CN114933736B - 一种多响应性神经支架材料及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种多响应性神经支架材料及其制备方法与应用，属于材料技术领域，制备方法包括：(1)向羟基化纤维素纳米晶须中加入磺化试剂，反应得到磺酸化‑羟基化纤维素纳米晶须；(2)向酸酐类化合物溶液中加入交联剂、氨基类苯硼酸和甲基丙烯酸酰化明胶，反应得到苯硼酸‑甲基丙烯酸酰化明胶；(3)磺酸化‑羟基化纤维素纳米晶须和苯硼酸‑甲基丙烯酸酰化明胶，在光引发剂作用下，于光照条件下反应，经定向冷冻得到神经支架材料；(4)神经支架材料搭载邻苯二酚类化合物，得到多响应性神经支架材料，多响应性神经支架材料中苯硼酸结构与邻苯二酚类化合物结合形成硼酸酯键，可响应葡萄糖、pH和H2O2，达到缓慢释放药物的目的。

Description

一种多响应性神经支架材料及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于材料技术领域，尤其涉及一种多响应性神经支架材料及其制备方法与应用。
背景技术
越来越多的患者因神经退行性疾病、创伤性脑损伤以及脊髓和外周疾病罹患不可逆的神经损伤，为解决这一难题，需要研究出一种可靠的神经修复治疗方案。解决神经修复问题的关键是组织缺失以及组织再生能力低，限制了神经损伤后功能的修复。中枢神经系统受损后，会抑制生理再生过程，阻碍功能恢复并促进疤痕组织的形成。
目前，治疗创伤型神经损伤的支架材料很少关注脱髓鞘现象对神经修复的影响。传统神经组织工程技术的研究并不完善，仍具许多局限：(1)神经导管在制备的时候通过物理包封搭载药物，或无生化诱导，导致神经恢复不佳；(2)神经导管大多只提供物理通道，且轴突后续恢复并不能达到有序分布，影响神经系统功能的恢复；(3)多数神经导管只着重关注神经元的恢复，忽视了髓鞘在神经恢复过程中的重要作用。同时，市面需要对安全性更高的支架材料，一些合成生物材料生物降解性差，且可能会产生有毒生物降解副产物，继而导致人体炎症等不良反应。以来源更广泛的明胶和纤维素纳米晶须为原料制备的神经支架材料对人体几乎没有危害，经济效益高，在生物医用材料领域开发前景广阔。
发明内容
为此，本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术中神经支架材料功能性不足、材料生物降解性差和无法提供有序通道等问题。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种多响应性神经支架材料及其制备方法与应用，本发明以可光交联的甲基丙烯酸酰化明胶为原料，通过接枝氨基苯硼酸获得可光交联、可响应性释放药物功能的苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)；以表面具有大量羟基的纤维素纳米晶须为原材料，在磺化试剂的作用下合成磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须(SHC)。通过定向冷冻的方法制备了磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须/苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(SHC/GMPB)神经支架(SH-GB)，并搭载邻苯二酚类化合物，得到多响应性神经支架材料。
本发明的第一个目的是提供一种多响应性神经支架材料的制备方法，包括以下步骤，
(1)向羟基化纤维素纳米晶须中加入磺化试剂，反应12-24h后，离心加水重悬，透析、冻干得到磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须；
(2)向酸酐类化合物溶液中加入交联剂、氨基类苯硼酸和甲基丙烯酸酰化明胶，反应10-24h，透析、冻干得到苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶；所述氨基类苯硼酸为含有苯环、硼酸基和氨基的化合物；
(3)步骤(1)所述的磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须和步骤(2)所述的苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶，在光引发剂作用下，于光照条件下发生光交联反应，经定向冷冻得到神经支架材料；
