CN114615999A - 药物抗体偶联物 - Google Patents

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Abstract

具有式[D‑(X)b‑(AA)w‑(T)g‑(L)‑]n‑Ab的药物偶联物，其中：D是具有下式(I)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，
Figure DDA0003532041000000011
其中D通过OR1、OR3或ZH处的羟基或ZH处的硫醇基共价连接至(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)，或(L)；其可用于治疗癌症。

Description

药物抗体偶联物
技术领域
本发明涉及新型药物偶联物、药物连接子化合物、其制备方法、含有所述药物偶联物的药物组合物及其作为抗肿瘤剂的用途。
背景技术
公开号为WO2013016120的专利申请描述了下式的Pederin及其类似物的全合成：
Figure BDA0003532040980000011
其中R1或R2中的至少一个包括连接子，所述连接子包括可与靶向部分结合的反应性官能团。
公开号为WO2018167270的国际专利申请涉及从自由生活的海洋α变形菌分离的具有高细胞毒活性的类Pederin化合物及其类似物。
近年来，随着更有效地靶向和杀死癌细胞的药物实体的发展，癌症的治疗取得了显著进展。研究人员已经利用由靶细胞(如癌细胞)选择性表达的细胞表面受体和抗原来开发基于抗体的药物实体，以肿瘤为例，所述抗体结合肿瘤特异性或肿瘤相关抗原。为了实现这一点，已经将细胞毒分子(如化疗药物、细菌、植物毒素和放射性核素)与单克隆抗体化学连接，所述单克隆抗体结合肿瘤特异性或肿瘤相关细胞表面抗原。
抗体-药物偶联物(ADC)代表了一种将细胞毒分子传递给癌细胞的靶向策略。然而，考虑到复杂的有效载荷、连接子和抗体结构，ADC代表了一个具有挑战性的发展领域，仍然需要进一步开发ADC。
发明内容
需要新的活性药物偶联物。本发明解决了这种需要。本发明还提供了用于制备本发明的药物偶联物的新的药物连接子化合物、用于制备本发明的新的药物偶联物的方法、含有所述药物偶联物的药物组合物及其作为抗肿瘤剂的用途，以及包含用于治疗癌症的本发明的药物偶联物的试剂盒。
在本发明的第一方面，提供了药物偶联物，所述药物偶联物包括药物部分，所述药物部分共价连接至所述药物偶联物的其余部分，所述药物偶联物具有式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab，其中：
D是具有下式(I)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，
Figure BDA0003532040980000021
其中：
D经由OR1、OR3或ZH处的羟基或经由ZH处的硫醇基共价连接至(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)；
R1和R2各自独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
R3选自氢、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
Z选自-O-和-S-；
Ra选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rb选自取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rc和Rd独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
X和T是相同或不同的延伸基团；
每个AA独立地是氨基酸单元；
L是连接子基团；
w是范围在0到12之间的一整数；
b为整数0或1；
g为整数0或1；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，并且在1至20的范围内。
在本发明的另一方面，提供了药物偶联物，其包含共价连接至药物偶联物其余部分的药物部分，所述化合物具有式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab，其中：
D是具有下式(II)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，
Figure BDA0003532040980000031
其中：
R1和R2各自独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3选自氢、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
Z为-O-或-S-；
Ra选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
Rb选自取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
Rc和Rd独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
取代基Rx选自由以下各项组成的组：可以可选地被至少一个基团Ry取代的C1-C12烷基，可以可选地被至少一个基团Ry取代的C2-C12烯基，可以可选地被至少一个基团Ry取代的C2-C12炔基，卤素原子，氧代基团，硫代基团，氰基，硝基，ORy，OCORy，OCOORy，CORy，COORy，OCONRyRz，CONRyRz，SRy，S(＝O)Ry，SO2Ry，SSRy，P(O)(Ry)ORz，NRyRz，NRyCORz，NRyC(＝O)NRyRz，NRyC(＝NRy)NRyRz，在一个或多个环中具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基可以可选地被一个或多个相同或不同的选自以下组的取代基取代：Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz、以及NRyC(＝NRy)NRyRz，包含被上述可选地被取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基，包含被上述可选地被取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷基氧基，以及具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元的饱和或不饱和杂环基，所述杂环基可选地被一个或多个取代基Ry取代，并且当在任一给定基团上存在多于一个的可选的取代基时，所述可选的取代基Ry可以相同或不同；
Ry和Rz各自独立地选自以下各项组成的组：氢、C1-C12烷基、被至少一个卤素原子取代的C1-C12烷基，包含被一个或多个环中具有6至18个碳原子的芳基取代的C1-C12烷基的芳烷基，以及包含被5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1-C12烷基的杂环烷基，所述杂环基具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子；
X和T是可以相同或不同的延伸基团；
每个AA独立地是氨基酸单元；
L是连接子基团；
w是范围在0到12之间的一整数；
b为整数0或1；
g为整数0或1；
其中b+g+w可选地不为0；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，并且在1至20的范围内。
正如我们将在下面更详细地解释和举例说明的那样，本发明的具有式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物代表了在解决上述问题方面的突破，除了基于迄今为止被用作有效载荷的细胞毒性药物的三个主要家族之外，还需要进一步的显示出优异的抗肿瘤活性的药物偶联物。
在本发明的另一方面，提供了具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是选自以下各式构成的组的连接子：
Figure BDA0003532040980000061
每条波浪线表示与(T)g(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(X)b(如果有的话)或D的共价连接点；
G选自卤素、-O-甲磺酰基和-O-甲苯磺酰基；
J选自卤素、羟基、-N-琥珀酰亚胺氧基、-O-(4-硝基苯基)、-O-五氟苯基、-O-四氟苯基和-O-C(O)-OR20；
R19选自：-C1-C12亚烷基-，-C3-C8碳环-，-O-(C1-C12亚烷基)-，-C6-C18亚芳基-，所述-C6-C18亚芳基-在一个或多个环中，所述-C6-C18亚芳基-可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-C6-C18亚芳基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C6-C18亚芳基-C1-C12亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C3-C8碳环)-，-(C3-C8碳环)-C1-C12亚烷基-，-C5-C14杂环-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C5-C14杂环)-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(C5-C14杂环)-C1-C12亚烷基-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(OCH2CH2)r-，以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R20是C1-C12烷基或在一个或多个芳环中具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基可选地被一个或多个取代基Rx取代；
r是范围在1-10之间的一整数；
g为整数0或1；
b为整数0或1；
w是范围在0到12之间的一整数；且
D、Rx、X、T和AA中的每一个如在本发明的第一方面中所定义；
其中对于式为D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，b+g+w不为0。
在本发明的优选实施例中，b+g+w不为0。在进一步的实施例中，b+w不是0。在又一些实施例中，当w不为0时，则b为1。
在本发明的另一方面，提供了具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物或其药学上可接受的盐或酯；其中D、X、AA、T、L1、b、g和w中的每一个如本文所定义；但进一步如果该化合物是具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，则b+w+g≠0。
在本发明的另一方面，提供了用于抗体药物偶联物的药物部分D。在本发明的另一方面，提供了用作抗体药物偶联物的有效载荷的药物部分D。在本发明的另一方面，提供了本文所述的药物部分D在制备抗体药物偶联物中的用途。
在本发明的另一方面，提供了具有式(Int)的合成中间体
Figure BDA0003532040980000071
其中
R1和R2各自独立地选自氢、OH的保护基、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
R3选自氢、OH的保护基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
Ra选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rb选自取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rc和Rd独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基。
在本发明的另一方面，提供了一种药物组合物，其包含根据本发明的药物偶联物和药学上可接受的载体。
在本发明的另一方面，提供了用作药物的根据本发明的药物偶联物。
在本发明的另一方面，提供了用于治疗癌症的根据本发明的药物偶联物。
在本发明的另一方面，提供了用于预防或治疗癌症的方法，包括将有效量的根据本发明的药物偶联物给予有此需要的患者。
在本发明的另一方面，提供了根据本发明的药物偶联物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
在本发明的另一方面，提供了试剂盒，其包含治疗有效量的根据本发明的药物偶联物和药学上可接受的载体。这种试剂盒是用来治疗癌症的。
根据本发明的试剂盒可包含治疗有效量的根据本发明的药物偶联物，和可选地，关于药物偶联物在治疗癌症中的用途的说明书。
在本发明的上述方面中，癌症可以选自包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤。在优选的实施例中，癌症是HER2阳性癌症。优选的HER2阳性癌症包括HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌。更优选的癌症是HER2阳性乳腺癌、HER2阳性卵巢癌和HER2阳性胃癌。最优选的癌症是HER2阳性乳腺癌。
在本发明的另一方面，提供了用于制备根据本发明的药物偶联物的方法，其包括偶联包含至少一个抗原结合位点的部分Ab和药物D，Ab和D如本文所定义。
优选实施例的详细描述
以下适用于本发明的所有方面：
在本发明的化合物中，烷基可以是支化或非支化的，并且优选具有1至约12个碳原子。更优选的一类烷基具有1至约6个碳原子。甚至更优选具有1、2、3或4个碳原子的烷基。甲基、乙基、正丙基、异丙基和丁基(包括正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)是本发明的化合物中特别优选的烷基。
在本发明的化合物中，烯基可以是支化或非支化的，具有一个或多个双键和2至约12个碳原子。更优选的一类烯基具有2至约6个碳原子。甚至更优选具有2、3或4个碳原子的烯基。乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基和3-丁烯基是本发明的化合物中特别优选的烯基。
在本发明的化合物中，炔基可以是支化或非支化的，具有一个或多个三键和2至约12个碳原子。更优选的一类炔基具有2至约6个碳原子。甚至更优选具有2、3或4个碳原子的炔基。
在本发明的化合物中，合适的芳基包括单环和多环化合物，所述多环化合物包括含有分开的和/或稠合的芳基的多环化合物。典型的芳基含有1至3个分开的和/或稠合的环和6至约18个碳环原子。优选芳基含有6至约10个碳环原子。特别优选芳基包括取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、取代或未取代的联苯基、取代或未取代的菲基和取代或未取代的蒽基。
合适的杂环基包括杂芳族和杂脂环族基团，所述杂芳族和杂脂环族基团含有1至3个分开的和/或稠合的环和5至约18个环原子。优选杂芳族和杂脂环族基团含有5至约10个环原子，最优选5、6或7个环原子。在本发明的化合物中，合适的杂芳族基团含有一个、两个或三个选自N、O或S原子的杂原子，包括例如香豆素基(包括8-香豆素基)、喹啉基(包括8-喹啉基)、异喹啉基、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、异噁唑基、噁唑基、咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、吲哚嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、哒嗪基、三嗪基、噌啉基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃吡啶基。本发明的化合物中，合适的杂脂环族基团含有一个、两个或三个选自N、O或S的杂原子，包括例如吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢噻喃基(tetrahydrothiopyranyl)、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、噻噁烷基(thioxanyl)、哌嗪基、氮杂环丁烷基(azetidinyl)、氧杂环丁烷基(oxetanyl)、硫杂环丁烷基(thietanyl)、高哌啶基(homopiperidyl)、氧杂环庚烷基(oxepanyl)、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、氧氮杂基、二氮杂基、硫氮杂基、1，2，3，6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基(indolinyl)、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊烷基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基(dihydrofuranyl)、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、3H-吲哚基和喹啉基。上述基团可在一个或多个可用位置被一个或多个合适的基团取代，如OR’、＝O、SR’、SOR’、SO2R’、NO2、NHR’、NR’R’、＝N-R’、NHCOR’、N(COR’)2、NHSO2R’、NR’C(＝NR’)NR’R’、CN、卤素、COR’、COOR’、OCOR’、OCONHR’、OCONR’R’、CONHR’、CONR’R’、被保护的OH、被保护的氨基、被保护的SH、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基，其中每个R’基团单独选自由以下各项组成的组：H、OH、NO2、NH2、SH、CN、卤素、COH、CO烷基、CO2H、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基。当这些基团本身被取代时，取代基可选自前面列出的基团。此外，当取代基上有多余一个的R’基团时，每个R’可以相同或不同。
在本发明的化合物中，卤素取代基包括F、Cl、Br和I。
更特别地，在本发明的化合物中，R1、R2、R20、Ra、Rb、Rc、Rd、Rx、Ry、Rz和R’定义中的烷基可以是具有1至12个碳原子的直链或支化的烷基链基团，优选是具有1至6个碳原子的烷基基团，更优选是甲基、乙基或异丙基，最优选是甲基。在M和Q的定义中，它们可以是具有1至6个碳原子的直链或支化的烷基链基团。甲基、乙基、正丙基、异丙基和丁基(包括正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)是本发明的化合物中特别优选的烷基。
在本发明的化合物中，R1、R2、Ra、Rb、Rc、Rd、Rx和R’定义中的烯基是支化或非支化的，并且可以具有一个或多个双键和2至12个碳原子，优选具有2至6个碳原子，更优选是具有2、3或4个碳原子的支化或非支化的烯基。乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基和3-丁烯基是本发明的化合物中特别优选的烯基。
在本发明的化合物中，R1、R2、Ra、Rb、Rc、Rd、Rx和R’定义中的炔基是支化或非支化的，并且可以具有一个或多个三键和2至12个碳原子，优选具有2至6个碳原子，更优选是具有2、3或4个碳原子的支化或非支化的炔基。
在本发明的化合物中，Rx、Ry和Rz定义中的卤素取代基包括F、Cl、Br和I，优选Cl。
在本发明的化合物中，Ra、Rb、Rc、Rd、Rx和R’定义中的杂环基是具有一个或多个环的5至14元的饱和或不饱和的杂环基，其在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子。杂环基可以是杂芳族基团或杂脂环族基团，杂脂环族基团可以是部分不饱和的，杂芳族基团和杂脂环族基团都包含1至3个分开的或稠合的环。优选杂芳族和杂脂环族基团含有5至10个环原子。在本发明的化合物中，合适的杂芳族基团含有一个、两个或三个选自N、O和S原子的杂原子，并且包括例如喹啉基，包括喹啉基(包括8-喹啉基)、异喹啉基、香豆素基(包括8-香豆素基)、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、异噁唑基、噁唑基、咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、吲哚嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、哒嗪基、三嗪基、噌啉基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃吡啶基。本发明的化合物中，合适的杂脂环族基团含有一个、两个或三个选自N、O或S的杂原子，包括例如吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、噻噁烷基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂基、二氮杂基、硫氮杂基、1，2，3，6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧戊环基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫戊烷基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、3H-吲哚基和喹啉基。
在本发明的化合物中，Ra、Rb、Rc、Rd、Rx、R20和R’定义中的芳基是含有分开的和/或稠合的芳基的单环或多环化合物，并具有6至18个环原子，且可选地被取代。典型的芳基含有1至3个分开的或稠合的环。优选地，芳基含有6至12个碳环原子。特别优选的芳基包括取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基、取代或未取代的联苯基、取代或未取代的菲基和取代或未取代的蒽基，最优选取代或未取代的苯基，其中取代基如上所述。
在本发明的化合物中，Rx、Ry和Rz定义中的芳烷基包括如上定义和示例的烷基，该烷基被一个或多个如上定义和示例的芳基取代。优选的示例包括可选地被取代的苄基、可选地被取代的苯乙基和可选地被取代的萘甲基。
在本发明的化合物中，Rx定义中的芳烷基氧基包括具有1至12个碳原子的烷氧基，该烷氧基被一个或多个如上定义和示例的芳基取代。优选地，烷氧基部分具有1至6个碳原子并且芳基包含6至约12个碳环原子，并且最优选地，芳烷基氧基是可选地被取代的苄氧基、可选地被取代的苯乙氧基和可选地被取代的萘甲氧基。
在本发明的化合物中，Ry和Rz定义中的杂环烷基包括如上定义和示例的烷基，该烷基被一个或多个如上定义和示例的杂环基取代。优选地，杂环烷基包括具有1至6个碳原子的烷基，该烷基在1个或2个环原子中被具有5至10个环原子的杂环基取代，并且杂环烷基可以是芳族的、部分饱和的或完全饱和的。更优选地，杂环烷基包括被杂环基取代的甲基或乙基，该杂环基选自由以下各项组成的组：吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、四氢呋喃基、噁烷基(oxanyl)、噻烷基(thianyl)、8-喹啉基、异喹啉基、吡啶基、吡嗪基、吡唑基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、四唑基、异噁唑基和苯并咪唑。
在本发明的化合物中，R19定义中的亚烷基是具有1至12个碳原子的直链的或支化的亚烷基，并且M、X、T和R30定义中的亚烷基是具有1至6个碳原子的直链的或支化的亚烷基。优选地，R19定义中的亚烷基是具有1至8个碳原子的直链的或支链亚烷基，更优选是具有1至6个碳原子的直链的或支化的亚烷基。对于M，优选的是具有1至3个碳原子的直链的或支化的亚烷基。在X的定义中，X的定义中的亚烷基优选为具有2至4个碳原子的直链的或支化的亚烷基。对于T，优选的是具有2至4个碳原子的直链的或支化的亚烷基。在R30的定义中，优选的是具有2至4个碳原子的直链的或支化的亚烷基，最优选具有3个碳原子的直链的亚烷基。为避免疑义，术语“亚烷基”被定义为指烷二基(alkanediyl)。
在本发明的化合物中，R19和M定义中的碳环基(carbocyclo group)是具有3至8个碳原子的环烷基，该环烷基在环烷基环上的任一位置具有将所述环烷基连接到药物偶联物的其余部分上的两个共价键。优选地，R19和M定义中的碳环基为具有3至7个碳原子的环烷基，更优选为具有5至7个碳原子的碳环基。
在本发明的化合物中，R19定义中的亚芳基是在一个或多个环中具有6至18个碳原子的芳基，且该芳基在芳环体系上的任一位置具有将所述亚芳基连接到药物偶联物的剩余部分的两个共价键。优选地，R19定义中的亚芳基是在一个或多个环中具有6至12个碳原子的芳基，该芳基在芳环体系上的任一位置具有两个共价键，并且最优选的亚芳基是亚苯基。
在本发明的化合物中，R19定义中的杂环基是包含1至3个分开的或稠合的环的杂环基，所述杂环基具有5至14个环原子并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子，其中在所述杂环基的环系上的任一位置存在两个共价键。杂环基是可以是杂芳族基团或杂脂环族基团(杂脂环族基团可以是部分不饱和的)。优选地，R19定义中的杂环基是包含1至3个分开的或稠合的环的杂环基，所述杂环基具有5至12个环原子并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子，其中在所述杂环基的环系上的任一位置存在两个共价键。
当在相同的药物部分中存在多于一个的基团Ra、Rb、Rc或Rd时，每个基团Ra可以相同或不同，Rb可以相同或不同，Rc可以相同或不同，Rd可以相同或不同。
当在取代基上存在多于一个的可选的取代基Rx、Ry、Rz或R’时，每个取代基Rx可以相同或不同，每个取代基Ry可以相同或不同，每个取代基Rz可以相同或不同，且每个取代基R’可以相同或不同。
在一个实施例中，D可以是式(Ia)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯：
Figure BDA0003532040980000141
其中D经由OR1、OR3或ZH处的羟基或经由ZH处的硫醇基共价连接至(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)；并且R1、R2、R3和Z如上式(I)所定义。
在另一个实施例中，D可以是式为(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯：
Figure BDA0003532040980000142
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与(L)的共价连接点；并且R1、R2、R3和Z如上式(I)或(II)所定义。
优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C12烷基；
并且R2、R3和Z如上所定义。
进一步优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
并且R1、R3和Z如上所定义。
进一步优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
并且R1、R2和Z如上所定义。
优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
Z为-O-；
并且R1、R2和R3如上所定义。
进一步优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C12烷基；
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
且R3和Z如上文所定义。
进一步优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C12烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
并且R2和Z如上所定义。
进一步优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
并且R1和Z如上所定义。
进一步优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C12烷基；
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
Z如上所定义。
进一步优选的药物部分是通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C12烷基；
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C12烷基；
Z为-O-。
以下优选的取代基适用于式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分：
特别优选的R1是氢和取代或未取代的C1-C6烷基；更优选地，R1选自氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基和异丁基。最优选的R1是氢和甲基。
特别优选的R2是氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；更优选Ra选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基和异丁基。最优选的R2是氢。
特别优选的R3是氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；更优选Ra选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、仲丁基和异丁基。最优选的R3是氢。
特别优选的Z是-O-。
根据本发明的化合物中优选的药物部分包括：
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C6烷基；
并且R2、R3和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
并且R1、R3和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
并且R1、R2和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
Z为-O-；
并且R1、R2和R3如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C6烷基；
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
并且R3和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C6烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
并且R2和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
并且R1和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C6烷基；
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和取代或未取代的C1-C6烷基；
R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基；
Z为-O-。
根据本发明的化合物中优选的药物部分包括：
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和甲基；
并且R2、R3和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R2是氢；
并且R1、R3和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R3是氢；
并且R1、R2和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
Z为-O-；
并且R1、R2和R3如上所定义。
本发明的化合物中的其它药物部分包括：
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和甲基；
R2是氢；
且R3和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和甲基；
R3是氢；
并且R2和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R2是氢；
R3是氢；
并且R1和Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和甲基；
R2是氢；
R3是氢；
且Z如上所定义。
·通式为(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分，其中：
R1选自氢和甲基；
R2是氢；
R3是氢；且
Z为-O-。
根据本发明的化合物中甚至更优选的药物部分选自：
Figure BDA0003532040980000191
Figure BDA0003532040980000201
以及
Figure BDA0003532040980000202
其中D通过OR1、OR3或ZH处的羟基共价连接至(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)。
根据本发明的化合物中最优选的药物部分选自：
Figure BDA0003532040980000203
Figure BDA0003532040980000204
以及
Figure BDA0003532040980000205
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与(L)的共价连接点。
在另外的优选实施例中，结合上述不同取代基的优选项。本发明还涉及根据本发明的具有式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的药物部分的化合物中的优选取代基(在被可能的取代基允许的情况下)的结合。
为避免疑义，式为(I)和(Ia)的药物部分经由OR1、OR3或ZH处的羟基或经由ZH处的硫醇基共价连接至(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)。因此，当共轭时，共价键取代化合物上羟基或硫醇基上的质子。
以下给出根据本发明的优选药物偶联物。下述(X)b、(AA)w、(T)g和(L)的优选定义适用于上述所有药物部分D化合物。根据本发明优选的药物偶联物包括：
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L是
选自下组的连接子基团：
Figure BDA0003532040980000211
其中
波浪线表示与Ab的共价连接点(右侧的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左侧的波浪线)；
R19选自-C1-C12亚烷基-、-C3-C8碳环-、-O-(C1-C12亚烷基)-、-C6-C18亚芳基-(在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-C6-C18亚芳基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C6-C18亚芳基-C1-C12亚烷基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-(C3-C8碳环)-、-(C3-C8碳环)-C1-C12亚烷基-、-C5-C14杂环-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-(C5-C14杂环)-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(C5-C14杂环)-C1-C12亚烷基-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(OCH2CH2)r-、以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C1-C6亚烷基；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C6亚烷基-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-、-(CH2CH2O)-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-CON(H或C1-C6烷基)-C1-C6亚烷基-、-亚苯基-(其可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-亚苯基-C1-C6亚烷基(其中亚苯基部分可选地被一个或多个取代基Rx取代)、以及-C1-C6亚烷基-CON(H或C1-C6烷基)C1-C6亚烷基-；
Q选自-N(H或C1-C6烷基)亚苯基-和-N(H或C1-C6烷基)-(CH2)s；
r是范围在1到10之间的一整数；且
s是范围在1到10之间的一整数。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L选自：
Figure BDA0003532040980000221
以及
Figure BDA0003532040980000222
其中：
波浪线表示与Ab的共价连接点(右侧的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左侧的波浪线)；
R19选自-C1-C12亚烷基-、-O-(C1-C12亚烷基)-、-C6-C12亚芳基-(在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-C6-C12亚芳基(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C6-C12亚芳基-C1-C12亚烷基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C5-C12杂环(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-(C5-C12杂环)-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(C5-C12杂环)-C1-C12亚烷基-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(OCH2CH2)r-、以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C1-C6亚烷基-基团；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C6亚烷基-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-、以及-亚苯基-，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；且r是范围在1至6之间的一整数。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure BDA0003532040980000231
其中：
X和T是延伸基团，其可以相同或不同；
每个AA独立地是如本文所定义的氨基酸单元；
w是范围在0到12之间的一整数；
b是整数0或1；
g是整数0或1；
其中可选地b+g+w不为0；
D是药物部分；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，并且n在1至20的范围内；
R19选自-C1-C8亚烷基-、-O-(C1-C8亚烷基)-、-C1-C8亚烷基-C6-C12亚芳基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、以及-C6-C12亚芳基-C1-C8亚烷基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30是-C2-C4亚烷基-基团；且
