CN114942280A - 一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法 - Google Patents

一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法 Download PDF

Info

Publication number
CN114942280A
CN114942280A CN202210402134.0A CN202210402134A CN114942280A CN 114942280 A CN114942280 A CN 114942280A CN 202210402134 A CN202210402134 A CN 202210402134A CN 114942280 A CN114942280 A CN 114942280A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sample
amino
solution
liquid chromatography
sulfate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202210402134.0A
Other languages
English (en)
Inventor
吴思霖
简龙海
毛北萍
张凯
许勇
王欣美
郑荣
彭兴盛
王柯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Original Assignee
SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL filed Critical SHANGHAI INSTITUTE FOR FOOD AND DRUG CONTROL
Priority to CN202210402134.0A priority Critical patent/CN114942280A/zh
Publication of CN114942280A publication Critical patent/CN114942280A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

本发明提供了一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法，包括如下步骤：标准工作溶液的配制；样品前处理制备成样品工作液；采用高效液相色谱法测定染发剂的含量和/或采用高效液相色谱‑串联质谱法进行确证；该12种染发剂包括1‑羟乙基‑4，5‑二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2‑氨基‑6‑氯‑4‑硝基苯酚、羟苯并吗啉、2‑氨基‑4‑羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2‑甲基‑5‑羟乙氨基苯酚、1，3‑双‑(2，4‑二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5‑氨基‑6‑氯‑O‑甲酚、碱性黄87号、碱性红51号和HC黄2号。本发明所提供的方法能够大幅弥补现有化妆品中这12种染发剂的方法空白，测定结果接近真实值，且回收率可以满足要求，因此，具有广阔的应用前景与良好的市场潜力。

