CN114903981A - 一种含有重组iii型胶原蛋白的创面修复配方 - Google Patents

一种含有重组iii型胶原蛋白的创面修复配方 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白2‑3份、纯化水10‑11份、甘油4‑5份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4‑5份、β‑葡聚糖9‑10份、对羟基苯乙酮5‑6份、1,2‑己二醇6‑7份、卡波姆7‑8份、三乙醇胺6‑7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。可以加快细胞增殖,促进创面愈合，对创面修复具有一定的治疗作用，还可以起到很好的抗炎杀菌效果，减少或避免创口的免疫排斥反应。

Description

一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方
技术领域
本发明属于促进创面修复领域，特别涉及一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方。
背景技术
皮肤，包括其附属结构如毛发、指甲、皮脂腺以及汗腺等，是人体最大的器官。在成年人，平均来说，全身皮肤面积约有7600平方厘米，占整个体重的15％，而且约有1/3的循环血量是供应到皮肤的(Van De Graaff,1986)。身体不同部位的皮肤厚度也不尽相同，从最薄的0.04mm(眼睑部)到最厚的1.6mm(手掌及脚掌部)。皮肤是机体与自然界之间的第一道屏障，其主要功能是保护作用，防止环境致病微生物的入侵以及自身体液的丢失。同时，皮肤也具有感觉、交换以及体温调节等作用。然而，我们也可以通过皮肤了解个体的健康状况、心理状态、年龄、种族和文化背景等。因此，可以说，皮肤是机体的一个非常重要的器官。组织结构上，皮肤由外至内可以分为三层，即表皮层(Epidermis)、真皮层(Dermis)以及皮下组织(Hypodermis)。
创面是正常皮肤(组织)在外界致伤因子如外科手术、外力、热、电流、化学物质、低温以及机体内在因素如局部血液供应障碍等作用下所导致的损害。常伴有皮肤完整性的破坏以及一定量正常组织的丢失，同时，皮肤的正常功能受损。也称为伤口或者创伤。创面修复既伤口修复。
创面愈合(Wound healing)是指由于致伤因子的作用造成组织缺失后，局部组织通过再生(Regeneration)、修复(Repair)、重建(Reconstruction)，进行修补的一系列病理生理过程。本质上是机体对各种有害因素作用所致的组织细胞损伤的一种固有的防御性适应性反应。这种再生修复表现于丧失组织结构的恢复上，也能不同程度地恢复其功能。
然而，丢失的组织细胞的修复可以是原来组织细胞的“完全复原”—称之为“再生”(Regeneration)；也可以是由非特异性的结缔组织增生来替代原有的组织细胞，形成“不完全复原”—称之为“修复”(Repair)，不过，这两种不同的结果，其过程却是相同的。创面愈合的基本知识再生(Regeneration)再生是对于丧失组织和细胞的补偿，因此是创面愈合的始动和基础。正常情况下，有些组织和细胞会不断地消耗、老化和死亡，又不断地由同种细胞分裂增生加以补充，称之为生理性再生(Physiological regeneration)，如表皮的脱落与更新，又如血细胞周期性的凋亡与补充。其特征是再生后的细胞完全保持了原有的结构与功能，故称之为完全性再生(Complete regeneration)。而损伤所致的组织细胞丢失后的再生，称之为病理性再生(Pathological regeneration)或修复性再生。
当创面浅表、组织细胞丢失轻微，则可由同种组织细胞分裂增生来补充，使之具有同样的结构和功能，形成完全性病理性再生；见于表皮基底膜完整的创面如皮肤擦伤以及I度烧伤等。但当组织细胞缺失较多时，则机体修复时常由另一种替代组织—结缔组织来填补，使之失去原有组织的结构和功能，形成不完全性病理性再生。临床上绝大多数是这种类型的再生。创面愈合的过程创面愈合的基础是炎症细胞如巨噬细胞、中性粒细胞以及修复细胞如成纤维细胞、表皮细胞等的一系列生物学活动，同时，细胞基质也参与其中。
国外对创面修复十分重视，其基础研究已深入至细胞、分子与基因水平。70年代以来，由于能有效的获取大量细胞因子并用于动物实验，使得在以生长因子与创面修复关系为突破口的组织修复研究国外走在了前列，并由此带动了整个创面修复的发展。经过近20年的努力，已在组织修复的细胞学、胞外基质与胶原代谢、生长因子促(抑)创面修复机理、慢性难愈合溃疡的病理生理特征与促愈合方法、增生性瘢痕的成因与控制、活性敷料的研制以及基因治疗等方面取得了令人瞩目的进展，不少基础研究成果已开始应用于临床。
目前，创面修复膜仅具有对创口的保护作用，而对于严重的创口，创口愈合期较长，不可避免的，会造成创口的感染，因此，提高修复膜的抗菌性能对创面修复具有重要作用，目前，通常以物理吸附的作用形式将抗菌剂吸附于修复膜上，一方面抗菌剂易脱落而影响创面修复膜的抗菌性能；另一方面存在抗菌剂(如银离子)过量会给人体带来副作用的问题。
发表于《中国中西医结合杂志》2004年08期的《积雪草总苷抗DMN诱导大鼠肝纤维化的作用》一文中证实不同剂量组的积雪草总苷均具有改善肝功能，抑制ALT以及AST的在哟用，病理组织观察显示其能减轻肝纤维组织增生，具有一定的抗肝纤维化作用。发表于《中华实验外科杂志》2005年1期《积雪草苷对烧伤创面愈合中细胞周期蛋白、增殖细胞核抗原表达的影响》一文中指出报道了积雪草苷在烧伤创面愈合过程中能有效促进细胞周期蛋白B1和增殖细胞核抗原的表达，使细胞周期的S+G2期明显提前,从而加快细胞增殖,促进创面愈合。中国专利CN102526121A、CN 102698312A分别公开了不同配方的组合物对创面修复的治疗，但这类药物受制于药物有效成份而不能起到很好的抗炎杀菌效果，甚至有使伤口或创面炎症加重的风险。
