CN114858111B - 一种检测海带游孢子游泳距离的方法 - Google Patents
一种检测海带游孢子游泳距离的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114858111B CN114858111B CN202210404425.3A CN202210404425A CN114858111B CN 114858111 B CN114858111 B CN 114858111B CN 202210404425 A CN202210404425 A CN 202210404425A CN 114858111 B CN114858111 B CN 114858111B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- kelp
- detection
- spores
- glass sheet
- distance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 title claims abstract description 55
- 230000009182 swimming Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 210000004215 spore Anatomy 0.000 claims abstract description 47
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 35
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims abstract description 34
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 8
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 210000003046 sporozoite Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 3
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 claims 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000003892 spreading Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01B—MEASURING LENGTH, THICKNESS OR SIMILAR LINEAR DIMENSIONS; MEASURING ANGLES; MEASURING AREAS; MEASURING IRREGULARITIES OF SURFACES OR CONTOURS
- G01B21/00—Measuring arrangements or details thereof, where the measuring technique is not covered by the other groups of this subclass, unspecified or not relevant
- G01B21/02—Measuring arrangements or details thereof, where the measuring technique is not covered by the other groups of this subclass, unspecified or not relevant for measuring length, width, or thickness
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G33/00—Cultivation of seaweed or algae
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种检测海带游孢子游泳距离的方法，包括以下步骤：游孢子液的制备：将成熟期的海带阴干后置于海水中放散，放散后取出海带，得到游孢子液；检测池的设置：准备一条检测池，将检测池的两端分别设为初始端和末端，并在检测池中加入1/4PES培养基，将若干带编号的玻璃片依次由检测池的初始端向末端等间隔水平放置，检测池池水静置5h以上；游泳距离的检测：将游孢子液沿检测池的初始端缓慢注入到检测池中，不扰动检测池中的水面，附着后观察玻璃片上胚孢子的附着量，确定符合条件的玻璃片，得到玻璃片距检测池初始端的距离，即为海带游孢子的游泳距离。本发明的方法可以得到每批游孢子的最佳游泳距离和最远游泳距离。
Description
技术领域
本发明涉及海带养殖技术领域，具体涉及一种检测海带游孢子游泳距离的方法。
背景技术
海带育苗生产的采苗操作中，需要将阴干处理后的海带种菜放到特定容器中集中放散游孢子，游孢子放散后，将计量好的游孢子液投入附苗池中，再将空白苗种帘放入附苗池中，游孢子附着到苗种帘上后，再将苗种帘转移到育苗池中平铺培育，获得海带种苗。
该采苗操作可节省海带游孢子，提高采苗效率，是一种长期采用的有效采苗技术。但该采苗操作中，同一采苗池不同位置苗种帘上游孢子有时附着密度差别很大，导致后续不同苗种帘上的种苗密度不稳定。海带采苗过程中，如若知道了游孢子游动的距离问题，可以根据游孢子游动距离调整采苗的方案，如：搅动的频率、育苗的操作时间，以及预估池壁的附着等外部条件的干扰。做到科学化，现代化，高质量采苗，使海带苗种帘上附着的游孢子密度均匀可控，进而培育出密度均匀高质量种苗。因此对解决海带育苗生产中种苗密度不均匀的问题，具有较大的实际生产意义。