Description

一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法
技术领域
本发明涉及化妆品检测分析技术领域，具体涉及一种化妆品中12种染发剂(1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号、HC黄2号)的含量测定和质谱确证方法。
背景技术
随着居民生活水平的日益提升，我国染发类产品的市场需求也日趋增加。但目前市场上的染发产品质量状况不容乐观，2020年国家药监局共通告不合格化妆品162批次，其中染发、烫发类产品122批次，占比高达75.31％，为主要不合格品种。染发产品按作用机理可分为氧化型和非氧化型，其中氧化型染发剂因染色效果好、色调范围宽、持续时间长等优点成为目前应用最为广泛的染发产品，其中又以对苯二胺(PPD)类染发剂应用最为广泛。此类染发剂存在致敏、致癌等潜在危害。
为了有效地对市售染发产品进行监督检查，我国建立了多个染发剂测定标准，检测手段主要是高效液相色谱法或液相色谱-质谱法[1-2]，包括：GB/T 24800.12-2009《化妆品中对苯二胺、邻苯二胺和间苯二胺的测定》；QB/T 1863-1993《染发剂中对苯二胺的测定气相色谱法》；SN/T 2110--2008《进出口染发剂中2-氨基-4-硝基苯酚和2-氨基-5-硝基苯酚的测定方法》；《化妆品安全技术规范》(2015年版)中的“对苯二胺等8种物质高效液相色谱法”和“对苯二胺等32种物质高效液相色谱法”；GB/T 35824-2018《染发类化妆品20种禁限用染料成分的测定高效液相色谱法》。
除了上述标准中的染发剂外，目前仍有较多准用染发剂尚未建立相关检测方法，且通过对近百批市售染发产品进行配方调研发现，产品中有添加《化妆品安全技术规范》第四章7.2项下标准未覆盖的染发剂情况，具体包括：1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、6-甲氧基-2-甲氨基-3-氨基吡啶盐酸盐(HC蓝7号)、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号、HC黄2号共计12种。
因此，急需研发出一种全新的提取分离方法及后续的检测方法，从染发产品中高效分离提取出1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐等12种染发剂，并进行定量分析与阳性样品确认分析，以确保结果准确可靠，为化妆品的监管提供技术支持。
参考文献：
[1]尤海丹.高效液相色谱法测定染发剂中14种染料[J].分析仪器，2018，9(5)：45-48.
[2]李红英，黄程，丁晓萍等.高效液相色谱法测定染发剂中21种禁限用成分[J].香料香精化妆品，2019，8(4)：28-46.
发明内容
为了解决现有技术中无法测定1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐等12种染发剂，同时可能存在假阳性的技术问题，本发明提供了一种化妆品中12种染发剂(1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号、HC黄2号)的含量测定和质谱确证方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供了一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法，该12种染发剂包括1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号和HC黄2号；
上述方法包括如下步骤：
步骤一，标准工作溶液的配制：精密称取对照品，采用包括亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇的混合溶液进行溶解，并定容，制备成各个对照品的浓度均为200～1000μg·mL-1的混合对照品储备液；然后用亚硫酸氢钠水溶液稀释制得一系列梯度浓度的标准工作溶液；
步骤二，样品前处理：准确称取样品，采用包括亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇的混合溶液进行溶解，涡旋混匀后进行超声提取，冷却后加入亚硫酸氢钠水溶液定容，混匀，离心，取上清液经微膜过滤制备成样品工作液；
步骤三，检测：采用高效液相色谱法测定染发剂的含量和/或采用高效液相色谱-串联质谱法进行确证。
为了优化上述方法，本发明采取的技术措施还包括：
进一步地，上述包括亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇的混合溶液由亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇按照体积比为1∶1～2配制而成；该亚硫酸氢钠水溶液的浓度为1.2～2.5g/L。
进一步地，上述一系列梯度浓度分别为1、5、20、50、100、200μg·mL-1。
进一步地，步骤二中样品前处理还包括设置空白对照样品。
进一步地，超声提取的条件为：冰浴，10～20min。
进一步地，离心的条件为：3000～5000rpm，5～10min。
进一步地，上述微膜的孔径为0.2～0.45μm。
进一步地，上述高效液相色谱的测定条件如下：
色谱柱：菲罗门Titank C18，4.6mm×250mm，5μm；
流动相：A相为10mmol/L磷酸氢二钾溶液，B相为甲醇，C相为乙腈；
