CN114671935A - 基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法及结构 - Google Patents

基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法及结构 Download PDF

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CN114671935A CN202210447793.6A CN202210447793A CN114671935A CN 114671935 A CN114671935 A CN 114671935A CN 202210447793 A CN202210447793 A CN 202210447793A CN 114671935 A CN114671935 A CN 114671935A
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Abstract

本申请实施例提供的一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法及结构,包括获取容置模具;将待处理电极探针的待植入区域置于容置模具的容置空间内;向容置空间内注入基于基因重组蛛丝蛋白溶液,使得待植入区域完全浸入基于基因重组蛛丝蛋白溶液中;对待植入区域进行固化处理,使得在待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层,得到基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针。本申请通过可定制、大批量地制备出蛋白片段、功能、力学强度均优于天然蛋白的基因重组蛛丝蛋白,可以提高涂覆基因重组蛛丝蛋白的柔性探针的强度,使得在植入时无需使用额外的导入装置,减少植入偏离,降低对操作人员的要求。

Description

基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法及结构
技术领域
本发明涉及柔性探针制备技术领域,尤其涉及一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法及结构。
背景技术
可植入神经探针是用于记录单细胞、亚毫秒分辨率神经活动最广泛应用的工具,现有可植入神经探针包括硬质硅基探针和柔性电极探针。植入硬质硅基探针后将会引起排异反应,造成植入区域的周围神经坏死,慢性炎症以及神经元细胞的失活,进而会导致可植入神经探针接收到的信号随着时间的推移而退化。植入柔性电极具有较小的杨氏模量,植入后神经元生成状况良好,排异反应很少。
蜘蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白,不仅具有较高的强度、弹性、柔韧性、伸长度和抗张强度,而且具备轻盈、生物兼容、生物可降解等优势。然而,天然蜘蛛丝蛋白的产量极低,难以满足柔性电极探针的制备需求。
发明内容
本申请实施例提供了一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法及结构,可以提高涂覆基因重组蛛丝蛋白的柔性探针的强度,使得在植入时无需使用额外的导入装置,减少植入偏离,降低对操作人员的要求。
本申请实施例提供的一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法,包括:
获取容置模具;容置模具包括与待处理电极探针的结构匹配的容置空间;
将待处理电极探针的待植入区域置于容置空间内;
向容置空间内注入基于基因重组蛛丝蛋白溶液,使得待植入区域完全浸入基于基因重组蛛丝蛋白溶液中;
对待植入区域进行固化处理,使得在待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层,得到基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针。
进一步地,制备方法还包括制备基于基因重组蛛丝蛋白溶液的步骤,包括:
将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于缓冲溶液中,得到混合体系;缓冲溶液为三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液、氯化钠溶液和咪唑溶液的混合溶液;
对混合体系中进行离心处理,收集置于混合体系上层的第一清液;
对第一清液进行离心处理,收集置于第一清液上层的第二清液;
在第二清液中加入镍层析柱,对吸附在镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及对吸附在镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,得到待处理基因重组蛛丝蛋白;
对待处理基因重组蛛丝蛋白进行透析处理,得到目标基因重组蛛丝蛋白溶液。
进一步地,待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层的厚度大于等于预设厚度阈值;预设厚度阈值为10μm;
基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的截面积小于等于预设截面积;预设截面积为2000μm2
进一步地,将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于缓冲溶液中,得到混合体系,包括:
将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于缓冲溶液中,对工程菌进行破碎处理,得到混合体系;