M选自由以下各项组成的组：-C1-C3亚烷基-和-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure BDA0003532040980000251
其中：
X和T是延伸基团，其可以相同或不同；
每个AA独立地是氨基酸单元；
w是范围在0到12之间的一整数；
b是整数0或1；
g是整数0或1；
其中可选地b+g+w不为0；
D是药物部分；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，并且n在1至20的范围内；
R19选自-C1-C6亚烷基-、-亚苯基-C1-C6亚烷基-(其中亚苯基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基和氰基，并且优选R19是-C1-C6亚烷基-基团；
R30是-C2-C4亚烷基-基团；且
M是-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-。
·优选地，在式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物的定义中，L如上述基团的优选定义所定义，并且(AA)w具有式(III)：
Figure BDA0003532040980000261
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；且
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苄基、对羟基苄基、-CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH2CH2SCH3、-CH2CONH2、-CH2COOH、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2COOH、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、-(CH2)3NH2、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCHO、-(CH2)4NHC(＝NH)NH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)4NHCHO、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NHCONH2、-CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2-吡啶基-、3-吡啶基-、4-吡啶基-、苯基、环己基、
Figure BDA0003532040980000262
Figure BDA0003532040980000263
及
Figure BDA0003532040980000264
并且w是范围在0到12之间的一整数。
·根据本发明第一方面的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L如上述基团的优选定义所定义，并且(AA)w具有式(III)，其中：
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苄基、吲哚基甲基、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、及-(CH2)4NHC(＝NH)NH2；且
W是范围在0到6之间的一整数。
·根据本发明第一方面的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L如在上述基团的优选定义中所定义，其中w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)，其中：
Figure BDA0003532040980000271
波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R22选自甲基、苄基、异丙基、仲丁基和吲哚基甲基；且
R23选自甲基、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHCONH2和-(CH2)3NHC(＝NH)NH2。
·在本发明的实施例中，b+g+w不为0。在进一步的实施例中，b+w不为0。
在又一些实施例中，当w不为0时，b为1。此外，优选的是，在式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物的定义中，L和(AA)w如上述基团的优选定义中所定义，并且X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-；
-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-；
-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-；
-COCH2NH-COCH2-NH-；
-COCH2NH-；
-CONH-(C1-C6亚烷基)S-；
-CONH-(C1-C6亚烷基)NHCO(C1-C6亚烷基)S-；且
b为0或1，优选为1。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L和(AA)w如在上述基团的优选定义中所定义，并且X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-；
-COO-CH2-亚苯基-NH-，其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基；
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)-NH-；
-COCH2NH-COCH2-NH-；
-CONH-(C2-C4亚烷基)S-；
-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；且
b为0或1，优选为1。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L和(AA)w如在上述基团的优选定义中所定义，并且X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-OO-CH2-亚苯基-NH-；
-CONH(CH2)3NHCOOCH2-亚苯基-NH-；
-CONH(CH2)3NH-；
-CONH(CH2)3-S-；
-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-；且
b为0或1，优选为1。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L、(AA)w和(X)b如在上述基团的优选定义中所定义，并且T是选自下组的延伸基团：
-CO-(C1-C6亚烷基)-NH-；
-CO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-；
-COO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-；
其中j是范围在1至25之间的一整数，并且
g为0或1，优选为0。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L、(AA)w和(X)b如在上述基团的优选定义中所定义，并且T是选自下组的延伸基团：
-CO-(C1-C4亚烷基)NH-；
-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；
-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；
其中j是范围在1至10之间的一整数；以及
g为0或1，优选为0。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物，其中L、(AA)w和(X)b如在上述基团的优选定义中所定义，并且T是选自下组的延伸基团：
-CO-(C1-C4亚烷基)NH-；
-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；
-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；
其中j是范围在1至5之间的一整数；且
g为0或1，优选为0。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的优选药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的化合物，其中R1是氢或取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx，更优选R1是氢或甲基。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的另一种优选药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的化合物，其中R2是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代的或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx，更优选R2是氢。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的另一种优选药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的化合物，其中R3是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代的或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx，更优选R3是氢。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的另一种优选药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的化合物，其中Z为-O-。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R2是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；且
Z为-O-。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或甲基；
R2是氢；
R3为氢；且
Z为-O-。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的化合物或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是甲基；
R2是氢；
R3为氢；且
Z为-O-。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D选自：
Figure BDA0003532040980000311
及
Figure BDA0003532040980000312
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线指示与(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)的共价连接点。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b和(T)g如上所定义，D选自：
Figure BDA0003532040980000321
及
Figure BDA0003532040980000322
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线指示与(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)的共价连接点。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如上所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗原结合肽。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如上所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体、单域抗体或其抗原结合片段。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如上所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是单克隆抗体、多克隆抗体或双特异性抗体，并且其中所述抗体或其抗原结合片段衍生自任何物种，优选人、小鼠或兔。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如上所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体或其抗原结合片段，其选自由以下各项组成的组：人抗体、人抗体的抗原结合片段、人源化抗体、人源化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体、以及糖基化抗原结合片段。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如上所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是抗原结合片段，该抗原结合片段选自由以下各项组成的组：Fab片段、Fab’片段、F(ab’)2片段、以及Fv片段。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如上所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是免疫特异性结合癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自身免疫病相关的自身免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单克隆抗体，且优选如本文所定义的免疫特异性结合癌细胞抗原的单克隆抗体。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如本文所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗HER2抗体。
·根据本发明的式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的进一步优选的药物偶联物的L、(AA)w、(X)b、(T)g和D如本文所定义，包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的抗体：阿昔单抗(Abciximab)、阿仑珠单抗(Alemtuzumab)、阿奈妥单抗(Anetumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐珠单抗(Bevacizumab)、Blinatomumab、本妥昔单抗(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、考妥昔单抗(Coltuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地宁妥珠单抗(Denintuzumab)、地诺单抗(Denosumab)、迪妥昔珠单抗(Depatuxizumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、恩弗妥单抗(Enfortumab)、格仑妥木单抗(Glembatumumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、英达西单抗(Indatuximab)、英度妥单抗(Indusatumab)、伊珠单抗(Inotuzumab)、易普利单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗(laprituximab)、利法妥珠单抗(lifastuzumab)、洛沃妥珠单抗(lorvotuzumab)、米拉珠单抗(Milatuzumab)、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗(Naratuximab)、奈昔木单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、尼沃鲁单抗(Nivolumab)、奥比妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉妥单抗(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、匹那妥珠单抗(Pinatuzumab)、泊洛妥珠单抗(Polatuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、沙妥珠单抗(Sacituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、斯妥尤单抗(Sirtratumab)、索非妥珠单抗(Sofituzumab)、伐达妥昔单抗(Vadastuximab)、沃瑟妥珠单抗(Vorsetuzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，其中优选地，所述抗体选自：阿昔单抗(Abciximab)、阿仑珠单抗(Alemtuzumab)、阿奈妥单抗(Anetumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐珠单抗(Bevacizumab)、Blinatomumab、本妥昔单抗(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地宁妥珠单抗(Denintuzumab)、地诺单抗(Denosumab)、迪妥昔珠单抗(Depatuxizumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、恩弗妥单抗(Enfortumab)、格仑妥木单抗(Glembatumumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、英达西单抗(Indatuximab)、英度妥单抗(Indusatumab)、伊珠单抗(Inotuzumab)、易普利单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗(laprituximab)、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗(Naratuximab)、奈昔木单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、尼沃鲁单抗(Nivolumab)、奥比妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉妥单抗(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、泊洛妥珠单抗(Polatuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、沙妥珠单抗(Sacituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、斯妥尤单抗(Sirtratumab)、伐达妥昔单抗(Vadastuximab)、沃瑟妥珠单抗(Vorsetuzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选阿昔单抗(Abciximab)、阿仑珠单抗(Alemtuzumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐珠单抗(Bevacizumab)、Blinatomumab、本妥昔单抗(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地诺单抗(Denosumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、伊珠单抗(Inotuzumab)、易普利单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、奈昔木单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、尼沃鲁单抗(Nivolumab)、奥比妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉妥单抗(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，其中，特别优选的是本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，或所述抗体是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，特别是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
·根据本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的特别优选的药物偶联物包括：
(a)根据本发明的药物偶联物，其中：
L选自由以下各项组成的组：
Figure BDA0003532040980000361
及
Figure BDA0003532040980000362
其中：
波浪线表示与Ab的共价连接点(右侧的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(X)b(如果有的话)或(D)的共价连接点(左侧的波浪线)；
R19选自-C1-C12亚烷基-、-O-(C1-C12亚烷基)-、-C6-C12亚芳基-(在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-C6-C12亚芳基(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C6-C12亚芳基-C1-C12亚烷基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C5-C12杂环(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-(C5-C12杂环)-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(C5-C12杂环)-C1-C12亚烷基-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(OCH2CH2)r-、以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C1-C6亚烷基-基团；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C6亚烷基-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-、以及-亚苯基-，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；且
r是范围在1至6之间的一整数；
(AA)w的式为(III)：
Figure BDA0003532040980000371
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苄基、对羟基苄基、-CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH2CH2SCH3、-CH2CONH2、-CH2COOH、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2COOH、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、-(CH2)3NH2、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCHO、-(CH2)4NHC(＝NH)NH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)4NHCHO、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NHCONH2、-CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2-吡啶基-、3-吡啶基-、4-吡啶基-、苯基、环己基、
Figure BDA0003532040980000372
Figure BDA0003532040980000373
及
Figure BDA0003532040980000374
w是范围在0到12之间的一整数；
其中X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-、-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-、-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-、-COCH2NH-COCH2-NH-、-COCH2NH-、-CONH-(C1-C6亚烷基)S-、以及-CONH-(C1-C6亚烷基)NHCO(C1-C6亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
其中T是选自-CO-(C1-C6亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至25之间的一整数；
g为0或1，优选为0；
D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R2是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
Z为-O-；
包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体或其抗原结合片段，并且其选自由以下各项组成的组：人抗体、人抗体的抗原结合片段、人源化抗体、人源化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体、以及糖基化抗原结合片段；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，并且n在1至12的范围内。
(b)根据本发明的选自式(V)、(VI)和(VII)的药物偶联物：
Figure BDA0003532040980000391
其中：
R19选自-C1-C8亚烷基-、-O-(C1-C8亚烷基)-、-C1-C8亚烷基-C6-C12亚芳基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、以及-C6-C12亚芳基-C1-C8亚烷基(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)，其中上述亚烷基取代基中的每一个，无论是单独的还是连接到另一个部分上的，所述碳链可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C2-C4亚烷基-基团；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C3亚烷基-、以及-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
(AA)w的式为(III)：
Figure BDA0003532040980000392
其中：
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苄基、吲哚基甲基、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、以及-(CH2)4NHC(＝NH)NH2；且
W是范围在0到6之间的一整数；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-、-COO-CH2-亚苯基-NH-(其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)、-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)-NH-、-COCH2NH-COCH2-NH-、-CONH-(C2-C4亚烷基)S-、以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至10之间的一整数；
g为0或1，优选为0；
D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或甲基，更优选甲基；
R2是氢；
R3是氢；
Z为-O-；
包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是免疫特异性结合癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自身免疫病相关的自身免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单克隆抗体，且优选免疫特异性结合癌细胞抗原的单克隆抗体；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至8的范围内。
(c)根据本发明的选自式(V)、(VI)和(VII)的药物偶联物：
Figure BDA0003532040980000411
其中：
R19选自-C1-C6亚烷基-、-亚苯基-C1-C6亚烷基-(其中亚苯基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链中的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基和氰基，并且优选R19是-C1-C6亚烷基；
R30为-C2-C4亚烷基-基团；
M为-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000421
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R22选自甲基、苄基、异丙基、仲丁基和吲哚基甲基；
R23选自甲基、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHCONH2、以及-(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-、-COO-CH2-亚苯基-NH-(其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)、-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基)-NH-、-COCH2NH-COCH2-NH-、-CONH-(C2-C4亚烷基)S-和-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
g是0或1，优选0；
D是式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或甲基，更优选甲基；
R2是氢；
R3是氢；
Z为-O-；
包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的单克隆抗体：阿昔单抗(Abciximab)、阿仑珠单抗(Alemtuzumab)、阿奈妥单抗(Anetumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐珠单抗(Bevacizumab)、Blinatomumab、本妥昔单抗(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、考妥昔单抗(Coltuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地宁妥珠单抗(Denintuzumab)、地诺单抗(Denosumab)、迪妥昔珠单抗(Depatuxizumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、恩弗妥单抗(Enfortumab)、格仑妥木单抗(Glembatumumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、英达西单抗(Indatuximab)、英度妥单抗(Indusatumab)、伊珠单抗(Inotuzumab)、易普利单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗(laprituximab)、利法妥珠单抗(lifastuzumab)、洛沃妥珠单抗(lorvotuzumab)、米拉珠单抗(Milatuzumab)、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗(Naratuximab)、奈昔木单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、尼沃鲁单抗(Nivolumab)、奥比妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉妥单抗(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、匹那妥珠单抗(Pinatuzumab)、泊洛妥珠单抗(Polatuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、沙妥珠单抗(Sacituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、斯妥尤单抗(Sirtratumab)、索非妥珠单抗(Sofituzumab)、伐达妥昔单抗(Vadastuximab)、沃瑟妥珠单抗(Vorsetuzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，其中优选地，所述抗体选自：阿昔单抗(Abciximab)、阿仑珠单抗(Alemtuzumab)、阿奈妥单抗(Anetumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐珠单抗(Bevacizumab)、Blinatomumab、本妥昔单抗(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地宁妥珠单抗(Denintuzumab)、地诺单抗(Denosumab)、迪妥昔珠单抗(Depatuxizumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、恩弗妥单抗(Enfortumab)、格仑妥木单抗(Glembatumumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、英达西单抗(Indatuximab)、英度妥单抗(Indusatumab)、伊珠单抗(Inotuzumab)、易普利单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗(laprituximab)、米妥昔单抗(Mirvetuximab)、那妥昔单抗(Naratuximab)、奈昔木单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、尼沃鲁单抗(Nivolumab)、奥比妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉妥单抗(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、泊洛妥珠单抗(Polatuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、沙妥珠单抗(Sacituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、斯妥尤单抗(Sirtratumab)、伐达妥昔单抗(Vadastuximab)、沃瑟妥珠单抗(Vorsetuzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选阿昔单抗(Abciximab)、阿仑珠单抗(Alemtuzumab)、阿特珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、巴利昔单抗(Basiliximab)、贝伐珠单抗(Bevacizumab)、Blinatomumab、本妥昔单抗(Brentuximab)、卡妥索单抗(Catumaxomab)、西妥昔单抗(Cetuximab)、达利珠单抗(Daclizumab)、达雷木单抗(Daratumumab)、地诺单抗(Denosumab)、地努妥昔单抗(Dinutuximab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)、埃罗妥珠单抗(Elotuzumab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、替伊莫单抗(Ibritumomab)、伊珠单抗(Inotuzumab)、易普利单抗(Ipilimumab)、拉贝珠单抗(Labetuzumab)、奈昔木单抗(Necitumumab)、尼妥珠单抗(Nimotuzumab)、尼沃鲁单抗(Nivolumab)、奥比妥珠单抗(Obinutuzumab)、奥法木单抗(Ofatumumab)、奥拉妥单抗(Olaratumab)、奥马珠单抗(Omalizumab)、帕利珠单抗(Palivizumab)、帕尼单抗(Panitumumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、帕妥珠单抗(Pertuzumab)、雷莫芦单抗(Ramucirumab)、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、司妥昔单抗(Siltuximab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，其中，特别优选的是本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，或所述抗体是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，特别是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内。
(d)根据本发明的选自式(V)、(VI)和(VII)的药物偶联物：
Figure BDA0003532040980000451
其中：
R19为-C2-C6亚烷基-；
R30为-C2-C4亚烷基-；
M为-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000452
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-、-COO-CH2-亚苯基-NH-(其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)、-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基)-NH-、-COCH2NH-COCH2-NH-、-CONH-(C2-C4亚烷基)S-、以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
g是0或1，优选0；
D是选自以下的药物部分：
Figure BDA0003532040980000461
以及
Figure BDA0003532040980000462