梯度洗脱程序：0～5min，2％B，2％C；5～6min，2％～20％B，2％C～0％C；6～18min，20％～25％B；18～18.1min，25％～6％B，0％～19％C；18.1～37min，6％～8％B，19％～27％C；37～37.1min，8％～10％B，27％～40％C；37.1～47min，10％B，40％C；47～47.1min，10％～2％B，40％～2％C；47.1～50min，2％B，2％C；
柱温为25～40℃；
流速为0.8～1.5mL·min-1；
进样量为3～7μL。
进一步地，上述高效液相色谱-串联质谱法采用液相色谱-四级杆-飞行时间质谱仪，其检测条件如下：
(1)色谱条件
色谱柱：AgilentPoroshell 120Bonus-RP C18柱，3.0mm×150mm，2.7μm；
流动相：A相为5mmol/L乙酸铵溶液，B相为乙腈；
梯度洗脱程序为：0～2min，100％A；2～8min，100％～80％A；8～15min，80％～30％A；15～15.1min，30％～5％A；15.1～18min，5％A；18～22min，100％A：
柱温为25～35℃；
流速为0.2～0.4mL·min-1；
进样量为1.4～2.4μL；
(2)质谱条件
电喷雾离子源，正离子电离模式(ESI+)及负离子电离模式(ESI-)；
毛细管电压：2.0～3.0kV；
干燥气温度：200～300℃；干燥气流量：10～16L·min-1；
鞘气温度：350～400℃；鞘气流速：12L～18·min-1；
碎裂电压：300～380V；
检测方式：多反应监测模式。
本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
1)通过本发明提供的全新的提取方法，能够快速、完全、准确地提取化妆品中的1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号、HC黄2号；
2)采用本发明的提取方法作为前处理，然后实施本发明所述的液相色谱分析检测方法，发现样品中1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐等12种染发剂的回收率可以满足要求；
3)采用本发明的液相色谱-串联质谱确认方法，可以对疑似阳性样品进行进一步的结果确证，避免假阳性，确保结果准确可靠。
4)本发明所提供的提取方法、液相色谱定量分析方法以及液质确认方法能够大幅弥补现有化妆品中1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐等12种染发剂的方法空白，测定结果接近真实值，因此，具有广阔的应用前景与良好的市场潜力。
附图说明
图1是本发明一实施例中浓度为100μg·mL-1的包括12中染发剂的混合对照品色谱图；
图2是本发明一实施例中12种染发剂的多反应监测色谱图；
其中，1：1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐；2：羟乙基对苯二胺硫酸盐；3：2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚；4：羟苯并吗啉；5：2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐；6：HC蓝7号；7：2-甲基-5-羟乙氨基苯酚；8：1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐；9：5-氨基-6-氯-O-甲酚；10：碱性黄87号；11：碱性红51号；12：HC黄2号。
具体实施方式
本发明提供了一种化妆品中12种染发剂(1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号、HC黄2号)的含量测定和质谱确证方法。下面通过具体实施例和附图对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本发明，但是下述实施例并不限制本发明范围。
实施例中方法如无特殊说明的采用常规方法，使用的试剂如无特殊说明的使用常规市售试剂或按常规方法配制的试剂。
实施例1
本实施例提供了一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法，包括如下步骤：
步骤一，标准工作溶液的配制
精密称取1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号、HC黄2号对照品各10mg，分别置于同一10mL棕色量瓶种，以2g/L亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇(1∶1)的混合溶液溶解并定容至10mL，摇匀，配制成浓度为1000μg·mL-1的混合对照品储备液。
标准工作溶液：精密吸取适量混合对照品储备液，用2g/L亚硫酸氢钠水溶液稀释制得质量浓度分别为1、5、20、50、100、200μg·mL-1的系列对照品溶液，所得溶液于4℃保存。
步骤二，样品前处理
称取样品0.5g于50mL具塞比色管中，加2g/L亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇(1∶1)的混合溶液10mL，涡旋1min，冰浴超声提取15min，放冷后加入2g/L的亚硫酸氢钠水溶液至25mL，涡旋30s，充分振摇混匀。5000rpm，离心5min。取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液，同时进行空白试验。
步骤三，使用液相色谱法分别检测标准溶液和样品溶液