其中,工程菌的质量和缓冲溶液的体积的比值在10g:1mL~10g:1000mL 内;
对工程菌进行破碎处理中破碎处理的压力在600bar~2000bar内。
进一步地,对混合体系中进行离心处理,收集置于混合体系上层的第一清液,包括:
在-3℃~30℃的温度中对混合体系进行离心处理,并收集置于离心处理后的混合体系上层的第一清液;
离心处理的转速在1r/min~40000r/min内,离心处理的时长在1s~10h 内。
进一步地,对第一清液进行离心处理,收集置于第一清液上层的第二清液,包括:
对第一清液进行恒温水浴处理,得到保温后的第一清液;
对保温后的第一清液进行离心处理,并收集置于离心处理后的第一清液上层的第二清液;
恒温水浴的温度在20℃~100℃内,恒温水浴的时长在0.1~100h内;
离心处理的转速在1r/min~40000r/min内,离心处理的时长在1s~10h 内,离心处理的温度在-3℃~30℃内。
进一步地,在第二清液中加入镍层析柱,对吸附在镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及对吸附在镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,得到待处理基因重组蛛丝蛋白,包括:
在体积在10mL~1000mL内的第二清液中加入镍层析柱,利用缓冲溶液对吸附在镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及利用缓冲溶液对吸附在镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,收集从镍层析柱上脱落的待处理基因重组蛛丝蛋白。
进一步地,对待处理基因重组蛛丝蛋白进行透析处理,得到目标基因重组蛛丝蛋白溶液,包括:
将待处理基因重组蛛丝蛋白置于磷酸缓冲液中进行梯度透析处理,并梯度透析处理后的待处理基因重组蛛丝蛋白转移至超纯水中进行透析处理,得到透析处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液;
对透析处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液进行离心处理,并收集置于离心处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液上层的目标基因重组蛛丝蛋白溶液;
梯度透析处理中透析袋的规格在10Da~10000000Da内,透析处理包括静置透析处理和磁力搅拌透析处理,磁力搅拌透析处理的转速在 1r/min~2000r/min内;
磷酸缓冲液的浓度在10mmol/L~1000mmol/L内;
梯度透析处理中更换磷酸缓冲液的时间间隔在0.1~100h内,每次更换磷酸缓冲液的体积在1mL~1000L内。
进一步地,制备方法还包括制备待处理电极探针的步骤,包括:
制备待处理衬底;待处理衬底包括基底和设置在基底上的牺牲层;
对牺牲层进行图形化处理,使得在牺牲层上形成第一电极层;
在第一电极层上制备隔离层;
在隔离层上制备第二电极层,并对第二电极层进行图形化处理,形成当次制备处理的外露电极的连接部分、引线结构和接触端部;
将多次制备处理得到的外露电极的连接部分连接,得到得到包含多层的引线结构和接触端部的待处理电极探针。
相应地,本申请实施例提供了一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针,基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针是上述基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法得到的探针;
基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针包括待植入区域和柔性缓冲带;
待植入区域和柔性缓冲带连接;
待植入区域涂覆有固化后的基于基因重组蛛丝蛋白溶液。
本申请实施例具有如下有益效果:
本申请实施例所公开的一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法及结构,基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法包括获取容置模具;容置模具包括与待处理电极探针的结构匹配的容置空间;将待处理电极探针的待植入区域置于容置空间内;向容置空间内注入基于基因重组蛛丝蛋白溶液,使得待植入区域完全浸入基于基因重组蛛丝蛋白溶液中;对待植入区域进行固化处理,使得在待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层,得到基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针。基于本申请实施例,通过可定制、大批量地制备出蛋白片段、功能、力学强度均优于天然蛋白的基因重组蛛丝蛋白,可以提高涂覆基因重组蛛丝蛋白的柔性探针的强度,使得在植入时无需使用额外的导入装置,减少植入偏离,降低对操作人员的要求。并且,可以使得在使用基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针时,不需要移除大面积颅骨,可以见减小对研究对象的创伤,缩短术后恢复期。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例或现有技术中的技术方案和优点,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单的介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其它附图。