重组Ⅲ型人源化胶原蛋白，是由DNA重组技术制备的人胶原蛋白特定型别基因编码的全长或部分氨基酸序列片段，或是含人胶原蛋白功能片段的组合。
重组人源化Ⅲ型胶原蛋白100％人源化，无过敏反应无排异，首次发现了人Ⅲ型胶原蛋白核心功能区通过原子结构确认和人类基因库序列比对，与人Ⅲ型胶原蛋白中央功能区域100％相同；氨基酸序列100％相同，高粘附性特有的164.88°柔性弯折结构，高细胞黏附性首次原子水平解析了人Ⅲ型胶原蛋白核心功能区原子结构，被国际权威蛋白数据库(PDB)收录；补充人体结合水大量带电基团结合众多水分子、亲水性强、高水溶性稳固的三螺旋结构。
重组Ⅲ型人源化胶原蛋白氨基酸序列的重复单元与人胶原蛋白氨基酸序列特定功能区相同，生物相容性好；功能区域具有164.88°柔性三螺旋结构，相关结构数据已被国际蛋白结构数据库收录；具有高于人体I型和Ⅲ型胶原蛋白的细胞粘附性，形成了网状纤维结构，具有良好的修复特性，预计在血管内皮、子宫内膜、创面、口腔黏膜修复及骨科等领域具有更广阔的临床应用。
发明内容
本发明旨在在现有技术的基础上提供一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方。
为了克服现有皮肤创面修复过程中有效治疗药物匮乏且治疗效果差的技术缺陷，本发明提供一种新的含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，本发明能解决皮肤伤口、切口及溃殇创面的治疗问题，因此本发明配方具有十分广阔的医学应用前景。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，含有重组III型胶原蛋白。
优选的，含有纯化水、甘油、丁二醇甘油聚丙烯酸酯。
优选的，含有β-葡聚糖、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、卡波姆、三乙醇胺。
优选的，按质量份数计含有重组III型胶原蛋白1-3份、纯化水10-15份、甘油4-6份。
优选的，按质量份数计含有丁二醇甘油聚丙烯酸酯3-5份、β-葡聚糖8-12份。
优选的，按质量份数计含有对羟基苯乙酮5-7份、1,2-己二醇4-7份。
优选的，按质量份数计含有卡波姆5-10份、三乙醇胺4-7份。
优选的，按质量份数计含有重组III型胶原蛋白2-3份、纯化水10-11份、甘油4-5份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4-5份、β-葡聚糖9-10份、对羟基苯乙酮5-6份、1,2-己二醇6-7份、卡波姆7-8份、三乙醇胺6-7份。
一种创面修复凝胶，含有任一项所述的创面修复配方。
一种创面修复敷贴，含有任一项所述的创面修复配方。
现有技术相比，本发明具有创面创口的保护作用，对于严重的创口，不会会造成创口的感染，具有很好的抗菌性能，对创面修复具有促进作用，不会给人体带来副作用的问题。
可以加快细胞增殖,促进创面愈合，对创面修复具有一定的治疗作用，还可以起到很好的抗炎杀菌效果，减少或避免创口的免疫排斥反应。
具体实施方式
为了使本技术领域人员更好地理解本发明的技术方案，并使本发明的上述特征、目的及优点更加清晰易懂，现结合实施例对本发明做进一步解释说明，应当指出的是，在此列出的所有实施例仅仅是说明性的，并不意味着对本发明范围进行限定。
实施例1
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白2份、纯化水10份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖9份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇6份、卡波姆7份、三乙醇胺6份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂。
实施例2
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、甘油5份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯5份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮6份、1,2-己二醇7份、卡波姆8份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂。
实施例3
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂。
实施例4
将实施例3所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。
实施例5
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、石墨烯3份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。
实施例6
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、MXene材料2份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。
实施例7
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、二氧化钛5份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。
实施例8
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、碳纳米管3份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。
实施例9