将标准工作液与样品工作液分别注入到液相色谱仪中，进行色谱分析，以系列标准工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，通过对比保留时间和标准曲线对化妆品中的染发剂进行定性定量检测，计算样品中染发剂的含量，浓度为100μg·mL-1的包括12中染发剂的混合对照品色谱图如图1所示。其中，高效液相色谱测定条件如下：
色谱柱：菲罗门Titank C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：A相为10mmol/L磷酸氢二钾溶液(磷酸调pH为7.5)，B相为甲醇，C相为乙腈；梯度洗脱程序：0～5min，2％B，2％C；5～6min，2％～20％B，2％～0％C；6～18min，20％～25％B；18～18.1min，25％～6％B，0％～19％C；18.1～37min，6％～8％B，19％～27％C；37～37.1min，8％～10％B，27％～40％C；37.1～47min，10％B，40％C；47～47.1min，10％～2％B，40％～2％C；47.1～50min，2％B，2％C；柱温为35℃；流速为1.0mL·min-1；进样量为5μL。
步骤四，使用质谱法分别检测标准溶液和样品溶液：将标准工作液与样品工作液分别注入到液相色谱-串联质谱仪中，进行质谱分析，对化妆品中的染发剂进行定性检测。其中，检测条件如下：
色谱柱：AgilentPoroshell 120Bonus-RP C18柱(3.0mm×150mm，2.7μm)；流动相：A为5mmol/L乙酸铵溶液，B为乙腈；梯度洗脱程序为：0～2min，100％A；2～8min，100％～80％A；8～15min，80％～30％A；15～15.1min，30％～5％A；15.1～18min，5％A；18～22min，100％A；柱温为30℃；流速为0.3mL·min-1；进样量为2μL。
质谱条件：电喷雾离子源，正离子电离模式(ESI+)及负离子电离模式(ESI-)；毛细管电压：2.0kV；干燥气温度：200℃；干燥气流量：16L·min-1；鞘气温度：400℃；鞘气流速：12L·min-1；碎裂电压：380V；检测方式：多反应监测(MRM)模式。12种染发剂的质谱参数详见下表1。12种染发剂的质谱确证图谱详见图2。
表1 12种染发剂的质谱参数
Figure BDA0003599580750000071
Figure BDA0003599580750000081
注：*：定量离子；1：1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐；2：羟乙基对苯二胺硫酸盐；3：2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚；4：羟苯并吗啉；5∶2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐；6：HC蓝7号；7：2-甲基-5-羟乙氨基苯酚；8∶1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐；9：5-氨基-6-氯-O-甲酚；10：碱性黄87号；11：碱性红51号；12：HC黄2号。
实施例2
本实施例取染发膏空白基质化妆品0.5g于50mL具塞比色管中，分别加标0.25mg·g-1、1mg·g-1和5mg·g-1，同时做平行试验(n＝6)，加入2g/L亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇(1：1)的混合溶液10mL，涡旋1min，冰浴超声提取15min，放冷后加入2g/L的亚硫酸氢钠水溶液至25mL，涡旋30s，充分振摇混匀。5000rpm，离心5min。取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液，测定回收率和RSD。
在本实施例中，所使用的主要仪器、材料与试剂包括：
仪器与设备及试剂：Agilent1260高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器(Agilent公司)；Agilent 6495液相色谱-三重四极杆串联质谱仪(Agilent公司)；Sartorius CP224S和225D-1CN电子天平(赛多利斯公司)；5800型超声仪(BRANSON公司)；MS3涡旋混合器(IKA公司)；5810R型台式离心机(Eppendof公司)；Milli-Q Reference A+型超纯水仪(Millipore公司)。
对照品与试剂：1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐对照品(纯度98％，购自MACKLIN公司)；羟乙基对苯二胺硫酸盐对照品(纯度99％，购自damas-beta公司)；2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚对照品(纯度98％，购自TCI公司)；羟苯并吗啉对照品(纯度95％，购自上海毕得医药公司)；2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐对照品(纯度98％，购自上海毕得医药公司)；HC蓝7号对照品(纯度98％，购自MACKLIN公司)；2-甲基-5-羟乙氨基苯酚对照品(纯度97％，购自上海毕得医药公司)；1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐对照品(纯度98％，购自damas-beta公司)；5-氨基-6-氯-O-甲酚对照品(纯度98％，购自MACKLIN公司)；碱性黄87号对照品(纯度98％，购自BePure公司)；碱性红51号对照品(纯度98.7％，购自BePure公司)；HC黄2号对照品(纯度99.68％，购自上海毕得医药公司)。
乙腈、甲醇、无水乙醇(色谱纯，默克公司)；乙酸铵(色谱纯，Sigma公司)；三水合磷酸氢二钾(分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司)。
标准工作液的配制：精密称取1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、HC蓝7号、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号、HC黄2号对照品各10mg，分别置于同一10mL棕色量瓶种，以2g/L亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇(1∶1)的混合溶液溶解并定容至10mL，摇匀，配制成浓度为1000μg.mL-1的混合对照品储备液。精密吸取适量混合对照品储备液，用2g/L亚硫酸氢钠水溶液稀释制得质量浓度分别为1、5、20、50、100、200μg·mL-1的系列对照品溶液，所得溶液于4℃保存。
色谱条件为：色谱柱：菲罗门Titank C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：A相为10mmol/L磷酸氢二钾溶液(磷酸调pH为7.5)，B相为甲醇，C相为乙腈；梯度洗脱程序见实施例1；柱温为35℃；流速为1.0mL·min-1；进样量为5μL。
使用液相色谱法分别检测标准溶液和样品溶液：将标准工作液与样品工作液分别注入到液相色谱仪中，进行色谱分析，以系列标准工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，通过对比保留时间和标准曲线对化妆品中的染发剂进行定性定量检测，计算样品中染发剂的含量，结果(下表2)显示在低、中、高加标浓度条件下12种染发剂的回收率范围在90.1％～104.5％，相对标准偏差(RSD)为0.4％～4.2％，表明本方法回收率结果良好。
表2回收率试验及其精密度结果(n＝6)
Figure BDA0003599580750000091
Figure BDA0003599580750000101
注：1：1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐；2：羟乙基对苯二胺硫酸盐；3：2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚；4：羟苯并吗啉；5：2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐；6：HC蓝7号；7：2-甲基-5-羟乙氨基苯酚；8：1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐；9：5-氨基-6-氯-O-甲酚；10：碱性黄87号；11：碱性红51号；12：HC黄2号。
实施例3
本实施例对某A厂生产的添加了HC蓝7号、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐以及HC黄2号的染发产品进行提取与检测，具体的实验步骤和结果如下：
准确称取样品0.5g于50mL具塞比色管中，加2g/L亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇(1∶1)的混合溶液10mL，涡旋1min，冰浴超声提取15min，放冷后加入2g/L的亚硫酸氢钠水溶液至25mL，涡旋30s，充分振摇混匀。5000rpm，离心5min。取上清液经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液，同时进行空白试验。
标准工作液的配制：精密称取HC蓝7号、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、HC黄2号对照品各10mg，分别置于同一10mL棕色量瓶种，以2g/L亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇(1∶1)的混合溶液溶解并定容至10mL，摇匀，配制成浓度为1000μg·mL-1的混合对照品储备液。精密吸取适量混合对照品储备液，用2g/L亚硫酸氢钠水溶液稀释制得质量浓度分别为1、5、20、50、100、200μg·mL-1的系列对照品溶液，所得溶液于4℃保存。
①使用色谱法分别检测标准溶液和样品溶液：将标准工作液与样品工作液分别注入到液相色谱仪中，进行色谱分析(色谱条件如实施例1)，以系列标准工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，建立标准曲线，通过对比保留时间和标准曲线对化妆品中的染发剂进行定性定量检测，计算样品中染发剂的含量，结果见表3。
②使用质谱法分别检测标准溶液和样品溶液：将标准工作液与样品工作液分别注入到液相色谱-串联质谱仪中，进行质谱分析(分析条件如实施例1)，对化妆品中的染发剂进行定性检测，结果见表3。
表3样品测定结果
Figure BDA0003599580750000111
可见，液相检出化合物与液质检出化合物一致，与配方、批件标示一致，说明本发明的方法准确可靠，可用于阳性样品验证和实际样品检测。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