(4)步骤(3)所述的神经支架材料搭载邻苯二酚类化合物，得到所述多响应性神经支架材料。
在本发明的一个实施例中，在步骤(1)中，所述羟基化纤维素纳米晶须的制备方法具体包括以下步骤：
S1、将纤维素纳米晶须溶于水，进行TEMPO氧化法反应，透析、冻干得到羧基化纤维素纳米晶须；
S2、向S1所述的羧基化纤维素纳米晶须中加入羟基化试剂，反应12-24h后，离心加水重悬，透析、冻干得到羟基化纤维素纳米晶须；
在本发明的一个实施例中，在S2中，所述羟基化试剂为缩水甘油、氧杂环丁-3-醇和2-(环氧乙烷-2-基)乙-1-醇中的一种或多种。
在本发明的一个实施例中，在步骤(1)中，所述磺化试剂为三氧化硫吡啶、三甲基铵三氧化硫和氯磺酸中的一种或多种。
在本发明的一个实施例中，在步骤(1)中，所述羟基化纤维素纳米晶须和磺化试剂的质量比为1：2-5。
在本发明的一个实施例中，在步骤(1)中，所述磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须的粒径为100-700nm。
在本发明的一个实施例中，在步骤(1)中，所述磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须的取代度为5-40％。
在本发明的一个实施例中，在步骤(2)中，所述酸酐类化合物为丁二酸酐、乙二酸、丙酸酐、邻苯二甲酸酐和顺丁烯二酸酐中的一种或多种。
在本发明的一个实施例中，在步骤(2)中，所述甲基丙烯酸酰化明胶的制备方法具体包括以下步骤：将A型明胶溶于PBS，加入甲基丙烯酸酐，避光反应8-24h，透析、冻干得到所述甲基丙烯酸酰化明胶。
在本发明的一个实施例中，在步骤(2)中，所述酸酐类化合物、交联剂和氨基类苯硼酸的摩尔比为1：1.2.-1.5：1-1.2；所述氨基类苯硼酸和甲基丙烯酸酰化明胶的质量比为1：2-4。
在本发明的一个实施例中，在步骤(2)中，所述交联剂由N-羟基琥珀酰亚胺和(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐按照摩尔比3-5：5-7混合得到。
在本发明的一个实施例中，在步骤(3)中，所述磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须、苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶和光引发剂的质量比为0.5-2：3-10：0.25-3。
在本发明的一个实施例中，在步骤(3)中，所述光引发剂为羟基环已基苯基甲酮、苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐LAP和安息香双甲醚BDK中的一种或多种。
在本发明的一个实施例中，在步骤(3)中，所述光交联反应的温度为-20℃至0℃，时间为20-75min。
在本发明的一个实施例中，在步骤(3)中，所述光照的光源为紫外光。
在本发明的一个实施例中，在步骤(3)中，所述紫外光的波长为350-420nm，可激活光引发剂，进行光交联反应。
在本发明的一个实施例中，在步骤(3)中，所述定向冷冻的速度为1-8mm/min。
在本发明的一个实施例中，在步骤(4)中，所述邻苯二酚类化合物为丹参素钠、4-甲基儿茶酚、盐酸多巴胺、2,3-二羟基萘、没食子酸和原儿茶酸中的一种或多种。
本发明的第二个目的是提供一种所述的方法制备的多响应性神经支架材料。
在本发明的一个实施例中，所述多响应性神经支架材料的孔径为20-30nm。
本发明的技术方案相比现有技术具有以下优点：
(1)本发明所述的多响应性神经支架材料以生物相容性良好的天然高分子材料为基础，制备了一种具有取向性微通道、可响应性释放含邻苯二酚结构药物的多功能神经支架。该神经支架可促进少突胶质前体细胞和神经元粘附，引导细胞有序生长，避免髓鞘再生过程中的无序修复。
(2)本发明所述的多响应性神经支架材料中苯硼酸结构与邻苯二酚类化合物结合形成硼酸酯键，可响应葡萄糖、pH和H2O2，达到缓慢释放药物的目的。具有良好机械性能、规整取向微通道，良好溶胀率和降解率，说明该材料可为细胞生长提供稳定的环境，便于支架材料与外界进行物质交换。负载邻苯二酚类化合物的神经支架材料可分别响应在一定范围内可促进细胞生长，引导神经元及少突胶质细胞有序生长。且神经支架材料对人体几乎没有危害，经济效益高，在生物医用材料领域开发前景广阔。