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、水杨酸十八胺离子液体5份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。水杨酸十八胺离子液体由水杨酸和十八胺按摩尔比1:1中和制备得到。
实施例10
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、水杨酸十八胺离子液体5份、[P4444]2[CoII(Sal)2]离子液体4份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。水杨酸十八胺离子液体由水杨酸和十八胺按摩尔比1:1中和制备得到，[P4444]2[CoII(Sal)2]离子液体的制备方法为：
Figure BDA0003710894820000091
实施例11
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，结合实施例9将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、水杨酸十八胺离子液体5份、石墨烯3份、MXene材料2份、二氧化钛5份、碳纳米管3份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。
实施例12
一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，结合实施例10，将重组III型胶原蛋白3份、纯化水11份、水杨酸十八胺离子液体5份、[P4444]2[CoII(Sal)2]离子液体4份、石墨烯3份、MXene材料2份、二氧化钛5份、甘油4份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4份、β-葡聚糖10份、对羟基苯乙酮5份、1,2-己二醇7份、卡波姆7份、三乙醇胺7份混合后搅拌并超声混合均匀，得到创面修复涂抹剂，之后将所得到的凝胶状涂抹剂中放入消毒灭菌后的无纺布，浸润2小时后取出，贴附于医用防水贴上，制得创面修复贴。
效果测试：
抗菌性测试，将实施例1-12所制备的创面修复涂抹剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌进行抗菌试验；抗菌结果如表所示：
创面修复膜对几种医院菌的抑菌率
Figure BDA0003710894820000111
取家兔130只(健康状况良好，体重为2-3kg)分为13组，每组10只，使用实施例1-12制备的创面修复涂抹剂处理家兔；将兔子背部预留5cm×5cm的去除背毛的部位，消毒后，用手术刀在其背部作1cm×1cm的创口，将本发明实施例制备创面修复涂抹剂涂抹于于创口表面，观察创口的止血情况，每天涂抹1次，直至家兔的创口完全愈合为止，统计记录家兔创面的感染和愈合情况，结果如表，其中，创面愈合率(％)＝(原始创面面积－未愈合创面面积)/原始创面面积。
动物创面愈合及感染情况
Figure BDA0003710894820000121
在12名创伤志愿者伤口进行涂抹实验，(健康状况良好，体重为45-75kg)，使用实施例1-12制备的创面修复涂抹剂对伤口进行一半处理，留一半伤口作为对照实验，将本发明实施例制备创面修复涂抹剂涂抹于于创口表面，观察创口的止血情况，每天涂抹1次，直至痊愈，统计发现，涂抹本发明实施例修复剂后，创面痊愈时间明显缩短一半以上，相比无涂抹情况，疤痕明显减少95％以上。
上述实施例中效果数据均为实验手段获取，可能存在无法避免的一定范围内的合理误差，但不影响对本发明内容的说明。
上述仅对本发明中的几种具体实施例加以说明，但并不能作为本发明的保护范围，凡是依据本发明中的设计精神所作出的等效变化或修饰或在官能团不变的情况下增加支链或将甲基替换为乙基等常规替换手段等，均应认为落入本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：含有重组III型胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：含有纯化水、甘油、丁二醇甘油聚丙烯酸酯。
3.根据权利要求2所述的一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：含有β-葡聚糖、对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、卡波姆、三乙醇胺。
4.根据权利要求3所述的一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：按质量份数计含有重组III型胶原蛋白1-3份、纯化水10-15份、甘油4-6份。
5.根据权利要求4所述的一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：按质量份数计含有丁二醇甘油聚丙烯酸酯3-5份、β-葡聚糖8-12份。
6.根据权利要求5所述的一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：按质量份数计含有对羟基苯乙酮5-7份、1,2-己二醇4-7份。
7.根据权利要求6所述的一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：按质量份数计含有卡波姆5-10份、三乙醇胺4-7份。
8.根据权利要求7所述的一种含有重组III型胶原蛋白的创面修复配方，其特征在于：按质量份数计含有重组III型胶原蛋白2-3份、纯化水10-11份、甘油4-5份、丁二醇甘油聚丙烯酸酯4-5份、β-葡聚糖9-10份、对羟基苯乙酮5-6份、1,2-己二醇6-7份、卡波姆7-8份、三乙醇胺6-7份。
9.一种创面修复凝胶，其特征在于：含有权利要求1-8任一项所述的创面修复配方。
10.一种创面修复敷贴，其特征在于：含有权利要求1-8任一项所述的创面修复配方。
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