Claims (9)

1.一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法，其特征在于，所述12种染发剂包括1-羟乙基-4，5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、羟苯并吗啉、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚硫酸盐、6-甲氧基-2-甲氨基-3-氨基吡啶盐酸盐、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、1，3-双-(2，4-二氨基苯氧基)丙烷盐酸盐、5-氨基-6-氯-O-甲酚、碱性黄87号、碱性红51号和HC黄2号；
所述方法包括如下步骤：
步骤一，标准工作溶液的配制：精密称取对照品，采用包括亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇的混合溶液进行溶解，并定容，制备成各个对照品的浓度均为200～1000μg·mL-1的混合对照品储备液；然后用亚硫酸氢钠水溶液稀释制得一系列梯度浓度的标准工作溶液；
步骤二，样品前处理：准确称取样品，采用包括亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇的混合溶液进行溶解，涡旋混匀后进行超声提取，冷却后加入亚硫酸氢钠水溶液定容，混匀，离心，取上清液经微膜过滤制备成样品工作液；
步骤三，检测：采用高效液相色谱法测定染发剂的含量和/或采用高效液相色谱-串联质谱法进行确证。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述包括亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇的混合溶液由亚硫酸氢钠水溶液和无水乙醇按照体积比为1∶1～2配制而成；所述亚硫酸氢钠水溶液的浓度为1.2～2.5g/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述一系列梯度浓度分别为1、5、20、50、100、200μg·mL-1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤二中样品前处理还包括设置空白对照样品。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，超声提取的条件为：冰浴，10～20min。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，离心的条件为：3000～5000rpm，5～10min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述微膜的孔径为0.2～0.45μm。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的测定条件如下：
色谱柱：菲罗门Titank C18，4.6mm×250mm，5μm；
流动相：A相为10mmol/L磷酸氢二钾溶液，B相为甲醇，C相为乙腈；
梯度洗脱程序：0～5min，2％B，2％C；5～6min，2％～20％B，2％C～0％C；6～18min，20％～25％B；18～18.1min，25％～6％B，0％～19％C；18.1～37min，6％～8％B，19％～27％C；37～37.1min，8％～10％B，27％～40％C；37.1～47min，10％B，40％C；47～47.1min，10％～2％B，40％～2％C；47.1～50min，2％B，2％C；
柱温为25～40℃；
流速为0.8～1.5mL·min-1；
进样量为3～7μL。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱-串联质谱法采用液相色谱-四级杆-飞行时间质谱仪，其检测条件如下：
(1)色谱条件
色谱柱：AgilentPoroshell 120Bonus-RP C18柱，3.0mm×150mm，2.7μm；
流动相：A相为5mmol/L乙酸铵溶液，B相为乙腈；
梯度洗脱程序为：0～2min，100％A；2～8min，100％～80％A；8～15min，80％～30％A；15～15.1min，30％～5％A；15.1～18min，5％A；18～22min，100％A：
柱温为25～35℃；
流速为0.2～0.4mL·min-1；
进样量为1.4～2.4μL；
(2)质谱条件
电喷雾离子源，正离子电离模式及负离子电离模式；
毛细管电压：2.0～3.0kV；
干燥气温度：200～300℃；干燥气流量：10～16L·min-1；
鞘气温度：350～400℃；鞘气流速：12L～18·min-1；
碎裂电压：300～380V；
检测方式：多反应监测模式。
CN202210402134.0A 2022-04-15 2022-04-15 一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法 Pending CN114942280A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210402134.0A CN114942280A (zh) 2022-04-15 2022-04-15 一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210402134.0A CN114942280A (zh) 2022-04-15 2022-04-15 一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114942280A true CN114942280A (zh) 2022-08-26