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与(L)的共价连接点；
包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，并且更优选地是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，特别是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内。
(e)根据本发明的选自式(V)、(VI)和(VII)的药物偶联物：
Figure BDA0003532040980000471
其中：
R19为-C2-C6亚烷基-；
R30为-C2-C4亚烷基-；
M为-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000472
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-、-COO-CH2-亚苯基-NH-(其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)、-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基)-NH-、-COCH2NH-COCH2-NH-、-CONH-(C2-C4亚烷基)S-、以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至10之间的一整数；
g是0或1；优选0；
D是选自以下的药物部分：
Figure BDA0003532040980000481
以及
Figure BDA0003532040980000482
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与(L)的共价连接点；
包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，并且更优选地是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，特别是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内。
(f)根据本发明的药物偶联物具有式(V)：
Figure BDA0003532040980000491
其中：
R19为-C2-C5亚烷基-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000492
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，波浪线表示与(X)b的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；X为-CONH-(C3亚烷基)NH-或-CONH-(C3亚烷基)NH-COO-CH2-亚苯基-NH-；
b为1；
T为具有式-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]4-NH-的延伸基团；
g为0或1，优选0；
或具有式(VI)
Figure BDA0003532040980000493
其中M为-甲基-亚环己基-；
b为1；
w为0；
X为选自-CONH(CH2)3S-和-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-的延伸基团。
g为0；
或具有式(VII)
Figure BDA0003532040980000501
其中R19为-C2-C5亚烷基-；
R30为-C3亚烷基；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000502
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，波浪线表示与(X)b的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是-CONH-(C3亚烷基)NH-或-CONH-(C3亚烷基)NH-COO-CH2-亚苯基-NH-；
b是1；
T是具有式-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]4-NH-的延伸基团；
g是0或1，优选0；
D是选自以下的药物部分：
Figure BDA0003532040980000511
以及
Figure BDA0003532040980000512
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b的共价连接点；
包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，并且更优选地是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，特别是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内，优选4。
g)根据本发明的抗体药物偶联物，其选自由以下各项组成的组：
Figure BDA0003532040980000513
Figure BDA0003532040980000521
及
Figure BDA0003532040980000522
其中n的范围为2至6，更优选n为3、4或5，且
Figure BDA0003532040980000523
和
Figure BDA0003532040980000524
各自独立地选自本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，并且更优选地是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，特别是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
更优选地，抗体药物偶联物选自由以下各项组成的组：
Figure BDA0003532040980000531
其中n的范围为2至6，更优选n为3、4或5，并且
Figure BDA0003532040980000532
是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分，
Figure BDA0003532040980000533
其中n的范围为2至6，更优选n为3、4或5，并且
Figure BDA0003532040980000534
是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分，
Figure BDA0003532040980000535
其中n的范围为2至6，更优选n为3、4或5，并且
Figure BDA0003532040980000536
是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分，
Figure BDA0003532040980000541
其中n的范围为2至6，更优选n为3、4或5，并且
Figure BDA0003532040980000542
是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分，以及
Figure BDA0003532040980000543
其中n的范围为2至6，更优选n为3、4或5，并且
Figure BDA0003532040980000544
是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
特别优选地，根据本发明的抗体药物偶联物应当是分离的或纯化的形式。
根据本发明的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的优选化合物包括：
·具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中D、X、AA、T、L1、b、g和w分别如在本发明这里所定义，其中对于式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H，b+w+g的化合物不为0。
·根据本发明的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中b+w+g不为0。
·根据本发明的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有下式的连接子：
Figure BDA0003532040980000551
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19选自-C1-C12亚烷基-、-O-(C1-C12亚烷基)-、-C6-C12亚芳基-(在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-C6-C12亚芳基(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C6-C12亚芳基-C1-C12亚烷基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C5-C12杂环(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-C1-C12亚烷基-(C5-C12杂环)-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(C5-C12杂环)-C1-C12亚烷基-(其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代)、-(OCH2CH2)r-、以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
r是范围在1至6之间的一整数；且
D、Rx、X、AA、T、b、g和w中的每一个都如本发明中所定义，但是如果化合物是具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，则b+w+g≠0。
·根据本发明的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有下式的连接子：
Figure BDA0003532040980000561
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19选自-C1-C8亚烷基-、-O-(C1-C8亚烷基)-、-C1-C8亚烷基-C6-C12亚芳基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)、以及-C6-C12亚芳基-C1-C8亚烷基-(其中亚芳基在一个或多个环中，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代)，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
(AA)w具有式(III)：
Figure BDA0003532040980000562
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或与氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
其中R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苄基、吲哚基甲基、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、及-(CH2)4NHC(＝NH)NH2，并且w是范围在0至6之间的一整数；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-、-COO-CH2-亚苯基-NH-(其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)、-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)-NH-、-COCH2NH-COCH2-NH-、-CONH-(C2-C4亚烷基)S-、以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至10之间的一整数；
b为0或1，优选为1；
g为0或1，优选为0；
其中如果所述化合物是具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，则b+w+g≠0
D是具有式(I)、(Ia)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯：
Figure BDA0003532040980000571
并且通过OR1、OR3或ZH处的羟基共价连接；或
D是具有式(II)或式(IIa)的药物部分，或其药学上可接受的盐或酯：
Figure BDA0003532040980000572
其中(II)和(IIa)的波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与L1的共价连接点；
R1是氢或取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R2是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx。
Z为-O-。
·根据本发明的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有以下式的基团：
Figure BDA0003532040980000581
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19选自-C1-C6亚烷基-、-亚苯基-C1-C6亚烷基-(其中亚苯基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)，其中每个上述亚烷基取代基(无论是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的)可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基和氰基，并且优选R19是-C1-C6亚烷基-基团；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000591
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
R22选自甲基、苄基、异丙基、仲丁基和吲哚基甲基；
R23选自甲基、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHCONH2和-(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
X是选自以下的延伸基团：
-COO-CH2-亚苯基-NH-、-CONH(CH2)3NHCOOCH2-亚苯基-NH-、-CONH(CH2)3NH-、-CONH(CH2)3-S、以及-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
b为0或1，优选为1；
g为0或1，优选为0；
其中如果所述化合物是具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，则b+w+g≠0；且
D是具有式(I)或(Ia)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，并通过OR1、OR3或ZH处的羟基共价连接；
Figure BDA0003532040980000592
或者
D是具有式(II)或式(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯：
Figure BDA0003532040980000601
其中(II)和(IIa)的波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与L1的共价连接点；
R1是氢或甲基，更优选甲基；
R2是氢；
R3是氢；且
Z为-O-。
·根据本发明的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有下式的连接子：
Figure BDA0003532040980000602
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19为-C2-C6亚烷基-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000603
R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或与氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-COO-CH2-亚苯基-NH-、-CONH(CH2)3NHCOO-CH2-亚苯基-NH、-CONH-(CH2)3)NH-、-CONH(CH2)3-S-、以及-CONH-(CH2)3NHCO-(CH2)2S-的延伸基团；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
b为0或1，优选为1；
g是0或1，优选0；
其中如果所述化合物是具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，则b+w+g≠0
D是选自以下的药物部分：
Figure BDA0003532040980000611
以及
Figure BDA0003532040980000612
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与L1的共价连接点。
根据本发明的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有以下式的基团：
Figure BDA0003532040980000613
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19是-C2-C5亚烷基-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure BDA0003532040980000621
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，波浪线表示与(X)b的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或与氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
X为-CONH-(C3亚烷基)NH-或-CONH-(C3亚烷基)NH-COO-CH2-亚苯基-NH-；
T为-CO-(CH2)2-[O-(CH2)2]4-NH-基团；
b为1；
g为0或1，优选为0；
其中如果所述化合物是具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，则b+w+g≠0；且
D是选自以下的药物部分：
Figure BDA0003532040980000622
以及
Figure BDA0003532040980000623
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b的共价连接点。
·具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1的化合物选自：
Figure BDA0003532040980000631
Figure BDA0003532040980000632
以及
Figure BDA0003532040980000633
具有式(Int)的化合物的优选立体化学如式(Int-a)中所定义：
Figure BDA0003532040980000634
其中R1、R2和R3如上式(Int)所定义。
具有式(Int)和(Int-a)的优选中间体的R1、R2和R3如在通式(I)、(Ia)、(II)和(IIa)的药物部分的优选实施例中所定义的那样。
本发明的药物偶联物中的术语“药学上可接受的盐或酯”是指任何药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、水合物或立体异构体形式或任何其它化合物，其在给药于患者时能够直接或间接地提供本文所述的化合物。然而，应理解，非药学上可接受的盐也落入本发明的范围内，因为这些盐可用于制备药学上可接受的盐。盐、前药和衍生物的制备可以通过本领域已知的方法进行。
例如，本文提供的化合物的药学上可接受的盐由含有碱性或酸性部分的母体化合物通过常规化学方法合成。通常，这样的盐例如通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的合适的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备。通常，优选非水介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。酸加成盐的示例包括无机酸加成盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐，以及有机酸加成盐，如乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、草酸酯、琥珀酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐和对甲苯磺酸盐。碱加成盐的示例包括无机盐，如钠盐、钾盐、钙盐和铵盐，以及有机碱盐，如乙二胺盐、乙醇胺盐、N，N-二亚烷基乙醇胺盐(N，N-dialkylenethanolamine)、三乙醇胺盐和碱性氨基酸盐。
本发明的药物偶联物可以是作为游离化合物或作为溶剂化物(例如水合物)的结晶形式，并且这两种形式都在本发明的范围内。溶剂化的方法在本领域中是公知的。
作为本发明的药物偶联物的前药的任何化合物都在本发明的范围和精神内。术语“前药”以其最广泛的意义使用，并包括在体内转化为本发明的化合物的那些衍生物。这样的衍生物对于本领域技术人员来说是容易想到的，并且包括例如其中游离羟基被转化为酯衍生物的化合物。许多合适的前药是本领域技术人员公知的，并且可以在例如Burger“Medicinal Chemistry and Drug Discovery”第6版(Donald J.Abraham ed.，2001，Wiley)和“Design and Applications of Prodrugs”(H.Bundgaard ed.，1985，HarwoodAcademic Publishers)中找到，这些内容通过引用并入本文。
关于本发明的化合物，药理学上可接受的酯没有特别限制，可以由本领域普通技术人员选择。在所述酯的情况下，优选的是这样的酯可以通过生物过程如体内水解而裂解。构成所述酯的基团(当其酯表示为-COOR时，基团表示为R)可以是例如C1-C4烷氧基C1-C4烷基(如甲氧基乙基、1-乙氧基乙基、1-甲基-1-甲氧基乙基、1-(异丙氧基)乙基、2-甲氧基乙基、1，1-二甲基-1-甲氧基甲基、乙氧基甲基、丙氧基甲基、异丙氧基甲基、丁氧基甲基、或叔丁氧基甲基)；C1-C4烷氧基化的C1-C4烷氧基C1-C4烷基(如2-甲氧基乙氧基甲基)；C6-C10芳氧基C1-C4烷基(如苯氧基甲基)；卤代C1-C4烷氧基C1-C4烷基(如2，2，2-三氯乙氧基甲基或双(2-氯乙氧基)甲基)；C1-C4烷氧基羰基C1-C4烷基(如甲氧基羰基甲基)；氰基C1-C4烷基(如氰基甲基或2-氰基乙基)；C1-C4烷基硫甲基(如甲基硫甲基或乙基硫甲基)；C6-C10芳基硫甲基(如苯基硫甲基或萘基硫甲基)；C1-C4烷基磺酰基C1-C4低级烷基(其可以可选地被一个或多个卤素原子取代，如2-甲磺酰基乙基或2-三氟甲磺酰基乙基)；C6-C10芳基磺酰基C1-C4烷基(例如2-苯磺酰基乙基或2-甲苯磺酰基乙基)；C1-C7脂肪酰氧基C1-C4烷基(例如甲酰氧基甲基、乙酰氧基甲基、丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基、戊酰氧基甲基、异戊酰氧基甲基、己酰氧基甲基、1-甲酰氧基乙基、1-乙酰氧基乙基、1-丙酰氧基乙基、1-丁酰氧基乙基、1-新戊酰氧基乙基、1-戊酰氧基乙基、1-异戊酰氧基乙基、1-己酰氧基乙基、2-甲酰氧基乙基、2-乙酰氧基乙基、2-丙酰氧基乙基、2-丁酰氧基乙基、2-新戊酰氧基乙基、2-戊酰氧基乙基、2-异戊酰氧基乙基、2-己酰氧基乙基、1-甲酰氧基丙基、1-乙酰氧基丙基、1-丙酰氧基丙基、1-丁酰氧基丙基、1-新戊酰氧基丙基、1-戊酰氧基丙基、1-异戊酰氧基丙基、1-己酰氧基丙基、1-乙酰氧基丁基、1-丙酰氧基丁基、1-丁酰氧基丁基、1-新戊酰氧基丁基、1-乙酰氧基戊基、1-丙酰氧基戊基、1-丁酰氧基戊基、1-新戊酰氧基戊基、或1-新戊酰氧基己基)；C5-C6环烷基羰基氧基C1-C4烷基(例如环戊基羰基氧基甲基、环己基羰基氧基甲基、1-环戊基羰基氧基乙基、1-环己基羰基氧基乙基、1-环戊基羰基氧基丙基、1-环己基羰基氧基丙基、1-环戊基羰基氧基丁基、或1-环己基羰基氧基丁基)；C6-C10芳基羰基氧基C1-C4烷基(例如苯甲酰氧基甲基)；C1-C6烷氧基羰基氧基C1-C4烷基(例如甲氧基羰基氧基甲基、1-(甲氧基羰基氧基)乙基、1-(甲氧基羰基氧基)丙基、1-(甲氧基羰基氧基)丁基、1-(甲氧基羰基氧基)戊基、1-(甲氧基羰基氧基)己基、乙氧基羰基氧基甲基、1-(乙氧基羰基氧基)乙基、1-(乙氧基羰基氧基)丙基、1-(乙氧基羰基氧基)丁基、1-(乙氧基羰基氧基)戊基、1-(乙氧基羰基氧基)己基、丙氧基羰基氧基甲基，1-(丙氧基羰基氧基)乙基、1-(丙氧基羰基氧基)丙基、1-(丙氧基羰基氧基)丁基、异丙氧基羰基氧基甲基、1-(异丙氧基羰基氧基)乙基、1-(异丙氧基羰基氧基)丁基、丁氧基羰基氧基甲基、1-(丁氧基羰基氧基)乙基、1-(丁氧基羰基氧基)丙基、1-(丁氧基羰基氧基)丁基、异丁氧基羰基氧基甲基、1-(异丁氧基羰基氧基)乙基、1-(异丁氧基羰基氧基)丙基、1-(异丁氧基羰基氧基)丁基、叔丁氧基羰基氧基甲基、1-(叔丁氧基羰基氧基)乙基、戊氧基羰基氧基甲基、1-(戊氧基羰基氧基)乙基、1-(戊氧基羰基氧基)丙基、己氧基羰基氧基甲基、1-(己氧基羰基氧基)乙基、或1-(己氧基羰基氧基)丙基)；C5-C6环烷基氧基羰基氧基C1-C4烷基(例如环戊基氧基羰基氧基甲基、1-(环戊基氧基羰基氧基)乙基、1-(环戊基氧基羰基氧基)丙基、1-(环戊基氧基羰基氧基)丁基、环己基氧基羰基氧基甲基、1-(环己基氧基羰基氧基)乙基，1-(环己基氧基羰基氧基)丙基、或1-(环己基氧羰基氧基)丁基)；[5-(C1-C4烷基)-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基]甲基(如(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基、(5-乙基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基、(5-丙基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基、(5-异丙基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基、或(5-丁基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基)；[5-(苯基，其可以可选地被C1-C4烷基、C1-C4烷氧基或一个或多个卤素原子取代)-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基]甲基(如(5-苯基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基、[5-(4-甲基苯基)-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基]甲基、[5-(4-甲氧基苯基)-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基]甲基、[5-(4-氟苯基)-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基]甲基、或[5-(4-氯苯基)-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基]甲基)；或邻苯二甲酰基(其可以可选地被一个或多个C1-C4烷基或C1-C4烷氧基取代，例如邻苯二甲酰基、二甲基邻苯二甲酰基、或二甲氧基邻苯二甲酰基)，并且优选地，构成所述酯的基团为新戊酰氧基甲基、邻苯二甲酰基、或(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基，更优选(5-甲基-2-氧代-1，3-二氧戊环-4-基)甲基。
本文提及的任何化合物旨在表示这种特定的化合物以及一些变型或形式。特别地，本文提及的化合物可具有不对称中心并因此以不同的对映异构体形式存在。本文提及的化合物的所有光学异构体和立体异构体及其混合物都被认为在本发明的范围内。因此，本文提及的任一给定化合物旨在表示外消旋物、一种或多种对映异构体形式、一种或多种非对映异构体形式、一种或多种阻转异构体形式、及其混合物中的任何一种。特别地，具有式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)]n-Ab的药物偶联物和具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物可以包括对映异构体，这取决于它们的不对称或非对映异构体。关于双键的立体异构也是可能的，因此在某些情况下，分子可以以(E)-异构体或(Z)-异构体存在。如果该分子包含几个双键，每个双键将具有其自身的立体异构，该立体异构可以与该分子的其它双键的立体异构相同或不同。单个异构体和异构体的混合物落入本发明的范围内。
此外，本文提及的化合物可以作为几何异构体(即，顺式和反式异构体)、互变异构体或阻转异构体存在。具体地，术语互变异构体是指共存于平衡体系中并且容易从一种异构体形式转化为另一种异构体形式的化合物的两种或多种结构异构体的其中一个。常见的互变异构对是胺-亚胺、酰胺-酰亚胺、酮-烯醇、内酰胺-内酰亚胺等。另外，本文提及的任何化合物旨在表示水合物、溶剂化物和多晶型物，以及当这些形式存在于培养基中时它们的混合物。此外，本文提及的化合物可以同位素标记形式存在。本文提及的化合物的所有几何异构体、互变异构体、阻转异构体、水合物、溶剂化物、多晶型和同位素标记形式及其混合物都被认为在本发明的范围内。
本文公开的化合物的保护形式被认为在本发明的范围内。合适的保护基团是本领域技术人员公知的。Wuts、P.G.M.以及Greene T.W.在第4版Wiley-Interscience的Protecting groups in Organic Synthesis中、Kocienski P.J.在第3版Georg ThiemeVerlag的Protecting groups中综述了有机化学中的保护基。这些参考文献提供了关于OH、氨基和SH基团的保护基的部分。所有这些参考文献通过引用全部并入本文。
在本发明的范围内，OH的保护基定义为通过形成合适的被保护的OH基团来保护OH基团而产生的O-键合部分。这种被保护的OH基团的示例包括醚、硅醚、酯、磺酸酯、次磺酸酯(sulfenates)和亚磺酸酯(sulfinates)、碳酸酯和氨基甲酸酯。在醚的情况下，OH的保护基可以选自甲基、甲氧基甲基、甲硫基甲基、(苯基二甲基硅基)甲氧基甲基、苄氧基甲基、对甲氧基苄氧基甲基、[(3，4-二甲氧苄基)氧基]甲基、对硝基苄氧基甲基、邻硝基苄氧基甲基、[(R)-1-(2-硝基苯基)乙氧基]甲基、(4-甲氧基-苯氧基)甲基、愈创木基甲基、[(对苯基苯基)氧基]甲基、叔丁氧基甲基、4-戊烯氧基甲基、硅氧基甲基(siloxymethyl)、2-甲氧基乙氧基甲基、2-氰基乙氧基甲基、二(2-氯乙氧基)甲基、2，2，2-三氯乙氧基甲基、2-(三甲基硅基)乙氧基甲基、薄荷氧基甲基、邻-二(2-乙酰氧基乙氧基)甲基、四氢吡喃基、氟四氢吡喃基、3-溴四氢吡喃基、四氢噻喃基、1-甲氧基环己基、4-甲氧基四氢吡喃基、4-甲氧基四氢噻喃基、4-甲氧基-四氢噻喃基S，S-二氧化物、1-[(2-氯-4-甲基)-苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基、1-(2-氟苯基)-4-甲氧基哌啶-4-基、1-(4-氯苯基)-4-甲氧基哌啶-4-基、1，4-二恶烷-2–基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、2，3，3a，4，5，6，7，7a-八氢-7，8，8-三甲基-4，7-甲基苯并呋喃-2-基(2，3，3a，4，5，6，7，7a-octahydro-7，8，8-trimethyl-4，7-methanobenzofuran-2-yl)、1-乙氧基乙基、1-(2-氯乙氧基)乙基、2-羟乙基、2-溴乙基、1-[2-(三甲基硅基)乙氧基]乙基、1-甲基-1-甲氧基乙基、1-甲基-1-苄氧基乙基、1-甲基-1-苄氧基-2-氟乙基、1-甲基-1-苯氧基乙基、2，2，2-三氯乙基、1，1-二甲氧苯基-2，2，2-三氯乙基(1，1-dianisyl-2，2，2-trichloroethyl)、1，1，1，3，3，3-六氟-2-苯基异丙基、1-(2-氰基乙氧基)乙基、2-三甲基硅基乙基、2-(苄硫基)乙基、2-(苯硒基)乙基(2–(phenylselenyl)ethyl)、叔丁基、环己基、1-甲基-1'-环丙基甲基、烯丙基、异戊二烯基、肉桂基、2-苯烯丙基(phenallyl)、炔丙基、对氯苯基、对甲氧基苯基、对硝基苯基、2，4二硝基苯基、2，3，5，6-四氟-4-(三氟甲基)苯基、苄基、对甲氧基苄基、3，4-二甲氧基苄基、2，6-二甲氧基苄基、邻硝基苄基、对硝基苄基、戊二烯基硝基苄基、戊二烯基硝基胡椒基、卤代苄基、2，6-二氯苄基、2，4-二氯苄基、2，6-二氟苄基、对氰基苄基、氟苄基、4-氟烷氧基苄基、三甲基硅基二甲苯基、对苯基苄基、2-苯基-2-丙基、对酰基氨基苄基、对叠氮基苄基、4-叠氮基-3-氯苄基、2-三氟甲基苄基、4-三氟甲基苄基、对(甲基亚磺酰基)苄基、对甲硅基苄基(p-siletanylbenzyl)，4-乙酰氧基苄基、4-(2-三甲基硅基)乙氧基甲氧基苄基、2-萘基甲基、2-吡啶甲基、4-吡啶甲基、3-甲基-2-吡啶甲基-N-氧化物、2-喹啉基甲基、6-甲氧基-2-(4-甲基苯基)-4-喹啉甲基、1-芘基甲基、二苯基甲基、4-甲氧基二苯基甲基、4-苯基二苯基甲基、p，p'-二硝基苯甲基(p，p’-dinitrobenzhydryl)、5-二苯并环庚基、三苯基甲基、三(4叔丁基苯基)甲基、α-萘基二苯基甲基、对甲氧基苯基二苯基甲基、二(对甲氧基苯基)苯基甲基、三(对甲氧基苯基)甲基、4-(4'-溴苯甲酰氧基)苯基二苯基甲基、4，4'，4”-三(4，5-二氯苯二酰亚氨基苯基)甲基、4，4'，4”-三(菊芋糖基氧基苯基)甲基(4，4’，4”-tris(levulinoyloxyphenyl)methyl)、4，4'，4”-三(苯甲酰氧基苯基)甲基、4，4'-二甲氧基-3”-[N-(咪唑基甲基)]三苯甲基、4，4'-二甲氧基-3”-[N-(咪唑基乙基)氨基甲酰基]三苯甲基、二(4-甲氧基苯基)-1'-芘基甲基、4-(17-四苯并[a，c，g，i]芴基甲基)-4，4”-二甲氧基三苯甲基、9-蒽基、9-(9-苯基)呫吨基、9-苯基硫代蒽基、9-(9-苯基-10-氧代)蒽基、1，3-苯并二硫戊环-2-基、和4，5-二(乙氧基羰基)-[1，3]-二氧戊环-2-基、苯并异噻唑基S，S-二氧化物。在硅醚的情况下，OH的保护基可以选自三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、二甲基异丙基硅基、二乙基异丙基硅基、二甲基(2，3-二甲基-丁烷-2-基)硅基(dimethylthexylsilyl)、2-降冰片基二甲基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基、三苄基硅基、三-对二甲苯基硅基(tri-p-xylylsilyl)、三苯基硅基、二苯基甲基硅基、二叔丁基甲基硅基、二(叔丁基)-1-芘基甲氧基硅基、三(三甲基硅基)硅基、(2-羟基苯乙烯基)二甲基硅基、(2-羟基苯乙烯基)二异丙基硅基、叔丁基甲氧基苯基硅基、叔丁氧基二苯基硅基、1，1，3，3-四异丙基-3-[2-(三苯基甲氧基)乙氧基]二硅氧烷-1-基和氟硅基。在酯的情况下，OH的保护基以及与其连接的未被保护的OH基团的氧原子一起形成酯，该酯可以选自甲酸酯、苯甲酰基甲酸酯、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氯乙酰氨基酸酯(trichloroacetamidate)、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、苯乙酸酯、二苯基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、双氟链型丙酰基、4-戊烯酸酯、4-氧戊酸酯、4，4(亚乙基二硫基)戊酸酯、5-[3-二(4-甲氧基苯基)-羟基甲基苯氧基]乙酰丙酸酯、新戊酸酯(pivaloate)、1-金刚烷酯、巴豆酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苯基苯甲酸酯、2，4，6-三甲基苯甲酸酯、4-溴苯甲酸酯、2，5-二氟苯甲酸酯、对硝基苯甲酸酯、吡啶甲酸酯(picolinate)、烟酸酯，2-(叠氮甲基)苯甲酸酯、4-叠氮基丁酸酯、(2-叠氮甲基)苯乙酸酯、2-{[(三苯甲基硫基)氧基]甲基}苯甲酸酯(2-{[(tritylthio)oxy]methyl}benzoate)、2-{[(4-甲氧基三苯甲基硫基)氧基]甲基}苯甲酸酯(2-{[(4-methoxytritylthio)oxy]methyl}benzoate)，2-{[甲基(三苯甲基硫基)氨基]甲基}苯甲酸酯、2-{{[(4-甲氧基三苯甲基)硫基]甲基氨基}-甲基}苯甲酸酯、2-(烯丙基氧基)苯基乙酸酯、2-(异戊二烯基氧基甲基)苯甲酸酯、6-(乙酰丙酰基氧基甲基)-3-甲氧基-2-硝基苯甲酸酯、6-(乙酰丙酰基氧基甲基)-3-甲氧基-4-硝基苯甲酸酯、4-苄氧基丁酸酯、4-三烷基甲硅烷氧基丁酸酯、4-乙酰氧基-2，2-二甲基丁酸酯、2，2-二甲基-4-戊烯酸酯、2-碘代苯甲酸酯、4-硝基-4-甲基戊酸酯、邻(二溴甲基)苯甲酸酯、2-甲酰基苯磺酸酯、4-(甲硫基甲氧基)丁酸酯、2-(甲硫基甲氧基甲基)苯甲酸酯、2-(氯乙酰氧基甲基)苯甲酸酯、2-[(2-氯乙酰氧基)乙基]苯甲酸酯、2-[2-(苄氧基)乙基]苯甲酸酯、2-[2-(4-甲氧基苄氧基)乙基]苯甲酸酯、2，6-二氯-4-甲基苯氧基乙酸酯、2，6-二氯-4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯氧基乙酸酯、2，4-二(1，1-二甲基丙基)苯氧基乙酸酯、氯二苯乙酸酯、异丁酸酯、单琥珀酸酯、(E)-2-甲基-2-丁烯酸酯、邻(甲氧基羰基)苯甲酸酯、α-萘甲酸酯、硝酸酯、烷基N，N，N’，N’-四甲基磷酰二胺(alkyl N，N，N’，N’tetramethyl-phosphorodiamidate)、2-氯苯甲酸酯。在磺酸酯、次磺酸酯和亚磺酸酯的情况下，将OH的保护基以及与其连接的未被保护的OH基团的氧原子一起形成磺酸酯、次磺酸酯和亚磺酸酯，该磺酸酯、次磺酸酯和亚磺酸酯可以选自磺酸酯、烯丙基磺酸酯、甲磺酸酯、苄基磺酸酯、甲苯磺酸酯、2-[(4-硝基苯基)乙基]磺酸酯、2-三氟甲基磺酸酯、4-单甲氧基三苯甲基次磺酸酯、烷基2，4-二硝基苯基次磺酸酯、和2，2，5，5-四甲基吡咯烷-3-酮-1-亚磺酸酯。在碳酸酯的情况下，OH的保护基以及与其连接的未被保护的OH基的氧原子一起形成碳酸酯基，该碳酸酯基选自甲基碳酸酯、甲氧基甲基碳酸酯、9-芴基甲基碳酸酯、乙基碳酸酯、溴乙基碳酸酯、2-(甲基硫基甲氧基)乙基碳酸酯、2，2，2-三氯乙基碳酸酯、1，1-二甲基-2，2，2-三氯乙基碳酸酯、2-(三甲基硅基)乙基碳酸酯、2-[二甲基(2-萘基甲基)硅基]乙基碳酸酯、2-(苯基磺酰基)乙基碳酸酯、2-(三苯基磷基)乙基碳酸酯、顺-[4-[[(-甲氧基三苯甲基)亚磺酰基]氧基]-四氢呋喃-3-基]氧基碳酸酯、异丁基碳酸酯、叔丁基碳酸酯、乙烯基碳酸酯、烯丙基碳酸酯、肉桂基碳酸酯、炔丙基碳酸酯、对氯苯基碳酸酯、对硝基苯基碳酸酯、4-乙氧基-1-萘基碳酸酯、6-溴-7-羟基香豆素-4-基甲基碳酸酯、苄基碳酸酯、邻硝基苄基碳酸酯、对硝基苄基碳酸酯、对甲氧基苄基碳酸酯、3，4-二甲氧基苄基碳酸酯、蒽醌-2-基甲基碳酸酯、2-丹磺酰基乙基碳酸酯、2-(4-硝基苯基)乙基、2-(2，4-二硝基苯基)乙基碳酸酯、2-(2-硝基苯基)丙基碳酸酯、烷基2-(3，4-亚甲基二氧基-6-硝基苯基)丙基碳酸酯、2-氰基-1-苯基乙基碳酸酯、2-(2-吡啶基)氨基-1-苯基乙基碳酸酯、2-[N-甲基-N-(2-吡啶基)]氨基-1-苯基乙基碳酸酯、苯甲酰甲基碳酸酯、3’，5’-二甲氧基苯偶姻碳酸酯、甲基二硫代碳酸酯、和S-苄基硫代碳酸酯。并且在氨基甲酸酯的情况下，OH的保护基以及与之连接的未被保护的OH基的氧原子一起形成氨基甲酸酯，该氨基甲酸酯可以选自二甲基硫基氨基甲酸酯，N-苯基氨基甲酸酯、N-甲基-N-(邻硝基苯基)氨基甲酸酯。