图1是本申请实施例提供的一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法的流程示意图;
图2是本申请实施例提供的一种待处理电极探针的制备方法的流程示意图;
图3是本申请实施例提供的一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的制备方法的流程示意图。
具体实施方式
为使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合附图对本申请实施例作进一步地详细描述。显然,所描述的实施例仅仅是本申请一个实施例,而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本申请保护的范围。
此处所称的“实施例”是指可包含于本申请至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本申请实施例的描述中,需要理解的是,术语“第一”、“第二”仅用于描述目的,而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此,限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含的包括一个或者更多个该特征。而且,术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象,而不必用于描述特定的顺序或先后次序。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换,以便这里描述的本申请实施例能够以除了在这里图示或描述以外的顺序实施。此外,术语“包括”、“具有”和“为”以及他们的任何变形,意图在于覆盖不排他的包含。
下面介绍本申请一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法的具体实施例,图1是本申请实施例提供的一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法的流程示意图,本说明书提供了如实施例或流程图所示的方法操作步骤,但基于常规或者无创造性的劳动可以包括更多或者更少的操作步骤。实施例中列举的步骤顺序仅仅为众多执行顺序中的一种方式,不代表唯一的执行顺序,在实际执行时,可以按照实施例或者附图所示的方法顺序执行或者并行执行。
具体的如图1所示,该基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法方法可以包括:
S101:获取容置模具;容置模具包括与待处理电极探针的结构匹配的容置空间。
在一些可能的实施方式中,可以使用双光子打印技术和柔性聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane,pdms)制备容置模具,该容置模具可以具有与待处理电极探针的结构匹配的容置空间。可以利用丙醇对容置空间的内壁进行处理,使得容置空间的内壁具有亲水性,使得在后续将基因重组蛛丝蛋白溶液注入到溶脂空间时,基因重组蛛丝蛋白溶液不会从容置空间溢出。可选地,容置空间的深度可以大于等于20μm,在具体实施过程中,可以根据基因重组蛛丝蛋白涂层的预设目标厚度调整凹槽的深度。
S103:将待处理电极探针的待植入区域置于容置空间内。
图2是本申请实施例提供的一种待处理电极探针的制备方法的流程示意图,在实际应用过程中,可以采用图2所示的方法步骤制备待处理电极探针,具体步骤如下:
S201:制备待处理衬底;待处理衬底包括基底和设置在基底上的牺牲层。
S203:对牺牲层进行图形化处理,使得在牺牲层上形成第一电极层。
S205:在第一电极层上制备隔离层。
S207:在隔离层上制备第二电极层,并对第二电极层进行图形化处理,形成当次制备处理的外露电极的连接部分、引线结构和接触端部。
S209:将多次制备处理得到的外露电极的连接部分连接,得到得到包含多层的引线结构和接触端部的待处理电极探针。
在一些可能的实施方式中,在将待处理电极探针的待植入区域置于容置空间之前,可以向容置空间滴灌去离子水,使得在将待处理电极探针的待植入区域置于容置空间时,利用待处理电极探针的张力将待处理电极探针中的每个探针贴附在容置空间的每个子空间内,便于待处理电极探针与容置空间的对应匹配和对齐,并等待30min使去离子水蒸发干净。可以利用70%的酒精对待处理电极探针的待植入区域进行消毒处理,并将消毒处理后的待处理电极探针转移至去离子水中,随后可以在体式显微镜下,用镊子将待处理电极探针的待植入区域置于容置空间内。
S105:向容置空间内注入基于基因重组蛛丝蛋白溶液,使得待植入区域完全浸入基于基因重组蛛丝蛋白溶液中。
图3是本申请实施例提供的一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的制备方法的流程示意图,在实际应用过程中,可以采用图3所示的方法步骤制备基于基因重组蛛丝蛋白溶液,具体步骤如下:
S301:将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于缓冲溶液中,得到混合体系;缓冲溶液为三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液、氯化钠溶液和咪唑溶液的混合溶液。
本申请实施例中,缓冲溶液中三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液的PH值可以为8,三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液的浓度可以为0.1mmol/L~100mmol/L 浓度范围内的任意数值,氯化钠溶液的浓度可以为0.1mmol/L~1000mmol/L 浓度范围内的任意数值,咪唑溶液的浓度可以为0.1mmol/L~1000mmol/L浓度范围内的任意数值。也可以采用其他混合液体作为缓冲溶液来溶解工程菌,本申请实施例不作具体限定。
工程菌一般使用基因工程的方法,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。工程菌采用现代生物工程技术加工出来的新型微生物,具有多功能、高效和适应性强等特点。
在一些可能的实施方式中,可以将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液、氯化钠溶液和咪唑溶液的混合溶液中,并可以在600bar~2000bar的破碎压力下对工程菌进行破碎处理,得到混合体系。可选地,破碎压力可以为800bar~1500bar压力范围内的任意数值。其中,工程菌的质量和缓冲溶液的体积的比值为10g:1mL~10g:1000mL比值范围内的任意比值。可选地,工程菌的质量和缓冲溶液的体积的比值为10g:50mL~10g:500mL。
S303:对混合体系中进行离心处理,收集置于混合体系上层的第一清液。
在一些可能的实施方式中,可以在-3℃~30℃温度环境中对混合体系进行离心处理,并收集置于离心处理后的混合体系上层的第一清液,其中,离心处理的转速可以在1r/min~40000r/min内,离心处理的时长可以在 1s~10h内。
S305:对第一清液进行离心处理,收集置于第一清液上层的第二清液。
在一些可能的实施方式中,在得到第一清液之后,可以在20℃~100℃的环境中对第一清液进行恒温水浴处理0.1~100h,得到保温后的第一清液,并在转速为1r/min~40000r/min、20℃~100℃的温度环境中对保温后的第一清液进行离心处理1s~10h,并收集置于的离心处理后的第一清液上层的第二清液。该第二清液中杂质的含量低于第一清液中杂质的含量。
S307:在第二清液中加入镍层析柱,对吸附在镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及对吸附在镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,得到待处理基因重组蛛丝蛋白。
在一些可能的实施方式中,可以在体积在10mL~1000mL的第二清液中加入镍层析柱,并利用缓冲溶液对吸附在镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及利用缓冲溶液对吸附在镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,收集从镍层析柱上脱落的待处理基因重组蛛丝蛋白。其中,缓冲溶液可以为三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液、氯化钠溶液和咪唑溶液的混合溶液。缓冲溶液中三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液的PH值可以为8,三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液的浓度可以为0.1mmol/L~100mmol/L浓度范围内的任意数值,氯化钠溶液的浓度可以为0.1mmol/L~1000mmol/L浓度范围内的任意数值,咪唑溶液的浓度可以为0.1mmol/L~1000mmol/L浓度范围内的任意数值。也可以采用其他混合液体作为缓冲溶液来溶解工程菌,本申请实施例不作具体限定。
S309:对待处理基因重组蛛丝蛋白进行透析处理,得到目标基因重组蛛丝蛋白溶液。
在一些可能的实施方式中,在得到待处理基于重组蛛丝蛋白之后,可以将待处理基因重组蛛丝蛋白置于浓度为10mmol/L~1000mmol/L的磷酸缓冲液中进行梯度透析处理,并梯度透析处理后的待处理基因重组蛛丝蛋白转移至超纯水中进行透析处理,得到透析处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液。然后可以在转速为1r/min~40000r/min、20℃~100℃的温度环境中对透析处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液进行离心处理1s~10h,并收集置于离心处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液上层的目标基因重组蛛丝蛋白溶液。可选地,透析袋的规格在10Da~10000000Da,梯度透析处理中更换磷酸缓冲液的时间间隔为0.1~100h,每次更换磷酸缓冲液的体积为1mL~1000L。透析处理可以包括静置透析处理和磁力搅拌透析处理,磁力搅拌透析处理的转速为1r/min~2000r/min。
S107:对待植入区域进行固化处理,使得在待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层,得到基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针。
本申请实施例中,预设厚度阈值可以为10μm,待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层的厚度可以大于等于预设厚度阈值。即基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针表面的基因重组蛛丝蛋白涂层的厚度可以在10μm以上,可以提高基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的强度,使基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针暂时硬化,在植入时不需要依附针状导入装置即可植入大脑。
本申请实施例中,预设截面积可以为2000μm2,基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的截面积可以小于等于预设截面积。由于待处理电极探针本身具有极小的横截面,当基因重组蛛丝蛋白溶液在待处理电极探针表面固化后,将基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的截面积控制在 2000μm2以下,使得在植入时不需要移除大面积颅骨。
采用本申请实施例所提供的基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法,通过可定制、大批量地制备出蛋白片段、功能、力学强度均优于天然蛋白的基因重组蛛丝蛋白,可以提高涂覆基因重组蛛丝蛋白的柔性探针的强度,使得在植入时无需使用额外的导入装置,减少植入偏离,降低对操作人员的要求。并且,可以使得在使用基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针时,不需要移除大面积颅骨,可以见减小对研究对象的创伤,缩短术后恢复期。
本申请实施例提供了一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针,基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针是上述基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法得到的探针;该基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针可以包括待植入区域和柔性缓冲带,待植入区域和柔性缓冲带连接,待植入区域涂覆有固化后的基于基因重组蛛丝蛋白溶液。
由上述本申请提供的基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法或基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的实施例可见,本申请中基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法包括获取容置模具;容置模具包括与待处理电极探针的结构匹配的容置空间;将待处理电极探针的待植入区域置于容置空间内;向容置空间内注入基于基因重组蛛丝蛋白溶液,使得待植入区域完全浸入基于基因重组蛛丝蛋白溶液中;对待植入区域进行固化处理,使得在待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层,得到基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针。基于本申请实施例,通过可定制、大批量地制备出蛋白片段、功能、力学强度均优于天然蛋白的基因重组蛛丝蛋白,可以提高涂覆基因重组蛛丝蛋白的柔性探针的强度,使得在植入时无需使用额外的导入装置,减少植入偏离,降低对操作人员的要求。并且,可以使得在使用基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针时,不需要移除大面积颅骨,可以见减小对研究对象的创伤,缩短术后恢复期。
在本发明中,除非另有明确的规定和限定,术语“相连”、“连接”等术语应做广义理解,例如,可以是固定连接,也可以是可拆卸连接,或成一体;可以是机械连接,也可以是电连接;可以是直接相连,也可以通过中间媒介间接相连,可以是两个元件内部的相连或两个元件的相互作用关系。对于本领域的普通技术人员而言,可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
需要说明的是:上述本申请实施例的先后顺序仅仅为了描述,不代表实施例的优劣,且上述本说明书对特定的实施例进行了描述,其他实施例也在所附权利要求书的范围内。在一些情况下,在权利要求书中记载的动作或者步骤可以按照不同的实施例中的顺序来执行并且能够实现预期的结果。另外,在附图中描绘的过程不一定要求示出特定顺序或者而连接顺序才能够实现期望的结果,在某些实施方式中,多任务并行处理也是可以的或者可能是有利的。
本说明书中的各个实施例均采用递进的方式描述,各个实施例之间相同相似的部分互相参见即可,每个实施例重点说明的均为与其他实施例的不同之处。尤其,对于装置的实施例而言,由于其基于相似于方法实施例,所以描述的比较简单,相关之处参见方法实施例的部分说明即可。
以上所述是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的制备方法,其特征在于,包括:
获取容置模具;所述容置模具包括与待处理电极探针的结构匹配的容置空间;
将所述待处理电极探针的待植入区域置于所述容置空间内;
向所述容置空间内注入基于基因重组蛛丝蛋白溶液,使得所述待植入区域完全浸入所述基于基因重组蛛丝蛋白溶液中;
对所述待植入区域进行固化处理,使得在所述待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层,得到基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述制备方法还包括制备所述基于基因重组蛛丝蛋白溶液的步骤,包括:
将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于缓冲溶液中,得到混合体系;所述缓冲溶液为三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液、氯化钠溶液和咪唑溶液的混合溶液;
对所述混合体系中进行离心处理,收集置于所述混合体系上层的第一清液;
对所述第一清液进行离心处理,收集置于所述第一清液上层的第二清液;
在所述第二清液中加入镍层析柱,对吸附在所述镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及对吸附在所述镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,得到所述待处理基因重组蛛丝蛋白;
对所述待处理基因重组蛛丝蛋白进行透析处理,得到基因重组蛛丝蛋白溶液。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述待植入区域形成基因重组蛛丝蛋白涂层的厚度大于等于预设厚度阈值;所述预设厚度阈值为10μm;
所述基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针的截面积小于等于预设截面积;所述预设截面积为2000μm2
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于缓冲溶液中,得到混合体系,包括:
将经过发酵并表达基因重组蛛丝蛋白的工程菌溶解于缓冲溶液中,对所述工程菌进行破碎处理,得到所述混合体系;
其中,所述工程菌的质量和所述缓冲溶液的体积的比值在10g:1mL~10g:1000mL内;
所述对所述工程菌进行破碎处理中破碎处理的压力在600bar~2000bar内。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述对所述混合体系中进行离心处理,收集置于所述混合体系上层的第一清液,包括:
在-3℃~30℃的温度中对所述混合体系进行离心处理,并收集置于离心处理后的混合体系上层的第一清液;
所述离心处理的转速在1r/min~40000r/min内,所述离心处理的时长在1s~10h内。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述对所述第一清液进行离心处理,收集置于所述第一清液上层的第二清液,包括:
对所述第一清液进行恒温水浴处理,得到保温后的第一清液;
对保温后的第一清液进行离心处理,并收集置于离心处理后的第一清液上层的第二清液;
所述恒温水浴的温度在20℃~100℃内,所述恒温水浴的时长在0.1~100h内;
所述离心处理的转速在1r/min~40000r/min内,所述离心处理的时长在1s~10h内,所述离心处理的温度在-3℃~30℃内。
7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述在所述第二清液中加入镍层析柱,对吸附在所述镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及对吸附在所述镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,得到所述待处理基因重组蛛丝蛋白,包括:
在体积在10mL~1000mL内的所述第二清液中加入所述镍层析柱,利用所述缓冲溶液对吸附在所述镍层析柱上的杂蛋白进行清洗处理,以及利用所述缓冲溶液对吸附在所述镍层析柱上的基因重组蛛丝蛋白进行洗脱处理,收集从所述镍层析柱上脱落的所述待处理基因重组蛛丝蛋白。
8.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述对所述待处理基因重组蛛丝蛋白进行透析处理,得到目标基因重组蛛丝蛋白溶液,包括:
将所述待处理基因重组蛛丝蛋白置于磷酸缓冲液中进行梯度透析处理,并梯度透析处理后的待处理基因重组蛛丝蛋白转移至超纯水中进行透析处理,得到透析处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液;
对所述透析处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液进行离心处理,并收集置于离心处理后的基因重组蛛丝蛋白溶液上层的所述目标基因重组蛛丝蛋白溶液;
所述梯度透析处理中透析袋的规格在10Da~10000000Da内,所述透析处理包括静置透析处理和磁力搅拌透析处理,所述磁力搅拌透析处理的转速在1r/min~2000r/min内;
所述磷酸缓冲液的浓度在10mmol/L~1000mmol/L内;
所述梯度透析处理中更换所述磷酸缓冲液的时间间隔在0.1~100h内,每次更换所述磷酸缓冲液的体积在1mL~1000L内。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述制备方法还包括制备所述待处理电极探针的步骤,包括:
制备待处理衬底;所述待处理衬底包括基底和设置在所述基底上的牺牲层;
对所述牺牲层进行图形化处理,使得在所述牺牲层上形成第一电极层;
在所述第一电极层上制备隔离层;
在所述隔离层上制备第二电极层,并对所述第二电极层进行图形化处理,形成当次制备处理的外露电极的连接部分、引线结构和接触端部;
将多次制备处理得到的外露电极的连接部分连接,得到包含多层的引线结构和接触端部的待处理电极探针。
10.一种基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针,其特征在于,所述基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针是基于权利要求1-9任一所述的制备方法得到的探针;
所述基于基因重组蛛丝蛋白溶液的柔性探针包括待植入区域和柔性缓冲带;
所述待植入区域和所述柔性缓冲带连接;
所述待植入区域涂覆有固化后的基于基因重组蛛丝蛋白溶液。
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