CN114867465A - 包含石榴和芍药提取物的美容组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种包含在生理学上可接受的介质中的石榴提取物和芍药提取物的美容组合物。

Description

包含石榴和芍药提取物的美容组合物
技术领域
本发明涉及美容领域。它特别是涉及石榴的油性提取物和芍药的油性提取物的特定联合，其旨在改善角蛋白材料表面的舒适性、润肤性和保湿性，并防止和/或减少皮肤和/或嘴唇(特别是嘴唇)的体积和紧致度的损失。
背景技术
皮肤是身体抵御环境的第一道保护屏障。因此，皮肤和嘴唇每天都受到外部或内部来源的因素的影响，所述因素可能会削弱皮肤屏障，促进皮肤和嘴唇的脱水并损害其美观。
面部皮肤是对水分流失最敏感的身体部分，嘴唇更是如此。皮肤和嘴唇的良好保湿对于舒适性至关重要，特别是会影响触觉敏感性(Effect of hydration on thetactile and thermal sensitivity of the lip,S.Guest,Physiology&Behavior 123(2014),127-135)。
因此，持续需要寻找能够滋养皮肤和/或嘴唇和使其保湿、恢复皮肤屏障并由此防止和/或减少我们的皮肤每天暴露于其中的有害影响的新型试剂。
出乎意料地，申请人已经证明了提取物的联合的体外效果，所述联合组合了石榴提取物和芍药提取物，特别是石榴花的油性提取物和芍药花的油性提取物。植物提取物的这种联合特别允许调节一些具有与皮肤屏障的保湿、紧致和强化有关的功能的基因的表达。因此，设想使用这种提取物的联合作为美容活性成分，以促进和/或刺激角蛋白材料(优选皮肤和/或嘴唇)的保湿和/或滋养，和/或防止和/或减少皮肤和/或嘴唇的体积损失、紧致度损失、弹性损失、皮肤厚度下降和/或屏障功能损害。
发明内容
本发明的第一主题涉及一种美容组合物，其包含在生理学可接受的介质中的石榴提取物和芍药提取物，优选石榴花提取物和芍药花提取物。
本发明进一步涉及用于护理和/或化妆角蛋白材料(特别是皮肤和/或嘴唇)的美容方法，其包括将至少一层本发明的美容组合物应用于所述角蛋白材料。
本发明中的“角蛋白材料”是指皮肤和/或其附属物和嘴唇。其特别涉及面部、颈部和/或身体以及嘴唇的皮肤。
本发明的美容方法特别旨在促进和/或刺激角蛋白材料(优选皮肤和/或嘴唇)的保湿和/或滋养，和/或防止和/或减少皮肤和/或嘴唇的体积损失、紧致度损失、弹性损失、皮肤厚度下降和/或屏障功能损害。
本发明进一步涉及本发明的植物提取物的联合的美容用途，所述联合特别是至少一种在霍霍巴油(l’huile de jojoba)中的石榴花提取物和在甜杏仁油(l’huile d’amande douce)中的芍药花提取物的联合，其作为活性成分的联合，以促进和/或刺激角蛋白材料(优选皮肤和/或嘴唇)的保湿和/或滋养，和/或防止和/或减少皮肤和/或嘴唇的体积损失、紧致度损失、弹性损失、皮肤厚度下降和/或屏障功能损害。
附图说明
[图1]图1是说明在对照条件下或在本发明的提取物存在下的水通道蛋白3(AQP3)表达的图(染色强度/细胞)。
[图2]图2是说明在对照条件下或在本发明的提取物存在下的巢蛋白(Nidogène)表达的图(染色强度/细胞)。
[图3]图3是说明在对照条件下或在本发明的提取物存在下的前胶原1表达的图(染色强度/细胞)。
[图4]图4是说明在对照条件下或在本发明的提取物存在下的纤连蛋白表达的图(染色强度/细胞)。
具体实施方式
本发明的植物提取物
一方面，本发明涉及植物提取物的联合，特别是石榴提取物和芍药提取物的联合。
植物“提取物”通常是指通过从植物原料中提取而获得的分离的物质，并且其本身在自然界中并不预先存在。
根据本发明的植物提取物以溶液或浓缩液的形式用于美容组合物中，或者称为“含有所述提取物的产品”，所述浓缩液的溶剂可能是提取溶剂和/或另外的溶剂。因此，组合物的实施例中说明的提取物是溶液形式。也将使用术语产品或含有每种提取物的产品，一些所述产品是商业产品。
本领域技术人员已知植物或一般植物界可以产生许多美容感兴趣的物质。根据所使用的植物或花的类型，这些感兴趣的物质可以在所述植物的不同部分或不同器官中找到，特别是在种子、根、鳞茎、茎、叶、花瓣、花、花头(sommités fleuries)中，甚至在整株植物中找到。对于同一种植物或对于同一种花，不同的提取物(特别是种子、根、鳞茎、茎、叶、花瓣、花、花头的提取物)将具有不同的活性分子组成，因此将表现出互补的、甚至是协同的美容特性。
