CN115028642A - 二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其制备方法与应用 - Google Patents

二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种二芳基二氢呋喃并[3,4‑d]嘧啶类化合物及其制备方法和应用。所述化合物具有通式I或II所示的结构。本发明还涉及含有式I或II结构化合物的药物组合物。活性筛选实验显示本发明化合物具有很好的抗HIV‑1活性，因此本发明还提供上述化合物在制备抗艾滋病药物中的应用。

Description

二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类HIV-1逆转录酶抑制剂及其 制备方法与应用
技术领域
本发明属于有机化合物合成与医药应用技术领域，具体涉及一种二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物及其制备方法与应用。
背景技术
艾滋病(Acquired immune deficiency syndrome,AIDS)是一种主要由人体免疫缺陷病毒1型(Human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)感染并引起的人体免疫防御机能缺陷而易于引发机会性感染和肿瘤的临床综合征，已经成为严重危害人类生命健康的重大传染性疾病之一。目前全球约有3770万艾滋病毒感染者，每年约有170万的新发感染者；而在我国，艾滋病流行已经进入快速增长期，目前感染人数已超过100万。但我国在临床上用于免费治疗的抗艾滋病药物大多为专利过期的仿制药物，其品种少，毒副作用大，且在长期的临床应用中产生了严重的耐药性，无法满足患者的临床需求。因此，立足自主创新，研发具有自主知识产权的治疗艾滋病的原创性新药，为国民提供安全、有效和价廉的抗艾滋病药物，是面向国家发展战略和人民生命健康的重大需求。
逆转录酶(Reverse transcriptase，RT)在HIV复制周期中具有关键性的作用，且由于人体内缺少其同源性酶而成为抗HIV-1药物研发的重要靶点。其中，非核苷类逆转录酶抑制剂(Non-nucleoside reverse transcriptase inhibitors,NNRTIs)由于其高效低毒、特异性高、协同性强等优点，成为临床上用于治疗艾滋病患者常用的高效抗逆转录病毒疗法(Highly active antiretroviral therapy,HAART)的重要组成部分。然而，由于缺乏限制性核酸外切酶校正及HIV-1RT的高突变性，第一代NNRTIs的有效性大大下降，而第二代NNRTIs结构具有较高的柔性，对第一代常见突变株有较好的抑制作用，但随其广泛使用，目前在临床上已出现多种针对第二代NNRTIs的突变株，如E138A、E138K、Y181C以及Y181I等，并且由于该类化合物水溶性和口服生物利用度很低，口服剂量大，进而引起严重的毒副作用，限制了其在临床上的广泛应用。因此，研发新型高效、且具有广谱抗耐药性及良好药代动力学性质的NNRTIs是当前抗艾滋病药物研究的热点领域之一。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供了一类以HIV-1逆转录酶为靶点的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物及其制备方法；本发明还提供了二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物作为非核苷类抗HIV-1抑制剂在制备抗艾滋病药物中的应用。
本发明的技术方案如下：
一、二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物
本发明的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐，是具有如下通式I或II所示的结构：
Figure BDA0003725514230000021
其中，
R为：CN，CH＝CHCN，芳基或取代芳基，所述取代基分别独立选自氢，氰基，硝基，氨基，羟基，卤素，磺酸基，三氟甲基，C1～6烷基，C1～6烷氧基，C3～6环烷基，C3～6环烷氧基，C3～6环烷氨基；
X为：H或卤素；
R1为：H，氟或三氟甲基；
X1，X2，X3，X4为：C或者N，且至少有一个为N。
根据本发明优选的，本发明的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物为如下之一：
Figure BDA0003725514230000022
Figure BDA0003725514230000031
Figure BDA0003725514230000041
二、二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物的制备方法
二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物的制备方法，步骤包括：以2,4-二氯-5,7-二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶1为起始原料，首先在N,N-二甲基甲酰胺溶液中与取代苯酚发生亲核取代反应生成中间体2；然后中间体2与氟原子或三氟甲基取代的对氰基苯胺发生布赫瓦尔德-哈特维希(Buchwald-Hartwig)偶联反应生成目标产物I；中间体2与吡啶胺或者嘧啶胺发生Buchwald-Hartwig偶联反应生成目标产物Ⅱ；
合成路线一如下：
Figure BDA0003725514230000042
试剂及条件:(i)取代苯酚，N,N-二甲基甲酰胺，碳酸钾，室温；(ii)氟原子或三氟甲基取代的对氰基苯胺，醋酸钯，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽，碳酸铯，90℃，二氧六环。
合成路线二如下：
Figure BDA0003725514230000043
试剂及条件:(i)取代苯酚，N,N-二甲基甲酰胺，碳酸钾，室温；(ii)吡啶胺或者嘧啶胺，醋酸钯，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽，碳酸铯，90℃，二氧六环。
所述的取代苯酚的取代基为氢，氰基，硝基，氨基，羟基，卤素，磺酸基，三氟甲基，C1～6烷基，C1～6烷氧基，C3～6环烷基，C3～6环烷氧基，C3～6环烷氨基。R、X、R1、X1、X2、X3、X4同上述通式I、Ⅱ所示。
三、二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物的应用