在本发明的范围内，氨基的保护基定义为通过形成合适的被保护的氨基来保护氨基而产生的N-键合部分。这种被保护的氨基的示例包括氨基甲酸酯、脲、酰胺、杂环体系、N-烷基胺、N-烯基胺、N-炔基胺、N-芳基胺、亚胺、烯胺、N-金属衍生物、N-N衍生物、N-P衍生物、N-Si衍生物和N-S衍生物。在氨基甲酸酯的情况下，氨基的保护基以及与其相连的氨基一起形成氨基甲酸酯，该氨基甲酸酯可以选自氨基甲酸甲酯、氨基甲酸乙酯、9-芴基氨基甲酸甲酯、2，6-二叔丁基-9-芴基氨基甲酸甲酯、2，7-二(三甲基硅基)芴基氨基甲酸甲酯、9-(2-磺基)芴基氨基甲酸甲酯、9-(2，7-二溴)芴基氨基甲酸甲酯、17-四苯并[a，c，g，i]芴基氨基甲酸甲酯、2-氯-3-茚基氨基甲酸甲酯、苯并[f]茚基-3-基氨基甲酸甲酯、1，1-二氧苯并[b]-噻吩-2-基氨基甲酸甲酯、2-甲基磺酰基-3-苯基-1-丙-2-基氨基甲酸酯、2，7-二叔丁基-[9-(10，10-二氧-10，10，10，10-四氢噻吨基)]氨基甲酸甲酯、2，2，2-三氯氨基甲酸乙酯、2-三甲基硅基氨基甲酸乙酯、(2-苯基-2-三甲基硅基)氨基甲酸乙酯、2-苯基氨基甲酸乙酯、2-氯氨基甲酸乙酯、1，1-二甲基-2-卤代氨基甲酸乙酯、1，1-二甲基-2，2-二溴氨基甲酸乙酯、1，1-二甲基-2，2，2-三氯氨基甲酸乙酯、2-(2'-吡啶基)氨基甲酸乙酯、2-(4'-吡啶基)氨基甲酸乙酯、2，2-二(4'-硝基苯基)氨基甲酸乙酯、2-[(2-硝基苯基)二硫代]-1-苯基氨基甲酸乙酯、2-(N，N-二环己基甲酰胺基)氨基甲酸乙酯、叔丁基氨基甲酸酯、氟代BOC-氨基甲酸酯、1-金刚烷基氨基甲酸酯、2-金刚烷基氨基甲酸酯、1-(1-金刚烷基)-1-甲基氨基甲酸乙酯、1-甲基-1-(4-联苯基)氨基甲酸乙酯(1-methyl-1-(4-byphenylyl)ethylcarbamate)、1-(3，5-二叔丁基苯基)-1-甲基氨基甲酸乙酯、三异丙基-硅基氨基甲酸酯、乙烯基氨基甲酸酯、烯丙基氨基甲酸酯、异戊二烯基氨基甲酸酯、1-异丙基烯丙基氨基甲酸酯、肉桂基氨基甲酸酯、4-硝基肉桂基氨基甲酸酯、3-(3'-吡啶基)丙-2-烯基氨基甲酸酯、六二烯基氨基甲酸酯、炔丙基氨基甲酸酯、1，4-丁-2-炔基二氨基甲酸酯、8-喹啉基氨基甲酸酯、N-羟基哌啶氨基甲酸酯、烷基二硫代氨基甲酸酯、苄基氨基甲酸酯、3，5-二叔丁基苄基氨基甲酸酯、对甲氧基苄基氨基甲酸酯、对硝基苄基氨基甲酸酯、对溴苄基氨基甲酸酯、对氯苄基氨基甲酸酯、2，4-二氯苄基氨基甲酸酯、4-甲基亚磺酰基苄基氨基甲酸酯、4-三氟甲基苄基氨基甲酸酯、氟苄基氨基甲酸酯、2-萘基氨基甲酸甲酯、9-蒽基氨基甲酸甲酯、二苯基氨基甲酸甲酯、4-苯基乙酰氧基苄基氨基甲酸酯、4-叠氮基苄基氨基甲酸酯、4-叠氮基-甲氧基苄基氨基甲酸酯、间-氯-对-酰氧基苄基氨基甲酸酯、对-(二羟基硼基)苄基氨基甲酸酯、5-苯并恶唑基氨基甲酸甲酯、2-(三氟甲基)-6-色酮基氨基甲酸甲酯、2-甲基硫代氨基甲酸乙酯、2-甲基磺酰基氨基甲酸乙酯、2-(对甲苯磺酰基)氨基甲酸乙酯、2-(4-硝基苯基磺酰基)氨基甲酸乙酯、2-(2，4-二硝基苯基磺酰基)氨基甲酸乙酯、2-(4-三氟甲基苯基磺酰基)氨基甲酸乙酯、[2-(1，3-二噻烷基)]氨基甲酸甲酯、2-磷基氨基甲酸乙酯、2-[苯基(甲基)磺酰基氨基甲酸乙酯、1-甲基-1-(三苯基磷基)氨基甲酸乙酯、1，1-二甲基-2-氰基氨基甲酸乙酯、2-丹基氨基甲酸乙酯、2-(4-硝基苯基)氨基甲酸乙酯、4-甲基硫代苯基氨基甲酸酯、2，4-二甲基硫代苯基氨基甲酸酯、间硝基苯基氨基甲酸酯、3，5-二甲氧基苄基氨基甲酸酯、1-甲基-1-(3，5-二甲氧基苯基)氨基甲酸乙酯、α-甲基硝基哌啶基氨基甲酸酯、邻硝基苄基氨基甲酸酯、3，4-二甲氧基-6-硝基苄基氨基甲酸酯、苯基(邻硝基苯基)氨基甲酸甲酯、2-硝基苯基氨基甲酸乙酯、6-硝基藜芦基氨基甲酸酯、4-甲氧基苯甲酰甲基氨基甲酸酯、3'，5'-二甲氧基苯偶姻氨基甲酸酯、9-呫吨基氨基甲酸甲酯、N-甲基-N-(邻硝基苯基)氨基甲酸酯、叔戊基氨基甲酸酯、1-甲基环丁基氨基甲酸酯、1-甲基环己基氨基甲酸酯、1-甲基-1-环丙基氨基甲酸甲酯、环丁基氨基甲酸酯、环戊基氨基甲酸酯、环己基氨基甲酸酯、异丁基氨基甲酸酯、异冰片基氨基甲酸酯、环丙基氨基甲酸甲酯、对-癸氧基苄基氨基甲酸酯、二异丙基氨基甲酸甲酯、2，2-二甲氧基羰基乙烯基氨基甲酸酯、邻-(N，N-二甲基甲酰胺基)苄基氨基甲酸酯、1，1-二甲基-3-(N，N-二甲基甲酰胺基)丙基氨基甲酸酯、丁炔基氨基甲酸酯、1，1-二甲基丙炔基氨基甲酸酯、2-碘氨基甲酸乙酯、1-甲基-1-(4'-吡啶基)氨基甲酸乙酯、1-甲基-1-(对苯偶氮基苯基)氨基甲酸乙酯、对-(p'-甲氧基苯偶氮基)苄基氨基甲酸酯、对-(苯偶氮基)苄基氨基甲酸酯、2，4，6-三甲基苄基氨基甲酸酯、异烟基氨基甲酸酯、4-(三甲铵基)苄基氨基甲酸酯、对氰基苄基氨基甲酸酯、二(2-吡啶基)氨基甲酸甲酯、2-呋喃基氨基甲酸甲酯、苯基氨基甲酸酯、2，4，6三叔丁基苯基氨基甲酸酯、1-甲基-1-苯基氨基甲酸乙酯和S-苄基硫代氨基甲酸酯。在脲的情况下，氨基的保护基可以选自吩噻嗪基-(10)-羰基、N'-对甲苯磺酰基氨基羰基、N'-苯基氨基硫羰基、4-羟基苯基氨基羰基、3-羟基色氨基羰基(3-hydroxytryptaminocarbonyl)和N'-苯基-氨基硫羰基。在酰胺的情况下，胺基保护基以及与之连接的胺基一起形成酰胺基，该酰胺基可以选自甲酰胺、乙酰胺、氯乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、苯乙酰胺、3-苯丙酰胺、戊-4-烯酰胺、吡啶酰胺、3-吡啶甲酰胺、N-苯甲酰基苯丙氨酰、苯甲酰胺、对苯基苯甲酰胺、邻硝基苯乙酰胺、2，2-二甲基-2-(邻硝基苯基)乙酰胺、邻硝基苯氧基乙酰胺、3-(邻硝基苯基)丙酰胺、2-甲基-2-(邻硝基苯氧基)-丙酰胺、3-甲基-3-硝基丁酰胺、邻硝基肉桂酰胺、邻硝基苯甲酰胺、3-(4-叔丁基-2，6-二硝基苯基))-2，2-二甲基丙酰胺、邻苯甲酰氧基甲基)苯甲酰胺、2-(乙酰氧基甲基)苯甲酰胺、2-[(叔丁基二苯基硅氧基)甲基]苯甲酰胺、3-(3'，6'-二氧-2'，4'，5'-三甲基环己-1'，4'-二烯)-3，3-二甲基丙酰胺、邻羟基反式肉桂酰胺、2-甲基-2-(邻苯偶氮基苯氧基)丙酰胺、4-氯丁酰胺、乙酰乙酰胺、3-(对羟苯基)丙酰胺、(N'-二硫苄氧基羰基氨基)乙酰胺、和N-乙酰甲硫氨酸酰胺(N-acetylmethionine amide)。在杂环体系的情况下，胺基保护基以及与之连接的胺基一起形成杂环体系，杂环体系可以选自4，5-二苯基-3-恶唑啉-2-酮、N-邻苯二甲酰亚胺、N-二氯邻苯二甲酰亚胺、N-四氯邻苯二甲酰亚胺、N-4-硝基邻苯二甲酰亚胺、N-硫代二乙醇酰(N-thiodiglycoloyl)、N-二硫代琥珀酰亚胺、N-2，3-二苯基马来酰亚胺、N-2，3-二甲基马来酰亚胺、N-2，5-二甲基吡咯、N-2，5-二(三异丙基硅氧基)吡咯、N-1，1，4，4-四甲基二甲硅烷基氮杂环戊烷加合物(N-1，1，4，4-tetramethyldisilylazacyclopentane adduct)、N-1，1，3，3-四甲基-1，3-二硅异吲哚啉、N-二苯基硅基二乙烯、N-5-取代的-1，3-二甲基-1，3，5-三氮杂环己基-2-酮、N-5-取代的-1，3-苄基-1，3，5-三氮杂环己基-2-酮、1-取代的3，5-二硝基-4-吡啶酮、和1，3，5-二恶嗪。在N-烷基、N-烯基、N-炔基或N-芳基胺的情况下，胺基保护基可以选自N-甲基、N-叔丁基、N-烯丙基、N-异戊二烯基、N-肉桂基、N-苯基烯丙基、N-炔丙基、N-甲氧基甲基、N-[2-(三甲基硅基)乙氧基]甲基、N-3-乙酰氧基丙基、N-氰基甲基、N-2-氮杂降冰片烯、N-苄基、N-4-甲氧基苄基、N-2，4-二甲氧基苄基、N-2-羟基苄基、N-二茂铁基甲基、N-2，4-二硝基苯基、邻甲氧基苯基、对甲氧基苯基、N-9-苯基芴基、N-芴基、N-2-吡啶甲基胺、N'-氧化物、N-7-甲氧基香豆-4-基甲基、N-二苯甲基、N-二(4-甲氧基苯基)甲基、N-5-二苯并环庚基、N-三苯甲基、N-(4-甲基苯基)二苯甲基、和N-(4-甲氧基苯基)二苯基甲基。在亚胺的情况下，胺基保护基可以选自N-1，1-二甲基硫亚甲基、N-亚苄基、N-对甲氧基亚苄基、N-二苯基亚甲基、N-[2-吡啶基)三甲苯基]亚甲基(N-[2-pyridyl)mesityl]methylene)、N-(N′，N′-二甲基氨基亚甲基)、N-(N′，N′-二苄基氨基亚甲基)、N-(N′-叔丁基氨基亚甲基)、N，N′-异亚丙基、N-对硝基亚苄基、N-亚水杨基、N-5-氯亚水杨基、N-(5-氯-2-羟基苯基)苯基亚甲基、N亚环己基、和N-亚叔丁基。在烯胺的情况下，胺基保护基可以选自N-(5，5-二甲基-3-氧代-1-环己烯基)、N-2，7-二氯-9-芴基亚甲基、N-1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代亚环己基)乙基、N-(1，3-二甲基-2，4，6-(1H，3H，5H)-三氧嘧啶-5-亚基)甲基、N-4，4，4-三氟-3-氧代-1-丁烯基、和N-(1-异丙基-4-硝基-2-氧代-3-吡咯啉-3-基)。在使用N-金属衍生物的情况下，胺基保护基可以选自N-硼烷、N-二苯基硼酸酯、N-二乙基硼酸酯、N-9-硼酸二环壬烷(N-9-borabicyclononane)、N-二氟硼酸酯、和3，5-二(三氟甲基)苯基硼酸；并且还包括N-苯基(五羰基铬)卡宾基(carbenyl)、N-苯基(五羰基钨)卡宾基、N-甲基(五羰基铬)卡宾基、N-甲基(五羰基钨)卡宾基、N-铜螯合物、N-锌螯合物和18-冠-6-衍生物。在N-N衍生物的情况下，氨基保护基以及与其连接的氨基一起形成N-N衍生物，该N-N衍生物可以选自N-硝基氨基、N-亚硝基氨基、胺-N-氧化物、叠氮衍生物、三氮烯衍生物、和N-三甲基硅基甲基-N-苄基肼。在N-P衍生物的情况下，氨基保护基以及与其连接的氨基一起形成N-P衍生物，该N-P衍生物可以选自二苯基亚膦酰胺(diphenylphosphinamide)、二甲基硫代亚膦酰胺、二苯基硫代亚膦酰胺、二烃基膦酰胺，二苄基膦酰胺、二苯基膦酰胺、和亚氨基三苯基膦烷。在N-Si衍生物的情况下，NH2保护基可以选自叔丁基二苯基硅基和三苯基硅基。在N-S衍生物的情况下，被保护的胺基选自N-S衍生物，该N-S衍生物可以选自N-次磺酰基或N-磺酰基衍生物。N-次磺酰基(N-sulfenyl)衍生物可以选自苯次磺酰胺、2-硝基苯次磺酰胺、2，4-二硝基苯次磺酰胺、五氯苯次磺酰胺、2-硝基-4-甲氧基苯次磺酰胺、三苯基甲基次磺酰胺、1-(2，2，2)-三氟-1，1-二苯基)乙基次磺酰胺、和N-3-硝基-2-吡啶次磺酰胺。N-磺酰基衍生物可以选自甲磺酰胺、三氟甲磺酰胺、叔丁基磺酰胺、苄基磺酰胺、2-(三甲基硅基)乙磺酰胺、对甲苯磺酰胺、苯磺酰胺、邻甲氧苯基磺酰胺、2-硝基苯磺酰胺、4-硝基苯磺酰胺、2，4-二硝基苯磺酰胺、2-萘磺酰胺、4-(4'，8'-二甲氧基萘甲基)苯基磺酰胺、2-(4-甲基苯基)-6-甲氧基-4-甲基磺酰胺、9-蒽磺酰胺、吡啶-2-磺酰胺、苯并噻唑-2-磺酰胺、苯甲酰甲基磺酰胺(phenacylsulfonamide)、2，3，6-三甲基-4-甲氧基苯磺酰胺、2，4，6-三甲氧基苯磺酰胺、2，6-二甲基-4-甲氧基苯磺酰胺、五甲基苯磺酰胺、2，3，5，6-四甲基-4-甲氧基苯磺酰胺、4-甲氧基苯磺酰胺、2，4，6-三甲基苯磺酰胺、2，6-二甲氧基-4-甲基苯磺酰胺、3-甲氧基-4-叔丁基苯磺酰胺、和2，2，5，7，8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰胺。
在本发明的范围内，SH的保护基团被定义为通过形成合适的被保护的SH基团来保护SH基团而产生的S-键合部分。这种被保护的SH基团的示例包括硫醚、二硫化物、甲硅烷基硫醚、硫酯、硫代碳酸酯和硫代氨基甲酸酯。在硫醚的情况下，SH的保护基可选自：S-烷基，S-苄基，S-对甲氧基苄基，S-邻羟基苄基，S-对羟基苄基S，S-邻乙酰苄基，S-对乙酰苄基，S-对硝基苄基，S-邻硝基苄基，S-2，4，6-三甲基苄基，S-2，4，6-三甲氧基苄基，S-4-吡啶甲基，S-2-吡啶甲基-N-氧化物，S-2-喹啉基甲基，S-9-蒽甲基，S-9-芴基甲基，S-呫吨基，S-二茂铁基甲基，S-二苯甲基，S-双(4-甲氧基苯基)甲基，S-5-二苯并环庚基，S-三苯甲基，4-甲氧基三苯甲基，S-二苯基-4-吡啶基甲基，S-苯基，S-2，4-二硝基苯基，S-2-喹啉基，S-叔丁基，S-1-金刚烷基，S-甲氧基甲基，S-异丁氧基甲基，S-苄氧基甲基，S-1-乙氧基乙基，S-2-四氢吡喃基，S-苄硫基甲基，S-苯硫基甲基，S-乙酰氨基甲基(Acm)，S-三甲基乙酰氨基甲基，S-苯甲酰胺基甲基，S-烯丙氧基羰基氨基甲基，S-N-[2，3，5，6-四氟-4-(N'-哌啶子基)-苯基-N-烯丙氧基羰基氨基甲基，S-邻苯二甲酰亚胺基甲基，S-苯基乙酰氨基甲基，S-乙酰甲基，S-羧甲基，S-氰基甲基，S-(2-硝基-1-苯基)乙基，S-2-(2，4-二硝基苯基)乙基，S-2-(4'-吡啶基)乙基，S-2-氰基乙基，S-2-(三甲基甲硅烷基)乙基，S-2，2-双(羰基乙氧基)乙基，S-(1-间硝基苯基-2-苯甲酰基)乙基，S-2-苯基磺酰基乙基，S-1-(4-甲基苯基磺酰基)-2-甲基丙-2-基和S-对羟基苯酰基。在二硫化物的情况下，被保护的SH基团可以选自：S-乙基二硫化物，S-叔丁基二硫化物，S-2-硝基苯基二硫化物，S-2，4-二硝基苯基二硫化物，S-2-苯基偶氮苯基二硫化物，S-2-羧基苯基二硫化物和S-3-硝基-2-吡啶基二硫化物。在甲硅烷基硫醚的情况下，SH的保护基团可选自上文所列的用甲硅烷基醚保护OH的基团。在硫酯的情况下，SH的保护基可选自以下组：S-乙酰基、S-苯甲酰基、S-2-甲氧基异丁酰基、S-三氟乙酰基、S-N-[[对联苯基)-异丙基氧基]羰基]-N-甲基-γ-氨硫丁酸酯和S-N-(叔丁氧羰基)-N-甲基-γ-氨硫丁酸酯。在硫代碳酸酯的情况下，SH的保护基可选自：S-2，2，2-三氯乙氧基羰基、S-叔丁氧基羰基、S-苄氧基羰基、S-对甲氧基苄氧基羰基和S-芴基甲基羰基。在硫代氨基甲酸酯的情况下，受保护的SH基团可选自S-(N-乙基氨基甲酸酯)和S-(N-甲氧基甲基氨基甲酸酯)。
这些基团的提及不应被解释为对本发明范围的限制，因为它们仅作为OH、氨基和SH基团的保护基团的示例而被提及，但是本领域技术人员可能已知具有所述功能的其它基团，这些基团也应被理解为被本发明所包括。
为了提供更简明的描述，本文给出的一些定量表达式不用术语“约”限定。应当理解，无论是否明确使用术语“约”，本文给出的每个量都指实际给定值，并且还指基于本领域技术人员合理推断的对这样的给定值的近似值(包括由于这种给定值的实验和/或测量条件而导致的类似值和近似值)。
“抗体-药物偶联物(ADC)”代表了一种将细胞毒分子传递给癌细胞的靶向策略。(参见例如国际专利申请WO-A-2004/010957、WO-A-2006/060533和WO-A-2007/024536)。这种化合物通常被称为药物、毒素和放射性核素的“偶联物”。当药物偶联物与肿瘤细胞结合并释放和/或激活药物部分的细胞毒活性时，发生杀死肿瘤细胞。药物偶联物提供的选择性使对正常细胞的毒性最小化，从而增强患者对药物的耐受性。已获得市场批准的这类药物抗体偶联物的三个示例是：用于急性髓系白血病的吉妥珠单抗(Gemtuzumab ozogamicin)、用于复发难治性霍奇金淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤的本妥昔单抗(Brentuximabvedotin)、以及用于乳腺癌的曲妥珠单抗抗体-药物偶联物(ado-Trastuzumabemtansine)，尤其是HER2+。
用于癌症化疗的药物的有效性通常依赖于癌症和正常组织之间的生长速率、生化途径和生理特征的差异。因此，大多数标准的化疗药物是相对非特异性的，表现出剂量限制性毒性，导致次优的治疗效果。选择性靶向恶性细胞和非健康组织的一种方法是使用识别肿瘤细胞表面表达的肿瘤相关抗原的特异性单克隆抗体(mAb)[Meyer，D.L.&Senter，P.D.(2003)Recent advances in antibody drug conjugates for cancertherapy.Annu.Rep.Med.Chem.，38，229-237；Chari，R.V.(2008)Targeted cancertherapy:conferring specificity to cytotoxic drugs.Acc.Chem.Res.41，98-107]。在过去的25年里，已经批准了30多种主要用于癌症和炎性疾病的免疫球蛋白G(IgG)和相关试剂。
另一种策略是将小的抗肿瘤分子与用作载体(增加半衰期)和靶向剂(选择性)的mAb化学结合。由于单克隆抗体(mAb)对肿瘤相关抗原的高选择性、有利的药物代谢动力学和相对低的内在毒性，已经投入了相当大的工作以将单克隆抗体(mAb)用于靶向药物递送。通常通过条件稳定的连接子系统将抗癌药物共价连接至mAb而形成mAb-药物偶联物(ADC)。当与细胞表面抗原结合时，用于大多数ADC的mAb被主动转运到溶酶体或其他细胞内隔室，在溶酶体或其他细胞内隔室处，酶、低pH或还原剂促进药物释放。然而，目前开发的ADC有限。
抗原必须具有高肿瘤细胞选择性以限制毒性和非靶效应。已经在临床前模型和临床试验中研究了过多的肿瘤相关抗原，包括在B细胞中过度表达的抗原(例如，CD20、CD22、CD40、CD79)、T细胞(CD25、CD30)、癌细胞(HER2、EGFR、EpCAM、EphB2、PSMA)、内皮细胞(endoglin)或基质细胞(成纤维细胞活化蛋白)，这里仅举几个例子[Teicher B.A.(2009).Antibody-drug conjugate targets.Curr Cancer Drug Targets 9(8):982-1004]。ADC靶标的一个重要特性是它们被内化的能力；这可以是抗原本身的内在特征，或者可以通过抗体与其抗原的结合来诱导。事实上，ADC的内化对于减少与药物有效载荷的细胞外传递相关的毒性至关重要。
关于偶联的小分子，与广泛认定的抗原靶标相反地，目前只有有限的用作ADC有效载荷的细胞毒性药物家族被积极用于临床试验研究：刺孢霉素(Calicheamycin，Pfizer)、倍癌霉素(duocarmycins，Synthon)、吡咯并苯二氮卓类药物(pyrrolobenzodiazepines，Spirogen)、伊立替康(irinotecan，Immunomedics)、美登素(maytansinoids，DM1和DM4；ImmunoGen+Genentech/Roche、Sanofi-Aventis、Biogen Idec、Centocor/Johnson、Millennium/Takeda)和奥里斯他汀(Auratins，MMAE和MMAF；Seattlegenetics+genentech/Roche，MedImmune/AstraZeneca，Bayer-Schering，Celldex，Progenics，Genmab)。刺孢霉素、倍癌霉素和吡咯并苯二氮卓类药物是DNA小沟结合剂，伊立替康是拓扑异构酶I抑制剂，而美登素和奥里斯他汀是微管蛋白解聚剂。
有趣的是，其中三种细胞毒性来源的代表性ADC已经进入后期临床试验：曲妥珠单抗抗体-药物偶联物(T-DM1)，曲妥珠单抗通过稳定的连接子与美登素类半合成药物连接(FDA于2013年2月22日批准用于晚期HER2阳性乳腺癌)；伊珠单抗奥佐米星(CMC-544)，一种人源化抗CD22 mAb(G5/44，IgG4)，其通过酸不稳定性连接子(乙酰苯氧基丁酸)与刺孢霉素结合(B细胞非霍奇金淋巴瘤)；本妥昔单抗(Brentuximab vedotin)，一种人源抗CD30 mAb，其通过马来酰亚胺己基-缬氨酰基-瓜氨酸基-对氨基苄基氨基甲酸酯(maleimidecaproyl-valyl-citrullinyl-p-aminobenzylcarbamate)与甲基奥里斯他汀E(MMAE)结合(FDA于2011年批准用于间变性大细胞淋巴瘤和霍奇金氏淋巴瘤)。
连接子代表ADC结构的关键组分。已经研究了几类第二代连接子，包括酸不稳定性腙连接子(溶酶体)(例如吉妥珠单抗和伊珠单抗奥佐米星)；二硫化物基连接子(还原性细胞内环境)；不可切割的硫醚连接子(溶酶体的分解代谢降解)(例如，曲妥珠单抗抗体-药物偶联物)；肽连接子(例如瓜氨酸-缬氨酸)(溶酶体蛋白酶，如组织蛋白酶-B)(例如，本妥昔单抗)：参见例如WO-A-2004/010957，WO-A-2006/060533和WO-A-2007/024536。还描述了通过尺寸排阻层析(SEC)纯化抗体-药物偶联物[参见，例如Liu等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，93:8618-8623(1996)，以及Chari等，Cancer Research，52:127-131(1992)]。
曲妥珠单抗(Herceptin)是干扰HER2/neu受体的单克隆抗体。它的主要用途是治疗某些胃癌和乳腺癌。HER受体是嵌入细胞膜中的蛋白质，它将细胞外的分子信号(称为EGF的分子)传递到细胞内，并启动和关闭基因。HER蛋白质刺激细胞增殖。在一些癌症中，特别是某些类型的乳腺癌、卵巢癌、胃癌、肺癌、子宫癌、子宫内膜癌、唾液腺导管癌、膀胱癌、宫颈癌、结肠直肠癌、食道癌、胰腺癌和胆囊癌，HER2过度表达，导致癌细胞不受控制地繁殖。
HER2(人表皮生长因子受体2)基因在20-30％的早期乳腺癌中被扩增，这使得其在细胞膜中过度表达表皮生长因子(EGF)受体。在某些类型的癌症中，HER2可能在没有生长因子到达并与受体结合的情况下发出信号，使其在细胞构成中发挥作用；然而，在这种情况下，曲妥珠单抗无效。
HER2通路在功能正常时促进细胞生长和分裂；然而，当它过度表达时，细胞生长加速，超过其正常极限。在某些类型的癌症中，该通路被用来促进细胞的快速生长和增殖，从而促进肿瘤的形成。在癌细胞中，HER2蛋白的表达比在正常细胞中高达100倍(每20，000细胞中2百万个)。这种过度表达导致强烈且持续的增殖信号传导并因此导致肿瘤形成。HER2的过度表达还导致检查点的失活，从而允许增殖的更大程度的增加。
在本发明的化合物中，Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分。在另一个实施例中，Ab可以是能够结合靶细胞，优选动物细胞，更优选人细胞的任何合适的试剂。此类试剂的示例包括淋巴因子、激素、生长因子和营养转运分子(例如铁转运蛋白)。在另一个实施例中，Ab可以是适配体，例如核酸或肽适配体、亲和体或二环肽。
当Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分时，该部分优选是抗原结合肽或多肽。在优选的实施例中，所述部分是抗体或其抗原结合片段。
本发明的药物偶联物中的术语“抗体”是指任何免疫球蛋白，优选全长免疫球蛋白。优选地，该术语涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)及其抗体片段，只要它们表现出所需的生物活性。抗体可源自任何物种，但优选啮齿动物，例如大鼠或小鼠、人或兔来源。或者，抗体，优选单克隆抗体，可以是人源化的、嵌合的或其抗体片段。术语“嵌合抗体”还可以包括包含衍生自非人灵长类动物(例如，旧大陆猴子、猿等)的可变结构域抗原结合序列的“灵长化”抗体和人类恒定区序列。免疫球蛋白也可以是任何类型的(例如，IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)、任何类别的(例如，IgG1，IgG2，IgG3，IgG4，Igal和IgA2)、或任何子类别的免疫球蛋白分子。
术语“单克隆抗体”是指由单一B细胞克隆产生的基本均一的抗体分子群(即，构成该群的各个抗体是相同的，除了可能存在少量的天然发生的突变之外)，通常是杂交瘤。重要的是，每个单克隆具有相同的抗原特异性，即它针对的是抗原上的单一决定簇。
单克隆抗体的制备可以通过本领域已知的方法进行。然而，作为示例，单克隆抗体可通过杂交瘤方法(Kohler等(1975)Nature 256:495)、人B细胞杂交瘤技术(Kozbor等，1983年，Immunology Today 4：72)、或EBV-杂交瘤技术(Cole等人，1985，MonoclonalAntibodies and Cancer Therapy，Alan R.Liss，Inc.，pp.77-96)。或者，可使用重组DNA方法(参见US 4816567)产生单克隆抗体，或使用Clackson等人(1991)Nature，352:624-628，Marks等人(1991)J.MoI.Biol.，222:581-597描述的技术从噬菌体抗体库分离单克隆抗体。
多克隆抗体是针对不同决定簇(表位)的抗体。该非均一抗体群可以使用本领域公知的各种方法从免疫动物的血清中获得。
术语“双特异性抗体”是指由两种不同的单克隆抗体组成的人工抗体。它们可以被设计成结合单一抗原上的两个相邻表位，从而增加亲和力和特异性，或者结合两种不同的抗原用于多种应用，特别是用于招募细胞毒性T-细胞和自然杀伤(NK)细胞或重新靶向用于癌症治疗的毒素、放射性核素或细胞毒性药物(Holliger&Hudson，Nature Biotechnology，2005，9，23)。双特异性抗体可以具有在一个臂中的具有第一结合特异性的杂交免疫球蛋白重链、以及在另一个臂中的杂交免疫球蛋白重链-轻链对(提供第二结合特异性)。这种不对称结构有助于所需双特异性化合物从不想要的免疫球蛋白链结合中分离，因为仅存在于一个半的双特异性分子中的免疫球蛋白轻链提供容易的分离方式(WO 94/04690；Suresh等，Methods in Enzymology，1986年，121:210；Rodrigues等人，1993，J.of Immunology 151:6954-6961；Carter等人，1992年，Bio/Technology 10:163-167；Carter等人，1995年，J.ofHematotherapy 4:463-470；Merchant等人，1998，Nature Biotechnology 16:677-681)。
制备杂交或双特异性抗体的方法是本领域已知的。在一种方法中，双特异性抗体可通过两个不同的Fab或scFv模块的化学交联或基因融合将两个杂交瘤融合成单个“四交瘤(quadroma)”而产生(Holliger&Hudson，Nature Biotechnology，2005，9，23)。
术语“嵌合”抗体是指其中不同部分衍生自不同动物物种的抗体。例如，嵌合抗体可衍生自小鼠的可变区和衍生自人的恒定区。相比之下，“人源化抗体”主要来自人，尽管它含有非人部分。特别地，人源化抗体是人免疫球蛋白(受体抗体)，其中来自受体的高变区的残基被来自非人物种(供体抗体)的高变区的残基取代，所述非人物种具有所需的特异性、亲和力和能力，例如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类。在一些情况下，人免疫球蛋白的骨架区(FR)残基被相应的非人残基取代。此外，人源化抗体可包含受体抗体或供体抗体中未发现的残基。进行这些修饰以进一步改进抗体性能。通常，人源化抗体将基本上包含全部的至少一个(通常两个)可变结构域，其中所有或基本上所有的高变环对应于非人免疫球蛋白的那些，并且所有或基本上所有的FR是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体可选地还将包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的恒定区。
重组抗体如嵌合和人源化单克隆抗体可通过本领域已知的重组DNA技术产生。使用不能表达内源性免疫球蛋白重链和轻链基因，但能表达人重链和轻链基因的转基因小鼠可产生全人抗体。用选择的抗原以正常方式免疫转基因小鼠。可使用常规杂交瘤技术获得针对抗原的单克隆抗体。转基因小鼠携带的人免疫球蛋白基因在B细胞分化过程中重排，随后发生类别转换和体细胞突变。因此，使用这种技术，有可能产生治疗上有用的IgG、IgA、IgM和IgE抗体。关于用于产生人抗体的该技术的概述，参见Lonberg和Huszar(1995，Int.Rev.Immunol.13：65-93)。对于用于产生人抗体和人单克隆抗体的该技术以及用于产生这种抗体的方案的详细讨论，参见例如美国专利US5625126、US5633425、U5569825、US5661016、US5545806，这些美国专利中的每一个均通过引用整体并入本文。其它人抗体可从例如Abgenix公司(加利福尼亚州弗里蒙特)和Genpharm(加利福尼亚州圣何塞)商购获得。
本发明的药物偶联物中的术语“抗原结合片段”是指全长抗体的一部分，其中抗体的这种抗原结合片段保留相应全长抗体的抗原结合功能。抗原结合片段可包含抗体可变区的一部分，所述部分包含至少一个、两个、优选三个选自CDR1、CDR2和CDR3的CDR。抗原结合片段还可包含免疫球蛋白轻链和重链的一部分。抗体片段的示例包括Fab，Fab’，F(ab’)2，scFv，di-scFv，sdAb和BiTE(双特异性T细胞衔接器)，Fv片段包括纳米抗体、双抗体(diabody)、双抗体-Fc融合蛋白、三抗体(triabody)和四抗体(tetrabody)；微抗体；线性抗体(linear antibody)；由Fab表达文库(Fab expression library)产生的片段，抗独特型(抗Id)抗体，CDR(互补决定区)，以及以上任一项的表位结合片段(该表位结合片段免疫特异性结合靶抗原如癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原)，包括仅有重链的抗体的单链或单域抗体分子，例如骆驼VHH结构域和鲨鱼V-NAR；以及由抗体片段形成的多特异性抗体。作为比较，称为“抗体”的全长抗体是包含VL和VH结构域以及完整的轻链和重链恒定结构域的抗体。
抗体还可以具有一种或多种效应子功能，所述效应子功能是指归因于抗体的Fc区(根据本领域中改变受体结合的方法工程化的天然序列Fc区或氨基酸序列变体Fc区)的生物活性。抗体效应子功能的示例包括CIq结合；补体依赖的细胞毒性；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)；吞噬作用；细胞表面受体的下调(例如，B细胞受体；BCR)等。
所述抗体还可以是功能性活性片段(在本文中也称为免疫活性部分)，免疫特异性结合靶抗原例如癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原的抗体的衍生物或类似物，或者结合至肿瘤细胞的其它抗体。在此，功能性活性是指片段、衍生物或类似物能够引发抗独特型抗体，该抗体识别与衍生所述片段、衍生物或类似物的抗体所识别的抗原相同的抗原。具体地，在示例性实施例中，可通过删除骨架和特异性识别抗原的CDR序列的C端的CDR序列来增强免疫球蛋白分子的独特型的抗原性。为了确定哪些CDR序列结合抗原，可以通过本领域已知的任何结合试验(binding assay)方法(例如，BIA core assay)将含有CDR序列的合成肽用于与抗原的结合试验，参见，例如，Kabat等，1991，Sequences of Proteins ofImmunological Interest，第五版，National Institute of Health，Bethesda，Md；KabatE et al.，1980，J.of Immunology 125(3):961-969)。
术语“抗体”还可以包括抗体的融合蛋白或其功能性活性片段，例如抗体通过共价键(例如肽键)在N-端或C-端与不是抗体的另一蛋白质的氨基酸序列(或其部分，如蛋白质的至少10、20或50个氨基酸部分)融合的融合蛋白或其功能性活性片段。抗体或其片段可以在恒定结构域的N-端共价连接至其它蛋白质。
此外，本发明的抗体或抗原结合片段可以包括抗体或其抗原结合片段的类似物和衍生物，其可以被修饰，例如通过任意类型的分子的共价连接被修饰，只要这种共价连接允许抗体保持其抗原结合免疫特异性。修饰的示例包括糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、通过已知的保护/阻断基团的衍生化、蛋白水解切割、连接至细胞抗体单元或其它蛋白质等。可通过已知技术进行许多化学修饰中的任意一种，包括但不限于特定的化学切割、乙酰化、甲酰化、在衣霉素存在情况下的代谢合成等。另外，类似物或衍生物可包含一种或多种非天然氨基酸。
本发明的抗体或抗原结合片段还可以在抗体的Fc结构域中具有修饰(例如，取代、删除或添加)。特别地，修饰可以在Fc-铰链区中并导致FcRn受体的结合增加(WO 97/34631)。
在一个实施例中，本发明的药物偶联物中的抗体可以是任意抗体或其抗原结合片段，优选用于治疗疾病的单克隆抗体，所述疾病优选癌症，更优选以下癌症：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤，其中所述癌症优选为HER2阳性癌症，其中HER2阳性癌症包括包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性食道癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌，更优选HER2阳性乳腺癌、HER2阳性卵巢癌和HER2阳性胃癌，最优选HER2阳性乳腺癌。
可用于治疗癌症的抗体包括但不限于针对癌细胞抗原的抗体。如本文所用，“癌细胞抗原”可选自以下抗原之一：HER2(人表皮生长因子受体2)、CA125(卵巢癌)、CA15-3(癌(carcinomas))、CA19-9(癌)、L6(癌)、Lewis Y(癌)、Lewis X(癌)、α-胎儿蛋白(癌)、CA 242(结肠直肠癌)、胎盘碱性磷酸酶(癌)、前列腺特异性抗原(前列腺)、前列腺磷酸酶(前列腺)、表皮生长因子(癌)(例如EGF受体2蛋白(乳腺癌))、MAGE-1(癌)、MAGE-2(癌)、MAGE-3(癌)、MAGE-4(癌)、抗转铁蛋白(癌)、p97(黑色素瘤)、MUC1-KLH(乳腺癌)、CEA(结肠直肠癌)、gp100(黑色素瘤)、MART1(黑色素瘤)、PSA(前列腺)、IL-2受体(T细胞白血病和淋巴瘤)、CD20(非霍奇金淋巴瘤)、CD52(白血病)、CD33(白血病)、CD22(淋巴瘤)、人绒毛膜促性腺激素(癌)、CD38(多发性骨髓瘤)、CD40(淋巴瘤)、粘蛋白(癌)、P21(癌)、MPG(黑色素瘤)和Neu癌基因产物(癌)。在一个实施例中，癌细胞抗原是HER2。一些特定的、有用的抗体包括但不限于BR96 mAb(Trail，P.A.等Science(1993)261，212-215)、BR64(Trail，PA等CancerResearch(1997)57，100-105)、抗CD40抗原的mAb(例如S2C6 mAb(Francisco，J.A.等CancerRes.(2000)60:3225-3231))、抗CD70抗原的mAb(例如1F6 mAb)、抗CD30抗原的mAb(例如AC10(Bowen，M.A.等(1993)J.Immunol.，151:5896-5906；Wahl等人，2002，Cancer Res.，62(13)：3736-42))。许多其它结合肿瘤相关抗原的内在化抗体也可以使用并已被报道(Franke，A.E.等Cancer Biother Radiopharm.(2000)15:459-76；Murray，J.L.，(2000)Semin Oncol，27:64-70；Breitling，F.，and Dubel，S.，Recombinant Antibodies，JohnWiley，and Sons，New York，1998)。
其他肿瘤相关抗原包括但不限于BMPR1B、E16、STEAP1、STEAP2、0772P.MPF、Napi3b、Sema5b、PSCA hlg、ETBR、MSG783、TrpM4、CRIPTO、CD21、CD79b、FcRH2、HER2、NCA、MDP、IL20Rα、Brevican、EphB2R、ASLG659、PSCA、GEDA、BAFF-R、CD79A、CXCR5、HLA-DOB、P2X5、CD72、LY64、FCRH、IRTA2以及TENB2。
在另一个实施例中，本发明药物偶联物中的抗体可以是抗体或其抗原结合片段，优选免疫特异性结合病毒抗原、微生物抗原、或产生与自身免疫病相关的自身免疫抗体的细胞的抗原的单克隆抗体。
病毒抗原可以包括但不限于任何能够引发免疫应答的病毒肽、多肽或蛋白质，例如HIV gpl20、HIV nef、RSV F糖蛋白、流感病毒神经氨酸酶、流感病毒血凝素、HTLV tax、单纯疱疹病毒糖蛋白(例如，Gb、Gc、Gd和Ge)和乙肝表面抗原)。
微生物抗原可以包括但不限于任何能够引发免疫应答的微生物肽、多肽、蛋白质、糖、多糖或脂质分子(例如，细菌、真菌、致病原生生物或酵母多肽包括例如LPS和荚膜多糖)。
在另一个实施例中，抗体或抗原结合片段结合存在于细胞如肿瘤细胞上的表位。优选地，当细胞是肿瘤细胞时，肿瘤细胞表位不存在于非肿瘤细胞上，或者以比肿瘤细胞中更低的浓度或以与肿瘤细胞不同的立体构型存在。
在一个实施例中，抗体或抗原结合片段结合存在于以下抗原之一的环境中的表位：CA125，CA15-3，CA19-9 L6，Lewis Y，Lewis X，甲胎蛋白，CA 242，胎盘碱性磷酸酶，前列腺特异性抗原，前列腺酸性磷酸酶，表皮生长因子(例如EGF受体2蛋白)，MAGE-I，MAGE-2，MAGE-3，MAGE-4，抗转铁蛋白受体，p97，MUCl-KLH，CEA，gplOO，MARTl，PSA，IL-2受体，CD20，CD52，CD33，CD22，人绒毛膜促性腺激素，CD38，CD40，粘蛋白，P21，MPG，Neu癌基因产物，BMPR1B，E16，STEAP1，STEAP2，0772P.MPF，Napi3b，Sema5b，PSCA hlg，ETBR，MSG783，TrpM4，CRIPTO，CD21，CD79b，FcRH2，HER2，NCA，MDP，IL20Rα，Brevican，EphB2R，ASLG659，PSCA，GEDA，BAFF-R，CD79A，CXCR5，HLA-DOB，P2X5，CD72，LY64，FCRH1，IRTA2，TENB2，病毒抗原(例如任何能够引发免疫应答的病毒肽、多肽或蛋白质，例如HIV gpl20、HIV nef、RSV F糖蛋白、流感病毒神经氨酸酶、流感病毒血凝素、HTLV tax、单纯疱疹病毒糖蛋白(例如，Gb、Gc、Gd和Ge)和乙肝表面抗原)、微生物抗原(例如任何能够引发免疫应答的微生物肽、多肽、蛋白质、糖、多糖或脂质分子(例如，细菌、真菌、致病原生生物或酵母多肽包括例如LPS和荚膜多糖)、或产生与自身免疫病相关的自身免疫抗体的细胞的抗原。
在一个实施例中，当抗原是ErBB2(也称为ERBB2、CD340或HER2；这些术语可以互换使用)时，抗体或抗原结合片段可以结合一个或多个以下表位：ARHC l(序列号：1)，QNGS(序列号：2)和PPFCVARC PSG(序列号：3)。这些表位分别对应于人HER2多肽序列的位置557-561、570-573和593-603(检索号：NM_004448，版本号：NM_004448.3)。
在另一个实施例中，抗体可以是已知用于治疗或预防病毒或微生物感染(即传染病)的任何抗体。这样的抗体的示例包括但不限于：PRO542(Progenies)，其是一种用于治疗HIV感染的CD4融合抗体；OsTAVIR(Protein Design Labs，Inc.，CA)，其是一种用于治疗乙型肝炎病毒的人抗体；PROTOVIR(Protein Design Labs，Inc.，CA)，其是一种用于治疗巨细胞病毒(CMV)的人源化IgG1抗体；以及抗LPS抗体。