在本发明中，所述联合的特征在于每种植物提取物从所述植物的一部分中获得，所述部分选自种子、根、鳞茎、茎、叶、花瓣、花、花头、整株植物及其混合物。
在一个特定的实施方案中，每种植物提取物从所述植物的一部分中获得，所述部分选自花瓣、花、花头及其混合物，优选本发明的植物提取物从花和/或花瓣中获得。
因此，根据一个优选的实施方案，本发明涉及石榴花提取物和芍药花提取物的联合。
在一个特定和优选的实施方案中，本发明的每种植物提取物是“油性提取物(extrait huileux)”。本发明中的“油性提取物”是指包含非挥发性化合物的提取物。因此，本发明的植物提取物不同于由挥发性化合物组成的“精油(huile essentielle)”。精油是通过从植物材料中提取或蒸馏挥发性分子(例如萜类化合物、芳香分子)而获得的。
现有技术中已知用于提取植物原料的许多方法，并且技术人员可以容易地实施，或如果需要则采用这些已知方法来制备本发明的植物提取物。尽管如此，本发明的植物提取物优选使用绿色提取方法来获得。
“绿色提取”是指允许节约能源以及使用替代溶剂和可再生植物资源，同时保证产品/提取物的安全和质量的提取方法。绿色提取优先考虑6个主要原则(Farid Chemat,Dunod,2010,Eco-Extraction du végétal)：
-通过选择品种和使用可再生植物资源来促进创新。
-优先考虑替代溶剂，其称为绿色溶剂，主要是来自农业资源的溶剂；
-借助创新技术节约能源，并促进能源回收。
-生产联产品(coproduit)而不是废物，以整合生物和农业精炼。
-通过技术创新减少单元操作，并促进安全、稳健、受控的工艺。
-优先考虑不含污染物的非变性、可生物降解产品，特别是具有“绿色提取物”价值的产品。
有利地使用水或植物油作为绿色溶剂。
在一个特定的实施方案中，本发明涉及石榴花油性提取物和芍药花油性提取物的联合，所述油性提取物优选通过上述提取方法来获得。
石榴提取物
本发明使用石榴提取物(extrait de grenadier)，优选来自石榴(Punicagranatum)物种的石榴提取物，该物种是千屈菜科(Lythracées)的果树，源自西亚，在热带和亚热带地区栽培。
在本发明的上下文中，用于获得植物提取物的石榴优选源自摩洛哥。
在本发明的上下文中，石榴植物提取物从所述植物的一部分中获得，所述部分选自种子、根、鳞茎、茎、叶、花瓣、花、花头、整株植物及其混合物。在一个优选的实施方案中，所述石榴提取物，石榴(Punica granatum)，是具有INCI名称(国际化妆品原料命名(International Nomenclature Cosmetics Ingrédients))：石榴(Punica granatum)花提取物。
在一个特定的实施方案中，所述石榴提取物通过油提取使用已获专利的油脂生态提取(Oléo-éco-extraction)方法来获得，所述方法特别描述于欧洲专利EP2413706(B1)中。有利地，该方法允许使用天然脂肪物质提取石榴花中含有的天然非挥发性化合物，而不使用有机溶剂且不经过化学转化，所述天然脂肪物质特别是植物油或蜡，优选霍霍巴蜡(cire de jojoba)。
因此，在一个特定的、优选的实施方案中，本发明使用的所述石榴提取物通过至少包括以下步骤的提取方法来获得：
a)在高于所述脂肪物质的熔点的温度和在无氧或基本无氧的气氛中，将可分散形式的固体原料(优选石榴花)与天然脂肪物质(优选霍霍巴蜡)混合并浸渍；
b)在无氧或基本无氧的气氛中，使用微波加热至80至200℃的温度持续10min或更短时间；
c)在高于脂肪物质的熔点的温度和无氧或基本无氧的气氛中，使用微波将待提取的材料微分散在所述天然脂肪物质中并任选地使原料细胞破裂，步骤c)可能在步骤b)之前、期间或之后进行。
在该特定的实施方案中，预先使石榴花破碎，优选在低温(例如在-20和-80℃之间)破碎。在低温破碎有利地允许保存植物材料中含有的活性分子。
因此，本发明使用的所述石榴提取物优选是石榴花的油性提取物，进一步优选在霍霍巴蜡中的石榴花提取物。
这种石榴的油性提取物具有用于美容用途的有利特性。石榴花富含多酚，特别是鞣花酸和花青素：抗氧化分子。此外，液体霍霍巴蜡具有接近皮肤皮脂的成分，98％由对表皮细胞间粘固剂的脂质具有强亲和力的C20:1酯组成。
因此，使用在霍霍巴蜡中的石榴花提取物对于实施本发明的美容方法特别有利，因为该提取物特别促进保湿、润肤并参与皮肤重组特性(紧致度、弹性)。
在一个优选的实施方案中，用于本发明的石榴提取物是Oléos以商品名“Plump
Figure BDA0003683408400000051
”销售的产品。“Plump
Figure BDA0003683408400000052
”产品在国际INCI命名中被引用：油蜡树(霍霍巴)籽油(和)石榴花提取物(和)聚甘油-3二异硬脂酸酯(Simmondsia Chinensis(Jojoba)Seed Oil(and)Punica Granatum Flower Extract(and)Polyglyceryl-3Diisostearate)。
本发明的美容组合物中含有有效量的石榴提取物以获得所需效果。
特别地，所述石榴提取物(优选以商品名“Plump
Figure BDA0003683408400000061
”销售的产品)的含量范围是相对于组合物的总重量以原料重量(产品重量)计0.0001％至10％，特别是0.0005％至5％，优选0.001％至1％，更优选0.005％至0.5％，进一步优选0.01％至0.4％，甚至0.05％至0.3％。
芍药提取物
本发明使用芍药提取物(extrait de pivoine)，优选来自荷兰芍药(Paeoniaofficinalis)物种的药用芍药提取物，该物种是源自南欧和中欧的草本植物。
在本发明的上下文中，用于获得植物提取物的芍药优选源自法国。
在本发明的上下文中，芍药植物提取物从所述植物的一部分中获得，所述部分选自种子、根、鳞茎、茎、叶、花瓣、花、花头、整株植物及其混合物。在一个优选的实施方案中，来自荷兰芍药的所述芍药提取物是花提取物(INCI名称：荷兰芍药花提取物(Paeoniaofficinalis flower extract))。
在一个特定的实施方案中，所述芍药提取物通过在甜杏仁油中浸渍来获得。
在一个特定的实施方案中，所述甜杏仁油通过包括以下步骤的方法来获得：
a)冷榨甜杏仁；
b)在中性土上对初榨油进行脱色；和
c)对初榨油进行蒸汽除臭。
在步骤c)之后得到的甜杏仁油是精制甜杏仁油。
因此，在一个特定和优选的实施方案中，本发明使用的所述芍药提取物通过包括以下步骤的提取方法来获得：
a)冷榨甜杏仁；
b)在中性土上对初榨油进行脱色；
c)对初榨油进行蒸汽除臭，和
d)在步骤c)获得的精制甜杏仁油中浸渍芍药植物材料。
在一个特定的实施方案中，在所述甜杏仁油中浸渍之前使植物材料干燥，所述植物材料优选花，更优选芍药花瓣。
因此，本发明使用的所述芍药提取物优选是芍药花的油性提取物，更优选在甜杏仁油中的芍药花提取物。
有利地，甜杏仁油在法国药典中被引用，并且可以用于本发明的美容组合物中。此外，甜杏仁油具有用于美容用途的有利特性。甜杏仁油传统上用于软化皮肤，具有舒缓的特性。
甜杏仁油特别是具有高ω-6含量。这些脂肪酸参与皮肤细胞膜的流动性，因此对于维持健康的皮肤至关重要。甜杏仁油还富含亚油酸(C18:2n-6)，以其重组和保护效果而闻名，这种脂肪酸包含在神经酰胺的成分中，有助于加强保护性皮肤屏障。然而，众所周知，皮肤中亚油酸的存在随年龄增长而大大减少(Hayashi 2003)。甜杏仁油还具有高ω-9含量，特别是油酸(C18:1n-9)。这些ω-9以其滋养特性而闻名，因此特别适用于干燥和受损的皮肤(特别是嘴唇)，它们有助于在此皮肤表面形成成膜屏障，从而防止水分蒸发。皮肤中的油酸也随年龄增长而减少。
因此，使用在甜杏仁油中的芍药花提取物特别适用于本发明的美容方法，该提取物特别是促进皮肤和/或嘴唇以及皮肤屏障的保湿和滋养。
在一个优选的实施方案中，本发明使用的芍药提取物是Greentech以商品名“Pivoine de France extrait huileux(amande douce raffinée)”销售的产品。该产品在国际INCI命名中被引用：甜扁桃(甜杏仁)油(和)荷兰芍药花提取物(Prunus Amygdalusdulcis(sweet almond)oil(and)Paeonia officinalis flower extract)。
本发明的美容组合物中含有有效量的芍药提取物以获得所需效果。
特别地，所述芍药提取物(优选以商品名“Pivoine de France extrait huileux(amande douce raffinée)”销售的产品)的含量范围是相对于组合物的总重量以原料重量(产品重量)计0.0001％至10％，特别是0.0005％至5％，优选0.001％至1％，更优选0.005％至0.5％，进一步优选0.01％至0.4％，甚至0.05％至0.3％。