(3)本发明所述的多响应性神经支架材料以天然高分子材料纤维素纳米晶须和明胶为原始原料，其来源广泛且具有较高生物相容性，改善了其功能性不足的缺点；同时，通过定向冷冻技术制备神经支架，过程简洁、成本低和环保特点，在组织工程中显示出不可替代的优势。
(4)本发明所述的多响应性神经支架材料以促进髓鞘再生，在引导神经元定向生长的同时，着重关注形成髓鞘的少突胶质前体细胞及少突胶质细胞的正常生长、增殖及分化。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚地理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中：
图1为本发明测试例1中的粒径分布图(DLS)。
图2为本发明测试例2中的神经支架上神经元及少突胶质细胞生长情况的激光共聚焦扫描图。
图3为本发明测试例3中的磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须的透射电镜图。
图4为本发明测试例4中的磁共振氢谱图。
图5为本发明测试例5中的神经支架在不同浓度葡萄糖中响应性释放的结果。
图6为本发明测试例5中的神经支架在不同pH中响应性释放的结果。
图7为本发明测试例5中的神经支架在不同浓度H2O2中响应性释放的结果。
图8为本发明测试例6中的神经支架的扫描电子显微镜图(横截面)。
图9为本发明测试例6中的神经支架的扫描电子显微镜图(纵截面)。
图10为本发明测试例7中的苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶与等量茜素红S混合后，添加不同含量葡萄糖后，荧光强度随葡萄糖浓度变化的图谱。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。
实施例1
一种多响应性神经支架材料及其制备方法，具体包括以下步骤：
(1)取15g纤维绵纸粉末，加入200mL 30％H2SO4溶液，60℃反应8h后终止反应，离心。倒掉上清，超纯水重悬、配平、离心，直至液体为中性；透析后，将获得的混悬液超声破碎后于离心，上清胶体即为纤维素纳米晶须(CNC)水溶液。
(2)采用TEMPO氧化法制备羧基化纤维素纳米晶须。取2g纤维素纳米晶须，2gNaBr，200mg TEMPO于500mL圆底烧瓶中，水浴加热35℃，30min；加入17mLNaClO，调节pH＝10.5，反应3.5h；反应结束后降至室温，调节pH＝6，透析、冻干后获得羧基化纤维素纳米晶须(CCNC)。
(3)300mg羧基化纤维素纳米晶须，9mLN,N-二甲基甲酰胺置于100mL圆底烧瓶中，搅拌；2.5mL缩水甘油和10mL 1,4-二氧六环在氮气保护下，于100℃油浴锅中预热5min，缓慢滴加缩水甘油和1,4-二氧六环混合液，反应12h；透析、冻干后获得超支化聚甘油化纤维素纳米晶须。
(4)130mg超支化聚甘油化纤维素纳米晶须分散在5mL无水DMF中；加入365mg三氧化硫吡啶复合物，在氮气保护、60℃的条件下，反应12h后冷却至室温，加2mL水终止反应，在饱和氯化钠溶液和水中依次离心，透析并冻干后获得磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须。
(5)取10gA型明胶，100mL PBS，于50℃条件下搅拌20min；缓慢滴加12mL甲基丙烯酸酐，在50℃下避光反应12h；透析并冻干后获得甲基丙烯酸酰化明胶。
(6)300mg丁二酸酐溶于10mL热水，冷却后加入600mg EDC和350mg NHS，室温搅拌1h；将溶解好的0.5g 3-氨基苯硼酸PBA与上述溶液混合，调节pH＝5.5，室温反应12h；加入600mg EDC，活化1h；按照3-氨基苯硼酸PBA：甲基丙烯酸酰化明胶(GelMA)质量比为1：2加入相应质量GelMA，避光反应24h；透析并冻干后获得苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)。
(7)反应液的GMPB终浓度为8wt％，SHC的终浓度为0.5wt％，加入终浓度为0.25％的LAP，将溶液转移至模具中，在4℃静置过夜除气泡；然后以2mm/min的速度浸没液氮，在-20℃中以UV 405nm光源辐照40min，冻干。将支架通过浸泡的方式负载丹参素钠，得到多响应性神经支架材料。