发明内容
针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种检测海带游孢子游泳距离的方法。本发明通过选择合适数量的附着游孢子的玻璃片，得到游孢子附着均匀密度合理的游泳距离，以此距离在实际育苗中对游孢子进行泼洒，泼洒后的游孢子能够均匀附着于苗帘上，使海带种苗密度稳定，进而培育出密度均匀高质量的海带种苗，为海带高质量低成本养殖打下坚实的基础。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明的第一方面，提供一种检测海带游孢子游泳距离的方法，包括以下步骤：
(1)游孢子液的制备：将成熟期的海带阴干后置于消毒海水中放散，放散后取出海带得到游孢子液；
(2)检测池的设置：准备一条宽度＜8cm，长度≥5m，深度≥4cm的检测池，将检测池的两端分别设为初始端和末端，并在检测池中加入1/4PES培养基，将若干带编号的玻璃片依次由检测池的初始端向末端等间隔水平放置，检测池池水静置5h以上；
(3)游泳距离的检测：将步骤(1)制备的游孢子液沿检测池的初始端缓慢注入到检测池中，游孢子附着后，观察玻璃片上胚孢子的附着量，确定符合条件的玻璃片，得到玻璃片距检测池初始端的距离，即为海带游孢子的游泳距离。
优选的，步骤(1)中，所述阴干的时间为1-2h、温度为15℃。
优选的，步骤(1)中，所述放散为4℃的黑暗条件下静置5h。
优选的，步骤(1)中，所述游孢子液中游孢子的密度为10-20万个/mL。
优选的，步骤(2)中，所述检测池的长度为5.3m，宽度为7.5cm，深度为5cm。
优选的，步骤(2)中，所述检测池的初始端距第二片玻璃片的距离为40cm；所述玻璃片设置在水面以下的位置，水平放置于检测池底部。
优选的，步骤(3)中，所述游孢子液与1/4PES培养基的体积比为1：(18～22)。
优选的，步骤(3)中，所述培养的时间为12h，所述培养的条件为：15℃，光照1000Lux。
优选的，步骤(3)中，所述确定符合条件的玻璃片为：将附着游孢子的玻璃片取出，依次用高倍镜观察每个玻璃片上的胚孢子数量，当用20×10倍高倍镜观察到视野内的游孢子数量为10～20个时，该玻璃片即为符合条件的玻璃片。
本发明的第二方面，提供上述方法在海带育苗中的应用。
本发明的有益效果：
(1)本发明的方法可以在采苗前了解当年每一个品种海带游孢子在采苗温度下的游泳距离和附着特性，从而调整采苗操作，使海带游孢子在苗种帘上较均匀附着，进而培育出密度均匀的海带种苗。
(2)本发明通过选择合适数量的附着游孢子的玻璃片，得到游孢子附着均匀密度合理的游泳距离和游孢子的最远游泳距离，以此距离在实际育苗中对游孢子进行泼洒，泼洒后的游孢子能够均匀附着于苗帘上，使海带种苗密度稳定，进而培育出密度均匀高质量的海带种苗，为海带高质量低成本养殖打下坚实的基础。
附图说明
图1：成熟期野生海带的照片，红圈内为海带上附着的孢子；
图2：实施例中检测池的照片；
图3：最远距离的游孢子照片；
图4：附苗池及投放点示意图。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
正如背景技术所述，不同的海带品种甚至同一品种海带不同批次，游孢子在养殖池中的附着密度和游泳距离有一定差异。造成每次泼洒游孢子时，苗帘上附着的游孢子密度可能出现不均匀，影响苗种的质量。
基于此，本申请提供一种检测海带游孢子游泳距离的方法，在每次泼洒游孢子前，先进行海带游孢子游泳距离的检测，找到游孢子最适宜的游泳距离，根据这个距离进行泼洒游孢子，这样其在苗帘上的附着密度就能更为均匀。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本申请的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本申请的技术方案。
本发明实施例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料，均可通过商业渠道购买得到。
实施例
(1)游孢子液的制备：
种海带：成熟期的野生海带，表面有成熟海带孢子囊，见图1；
阴干时间：2h，温度15℃；
放散时间：5h，温度4℃，黑暗条件；
游孢子密度：11.25万个/mL。
消毒海水为经过121℃，0.1Mpa灭菌处理后的自然海水。
(2)检测池的制备：
材质：PVC管道；
管道总长度：5.3m；
管道直径：7.5cm；
将两个PVC管道拼接成U型并将PVC管道的1/3切割掉，保留下面2/3，将切割后的两个PVC管道的一端串联起来，另一端分别封住，并且在连接端设有清洗管道用的阀门，见图2，即得到检测池(以下简称U型管)。
(3)游泳距离的检测：
在步骤(2)制备的U型管道中加入1/4PES培养基5L。使U型管内的水深约为4cm。从U型管被封堵的一端起放置玻璃片，每隔40cm的距离水平放置一片玻璃片。共计放置14个玻璃片(依次编号1到14)，用来观察游孢子附着的情况，整个装置静置5h，使水面保持平静状态，消除水面波动给后续实验带来的干扰。
将260mL步骤(1)制备的游孢子液从U型管的封堵端缓慢注入，注入时尽量不扰动水面，次日早晨(12h后)观察玻璃片上游孢子附着的情况。整个实验过程中，房间内温度15℃，光照1000Lux。
观察玻璃片上游孢子的附着情况，每个视野下对胚孢子数量进行计数，每个玻璃片选择三个视野进行观察。所得检测结果见表1。
表1
后面编号的玻璃片因为游孢子附着数量较少，不再统计每个视野的数量，只检查有无游孢子附着。
最远是在第8个玻璃片上检查到了游孢子附着，游孢子最远距离可游至2.8m，见图3。本批次海带游孢子的游泳距离按照第四片玻璃片的距离进行计算，游泳距离＝(4-1)*40＝1.2m。