本发明的美容和盖仑(galénique)组合物
在本发明中，这种提取物的联合特别用于制备美容组合物。
因此，一方面，本发明涉及一种美容组合物，其包含在生理学上可接受的介质中的石榴提取物和芍药提取物。
“生理学上可接受的”或“美容上可接受的”是指组合物适合局部使用，接触哺乳动物的皮肤和/或嘴唇，更特别是人的皮肤和/或嘴唇，优选嘴唇。
在一个优选的实施方案中，所述石榴提取物是石榴花提取物，更优选石榴花的油性提取物。
在另一个优选的实施方案中，所述芍药提取物是芍药花提取物，更优选芍药花的油性提取物。
在一个优选的实施方案中，通过上述提取方法来制备所述石榴提取物和所述芍药提取物。优选地，所述石榴花的油性提取物在霍霍巴油中提取。同样优选地，所述芍药花的油性提取物在甜杏仁油中提取。
在一些特定的实施方案中，所述美容组合物还包含牛油树脂(beurre de karité)(牛油果树果脂(Butyrospermum parkii))。
牛油树脂在本发明的美容方法中具有完全有利的特性。当本发明的美容组合物中含有这种脂时，它有助于滋养和保护嘴唇皮肤，促进皮肤更新并防止皮肤干燥。因此，牛油树脂为皮肤或嘴唇提供保护，使其免受外源性侵袭如恶劣天气、寒冷、风或日光等。
优选地，本发明的美容组合物中使用的牛油树脂是通过自然方法获得的有机牛油树脂，对环境没有影响并且不含溶剂和防腐剂。还优选地，本发明的美容组合物中使用的牛油树脂是富含不可皂化部分的脂。
“不可皂化部分”是指皂化后获得的非甘油酯、水不溶性部分。植物油中含有少量的不皂化物部分，其特别富含多酚、植物甾醇、矿物质、维生素、和其他抗氧化酶。
在本发明中，优选通过超临界CO2技术来获得富含不可皂化部分的牛油树脂。
因此，在一个最佳优选的实施方案中，本发明涉及一种美容组合物，其包含在生理学上可接受的介质中的：
a.在霍霍巴油中的石榴花提取物，优选在霍霍巴油中的石榴(Punica Granatum)花提取物；
b.在甜杏仁油中的芍药花提取物，优选在甜杏仁油中的荷兰芍药花提取物；和
c.任选地，牛油树脂。
在一个优选的实施方案中，本发明的组合物包含：
-石榴花的油性提取物，特别是Oléos以“Plump
Figure BDA0003683408400000091
”的商品名销售的提取物，其具有INCI名称：油蜡树(霍霍巴)籽油(和)石榴花提取物(和)聚甘油-3二异硬脂酸酯；和
-芍药花的油性提取物，特别是Greentech以“Pivoine de France extraithuileux(amande douce raffinée)”的商品名销售的提取物，其具有INCI名称：甜扁桃(甜杏仁)油(和)荷兰芍药花提取物。
在本发明中，使用有效量的石榴的油性提取物和芍药的油性提取物以获得所需效果。优选联合使用它们并掺入适合局部应用于角蛋白材料(特别是皮肤和/或嘴唇，优选嘴唇)的美容组合物中。
在一个特定的实施方案中，优选联合使用石榴的油性提取物和芍药的油性提取物，并且其各自在所述美容组合物中的含量范围是相对于组合物的总重量以原料重量计0.0001％至10％，优选0.0005％至5％，更优选0.001％至1％。
在一个特定和优选的实施方案中，所述提取物各自在组合物中的含量范围是相对于组合物的总重量以重量计0.1％至1％，更优选以重量计0.2至0.5％。
在一个优选的实施方案中，本发明的组合物包含：
-石榴花的油性提取物，特别是Oléos以“Plump
Figure BDA0003683408400000092
”的商品名销售的提取物，其具有INCI名称：油蜡树(霍霍巴)籽油(和)石榴花提取物(和)聚甘油-3二异硬脂酸酯，其含量范围是相对于组合物以重量计0.001至1％，优选0.1至1％，更优选0.2至0.5％，和
-芍药花的油性提取物，特别是Greentech以“Pivoine de France extraithuileux(amande douce raffinée)”的商品名销售的提取物，其具有INCI名称：甜扁桃(甜杏仁)油(和)荷兰芍药花提取物，其含量范围是相对于组合物的总重量以重量计0.001至1％，优选0.1至1％，更优选0.2至0.5％。
在一个优选的实施方案中，本发明的美容组合物是用于角蛋白材料(特别是皮肤和/或嘴唇，特别是嘴唇)的护理和/或化妆组合物。
本发明的美容组合物包含至少一种石榴提取物、至少一种芍药提取物、任选的牛油树脂和另外一种或多种本领域技术人员已知的美容上可接受的赋形剂，以获得用于局部应用的组合物。
因此，本发明还涉及用于嘴唇和/或皮肤的局部组合物形式的美容组合物，其特别是润唇膏、棒、唇釉、霜、水包油或油包水乳剂或复合乳剂、溶液、混悬液、凝胶、乳液、润肤露或精华液的形式。
在一个优选的实施方案中，所述组合物是润唇膏、棒或唇釉的形式。
在另一个优选的实施方案中，所述组合物是护肤霜或油的形式。
本发明的组合物还可以包含至少一种美容添加剂，其选自抗氧化剂、润肤剂、保湿剂、抗衰老剂、香料及其混合物。
本发明的组合物中有利地使用的美容添加剂的含量可以是相对于组合物的总重量以(原料的)重量计0.0001％至10％，优选0.001％至5％。
根据组合物的类型，还可以选择一种或多种美容上可接受的赋形剂，其选自聚合物、表面活性剂、流变剂、香料、电解质、pH调节剂、防腐剂、着色剂、珠光剂、颜料及其混合物。
根据所需的盖仑制剂形式，本领域技术人员能够调整水相和/或脂肪相的类型和含量。
在一个实施方案中，本发明的组合物是无水组合物。
“无水”特别是指优选非有意地向组合物加入水，但水可以以痕量形式存在于组合物中使用的不同化合物中。特别地，本发明的组合物包含相对于所述组合物的总重量以重量计小于4％的水，优选小于3％，更优选小于2％，进一步优选小于1％，更进一步优选以重量计小于0.5％的水，甚至完全不含水。
在另一个实施方案中，本发明的组合物包含水相。
水相存在时一般占相对于组合物的总重量以重量计1至99％。脂肪相或油相的范围通常是相对于所述组合物的总重量以重量计0.2％至45％，优选0.5％至30％，更优选2％至25％。
水相
在一些实施方案中，本发明的美容组合物包含水相。本发明的组合物的水相包含水，并任选包含水溶性溶剂。
根据本发明的“水溶性溶剂”是指在环境温度下呈液态并可与水混溶(在25℃和大气压下在水中的混溶性以重量计大于50％)的化合物。可以特别提及：
-C1-C5低级单醇，如乙醇、异丙醇及其混合物；
-C2-C8二醇，如乙二醇、丙二醇、1,3-丁二醇、二丙二醇及其混合物；
-C2-C32多元醇，如聚甘油、聚乙二醇及其混合物；
-及其混合物。
它还可以包括亲水胶凝剂、抗氧化剂、防腐剂及其混合物。
作为“亲水胶凝剂”，可以特别提及丙烯酸聚合物、丙烯酸和甲基丙烯酸的共聚物、羧基乙烯聚合物、丙烯酸类或聚氨酯类缔合增稠剂、多糖胶凝剂、天然或改性树胶、矿物胶凝剂及其混合物。
本发明的美容组合物中亲水胶凝剂的含量范围通常是相对于所述组合物的总重量以重量计0.01％至5％，特别是0.1％至4％，优选0.2％至3％，更优选0.5％至2％。
脂肪相或油相
在一些实施方案中，本发明的美容组合物包含脂肪相(固体脂肪物质)或油相。
“油相”是指油或彼此可以混溶或不混溶的油的混合物。
本发明中的“油”是指在25℃和大气压下不溶于水且呈液态的脂肪物质。
这些油可以是挥发性的或非挥发性的植物油、矿物油或合成油。
本发明中的“挥发油”是指具有挥发性的油，其由以下给出的标准中的至少一项定义。
本发明中的挥发性可以通过例如在25℃用经验方法测量的蒸气压来定义，并且具有在2.6Pa和40000Pa之间、例如在5Pa和20000Pa之间、10Pa和8000Pa之间、甚至在15和150Pa之间的值。蒸气压应根据对感兴趣的化合物最适用的方法之一进行测量，特别是文件《OECD化学品测试指南-蒸气压(OECD Guidelines for the Testing of Chemicals-Vapour pressure)》(2006年3月23日商定的第104号文件)中推荐的方法。可选地，可以选择在大气压下沸点低于250℃，优选低于230℃，更优选在150℃和220℃之间的挥发油。最后，挥发性油可以定义为闪点范围为35℃至100℃，优选40℃至80℃的油。
本发明中的“非挥发性油”是指不符合上述定义的挥发性标准的油，特别是在25℃用经验方法测量的蒸气压低于2.6Pa，优选低于0.13Pa，特别是用上述方法测量的油。
本发明的油相可以包含天然来源的油、烃油、含硅油及其混合物。
这些油性化合物在30℃可以是挥发性的或非挥发性的、液态或固态的植物油、矿物油或合成油。
本发明中的“天然来源的油”是指从植物、根、叶或果实中提取的植物油，任选通过酯化转化。
本发明中的“烃油”是指主要含有氢和碳原子的油化合物。
作为烃类非挥发性油化合物，可以特别提及烃油、植物来源的烃油、C10-C40合成醚、C10-C40合成酯、C12-C26脂肪醇、C12-C22高级脂肪酸及其混合物。
本发明中的“含硅油”是指含有至少一个硅原子，特别是至少一个Si-O基团的油。
脂肪相或油相还可以包含蜡、糊状脂肪物质及其混合物。
本发明中的“蜡”是指化合物，其在25℃为固体呈固态/液态可逆变化并且熔点高于30℃，优选高于45℃。
可以特别提及聚乙烯蜡、小烛树蜡、蜂蜡及其混合物。
本发明的组合物(特别是用于唇部的组合物)可以具有的蜡含量范围是相对于组合物的总重量以重量计5％至25％，例如10％至20％，优选以重量计12％至18％。
“糊状脂肪化合物”或“糊状化合物”或“糊状脂肪物质”是指在温度25℃具有液体部分和固体部分的非结晶脂肪化合物。
例如，糊状化合物选自羊毛脂及其衍生物、脂肪酸甘油三酯及其衍生物、牛油树脂、可可脂、芒果油或脂及其混合物。
本发明的组合物(特别是用于唇部的组合物)可以具有的糊状化合物含量范围是相对于组合物的总重量以重量计5％至25％，例如10％至22％，优选以重量计15％至20％。
美容方法和用途
下面描述的美容方法和美容用途旨在应用于角蛋白材料，特别是健康的角蛋白材料，优选健康的皮肤和/或嘴唇，特别是健康的嘴唇(“健康”受试者)。
根据本发明的“健康角蛋白材料”是指不患有与病理病状相关的病症的角蛋白材料(“非健康”受试者，患有病态)。术语皮肤和/或嘴唇，或健康皮肤和/或嘴唇，将在本说明书的其余部分中无差别地使用。
本发明进一步的主题涉及一种用于护理和/或化妆健康的角蛋白材料(特别是皮肤和/或嘴唇)的美容方法，其包括将至少一层例如如上所述的美容组合物应用于所述角蛋白材料。
在本发明中，所述美容方法旨在促进和/或刺激角蛋白材料(优选皮肤和/或嘴唇)的保湿和/或滋养，和/或防止和/或减少皮肤和/或嘴唇的体积损失、紧致度损失、弹性损失、皮肤厚度下降和/或屏障功能损害。
因此，本发明的所述美容方法特别是通过其对保湿的效果来允许改善角蛋白材料的舒适感，特别是皮肤和/或嘴唇的舒适感。
本发明进一步的主题是如上所述的植物提取物的联合的美容用途，所述联合特别是至少一种在霍霍巴油中的石榴花提取物和在甜杏仁油中的芍药花提取物的联合，其作为活性成分的联合，以促进和/或刺激角蛋白材料(优选皮肤和/或嘴唇)的保湿和滋养，和/或防止和/或减少皮肤的体积损失、紧致度损失、弹性损失、皮肤厚度下降和/或屏障功能损害。
在一个特定的实施方案中，用于本发明的方法的组合物包含：
-石榴花的油性提取物，特别是Oléos以“Plump
Figure BDA0003683408400000131
”的商品名销售的提取物，其具有INCI名称：油蜡树(霍霍巴)籽油(和)石榴花提取物(和)聚甘油-3二异硬脂酸酯；和
-芍药花的油性提取物，特别是Greentech以“Pivoine de France extraithuileux(amande douce raffinée)”的商品名销售的提取物，其具有INCI名称：甜扁桃(甜杏仁)油(和)荷兰芍药花提取物。
在一个特定的实施方案中，本发明的组合物将应用于皮肤紧致度和/或弹性和/或体积损失或皮肤干燥的健康受试者。
在另一个特定的实施方案中，本发明的组合物将应用于嘴唇体积损失或嘴唇干燥或容易受刺激的健康受试者。
本发明在以下非限制性实施例中进行说明。
除非另有说明，百分比以相对于组合物的总重量的原料重量表示。
实施例
1.材料和方法
1.1.石榴和芍药的油性提取物
以下实施例中使用的提取物是：
·石榴花的油性提取物：Oléos的“Plump
Figure BDA0003683408400000141
”，其具有INCI名称：油蜡树(霍霍巴)籽油(和)石榴花提取物(和)聚甘油-3二异硬脂酸酯。
·芍药花的油性提取物：Greentech的“Pivoine de France extrait huileux(amande douce raffinée)”，其具有INCI名称：甜扁桃(甜杏仁)油(和)荷兰芍药花提取物。
在存在1％BSA(牛血清白蛋白)的培养基中，以原料重量计0.25％的浓度使用这些提取物，以溶解油性活性成分。
1.2.正常人角质形成细胞的培养和处理
正常人角质形成细胞(KHN)从腹部整形术获得，在第4代接种于TPP150烧瓶中于补充Epilife培养基中。在汇合前用胰蛋白酶处理KHN(0.05％胰蛋白酶-EDTA，GIBCO-Invitrogen)，并用含有血清的培养基中和。然后在第5代将它们接种于96孔成像板(μ-板96孔，ibiTreat，Ibidi)中，比例为每孔15000个细胞。
在汇合时，用在含有200μM CaCl2的完全Epilife培养基中的本发明的植物提取物处理KHN，以促进细胞分化(0.2mL/孔)。每种条件的处理一式三份进行48h(研究早期分化标志物)或进行5天(研究晚期分化标志物)。对于未处理的对照条件(NT)，将培养基替换为新鲜培养基+CaCl2。
1.3.正常人角质形成细胞的培养和处理
正常人成纤维细胞(FHN)从腹部整形术获得，在第P6代接种于96孔板中于补充10％胎牛血清的1g/L葡萄糖DMEM培养基中，接种密度为每孔30000个细胞。
在汇合时，用在1g/L葡萄糖+10％SVF的DMEM培养基中的本发明的植物提取物处理FHN。每种条件的处理一式三份进行5天。对于对照条件NT(未处理)，将培养基替换为新鲜培养基。
1.4.免疫染色
在这些处理之后，用PBS(PBS片剂，Invitrogen GIBCO)冲洗细胞3次，并用福尔马林(10％中性缓冲的福尔马林溶液，Sigma)固定细胞10分钟。
用PBS冲洗3次后，用0.1％PBS Triton溶液(Triton X-100,Sigma)透化细胞膜，再用PBS冲洗3次。
在环境温度用1％PBS/BSA溶液(白蛋白，来自牛血清，Sigma)包被细胞30分钟。
然后将1％PBS/BSA溶液替换为在1％PBS/BSA中稀释的对应每种染色蛋白质的一抗溶液(见表1)。在4℃过夜孵育板。
用PBS冲洗细胞3次，并根据要靶向的一抗用二抗溶液(见表2)和用在1％PBS/BSA中稀释的1:500DAPI(4',6'-二脒基-2-苯基吲哚，二盐酸盐，Invitrogen MolecularProbes)包被细胞。在室温避光保存板一小时。
吸出二抗溶液，用PBS冲洗细胞两次，用蒸馏水冲洗细胞一次。每孔加入1mL比例的PBS。在4℃避光保存板，直到图像采集。
表1：染色靶标和使用条件列表
靶标名称 供应商 参考 透化 稀释 物种
水通道蛋白3 Abcam Ab 215853 + 1:200 兔
巢蛋白 R&D system AF2570 - 1:200 山羊
前胶原1型 Abcam Ab 64409 + 1:1000 大鼠
纤连蛋白 Novotec 24911 - 1:500 兔
1.5.图像采集和分析
用Thermo Cellomics的ArrayScan XTi扫描板。
使用Spot检测器图像分析软件分析图像，该软件是为arrayscan系统开发的生物应用程序。
该程序(流水线)允许检测靶标蛋白质的红色染色，对应于其表达。测量区的表面界定为整个图像表面。
通过检测蓝色染色计数细胞核，从而确定细胞数量。
1.6.统计分析
通过计算平均值、标准差和置信区间(α＝0.05)对结果进行统计分析。
用学生检验测量对照和处理细胞之间观察到的这些比率差异的显著性。如果获得的值小于0.05，则认为该检验是显著的。
2.本发明的植物提取物的体外效果
在KHN和FHN培养物上测试了本发明的植物提取物及其联合的效果。将KHN和FHN置于培养物中并按照上述方案进行处理，以评估感兴趣的蛋白质的基因表达。
2.1.对保湿的效果
水通道蛋白(AQP)是一类膜蛋白，其在生物膜中形成可渗透水分子的“孔”或通道。它们允许从最内层向表层供水；因此，在表皮下部表达的AQP3在建立跨表皮水流中发挥重大作用。申请人已经特别研究了其在调节皮肤保湿效果方面的优势。
图1中的结果显示，当单独用石榴的油性提取物处理时，水通道蛋白3的染色强度显著增加(+846％)。单独的芍药提取物对该基因的表达没有有益效果。然而，两种提取物的联合诱导水通道蛋白3的表达显著增加(+932％)，甚至高于单独使用石榴提取物获得的效果。
因此，这些结果表明本发明的两种提取物的联合对角蛋白材料(特别是皮肤和/或嘴唇)的保湿具有有益效果。
2.2.对真皮-表皮连接处的效果
真皮-表皮连接处或表皮基底膜是将真皮与表皮分开的无细胞区域。它为表皮与真皮的粘附提供机械支持，控制交换，并通过其成分糖蛋白作为角质形成细胞粘附和迁移的支持，在皮肤再表皮化中发挥重大作用。巢蛋白(也称为entactine)是在该基底层发现的一种糖蛋白，其允许组装该基底层的成分。
图2中的结果表明，单独用石榴的油性提取物处理对巢蛋白的表达没有效果。单独的芍药提取物允许该基因的表达显著增加(+16％)。出乎意料的是，结果还表明，这两种提取物的联合产生了协同效应，使巢蛋白的表达显著增加44％。
出乎意料的是，结果因此表明，本发明的两种提取物的联合表现出协同效应，其有益于维持真皮-表皮连接处并因此维持皮肤屏障功能。
2.3.对紧致度和体积的效果
胶原蛋白1属于称为结构蛋白的家族，并以原纤维形式存在于真皮中。细胞外基质(MEC)中大量含有这种支持蛋白，其为组织提供了对拉伸的机械阻力。前胶原蛋白是1型胶原蛋白的可溶性前体。MEC中胶原原纤维的堆积和组装是一个复杂的过程，其涉及多种蛋白质，包括结构蛋白纤连蛋白。
图3中的结果表明，单独用石榴的油性提取物处理或单独用芍药提取物处理都不能调节前胶原1的表达。另一方面出乎意料的是，结果表明，这两种提取物的联合产生了协同效应，使该基因的表达显著增加17％。
此外，图4中的结果表明，单独用石榴提取物处理导致纤连蛋白的表达显著降低6％，而单独用芍药提取物处理使纤连蛋白的表达显著增加5％。令人惊讶的是，两种提取物的联合产生了增强效果，其允许纤连蛋白的表达显著增加15％。
因此，令人惊讶的是，结果表明本发明的两种提取物的联合表现出协同效应、甚至是增强效果，因此有利于维持皮肤细胞外基质。因此，这种提取物的联合允许防止和/或减少体积损失、紧实度损失、弹性损失和皮肤厚度下降。
3.配方实施例
下面说明的美容组合物按照美容领域中的常规配制方法制备。
3.1.滋养霜(crème riche)形式的组合物
[表2]
Figure BDA0003683408400000171
Figure BDA0003683408400000181
*如材料和方法中所述
该组合物包含等比例的本发明的两种油性提取物的联合(0.25％石榴花的油性提取物和0.25％芍药花的油性提取物)。
该组合物应用于皮肤(特别是面部)，提供保湿和滋养效果，并允许防止和/或减少体积损失、紧致度损失、弹性损失和皮肤厚度下降。
3.2.润唇膏形式的组合物
[表3]
Figure BDA0003683408400000182
*如材料和方法中所述
该组合物包含等比例的本发明的两种油性提取物的联合(0.25％石榴花的油性提取物和0.25％芍药花的油性提取物)。
这种润唇膏应用于嘴唇，立即赋予滋养和保湿效果，防止体积损失，保护疼痛的嘴唇，并为嘴唇表面提供舒适性、润肤性和保湿性。

Claims (8)

1.一种包含在生理学上可接受的介质中的石榴提取物和芍药提取物的美容组合物，其特征在于所述石榴提取物是石榴花的油性提取物，所述芍药提取物是芍药花的油性提取物。
2.根据权利要求1所述的美容组合物，其特征在于所述石榴花的油性提取物是在霍霍巴油中的石榴花提取物。
3.根据权利要求1或2所述的美容组合物，其特征在于所述芍药花的油性提取物是在甜杏仁油中的芍药花提取物。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的美容组合物，其特征在于其包含：
a.在霍霍巴油中的石榴花提取物，优选在霍霍巴油中的石榴(Punica Granatum)花提取物，其含量范围是相对于所述组合物的总重量以原料重量计0.0001至10％；
b.在甜杏仁油中的芍药花提取物，优选在甜杏仁油中的荷兰芍药(Paenoniaofficinalis)花提取物，其含量范围是相对于所述组合物的总重量以原料重量计0.0001至10％；
c.任选地，牛油树脂。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的美容组合物，其特征在于其是用于嘴唇和/或皮肤的局部组合物形式，特别是润唇膏、棒、唇釉、霜、水包油或油包水乳剂或复合乳剂、溶液、混悬液、凝胶、乳液、润肤露或精华液的形式。
6.一种用于护理和/或化妆角蛋白材料特别是皮肤和/或嘴唇的美容方法，其包括将至少一层如权利要求1至5中任一项所定义的美容组合物应用于所述角蛋白材料。
7.根据权利要求6所述的美容方法，其特征在于其旨在促进和/或刺激角蛋白材料优选皮肤和/或嘴唇的保湿和/或滋养，和/或防止和/或减少皮肤和/或嘴唇的体积损失、紧致度损失、弹性损失、皮肤厚度下降和/或屏障功能损害。
8.如权利要求1至4中任一项所定义的植物提取物的联合的美容用途，所述联合特别是至少一种在霍霍巴油中的石榴花提取物和在甜杏仁油中的芍药花提取物的联合，其作为活性成分的联合，以促进和/或刺激角蛋白材料优选皮肤和/或嘴唇的保湿和/或滋养，和/或防止和/或减少皮肤的体积损失、紧致度损失、弹性损失、皮肤厚度下降和/或屏障功能损害。
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