实施例2
一种多响应性神经支架材料及其制备方法，具体包括以下步骤：
(1)取15g纤维绵纸粉末，加入250mL 30％H2SO4溶液，60℃反应10h后终止反应，离心。倒掉上清，超纯水重悬、配平、离心，直至液体为中性；透析后，将获得的混悬液超声破碎后于离心，上清胶体即为纤维素纳米晶须水溶液。
(2)采用TEMPO氧化法制备羧基化纤维素纳米晶须。取2g纤维素纳米晶须，2gNaBr，150mg TEMPO于500mL圆底烧瓶中，水浴加热35℃，30min；加入15mLNaClO，调节pH＝10.5，反应3.5h；反应结束后降至室温，调节pH＝6，透析、冻干后获得羧基化纤维素纳米晶须。
(3)300mg羧基化纤维素纳米晶须，9mLN,N-二甲基甲酰胺置于100mL圆底烧瓶中，搅拌；2.5mL缩水甘油和10mL 1,4-二氧六环在氮气保护下，于100℃油浴锅中预热5min，缓慢滴加缩水甘油和1,4-二氧六环混合液，反应13h；透析、冻干后获得超支化聚甘油化纤维素纳米晶须。
(4)130mg超支化聚甘油化纤维素纳米晶须分散在5mL无水DMF中；加入390mg三氧化硫吡啶复合物，在氮气保护、60℃的条件下，反应15h后冷却至室温，加2mL水终止反应，在饱和氯化钠溶液和水中依次离心，透析并冻干后获得磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须。
(5)取10gA型明胶，100mL PBS，于50℃条件下搅拌20min；缓慢滴加15mL甲基丙烯酸酐，在50℃下避光反应12h；透析并冻干后获得甲基丙烯酸酰化明胶。
(6)300mg丁二酸酐溶于10mL热水，冷却后加入500mg EDC和450mg NHS，室温搅拌1.5h；将溶解好的0.5g 3-氨基苯硼酸PBA与上述溶液混合，室温反应15h；加入500mg EDC，活化1h；按照3-氨基苯硼酸PBA：甲基丙烯酸酰化明胶(GelMA)质量比为1：4加入相应质量GelMA，避光反应24h；透析并冻干后获得苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)。
(7)反应液的GMPB终浓度为4wt％，SHC的终浓度为0wt％，加入终浓度为0.5％的LAP，将溶液转移至模具中，在4℃静置过夜除气泡；然后以3mm/min的速度浸没液氮，在0℃中以UV 405nm光源辐照30min，冻干，将支架通过浸泡的方式负载盐酸多巴胺，得到多响应性神经支架材料。
实施例3
一种多响应性神经支架材料及其制备方法，具体包括以下步骤：
(1)取15g纤维绵纸粉末，加入150mL 30％H2SO4溶液，60℃反应11h后终止反应，离心。倒掉上清，超纯水重悬、配平、离心，直至液体为中性；透析后，将获得的混悬液超声破碎后于离心，上清胶体即为纤维素纳米晶须水溶液。
(2)采用TEMPO氧化法制备羧基化纤维素纳米晶须。取2g纤维素纳米晶须，2gNaBr，150mg TEMPO于500mL圆底烧瓶中，水浴加热35℃，30min；加入20mLNaClO，调节pH＝10.5，反应3.5h；反应结束后降至室温，调节pH＝6，透析、冻干后获得羧基化纤维素纳米晶须。
(3)300mg羧基化纤维素纳米晶须，9mLN,N-二甲基甲酰胺置于100mL圆底烧瓶中，搅拌；4mL缩水甘油和10mL 1,4-二氧六环在氮气保护下，于100℃油浴锅中预热5min，缓慢滴加缩水甘油和1,4-二氧六环混合液，反应12h；透析、冻干后获得超支化聚甘油化纤维素纳米晶须。
(4)130mg超支化聚甘油化纤维素纳米晶须分散在5mL无水DMF中；加入420mg三氧化硫吡啶复合物，在氮气保护、60℃的条件下，反应16h后冷却至室温，加2mL水终止反应，在饱和氯化钠溶液和水中依次离心，透析并冻干后获得磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须。
(5)取10gA型明胶，100mL PBS，于50℃条件下搅拌20min；缓慢滴加11.5mL甲基丙烯酸酐，在50℃下避光反应18h；透析并冻干后获得甲基丙烯酸酰化明胶。
(6)300mg丁二酸酐溶于10mL热水，冷却后加入550mg EDC和350mg NHS，室温搅拌1.5h；将溶解好的0.5g 3-氨基苯硼酸PBA与上述溶液混合，室温反应15h；加入550mg EDC，活化1h；按照3-氨基苯硼酸PBA：甲基丙烯酸酰化明胶(GelMA)质量比为1：3加入相应质量GelMA，避光反应24h；透析并冻干后获得苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)。