Family

ID=82906608

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210402134.0A Pending CN114942280A (zh) 2022-04-15 2022-04-15 一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114942280A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115902024A (zh) * 2022-11-28 2023-04-04 甘肃省药品检验研究院 一种染发剂中强还原性禁限用染料的稳定同位素标记与液质联用分析方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20170258695A1 (en) * 2016-03-09 2017-09-14 Beauty & Business S.P.A. Keratin fibre dyeing composition
CN110531011A (zh) * 2019-09-27 2019-12-03 广州广电计量检测股份有限公司 一种2,4-二氨基苯甲醚硫酸盐的检测方法
CN111812265A (zh) * 2020-07-10 2020-10-23 甘肃省药品检验研究院 一种同时测定染发剂中32种染料的检测方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20170258695A1 (en) * 2016-03-09 2017-09-14 Beauty & Business S.P.A. Keratin fibre dyeing composition
CN110531011A (zh) * 2019-09-27 2019-12-03 广州广电计量检测股份有限公司 一种2,4-二氨基苯甲醚硫酸盐的检测方法
CN111812265A (zh) * 2020-07-10 2020-10-23 甘肃省药品检验研究院 一种同时测定染发剂中32种染料的检测方法

Non-Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘玉玲 等: "染发剂中对苯二胺等32种染料检测结果分析", 《食品安全质量检测学报》, vol. 9, no. 5, pages 1149 - 1157 *
卢巧梅;张兰;: "液相色谱-串联质谱法测定食品中甜味剂和抗氧化剂", 《分析测试技术与仪器》, no. 03 *
朱万燕;徐文远;张伟;: "超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法同时快速检测水产品中37种兽药残留", 《食品安全质量检测学报》, no. 02 *
李红英 等: "染发类产品中染发剂的检测及结果分析", 《中国卫生检验杂志》, vol. 30, no. 7, pages 864 - 868 *
杨春兰;王琴;苏涌;夏泉;廖贵益;许杜娟;: "高效液相色谱法测定血浆中霉酚酸及其代谢物分化葡萄糖醛麦草酰胺的浓度", 《中国生化药物杂志》, no. 11 *
段辉;李广;: "RP-HPLC法测定甘肃油松针叶中绿原酸含量", 《中兽医医药杂志》, no. 05 *
王兴军;许庆栋;: "HPLC法测定那格列奈胶囊的含量", 《齐鲁药事》, no. 09 *
葛慈斌;刘波;陈峥;朱育菁;潘志针;: "液相色谱/四极杆飞行时间串联质谱筛选产β-丙氨酸甜菜碱芽胞杆菌", 《食品安全质量检测学报》, no. 10 *
郑荣;茹歌;王柯;: "高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中16种防腐剂", 《中国卫生检验杂志》, no. 19 *
黄继红: "《抗性淀粉生产技术及其应用》", 31 January 2017, 河南科学技术出版社, pages: 243 - 244 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115902024A (zh) * 2022-11-28 2023-04-04 甘肃省药品检验研究院 一种染发剂中强还原性禁限用染料的稳定同位素标记与液质联用分析方法
CN115902024B (zh) * 2022-11-28 2023-11-14 甘肃省药品检验研究院 一种染发剂中强还原性禁限用染料的稳定同位素标记与液质联用分析方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wu et al. A simple, rapid and reliable liquid chromatography–mass spectrometry method for determination of methotrexate in human plasma and its application to therapeutic drug monitoring
Lynn et al. Separation of 2, 4-dinitrophenylhydrazones of aldehydes and ketones by paper chromatography
CN106950306B (zh) 一种测定复方氨基酸注射液中半胱氨酸含量的方法
Wen et al. Development and validation of a hydrophilic interaction ultra‐high‐performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry method for rapid simultaneous determination of 19 free amino acids in rat plasma and urine
Cabañero et al. Isotope ratio mass spectrometry coupled to liquid and gas chromatography for wine ethanol characterization
CN111812265B (zh) 一种同时测定染发剂中32种染料的检测方法
CN111679028B (zh) 化妆品中四种胜肽的高效液相色谱串联质谱检测方法
Woźniakiewicz et al. A quick method for determination of psychoactive agents in serum and hair by using capillary electrophoresis and mass spectrometry
CN114942280A (zh) 一种化妆品中12种染发剂的含量测定和质谱确证方法
CN115876933A (zh) 一种血清中类固醇激素的检测方法
Antonelli et al. Ultrahigh-performance supercritical fluid chromatography–mass spectrometry for the qualitative analysis of metabolites covering a large polarity range
CN115326960A (zh) 一种同时检测人血浆中8种抗癫痫药物及1种活性代谢物浓度的分析方法
CN107957467B (zh) 一种分离测定药物制剂中溶血磷脂酰胆碱的方法
CN105092733B (zh) Lc‑ms测试物中不挥发性缓冲盐含量的降低方法和装置
CN106950317A (zh) 一种合相色谱‑串联质谱法测定烟用纸张中偶氮染料释放的特定芳香胺的方法
Yang et al. Analysis of methylene blue and its metabolites in blood by capillary electrophoresis/electrospray ionization mass spectrometry
Häkkinen Polyamine analysis by LC-MS
CN112834680B (zh) 一种测定肿瘤患者血浆中替加氟、吉美嘧啶和5-氟尿嘧啶浓度的方法
Petritis et al. Evaporative light scattering detection for in‐line monitoring of stopped‐flow liquid chromatography–nuclear magnetic resonance analysis of compounds with weak or no chromophore groups
Zhang et al. Determination of domperidone in human plasma using liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry and its pharmacokinetic study
CN106872627A (zh) 一种原人参二醇的液质联用检测方法
Saw et al. Use of N‐(4‐aminophenyl) piperidine derivatization to improve organic acid detection with supercritical fluid chromatography‐mass spectrometry
CN115902024B (zh) 一种染发剂中强还原性禁限用染料的稳定同位素标记与液质联用分析方法
WO2024109016A1 (zh) 高效液相色谱测定反应液中甘氨酸和二酮哌嗪含量的方法
Du et al. Rapid method for simultaneous determination of 20 components in Isodon nervosa by high‐performance liquid chromatography–electrospray ionisation tandem mass spectrometry

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination