CN114606156A - 一种多功能复合微生物菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种多功能复合微生物菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种多功能复合微生物菌剂及其制备方法和应用，通过在发酵培养基中添加苦参粉，并用苏云金芽孢杆菌‑坚强芽孢杆菌联合发酵，同时与淡紫拟青霉发酵液混合制备得到的微生物菌干粉对于蛴螬和金针虫虫害协同作用，防治效果好，然后以玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维为原料通过高温膨化制得的载体颗粒在吸水条件下粘结性增强且仍具有较好的结构强度，通过滴加微生物菌干粉制成多功能复合微生物菌剂，为微生物菌提供良好的生存环境，同时玉米粉、芝麻粕中的蛋白质与多糖等营养可以缓慢释放，提高微生物菌在土壤中宿存的时间，且进一步提高微生物菌对蛴螬和金针虫虫害的防治率，减少了化学农药的使用。

Description

一种多功能复合微生物菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及微生物菌剂技术领域，特别是涉及一种多功能复合微生物菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
危害花生的地下害虫是蛴螬、金针虫、蝼姑、地老虎。蛴螬和金针虫是危害较严重的2种害虫，如果不及时防治可造成减产甚至绝产绝收。
目前对于花生中蛴螬和金线虫的药物防治方法主要是药剂处理土壤。用50％辛硫磷乳油每亩200～250克，加水10倍喷于25～30千克细土上拌匀制成毒土，顺垄条施，随即浅锄，或将该毒土撤于种沟或地面，随即耕翻或混入厩肥中施用；用2％甲基异柳磷粉每亩2～3千克拌细土25～30千克制成毒土；用3％甲基异柳磷颗粒剂、3％吠哺丹颗粒剂、5％辛硫磷颗粒剂或5％地亚农颗粒剂，每亩2.5～3千克处理土壤。
化学药剂初次施用对杀灭蛴螬和金线虫具有明显的效果，但是长期使用会虫害产生耐药性，随着用药次数的增多，灭杀的效果就会减弱。随着虫害耐药性的增加，防治效果会越来越差，且化学药剂不利于地下农作物食物的安全，因此，探索开发高效、安全、经济的绿色防控迫在眉睫。
发明内容
针对上述情况，本发明之目的在于提供多功能复合微生物菌剂，用于花生中蛴螬和金线虫的防治。
其解决的技术方案是：
一种多功能复合微生物菌剂，包括微生物菌干粉和载体颗粒；
进一步的，所述微生物菌干粉按照如下工艺制备：(1)将苏云金芽孢杆菌种子液和坚强芽孢杆菌按照2:1的体积比混合，然后以10％体积比的接种量接入到发酵培养基I中，32℃培养24h，得到苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌发酵液；(2)将淡紫拟青霉种子液以8％体积比的接种量接入到发酵培养基II中，30℃培养48h，得到淡紫拟青霉发酵液；(3)苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌发酵液、淡紫拟青霉发酵液2-4:5-7的体积比混合均匀，得到液体菌剂；(4)将液体菌剂经过冷冻干燥制备成微生物菌干粉；发酵培养基I包括苦参粉；
进一步的，所述载体颗粒的制备方法包括以下步骤：将玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维混合，然后添加18％的加水量混合均匀，然后经膨化机高温膨化、切制，得载体颗粒；
进一步的，所述多功能复合微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：(1)将1-1.2g微生物干粉加入50mL灭菌水中，配制成混悬液，4℃保存；(2)吸取配制好的混悬液加到载体颗粒表面，得多功能复合微生物菌剂。
进一步的，所述发酵培养基I的配方为：苦参粉2g/L、玉米淀粉10g/L、葡萄糖8g/L、豆饼粉5g/L、硫酸铵2g/L、磷酸氢二钾2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁0.1g/L、硫酸锰0.1mg/L。
进一步的，所述发酵培养基II的配方为：红薯粉12g/L、海藻多糖10g/L、酵母浸出粉2g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硝酸钾1.0g/L和硫酸镁0.1g/L、硫酸铜1.0g/L、二氧化锰0.5g/L。
进一步的，所述玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维的质量比为1:3:2:1。
进一步的，所述改性蒙脱石的制备方法如下：取蒙脱石进行粉碎，过100目筛后与十六烷基三甲基铵、二乙胺基二硫代甲酸钠、2，4-二甲基吡咯，磨碎后混合均匀，然后加入水和浓硝酸，搅拌均匀后，72℃下15KHz的频率超声10min，最后烘干、磨碎，过100目筛，得到改性蒙脱石。
进一步的，所述混悬液加到载体颗粒表面的用量为25μL/粒，每颗粒上的有效活菌数量不少于5亿。
进一步的，所述载体颗粒的粒径为2-3mm，所述多功能复合微生物菌剂的粒径为3-4.2mm。
进一步的，所述多功能复合微生物菌剂现制现用。
进一步的，所述多功能复合微生物菌剂用于花生中蛴螬和金针虫的防治。
由于以上技术方案的采用，本发明与现有技术相比具有如下优点：
本发明一方面通过在发酵培养基中添加苦参粉，并用苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌联合发酵，同时与淡紫拟青霉发酵液混合制备得到的微生物菌干粉对于蛴螬和金针虫虫害协同作用，相互增效，防治效果好，另一方面，以玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维为原料通过高温膨化制得的载体颗粒在吸水条件下粘结性增强且仍具有较好的结构强度，为微生物菌提供良好的生存环境，同时玉米粉、芝麻粕中的蛋白质与多糖等营养可以缓慢释放，提高微生物菌在土壤中宿存的时间，且进一步提高微生物菌对蛴螬和金针虫虫害的防治率，减少了化学农药的使用。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作详细描述，但需要强调的是，本发明并不受限于所述的具体实施方式；下述实施例所用微生物菌种可自行分离或通过购买得到；下述实施例所述原料无特殊说明均可通过常规方法制备或购买获得。
实施例1
微生物菌干粉的制备：
(1)将苏云金芽孢杆菌种子液和坚强芽孢杆菌按照2:1的体积比混合，然后以10％体积比的接种量接入到发酵培养基I中，32℃培养24h，得到苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌发酵液；(2)将淡紫拟青霉种子液以8％体积比的接种量接入到发酵培养基II中，30℃培养48h，得到淡紫拟青霉发酵液；(3)苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌发酵液、淡紫拟青霉发酵液4:7的体积比混合均匀，得到液体菌剂；(4)将液体菌剂经过冷冻干燥制备成微生物菌干粉；
所述发酵培养基I的配方为：苦参粉2g/L、玉米淀粉10g/L、葡萄糖8g/L、豆饼粉5g/L、硫酸铵2g/L、磷酸氢二钾2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁0.1g/L、硫酸锰0.1mg/L；
所述发酵培养基II的配方为：红薯粉12g/L、海藻多糖10g/L、酵母浸出粉2g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硝酸钾1.0g/L和硫酸镁0.1g/L、硫酸铜1.0g/L、二氧化锰0.5g/L。
实施例2
载体颗粒的制备：
将玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维混合，然后添加18％的加水量混合均匀，然后经膨化机高温膨化、切制，得载体颗粒；所述玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维的质量比为1:3:2:1；所得载体颗粒的粒径为2-3mm。
实施例3
改性蒙脱石的制备：
取蒙脱石进行粉碎，过100目筛后与十六烷基三甲基铵、二乙胺基二硫代甲酸钠、2，4-二甲基吡咯，磨碎后混合均匀，然后加入水和98％浓度的浓硝酸，搅拌均匀后，72℃下15KHz的频率超声10min，最后110℃烘干、磨碎，过100目筛，得到改性蒙脱石；所述蒙脱石粉:十六烷基三甲基铵:二乙胺基二硫代甲酸钠:2，4-二甲基吡咯:水:浓硝酸的质量比为2g:8g:0.6g:0.3g:17mL:0.2mL。
实施例4
多功能复合微生物菌剂的制备：
(1)将1-1.2g微生物干粉加入50mL灭菌水中，配制成混悬液，4℃保存；(2)吸取配制好的混悬液加到载体颗粒表面，得多功能复合微生物菌剂；所述混悬液加到载体颗粒表面的用量为25μL/粒，每颗粒上的有效活菌数量不少于5亿；所述多功能复合微生物菌剂的粒径为3-4.2mm。
对比例1
所述苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌的发酵培养基I不含有苦参粉，载体颗粒的制备过程中添加苦参粉，其余同实施例1-4，得多功能复合微生物菌剂。
对比例1
所述苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌的发酵培养基I不含有苦参粉，载体颗粒的制备过程中添加苦参粉，其余同实施例1-4，得多功能复合微生物菌剂。
对比例2
所述载体颗粒的制备过程中将“改性蒙脱石”替换成“膨润土”，其余同实施例1-4，得多功能复合微生物菌剂。
对比例3
所述载体颗粒的制备过程中将“粘胶基甲壳素纤维”去掉，其余同实施例1-4，得多功能复合微生物菌剂。
对比例4
所述微生物菌干粉不含坚强芽孢杆菌，其余同实施例1-4，得多功能复合微生物菌剂。
对比例5
所述微生物菌干粉不含淡紫拟青霉菌，其余同实施例1-4，得多功能复合微生物菌剂。
对比例6
仅微生物菌干粉。
试验例：
空白组：虫害土壤，不做处理；
对照组：无虫害土壤，不做处理；
实验组：实施例4以及对比例1-5所制备的多功能复合微生物菌剂。
实验方法：将多功能复合微生物菌剂均匀撒在与空白组相同的虫害土壤表层25cm深处，然后播种花生种子，正常施肥管理即可，多功能复合微生物菌剂用量：2500g/hm2。
调查方法参照GB/T17980.72-2004《农药田间药效试验准则(二)第72部分：杀虫剂防治旱地地下害虫》：共进行2次虫口调查，分别于药后15d，35d各调查1次。每小区“Z”字形5点取样，每点50cm×50cm(0.25m2)，挖土深度为30cm左右，调查受灾株，并根据被害状，记载害虫种类，计算被害株率和防治效果，另外记载15d时出苗情况，试验结果见表1-2。
表1.防治花生虫害田间药效15d实验效果：
Figure BDA0003517839820000061
表2.防治花生虫害田间药效35d实验效果
Figure BDA0003517839820000062
从表1和表2可以看出，在发酵培养基中添加苦参粉，可以提高微生物菌干粉对于蛴螬和金针虫虫害防治效果，改性蒙脱石和粘胶基甲壳素纤维的加入可以减缓玉米粉、芝麻粕中的蛋白质与多糖等营养可以缓慢释放，提高微生物菌在土壤中宿存的时，增加防治时间，且使用该复合微生物菌剂可以提高花生出苗率。
以上所述是结合具体实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明具体实施仅局限于此；对于本发明所属及相关技术领域的技术人员来说，在基于本发明技术方案思路前提下，所作的拓展以及操作方法、数据的替换，都应当落在本发明保护范围之内。

Claims (9)

1.一种多功能复合微生物菌剂，其特征在于，包括微生物菌干粉和载体颗粒；
a.所述微生物菌干粉按照如下工艺制备：(1)将苏云金芽孢杆菌种子液和坚强芽孢杆菌按照2:1的体积比混合，然后以10％体积比的接种量接入到发酵培养基I中，32℃培养24h，得到苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌发酵液；(2)将淡紫拟青霉种子液以8％体积比的接种量接入到发酵培养基II中，30℃培养48h，得到淡紫拟青霉发酵液；(3)苏云金芽孢杆菌-坚强芽孢杆菌发酵液、淡紫拟青霉发酵液2-4:5-7的体积比混合均匀，得到液体菌剂；(4)将液体菌剂经过冷冻干燥制备成微生物菌干粉；发酵培养基I包括苦参粉；
b.所述载体颗粒的制备方法包括以下步骤：将玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维混合，然后添加18％的加水量混合均匀，然后经膨化机高温膨化、切制，得载体颗粒；
c.所述多功能复合微生物菌剂的制备方法包括以下步骤：(1)将1-1.2g微生物干粉加入50mL灭菌水中，配制成混悬液，4℃保存；(2)吸取配制好的混悬液加到载体颗粒表面，得多功能复合微生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述发酵培养基I的配方为：苦参粉2g/L、玉米淀粉10g/L、葡萄糖8g/L、豆饼粉5g/L、硫酸铵2g/L、磷酸氢二钾2g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁0.1g/L、硫酸锰0.1mg/L。
3.根据权利要求1所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述发酵培养基II的配方为：红薯粉12g/L、海藻多糖10g/L、酵母浸出粉2g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硝酸钾1.0g/L和硫酸镁0.1g/L、硫酸铜1.0g/L、二氧化锰0.5g/L。
4.根据权利要求1所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述玉米粉、芝麻粕、改性蒙脱石、粘胶基甲壳素纤维的质量比为1:3:2:1。
5.根据权利要求1所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述改性蒙脱石的制备方法如下：取蒙脱石进行粉碎，过100目筛后与十六烷基三甲基铵、二乙胺基二硫代甲酸钠、2，4-二甲基吡咯，磨碎后混合均匀，然后加入水和浓硝酸，搅拌均匀后，72℃下15KHz的频率超声10min，最后烘干、磨碎，过100目筛，得到改性蒙脱石。
6.根据权利要求1所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述混悬液加到载体颗粒表面的用量为25μL/粒，每颗粒上的有效活菌数量不少于5亿。
7.根据权利要求1所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述载体颗粒的粒径为2-3mm，所述多功能复合微生物菌剂的粒径为3-4.2mm。
8.根据权利要求1所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述多功能复合微生物菌剂现制现用。
9.根据权利要求1-8任一所述的多功能复合微生物菌剂，其特征在于，所述多功能复合微生物菌剂用于花生中蛴螬和金针虫的防治。
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