本发明公开了二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物抗HIV-1活性筛选结果及其作为抗艾滋病毒抑制剂的首次应用。实验结果证明本发明的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物可用于制备抗艾滋病毒药物。
目标化合物的抗HIV-1的活性实验及成药性评价
对按照上述方法合成的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物进行了细胞水平的抗HIV-1野生株IIIB，突变株L100I、K103N、Y181C、Y188L、E138K、F227L/V106A以及RES056(K103N/Y181C)的活性筛选，以依曲韦林(ETR)为阳性对照。它们的抗HIV-1活性及对HIV-1RT抑制活性如表1所示，使用Maestro软件对化合物SA2的分子对接研究如图1所示，化合物SA2及其盐酸盐SA2·HCl的溶解度如表2所示，SA2·HCl在小鼠体内初步的成药性评价结果如表3所示，其急毒评价如图2所示。
由表1可以看出，本发明的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物表现出了极强的抗HIV-1野生株和突变株的活性，绝大部分化合物对HIV-1野生株和突变株的EC50值均达到了纳摩尔级别。其中，化合物SA2的活性尤为突出，抗耐药性显著提高，对单突变株和双突变株的活性均优于上市药物ETR。此外，目标化合物对WT HIV-1RT均表现出有效的RT抑制活性，与上市药物ETR相当，同时也表明了这系列新型二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物的靶点是HIV-1RT，它们是典型的NNRTIs。
图1显示了化合物SA2在WT HIV-1RT及RES056 HIV-1RT中的结合模式，SA2以优势的马蹄型构象结合在RT的NNIBP中，与周围氨基酸形成多重相互作用力，解释了化合物SA2良好的抗耐药性。
由表2可以看出，化合物SA2及其盐酸盐SA2·HCl在不同pH下的溶解度均表现出显著提高，可用于进一步的药性评价。由表3可以看出，SA2在小鼠中的半衰期为5.12h，生物利用度为12.1％，具有良好的药代动力学性质，此外其急性毒性试验结果显示SA2·HCl具有良好的安全性，可作为制备抗HIV的候选药物加以利用开发。
因此，本发明的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物可作为非核苷类HIV-1逆转录酶抑制剂应用。具体地说，作为HIV-1抑制剂用于制备抗艾滋病药物。
一种抗HIV-1药物组合物，包括本发明的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物和一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。
本发明提供了结构全新的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物、其制备方法、其抗HIV-1活性筛选结果及其在抗病毒领域中的首次应用。经过试验证明，本发明的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物可作为HIV-1非核苷类逆转录酶抑制剂应用并具有很高的应用价值。具体地说，作为HIV-1抑制剂用于制备抗艾滋病药物。
说明书附图
图1是化合物SA2的对接模式图(A:WT HIV-1RT,PDB:6c0j.B:RES056 HIV-1RT,PDB:6c0r.由Pymol显示)；
图2是实施例14中两组小鼠的相对体重变化图。
具体实施方式
通过下述实例有助于理解本发明，但是不能限制本发明的内容，在下列实例中，所有目标化合物的编号与表1相同。
合成路线1：
Figure BDA0003725514230000061
试剂及条件:(i)4-羟基-3,5-二甲基苯甲醛或3,5-二氟-4-羟基苯甲醛，N,N-二甲基甲酰胺，碳酸钾，室温；(ii)氰基磷酸二乙酯，叔丁醇钾，四氢呋喃，二氯甲烷，0℃；(iii)4-氨基苯腈或2-氟-4-氨基苯腈或5-氨基吡啶甲腈，醋酸钯，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽，碳酸铯，90℃，二氧六环。
合成路线2：
Figure BDA0003725514230000062
试剂及条件:(i)(4-氰基苯基)硼酸或(4-氟苯基)硼酸，四(三苯基膦)钯，N,N-二甲基甲酰胺，水，碳酸钠，100℃；(ii)2,4-二氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶，N,N-二甲基甲酰胺，碳酸钾，室温；(iii)4-氨基苯腈或2-氟-4-氨基苯腈或5-氨基吡啶甲腈，醋酸钯，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽，碳酸铯，90℃，二氧六环。
实施例1.(E)-3-(4-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3,5-二甲基苯基)丙烯腈4的合成
称取4-羟基-3,5-二甲基苯甲醛(1.50g,10mmol)和碳酸钾(1.70g,12mmol)于30mL的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，室温搅拌15分钟，然后加入2,4-二氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶(1,1.90g,10mmol)继续室温搅拌5h(TLC检测反应完毕)。此时有大量的白色固体生成，慢慢地向其中加入25mL冰水，过滤，真空干燥箱干燥，得到白色固体即为化合物4-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3,5-二甲基苯甲醛2，收率96％。ESI-MS:m/z 305.3[M+1]+.C15H12ClN3O2(304.06).
称取氰基磷酸二乙酯(0.49g,3.0mmol)与叔丁醇钾(0.34g,3.0mmol)于5mL的1,4-二氧六环，于0℃下搅拌0.5h。称取化合物2(0.31g,1.0mmol)溶于5mL的1,4-二氧六环与二氯甲烷的混合溶液(V/V＝1/1)中，在0℃下将其滴进上述溶液中后转移至室温反应5h(TLC检测反应完毕)。将反应液浓缩至3mL后滴加到20mL水中搅拌，有大量的白色固体生成。过滤，干燥得粗品(E)-3-(4-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3,5-二甲基苯基)丙烯腈4。然后在乙酸乙酯-石油醚中重结晶得化合物4，收率78％。ESI-MS:m/z 328.4[M+1]+.C17H14ClN3O2(327.08).
实施例2.目标化合物SA1-3的合成
称取化合物4(0.33g,1.0mmol)，4-氨基苯腈或2-氟-4-氨基苯腈或5-氨基吡啶甲腈(1.2mmol)，醋酸钯(0.02g,0.1mmol)，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(0.06g,0.1mmol)与碳酸铯(0.65g,2mmol)加入于15mL的1,4-二氧六环中，在氮气保护的条件下加热回流12h。待反应冷却到室温以后，加硅藻土过滤，滤液蒸干。然后加入乙酸乙酯溶解，饱和食盐水萃取(3×5mL)，分取有机层，用无水硫酸钠干燥。快速柱层析分离得到目标化合物，进而在乙酸乙酯-石油醚体系中重结晶得到目标化合物SA1-3。
目标化合物SA1-3，结果如下：
Figure BDA0003725514230000081
操作同上，所不同的是使用4-氨基苯腈。产物为(E)-4-((4-(4-(2-氰基乙烯基)-2,6-二甲基苯氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)苯腈(SA1)，白色固体，收率：72％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.19(s,1H,NH),7.64(d,J＝16.7,1H,ArCH＝),7.60(d,J＝8.8,2H,C2,C6-Ph’-H),7.48(s,2H,C3,C5-Ph”-H),7.36(d,J＝8.8,2H,C3,C5-Ph’-H),6.43(d,J＝16.7,1H,＝CHCN),5.02(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.87(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.04(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ174.12,162.84,160.03,151.99,150.45,148.65,144.94,133.06,132.07,131.82,129.61,128.69,119.85,119.36,118.55,106.46,102.99,97.03,96.01,72.33,69.49,26.80,16.59,16.50.ESI-MS:m/z410.3[M+1]+.C24H19N5O2(409.15).
Figure BDA0003725514230000082
操作同上，所不同的是使用2-氟-4-氨基苯腈。产物为(E)-4-((4-(4-(2-氰基乙烯基)-2,6-二甲基苯氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2-氟苯腈(SA2)，浅黄色固体，收率：65％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.52(s,1H,NH),7.66(d,J＝16.7,1H,ArCH＝),7.58(d,J＝8.3,1H,C6-Ph’-H),7.55(s,2H,C3,C5-Ph”-H),7.23(d,J＝8.5,1H,C5-Ph’-H),6.46(d,J＝16.7,1H,＝CHCN),5.76(s,1H,C3-Ph’-H),5.13(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.96(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.11(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ174.22,164.80,162.81,162.30(JCF＝1.0Hz),159.69,151.75,150.47,148.49,147.22,147.10,133.79,132.25,131.58,129.71,128.76,119.35,115.16,115.04,107.12,104.69,104.43,96.94,95.82,91.29,91.13,72.31,69.47,55.38,16.56,16.46.ESI-MS:m/z 428.3[M+1]+.C24H18FN5O2(427.14).
Figure BDA0003725514230000091
操作同上，所不同的是使用5-氨基吡啶甲腈。产物为(E)-5-((4-(4-(2-氰基乙烯基)-2,6-二甲基苯氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶甲腈(SA3)，白色固体，收率：71％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.44(s,1H,NH),8.71(s,1H,C6-Ph’-H),7.67(d,J＝16.6,1H,ArCH＝),7.61(d,J＝8.6,2H,C3,C4-Ph’-H),7.54(s,2H,C3,C5-Ph”-H),6.47(d,J＝16.7,1H,＝CHCN),5.10(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.96(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.11(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ174.18,162.92,159.91,151.76,151.37,150.41,148.61,141.96,140.65,132.15,131.73,129.65,129.37,128.73,124.19,123.98,119.35,118.51,118.31,107.30,97.12,96.07,72.37,69.49,16.58,16.49.ESI-MS:m/z 411.2[M+1]+.C23H18N6O2(410.15).
实施例3.(E)-3-(4-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3,5-二氟苯基)丙烯腈5的合成
称取3,5-二氟-4-羟基苯甲醛(1.58g,10mmol)和碳酸钾(1.70g,12mmol)于30mL的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，室温搅拌15分钟，然后加入2,4-二氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶(1,1.90g,10mmol)继续室温搅拌5h(TLC检测反应完毕)。此时有大量的白色固体生成，慢慢地向其中加入25mL冰水，过滤，真空干燥箱干燥，得到白色固体即为化合物4-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3,5-二氟苯甲醛3，收率94％。ESI-MS:m/z313.1[M+1]+.C15H12ClN3O2(312.01).
称取氰基磷酸二乙酯(0.49g,3.0mmol)与叔丁醇钾(0.34g,3.0mmol)于5mL的1,4-二氧六环，于0℃下搅拌0.5h。称取化合物3(0.31g,1.0mmol)溶于5mL的1,4-二氧六环与二氯甲烷的混合溶液(V/V＝1/1)中，在0℃下将其滴进上述溶液中后转移至室温反应5h(TLC检测反应完毕)。将反应液浓缩至3mL后滴加到20mL水溶液中搅拌，有大量的白色固体生成。过滤，干燥得粗品(E)-3-(4-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3,5-二氟苯基)丙烯腈5。然后在乙酸乙酯-石油醚中重结晶得化合物5，收率84％。ESI-MS:m/z 336.1[M+1]+.C17H14ClN3O2(335.03).