可用于治疗传染病的其他抗体包括但不限于：对抗来自致病菌株抗原的抗体(化脓性链球杆菌(Streptococcus pyogenes)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、奈瑟氏球菌(Neisseriagonorrheae)、脑膜炎双球菌(Neisseria meningitides)、白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheria)、肉毒杆菌(Clostridium botulinum)、产气荚膜芽胞梭菌(Clostridium perfringens)、破伤风芽孢梭菌(Clostridium tetani)、流行性感冒嗜血杆菌(Hemophilus influenza)、克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)、克雷伯氏臭鼻杆菌(Klebsiella ozaenas)、克雷伯氏鼻硬结杆菌(Klebsiella rhinoscleromotis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococc aureus)、霍乱弧菌(Vibrio colerae)、大肠杆菌(Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、胎儿弯曲杆菌(弧菌)(Campylobacter(Vibrio)fetus)、亲水性产气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、小肠大肠炎耶氏杆菌(Yersinia enterocolitica)、鼠疫耶氏杆菌(Yersinia pestis)、假性结核病耶氏杆菌(Yersinia pseudotuberculosis)、痢疾杆菌(Shigella dysenteriae)、副痢疾杆菌(Shigella flexneri)、宋内氏杆菌(Shigella sonnei)、沙门氏杆菌(Salmonellatyphimurium)、梅毒螺旋体(Treponema pallidum)、细弱螺旋体(Treponema pertenue)、斑点病密螺旋体(Treponema carateum)、(Borrelia vincentii)、包柔疏螺旋体(Borreliaburgdorferi)、出血黄疸钩端螺旋体(Leptospira icterohaemorrhagiae)、肺结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、卡氏肺囊虫(Pneumocystis carinii)、土拉文氏杆菌(Francisella tularensis)、牛布氏杆菌(Brucella abortus)、猪布氏杆菌(Brucellasuis)、地中海热布氏杆菌(Brucella melitensis)、霉浆菌属(Mycoplasma spp.)、斑疹伤寒立克次体(Rickettsia prowazeki)、恙虫病立克次体(Rickettsia tsutsugumushi)、披衣菌属(Chlamydia spp.))；致病真菌(粗球孢子菌(Coccidioides immitis)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、白色念珠球菌(Candida albicans)、皮炎芽生菌(Blastomycesdermatitidis)、新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)、荚膜组织胞浆菌(Histoplasmacapsulatum))；原生生物(赤痢变形虫(Entomoeba histolytica)、弓形虫(Toxoplasmagondii)、肠道鞭毛滴虫(Trichomonas tenax)、人毛滴虫(Trichomonashominis)、阴道滴虫(Trichomonas vaginalis)、刚比亚锥虫(Tryanosomagambiense)、德西亚锥虫(Trypanosoma rhodesiense)、克氏锥虫(Trypanosoma cruzi)、黑热病利什曼原虫(Leishmania donovani)、热带利什曼原虫(Leishmania tropica)、巴西利什曼原虫(Leishmania braziliensis)、肺孢子菌肺炎(Pneumocystis pneumonia)、间日疟原虫(Plasmodium vivax)、恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、疟原虫(Plasmodiummalaria))；或蠕虫(蛲虫(Enterobius vermicularis)、鞭虫(Trichuris trichiura)、蛔虫(Ascaris lumbricoides)、旋毛虫(Trichinella spiralis)、粪拟圆虫(Strongyloidesstercoralis)、住血吸虫(Schistosoma japonicum)、曼森氏住血吸虫(Schistosomamansoni)、埃及住血吸虫(Schistosoma haematobium)、及钩虫(hookworms))。
可用于治疗病毒性疾病的其它抗体包括但不限于：对抗致病病毒抗原的抗体，对抗致病病毒抗原的抗体包括作为示例且不限于：痘病毒科(Poxviridae)、疱疹病毒科(Herpesviridae)、单纯疱疹病毒第一型(Herpes Simplex virus 1)、单纯疱疹病毒第二型(Herpes Simplex virus 2)、腺病毒科(Adenoviridae)、乳多瘤病毒科(Papovaviridae)、肠道病毒科(Enteroviridae)、小核醣核酸病毒科(Picornaviridae)、小DNA病毒科(Parvoviridae)、呼肠孤病毒科(Reoviridae)、反转录病毒科(Retroviridae)、流感病毒(influenza viruses)、副流感病毒(parainfluenza viruses)、流行性腮腺炎(mumps)、麻疹(measles)、呼吸道细胞融合病毒(respiratory syncytial virus)、德国麻疹(rubella)、虫媒病毒科(Arboviridae)、杆状病毒科(Rhabdoviridae)、沙粒病毒科(Arenaviridae)、A型肝炎病毒(Hepatitis A virus)、B型肝炎病毒(Hepatitis B virus)、C型肝炎病毒(Hepatitis C virus)、E型肝炎病毒(Hepatitis E virus)、非A型/非B型肝炎病毒(Non A/Non B Hepatitis virus)、鼻病毒(Rhinoviridae)、冠状病毒(Coronaviridae)、轮状病毒(Rotoviridae)、及人类免疫缺陷病毒(HumanImmunodeficiency Virus)。
在替代实施例中，本发明的药物偶联物的抗体还可以是任意已知的用于治疗预防自身免疫性疾病的抗体，所述自身免疫性疾病例如但不限于：Th2-淋巴细胞相关疾病(例如特应性皮炎(atopic dermatitis)、特应性哮喘(atopic asthma)、鼻结膜炎(rhinoconjunctivitis)、过敏性鼻炎(allergic rhinitis)、Omenn's综合征(Omenn'syndrome)、系统性硬化症(systemic sclerosis)、和移植物抗宿主病(graft versus hostdisease))；Th1淋巴细胞相关疾病(例如类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)、多发性硬化(multiple sclerosis)、银屑病(psoriasis)、Sjorgren's综合征(Sjorgren'ssyndrome)、桥本甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis)、突眼性甲状腺肿(Grave'sdisease)、原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis)、韦格纳肉芽肿病(Wegener'sgranulomatosis)和肺结核(tuberculosis))；激活的B淋巴细胞相关疾病(例如系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus)、古德帕斯彻氏综合征(Goodpasture'ssyndrome)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)和I型糖尿病(type I diabetes))；慢性活动性肝炎(Active Chronic Hepatitis)、爱迪生氏病(Addison's Disease)、过敏性肺泡炎(Allergic Alveolitis)、过敏反应(Allergic Reaction)、过敏性鼻炎(AllergicRhinitis)、阿尔波特氏综合征(Alport's Syndrome)、过敏(Anaphlaxis)、强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis)、抗磷脂综合征(Anti-phosholipid Syndrome)、关节炎(Arthritis)、蛔虫(Ascariasis)、曲菌病(Aspergillosis)、特应性过敏(AtopicAllergy)、过敏性鼻炎(Atropic Dermatitis)、萎缩性鼻炎(Atropic Rhinitis)、白塞病(Behcet's Disease)、饲者肺病(Bird-Fancier's Lung)、支气管哮喘(BronchialAsthma)、卡普兰综合征(Caplan's Syndrome)、心肌病(Cardiomyopathy)、腹腔疾病(Celiac Disease)、恰加斯病(Chagas'Disease)、慢性肾小球肾炎(Chronicglomerulonephritis)、柯根氏综合征(Cogan's Syndrome)、冷凝集素病(ColdAgglutinin Disease)、先天性风疹感染(Congenital Rubella Infection)、CREST综合征(CREST Syndrome)、克罗恩病(Crohn's Disease)、冷球蛋白血症(Cryoglobulinemia)、库欣综合征(Cushing's Syndrome)、皮肌炎(Dermatomyositis)、盘状狼疮(Discoid Lupus)、Dresser's综合征(Dresser's Syndrome)、伊顿-兰伯特综合征(Eaton-LambertSyndrome)、埃可病毒感染(Echovirus Infection)、脑脊髓炎(Encephalomyelitis)、内分泌眼病(Endocrine opthalmopathy)、EB病毒感染(Epstein-Barr Virus Infection)、马类动物气喘病(Equine Heaves)、红斑病(Erythematosis)、埃文斯综合征(Evan'sSyndrome)、费尔蒂综合征(Felty's Syndrome)、纤维肌痛(Fibromyalgia)、Fuch睫状体炎(Fuch's Cyclitis)、胃萎缩(Gastric Atrophy)、胃肠道过敏(GastrointestinalAllergy)、巨细胞性动脉炎(Giant Cell Arteritis)、肾小球肾炎(Glomerulonephritis)、肾炎综合征(Goodpasture's Syndrome)、移植物抗宿主病(Graft v.Host Disease)、格雷夫斯病(Graves'Disease)、格林-巴利病(Guillain-Barre Disease)、桥本甲状腺炎(Hashimoto's Thyroiditis)、溶血性贫血(Hemolytic Anemia)、过敏性紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein Purpura)、特发性肾上腺萎缩(Idiopathic Adrenal Atrophy)、特发性肺纤维炎(Idiopathic Pulmonary Fibritis)、IgA肾病(IgA Nephropathy)、炎症性肠病(Inflammatory Bowel Diseases)、胰岛素依赖型糖尿病(Insulin-dependent DiabetesMellitus)、青少年关节炎(Juvenile Arthritis)、青少年糖尿病(I型)(JuvenileDiabetes Mellitus(Type I))、Lambert-Eaton综合征(Lambert-Eaton Syndrome)、椎板炎(Laminitis)、扁平苔藓病(Lichen Planus)、狼疮状肝炎(Lupoid Hepatitis)、狼疮性淋巴细胞减少症(Lupus Lymphopenia)、梅尼埃病(Meniere'sDisease)、混合结缔组织病(MixedConnective Tissue Disease)、多发性硬化症(Multiple Sclerosis)、重症肌无力(Myastheniagravis)、恶性贫血(Pernicious Anemia)、多内分泌腺综合症(PolyglandularSyndromes)、早老性痴呆症(Presenile Dementia)、原发性无丙种球蛋白血症(PrimaryAgammaglobulinemia)、原发性胆汁性肝硬化(Primary Biliary Cirrhosis)、银屑病(Psoriasis)、关节性银屑病(Psoriatic Arthritis)、雷诺氏现象(RaynaudsPhenomenon)、复发性流产(Recurrent Abortion)、赖特综合症(Reiter's Syndrome)、风湿热(Rheumatic Fever)、类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis)、Sampter氏综合征(Sampter's Syndrome)、血吸虫病(Schistosomiasis)、施密特氏综合征(Schmidt'sSyndrome)、硬皮病(Scleroderma)、舒尔曼综合征(Shulman's Syndrome)、Sjorgen氏综合征(Sjorgen's Syndrome)、僵人综合征(Stiff-Man Syndrome)、交感性眼炎(SympatheticOphthahnia)、系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosis)、多发性大动脉炎(Takayasu's Arteritis)、颞动脉炎(Temporal Arteritis)、甲状腺炎(Thyroiditis)、血小板减少症(Thrombocytopenia)、甲状腺毒症(Thyrotoxicosis)、中毒性表皮坏死松解症(Toxic Epidermal Necrolysis)、B型胰岛素抵抗(Type B Insulin Resistance)、I型糖尿病(Type I Diabetes Mellitus)、溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis)、葡萄膜炎(Uveitis)、白癜风(Vitiligo)、Waldenstrom's巨球蛋白血症(Waldenstrom'sMacroglobulemia)和肉芽肿病(Wegener'sgranulomatosis)。
对负责产生自身免疫抗体的细胞抗原具有免疫特异性的抗体可通过本领域技术人员已知的任何方法(例如化学合成或重组表达技术)获得。自身免疫抗体的示例包括但不限于：抗核抗体；抗双链DNA(抗ds DNA)；抗单链DNA(抗ss DNA)，抗心磷脂抗体IgM，IgG；抗磷脂抗体IgM，IgG；抗SM抗体；抗线粒体抗体；甲状腺抗体；微粒体抗体；甲状腺球蛋白抗体；抗SCL-70；抗Jo；抗U1RNP；抗La/SSB；抗SSA；抗SSB；抗perital细胞抗体；抗组蛋白；抗-RNP；C-ANCA；P-ANCA；抗着丝点；抗纤维蛋白和抗GBM抗体。
在另一个实施例中，本发明的药物偶联物的抗体可以是与在活化的淋巴细胞上表达的受体或受体复合物结合的抗体，例如与自身免疫性疾病相关的抗体。受体或受体复合物可包含免疫球蛋白基因超家族成员、TNF受体超家族成员、整联蛋白、白介素、细胞因子受体、趋化因子受体、主要组织相容性蛋白、凝集素或补体控制蛋白。合适的免疫球蛋白超家族成员的非限制性示例是CD2、CD3、CD4、CD5、CD8、CD19、CD22、CD28、CD79、CD90、CD152/CTLA-4、PD-I和ICOS。合适的TNF受体超家族成员的非限制性示例是CD27、CD40、CD95/Fas、CD134/OX40、CD137/4-1BB、TNF-R1、TNFR-2、RANK、TACI、BCMA、护骨素、APO2/TRAEL-R1、TRAIL-R2、TRAIL-R3、TRABL-R4和APO-3。合适的整联蛋白的非限制性示例为CD11a、CD11b、CD11c、CD18、CD29、CD41、CD49a、CD49b、CD49c、CD49d、CD49e、CD49f、CD103和CD104。合适的凝集素的非限制性示例是C-型、S-型和I-型凝集素。
结合分子靶标或目的抗原(例如ErbB2抗原)的抗体是能够以足够亲和力结合该抗原的抗体，使得该抗体可用于靶向表达该抗原的细胞。当抗体是结合ErbB2的抗体时，其通常将优先结合ErbB2而不是其他ErbB受体，并且可以是不与其他蛋白如EGFR、ErbB3或ErbB4显著交叉反应的抗体。在这样的实施例中，通过荧光激活细胞分选(FACS)分析或放射免疫沉淀(RIA)测定，抗体与这些非ErbB2蛋白(例如与内源受体结合的细胞表面)的结合程度将小于10％。有时，抗ErbB2抗体将不会与大鼠neu蛋白显著交叉反应，例如，如Schecter等人，Nature 312:513(1984)和Drebin等人，Nature 312:545-548(1984)描述的那样。
在另一个实施例中，本发明的药物偶联物的抗体或靶标可选自下表中的抗体或靶标。这样的抗体对靶抗原是免疫特异性的，并且可以商业获得或通过本领域已知的任何方法例如重组表达技术生产。
表1：治疗性单克隆抗体
Figure BDA0003532040980000911
Figure BDA0003532040980000921
Figure BDA0003532040980000931
Figure BDA0003532040980000941
Figure BDA0003532040980000951
Figure BDA0003532040980000961
Figure BDA0003532040980000971
Figure BDA0003532040980000981
Figure BDA0003532040980000991
Figure BDA0003532040980001001
Figure BDA0003532040980001011
Figure BDA0003532040980001021
Figure BDA0003532040980001031
Figure BDA0003532040980001041
Figure BDA0003532040980001051
Figure BDA0003532040980001061
Figure BDA0003532040980001071
Figure BDA0003532040980001081
Figure BDA0003532040980001091
Figure BDA0003532040980001101
Figure BDA0003532040980001111
Figure BDA0003532040980001121
Figure BDA0003532040980001131
Figure BDA0003532040980001141
Figure BDA0003532040980001151
除上述之外，本发明的药物抗体偶联物的抗体可以是：Vitaxin，其是用于治疗肉瘤的人源化抗体；Smart IDLO，其是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的人源化抗HLA-DR抗体；Oncolym，其是用于治疗非霍奇金淋巴瘤的放射性标记的鼠抗HLA-DrlO抗体；以及Allomune，其是用于治疗霍奇金病或非霍奇金淋巴瘤的人源化抗CD2 mAb。
本发明的药物偶联物的抗体还可以是已知的用于治疗任意疾病，优选癌症的任意抗体片段。同样，这样的抗体片段对靶抗原是免疫特异性的，并且可以商业获得或通过本领域已知的任何方法如重组表达技术生产。可获得的此类抗体的示例包括下表中的任意抗体。
表2：治疗性单克隆抗体片段
Figure BDA0003532040980001152
Figure BDA0003532040980001161
Figure BDA0003532040980001171
Figure BDA0003532040980001181
Figure BDA0003532040980001191
Fab片段，抗原结合(一条臂)
F(ab’)2片段，抗原结合，包括铰链区(两个臂)
Fab'片段，抗原结合，包括铰链区(一个臂)
scFv单链可变片段
di-scFv二聚体，单链可变片段
(Holliger&Hudson，Nature Biotechnology，2005，9，23)。
在优选的实施例中，本发明药物偶联物中的抗体可结合由ErbB基因编码的受体。所述抗体可特异性结合选自EGFR、HER2、HER3和HER4的ErbB受体。优选地，药物偶联物中的抗体可特异性结合HER2受体的胞外域并抑制过度表达HER2受体的肿瘤细胞的生长。药物偶联物的抗体可以是单克隆抗体，例如鼠单克隆抗体、嵌合抗体或人源化抗体。优选地，人源化抗体可以是huMAb4D5-1、huMAb4D5-2、huMAb4D5-3、huMAb4D5-4、huMAb4D5-5、huMAb4D5-6、huMAb4D5-7或huMAb4D5-8(曲妥单抗)，特别优选曲妥单抗。所述抗体也可以是抗体片段，例如Fab片段。
其它优选的抗体包括：
(i)抗CD4抗体。药物偶联物的抗体可以是单克隆抗体，例如鼠单克隆抗体、嵌合抗体或人源化抗体；
(ii)抗CD5抗体。药物偶联物的抗体可以是单克隆抗体，例如鼠单克隆抗体、嵌合抗体或人源化抗体；
(iii)抗CD20抗体。药物偶联物的抗体可以是单克隆抗体，例如鼠单克隆抗体、嵌合抗体或人源化抗体。优选地，所述人源化抗体是利妥昔单抗(Rituximab)或其抗体片段，例如Fab片段；以及
(iv)抗CD30抗体。药物偶联物的抗体可以是单克隆抗体，例如鼠单克隆抗体、嵌合抗体或人源化抗体。优选地，人源化抗体是本妥昔单抗(Brentuximab vedotin)或其抗体片段。
在本发明的一个实施例中，药物抗体偶联物可展示以下中的一种或多种：(i)增加的细胞毒性(或减少细胞存活)，(ii)增加的细胞抑制活性(细胞停滞)，(iii)增加的与靶抗原或表位的结合亲和力，(iv)增加的偶联物的内化作用，(v)患者副作用减少，和/或(vi)改善毒性。这种增加可能与本领域中已知的结合相同或不同表位或抗原的药物抗体偶联物有关。
药物抗体偶联物的制备方法
本发明的药物抗体偶联物可以根据本领域公知的技术制备。之前已经在例如WO-A-2004/010957、WO-A-2006/060533和WO-A-2007/024536中描述并举例说明了使用不同方法将包含至少一个抗原结合位点抗体的部分(例如抗体)偶联至许多不同药物的方法，这些内容通过引用结合于此。这些方法包括使用衍生药物、毒素或放射性核素的连接子基团，使其能够连接到抗体等部分上。连接到诸如抗体的部分通常通过三种途径之一：在抗体中的二硫基部分还原后，通过半胱氨酸中的游离硫醇基；通过抗体中的赖氨酸中的游离氨基；以及通过抗体中的丝氨酸和/或苏氨酸中的游离羟基。连接方法根据在诸如抗体的部分上的连接位点而变化。还描述了通过尺寸排阻层析(SEC)纯化抗体-药物偶联物[参见，例如，Liu等，Proc.Natl.Acad.Set(USA)，93:8618-8623(1996)，以及Chari等，Cancer Research，52:127-131(1992)]。
如前所述，本发明的药物偶联物的具有Z＝-O-的药物有效载荷是公开于或落入国际专利申请WO2018167270的范围内的类Pederin化合物，其内容通过引用结合于此。这些有效载荷是根据该文献中描述的方法获得的。
用于式为(I)、(Ia)、(II)或(IIa)的药物部分的有用中间体，其中Z是-S-，可由式为(Ib)的化合物获得：
Figure BDA0003532040980001211
其中
R1和R2各自独立地选自OH的保护基、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
R3选自OH的保护基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
Ra选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rb选自取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rc和Rd独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂环基；
通过将式为(Ib)的化合物与磺酰氯或磺酸酐反应得到磺酰酯，并将该磺基酯与硫代羧酸酯，特别是硫代乙酸酯反应得到硫酯，随后将该硫代酯水解得到相应的硫醇。
如前所述，提供了制备本发明药物偶联物的方法，该方法包括将包含至少一个抗原结合位点的部分Ab与式为(I)或(Ia)的药物D或式为(II)-H或(IIa)-H的药物D偶联，Ab和D如本文所定义。
制备本发明的药物偶联物的方法的一个示例包括制备本发明的如下式(G)、(G’)或(G”)的药物抗体偶联物：
Figure BDA0003532040980001221
所述方法包括以下步骤：
(i)或者：
(a)使如上定义的式为(Ib)的化合物与式为X2-C(＝O)-X1的化合物反应，其中X1和X2是离去基团，得到式为(B)的化合物：
Figure BDA0003532040980001231
并且-C(＝O)X1部分的连接点是式为(Ib)的化合物的游离伯OH基团，或者
(b)使如上定义的式为(Ib)的化合物与4-硝基-苯基氯甲酸酯反应，得到式为(J)的化合物：
Figure BDA0003532040980001232
其中(4-硝基苯基)-O-CO-基团的连接点与上述(a)中的X1(CO)部分的连接点相同；或者
(c)使如上定义的式为(Ib)的化合物与式为O＝C＝N-(CH2)1-6NHProtNH的异氰酸酯反应，其中ProtNH是适合于在碱性条件下脱保护的氨基的保护基团，得到下式化合物：
Figure BDA0003532040980001233
(ii)或者
(a)使步骤(i)(a)或(i)(b)中制备的式为(B)或(J)的化合物与式为NH2-(CH2)1- 6NH2的氨基化合物反应，得到式为(C)的化合物：
Figure BDA0003532040980001234
或者
(b)脱保护在步骤(i)(c)中获得的下式的化合物
Figure BDA0003532040980001241
，得到式为(C)的化合物。
(iii)使式为(C)的化合物与式为(D’)、(E)或E’的化合物反应：
Figure BDA0003532040980001242
其中R22和R23如上文在AA基团的定义中所定义；
分别得到式为(F)、(F’)或(F”)的化合物：
Figure BDA0003532040980001243
Figure BDA0003532040980001251
其中R1、R2和R3如上文对式为(Ib)的化合物所定义，且R22和R23如上文在AA基团的定义中所定义。
(iv)如果在式为(F)、(F’)或(F”)的化合物中存在OH的保护基团，则除去这些保护基团得到式为(F)、(F’)或(F”)的化合物，其中R1、R2和R3如上对于式为(II)的化合物所定义。
(v)部分还原待偶联的抗体中的一个或多个二硫键，得到具有游离硫醇基的还原的抗体Ab-SH：
Figure BDA0003532040980001252
以及
(vi)使具有游离硫醇基的部分还原的抗体Ab-SH与步骤(iv)中制备的式为(F)、(F’)或(F”)的化合物反应，分别得到所需的式为(G)、(G’)或(G”)的药物抗体偶联物：
Figure BDA0003532040980001253
Figure BDA0003532040980001261
在该方法的另一个优选实施例中，抗体选自本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，或其是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，最优选其为曲妥珠单抗或抗原结合片段或其免疫活性部分。此外，这种单克隆抗体的部分还原是用三[2-羧乙基]膦盐酸盐(TCEP)进行的。
制备本发明的药物偶联物的方法的另一个示例包括制备本发明的如下式(W)、(W’)或(W”)的药物抗体偶联物：
Figure BDA0003532040980001262
Figure BDA0003532040980001271
或其盐，所述方法包括以下步骤：
(i)将抗体与2-亚氨基硫烷盐酸盐(Traut's试剂)反应，得到硫醇活化的抗体：
Figure BDA0003532040980001272
(ii)使硫醇活化的抗体与式为(F)、(F’)或(F”)的化合物反应，分别得到所需的式为(W)、(W’)或(W”)的药物抗体偶联物。
Figure BDA0003532040980001273
Figure BDA0003532040980001281
或其盐，其中R1、R2和R3如上文在式为(II)中所定义，且R22和R23如上文在AA基团的定义中所定义。
在该方法的另一个优选实施例中，抗体选自本妥昔单抗(Brentuximab)、吉妥珠单抗(Gemtuzumab)、Inozutumab、罗武匹妥珠(Rovalpituzumab)、抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，或其是抗HER2抗体(例如曲妥珠单抗(Trastuzumab))或其抗原结合片段或其免疫活性部分，最优选其为曲妥珠单抗或抗原结合片段或其免疫活性部分。
本发明的药物抗体偶联物的制备方法的另一个示例涉及如下式(O)或(P)的药物抗体偶联物的制备
Figure BDA0003532040980001282
所述方法包括以下步骤：
(i)或者
(a)将式为(C)的化合物与式为Me-S-S-(CH2)1-3-CO2H化合物反应，得到式为(K)的化合物：
Figure BDA0003532040980001291
或者
(b)使化合物(J)与式为NH2-(CH2)1-3SProtSH的化合物反应，并从偶联的化合物中除去ProtSH基团，得到式为(L)的化合物：
Figure BDA0003532040980001292
(ii)使步骤(i)中产生的(K)或(L)与二硫苏糖醇在二硫化物还原条件下反应，分别得到式为(M)和(N)的化合物：
Figure BDA0003532040980001293
(iii)使待偶联的抗体与琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯反应以利用琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羰基在一个或多个赖氨酸基团处衍生所述抗体：
Figure BDA0003532040980001294
(iv)使步骤(iii)中产生的衍生抗体与步骤(ii)中产生的(M)或(N)反应，得到所需的式为(O)或(P)的药物抗体偶联物：
Figure BDA0003532040980001301
式为X2-C(＝O)-X1的化合物优选为1，1′-羰基二咪唑。同样地，与式为(B)的化合物反应的氨基化合物优选为NH2-(CH2)2-4-NH2，更优选为NH2-(CH2)3-NH2。
在本发明的一个优选实施例中，与式为(C)的化合物反应得到式为(K)的化合物的化合物是3-(甲基二硫基)丙酸。
在另一个优选的实施例中，与式为(J)的化合物反应得到式为(L)的化合物的化合物NH2-(CH2)1-3SProtSH是NH2-(CH2)3SProtSH。
其中在包含至少一个抗原结合位点的部分(如单克隆抗体)中的二硫基部分还原后，通过半胱氨酸中的游离硫醇基连接到药物连接子部分上，部分还原通常通过在二硫键部分还原之前首先稀释至合适的浓度并通过加入合适的还原剂如三[2-羧乙基]膦盐酸盐(TCEP)或二硫苏糖醇(DTT)来缓冲溶液来进行。通过选择适当比例的待还原部分如单克隆抗体和还原剂、反应条件和还原时间，可以获得所需的游离硫醇与部分的比例，例如每个单克隆抗体有4个游离硫醇基团。
然后使如上所述制备的部分还原的部分(如具有游离硫醇基的部分还原的单克隆抗体)与式为D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1的本发明的药物连接子化合物反应(其中该化合物中的基团L1是与硫醇基自由反应的马来酰亚胺基)。所得的药物抗体偶联物通过本领域已知的任何合适的方法纯化，例如通过尺寸排阻层析(SEC)[参见，例如，Liu等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，93:8618-8623(1996)，和Chari等，Cancer Research，52:127-131(1992)]。
在本发明的一个优选实施例中，部分还原的单克隆抗体是抗HER2抗体(如曲妥珠单抗)或其抗原结合片段或其免疫活性部分，优选曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
在本发明的另一实施例中，包含至少一个抗原结合位点的部分(如单克隆抗体)中的赖氨酸可首先与琥珀酰亚胺-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯反应。抗体上的游离胺基可与N-羟基琥珀酰亚胺酯反应，得到马来酰亚胺活化的抗体：
Figure BDA0003532040980001311
然后可以使马来酰亚胺活化的抗体与具有活性硫醇部分的式为D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物反应。
在本发明的另一实施例中，包含至少一个抗原结合位点的部分(如单克隆抗体)中的赖氨酸可首先与2-亚氨基硫烷盐酸盐(Traut's试剂)反应。抗体上的游离胺基团可与亚氨基硫内酯反应以产生硫醇活化的抗体。
Figure BDA0003532040980001312
在抗体中的二硫基部分还原后，通过结合半胱氨酸中的游离硫醇基制备本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物抗体偶联物的方法的一个具体示例显示于图1中。
在抗体与Traut's试剂反应后，通过结合与赖氨酸中的游离氨基制备本发明的式为[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物抗体偶联物的方法的另一个具体示例显示于图2中。
包含本发明的药物抗体偶联物的组合物及其用途
还提供了包含根据本发明的药物偶联物和药学上可接受的载体的药物组合物。本发明具有通式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab的药物偶联物的给药形式的示例包括但不限于口服、局部、胃肠外、舌下、直肠、阴道、眼部和鼻内给药。胃肠外给药包括皮下注射、静脉内、肌肉内、胸骨内注射或输注技术。优选地，所述组合物肠胃外给药。本发明的药物组合物可以配制成使得在将组合物施用给动物(优选人)时本发明的药物偶联物是生物可利用的。组合物可以采取一个或多个剂量单位的形式，其中例如，片剂可以是单个剂量单位，并且气雾剂形式的本发明的药物抗体偶联物的容器可以容纳多个剂量单位。
药学上可接受的载体或赋形剂可以是微粒，使得组合物例如为片剂或粉末形式。载体可以是液体，组合物例如是口服糖浆或可注射液体。另外，载体可以是气态的，以便提供可用于例如吸入给药的气雾剂组合物。术语“载体”是指稀释剂、佐剂或赋形剂，用其施用本发明的药物抗体偶联物。这样的药物载体可以是液体，例如水和油，包括石油、动物油、植物油或合成来源的那些油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。载体可以是盐水、阿拉伯胶、明胶、淀粉糊、滑石、角蛋白、胶态二氧化硅、尿素等。此外，还可使用助剂、稳定剂、增稠剂、润滑剂和着色剂。在一个实施例中，当给予动物时，本发明的药物抗体偶联物或组合物和药学上可接受的载体是无菌的。当静脉内施用本发明的药物抗体偶联物时，水是优选的载体。盐溶液和葡萄糖和甘油溶液也可用作液体载体，特别是用于可注射溶液。合适的药物载体还包括赋形剂，如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶、甘油、丙二醇、水、乙醇等。如果需要，本发明的组合物还可以含有少量的润湿剂或乳化剂，或pH缓冲剂。
当打算用于口服给药时，组合物优选为固体或液体形式，其中半固体、半液体、悬浮液和凝胶形式包括在本文的固体或液体的形式中。
对于用于口服给药的固体组合物，该组合物可以配制成粉末、颗粒、压缩片剂、丸剂、胶囊剂、口香糖、薄片等形式。这种固体组合物通常含有一种或多种惰性稀释剂。另外，可以呈现以下中的一个或多个：粘合剂，如羧甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素或明胶；赋形剂，如淀粉、乳糖或糊精；崩解剂，如海藻酸、海藻酸钠、玉米淀粉等；润滑剂，如硬脂酸镁；助流剂，如胶体二氧化硅；甜味剂，如蔗糖或糖精；调味剂，如薄荷、水杨酸甲酯或橙色调味剂；以及着色剂。
当该组合物为胶囊形式(例如明胶胶囊)时，除了上述类型的材料外，它还可以含有液体载体如聚乙二醇、环糊精或脂肪油。
该组合物可以是液体形式，例如酏剂、糖浆、溶液、乳液或悬浮液。该液体可用于口服给药或通过注射递送。当打算用于口服给药时，组合物可包含甜味剂、防腐剂、染料/着色剂和增味剂中的一种或多种。在通过注射给药的组合物中，还可以包括表面活性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、缓冲剂、稳定剂和等渗剂(isotonic agent)中的一种或多种。
优选的给药途径是胃肠外给药，包括但不限于皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外、鼻内、脑内、心室内、脊椎内、阴道内或经皮给药。优选的给药方式由医生决定，并部分取决于病情的部位(如癌症部位)。在更优选的实施例中，静脉内施用本发明的药物抗体偶联物。
本发明的液体组合物，无论它们是溶液、悬浮液或其它类似形式，还可包括以下一种或多种：无菌稀释液，如注射用水，盐溶液，优选生理盐水，林格氏液，等渗氯化钠，固定油，如合成单甘油酯或二甘油酯，聚乙二醇，甘油或其他溶剂；抗菌剂，如苄醇或对羟基苯甲酸甲酯；以及用于调节张力的试剂，如氯化钠或右旋糖。肠胃外组合物可以封装在安瓿、一次性注射器或由玻璃、塑料或其它材料制成的多剂量小瓶中。生理盐水是优选的佐剂。
在治疗特定疾病或病症中有效的本发明的药物偶联物的量将取决于疾病或病症的性质，并且可以通过标准临床技术确定。此外，可以可选地使用体外或体内测量以帮助确定最佳剂量范围。在组合物中使用的精确剂量还将取决于给药途径和疾病或病症的严重性，并且应当根据医生的判断和每个患者的情况来决定。
所述组合物包含有效量的本发明的药物偶联物，使得将获得合适的剂量。化合物的正确剂量将根据特定的配方、施用方式、其特定的部位、宿主和正在治疗的疾病而变化，例如癌症，如果是癌症的话，是什么类型的肿瘤。应考虑其他因素，如年龄、体重、性别、饮食、给药时间、排泄率、宿主状况、药物组合、反应敏感性和疾病严重程度。给药可在最大耐受剂量内连续或定期进行。
本发明的药物偶联物或组合物可以通过任何方便的途径给药，例如通过输注或团注，通过上皮层或皮肤黏膜层吸收。
在特定的实施例中，可能需要将一种或多种本发明的药物偶联物或组合物局部施用于需要治疗的区域。在一个实施例中，可以通过在癌症、肿瘤或癌组织或癌前组织的部位(或形成部位)直接注射来施用。在另一个实施例中，可以通过在显示自身免疫疾病的部位(或形成部位)处直接注射来施用。
也可以使用肺给药，例如，通过使用吸入器或喷雾器，和具有气雾化剂的配方，或通过在氟碳化合物或合成肺表面活性剂中灌注。在某些实施例中，本发明的药物抗体偶联物或组合物可以与传统的粘合剂和载体如甘油三酯一起配制成栓剂。
本发明的组合物可以采取溶液、悬浮液、乳剂、片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂、含有液体的胶囊剂、粉剂、缓释制剂、栓剂、乳剂、气雾剂、喷雾剂、混悬剂或任何其它适合使用的形式。合适的药物载体的其它示例在E.W.Martin的"Remington's PharmaceuticalSciences"中有描述。
药物组合物可以使用制药领域中公知的方法制备。例如，可以通过将本发明的药物偶联物与水组合以形成溶液来制备旨在通过注射施用的组合物。可以加入表面活性剂以促进均匀溶液或悬浮液的形成。
我们已经发现，本发明的药物偶联物和组合物在癌症的治疗中特别有效。
因此，如前所述，本发明提供了治疗需要治疗的患者，特别是受癌症影响的人的方法，该方法包括向受影响的个体施用治疗有效量的本发明的药物偶联物或组合物。本发明提供了用于治疗癌症的根据本发明的药物偶联物，所述癌症优选：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤，其中所述癌症优选为HER2阳性癌症，其中HER2阳性癌症包括包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性食道癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌，更优选HER2阳性乳腺癌、HER2阳性卵巢癌和HER2阳性胃癌，最优选HER2阳性乳腺癌。
本发明的药物偶联物和组合物可用于抑制肿瘤细胞或癌细胞的增殖，或用于治疗动物的癌症。因此，本发明的药物偶联物和组合物可以在各种环境中用于治疗动物癌症。本发明的包含含有至少一个抗原结合位点的药物-连接子-部分的偶联物可用于将药物或药物单元递送至肿瘤细胞或癌细胞。在不受理论束缚的情况下，在一个实施例中，本发明的药物偶联物的包含至少一个抗原结合位点的部分与癌细胞或肿瘤细胞相关抗原结合或关联，并且本发明的药物偶联物可以通过受体介导的内吞作用吸收在肿瘤细胞或癌细胞内。抗原可被连接到肿瘤细胞或癌细胞，或者可以是与肿瘤细胞或癌细胞相关的细胞外基质蛋白。一旦进入细胞内，连接子单元内的一个或多个特定序列被一个或多个肿瘤细胞或癌细胞相关的蛋白酶或水解酶水解切割，导致药物或药物-连接子化合物的释放。然后释放的药物或药物-连接子化合物在细胞中自由迁移并诱导细胞毒活性。在可选的实施例中，在肿瘤细胞或癌细胞外从本发明的药物偶联物切割药物或药物单元，并且药物或药物-连接子化合物随后进入细胞。
在一个实施例中，包含至少一个抗原结合位点的部分与肿瘤细胞或癌细胞结合。在另一个实施例中，包含至少一个抗原结合位点的部分与位于肿瘤细胞或癌细胞表面上的肿瘤细胞或癌细胞抗原结合。在又一个实施例中，包含至少一个抗原结合位点的部分结合肿瘤细胞或癌细胞抗原，所述肿瘤细胞或癌细胞抗原是与肿瘤细胞或癌细胞相关的细胞外基质蛋白。
针对特定肿瘤细胞或癌细胞的包含至少一个抗原结合位点的部分的特异性对于确定被最有效治疗的那些肿瘤或癌症是重要的。例如，具有曲妥珠单抗单元的本发明的药物偶联物可用于治疗抗原阳性癌，包括白血病、肺癌、结肠癌、淋巴瘤(例如，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤)，实体瘤，如肉瘤和癌，多发性骨髓瘤，肾癌和黑色素瘤。癌症可优选为肺癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤或卵巢癌。例如，具有利妥昔单抗单元的本发明的药物偶联物可用于治疗表达CD-20的肿瘤，例如血液癌症，包括白血病和淋巴瘤。例如，具有抗CD4抗体单元的本发明的药物偶联物可用于治疗表达CD-4的肿瘤，例如血液癌，包括淋巴瘤。例如，具有抗-CD5抗体单元的本发明的药物偶联物可用于治疗表达CD-5的肿瘤，例如血液癌症，包括白血病和淋巴瘤。
可以用本发明的药物偶联物治疗的其它特定类型的癌症包括但不限于：血源性癌症，包括所有形式的白血病；淋巴瘤，例如霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤。
特别地，本发明的药物偶联物和组合物在治疗乳腺癌中显示出优异的活性。
本发明的药物偶联物和组合物结合特异性肿瘤或癌症靶向，从而降低了这些偶联物的一般毒性。连接子单元稳定血液中的药物抗体偶联物，但可被细胞内肿瘤特异性蛋白酶和水解酶裂解，释放出药物。
本发明的药物偶联物和组合物可以施用于也经历了作为癌症治疗的手术的动物。在本发明的一个实施例中，附加的治疗方法是放射疗法。
在本发明的一个具体实施例中，本发明的药物偶联物或组合物可以与放射治疗一起施用。放射治疗可以在用本发明的药物偶联物或组合物治疗的同时、之前或之后进行。在一个实施例中，本发明的药物偶联物或组合物与放射治疗同时施用。在另一特定实施例中，在施用本发明的药物偶联物或组合物之前或之后施用放射治疗，优选在施用本发明的药物抗体偶联物或组合物之前或之后至少一小时、5小时、12小时、一天、一周、一个月、更优选几个月(例如至多三个月)施用放射治疗。
关于放射，根据要治疗的癌症的类型，可以使用任何放射治疗方案。例如，但不作为限制，可以施用x射线放射；特别地，高能量兆伏电压(大于1MeV能量的放射)可以用于深部肿瘤，并且电子束和正电压x射线放射可以用于皮肤癌。也可以施用发射γ射线的放射性同位素，例如镭、钴和其它元素的放射性同位素。
在本发明中，提供了试剂盒，其包含治疗有效量的根据本发明的药物偶联物和药学上可接受的载体。在一个实施例中，提供了试剂盒，其包含根据本发明的组合物和可选地用于治疗癌症的说明书，所述癌症优选选自：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤，其中所述癌症优选为HER2阳性癌症，其中HER2阳性癌症包括包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性食道癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌，更优选HER2阳性乳腺癌、HER2阳性卵巢癌和HER2阳性胃癌，最优选HER2阳性乳腺癌。
在一个实施例中，根据该方面的试剂盒用于治疗癌症，优选地癌症选自：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤，其中所述癌症优选为HER2阳性癌症，其中HER2阳性癌症包括包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性食道癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌，更优选HER2阳性乳腺癌、HER2阳性卵巢癌和HER2阳性胃癌，最优选HER2阳性乳腺癌。最优选的试剂盒用于治疗HER2阳性乳腺癌。
附图说明
在附图中以示例的方式示意性地示出了本发明，其中：
图1是根据本发明的一个方法的示意图，其中通过游离硫醇基与抗体偶联；
图2是本发明的一个方法的示意图，其中通过游离氨基与抗体偶联。
图3是用安慰剂(placebo)、赫赛汀(Herceptin)、卡迪拉(Kadcyla)(均为30mg/kg)和ADC3(4mg/kg)治疗的小鼠中的BT-474肿瘤的肿瘤体积评价。
示例
通过以下非限制性示例进一步说明本发明。在示例中，使用以下缩写：
CDI，1，1'-羰基二咪唑
DIPEA，二异丙基乙胺
Hex，己烷
EtOAc，乙酸乙酯
DCM，二氯甲烷
NMP，N-甲基-2-吡咯烷酮
DMF，二甲基甲酰胺
EDC，N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐
EDTA，乙二胺四乙酸
MeOH，甲醇
DTT，二硫苏糖醇
Py，吡啶
THF，四氢呋喃
TCEP，三[2-羧乙基]膦盐酸盐
MC，6-马来酰亚胺基己酰基
Fmoc，9-芴甲氧羰基
Cit，瓜氨酸
Val，缬氨酸
DMSO，二甲亚砜
Trt，三苯甲基
HOBt，1-羟基苯并三唑
DIPCDI，N，N’-二异丙基碳二亚胺
TFA，三氟乙酸
PABOH，4-氨基苯甲醇
bis-PNP，双(4-硝基苯基)碳酸酯
NAC，N-乙酰半胱氨酸
SEC，尺寸排阻层析
HPLC，高效液相色谱
ADC，抗体药物偶联物
ATCC，美国典型培养物保藏中心
DMEM，杜尔贝科改良伊格尔培养基
RPMI，罗斯韦尔公园纪念研究所
ITS，胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠培养基添加剂
FCS，胎儿小牛血清
SRB，磺酰罗丹明B
PBS，磷酸盐缓冲液
DR，剂量反应
UV，紫外线
SMCC，琥珀酰亚胺-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯
LAR，连接子与抗体的比率
合成中间体
按照WO2018167270中描述的方法获得化合物1和2。
按照Org.Biomol.Chem.2009，7，3400-3406中描述的方法得到6-马来酰亚胺基己酸N-羟基琥珀酰亚胺酯。
中间体7
a)
Figure BDA0003532040980001401
在23℃下，向1(19.2mg，0.039mmol)和咪唑(10eq，0.39mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中加入氯三甲基硅烷(6eq.，0.234mmol)。在23℃下搅拌1h后，将反应混合物真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(SiO2，Hex：EtOAc，90:10至70:30)中纯化，得到纯的无色油状物3(22mg，80％产率)。
1H NMR(400MHz，(CD3)2CO):δ7.45(d，J＝10.0Hz，1H)，5.33(dd，J＝10.0，6.8Hz，1H)，4.77(t，J＝2.2hz，1H)，4.61(t，J＝2.2hz，1H)，4.37(d，J＝0.7Hz，1H)，3.90-3.80(m，2H)，3.74-3.69(m，2H)，3.53(dd，J＝11.3，5.8Hz，1H)，3.36(s，3H)，3.35-3.31(m，2H)，3.32(s，3H)，3.29(s，3H)，2.59(d，J＝14.7Hz，1H)，2.51(d，J＝14.7Hz，1H)，2.23(qd，J＝7.0，2.5Hz，1H)，1.97-1.92(m，1H)，1.82-1.77(m，1H)，1.71-1.53(m，2H)，1.20(d，J＝6.6Hz，3H)，1.03(d，J＝7.0，3H)，0.92(s，3H)，0.85(s，3H)，0.24(s，9H)，0.14(s，9H)，0.11(s，9H)。
13C NMR(100MHz，(CD3)2CO):δ170.8，147.7，108.7，99.2，78.9(x3)，78.3，76.0，72.5，69.0，63.5，55.9，55.0，49.6，41.3，38.2，36.3，30.5，29.7，23.7，19.0，17.4，11.4，-0.2，-0.6，-0.9。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:728.4108[M+Na]+(calcd.for C33H67NO9Si3Na:728.4021)。
b)
Figure BDA0003532040980001411
在23℃下，向3(20mg，0.028mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液中添加SiO2(2.5g)。在23℃下搅拌2.5小时后，再次添加额外量的SiO2(1.5g)，并搅拌3小时。过滤固体并用EtOAc(100mL)洗涤。将滤液减压浓缩，然后在快速色谱系统(SiO2，Hex：EtOAc，80:20-60:40)中纯化，得到纯的无色油状物4(15mg，85％产率)。
1H NMR(400MHz，(CD3)2CO):δ7.50(d，J＝10.0Hz，1H)，5.41-5.33(m，1H)，4.80-4.74(m，1H)，4.61-4.60(m，1H)，4.45(s，1H)，3.90-3.80(m，2H)，3.73(dd，J＝10.1，4.2hz，1H)，3.67-3.56(m，1H)，3.43-3.27(m，4H)，3.37(m，3H)，3.32(s，3H)，3.29(s，3H)，2.58-2.48(m，2H)，2.27-2.17(m，1H)，2.01-1.92(m，1H)，1.81-1.61(m，2H)，1.51(ddd，J＝14.2，9.6，1.8Hz，1H)，1.20(d，J＝6.6Hz，3H)，1.02(d，J＝7.0Hz，3H)，0.91(s，3H)，0.84(s，3H)，0.24(s，9H)，0.14(s，9H)。
13C NMR(100MHz，(CD3)2CO):δ171.4，147.7，108.6，99.2，79.6，78.8，78.1，75.6，72.3，69.1，63.5，59.6，55.7，55.0，49.5，41.3，38.3，36.2，30.4，23.3，19.9，17.4，13.6，11.3，-0.3，-0.6。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:656.3718[M+Na]+(calcd.for C30H59NO9Si2Na:656.3626)。
C)
Figure BDA0003532040980001412
在23℃下，向4(18mg，0.028mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中添加1，1"-羰基二咪唑(6eq，0.168mmol)。在23℃下搅拌过夜后，将反应混合物真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(SiO2，Hex：EtOAc，80:20至50:50)中纯化，得到纯的无色油状物5(17mg，85％产率)。
1H NMR(400MHz,(CD3)2CO):δ8.14(s,1H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝10.0Hz,1H),7.05(s,1H),5.35(dd,J＝9.9,6.8Hz,1H),4.74(d,J＝2.4Hz,1H),4.66(dd,J＝11.8,2.4Hz,1H),4.59-4.57(m,1H),4.37(ddd,J＝11.8,5.9,1.3Hz,1H),4.28(s,1H),3.90(q,J＝5.4Hz,1H),3.86-3.78(m,1H),3.76(dd,J＝9.7,4.1Hz,1H),3.64(td,J＝6.4,2.9Hz,1H),3.55-3.48(m,1H),3.36(s,6H),3.30(s,3H),2.45(d,J＝14.5Hz,1H),2.33(d,J＝14.7Hz,1H),2.19(dd,J＝10.1,5.0Hz,1H),2.02-1.88(m,2H),1.79-1.60(m,2H),1.18(d,J＝6.5,3H),1.05-0.93(m,6H),0.88(d,J＝1.2hz,3H),0.23(s,9H),0.14(s,9H)。
13C NMR(100MHz,(CD3)2CO):δ170.9,148.6,147.6,136.8,130.5,117.1,108.7,99.1,79.0,78.0,76.2 75.5,72.2,69.1,68.2,59.6,56.1,54.9,49.4,41.3,38.2,35.8,30.3,29.7,23.4,17.3,13.6,11.4,-0.4,-0.6。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:750.3975[M+Na]+(calcd.for C34H61N3O10Si2Na:750.3793)。
d)
Figure BDA0003532040980001421
在23℃下，向5(17mg，0.023mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液中添加丙1，3二胺(16.6eq，32μL)。将反应混合物在23℃下搅拌过夜并真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(Si-NH2，CH2Cl2：CH3OH，100:0至90:10)中纯化，得到纯的无色油状物6(16mg，94％产率)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):δ5.20(d,J＝4.4Hz,1H),4.84-4.77(m,1H),4.65-4.62(m,1H),4.35(s,1H),4.31-4.21(m,1H),4.04(dd,J＝12.0,5.1Hz,1H),3.96-3.92(m,1H),3.84(qd,J＝6.5,2.5Hz,1H),3.71(dd,J＝8.2,3.9Hz,1H),3.55-3.48(m,2H),3.39(d,J＝0.7Hz,3H),3.35(s,3H),3.29(s,3H),3.17(t,J＝6.7Hz,2H),2.76(t,J＝7.1Hz,2H),2.61(d,J＝14.6Hz,1H),2.36(d,J＝14.6Hz,1H),2.25-2.13(m,1H),2.06-2.03(m,1H),2.00-1.86(m,2H),1.73-1.55(m,3H),1.16(d,J＝6.6Hz,3H),0.98(d,J＝7.0Hz,3H),0.94(s,3H),0.85(s,3H),0.20(s,9H),0.13(s,9H)。
13C NMR(100MHz,CD3OD):δ172.4,157.8,147.1,108.6,99.7,81.7,77.2,76.3,75.7,72.8,70.8,69.5,64.1,55.7,55.2,48.6,41.4,37.7,37.6,37.4,34.3,30.8,30.0,29.1,23.9,16.9,15.6,10.9,-1.1,-1.2。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:734.4526[M+H]+(calcd.for C34H67N3O10Si2:733.4365)。
e)
Figure BDA0003532040980001431
在23℃下，向6(16mg，0.022mmol)的MeOH(4mL)溶液中加入2.4mL 0.033M的碳酸钾甲醇溶液(3.65eq，0.08mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌过夜并真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(Si-NH2，CH2Cl2：CH3OH，100:0至80:20)中纯化，得到纯的无色油状物7(12.8mg，99％产率)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):δ5.49(d,J＝1.0Hz,1H),5.30(d,J＝6.7Hz,1H),4.83-4.79(m,1H),4.67-4.63(m,1H),4.28(d,J＝0.8Hz,1H),4.20(dd,J＝11.8,3.0Hz,1H),4.03(dd,J＝11.8,5.1Hz,1H),3.94-3.83(m,2H),3.61(dd,J＝10.5,4.6Hz,1H),3.57-3.51(m,1H),3.39(s,3H),3.33(s,3H),3.28(d,J＝0.8Hz,3H),3.17(t,J＝6.7Hz,2H),2.70(t,J＝7.0Hz,2H),2.47(d,J＝14.3Hz,1H),2.35(d,J＝14.3Hz,1H),2.27-2.13(m,1H),2.04-1.94(m,1H),1.78-1.60(m,5H),1.18(dd,J＝6.6,0.8Hz,3H),0.98(dd,J＝7.0,0.8Hz,3H),0.93(s,3H),0.86(s,3H)。
13C NMR(100MHz,CD3OD):δ172.8,157.8,146.8,108.8,99.8,80.3,77.0,75.7,72.7,71.8,71.1,69.3,64.4,55.7,55.3,53.4,41.5,38.0,37.5,33.5,31.7,29.9,29.0,22.5,16.7,13.0,12.8,11.1。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:590.3687[M+H]+(calcd.For C28H51N3O10:589.3574)。
中间体12
a)
Figure BDA0003532040980001441
在23℃下向2(26mg，0.055mmol)和咪唑(13eq，0.715mmol)的CH2Cl2(3mL)溶液中加入氯三甲基硅烷(8eq，0.44mmol)。在23℃下搅拌1小时后，将反应混合物真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(SiO2，Hex：EtOAc，90:10至70:30)中纯化，得到纯的无色油状物8(26mg，60％产率)。
1H NMR(400MHz,(CD3)2CO):7.46(d,J＝9.9Hz,1H),5.21(dd,J＝9.9,4.4Hz,1H),4.78-4.76(m,1H),4.61-4.59(m,1H),4.35(d,J＝0.6Hz,1H),4.01-3.92(m,2H),3.88-3.82(m,1H),3.72(dd,J＝7.3,3.6Hz,1H),3.68-3.61(m,1H),3.56-3.45(m,2H),3.35(s,3H),3.31(s,3H),2.62-2.49(m,2H),2.22(qd,J＝7.0,2.6Hz,1H),2.10-2.02(m,1H),1.91(ddd,J＝13.5,7.0,3.7Hz,1H),1.67(ddd,J＝14.1,9.9,2.7Hz,1H),1.59-1.47(m,1H),1.20(dd,J＝6.6,0.7Hz,3H),1.02(dd,J＝7.0,0.7Hz,3H),0.97(s,3H),0.85(s,3H),0.23(s,9H),0.13(s,9H),0.12(s,9H),0.11(s,9H).
13C NMR(100MHz,(CD3)2CO):170.7,147.7,108.6,99.3,80.3,77.8,76.6,72.9,70.5,69.1,65.8,55.0,49.4,41.3,37.5,35.9,33.2,30.9,24.9,17.4,11.3,-0.2,-0.3,-0.6,-0.9。
b)
Figure BDA0003532040980001451
在23℃下向8(40mg，0.052mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液中添加SiO2(2.5g)。在23℃下搅拌2.5小时后，再次添加额外量的SiO2(1.5g)，并搅拌3小时。过滤固体并用EtOAc(100mL)洗涤。将滤液减压浓缩，然后在快速色谱系统(SiO2，Hex：EtOAc，80:20-60:40)中纯化，得到纯的无色油状物9(16mg，44％产率)。
1H NMR(400MHz,(CD3)2CO):7.52(d,J＝9.9Hz,1H),5.26(dd,J＝9.9,5.4Hz,1H),4.76-4.78(m,1H),4.59-4.61(m,1H),4.39(s,1H),4.01-3.90(m,2H),3.88-3.82(m,1H),3.71(dd,J＝8.1,3.8Hz,1H),3.63-3.49(m,2H),3.39-3.28(m,2H),3.36(s,3H),3.31(s,3H),2.62-2.54(m,2H),2.25-2.19(m,1H),1.97-1.91(m,2H),1.69-1.50(m,2H),1.20(d,J＝6.6Hz,3H),1.01(d,J＝7.0Hz,3H),0.96(s,3H),0.85(s,3H),0.23(s,9H),0.14(s,9H),0.11(s,9H)。
ESI-MS m/z:714.4(M+Na)+。
C)
Figure BDA0003532040980001461
在23℃下，向9(16mg，0.023mmol)的CH2Cl2(2mL)溶液中添加1，1'-羰基二咪唑(6eq，0.138mmol)。在23℃下搅拌过夜后，将反应混合物真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(SiO2，Hex：EtOAc，80:20至50:50)中纯化，得到纯的无色油状物10(12.4mg，68％产率)。
1H NMR(500MHz,(CD3)2CO):8.14(d,J＝1.0Hz,1H),7.53(t,J＝1.4Hz,1H),7.48(d,J＝9.8Hz,1H),7.06(dd,J＝1.6,0.8Hz,1H),5.27(dd,J＝9.8,4.8Hz,1H),4.76(m,1H),4.61-4.53(m,2H),4.39(dd,J＝11.1,6.6Hz,1H),4.31(s,1H),4.29(m,1H),4.02(dt,J＝5.6,3.1Hz,1H),3.84(qd,J＝6.6,2.6Hz,1H),3.76(dd,J＝7.8,3.6Hz,1H),3.64(dd,J＝11.5,2.3Hz,1H),3.36(s,3H),3.31(s,3H),2.46-2.43(m,2H),2.25-2.17(m,2H),2.00-1.95(m,1H),1.80-1.75(m,1H),1.6-1.55(m,1H),1.19(d,J＝6.6Hz,3H),1.02(s,3H),0.98(d,J＝7.0Hz,3H),0.89(s,3H),0.23(s,9H),0.15(s,9H),0.14(m,9H)。
13C NMR(100MHz,(CD3)2CO):170.8,148.6,147.6,136.8,130.5,117.1,108.6,99.3,80.0,77.7,76.0,72.7,70.8,69.2,67.5,55.0,49.4,41.3,37.6,35.6,33.5,30.7,24.5,17.3,11.2,-0.4,-0.5,-0.6。
ESI-MS m/z:808.4(M+Na)+。
d)
Figure BDA0003532040980001471
在23℃下，向10(12.5mg，0.016mmol)的CH2Cl2(2.5mL)溶液中添加丙1，3-二胺(6eq，7μL)。将反应混合物在23℃下搅拌过夜，并真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(Si-NH2，CH2Cl2：CH3OH，100:0至90:10)中纯化，得到纯的无色油状物11(5mg，39％产率)。
1H NMR(400MHz,(CD3)2CO):7.47(d,J＝9.7Hz,1H),6.36-6.28(m,1H),5.20(dd,J＝9.8,4.2hz,1H),4.77-4.75(m,1H),4.61-4.59(m,1H),4.38(s,1H),4.12-3.95(m,4H),3.89-3.79(m,1H),3.73(dd,J＝7.1,3.6Hz,1H),3.53(d,J＝10.7Hz,1H),3.36(s,3H),3.30(s,3H),3.26-3.21(m,2H),2.64(d,J＝14.7Hz,1H),2.47(d,J＝14.7Hz,1H),2.26-2.16(m,1H),1.97-1.90(m,4H),1.81-1.65(m,5H),1.50-1.56(m,1H),1.19(d,J＝6.5Hz,3H),1.00(d,J＝7.0Hz,3H),0.97(s,3H),0.85(s,3H),0.23(s,9H),0.13(s,9H),0.12(s,9H).13C NMR(100MHz,(CD3)2CO):170.8,156.4,147.9,108.5,99.5,80.8,77.2,76.4,72.9,69.7,69.1,68.3,66.9,55.1,49.2,48.9,41.4,39.6,37.4,35.4,33.4,30.8,30.7,24.9,17.4,11.3,-0.4(x2),-0.6。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:792.4403[M+H]+(calcd.for C36H73N3O10Si3:791.4604)。
e)
Figure BDA0003532040980001472
向11(6mg，0.0076mmol)的MeOH(4mL)溶液中加入2.4mL 0.033M的碳酸钾甲醇溶液(10.5eq，0.08mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌过夜并真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(Si-NH2，CH2Cl2：CH3OH，100:0至70:30)中纯化，得到无色油状物12(4.3mg，99％产率)。
1H NMR(400MHz,CD3OD):5.33(m,1H),4.80(m,1H),4.65(m,1H),4.28(s,1H),4.06-3.83(m,3H),3.61-3.46(m,3H),3.47-3.36(m,1H),3.39(s,3H),3.28(s,3H),3.20-3.14(m,2H),2.72-2.65(m,2H),2.53-2.48(m,1H),2.38-2.34(m,1H),2.20(dt,J＝8.1,4.0Hz,1H),2.01-1.95(m,2H),1.78-1.61(m,4H),1.17(d,J＝6.6Hz,3H),0.98(d,J＝7.0Hz,3H),0.94(s,3H),0.87(s,3H)。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:576.3494[M+H]+(calcd.for C27H49N3O10:575.3418)。
中间体13
a)
Figure BDA0003532040980001481
在0℃下向9(80mg，0.126mmol)和Et3N(6eq，0.756mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中，滴加甲磺酰氯(6eq，0.756mmol)。在0℃下搅拌30分钟后，将反应混合物真空浓缩。所得残余物在快速色谱(SiO2，Hex：EtOAc，90:10至70:30)的自动系统中纯化，得到纯的无色油状物13(88mg，99％产率)。
1H NMR(500MHz,(CD3)2CO):7.50(d,J＝10.0Hz,1H),5.37(dd,J＝10.0,7.0Hz,1H),4.80-4.75(m,1H),4.63-4.48(m,1H),4.45(s,1H),4.32(dd,J＝11.1,2.0Hz,1H),4.22(dd,J＝11.1,6.6Hz,1H),3.92-3.73(m,2H),3.75(ddd,J＝9.7,4.2,0.5Hz,1H),3.63-3.55(m,1H),3.47-3.40(m,1H),3.38(s,3H),3.34(s,3H),3.33(s,3H),3.13(s,3H),2.64-2.56(m,1H),2.52(dt,J＝14.5,0.7Hz,1H),2.26-2.18(m,1H),2.03-1.90(m,2H),1.70-1.60(m,2H),1.20(d,J＝6.6Hz,3H),1.03(d,J＝7.0Hz,3H),0.96(s,3H),0.87(s,3H),0.25(s,9H),0.15(s,9H)。
13C NMR(125MHz,(CD3)2CO):172.1,148.7,109.4,100.1,79.7,78.8,77.1,76.2,73.1,72.2,70.0,56.7,55.9,50.3,42.2,39.1,37.2,36.8,31.2,24.3,18.2,15.1,12.1,0.5,0.3。
ESI-MS m/z:734.3[M+Na]+。
连接子的合成
制备LIN 1：MC-Val-Cit-PABC-PNP
反应机理
Figure BDA0003532040980001491
(a)制备LIN 1-1：MC-Val-Cit-OH
LIN 1-1
Figure BDA0003532040980001492
将CL-TrtCl-树脂(20g，1.49mmol/g)(Iris Biotech，Ref.：Br-1065，2-氯三苯甲基氯树脂(200-400目，1％DVB，1.0-1.6mmol/g)，CAS 42074-68-0)置于滤板中。将100mLDCM加入到树脂中，并将混合物搅拌1小时。通过真空过滤除去溶剂。加入Fmoc-Cit-OH(11.83g，29.78mmol)和DIPEA(17.15mL，98.45mmol)在DCM(80mL)中的溶液，并将混合物搅拌10分钟。然后加入DIPEA(34.82mmol，199.98mmol)并将混合物搅拌1小时。搅拌15分钟后，通过加入MeOH(30mL)终止反应。对作为结果产生的Fmoc-Cit-O-TrtCl-树脂进行以下洗涤/处理：DCM(5x 50mL x 0.5min)、DMF(5x 50mL x 0.5min)、哌啶：DMF(1:4、1x 1min、2x10min)、DMF(5x 50mL x 0.5min)、DCM(5x 50mL x 0.5min)。最后的哌啶洗涤得到NH2-Cit-O-TrtCl-树脂。载荷：1.15mmol/g。
将上述制得的NH2-Cit-O-TrtCl-树脂用DMF(5×50mL×0.5min)洗涤，并将Fmoc-Val-OH(31.22g，91.98mmol)、HOBt(11.23g，91.98mmol)在DMF(100mL)中的溶液加入到NH2-Cit-O-TrtCl-树脂中，搅拌并加入DIPCDI(14.24mL，91.98mmol)，并将混合物搅拌1.5小时。通过用DMF(5×50mL×0.5min)洗涤终止反应。这样制备的Fmoc-Val-Cit-O-TrtCl-树脂用哌啶：DMF(1：4，1×1min，2×10min)处理，并用DMF(5×50mL×0.5min)洗涤。最后的哌啶洗涤得到NH2-Val-Cit-O-TrtCl-树脂。
将6-马来酰亚胺基己酸(MC-OH)(9.7g，45.92mmol)、HOBt(6.21g，45.92mmol)在DMF(100mL)中的溶液加入到上述制备的NH2-Val-Cit-O-TrtCl-树脂中，搅拌并加入DIPCDI(7.12mL，45.92mmol)，并将混合物搅拌1.5小时。通过用DMF(5×50mL×0.5min)和DCM(5×50mL×0.5min)洗涤终止反应。
通过用TFA：DCM(1：99，5×100mL)处理将肽从树脂上切割下来。用DCM(7×50mL×0.5min)洗涤树脂。将合并的滤液减压蒸发至干，并将获得的固体用Et2O研磨并过滤以获得白色固体LIN 1-1(7.60g，71％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ12.47(s,1H),8.13(d,J＝7.3Hz,1H),7.74(d,J＝9.0Hz,1H),6.99(s,2H),5.93(s,1H),5.35(s,2H),4.20(dd,J＝9.0,6.8Hz,1H),4.15-4.07(m,1H),3.36(t,J＝7.0Hz,2H),3.00-2.88(m,2H),2.21-2.12(m,1H),2.11-2.03(m,1H),1.98-1.86(m,1H),1.74-1.62(m,1H),1.61-1.50(m,1H),1.50-1.31(m,6H),1.21-1.11(m,2H),0.84(d,J＝6.8Hz,3H),0.80(d,J＝6.8Hz,3H)。
ESI-MS m/z:468.3(M+H)+。
(b)制备LIN 1-2：MC-Val-Cit-PABOH
LIN 1-2
Figure BDA0003532040980001511
向LIN 1-1(1.6g，3.42mmol)和4-氨基苯甲醇(PABOH)(0.84g，6.84mmol)的DCM(60mL)溶液中加入HOBt(0.92g，6.84mmol)的DMF(5mL)溶液。加入DIPCDI(1.05mL，6.84mmol)，在23℃下搅拌反应混合物2小时，加入Et2O(150mL)，并在真空下在过滤板中过滤获得的固体，以获得LIN 1-2(1.31g，67％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ9.88(s,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.77(dd,J＝12.2,8.5Hz,1H),7.53(d,J＝8.2hz,2H),7.21(d,J＝8.2hz,2H),6.99(s,3H),6.01-5.92(m,1H),5.39(s,2H),5.07(s,1H),4.41(s,2H),4.39-4.31(m,1H),4.23-4.12(m,1H),3.36(t,J＝7.0Hz,2H),3.06-2.97(m,1H),2.96-2.90(m,1H),2.22-2.03(m,2H),2.01-1.88(m,1H),1.76-1.62(m,1H),1.63-1.28(m,6H),1.25-1.11(m,2H),0.84(d,J＝6.9Hz,3H),0.81(d,J＝6.8Hz,3H)。
ESI-MS m/z:573.3(M+H)+。
(c)制备LIN 1：MC-Val-Cit-PAB-PNP
LIN 1
Figure BDA0003532040980001521
向LIN 1-2(500mg，0.87mmol)和双(4-硝基苯基)碳酸酯(bis-PNP)(2.64g，8.72mmol)的DCM:DMF(8:2,25mL)溶液中加入DIPEA(0.45mL，2.61mmol)。反应混合物在23℃下搅拌20小时，并倒入硅胶柱(DCM:CH3OH，50:1到10:1)上，得到纯的目的物LIN 1(364mg，57％)。
Rf＝0.40(CH2Cl2:CH3OH,9:1)。
1H NMR(400MHz,CDCl3/CD3OD):δ9.45(s,1H),8.23(d,J＝8.3Hz,2H),7.59(d,J＝8.5Hz,2H),7.35(d,J＝8.3Hz,2H),7.34(d,J＝8.5Hz,2H),6.65(s,2H),5.20(s,2H),4.56(dt,J＝10.5,5.4Hz,1H),4.15(d,J＝7.2hz,1H),3.46(dd,J＝8.0,6.4Hz,2H),3.16-2.89(m,2H),2.21(dd,J＝8.3,6.6Hz,2H),2.06-1.97(m,1H),1.90-1.83(m,1H),1.73-1.46(m,7H),1.34-1.20(m,2H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H),0.90(d,J＝6.7Hz,3H)。
13C NMR(125MHz,CDCl3/CD3OD)δ174.4,172.4,171.1,170.6,160.5,155.5,152.5,145.3,138.7,134.1,129.9,129.5,125.2,121.8,120.0,70.6,59.0,53.2,37.5,35.8,30.6,29.6,29.3,28.1,26.2,26.2,25.1,19.1,18.1。
ESI-MS m/z:738.3(M+H)+。
示例1：式为D-X-(AA)w-(T)g-L1的化合物的合成
制备化合物DL-1
Figure BDA0003532040980001531
在23℃下，向7(13mg，0.022mmol)和LIN-1(24.4mg，0.033mmol)的NMP(3mL)溶液中添加DIPEA(10.5μL，0.06mmol)。在23℃下15小时后，将反应混合物用H2O稀释并用EtOAc萃取。合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。所得残余物通过半制备HPLC(SunfireC18，10x150mm，CH3CN：H2O，流速4mL/min，UV检测)纯化以获得纯的白色固体DL-1(14.5mg，54％产率)。
1H NMR(500MHz,CD3CN:D2O 2:1):7.53(d,J＝8.5Hz,2H),7.31(d,J＝8.3Hz,2H),6.77(m,2H),5.25(d,J＝7.6Hz,1H),4.99(s,2H),4.81(t,J＝2.1Hz,1H),4.67(t,J＝2.1Hz,1H),4.39(dd,J＝9.1,5.1Hz,1H),4.24(s,1H),4.11-4.04(m,2H),3.98(dd,J＝11.9,5.0Hz,1H),3.83(ddd,J＝11.3,5.5,3.4Hz,2H),3.57(dd,J＝10.7,4.5Hz,1H),3.43-3.40(m,3H),3.33(s,3H),3.25(s,3H),3.20(s,3H),3.19-3.18(m,1H),3.10-3.01(m,6H),2.38-2.28(m,2H),2.28-2.17(m,3H),2.06-1.97(m,1H),1.89(ddd,J＝13.7,4.6,3.1Hz,1H),1.82(s,1H),1.75-1.44(m,10H),1.30-1.17(m,4H),1.12(d,J＝6.6Hz,3H),0.92(d,J＝7.0Hz,3H),0.89(d,J＝3.0Hz,3H),0.88(d,J＝3.0Hz,3H),0.85(s,3H),0.78(s,3H)。
13C NMR(125MHz,CD3CN:D2O 2:1):175.3,172.6,172.5,172.1,171.1,158.3,158.2,146.8,137.7,134.3,133.1,128.6,120.2,119.5,109.7,99.9,79.8,76.8,75.7,72.4(x2),70.8,69.6,65.9,64.2,63.9,59.1,56.1,55.9,53.7,48.1,41.1,38.1,37.8,37.4,35.3,33.5,32.1,30.2,29.8,29.4,28.9,28.6,27.8,25.9,25.0,22.6,21.9,18.6,17.6,17.1,11.5,0.9。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:1210.6301[M+Na]+(calcd.for C57H89N9O18Na:1210.6223).