(7)反应液的GMPB终浓度为8wt％，SHC的终浓度为1.0wt％，加入终浓度为0.7％的LAP，将溶液转移至模具中，在4℃静置过夜除气泡；然后以4mm/min的速度浸没液氮，在0℃中以UV 405nm光源辐照30min，冻干。将支架通过浸泡的方式负载4-甲基儿茶酚得到多响应性神经支架材料。
测试例1
将实施例1的纤维素纳米晶须(CNC)、羧基化纤维素纳米晶须(CCNC)、聚甘油化纤维素纳米晶须(H-CNC)和磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须(SHC)均匀分散到水中，通过纳米粒径仪进行测试，如图1所示。
从图1可以看出，样品粒径曲线为对称峰，且表现出均一分散状态。纤维素纳米晶须的平均流体力学半径(Rh)均在190nm左右。与纤维素纳米晶须相比，超支化聚甘油化纤维素纳米晶须(250nm)和磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须的粒径变大(260nm)，说明接枝缩水甘油后，粒子的粒径会增大；而聚甘油化的纤维素纳米晶须再次磺酸化后，粒径变化不明显，说明磺酸化并不会对粒子的粒径产生较大影响。
测试例2
对实施例1的多响应性神经支架材料进行细胞行为研究，结果如图2所示。
将提取的神经元细胞悬液以5×104/mL的密度接种于灭菌后的多响应性神经支架材料上，神经元培养基按需换液，培养2天。将少突胶质前体细胞和星形胶质细胞悬液以1×105/mL的密度接种于上述材料上，少突胶质细胞-神经元混合培养基按需换液，继续培养9天。从图2可以看出，多响应性神经支架材料上生长的细胞，因材料纵截面具有取向微通道，可使神经元轴突沿微通道生长，OL自发向神经元聚集，并包裹在有序的轴突表面，形成髓鞘。
测试例3
对实施例2的磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须通过透射电子显微镜进行电镜表征，如图3所示。
从图3可以看出，磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须的透射电镜图，可观察到大小一致的棒状结构聚集，长约330nm，宽约35nm。与粒径测试结果相结合，进一步说明磺酸化-聚甘油化纤维素纳米晶须的结构保持完整。
测试例4
对实施例2的苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)、甲基丙烯酸酰化明胶(GelMA)、明胶(Gelatin)和3-氨基苯硼酸PBA通过磁共振氢谱进行测试，如图4所示。
1.9ppm处的峰表示甲基丙烯酰胺上的H(3H)，2.9ppm处的峰表示明胶中的赖氨酸亚甲基上的H(2H)，5.5ppm左右的双峰为甲基丙烯酰胺上的H(2H)。可以看出，甲基丙烯酸酰化明胶在1.9ppm和5.5ppm处的峰明显加强，同时2.9ppm处的峰明显减弱，说明赖氨酸上的氨基被反应，甲基丙烯酰胺成功接枝到明胶上。苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)在8.0-7.5ppm附近出现明显的吸收峰是苯硼酸苯环上的质子。苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)谱图中的质子峰位置与3-氨基苯硼酸PBA的谱图中苯环氢的化学位移相对应，表明苯硼酸已经成功接枝到甲基丙烯酸酰化明胶上。
测试例5
对实施例3的多响应性神经支架材料以葡萄糖、不同pH及H2O2为释放介质，对其进行响应性释放。通过紫外分光光度计测定释放介质中的丹参素钠的吸光度，通过标准曲线计算释放量，结果依次如图5-7所示。
从图5可以看出苯硼酸与葡萄糖的亲和力较强，使丹参素被竞争性释放，其最大累积释放率为63.34％；图6中，pH为酸性，苯硼酸与丹参素钠形成的硼酸酯键不稳定，极易水解，此时丹参素钠最大累积释放率63.47％；图7中，加入H2O2可以使苯硼酸的C-B键断裂，同时形成游离的硼酸并释放丹参素钠，此时最大累积释放率为73.28％。说明，该多响应性神经支架材料具有葡萄糖、pH及H2O2响应性。
测试例6
对实施例3的多响应性神经支架材料通过扫描电子显微镜进行电镜表征，如图8-9所示。
从图8可以看出多响应性神经支架材料横截面的扫描电镜图。横截面可见较为均匀的孔隙，孔径大小为41.78±3.89nm。图9为纵截面扫描电镜图，可见较为整齐的通道，方便伸进支架与外界进行物质交换，有助于细胞粘附及促使神经细胞定向生长。
测试例7
将实施例3的苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)与等量茜素红S(ARS)混合后，添加不同含量葡萄糖。混匀后静置5min，在激发波长468nm，发射扫描波长为300-800nm检测荧光强度，如图10所示。
加入葡萄糖后，茜素红S(ARS)-苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶(GMPB)荧光强度明显下降。随着葡萄糖浓度的增加，ARS-GMPB的荧光逐渐减弱，表明葡萄糖与GMPB竞争性结合ARS。葡萄糖的竞争性强于GMPB，导致ARS与葡萄糖结合量增加，与GMPB结合量减少，荧光强度降低。荧光强度与葡萄糖浓度的关系图表明，在一定范围内，葡萄糖对3-氨基苯硼酸PBA具有较强的结合能力。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (10)

1.一种多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，
(1)向羟基化纤维素纳米晶须中加入磺化试剂，反应得到磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须；
(2)向酸酐类化合物溶液中加入交联剂、氨基类苯硼酸和甲基丙烯酸酰化明胶，反应得到苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶；所述氨基类苯硼酸为含有苯环、硼酸基和氨基的化合物；
(3)步骤(1)所述的磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须和步骤(2)所述的苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶，在光引发剂作用下，于光照条件下发生光交联反应，经定向冷冻得到神经支架材料；
(4)步骤(3)所述的神经支架材料搭载邻苯二酚类化合物，得到所述多响应性神经支架材料。
2.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述磺化试剂为三氧化硫吡啶、三甲基铵三氧化硫和氯磺酸中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述羟基化纤维素纳米晶须和磺化试剂的质量比为1：2-5。
4.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述酸酐类化合物为丁二酸酐、乙二酸、丙酸酐、邻苯二甲酸酐和顺丁烯二酸酐中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述酸酐类化合物、交联剂和氨基类苯硼酸的摩尔比为1：1.2.-1.5：1-1.2；所述氨基类苯硼酸和甲基丙烯酸酰化明胶的质量比为1：2-4。
6.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述磺酸化-羟基化纤维素纳米晶须、苯硼酸-甲基丙烯酸酰化明胶和光引发剂的质量比为0.5-2：3-10：0.25-3。
7.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述光交联反应的温度为-20℃至0℃，时间为20-75min。
8.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述定向冷冻的速度为1-8mm/min。
9.根据权利要求1所述的多响应性神经支架材料的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述邻苯二酚类化合物为丹参素钠、4-甲基儿茶酚、盐酸多巴胺、2,3-二羟基萘、没食子酸和原儿茶酸中的一种或多种。
10.权利要求1-9任一项所述的方法制备的多响应性神经支架材料。
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