实施例4.目标化合物SA4-5的合成
称取化合物5(0.33g,1.0mmol)，2-氟-4-氨基苯腈或5-氨基吡啶甲腈(1.2mmol)，醋酸钯(0.02g,0.1mmol)，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(0.06g,0.1mmol)与碳酸铯(0.65g,2mmol)加入于15mL的1,4-二氧六环中，在氮气保护的条件下加热回流12h。待反应冷却到室温以后，加硅藻土过滤，滤液蒸干。然后加入乙酸乙酯溶解，饱和食盐水萃取(3×5mL)，分取有机层，用无水硫酸钠干燥。快速柱层析分离得到目标化合物，进而在乙酸乙酯-石油醚体系中重结晶得到目标化合物SA4-5。
目标化合物SA4-5，结果如下：
Figure BDA0003725514230000101
操作同上，所不同的是使用2-氟-4-氨基苯腈。产物为(E)-4-((4-(4-(2-氰基乙烯基)-2,6-二氟苯氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)-2-氟苯腈(SA4)，白色固体，收率：69％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.66(s,1H,NH),7.79(d,J＝8.8,2H,C3,C5-Ph”-H),7.73(d,J＝16.7,1H,ArCH＝),7.65(d,J＝8.2,1H,C6-Ph’-H),7.51(s,1H,C3-Ph’-H),7.28(d,J＝8.2,1H,C5-Ph’-H),6.69(d,J＝16.7,1H,＝CHCN),5.18(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.99(s,2H,C5-dihydrofuro-H).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ175.48,164.74,162.24,162.13(JCF＝1.0Hz),159.51,156.53,156.49,154.05,154.01,148.24,146.86,146.74,134.19,134.10,134.04,129.72,129.56,118.56,115.29(JCF＝1.1Hz),115.05,112.75,112.53,107.15,104.88,104.63,100.50,99.44,91.78,91.63,72.32,69.28.ESI-MS:m/z436.2[M+1]+.C22H12F3N5O2(435.09).
Figure BDA0003725514230000102
操作同上，所不同的是使用5-氨基吡啶甲腈。产物为(E)-5-((4-(4-(2-氰基乙烯基)-2,6-二氟苯氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶甲腈(SA5)，白色固体，收率：73％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.56(s,1H,NH),8.74(s,1H,C6-Ph’-H),7.80-7.75(m,2H,C3,C4-Ph’-H),7.74(d,J＝16.6,1H,ArCH＝),7.43(s,2H,C3,C5-Ph”-H),6.69(d,J＝16.7,1H,＝CHCN),5.17(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.99(s,2H,C5-dihydrofuro-H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ169.15,162.17,161.10(JCF＝1.0Hz),159.63,156.45,148.67,148.12,141.99,140.15,138.05,137.96,130.26,129.35,124.55,119.59,118.61,117.87,112.71,100.61.ESI-MS:m/z 419.3[M+1]+.C21H12F2N6O2(418.10).
实施例5.4'-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3',5'-二甲基-[1,1'-联苯]-4-腈9的合成
称取4-碘-2,6-二甲基苯酚6(0.25g,1.0mmol)，(4-氰基苯基)硼酸(0.18g,1.2mmol)，四(三苯基膦)钯(0.02g,0.1mmol)，与碳酸钠(0.21g,2mmol)加入于15mL的N,N-二甲基甲酰胺和1mL水的混合溶液中，在氮气保护的条件下加热回流10h。待反应冷却到室温以后，加硅藻土过滤，滤液用饱和食盐水萃取(3×5mL)，分取有机层，用无水硫酸钠干燥。快速柱层析分离得到目标化合物，进而在乙酸乙酯-石油醚体系中重结晶得到化合物4'-羟基-3',5'-二甲基-[1,1'-联苯]-4-甲腈7，收率64％。ESI-MS:m/z 224.3[M+1]+.C15H13NO(223.10).
称取化合物7(2.23g,10mmol)和碳酸钾(1.70g,12mmol)于30mL的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，室温搅拌15分钟，然后加入2,4-二氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶(1,1.90g,10mmol)继续室温搅拌5h(TLC检测反应完毕)。此时有大量的白色固体生成，慢慢地向其中加入25mL冰水，过滤，真空干燥箱干燥，得到白色固体即为化合物4'-((2-氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3',5'-二甲基-[1,1'-联苯]-4-腈9，收率93％。ESI-MS:m/z 378.1[M+1]+.C21H16ClN3O2(377.09).
实施例6.目标化合物SA6-8的合成
称取化合物9(0.37g,1.0mmol)，4-氨基苯腈或2-氟-4-氨基苯腈或5-氨基吡啶甲腈(1.2mmol)，醋酸钯(0.02g,0.1mmol)，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(0.06g,0.1mmol)与碳酸铯(0.65g,2mmol)加入于15mL的1,4-二氧六环中，在氮气保护的条件下加热回流12h。待反应冷却到室温以后，加硅藻土过滤，滤液蒸干。然后加入乙酸乙酯溶解，饱和食盐水萃取(3×5mL)，分取有机层，用无水硫酸钠干燥。快速柱层析分离得到目标化合物，进而在乙酸乙酯-石油醚体系中重结晶得到目标化合物SA6-8。
目标化合物SA6-8，结果如下：
Figure BDA0003725514230000121
操作同上，所不同的是使用4-氨基苯腈。产物为(4'-((2-((4-氰基苯基)氨基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3',5'-二甲基-[1,1'-联苯]-4-腈(SA6)，白色固体，收率：46％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H,NH),7.97-7.54(m,4H,C8,C9,C11,C12-biphenyl-H),7.53-7.45(m,2H,C3,C5-biphenyl-H),7.39(d,J＝8.5Hz,2H,C2,C6-Ph-H),7.21(d,J＝8.5Hz,2H,C3,C5-Ph-H),5.09(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.94(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.18(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ163.0,160.1,153.4,150.5,145.0,144.4,137.5,136.3,134.1,133.0,131.8,127.9,121.1,119.7,118.6,113.7,110.4,106.5,102.9,96.0,42.0,16.6.ESI-MS:m/z 460.4[M+1]+.C28H21N5O2(459.17).
Figure BDA0003725514230000122
操作同上，所不同的是使用2-氟-4-氨基苄腈。产物为4'-((2-((4-氰基-3-氟苯基)氨基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-4-基)氧基)-3',5'-二甲基-[1,1'-联苯]-4-腈(SA7)，白色固体，收率：52％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.53(s,1H,NH),7.95-7.90(m,4H,C8,C9,C11,C12-biphenyl-H),7.68-7.48(m,2H,C3,C5-biphenyl-H),7.54(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H,C6-Ph-H),7.44(d,J＝2.3Hz,1H,C2-Ph-H),7.41(d,J＝8.9Hz,1H,C5-Ph-H),5.14(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.98(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.18(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ165.9,163.4,156.0(JCF＝1.3Hz),145.2,144.6,137.8,134.5,133.2,127.9,121.3,119.7,118.2,116.3,110.7,99.5,84.4,84.2,16.6.ESI-MS:m/z 478.4[M+1]+.C28H20FN5O2(477.16).
Figure BDA0003725514230000131
操作同上，所不同的是使用5-氨基吡啶甲腈。产物为5-((4-((4'-氰基-3,5-二甲基-[1,1'-联苯]-4-基)氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶甲腈(SA8)，黄色固体，收率：58％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.38(s,1H,NH),8.65(s,2H,C3,C5-biphenyl-H),7.92(d,J＝2.0,1H,C6-Ph-H),7.89-7.56(m,4H,C8,C9,C11,C12-biphenyl-H),7.50(d,J＝8.5,1H,C3-Ph-H),6.87(dd,J＝8.5,2.3,1H,C4-Ph-H),5.04(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.90(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.11(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ163.11,159.94,150.32,148.67,144.55,141.97,140.71,138.05,136.51,133.29,131.71,130.26,128.06,124.36,119.59,118.62,117.87,110.45,72.36,16.63.ESI-MS:m/z 461.4[M+1]+.C27H20N6O2(460.16).
实施例7.2-氯-4-((4'-氟-3,5-二甲基-[1,1'-联苯]-4-基)氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶10的合成
称取4-碘-2,6-二甲基苯酚6(0.25g,1.0mmol)，(4-氟苯基)硼酸(0.17g,1.2mmol)，四(三苯基膦)钯(0.02g,0.1mmol)，与碳酸钠(0.21g,2mmol)加入于15mL的N,N-二甲基甲酰胺和1mL水的混合溶液中，在氮气保护的条件下加热回流10h。待反应冷却到室温以后，加硅藻土过滤，滤液用饱和食盐水萃取(3×5mL)，分取有机层，用无水硫酸钠干燥。快速柱层析分离得到目标化合物，进而在乙酸乙酯-石油醚体系中重结晶得到化合物4'-氟-3,5-二甲基-[1,1'-联苯]-4-醇8，收率56％。ESI-MS:m/z 217.4[M+1]+.C14H13FO(216.10).
称取化合物8(2.16g,10mmol)和碳酸钾(1.70g,12mmol)于30mL的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液中，室温搅拌15分钟，然后加入2,4-二氯-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶(1,1.90g,10mmol)继续室温搅拌5h(TLC检测反应完毕)。此时有大量的白色固体生成，慢慢地向其中加入25mL冰水，过滤，真空干燥箱干燥，得到白色固体即为化合物2-氯-4-((4'-氟-3,5-二甲基-[1,1'-联苯]-4-基)氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶10，收率88％。ESI-MS:m/z 371.2[M+1]+.C20H16ClFN2O2(370.09).
实施例8.目标化合物SA9-10的合成
称取化合物10(0.37g,1.0mmol)，2-氟-4-氨基苯腈或5-氨基吡啶甲腈(1.2mmol)，醋酸钯(0.02g,0.1mmol)，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(0.06g,0.1mmol)与碳酸铯(0.65g,2mmol)加入于15mL的1,4-二氧六环中，在氮气保护的条件下加热回流12h。待反应冷却到室温以后，加硅藻土过滤，滤液蒸干。然后加入乙酸乙酯溶解，饱和食盐水萃取(3×5mL)，分取有机层，用无水硫酸钠干燥。快速柱层析分离得到目标化合物，进而在乙酸乙酯-石油醚体系中重结晶得到目标化合物SA9-10。
目标化合物SA9-10，结果如下：
Figure BDA0003725514230000141
操作同上，所不同的是使用2-氟-4-氨基苯腈。产物为2-氟-4-((4-((4'-氟-3,5-二甲基-[1,1'-联苯]-4-基)氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)苯腈(SA9)，棕色固体，收率：50％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.46(s,1H,NH),7.68(m,4H,C8,C9,C11,C12-biphenyl-H),7.47(s,2H,C3,C5-biphenyl-H),7.44(s,1H,C6-Ph-H),7.26(d,J＝8.7,1H,C3-Ph-H),7.23-7.17(m,1H,C4-Ph-H),5.05(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.90(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.09(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ174.04,164.83,163.51,163.12,162.33(JCF＝1.1Hz),161.08,159.80,149.27,147.32,147.20,137.46,136.56,133.77,131.15,129.09,129.01,127.52,116.23,116.02,115.17,115.08,107.16,104.77,104.51(JCF＝1.2Hz),91.19,91.03,72.31,69.54,16.64.ESI-MS:m/z 471.4[M+1]+.C27H20F2N4O2(470.16).