制备化合物DL-2
Figure BDA0003532040980001541
在23℃下，向7(17.8mg，0.030mmol)和6-马来酰亚胺基己酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(0.060mmol，19mg)的CH2Cl2(3mL)溶液中添加DIPEA(16μL，0.091mmol)。将反应混合物在23℃下搅拌过夜并真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(SiO2，CH2Cl2：CH3OH，100:0至80:20)中纯化，得到纯DL-2(17.5mg，74％产率)。
1H NMR(400MHz,(CD3)2CO):7.42(d,J＝9.6Hz,1H),7.14-7.12(m,1H),6.86-6.84(m,2H),6.39-6.36(m,1H),5.35(dd,J＝9.6,7.5Hz,1H),4.82-4.76(m,1H),4.64-4.59(m,2H),4.34-4.32(m,1H),4.15(dd,J＝11.7,3.3Hz,1H),4.00(dd,J＝11.7,5.1Hz,1H),3.96-3.87(m,1H),3.90-3.80(m,2H),3.65-3.60(m,1H),3.48-3.44(m,3H),3.36(s,3H),3.34-3.31(m,1H),3.28-3.21(m,8H),3.16-3.11(m,2H),2.42-2.39(m,2H),2.32-2.11(m,3H),2.09-1.94(m,1H),1.79-1.52(m,9H),1.39-1.23(m,2H),1.16(d,J＝6.6Hz,3H),1.01(d,J＝7.0Hz,3H),0.94(s,3H),0.86(s,3H)。
13C NMR(100MHz,(CD3)2CO):172.3,171.7,170.8,156.6,147.2,134.2,109.0,99.7,79.8,76.6,75.5,73.3,72.1,70.7,69.0,64.4,55.9,55.4,48.2,41.4,38.2,37.7,37.2,35.9,35.6,34.2,30.8,30.0,29.8,28.1,26.1,25.0,23.0,17.2,13.2,11.6。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:805.4233[M+Na]+(calcd.for C38H62N4O13Na:805.4211)。
制备化合物DL-3
Figure BDA0003532040980001551
在23℃下向12(4.5mg，0.0078mmol)和6-马来酰亚胺基己酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(2eq，4.8mg)的CH2Cl2(2mL)溶液加入DIPEA(4.1μL，3eq)。将反应混合物在23℃下搅拌过夜并真空浓缩。所得残余物在快速色谱系统(SiO2，CH2Cl2：CH3OH，100:0至80:20)中纯化，得到DL-3(3mg，50％产率)。
1H NMR(500MHz,(CD3)2CO):7.58(d,J＝9.7Hz,1H),7.11-7.09(m,1H),6.86(s,2H),6.38-6.34(m,1H),5.45-5.35(m,1H),4.85-4.72(m,2H),4.64-4.62(m,1H),4.35-4.30(m,1H),4.09-3.87(m,7H),3.70-3.58(m,2H),3.51-3.45(m,2H),3.37(s,3H),3.29(s,3H),3.27-3.20(m,2H),3.17-3.12(m,2H),2.55-2.47(m,1H),2.42-2.38(m,1H),2.26-2.19(m,1H),2.18-2.13(m,2H),2.02-1.95(m,1H),1.79-1.54(m,11H),1.15(d,J＝6.6Hz,3H),1.00(d,J＝7.0Hz,3H),0.97(s,3H),0.89(s,3H)。
13C NMR(125MHz,(CD3)2CO):173.6,172.6,171.4,157.3,148.2,134.9,109.3,100.4,80.2,79.9,74.6,72.3,71.2,70.2,69.5,68.5,56.0,49.0,42.1,38.8,38.3,37.8,36.5(x2),34.7,33.3,30.6,30.5,28.7,26.8,25.7,23.8,17.9,14.5,12.1。
(+)-HRESI-TOFMS m/z:791.3830[M+Na]+(calcd.for C37H60N4O13Na:791.4055)。
示例2：制备抗体-药物偶联物(ADC)
在该实施例中，描述了本发明的抗体-药物偶联物的合成。应当注意，这些合成是示例性的，并且所描述的方法可以应用于本文描述的所有化合物和抗体。
用曲妥珠单抗和化合物DL-1制备抗体-药物偶联物ADC-1
(a)制备曲妥珠单抗
将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗，购自Roche，作为用于制备用于输注的浓溶液的白色冻干粉)溶解在5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中，并通过使用Sephadex G25 PD-10柱脱盐到磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中以进行纯化。通过测量280nm处的吸光度测定曲妥珠单抗的浓度(16.1mg/mL)。
(b)曲妥珠单抗与2-亚氨基硫烷盐酸盐(Traut's试剂)反应得到硫醇活化的曲妥珠单抗
使用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐，2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.75mL，12mg，72.7nmol)稀释至10mg/mL的浓度。加入Traut's试剂(72.6μL，872nmol，12eq.)，在20℃下搅拌反应2h。将混合物用两个Sephadex G25 NAP-5柱交换到PBS缓冲液中，并浓缩至体积为1.3mL(9.3mg/mL)。之后立即进行Ellman试验，得到游离硫醇与抗体的比率(FTAR)为4.2。
(c)制备ADC-1
向硫醇活化的曲妥珠单抗溶液(200μL，1.86mg，12.4nmol)中加入DMA(37μL)，随后加入新制备的DL-1溶液(10mM在DMA中，12.3μL，123nmol，10eq.)。将偶联反应在25℃下搅拌2小时，并通过使用Sephadex G25 NAP-5柱脱盐到PBS缓冲液中进行纯化。将最终的目标产物ADC-1浓缩至最终浓度为6.32mg/mL，通过UV测定，并获得210μL(1.32mg，8.8nmol，71％)的ADC溶液。
用曲妥珠单抗和化合物DL-2制备抗体-药物偶联物ADC-2
(a)制备曲妥珠单抗
将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗，购自Roche，作为用于制备用于输注的浓溶液的白色冻干粉)溶解在5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中，并通过使用Sephadex G25 PD-10柱脱盐到磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中进行纯化。通过测量280nm处的吸光度测定曲妥珠单抗的浓度(16.1mg/mL)。
(b)曲妥珠单抗与2-亚氨基硫烷盐酸盐(Traut's试剂)反应得到硫醇活化的曲妥珠单抗
使用磷酸盐缓冲液(50mM磷酸盐，2mM EDTA，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.75mL，12mg，72.7nmol)稀释至10mg/mL的浓度。加入Traut's试剂(72.6μL，872nmol，12eq.)，在20℃下搅拌反应2h。将混合物用两个Sephadex G25 NAP-5柱交换到PBS缓冲液中，并浓缩至体积为1.3mL(9.3mg/mL)。之后立即进行Ellman试验，得到游离硫醇与抗体的比率(FTAR)为4.2。
(c)制备ADC-2
向硫醇活化的曲妥珠单抗溶液(200μL，1.86mg，12.4nmol)中加入DMA(37μL)，随后加入新制备的DL-2溶液(10mM在DMA中，12.3μL，123nmol，10eq.)。将偶联反应在25℃下搅拌2小时，并通过使用Sephadex G25 NAP-5柱脱盐到PBS缓冲液中进行纯化。将最终的目标产物ADC-2浓缩至最终浓度为7.11mg/mL，通过UV测定，并获得220μL(1.56mg，10.4nmol，84％)的ADC溶液。
用曲妥珠单抗和化合物DL-2制备抗体-药物偶联物ADC-3
(a)制备曲妥珠单抗
将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗，购自Roche，作为用于制备用于输注的浓溶液的白色冻干粉)溶解在5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中，并通过使用Sephadex G25 PD-10柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中进行纯化。通过测量280nm处的吸光度测定曲妥珠单抗的浓度(17.6mg/mL)。
(b)部分还原曲妥珠单抗，得到部分还原的曲妥珠单抗
用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.55mL，9.7mg，64.5nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过加入5.0mM的三[2-羧乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(29.2μL，145.8nmol，2.2eq)进行抗体中二硫键的部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。还原后立即进行Ellman试验，得到游离硫醇与抗体的比率(FTAR)为3.4。
(c)制备ADC-3
向部分还原的曲妥珠单抗溶液(0.14mL，1.78mg，11.9nmol)中添加DMA(28.2μL)，然后添加新制备的DL-2溶液(10mM在DMA中，6.8μL，68nmol，5.6eq)。偶联反应在20℃下搅拌30分钟，通过加入N-乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，6.8μL，68nmol)淬灭(quench)过量的药物，然后搅拌溶液20分钟。通过使用Sephadex G25 NAP-5柱脱盐到PBS缓冲液中来纯化猝灭的偶联反应。将最终的目标产物ADC-3浓缩至最终浓度为6.73mg/mL，通过UV测定，获得188μL(1.26mg，8.4nmol，70％)的ADC溶液。进行HIC HPLC实验以测定偶联反应的百分比(91％)。
用曲妥珠单抗和化合物DL-1制备抗体-药物偶联物ADC-4
(a)曲妥珠单抗制备
将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗，购自Roche，作为用于制备用于输注的浓溶液的白色冻干粉)溶解在5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中，并通过使用Sephadex G25 PD-10柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中进行纯化。通过测量280nm处的吸光度测定曲妥珠单抗的浓度(17.1mg/mL)。
(b)部分还原曲妥珠单抗，得到部分还原的曲妥珠单抗
用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.25mL，4.27mg，28.5nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过加入5.0mM三[2-羧乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(16.5μL，81.6μmol，3eq.)进行抗体中二硫键的部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。还原后立即进行Ellman试验，得到游离硫醇与抗体的比率(FTAR)为6.4。
(c)制备ADC-4
向部分还原的曲妥珠单抗溶液(125μL，1.24mg，8.3nmol)中加入DMA(19.3μL)，随后加入新制备的DL-1溶液(10mM在DMA中，7.1μL，71nmol，8.5eq)。偶联反应在25℃下搅拌2小时。通过加入N-乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，7.1μL，71nmol)淬灭过量的药物，然后搅拌溶液20分钟。通过使用Sephadex G25 NAP-5柱脱盐到PBS缓冲液中来纯化猝灭的偶联反应。将最终的目标产物ADC-4浓缩至最终浓度为4.58mg/mL，通过UV测定，并获得270μL(1.24mg，8.26nmol，99％)的ADC溶液。进行HIC HPLC实验以测定偶联反应的百分比(96％)。
用曲妥珠单抗和化合物DL-3制备抗体-药物偶联物ADC-5
(a)制备曲妥珠单抗
将曲妥珠单抗(曲妥珠单抗，购自Roche，作为用于制备用于输注的浓溶液的白色冻干粉)溶解在5mL磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中，并通过使用Sephadex G25 PD-10柱脱盐至磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8.0)中进行纯化。通过测量280nm处的吸光度测定曲妥珠单抗的浓度(16.1mg/mL)。
(b)部分还原曲妥珠单抗，得到部分还原的曲妥珠单抗
用磷酸盐缓冲液(50mM，pH 8)将曲妥珠单抗溶液(0.3mL，4.8mg，32.2nmol)稀释至10mg/mL的浓度。通过加入5.0mM三[2-羧乙基]膦盐酸盐(TCEP)溶液(19.3μL，96.6μmol，3eq.)进行抗体中二硫键的部分还原。将还原反应在20℃下搅拌90分钟。还原后立即进行Ellman试验，得到游离硫醇与抗体的比率(FTAR)为4.3。
(c)制备ADC-5
向部分还原的曲妥珠单抗溶液(150μL，1.5mg，10nmol)中添加DMA(29.5μL)，然后添加新制备的DL-3溶液(10mM在DMA中，8μL，80nmol，8eq)。偶联反应在20℃下搅拌30分钟。通过加入N-乙酰半胱氨酸(NAC)(10mM，8μL，80nmol)淬灭过量的药物，然后搅拌溶液20分钟。通过使用Sephadex G25 NAP-5柱脱盐到PBS缓冲液中来纯化猝灭的偶联反应。将最终的目标产物ADC-5浓缩至最终浓度为6.1mg/mL，通过UV测定，并获得180μL(1.1mg，7.3nmol，73％)的ADC溶液。进行HIC HPLC实验以测定偶联反应的百分比(96％)。
示例3：证明本发明的抗体-药物偶联物的细胞毒性
抗肿瘤活性检测的生物测定法
测定的目的是评价被测样品的体外细胞抑制(延迟或阻止肿瘤细胞生长的能力)或细胞毒性(杀死肿瘤细胞的能力)活性。
细胞系和细胞培养
从美国典型培养物保藏中心(ATCC)获得下列人肿瘤细胞系：SK-BR-3(ATCC HB-30)、HCC-1954(ATCC CRL-2338)(均为乳腺癌，HER2+)、MDA-MB-231(ATCC HTB-26)、MCF-7(ATCC HTB-22)(均为乳腺癌，HER2)。在杜尔贝科改良伊格尔培养基(DMEM)(适用于SK-BR-3、MDA-MB-231和MCF-7细胞)或RPMI-1640(适用于HCC-1954细胞系)中，在37℃、5％CO2和95％湿度下保持细胞，所有培养基均补充10％胎儿小牛血清(FCS)、2Mm L-谷氨酰胺和100units/mL青霉素和链霉素。
细胞毒性试验
对于SK-BR-3、HCC-1954、MDA-MB-231和MCF-7细胞，采用使用磺酰罗丹明B(SRB)的比色测定来定量测量细胞生长和细胞毒性，如V.Vichai和K。Kirtikara.在“Sulforhodamine B colorimetric assay for cytotoxicity screening”,NatureProtocols,2006,1:1112-1116中描述的。简言之，将细胞接种在96孔微量滴定板中，并在单独用载体或用测试物质处理72小时之前，使其在不含药物的培养基中静置24小时。为了定量，将细胞用磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤两次，在1％戊二醛溶液中固定15分钟，用PBS漂洗两次，在具有1％(v/v)乙酸溶液的0.4％(w/v)SRB中染色30分钟，用1％乙酸溶液漂洗几次并风干。然后在10mM Trizma碱溶液中提取SRB，并在微量板分光光度计中在490nm处测量光密度。
在所有情况下，细胞存活表示为对照、未处理的细胞存活的百分比。所有评价重复进行三次，并且使用Prism 5.0统计软件(GraphPad，La Jolla，CA，USA)通过非线性回归将所得数据拟合为四参数logistic方程，由此计算IC50值(与未处理的对照组相比，化合物的浓度对细胞生长造成50％的影响)。本文给出的数据对应于重复三次进行的三个独立实验的几何平均值。
对比四种过度表达或不表达HER2受体(包括SK-BR-3、HCC-1954(HER2-阳性细胞)以及MDA-MB-231和MCF-7(HER2-阴性细胞))的不同人乳腺癌细胞系，评价了ADC连同母体细胞毒性化合物1、2和DL-2以及曲妥珠单抗的体外细胞毒性。进行与测试物质温育72小时的标准剂量-反应(DR)曲线。
用HER2阳性/阴性细胞系测定。
曲妥珠单抗的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，针对不同的肿瘤细胞系评估曲妥珠单抗的体外细胞毒性，范围为50至0.01μg/mL(3.33E-07-8.74E-11M)。曲妥珠单抗是完全无活性的，在所测试的任何细胞系中都没有达到IC50，与它们的HER2状态无关，如表3所示，其中给出了对应于在三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值的结果。
表3曲妥珠单抗的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001611
1的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线评价中间体化合物1对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为100至0.03ng/mL(2.04E-07-6.12E-11M)。
如表4所示，其中给出了对应于在三个独立实验中获得的IC50值的几何平均值的结果，该化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中是相似的，而不管它们的HER2表达如何，其中IC50值在纳摩尔范围内。
表4 1的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001621
2的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，评估中间体化合物2对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为1μg/mL到0.3μg/mL(2.10E-06-6.30eq-10M)的。
如表5所示，无论HER2表达如何，该化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中是相似的，IC50值在纳摩尔范围内。
表5 2的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001622
DL-2的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，评价中间体化合物DL-2对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为10μg/mL至2.6ng/mL(1.28E-05-3.32E-09M)。
如表6所示，无论其HER2表达如何，该化合物的细胞毒性在所有肿瘤细胞系中是相似的，IC50值在高纳摩尔范围内。
表6DL-2的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001631
ADC-3的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，评估ADC-3对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为100μg/mL到26ng/mL(6.67E-07-1.75E-10M)。表7总结了对应于所获得的IC50值的几何平均值的结果。ADC-3仅在HER2阳性细胞中显示了与母体药物1显示的细胞毒性相似的细胞毒性。然而，在HER2阴性细胞中，这种毒性显著更低：低500倍以上(根据通过将HER2阴性细胞的平均IC50值除以HER2阳性细胞的平均IC50值而获得的选择性比率)。该选择性使我们得出结论，该偶联物通过抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，随后胞内递送细胞毒性药物。
表7ADC-3的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001632
ADC-2的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，评估ADC-2对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为100μg/mL到26ng/mL(6.67E-07-1.75E-10M)。表8总结了对应于所获得的IC50值的几何平均值的结果。ADC-2仅在HER2阳性细胞中显示了与母体药物1显示的细胞毒性相似的细胞毒性。然而，在HER2阴性细胞中，这种毒性较低，几乎低7倍(根据通过将HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率)。该选择性使我们得出结论，该偶联物通过抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，随后胞内递送细胞毒性药物。
表8ADC-2的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001641
ADC-1的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，评估ADC-1对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为100μg/mL到26ng/mL(6.67E-07-1.75E-10M)。表9总结了对应于所获得的IC50值的几何平均值的结果。ADC-1显示了仅在HER2阳性细胞中与母体药物1显示的细胞毒性相似的细胞毒性。然而，在HER2阴性细胞中，这种毒性较低，低400倍以上(根据通过将HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率)。该选择性使我们得出结论，该偶联物通过抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，随后胞内递送细胞毒性药物。
表9ADC-1的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001642
ADC-4的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，评估ADC-4对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为100μg/mL到26ng/mL(6.67E-07-1.75E-10M)。表10总结了对应于所获得的IC50值的几何平均值的结果。ADC-4仅在HER2阳性细胞中显示了与母体药物1显示的细胞毒性相似的细胞毒性。然而，在HER2阴性细胞中，这种毒性较低，低1200倍以上(根据通过将HER2阴性细胞中的平均IC50值除以HER2阳性细胞中的平均IC50值所获得的选择性比率)。这种选择性使我们得出结论，该偶联物通过抗体与肿瘤细胞上的膜相关HER2受体的相互作用起作用，随后胞内递送细胞毒性药物。
表10ADC-4的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001651
ADC-5的细胞毒性
通过进行三次10点、2.5倍稀释DR曲线，评估ADC-5对不同肿瘤细胞系的细胞毒性，范围为100μg/mL到26ng/mL(6.67E-07-1.75E-10M)。表11总结了对应于所获得的IC50值的几何平均值的结果。这种偶联物选择性地损害表达HER2的细胞系的生长，其效力超过相应药物所显示的，因此表明该偶联物有利于药物的细胞吸收。在表达HER2的细胞系中这种显著的活性是对HER2阴性细胞观察到的高选择性的原因。
表11ADC-5的体外细胞毒性概览
Figure BDA0003532040980001652
Figure BDA0003532040980001661
从WO 2018/167270还可以看出，本发明的药物部分D在以下细胞系中显示出效力，其数据通过引用结合于此。
名称 ATCC编码 种类 组织 特点
A549 CCL-185 人 肺 肺癌(NSCLC)
HT29 HTB-38 人 结肠 结直肠腺癌
MDA-MB-231 HTB-26 人 乳房 乳腺腺癌
PSN1 CRM-CRL-3211 人 胰腺 胰腺腺癌
示例4化合物1的MTD和MTMD
1在小鼠中的最大耐受剂量
将CB17/SCID雌性小鼠(Envigo)用于该研究。将动物随机分配到剂量组并接受单次静脉内给药。
给药后，以固定的时间间隔观察动物的临床症状直到给药后14天。每天记录死亡率。
最大耐受剂量(MTD)定义为无死亡率记录的剂量水平。结果总结在表12中。
表12化合物1的MTD
Figure BDA0003532040980001662
Figure BDA0003532040980001671
1在小鼠中的最大耐受多剂量
将Athymmic和CB17/SCID雌性小鼠(Envigo)用于这些研究。将动物随机分配到剂量组，每周静脉内给药1次，连续5天(q7dx5)。
给药后，以固定的时间间隔观察动物的临床症状直到最后一次给药后14天。每天记录死亡率。
最大耐受多剂量(MTMD)定义为无死亡率记录的剂量水平。结果总结在表13中。
表13化合物1的MTMD
Figure BDA0003532040980001672
Figure BDA0003532040980001681
*初步数据，动物仍在随访期。
例5ADC 3的体内活性
已经评估了ADC-3在BT474细胞系中的体内抗肿瘤活性，BT474细胞系是HER2阳性乳腺肿瘤模型。
实验设计
简言之，将先前在供者小鼠中产生的肿瘤片段皮下植入4至6周龄SCID小鼠。在每个实验开始之前，通过IHC对C-erB2(与HER-2表达相关的癌基因)进行独立盲法测定。
动物如上文所述地被植入并且当肿瘤达到ca.150-200mm3时，携带肿瘤的动物(N＝10/组)根据以下实验设计随机分配到治疗组中：
Figure BDA0003532040980001682
治疗在第0、7、14、21和28天静脉给药(q7dx5)。
从治疗的第一天(第0天)开始，每周3次记录肿瘤尺寸和体重。致死性>20％和/或净体重减轻20％的处理被认为是有毒的。使用公式(a·b2)/2计算肿瘤体积，其中a和b分别是最长和最短的直径。当它们的肿瘤达到ca.2000mm3和/或严重坏死时，将动物安乐死。在每个测量日计算肿瘤体积的中间值。当连续测量2次或以上，肿瘤体积<63mm3时，确定肿瘤完全消退(CR)。
结果
对患有BT-474肿瘤的小鼠进行的所有治疗都产生抗肿瘤活性(图3)
施用4mg/kg的ADC3和Kadcyla(30mg/kg)诱导肿瘤消退。ADC3为4.0mg/kg，从第26天至第190天7个中有7个肿瘤消退，Kadcyla为30.0mg/kg，从第14天至第190天7个中有7个肿瘤消退。由于还没有观察到肿瘤再生长(在第190天)，该实验被认为仍在进行中。
Herceptin(30mg/Kg)处理也诱导显著的统计学显著的抗肿瘤活性，从第12天直到最后的实验数据记录的那天，p<0.038，尽管没有实现完全的肿瘤消退。
序列表
<110> 法马马有限公司
<120> 药物抗体偶联物
<130> PC928986WO
<150> EP19382765.6
<151> 2019-09-05
<160> 3
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 5
<212> PRT
<213> 智人
<400> 1
Ala Arg His Cys Leu
1 5
<210> 2
<211> 4
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
Gln Asn Gly Ser
1
<210> 3
<211> 11
<212> PRT
<213> 智人
<400> 3
Pro Pro Phe Cys Val Ala Arg Cys Pro Ser Gly
1 5 10

Claims (95)

1.药物偶联物，所述药物偶联物包括药物部分，所述药物部分共价连接至所述药物偶联物的其余部分，所述药物偶联物具有式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab，其中：
D是具有下式(I)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，
Figure FDA0003532040970000011
其中：
D经由OR1、OR3或ZH处的羟基或经由ZH处的硫醇基共价连接至(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)；
R1和R2各自独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
R3选自氢、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
Z选自-O-和-S-；
Ra选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rb选自取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rc和Rd独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
X和T是相同或不同的延伸基团；
每个AA独立地是氨基酸单元；
L是连接子基团；
w是范围在0到12之间的一整数；
b为整数0或1；
g为整数0或1；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，并且在1至20的范围内。
2.根据权利要求1所述的药物偶联物，其中D也是具有式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或酯：
Figure FDA0003532040970000021
其中R1、R2、R3和Z根据权利要求1中的式(I)中所定义。
3.根据权利要求1所述的药物偶联物，其中D是具有下式的化合物：
Figure FDA0003532040970000022
或者
Figure FDA0003532040970000023
或其药学上可接受的盐或酯。
4.根据权利要求2所述的药物偶联物，其中D是具有下式的化合物：
Figure FDA0003532040970000031
或其药学上可接受的盐或酯。
5.根据权利要求2所述的药物偶联物，其中D是具有下式的化合物：
Figure FDA0003532040970000032
或其药学上可接受的盐或酯。
6.药物偶联物，所述药物偶联物包括药物部分，所述药物部分共价连接至所述药物偶联物的其余部分，所述药物偶联物具有式[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]n-Ab，其中：
D是具有下式(II)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯：
Figure FDA0003532040970000033
其中：
波浪线表示与(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或(L)的共价连接点；
R1和R2各自独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3选自氢、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
Z为-O-或-S-；
Ra选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
Rb选自取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
Rc和Rd独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
取代基Rx选自由以下各项组成的组：可以可选地被至少一个基团Ry取代的C1-C12烷基，可以可选地被至少一个基团Ry取代的C2-C12烯基，可以可选地被至少一个基团Ry取代的C2-C12炔基，卤素原子，氧代基团，硫代基团，氰基，硝基，ORy，OCORy，OCOORy，CORy，COORy，OCONRyRz，CONRyRz，SRy，S(＝O)Ry，SO2Ry，SSRy，P(O)(Ry)ORz，NRyRz，NRyCORz，NRyC(＝O)NRyRz，NRyC(＝NRy)NRyRz，在一个或多个环中具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基可以可选地被一个或多个相同或不同的选自以下组的取代基取代：Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz、以及NRyC(＝NRy)NRyRz，包含被上述可选地被取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基，包含被上述可选地被取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷基氧基，以及具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元的饱和或不饱和杂环基，所述杂环基可选地被一个或多个取代基Ry取代，并且当在任一给定基团上存在多于一个的可选的取代基时，所述可选的取代基Ry可以相同或不同；
Ry和Rz各自独立地选自以下各项组成的组：氢、C1-C12烷基、被至少一个卤素原子取代的C1-C12烷基，包含被一个或多个环中具有6至18个碳原子的芳基取代的C1-C12烷基的芳烷基，以及包含被5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1-C12烷基的杂环烷基，所述杂环基具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子；
X和T是可以相同或不同的延伸基团；
每个AA独立地是氨基酸单元；
L是连接子基团；
w是范围在0到12之间的一整数；
b为整数0或1；
g为整数0或1；
其中b+g+w可选地不为0；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，并且在1至20的范围内。
7.根据权利要求6所述的药物偶联物，或其药学上可接受的盐或酯，其中D是具有式(IIa)的药物部分：
Figure FDA0003532040970000051
其中波浪线、R1、R2、R3和Z如式(II)所定义。
8.根据权利要求1、2、6和7中任一项所述的药物偶联物，其中R1选自氢和取代或未取代的C1-C6烷基。
9.根据权利要求8所述的药物偶联物，其中R1是氢或甲基。
10.根据权利要求1、2、6至9中任一项所述的药物偶联物，其中R2选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra为取代或未取代的C1-C6烷基；优选其中Ra选自取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的正丙基、取代或未取代的异丙基、取代或未取代的正丁基、取代或未取代的异丁基、取代或未取代的仲丁基、和取代或未取代的叔丁基。
11.根据权利要求10所述的药物偶联物，其中R2是氢。
12.根据权利要求1、2、6至11中任一项所述的药物偶联物，其中R3选自氢和-C(＝O)Ra，其中Ra为取代或未取代的C1-C6烷基；优选其中Ra选自取代或未取代的甲基、取代或未取代的乙基、取代或未取代的正丙基、取代或未取代的异丙基、取代或未取代的正丁基、取代或未取代的异丁基、取代或未取代的仲丁基、和取代或未取代的叔丁基。
13.根据权利要求12所述的药物偶联物，其中R3是氢。
14.根据权利要求1、2、6至13中任一项所述的药物偶联物，其中Z是-O-。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的药物偶联物，其中所述盐选自：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、草酸酯、琥珀酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、乙二胺盐、乙醇胺盐、N，N-二亚烷基乙醇胺盐、三乙醇胺盐和碱性氨基酸盐。
16.根据上述权利要求中任一项所述的药物偶联物，其中L是选自以下各项组成的组的连接子基团：
Figure FDA0003532040970000071
其中
波浪线表示与Ab的共价连接点(右侧的波浪线)、和与(T)g(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左侧的波浪线)；
R19选自：-C1-C12亚烷基-，-C3-C8碳环-，-O-(C1-C12亚烷基)-，-C6-C18亚芳基-，所述-C6-C18亚芳基-在一个或多个环中，所述-C6-C18亚芳基-可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-C6-C18亚芳基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C6-C18亚芳基-C1-C12亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C3-C8碳环)-，-(C3-C8碳环)-C1-C12亚烷基-，-C5-C14杂环-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C5-C14杂环)-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(C5-C14杂环)-C1-C12亚烷基-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(OCH2CH2)r-，以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C1-C6亚烷基；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C6亚烷基-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-、-(CH2CH2O)-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-CON(H或C1-C6烷基)-C1-C6亚烷基-、-亚苯基-，所述-亚苯基-可选地被一个或多个取代基Rx取代、-亚苯基-C1-C6亚烷基(其中亚苯基部分可选地被一个或多个取代基Rx取代)、以及-C1-C6亚烷基-CON(H或C1-C6烷基)C1-C6亚烷基-；
Q选自-N(H或C1-C6烷基)亚苯基-和-N(H或C1-C6烷基)-(CH2)s；
r是范围在1到10之间的一整数；且
s是范围在1到10之间的一整数。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的药物偶联物，其中L是选自下组的连接子基团：
Figure FDA0003532040970000081
以及
Figure FDA0003532040970000082
其中：
波浪线表示与Ab的共价连接点(右侧的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左侧的波浪线)；
R19选自：-C1-C12亚烷基-，-O-(C1-C12亚烷基)-，-C6-C12亚芳基-，所述-C6-C12亚芳基-在一个或多个环中，所述-C6-C12亚芳基-可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-C6-C12亚芳基，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C6-C12亚芳基-C1-C12亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C5-C12杂环，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C5-C12杂环)-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(C5-C12杂环)-C1-C12亚烷基-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(OCH2CH2)r-，以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C1-C6亚烷基-基团；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C6亚烷基-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-、以及-亚苯基-，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；且
r是范围在1至6之间的一整数。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的药物偶联物，其选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure FDA0003532040970000091
其中：
X和T是相同或不同的延伸基团；
每个AA独立地是氨基酸单元；
w是范围在0到12之间的一整数；
b是整数0或1；
g是整数0或1；
D是药物部分；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，并且n在1至20的范围内；
R19选自：-C1-C8亚烷基-，-O-(C1-C8亚烷基)-，-C1-C8亚烷基-C6-C12亚芳基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，以及-C6-C12亚芳基-C1-C8亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30是-C2-C4亚烷基-基团；且
M选自由以下各项组成的组：-C1-C3亚烷基-和-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-。
19.根据权利要求18所述的药物偶联物，其选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure FDA0003532040970000101
其中：
X和T是相同或不同的延伸基团；
每个AA独立地是氨基酸单元；
w是范围在0到12之间的一整数；
b为整数0或1；
g为整数0或1；
D是药物部分；
Ab是包含至少一个抗原结合位点的部分；
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与所述包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，并且n在1至20的范围内；
R19选自：-C1-C6亚烷基-，-亚苯基-C1-C6亚烷基-，其中所述亚苯基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基和氰基，并且优选R19是-C1-C6亚烷基-基团；
R30是-C2-C4亚烷基-基团；和
M是-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的药物偶联物，其中(AA)w具有式(III)：
Figure FDA0003532040970000111
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；且
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苄基、对羟基苄基、-CH2OH、-CH(OH)CHa、-CH2CH2SCH3、-CH2CONH2、-CH2COOH、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2COOH、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、-(CH2)3NH2、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCHO、-(CH2)4NHC(＝NH)NH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)4NHCHO、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NHCONH2、-CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2-吡啶基-、3-吡啶基-、4-吡啶基-、苯基、环己基、
Figure FDA0003532040970000121
Figure FDA0003532040970000122
及
Figure FDA0003532040970000123
并且w是范围在0到12之间的一整数。
21.根据权利要求20所述的药物偶联物，其中(AA)w具有式(III)，其中：
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苄基、吲哚基甲基、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、及-(CH2)4NHC(＝NH)NH2；且
W是范围在0到6之间的一整数。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的药物偶联物，其中w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000124
其中：
波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R22选自甲基、苄基、异丙基、仲丁基和吲哚基甲基；且
R23选自甲基、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHCONH2和-(CH2)3NHC(＝NH)NH2。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的药物偶联物，其中X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-；
-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-；
-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-；
-COCH2NH-COCH2-NH-；
-COCH2NH-；
-CONH-(C1-C6亚烷基)S-；
-CONH-(C1-C6亚烷基)NHCO(C1-C6亚烷基)S-；且
b为0或1，优选为1。
24.根据权利要求23所述的药物偶联物，其中X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-；
-COO-CH2-亚苯基-NH-，其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基；
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)-NH-；
-COCH2NH-COCH2-NH-；
-CONH-(C2-C4亚烷基)S-；
-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；且
b为0或1，优选为1。
25.根据权利要求24所述的药物偶联物，其中X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-OO-CH2-亚苯基-NH-；
-CONH(CH2)3NHCOOCH2-亚苯基-NH-；
-CONH(CH2)3NH-；
-CONH(CH2)3-S-；
-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-；且
b为0或1，优选为1。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的药物偶联物，其中T是选自下组的延伸基团：-CO-(C1-C6亚烷基)-NH-；-CO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-；-COO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-；其中j是范围在1至25之间的一整数，并且g为0或1。
27.根据权利要求26所述的药物偶联物，其中T是选自下组的延伸基团：-CO-(C1-C4亚烷基)NH-；-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；其中j是范围在1至10之间的一整数；且g为0或1。
28.根据权利要求27所述的药物偶联物，其中T选自下组的延伸基团：-CO-(C1-C4亚烷基)NH-；-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-；其中j是范围在1至5之间的一整数；且g为0或1。
29.根据权利要求6至28中任一项所述的药物偶联物，其中D是具有式(II)或式(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R2是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代的或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代的或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；且
Z为-O-。
30.根据权利要求29所述的药物偶联物，其中D是具有式(II)或式(IIa)的药物部分或其可药用盐或酯，其中：
R1是氢或甲基；
R2是氢；
R3为氢；且
Z为-O-。
31.根据权利要求29或30所述的药物偶联物，其中D是具有式(II)或式(IIa)的药物部分，或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是甲基；
R2是氢；
R3为氢；且
Z为-O-。
32.根据权利要求1、3、6至31中任一项所述的药物偶联物，其中D选自：
Figure FDA0003532040970000151
及
Figure FDA0003532040970000152
或其药学上可接受的盐或酯，其中波浪线指示与(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)的共价连接点。
33.根据权利要求1至3和5至32中任一项所述的药物偶联物，其中D选自：
Figure FDA0003532040970000161
及
Figure FDA0003532040970000162
或其药学上可接受的盐或酯，其中波浪线指示与(X)b(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(T)g(如果有的话)或(L)的共价连接点。
34.根据权利要求1至33中任一项所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗原结合肽。
35.根据权利要求34所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体、单域抗体或其抗原结合片段。
36.根据权利要求34或35所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是单克隆抗体、多克隆抗体或双特异性抗体，并且其中所述抗体或其抗原结合片段衍生自任何物种，优选人、小鼠或兔。
37.根据权利要求35或36所述的药物偶联物，其中所述抗体或其抗原结合片段选自由以下各项组成的组：人抗体、人抗体的抗原结合片段、人源化抗体、人源化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体、以及糖基化抗原结合片段。
38.根据权利要求35至37中任一项所述的药物偶联物，其中所述抗体或其抗原结合片段是选自由以下各项组成的组的抗原结合片段：Fab片段、Fab’片段、F(ab’)2片段、以及Fv片段。
39.根据权利要求35至38中任一项所述的药物偶联物，其中所述抗体或其抗原结合片段是免疫特异性结合癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自身免疫病相关的自身免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单克隆抗体，且优选免疫特异性结合癌细胞抗原的单克隆抗体。
40.根据权利要求1至39中任一项所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑珠单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐珠单抗、Blinatomumab、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、考妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、迪妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、恩弗妥单抗、格仑妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达西单抗、英度妥单抗、伊珠单抗、易普利单抗、拉贝珠单抗、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗、利法妥珠单抗、洛沃妥珠单抗、米拉珠单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、奈昔木单抗、尼妥珠单抗、尼沃鲁单抗、奥比妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉妥单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、匹那妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、罗武匹妥珠、沙妥珠单抗、司妥昔单抗、斯妥尤单抗、索非妥珠单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
41.根据权利要求40所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑珠单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐珠单抗、Blinatomumab、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、迪妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、恩弗妥单抗、格仑妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达西单抗、英度妥单抗、伊珠单抗、易普利单抗、拉贝珠单抗、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、奈昔木单抗、尼妥珠单抗、尼沃鲁单抗、奥比妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉妥单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、罗武匹妥珠、沙妥珠单抗、司妥昔单抗、斯妥尤单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
42.根据权利要求40所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑珠单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐珠单抗、Blinatomumab、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地诺单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、伊珠单抗、易普利单抗、拉贝珠单抗、奈昔木单抗、尼妥珠单抗、尼沃鲁单抗、奥比妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉妥单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、罗武匹妥珠、司妥昔单抗、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，优选抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
43.根据权利要求6至7中任一项所述的药物偶联物，其中：
L是选自由以下各项组成的组的连接子基团：
Figure FDA0003532040970000181
及
Figure FDA0003532040970000182
其中：
波浪线表示与Ab的共价连接点(右侧的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(X)b(如果有的话)或(D)的共价连接点(左侧的波浪线)；
R19选自：-C1-C12亚烷基-，-O-(C1-C12亚烷基)-，-C6-C12亚芳基-，所述-C6-C12亚芳基-在一个或多个环中，所述-C6-C12亚芳基-可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-C6-C12亚芳基，所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C6-C12亚芳基-C1-C12亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C5-C12杂环，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C5-C12杂环)-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(C5-C12杂环)-C1-C12亚烷基-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(OCH2CH2)r-，以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C1-C6亚烷基-基团；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C6亚烷基-、-C1-C6亚烷基-(C3-C8碳环基)-、以及-亚苯基-，其可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
r是范围在1至6之间的一整数；
(AA)w的式为(III)：
Figure FDA0003532040970000191
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、异丁基、仲丁基、苄基、对羟基苄基、-CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH2CH2SCH3、-CH2CONH2、-CH2COOH、-CH2CH2CONH2、-CH2CH2COOH、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、-(CH2)3NH2、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCHO、-(CH2)4NHC(＝NH)NH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)4NHCHO、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NHCONH2、-CH2CH2CH(OH)CH2NH2、2-吡啶基-、3-吡啶基-、4-吡啶基-、苯基、环己基、
Figure FDA0003532040970000192
Figure FDA0003532040970000201
Figure FDA0003532040970000202
及
Figure FDA0003532040970000203
w是范围在0到12之间的一整数；
其中X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-、-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-、-CONH-(C1-C6亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被一个或多个取代基Rx取代的亚苯基)-NH-、-COCH2NH-COCH2-NH-、-COCH2NH-、-CONH-(C1-C6亚烷基)S-、-CONH-(C1-C6亚烷基)NHCO(C1-C6亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
其中T是选自-CO-(C1-C6亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C6亚烷基)-[O-(C2-C6亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至25之间的一整数；
g为0或1，优选为0；
D是式为(II)或(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R2是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；且
Z为-O-；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体或其抗原结合片段，并且其选自由以下各项组成的组：人抗体、人抗体的抗原结合片段、人源化抗体、人源化抗体的抗原结合片段、嵌合抗体、嵌合抗体的抗原结合片段、糖基化抗体、以及糖基化抗原结合片段；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，并且n在1至12的范围内。
44.根据权利要求6至7中任一项的药物偶联物，其选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure FDA0003532040970000211
其中：
R19选自-C1-C8亚烷基-，-O-(C1-C8亚烷基)-，-C1-C8亚烷基-C6-C12亚芳基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，以及-C6-C12亚芳基-C1-C8亚烷基，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R30为-C2-C4亚烷基-基团；
M选自由以下各项组成的组：-C1-C3亚烷基-、以及-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
(AA)2的式为(III)：
Figure FDA0003532040970000221
其中：
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苄基、吲哚基甲基、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、以及-(CH2)4NHC(＝NH)NH2；
W是范围在0到6之间的一整数；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-，-COO-CH2-亚苯基-NH-，其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基，-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)-NH-，-COCH2NH-COCH2-NH-，-CONH-(C2-C4亚烷基)S-，以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至10之间的一整数；
g为0或1，优选为0；
D是式为(II)或(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或甲基，更优选甲基；
R2是氢；
R3是氢；
Z为-O-；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段是免疫特异性结合癌细胞抗原、病毒抗原、产生与自身免疫病相关的自身免疫抗体的细胞的抗原、微生物抗原的单克隆抗体，且优选免疫特异性结合癌细胞抗原的单克隆抗体；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至8的范围内。
45.根据权利要求6至7中任一项的药物偶联物，其选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure FDA0003532040970000231
其中：
R19选自-C1-C6亚烷基-、-亚苯基-C1-C6亚烷基-(其中亚苯基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基和氰基，并且优选R19是-C1-C6亚烷基；R30为-C2-C4亚烷基-基团；
M为-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000241
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
R22选自甲基、苄基、异丙基、仲丁基和吲哚基甲基；
R23选自甲基、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHCONH2、以及-(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-，-COO-CH2-亚苯基-NH-，其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基，-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基)-NH-，-COCH2NH-COCH2-NH-，-CONH-(C2-C4亚烷基)S-和-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
g是0或1；优选0；
D是式为(II)或式为(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，其中：
R1是氢或甲基，更优选甲基；
R2是氢；
R3是氢；
Z为-O-；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的单克隆抗体：阿昔单抗、阿仑珠单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐珠单抗、Blinatomumab、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、考妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、迪妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、恩弗妥单抗、格仑妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达西单抗、英度妥单抗、伊珠单抗、易普利单抗、拉贝珠单抗、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗、利法妥珠单抗、洛沃妥珠单抗、米拉珠单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、奈昔木单抗、尼妥珠单抗、尼沃鲁单抗、奥比妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉妥单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、匹那妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、罗武匹妥珠、沙妥珠单抗、司妥昔单抗、斯妥尤单抗、索非妥珠单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分；
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内。
46.根据权利要求45所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑珠单抗、阿奈妥单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐珠单抗、Blinatomumab、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地宁妥珠单抗、地诺单抗、迪妥昔珠单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、恩弗妥单抗、格仑妥木单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、英达西单抗、英度妥单抗、伊珠单抗、易普利单抗、拉贝珠单抗、Ladiratuzumab、拉妥昔单抗、米妥昔单抗、那妥昔单抗、奈昔木单抗、尼妥珠单抗、尼沃鲁单抗、奥比妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉妥单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、泊洛妥珠单抗、雷莫芦单抗、罗武匹妥珠、沙妥珠单抗、司妥昔单抗、斯妥尤单抗、伐达妥昔单抗、沃瑟妥珠单抗、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
47.根据权利要求45所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是选自由以下各项组成的组的抗体：阿昔单抗、阿仑珠单抗、阿特珠单抗、阿维鲁单抗、巴利昔单抗、贝伐珠单抗、Blinatomumab、本妥昔单抗、卡妥索单抗、西妥昔单抗、达利珠单抗、达雷木单抗、地诺单抗、地努妥昔单抗、德瓦鲁单抗、埃罗妥珠单抗、吉妥珠单抗、替伊莫单抗、伊珠单抗、易普利单抗、拉贝珠单抗、奈昔木单抗、尼妥珠单抗、尼沃鲁单抗、奥比妥珠单抗、奥法木单抗、奥拉妥单抗、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕尼单抗、派姆单抗、帕妥珠单抗、雷莫芦单抗、罗武匹妥珠、司妥昔单抗、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，优选抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，更优选曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
48.根据权利要求6或7中任一项所述的药物偶联物，其选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure FDA0003532040970000261
其中：
R19为-C2-C6亚烷基-；
R30为-C2-C4亚烷基-；
M为-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000271
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-，-COO-CH2-亚苯基-NH-，其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基，-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基)-NH-，-COCH2NH-COCH2-NH-，-CONH-(C2-C4亚烷基)S-，以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
g为0或1，优选为0；
D是选自以下的药物部分：
Figure FDA0003532040970000272
以及
Figure FDA0003532040970000273
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与(L)的共价连接点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内。
49.根据权利要求48所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗HER2抗体如曲妥珠单抗或抗原结合片段或其免疫活性部分。
50.根据权利要求48所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
51.根据权利要求6至7中任一项所述的药物偶联物，其选自式(V)、(VI)和(VII)：
Figure FDA0003532040970000281
其中：
R19为-C2-C6亚烷基-；
R30为-C2-C4亚烷基-；
M为-C1-C3亚烷基-(C5-C7碳环基)-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000291
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与药物部分的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-，-COO-CH2-亚苯基-NH-，其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基，-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基或氰基)-NH-，-COCH2NH-COCH2-NH-，-CONH-(C2-C4亚烷基)S-，以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
b为0或1，优选为1；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至10之间的一整数；
g是0或1；优选0；
D是选自以下的药物部分：
Figure FDA0003532040970000292
以及
Figure FDA0003532040970000293
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与(L)的共价连接点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分；
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内。
52.根据权利要求51所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗HER2抗体如曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
53.根据权利要求51所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
54.根据权利要求1至15或18至53中任一项所述的式为(V)的药物偶联物：
Figure FDA0003532040970000301
其中：
R19为-C2-C5亚烷基-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000302
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，波浪线表示与(X)b的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
X为-CONH-(C3亚烷基)NH-或-CONH-(C3亚烷基)NH-COO-CH2-亚苯基-NH-；
b为1；
T为具有式-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]4-NH-的延伸基团；
g是0或1，优选0；
或具有式(VI)
Figure FDA0003532040970000311
其中M为-甲基-亚环己基-；
b为1；
w为0；
X为选自-CONH(CH2)3S-和-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-的延伸基团；
g为0；
或具有式(VII)
Figure FDA0003532040970000312
其中R19为-C2-C5亚烷基-；
R30为-C3亚烷基；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000313
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，波浪线表示与(X)b的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与连接子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是-CONH-(C3亚烷基)NH-或-CONH-(C3亚烷基)NH-COO-CH2-亚苯基-NH-；
b为1；
T是具有式-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]4-NH-的延伸基团；
g是0或1，优选0；
D是选自以下的药物部分：
Figure FDA0003532040970000321
以及
Figure FDA0003532040970000322
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b的共价连接点；
所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自：本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分；且
n是基团[D-(X)b-(AA)w-(T)g-(L)-]与包含至少一个抗原结合位点的部分Ab的比率，其中L如式(V)、(VI)或(VII)中所定义，且n在3至5的范围内，优选4。
55.根据权利要求54所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗HER2抗体如曲妥珠单抗或抗原结合片段或其免疫活性部分。
56.根据权利要求54所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
57.根据权利要求1所述的抗体药物偶联物，选自以下各项组成的组：
Figure FDA0003532040970000323
Figure FDA0003532040970000331
Figure FDA0003532040970000332
以及
Figure FDA0003532040970000333
其中n的范围为2至6，更优选n为3、4或5，且
Figure FDA0003532040970000334
各自独立地选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，并且更优选地是抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，特别是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
58.根据权利要求57所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab是抗HER2抗体如曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
59.根据权利要求57所述的药物偶联物，其中所述包含至少一个抗原结合位点的部分Ab选自曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
60.根据权利要求1至59中任一项所述的抗体药物偶联物为分离或纯化形式。
61.具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是选自以下各式构成的组的连接子：
Figure FDA0003532040970000341
其中每条波浪线表示与(T)g(如果有的话)或(AA)w(如果有的话)或(X)b(如果有的话)或D的共价连接点；
G选自卤素、-O-甲磺酰基和-O-甲苯磺酰基；
J选自卤素、羟基、-N-琥珀酰亚胺氧基、-O-(4-硝基苯基)、-O-五氟苯基、-O-四氟苯基和-O-C(O)-OR20；
R19选自：-C1-C12亚烷基-，-C3-C8碳环-，-O-(C1-C12亚烷基)-，-C6-C18亚芳基-，所述-C6-C18亚芳基-在一个或多个环中，所述-C6-C18亚芳基-可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-C6-C18亚芳基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C6-C18亚芳基-C1-C12亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C3-C8碳环)-，-(C3-C8碳环)-C1-C12亚烷基-，-C5-C14杂环-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C5-C14杂环)-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(C5-C14杂环)-C1-C12亚烷基-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(OCH2CH2)r-，以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
R20是C1-C12烷基或在一个或多个芳环中具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基可选地被一个或多个取代基Rx取代；
取代基Rx选自由以下各项组成的组：可以可选地被至少一个基团Ry取代的C1-C12烷基，可以可选地被至少一个基团Ry取代的C2-C12烯基，可以可选地被至少一个基团Ry取代的C2-C12炔基，卤素原子，氧代基团，硫代基团，氰基，硝基，ORy，OCORy，OCOORy，CORy，COORy，OCONRyRz，CONRyRz，SRy，S(＝O)Ry，SO2Ry，SSRy，P(O)(Ry)ORz，NRyRz，NRyCORz，NRyC(＝O)NRyRz，NRyC(＝NRy)NRyRz，在一个或多个环中具有6至18个碳原子的芳基，所述芳基可以可选地被一个或多个相同或不同的选自以下组的取代基取代：Ry、ORy、OCORy、OCOORy、NRyRz、NRyCORz、以及NRyC(＝NRy)NRyRz，包含被上述可选地被取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷基的芳烷基，包含被上述可选地被取代的芳基取代的具有1至12个碳原子的烷氧基的芳烷基氧基，以及具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的5至14元的饱和或不饱和杂环基，所述杂环基可选地被一个或多个取代基Ry取代，并且当在任一给定基团上存在多于一个的可选的取代基时，所述可选的取代基Ry可以相同或不同；
Ry和Rz各自独立地选自以下各项组成的组：氢，C1-C12烷基，被至少一个卤素原子取代的C1-C12烷基，包含被一个或多个环中具有6至18个碳原子的芳基取代的C1-C12烷基的芳烷基，以及包含被5至14元饱和或不饱和杂环基取代的C1-C12烷基的杂环烷基，所述杂环基具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子；
r是范围在1-10之间的一整数；
b为整数0或1；
g为整数0或1；
w是范围在0到12之间的一整数；
D、X、T和AA中的每一个根据权利要求1至60中任一项所定义；
其中对于式为D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，b+w+g不为0。
62.根据权利要求61所述的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有下式的连接子：
Figure FDA0003532040970000361
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19选自：-C1-C12亚烷基-，-O-(C1-C12亚烷基)-，-C6-C12亚芳基-，所述-C6-C12亚芳基-在一个或多个环中，所述-C6-C12亚芳基-可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-C6-C12亚芳基，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C6-C12亚芳基-C1-C12亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C5-C12杂环，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并且在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-C1-C12亚烷基-(C5-C12杂环)-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(C5-C12杂环)-C1-C12亚烷基-，其中所述杂环可以是具有一个或多个环并在所述一个或多个环中包含至少一个氧、氮或硫原子的饱和或不饱和基团，所述基团可选地被一个或多个取代基Rx取代，-(OCH2CH2)r-，以及-CH2-(OCH2CH2)r-，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
r是范围在1至6之间的一整数；
b为整数0或1；
g为整数0或1；
w是范围在0到12之间的一整数；
其中对于式为D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，b+w+g不为0；
D、-X、AA和T中的每一个都根据权利要求1至60中任一项所定义。
63.根据权利要求62所述的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有下式的连接子：
Figure FDA0003532040970000371
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19选自-C1-C8亚烷基-，-O-(C1-C8亚烷基)-，-C1-C8亚烷基-C6-C12亚芳基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，以及-C6-C12亚芳基-C1-C8亚烷基-，其中所述亚芳基在一个或多个环中，所述亚芳基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代；
(AA)w具有式(III)：
Figure FDA0003532040970000381
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或与氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
其中R21在每次出现时选自由以下各项组成的组：氢、甲基、异丙基、仲丁基、苄基、吲哚基甲基、-(CH2)3NHCONH2、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2、及-(CH2)4NHC(＝NH)NH2，并且w是范围在0至6之间的一整数；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：
-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-，-COO-CH2-亚苯基-NH-，其中所述亚苯基可以可选地被一至四个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基，-CONH-(C2-C4亚烷基)NH-COO-CH2-(可以可选地被1至4个取代基Rx取代的亚苯基，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基)-NH-，-COCH2NH-COCH2-NH-，-CONH-(C2-C4亚烷基)S-，以及-CONH-(C2-C4亚烷基)NHCO(C1-C3亚烷基)S-；
T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至10之间的一整数；
b为0或1，优选为1；
g为0或1，优选为0；
其中对于式为D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，b+w+g不为0；
D是具有式(I)或式(Ia)的药物部分，或其药学上可接受的盐或酯：
Figure FDA0003532040970000391
并且通过OR1、OR3或ZH处的羟基共价连接；或
D是具有式(II)或式(IIa)的药物部分，或其药学上可接受的盐或酯
Figure FDA0003532040970000392
其中(II)和(IIa)的波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与L1的共价连接点；
R1是氢或取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R2是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
R3是氢或-C(＝O)Ra，其中Ra是取代或未取代的C1-C6烷基，其中可选的取代基是一个或多个取代基Rx；
Z为-O-。
64.根据权利要求62所述的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有以下式的基团：
Figure FDA0003532040970000401
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19选自-C1-C6亚烷基-，-亚苯基-C1-C6亚烷基-，其中所述亚苯基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、卤素原子、硝基和氰基，其中无论上述亚烷基取代基是单独的还是连接到碳链的另一个部分上的，每个上述亚烷基取代基可以可选地被一个或多个取代基Rx取代，所述取代基Rx选自由以下各项组成的组：具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至12个碳原子的芳基、卤素原子、硝基和氰基，并且优选R19是-C1-C6亚烷基-基团；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000402
其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
R22选自甲基、苄基、异丙基、仲丁基和吲哚基甲基；
R23选自甲基、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHCONH2和-(CH2)3NHC(＝NH)NH2；
X是选自以下的延伸基团：
-COO-CH2-亚苯基-NH-、-CONH(CH2)3NHCOOCH2-亚苯基-NH-、-CONH(CH2)3NH-、-CONH(CH2)3-S、以及-CONH(CH2)3NHCO(CH2)2S-；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
b为0或1，优选为1；
g为0或1，优选为0；
其中对于式为D-(X)b(AA)w-(T)g-H的化合物，b+w+g不为0；且
D是具有式(I)或(Ia)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯，并通过OR1、OR3或ZH处的羟基共价连接；
Figure FDA0003532040970000411
或者
D是具有式(II)或式(IIa)的药物部分或其药学上可接受的盐或酯：
Figure FDA0003532040970000412
其中(II)和(IIa)的波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与L1的共价连接点；
R1是氢或甲基，更优选甲基；
R2是氢；
R3是氢；且
Z为-O-。
65.根据权利要求62所述的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有下式的连接子：
Figure FDA0003532040970000421
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19为-C2-C6亚烷基-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000422
R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或与氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
X是选自由以下各项组成的组的延伸基团：-COO-CH2-亚苯基-NH-、-CONH(CH2)3NHCOO-CH2-亚苯基-NH、-CONH-(CH2)3)NH-、-CONH(CH2)3-S-、以及-CONH-(CH2)3NHCO-(CH2)2S-的延伸基团；
其中T是选自-CO-(C1-C4亚烷基)-NH-、-CO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-、以及-COO-(C1-C4亚烷基)-[O-(C2-C4亚烷基)]j-NH-的延伸基团，其中j是范围在1至5之间的一整数；
b为0或1，优选为1；
g是0或1；优选0；
其中对于式为D-(X)b(AA)w-(T)g-H的化合物，b+w+g不为0；且
D是选自以下的药物：
Figure FDA0003532040970000431
以及
Figure FDA0003532040970000432
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(T)g(如果有的话)或与L1的共价连接点。
66.根据权利要求62所述的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中：
L1是具有以下式的基团：
Figure FDA0003532040970000433
其中：
波浪线表示与(T)g(如果有的话)或与(AA)w(如果有的话)或与(X)b(如果有的话)或与D的共价连接点；
R19是-C2-C5亚烷基-；
w为0或2，并且当w为2时，(AA)w具有式(IV)：
Figure FDA0003532040970000434
其中R22为异丙基，R23选自甲基和-(CH2)3NHCONH2，波浪线表示与(X)b的共价连接点(左边的波浪线)、以及与(T)g(如果有的话)或与L1或与氢原子的共价连接点(右边的波浪线)；
X为-CONH-(C3亚烷基)NH-或-CONH-(C3亚烷基)NH-COO-CH2-亚苯基-NH-；
T为-CO-(CH2)2-[O-(CH2)2]4-NH-基团；
b为1；
g是0或1，优选0；且
D是选自以下的药物部分：
Figure FDA0003532040970000441
以及
Figure FDA0003532040970000442
或其药学上可接受的盐或酯；其中波浪线表示与(X)b的共价连接点。
67.根据权利要求61至66中任一项所述的具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1的化合物，其选自：
Figure FDA0003532040970000443
68.具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-L1或式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，其中D、X、AA、T、b、g和w中的每一个根据权利要求1至60中任一项所定义，且L1根据权利要求61至67中任一项所定义；但其中如果所述化合物是具有式D-(X)b-(AA)w-(T)g-H的化合物，则b+w+g+O≠0。
69.根据权利要求1至68中任一项所述的药物偶联物或化合物，其中b+g+w不为0。
70.根据权利要求1至69中任一项所述的药物偶联物或化合物，其中b+w不为0。
71.根据权利要求1至69中任一项所述的药物偶联物或化合物，其中当w不为0时，b为1。
72.根据权利要求1至60中任一项所述的药物部分，用作抗体药物偶联物中的有效载荷。
73.根据权利要求1至60中任一项所述的药物部分在制备抗体药物偶联物中的用途。
74.根据权利要求1至60中任一项所述的药物偶联物，用作药物。
75.根据权利要求1至60中任一项所述的药物偶联物，用于治疗癌症，优选以下癌症：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤。
76.根据权利要求75所述的药物偶联物，其中所述癌症是HER2阳性癌症，优选包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌。
77.药物组合物，其包含根据权利要求1至60中任一项的药物偶联物和药学上可接受的载体。
78.用于预防或治疗癌症的方法，包括将有效量的根据权利要求1至60中任一项的药物偶联物给予有此需要的患者。
79.根据权利要求78所述的癌症的治疗方法，其中所述癌症选自：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤。
80.根据权利要求79所述的癌症治疗方法，其中所述癌症是HER2阳性癌症，优选包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌。
81.根据权利要求1至60中任一项所述的药物偶联物在制备用于治疗癌症的药物中的用途，所述癌症优选以下癌症：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤。
82.根据权利要求81所述的用途，其中所述癌症是HER2阳性癌症，优选包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌。
83.试剂盒，所述试剂盒包括治疗有效量的根据权利要求1至60任一项所述的药物偶联物和药学上可接受的载体。
84.根据权利要求83所述的用于治疗癌症的试剂盒，所述癌症优选以下癌症：包括NSCLC的肺癌、胃癌、结肠直肠癌、乳腺癌、胰腺癌、子宫内膜癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胆囊癌、子宫癌、唾液腺导管癌、卵巢癌、肾癌、白血病、多发性骨髓瘤和淋巴瘤。
85.根据权利要求81所述的用途，其中所述癌症是HER2阳性癌症，优选包含HER2阳性NSCLC的HER2阳性肺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性结肠直肠癌、HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胰腺癌、HER2阳性子宫内膜癌、HER2阳性膀胱癌、HER2阳性宫颈癌、HER2阳性胆囊癌、HER2阳性子宫癌、HER2阳性唾液腺导管癌和HER2阳性卵巢癌。
86.一种制备根据权利要求1至60中任一项所述的药物抗体偶联物的方法，包括偶联包含至少一个抗原结合位点的部分Ab和药物D，Ab和D根据权利要求1至60中任一项所定义。
87.根据权利要求86所述的方法，所述方法用于制备具有式(G)、(G’)或(G”)的药物抗体偶联物：
Figure FDA0003532040970000471
所述方法包括以下步骤：
(i)或者：
(a)使式为(Ib)的化合物与式为X2-C(＝O)-X1的化合物反应：
Figure FDA0003532040970000481
其中
R1和R2各自独立地选自OH的保护基、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
R3选自OH的保护基、-C(＝O)Ra、-C(＝O)ORb和-C(＝O)NRcRd；
Ra选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rb选自取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基、以及取代或未取代的杂环基；
Rc和Rd独立地选自氢、取代或未取代的C1-C12烷基、取代或未取代的C2-C12烯基、取代或未取代的C2-C12炔基、取代或未取代的芳基和取代或未取代的杂环基；
其中X1和X2是离去基团，得到式为(B)的化合物：
Figure FDA0003532040970000482
并且-C(＝O)X1部分的连接点是式为(Ib)的化合物的游离伯OH基团，或者
(b)使如上定义的式为(Ib)的化合物与4-硝基-苯基氯甲酸酯反应，得到式为(J)的化合物：
Figure FDA0003532040970000483
其中(4-硝基苯基)-O-CO-基团的连接点与上述(a)中的X1(C＝O)部分的连接点相同；或者
(c)使如上定义的式为(Ib)的化合物与式为O＝C＝N-(CH2)1-6NHProtNH的异氰酸酯反应，其中ProtNH是适合于在碱性条件下脱保护的氨基的保护基团，得到下式化合物：
Figure FDA0003532040970000491
(ii)或者
(a)使步骤(i)(a)或(i)(b)中制备的式为(B)或(J)的化合物与式为NH2-(CH2)1-6NH2的氨基化合物反应，得到式为(C)的化合物：
Figure FDA0003532040970000492
或者
(b)脱保护在步骤(i)(c)中获得的下式的化合物
Figure FDA0003532040970000493
，
得到式为(C)的化合物；
(iii)使式为(C)的化合物与式为(D’)、(E)或E’的化合物反应：
Figure FDA0003532040970000494
Figure FDA0003532040970000501
其中R22和R23如上文在AA基团的定义中所定义；
分别得到式为(F)、(F’)或(F”)的化合物：
Figure FDA0003532040970000502
其中R1、R2和R3如上文对式为(Ib)的化合物所定义，且R22和R23如上文在AA基团的定义中所定义；
(iv)如果在式为(F)、(F’)或(F”)的化合物中存在OH的保护基团，则除去这些保护基团得到式为(F)、(F’)或(F”)的化合物，其中R1、R2和R3如上对于式为(II)的化合物所定义；
(v)部分还原待偶联的抗体中的一个或多个二硫键，得到具有游离硫醇基的还原的抗体Ab-SH：
还原二硫键
Figure FDA0003532040970000511
以及
(vi)使具有游离硫醇基的部分还原的抗体Ab-SH与步骤(iv)中制备的式为(F)、(F’)或(F”)的化合物反应，分别得到所需的式为(G)、(G’)或(G”)的药物抗体偶联物：
Figure FDA0003532040970000512
88.根据权利要求87所述的方法，其中所述抗体选自被在步骤(v)中用三[2-羧乙基]膦盐酸盐部分还原的本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，优选地，所述抗体是被在步骤(v)中用三[2-羧乙基]膦盐酸盐部分还原的抗HER2抗体如曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分，并且最优选地，所述抗体是被在步骤(v)中用三[2-羧乙基]膦盐酸盐部分还原的曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
89.根据权利要求86所述的方法，所述方法用于制备具有式(W)、(W’)或(W”)的药物抗体偶联物：
Figure FDA0003532040970000521
或其盐，所述方法包括以下步骤：
(i)将所述抗体与2-亚氨基硫烷盐酸盐(Traut’s试剂)反应，得到硫醇活化的抗体：
Figure FDA0003532040970000522
(ii)使硫醇活化的抗体与式为(F)、(F’)或(F”)的化合物反应，分别得到所需的式为(W)、(W’)或(W”)的药物抗体偶联物
Figure FDA0003532040970000531
或其盐，其中R1、R2和R3如上文在式为(II)中所定义，且R22和R23如上文在AA基团的定义中所定义。
90.根据权利要求89所述的方法，其中所述抗体选自本妥昔单抗、吉妥珠单抗、Inozutumab、罗武匹妥珠、抗HER2抗体例如曲妥珠单抗、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD30抗体、或其抗原结合片段或其免疫活性部分，优选地，所述抗体是抗HER2抗体如曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分，最优选所述抗体是曲妥珠单抗或其抗原结合片段或其免疫活性部分。
91.根据权利要求86所述的方法，所述方法用于制备式为(O)或(P)的药物抗体偶联物：
Figure FDA0003532040970000541
所述方法包括以下步骤：
(i)或者
(a)将式为(C)的化合物与式为Me-S-S-(CH2)1-3-CO2H化合物反应，得到式为(K)的化合物：
Figure FDA0003532040970000542
或者
(b)使化合物(J)与式为NH2-(CH2)1-3SProtSH的化合物反应，并从偶联的化合物中除去ProtSH基团，得到式为(L)的化合物：
Figure FDA0003532040970000543
(ii)使步骤(i)中产生的(K)或(L)与二硫苏糖醇在二硫化物还原条件下反应，分别得到式为(M)和(N)的化合物：
Figure FDA0003532040970000544
(iii)使待偶联的抗体与琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯反应以利用琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羰基在一个或多个赖氨酸基团处衍生所述抗体：
Figure FDA0003532040970000551
(iv)使步骤(iii)中产生的衍生抗体与步骤(ii)中产生的(M)或(N)反应，得到所需的式为(O)或(P)的药物抗体偶联物：
Figure FDA0003532040970000552
92.根据权利要求91所述的方法，其中式为X2-C(＝O)-X1的化合物是1，1″-羰基二咪唑。
93.根据权利要求91或权利要求92所述的方法，其中与式为(B)的化合物反应的羟基化合物优选为NH2-(CH2)2-4-NH2，且优选为NH2-(CH2)3-NH2。
94.根据权利要求91至93中任一项所述的方法，其中所述化合物与式为(C)的化合物反应得到式为(K)的化合物是3-(甲基二硫基)丙酸。
95.根据权利要求91所述的方法，其中与式为(J)的化合物反应得到式为(L)的化合物的化合物NH2-(CH2)1-3SProtSH是NH2-(CH2)3SProtSH。
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