应用例
2021年8月14日，育苗人员挑选比较完整的成熟海带(孢子囊发育好)，将其表面清洗干净，用毛巾擦干，再用卫生纸反复擦干，挂放在室温15℃阴凉通风处1.5个小时。
用10℃凉水冲洗干净后，再将阴干后的种海带放于采苗池中，水温保持9-11℃。
将放散好的游孢子液定量之后，按照计算好的数量投入附苗池(附苗池长宽高分别为8.1*2.4*1.1m，池中注水水深约为0.9m)。游孢子液投池时，控制相邻投放点间水面距离约为2.4米。投池点位置见图4。
接着育苗人员穿着下水裤进入附苗池，拿着搅拌耙，整池搅拌10分钟。
再将准备好的每10层(苗帘4帘一层，水平并列绑缚到两根长1.4m的PVC圆管上)为一组的苗帘放入附苗池，每组苗帘间留有间隔。
用搅拌耙在每组苗帘间隔内不停搅拌2小时。
停止搅拌后，静置24h，待游孢子附着后，将海带苗帘平铺于育苗池。进入室内育苗管理阶段。
本年度获得了附着密度较往年更为均匀的海带苗帘，保障了苗种的质量。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种检测海带游孢子游泳距离的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）游孢子液的制备：将成熟期的海带阴干后置于消毒海水中放散，放散后取出海带，得到游孢子液；
（2）检测池的设置：准备一条宽度＜8cm，长度≥5m，深度≥4cm的检测池，将检测池的两端分别设为初始端和末端，并在检测池中加入1/4PES培养基，将若干带编号的玻璃片依次由检测池的初始端向末端等间隔水平放置，检测池池水静置5h以上；
（3）游泳距离的检测：将步骤（1）制备的游孢子液沿检测池的初始端缓慢注入到检测池中，游孢子附着后成为胚孢子，观察玻璃片上胚孢子的附着量，确定符合条件的玻璃片，得到玻璃片距检测池初始端的距离，即为海带游孢子的游泳距离。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述阴干的时间为1-2h、温度为15℃。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述放散为4℃的黑暗条件下静置5h。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述游孢子液中游孢子的密度为10-20万个/mL。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述检测池的长度为5.3m，宽度为7.5cm，深度为5cm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述检测池的初始端距第二片玻璃片的距离为40cm；所述玻璃片设置在水面以下的位置，水平放置于检测池底部。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述游孢子液与1/4PES培养基的体积比为1：（18~22）。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述培养的时间为12h，所述培养的条件为：15℃，光照1000Lux。
9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述确定符合条件的玻璃片为：将附着胚孢子的玻璃片取出，依次用高倍镜观察每个玻璃片上的胚孢子数量，当用20×10倍高倍镜观察到视野内的胚孢子数量为10~20个时，该玻璃片即为符合条件的玻璃片。
10.权利要求1~9任一项所述的方法在海带育苗中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210404425.3A CN114858111B (zh) | 2022-04-18 | 2022-04-18 | 一种检测海带游孢子游泳距离的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210404425.3A CN114858111B (zh) | 2022-04-18 | 2022-04-18 | 一种检测海带游孢子游泳距离的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114858111A CN114858111A (zh) | 2022-08-05 |
| CN114858111B true CN114858111B (zh) | 2023-11-28 |
Family
ID=82631008
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210404425.3A Active CN114858111B (zh) | 2022-04-18 | 2022-04-18 | 一种检测海带游孢子游泳距离的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114858111B (zh) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000023582A (ja) * | 1998-07-09 | 2000-01-25 | Okabe Co Ltd | 海中林造成用海藻種苗の生産方法及びその海中林造成用海藻種苗 |
| CN101185426A (zh) * | 2007-11-20 | 2008-05-28 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 无特定病原中国对虾零换水苗种生产方法 |