Figure BDA0003725514230000151
操作同上，所不同的是使用5-氨基吡啶甲腈。产物为5-((4-((4'-氟-3,5-二甲基-[1,1'-联苯]-4-基)氧基)-5,7-二氢呋喃[3,4-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶甲腈(SA10)，黄色固体，收率：55％。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.38(s,1H,NH),8.54(s,2H,C3,C5-biphenyl-H),7.92(d,J＝2.6,1H,C6-Ph-H),7.70(d,J＝8.6,2H,C8,C12-biphenyl-H),7.50(d,J＝8.5,1H,C3-Ph-H),7.25(d,J＝8.8,2H,C9,C11-biphenyl-H),6.87(dd,J＝8.5,2.7,1H,C4-Ph-H),5.02(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.89(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.09(s,6H,CH3).13C NMR(100MHz,DMSO-d6)δ174.02,163.22,161.11,159.95,149.30,148.67,141.98,140.73,138.05,137.45,136.57,131.32,130.26,129.30,129.21,129.13,127.56,124.33,123.89,119.59,118.61,118.48,117.87(JCF＝1.3Hz),116.25,116.04,107.27,72.35,69.54,16.62.ESI-MS:m/z 454.3[M+1]+.C26H20FN5O2(453.16).
实施例9.化合物SA2·HCl的合成
称取SA2(100mg,0.24mmol)溶于4mL EA/DCM混合溶液中(V/V＝1/1)中，在0℃下搅拌，加入氯化氢乙醇溶液(1.6mL,4.8mmol)。搅拌2小时后形成白色固体。过滤，滤渣用乙酸乙酯洗涤，得到SA2·HCl。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝11.24(s,1H,NH),7.89(d,J＝16.7,1H,ArCH＝),7.72(d,J＝8.3,1H,C6-Ph’-H),7.63(s,2H,C3,C5-Ph”-H),7.44(d,J＝8.5,1H,C5-Ph’-H),6.69(d,J＝16.7,1H,＝CHCN),6.02(s,1H,C3-Ph’-H),5.38(s,2H,C7-dihydrofuro-H),4.99(s,2H,C5-dihydrofuro-H),2.15(s,6H,CH3).ESI-MS:m/z 428.2[M+1]+.SA2 C24H18FN5O2(427.14).
实施例10：目标化合物的体外抗HIV活性测试实验
测试原理
化合物体外抗HIV活性筛选采用MTT法。MTT全称为溴化-3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基四唑氮(商品名：噻唑蓝)，可用于检测细胞的存活和生长。检测原理为：MTT可以与活的细胞内琥珀酸脱氢酶结合还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒沉积在细胞中，而死细胞并无此功能。二甲基亚砜可以溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪检测其在590nm下的吸光度(A)值可以间接的反映活细胞的数量。在一定的细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。
由于HIV感染的MT-4细胞在一定时间内(5-7天)会发生病变，因此向HIV感染的MT-4细胞悬浊液中加入适当浓度的待检测化合物溶液，经过一段时间(5-7天)的培养后，用MTT分析法测定MT-4细胞活力，得到保护50％细胞免于细胞病变的药物浓度(EC50)即可得出目标化合物的抗HIV的活性。
测试材料和方法
(1)HIV-1(IIIB)、各种HIV-1耐药株：由比利时鲁汶大学医学院Rega研究所提供。
(2)MT-4细胞：由比利时鲁汶大学医学院Rega研究院提供。
(3)MTT：购自美国Sigma公司。
(4)样品处理：样品临用前溶于DMSO配成适当浓度，并用双蒸水作5倍稀释，各5个稀释度。
(5)阳性对照药：依曲韦林(ETR)。
(6)测试方法：样品稀释后加入到HIV感染MT-4细胞悬浊液中，经过一段时间后用MTT比色法测定细胞活力，用酶标仪中记录在590nm下的吸光度(A)值,计算出EC50。
(7)MTT比色法：加入样品溶液培养一段时间后，向每孔加入MTT溶液(5mg/mL)20μL，继续培养若干小时后，弃染色液，并向每孔加入150μL DMSO，充分混合，用酶标仪中测定590nm下的吸光度(A)值。
实验方法
在96孔细胞培养板上，加入50μL含1×104MT-4细胞培养液，再分别加入20μL感染HIV-1的MT-4细胞混悬液(每毫升含100倍CCID50)，然后加入不同浓度的待测化合物溶液或者阳性对照药物，每个浓度设计3个复孔。接着细胞在5％CO2氛围，37℃下培养5天，向每个孔中加入20μL(5mg/mL)MTT溶液，继续培养2小时，然后加入DMSO，使用酶标仪测定反应溶液在540nm处的吸收度，计算化合物不同浓度下的细胞增值率P％。同时设空白和药物对照组和阳性药物对照组，由此计算化合物保护50％的细胞免于HIV诱导的细胞病变所需浓度(EC50)。
按照上述实验方法对合成的部分二芳基-二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物进行了细胞水平的抗HIV-1野生株IIIB，单突变株L100I、K103N、Y181C、Y188L、E138K以及双突变株F227L/V106A、RES056(K103N/Y181C)的活性筛选，活性结果如表1所示。
实施例11：目标化合物的体外抑制HIV RT活性测试实验
测试原理：
本实验采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定目标化合物对重组RT的逆转录酶活性的抑制作用。逆转录酶(RT)以Poly(A)为模板，oligo(dT)15为引物，生物素标记和地高辛标记的dNTPs为底物，完成引物的延伸过程。逆转录反应完成后，生物素和地高辛双标记的DNA分子结合到涂有链霉亲和素的微孔板上。随后加入过氧化物酶连接的地高辛抗体，此连接片段将与DNA结合。最后，加入ABTS，过氧化物酶作用于ABTS底物，发生颜色反应，用酶标仪检测其吸光度O.D.值，计算抑制活性IC50值。
测试材料：
HIV-1逆转录酶试剂盒(Recombinant HIV-1RT kit,Roche)，微量加样器，EP管，分析纯DMSO，待测化合物，阳性对照药物依曲韦林。
实验方法：
RT活性测试采用Roche逆转录酶试剂盒，根据说明书中的操作步骤根据ELSIA原理测试化合物对WT RT抑制剂活性，基本实验步骤如下：用裂解缓冲液将4-6ng HIV-1RT配成一定浓度的溶液(20μL每孔)，置于PCR反应管中。向其中加入20μL以裂解缓冲液稀释而成的抑制剂溶液和20μL反应混合液(模版、引物、dNTP的混合反应液)，37℃条件孵育1h。1h后将PCR管中的样品液(60μL)移入到包被、封闭好并涂上链酶亲和素的板孔中，37℃孵育1h。用250μL冲洗缓冲液洗孔5次(30s/次)后，仔细除去冲洗液，随后向每孔加入20 0μL过氧化物酶连接的地高辛抗体溶液，37℃反应1h。冲洗液冲洗板孔，除尽，最后加入200μL ABTS底物溶液，15℃至25℃之间孵育直至变为绿色并可供检测。酶标仪测出样品液在405nm处吸光度值。
抑制率计算：抑制率％＝[阴性对照组O.D.值(有RT无抑制剂)-抑制剂组O.D.值(有RT和抑制剂)]/[抑制剂组O.D.值(有RT和抑制剂)-空白组O.D.值[无抑制剂，无RT])×100％。由不同浓度下的抑制率，计算化合物对逆转录酶的抑制活性IC50值。同时设药物对照组依曲韦林(ETR)实验。活性结果如表1所示。
表1部分二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物和阳性药物的抗HIV-1活性及抑制HIV RT活性
Figure BDA0003725514230000171
Figure BDA0003725514230000181
注：aEC50:保护50％感染HIV-1的MT-4细胞免于细胞病变的化合物浓度；
bIC50:HIV-1RT酶活性被抑制50％时的化合物浓度。
目标化合物抗野生型HIV-1活性的构效关系可总结如下：
R取代基对化合物活性的影响：R取代基为氰基乙烯基的化合物SA1-5活性优于R取代基为取代芳基的化合物SA6-10的活性。当R取代基为氰基乙烯基时，Ⅰ系列化合物活性优于Ⅱ系列化合物(SA1(EC50＝2.20nM)≈SA2(EC50＝2.22nM)<SA3(EC50＝2.40nM),SA4(EC50＝1.67nM)<SA5(EC50＝5.77nM)；当R取代基为取代芳基时，Ⅱ系列化合物活性优于Ⅰ系列化合物(SA8(EC50＝11.4nM)<SA6(EC50＝41.9nM)<SA7(EC50＝95.7nM),SA10(EC50＝28.6nM)<SA9(EC50＝169nM)。
其中化合物SA2表现出最好的抗病毒活性，其对HIV-1野生株、单突变株及双突变株的活性均优于已上市药物依曲韦林。因此，二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物具有进一步研发的价值，可作为抗HIV-1的先导化合物加以利用。
实施例12：目标化合物SA2的分子模拟分析
利用计算机辅助药物设计软件Maestro(Maestro,
Figure BDA0003725514230000182
LLC,New York,NY,2019)对目标化合物SA2进行了分子对接(PDB code：6c0j和6c0r)，并用Pymol软件显示对接结果。对接模式图如图1所示。
由图1可见，化合物SA2以经典的马蹄形构象结合在NNIBP中，并与口袋中的氨基酸残基形成一系列相互作用力：(1)化合物SA2左翼的(E)-3-(4-羟基-3,5-二甲基苯基)丙烯腈可伸入由Tyr181、Tyr188、Trp229、Phe227等氨基酸残基组成的疏水性亚口袋中，并与这些氨基酸形成π-π堆积和疏水相互作用；(2)中心5,7-二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶环上二位N原子与右翼NH linker链可以作为氢键受体与供体与Lys101的主链形成氢键相互作用；(3)中心5,7-二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶的O原子可以与Glu138的主链形成水桥介导的氢键作用力；(4)右翼的2-氟-4-氨基苯腈伸向蛋白-溶剂界面，与Lys103和Tyr318的亲脂性侧链形成范德华作用力，此外苯环上3位的氟原子与Tyr318的主链形成额外的氢键作用力。而SA2结合于RES056 RT时，Tyr181-Cys181的突变导致Tyr181与SA2左翼之间的π-π堆积作用大大降低，这可能是其效力降低的原因；然而由于其右翼的氟原子取向的灵活性，SA2右翼的结合力并未受Lys103-Asn103突变的影响，推测这也是化合物SA2具有高抗耐药性的主要原因。
实施例13：化合物SA2及其盐酸盐SA2·HCl的溶解度测试
测试材料
待测化合物、DMSO、
Figure BDA0003725514230000192
MS3数字微型振荡器、高效液相色谱(岛津，LC-20AT)测定化合物溶解度。
实验方法
(1)配制化合物的水饱和溶液。用DMSO将化合物溶解，配成浓度为10mg/mL的母液。取10μL母液加到1mL纯净水中，
Figure BDA0003725514230000193
MS3数字微型振荡器(最大转数3000rpm)振荡2h,平衡后肉眼观察有无化合物析出。如有，说明已为化合物的水饱和溶液，可进行后续操作；反之，则说明还未饱和，化合物溶解度较大，应增大母液浓度。
(2)配制标准曲线溶液。在上步估计的基础上，配制等倍数稀释的标曲溶液(5个浓度梯度)，以让溶解度包含在标曲浓度范围内为宜。
(3)水溶解度测定：先进行标曲溶液的测试，测定不同浓度下的吸收峰面积A，建立标准曲线，方程为A＝kC+b；接着测定化合物饱和溶液的吸收峰面积A饱和(至少重复两次)，代入方程，即可计算相应浓度，也就是饱和溶解度S。测试结果如表2所示。
表2：SA2和SA2·HCl的溶解度
Figure BDA0003725514230000191
实施例13：化合物SA2·HCl的体外药代动力学实验
材料和仪器
色谱甲醇购自Sigma-Aldrich，肝素购自山东大学齐鲁医院，纯净水为哇哈哈集团生产。Eppendorf 5415D型离心机；Agilent 1200LC/MSD液相色谱质谱联用仪；移液枪(IKA)；小鼠灌胃针。健康雄性ICR小鼠，体重18-20g，购自山东大学实验动物中心。动物在适宜条件下(温度：25±1℃，湿度60±5％)于饲养室饲养1周，期间自由进食和进水。实验前禁食12h，自由进水。实验完毕后所有动物均按照医药科学委员会动物实验职业道德的规定处死动物。
试验方法
16只雄性ICR小鼠随机分成2组，每组8只。给药前禁食12h，自由饮水。SA2·HCl单次口服剂量为10mg/kg，在给药前以70％的PEG400和30％的生理盐水配制成给药制剂。灌胃后分别在5min,15min,30min,1h,2h,4h,8h和12h，经眼球后静脉采血约0.2mL，血样置于肝素化的离心管中，离心15min后，取上清血浆样品保存于-20℃备用。对SA2·HCl进行尾静脉注射试验，剂量2mg/kg。注射后分别在15min,30min,1h,2h,4h,8h,10h和12h，经眼球后静脉采血约0.2mL，血样处理同前。
用LC-MS分析方法进行血浆样品中SA2·HCl浓度的分析测定。使用DAS 2.0药代动力学程序的非房室模型对测定的血浆药-时数据进行拟合分析，计算主要药代动力学参数Cmax、AUC、Tmax、T1/2、F等参数，并绘制出平均血药浓度-时间曲线。按照如下公式进行生物利用度的计算：
F(％)＝[AUC(po)×Div]/[AUC(iv)×Dpo]×100％
AUC：曲线下面积；D：给药剂量(mg/kg)
实验结果如表3所示。
表3：SA2·HCl的成药性评价表
Figure BDA0003725514230000201
实施例14：化合物SA2·HCl的急性毒性实验
材料和仪器
天平，小鼠灌胃针。健康雄性昆明小鼠，体重18-20g，购自山东大学实验动物中心。动物在适宜条件下(温度：25±1℃，湿度60±5％)于饲养室饲养1周，期间自由进食和进水。实验前禁食12h，自由进水。实验完毕后所有动物均按照医药科学委员会动物实验职业道德的规定处死动物。
试验方法
20只雄性昆明小鼠随机分为2组，每组10只。给药前禁食12h，自由饮水。其中一组单次灌胃给药SA2·HCl，剂量为2000mg/kg，在给药前以70％的PEG400和30％的生理盐水配制成给药制剂，另一组为对照组。在接下来的7天里，观察实验小鼠是否出现任何异常行为，每天称量小鼠体重。
实验结果如图2所示。

Claims (6)

1.一种二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于是具有如下通式I或II所示的结构：
Figure FDA0003725514220000011
其中，
R为：CN，CH＝CHCN，芳基或取代芳基，所述取代基分别独立选自氢，氰基，硝基，氨基，羟基，卤素，磺酸基，三氟甲基，C1～6烷基，C1～6烷氧基，C3～6环烷基，C3～6环烷氧基，C3～6环烷氨基；
X为：H或卤素；
R1为：H，氟或三氟甲基；
X1，X2，X3，X4为：C或者N，且至少有一个为N。
2.如权利要求1所述的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物，其特征在于为如下之一：
Figure FDA0003725514220000012
Figure FDA0003725514220000021
Figure FDA0003725514220000031
3.如权利要求1所述的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物，其特征在于所述化合物的药学上可接受的盐是钠盐、盐酸盐、硫酸盐、酒石酸盐或柠檬酸盐，以及药学上可接受的前体药物或衍生物。
4.如权利要求1所述的二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物的制备方法，其特征在于步骤包括：以2,4-二氯-5,7-二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶1为起始原料，首先在N,N-二甲基甲酰胺溶液中与取代苯酚发生亲核取代反应生成中间体2；然后中间体2与氟原子或三氟甲基取代的对氰基苯胺发生布赫瓦尔德-哈特维希(Buchwald-Hartwig)偶联反应生成目标产物I；中间体2与吡啶胺或者嘧啶胺发生Buchwald-Hartwig偶联反应生成目标产物Ⅱ；
合成路线一如下：
Figure FDA0003725514220000032
试剂及条件:(i)取代苯酚，N,N-二甲基甲酰胺，碳酸钾，室温；(ii)氟原子或三氟甲基取代的对氰基苯胺，醋酸钯，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽，碳酸铯，90℃，二氧六环。
合成路线二如下：
Figure FDA0003725514220000041
试剂及条件:(i)取代苯酚，N,N-二甲基甲酰胺，碳酸钾，室温；(ii)吡啶胺或者嘧啶胺，醋酸钯，4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽，碳酸铯，90℃，二氧六环；
所述的取代苯酚的取代基为氢，氰基，硝基，氨基，羟基，卤素，磺酸基，三氟甲基，C1～6烷基，C1～6烷氧基，C3～6环烷基，C3～6环烷氧基，C3～6环烷氨基；
R、X、R1、X1、X2、X3、X4同权利要求1中通式I、Ⅱ所示。
5.一种如权利要求1-3任一项所述二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物在制备抗艾滋病毒药物中的应用。
6.一种药物组合物，包含权利要求1-3任一项所述二芳基二氢呋喃并[3,4-d]嘧啶类化合物和一种或多种药学上可接受载体或赋形剂。
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