Ala Ala Ala Ala Ser Ser Ile Ala 30
Ala Ala Pro Ala Ser Ser Tyr Arg Arg Ile Ser Trp Ala Ser Asn 45
Leu Thr Leu Leu Gly Ser Ala Ser Leu Leu Pro Gly Ala Ala Gly 60
Val Ala Leu Thr Thr Pro Ser Arg Asp Gly Val Gly Ala Gly Arg 75
Ala Leu Phe Ser Glu Pro Val Arg Leu Leu Leu Pro Gln Asp Ala 90
Ala Ala Ser Ala Ser Ala Ser Arg Ala Ala Thr Pro Ala Ser Phe 105
Ser Thr Arg Phe Thr Phe Arg Ile Thr Pro Ser Pro Thr Tyr Gly 120
Asp Gly Leu Ala Phe Leu Leu Thr Ser Ser Arg Thr Phe Leu Gly 135
Ala Ser Asn Gly Phe Leu Gly Leu Phe Pro Ser Ser Ser Ala Ser 150
Asp Glu Gly Glu Leu Arg Asp Val Ser Thr Val Ala Val Glu Ile 165
Asp Thr His Leu Asp Val Ala Leu His Asp Pro Asp Gly Asn His 180
Val Ala Leu Asp Ala Gly Ser Ile Phe Ser Val Ala Ser Ala Gln 195
Pro Gly Val Asp Leu Lys Ala Gly Val Pro Ile Thr Ala Trp Val 210
Glu Tyr Arg Ala Pro Arg Arg Arg Leu Asn Val Trp Leu Ser Tyr 225
Ser Pro Ser Arg Arg Pro Glu Lys Pro Ala Leu Ser Ala Asp Val 240
Asp Leu Ser Gly Leu Leu Arg Thr Tyr Met Tyr Ala Gly Phe Ser 255
Ala Ser Asn Gly Asn Gly Ala Ala Leu His Val Val Glu Arg Trp 270
Thr Phe Arg Thr Phe Gly Phe Pro Asn Ser Ser Tyr Ala Pro Pro 285
Pro Thr Lys Tyr Ile Gly Pro Met Pro Pro Asn Asn Gln Pro Leu 300
Pro Pro Pro Pro Ser Pro Ser Pro Ser Pro Pro Pro Pro Ser Pro 315
Pro Pro Pro Pro His Pro Asn His Arg Arg Arg His Leu Phe Tyr 330
Lys Val Leu Gly Gly Val Leu Gly Gly Met Val Leu Leu Gly Leu 345
Val Val Val Gly Ser Ala Val Leu Leu Gly Arg Ser Val Arg Arg 360
Lys Asn Gln Glu His Ala Val Ala Ser Glu Asp Met Gly Glu Ala 375
Thr Leu Ser Met Glu Val Ala Arg Ala Ala Thr Lys Gly Phe Asp 390
Ser Gly Asn Val Ile Gly Val Gly Gly Ser Gly Ala Thr Val Tyr 405
Glu Gly Val Leu Pro Ser Gly Ser Arg Val Ala Val Lys Arg Phe 420
Gln Ala Ile Gly Ser Cys Thr Lys Ala Phe Asp Ser Glu Leu Lys 435
Ala Met Leu Asn Cys Pro His His Pro Asn Leu Val Pro Leu Ala 450
Gly Trp Cys Arg Ser Lys Asp Glu Leu Val Leu Val Tyr Glu Phe 465
Met Pro Asn Gly Asn Leu Asp Ser Ala Leu His Thr Leu Gly Gly 480
Ala Thr Leu Pro Trp Glu Ala Arg Phe Arg Ala Val Tyr Gly Val 495
Ala Ser Ala Leu Ala Tyr Leu His Asp Glu Cys Glu Asn Arg Ile 510
Ile His Arg Asp Val Lys Ser Ser Asn Val Met Leu Asp Ala Glu 525
Phe Asn Ala Arg Leu Gly Asp Phe Gly Leu Ala Arg Thr Val Ser 540
His Gly Gly Leu Pro Leu Thr Thr Gln Pro Ala Gly Thr Leu Gly 555
Tyr Leu Ala Pro Glu Tyr Val His Thr Gly Val Ala Thr Glu Arg 570
Ser Asp Val Tyr Ser Phe Gly Val Leu Ala Leu Glu Val Ala Thr 585
Gly Arg Arg Pro Ala Glu Arg Gly Ile Ser Val Val Asn Trp Val 600
Trp Thr Leu Trp Gly Arg Arg Arg Leu Val Asp Ala Ala Asp Arg 615
Arg Leu Gln Gly Arg Phe Val Ala Asp Glu Met Arg Arg Val Leu 630
Leu Val Gly Leu Cys Cys Val His Pro Asp Cys Arg Lys Arg Pro 645
Gly Met Arg Arg Val Val Ser Met Leu Asp Gly Thr Ala Pro Leu 660
Ile Leu Val Pro Asp Lys Met Pro Pro Val Leu Leu Gln Pro Val 675
Pro Asn Ala Ser Ser Met Asn Ser Ala Asp Thr Ala Asn Thr Ala 690
Phe Phe Ser Cys Arg 695
<210> 4
<211> 39
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
cacgtggacc actagtatgc ctccacgctg taggcgcct 39
<210> 5
<211> 39
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
gtcgactgga ggatcctcag cgacaactga agaatgcag 39
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
tttagccctg ccttcatacg 20
<210> 7
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
aagaccggca acaggattc 19
<210> 8
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
aggccatgct taattgccct 20
<210> 9
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
attcccgttg ggcatgaact 20
<210> 10
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
caaccagctg aggcccaaga a 21
<210> 11
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
ccagggagat aacaacggaa gc 22

Claims (9)

1.OsLecRK-S.7蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在降低植物根长上的应用,其特征在于:所述OsLecRK-S.7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.OsLecRK-S.7蛋白的编码基因或含有所述编码基因的生物材料在降低植物根长的遗传育种中的应用,其特征在于:所述OsLecRK-S.7蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
3.根据权利要求1-2任一项所述的应用,其特征在于:所述生物材料为表达盒、载体、宿主细胞、重组菌或转基因植物细胞。
4.根据权利要求1-2任一项所述的应用,其特征在于:所述OsLecRK-S.7蛋白编码基因的编码区的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.根据权利要求1-2任一项所述的应用,其特征在于:OsLecRK-S.7蛋白的编码基因全长基因组序列如SEQ ID NO:1所示。
6.根据权利要求1-2任一项所述的应用,其特征在于:所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
7.根据权利要求1-2任一项所述的应用,其特征在于:所述植物根长为植物的主根长。
8.一种培育根长降低植物的方法,其特征在于:通过转基因、杂交、回交、自交或无性繁殖的方法,提高植物OsLecRK-S.7蛋白的表达量;所述OsLecRK-S.7蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.3所示。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述转基因包括以下步骤:
S1、将OsLecRK-S.7基因克隆到pUbi载体,构建pUbi-OsLecRK-S.7载体;
S2、将所述pUbi-OsLecRK-S.7载体导入目的植物,筛选鉴定超量表达OsLecRK-S.7基因的转基因植物体。
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