| CN101268744A (zh) * | 2008-05-06 | 2008-09-24 | 东北农业大学 | 大豆疫霉菌接种大豆的一种方法 |
| CN101592616A (zh) * | 2009-06-13 | 2009-12-02 | 中国科学院海洋研究所 | 一种定量海水中石莼属海藻显微阶段总个体数的方法 |
| CN101915565A (zh) * | 2010-07-20 | 2010-12-15 | 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 | 隐花植物盖度野外测定样框 |
| CN103255047A (zh) * | 2012-02-16 | 2013-08-21 | 远东生物科技股份有限公司 | 连续式多层式立体微藻培养系统及方法 |
| CN106754245A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-05-31 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 基于海藻胶液滴的数字pcr芯片及其应用 |
-
2022
- 2022-04-18 CN CN202210404425.3A patent/CN114858111B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000023582A (ja) * | 1998-07-09 | 2000-01-25 | Okabe Co Ltd | 海中林造成用海藻種苗の生産方法及びその海中林造成用海藻種苗 |
| CN101185426A (zh) * | 2007-11-20 | 2008-05-28 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 无特定病原中国对虾零换水苗种生产方法 |
| CN101268744A (zh) * | 2008-05-06 | 2008-09-24 | 东北农业大学 | 大豆疫霉菌接种大豆的一种方法 |
| CN101592616A (zh) * | 2009-06-13 | 2009-12-02 | 中国科学院海洋研究所 | 一种定量海水中石莼属海藻显微阶段总个体数的方法 |
| CN101915565A (zh) * | 2010-07-20 | 2010-12-15 | 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所 | 隐花植物盖度野外测定样框 |
| CN103255047A (zh) * | 2012-02-16 | 2013-08-21 | 远东生物科技股份有限公司 | 连续式多层式立体微藻培养系统及方法 |
| CN106754245A (zh) * | 2016-12-07 | 2017-05-31 | 中国科学院深圳先进技术研究院 | 基于海藻胶液滴的数字pcr芯片及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114858111A (zh) | 2022-08-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102550452B (zh) | 一种海葵亲体的培养方法 | |
| CN104160933B (zh) | 一种烟草浮悬交替循环育苗方法 | |
| CN103858745B (zh) | 萱藻全人工育苗技术 | |
| CN213404432U (zh) | 一种用于消落带水生观赏植物的培养装置 | |
| CN103155889A (zh) | 一种三角帆蚌苗种早繁设施及方法 | |
| CN114858111B (zh) | 一种检测海带游孢子游泳距离的方法 | |
| CN104756932A (zh) | 一种花鳗鲡斜矩阵养殖池 | |
| CN214385633U (zh) | 一种寄生蜂饲养收集装置 | |
| CN113728967A (zh) | 一种红树林蟹共作生态培育装置 | |
| CN212184749U (zh) | 一种小龙虾规模化培育大规格幼苗装置 | |
| CN201042156Y (zh) | 一种养殖羊栖菜用装置 | |
| CN218736424U (zh) | 一种便于调控的水稻耐盐鉴定装置 | |
| CN207692641U (zh) | 一种刺激大型藻类孢子放散的可控循环装置 | |
| CN215454824U (zh) | 一种帘式刺参稚参室外规模化采苗设施 | |
| CN205378693U (zh) | 一种多孔沙蚕养殖装置 | |
| CN204560515U (zh) | 一种羊栖菜陆上工厂化保苗设施 | |
| CN105248316A (zh) | 沙塘鳢分层式巢穴组合体 | |
| CN105724281B (zh) | 一种组合式沙蚕养殖装置及其使用方法 | |
| CN211671629U (zh) | 一种农业全自动育苗设备 | |
| CN210519724U (zh) | 基于纤维毯养殖的沉水植物养殖系统 | |
| CN203378375U (zh) | 一种巨藻幼苗的海区暂养装置 | |
| CN214102835U (zh) | 生态养殖系统及应用于该养殖系统中的养殖浮床 | |
| CN202232553U (zh) | 一种塘鳢育苗的育苗池体体系 | |
| CN109220768A (zh) | 一种贻贝附着基海带苗种中间育成方法 | |
| CN111011281A (zh) | 一种红螯螯虾的工厂化繁育方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |